一種柞樹葉提取物及其制備方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種柞樹葉提取物其制備方法及應(yīng)用，屬于提取工藝領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 柞樹（Querus mongolica Fisch)為殼斗科（Fagaceae)櫟屬（Quercus)落葉喬木， 有蒙古櫟、遼東櫟、麻櫟、槲樹等種類，葉緣有鋸齒，少有全緣。雄花柔荑花序下垂，雌花單生 于總苞內(nèi)。堅(jiān)果單生，果皮內(nèi)壁無毛，不發(fā)育的胚珠位于種子基部之外側(cè)。樹干奇特蒼勁，樹 形優(yōu)美多姿，枝繁葉茂，耐修剪、易造型，經(jīng)拉片造型后冠如華蓋，千姿百態(tài)，神韻獨(dú)具，是風(fēng) 景園林、庭院別墅區(qū)造型景觀精品樹種。全世界約有300余種，中國(guó)有60余種，柞林面積約 有1億多畝。具有耐寒、耐旱能力強(qiáng)，適應(yīng)能力強(qiáng)等特點(diǎn)，我國(guó)主要分布在東北和華北地區(qū)， 其中遼寧省柞樹林有182萬公頃，占林地面積的14. 7%，資源極為豐富。研宄發(fā)現(xiàn)，柞樹葉 除含有豐富的蛋白質(zhì)、多糖、粗纖維、多種礦物質(zhì)元素外，還含有單寧、黃酮類等一些生物活 性物質(zhì)。一直以來柞樹葉主要作為柞蠶飼料被人們熟知，但實(shí)際上，很早以前就被應(yīng)用于食 品、藥品或易于降解的食品包裝材料。如遼寧、吉林、黑龍江、山東等地民間有傳統(tǒng)著名小吃 "波羅葉餅子"（柞樹葉餅子），近幾年柞樹葉已出口日本用于制作年糕，深受日本人歡迎，每 片葉子收購(gòu)價(jià)達(dá)〇. 6?0. 7元錢。但利用柞樹葉提取抑菌活性成分并用于食品防腐、外用治 療皮膚、粘膜由細(xì)菌引起的感染性疾病及果蔬保鮮防腐、化妝品外用消炎等方面未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明通過對(duì)柞樹葉中高效抑菌活性成分的提取，使本發(fā)明制備的柞樹葉提取物 可以應(yīng)用于制藥、衛(wèi)生材料、化妝用品、洗滌用品、果蔬保鮮及食品防腐等領(lǐng)域。
[0004] 本發(fā)明提供了一種柞樹葉提取物的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：
[0005] ①將柞樹葉浸取，得到浸取液，濃縮浸取液；
[0006] ②將步驟①所得產(chǎn)品利用超濾得到分子量為500?5000Dr的柞樹葉提取物。
[0007] 本發(fā)明所述柞樹葉優(yōu)選為來源于麻櫟、遼東櫟、蒙古櫟、槲樹或銳齒槲櫟。
[0008] 本發(fā)明所述柞樹葉浸取前優(yōu)選為清洗、22?30°C陰干、粉碎至小于40目。
[0009] 本發(fā)明所述浸取優(yōu)選為將柞樹葉與浸取劑按料液比為I : 10?20g/mL，20?25°C 浸取4?12h，浸取1?3次，過濾，離心。
[0010] 本發(fā)明所述浸取劑優(yōu)選為水或65?95%乙醇。
[0011] 本發(fā)明所述65?95%乙醇優(yōu)選為65?95% (V/V)乙醇水溶液。
[0012] 本發(fā)明所述濃縮優(yōu)選為當(dāng)浸取劑為水時(shí)將浸取液55?65°C回流濃縮至浸取液體 積的5?15%;或當(dāng)浸取劑為65?95%乙醇時(shí)將浸取液55?65°C回流濃縮至浸取液體積 的5?15%，得到第一次濃縮液，向第一次濃縮液中加入其5?10倍體積的水，55?65°C 回流濃縮至第一次濃縮液的體積。
[0013] 本發(fā)明所述超濾優(yōu)選為先將步驟①所得產(chǎn)品利用截留分子量在5000Dr以下物 質(zhì)的超濾裝置內(nèi)，〇. 05?0. 08MPa過濾，收取分子量在5000Dr以下的物質(zhì)，再將分子量在 5000Dr以下的物質(zhì)利用截留分子量在500Dr以上物質(zhì)的超濾裝置內(nèi)，0. 05?0. 08MPa過 濾，收取分子量在500Dr以上的物質(zhì)。
[0014] 本發(fā)明另一方面的目的在于提供上述本發(fā)明所述制備方法得到的柞樹葉提取物。
[0015] 本發(fā)明所述柞樹葉提取物主要成分為單寧、黃酮、多糖和葉蛋白類等活性物質(zhì)。
[0016] 本發(fā)明又一方面的目的在于提供上述本發(fā)明所述柞樹葉提取物在抑菌上的應(yīng)用。
[0017] 本發(fā)明有益效果為：
[0018] ①本發(fā)明有利于提高柞樹資源的利用率；
[0019] ②本發(fā)明浸取劑為水或65?95%乙醇，有利于降低成本，避免溶劑殘留，又可重 復(fù)利用溶劑；
[0020] ③本發(fā)明利用超濾得到分子量為500?5000Dr的柞樹葉提取物，制備方法簡(jiǎn)單易 行，設(shè)備投入少，易于工業(yè)化生產(chǎn)；
[0021] ④本發(fā)明制備的柞樹葉提取物具有廣譜抑菌作用；
[0022] ⑤將本發(fā)明制備的柞樹葉提取物加入到化妝品中，對(duì)化妝品中的易滋生菌有顯著 的抑制和殺滅作用，可延長(zhǎng)化妝品的保質(zhì)期；將本發(fā)明制備的柞樹葉提取物加入到食品中， 可作為食品防腐劑使用；本發(fā)明制備的柞樹葉提取物可作為外用抑菌劑治療皮膚、粘膜等 由細(xì)菌引起的感染性疾??；將果蔬浸泡在本發(fā)明制備的柞樹葉提取物中可作為保鮮防腐劑 使用。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下述非限制性實(shí)施例可以使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以 任何方式限制本發(fā)明。
[0024] 實(shí)施例1
[0025] -種麻櫟柞樹葉提取物的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：
[0026] ①將柞樹葉清洗、25°C陰干、粉碎至40目后與去離子水按料液比為lg/15mL，20°C 浸取12h，浸取3次，合并，過濾，3000rpm離心lOmin，得到浸取液，將浸取液65°C水浴回流 濃縮至浸取液體積的6. 67 %，得到lg/mL濃縮液；
[0027] ②將步驟①所得lg/mL濃縮液用去離子水稀釋成lg/10mL，過濾，將濾液利用截留 分子量在5000Dr以下物質(zhì)的超濾膜裝置內(nèi)，0. 05?0. 08MPa過濾收取分子量在5000Dr以 下的物質(zhì)，再將分子量在5000Dr以下的物質(zhì)利用截留分子量在500Dr以上物質(zhì)的超濾膜裝 置內(nèi)，0. 05?0. 08MPa過濾收取分子量在500Dr以上的物質(zhì)，得到分子量為500Dr?5000Dr 的柞樹葉提取物。
[0028] 實(shí)施例2
[0029] 一種麻櫟柞樹葉提取物的制備方法，與實(shí)施例1的區(qū)別為：將柞樹葉清洗、25°C陰 干、粉碎至40目后與65%乙醇按料液比為lg/15mL，20°C浸取12h，浸取3次，合并，過濾， 3000rpm離心lOmin，得到浸取液，將浸取液60°C回流濃縮至浸取液體積的6. 67%，得到第 一次濃縮液，向第一次濃縮液中加入其10倍體積的去離子水，60°C回流濃縮至第一次濃縮 液的體積，得到lg/mL濃縮液。
[0030] 實(shí)施例3
[0031] 一種麻櫟柞樹葉提取物的制備方法，與實(shí)施例1的區(qū)別為：將柞樹葉清洗、25°C陰 干、粉碎至40目后與75%乙醇按料液比為lg/15mL，20°C浸取12h，浸取3次，合并，過濾， 3000rpm離心lOmin，得到浸取液，將浸取液60°C回流濃縮至浸取液體積的6. 67%，得到第 一次濃縮液，向第一次濃縮液中加入其10倍體積的去離子水，60°C回流濃縮至第一次濃縮 液的體積，得到lg/mL濃縮液。
[0032] 實(shí)施例4
[0033] -種麻櫟柞樹葉提取物的制備方法，與實(shí)施例1的區(qū)別為：將柞樹葉清洗、25°C陰 干、粉碎至40目后與85%乙醇按料液比為lg/15mL，20°C浸取12h，浸取3次，合并，過濾， 3000rpm離心lOmin，得到浸取液，將浸取液60°C回流濃縮至浸取液體積的6. 67%，得到第 一次濃縮液，向第一次濃縮液中加入其10倍體積的去離子水，60°C回流濃縮至第一次濃縮 液的體積，得到lg/mL濃縮液。
[0034] 實(shí)施例5
[0035] 一種麻櫟柞樹葉提取物的制備方法，與實(shí)施例1的區(qū)別為：將柞樹葉清洗、25°C陰 干、粉碎至40目后與95%乙醇按料液比為lg/15mL，20°C浸取12h，浸取3次，合并，過濾， 3000rpm離心lOmin，得到浸取液，將浸取液60°C回流濃縮至浸取液體積的6. 67%，得到第 一次濃縮液，向第一次濃縮液中加入其10倍體積的去離子水，60°C回流濃縮至第一次濃 縮液的體積，得到lg/mL濃縮液。
[0036] 應(yīng)用例1
[0037] 實(shí)施例1?5制備得到的柞樹葉提取物抑菌作用實(shí)驗(yàn)：
[0038] 實(shí)驗(yàn)材料：樣品為實(shí)施例1?5制備得到的柞樹葉提取物，受試菌為金黃色葡萄球 菌金黃亞種ATCC1. 2465、大腸埃希氏菌ATCC1. 90、普通變形桿菌ATCC1. 491、痢疾志賀氏菌 ATCC1. 1869和腸道沙門氏菌亞種ATCC1. 1190,細(xì)菌用營(yíng)養(yǎng)肉湯和營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
[0039] 實(shí)驗(yàn)方法：
[0040] ①菌懸液的制備將金黃色葡萄球菌金黃亞種、大腸埃希氏菌、普通變形桿菌、痢疾 志賀氏菌和腸道沙門氏菌亞種用相應(yīng)斜面培養(yǎng)基活化2次，用無菌生理鹽水配成菌體或孢 子濃度為IO6?10 7CfVmL的菌懸液；
[0041] ②抑菌作用的測(cè)定選取直徑為9cm的培養(yǎng)皿，每個(gè)培養(yǎng)皿加15mL培養(yǎng)基，移取上 述各個(gè)菌懸液0. 5mL分別加入各個(gè)平板上，涂布均勻，凝固后，每個(gè)培養(yǎng)皿等距離放置5個(gè) 滅菌牛津杯，于其中分別滴加0. 2mL實(shí)施例1?5制備得到的柞樹葉提取物，對(duì)照加無菌生 理鹽水，每個(gè)菌重復(fù)實(shí)驗(yàn)5次，普通變形桿菌置于30°C，其余菌置于37°C培養(yǎng)24h，移去牛津 杯，量取各個(gè)抑菌圈直徑。
[0042] 實(shí)施例1?5制備得到的柞樹葉提取物抑菌情況見表1 (抑菌圈直徑為5次實(shí)驗(yàn) 平均值）。
[0043] 表1實(shí)施例1?5制備得到的柞樹葉提取物抑菌情況
[0044]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種柞樹葉提取物的制備方法，其特征在于：所述制備方法包括如下步驟： ① 將柞樹葉浸取，得到浸取液，濃縮浸取液； ② 將步驟①所得產(chǎn)品利用超濾得到分子量為500?5000Dr的柞樹葉提取物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述柞樹葉浸取前清洗、陰干、粉碎。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述浸取為將柞樹葉與浸取劑按料 液比為1 :1〇?20g/mL，20?25°C浸取4?12h，浸取1?3次。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述浸取劑為水或65?95%乙醇。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述濃縮為當(dāng)浸取劑為水時(shí)將浸取 液55?65°C回流濃縮至浸取液體積的5?15% ;或當(dāng)浸取劑為65?95%乙醇時(shí)將浸取 液55?65°C回流濃縮至浸取液體積的5?15%，得到第一次濃縮液，向第一次濃縮液中加 入其5?10倍體積的水，55?65°C回流濃縮至第一次濃縮液的體積。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述超濾為先將步驟①所得產(chǎn)品 利用截留分子量在5000Dr以下物質(zhì)的超濾裝置內(nèi)，0. 05?0. 08MPa過濾，收取分子量在 5000Dr以下的物質(zhì)，再將分子量在5000Dr以下的物質(zhì)利用截留分子量在500Dr以上物質(zhì)的 超濾裝置內(nèi)，〇. 05?0. 08MPa過濾，收取分子量在500Dr以上的物質(zhì)。
7. 權(quán)利要求1所述制備方法得到的柞樹葉提取物。
8. 權(quán)利要求7所述的柞樹葉提取物在抑菌上的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種柞樹葉提取物其制備方法及應(yīng)用，屬于提取工藝領(lǐng)域，所述制備方法包括如下步驟：①將柞樹葉浸取，得到浸取液，濃縮浸取液；②將步驟①所得產(chǎn)品利用超濾得到分子量為500～5000Dr的柞樹葉提取物，本發(fā)明有益效果為本發(fā)明制備的柞樹葉提取物具有抑菌作用。
【IPC分類】A61K36-185, A61K8-97, A23L3-3472, A61K127-00, A23B7-153, A61P31-04
【公開號(hào)】CN104606265
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410852045
【發(fā)明人】王林美, 岳冬梅, 夏興宏, 李樹英
【申請(qǐng)人】遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院大連生物技術(shù)研究所
【公開日】2015年5月13日
【申請(qǐng)日】2014年12月30日