用梔子植物的葉子制備梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的工藝方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物制品的提取制備技術(shù)領(lǐng)域，涉及梔子環(huán)烯醚萜苷類有效成分制備工藝方法。
【背景技術(shù)】
[0002]梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物是國際公認(rèn)的中藥梔子的主要有效成分。該類成分一直以來都是從茜草科植物梔子的干燥成熟的果實(shí)中提取得到。梔子果是中國傳統(tǒng)中藥，也是中國近年來大力發(fā)展，擬打入國際市場的中國特色產(chǎn)品。梔子果中除含有梔子苷或京尼平苷等環(huán)烯醚萜苷類成分外還含有大量梔子色素。其中梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物具有多種用途:可以制成天然食用色素梔子藍(lán)，也是用于治療心腦血管、肝膽等疾病及糖尿病的原料藥物。具體藥用活性包括:(1)利膽作用；(2)鎮(zhèn)靜、降壓作用；(3)抗微生物作用，能對許蘭氏黃癬菌、腹股溝表皮癬菌、紅色表皮癬菌等多種真菌及血吸蟲有抑制作用；(4)解熱作用；(5)抗炎作用；(6)降低血壓；(7)促進(jìn)胰腺分泌，并能保持胰細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能；此外還有抑制人口肌收縮、止血、保肝、止瀉、鎮(zhèn)痛和防治動(dòng)脈粥樣硬化等作用。
[0003]梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物成分具有廣闊的應(yīng)用領(lǐng)域，但傳統(tǒng)的制備方法都是從梔子果中提取，而梔子果含有大量的干擾物質(zhì)，導(dǎo)致提取工藝復(fù)雜，物耗過大、收得率低，同時(shí)原料成本也很高，產(chǎn)品極其昂貴，從而限制了該類成分的大量應(yīng)用和我國近年相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了降低梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物生產(chǎn)成本及加工難度，本發(fā)明提供一種用梔子植物的葉子作為加工原料制備梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的工藝方法。
[0005]從梔子葉中制備梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的工藝步驟如下:
(1)在新鮮的梔子的葉子中或干燥粉碎的梔子的葉子粉中加入加打漿劑，打漿，制成梔子葉楽;
(2)將梔子葉漿過濾或離心，加洗滌劑攪拌洗滌I次以上，再過濾或離心，合并保留的上清液或?yàn)V液即為梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液；
(3)將梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液濃縮，上色譜柱洗脫，即得到梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物，為類白色或白色粉末；其中梔子苷的含量為20?99.9%。
[0006]從梔子葉中制備梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的具體工藝操作步驟如下:
(O梔子葉楽的制備
將新鮮的梔子葉和打漿劑按料液體積比1:0.2?3 (w/w)混合打漿，在10?98°C，提取I?200分鐘，得到梔子葉漿；或?qū)⒏稍锏臈d子葉粉碎后與提取劑，按料液比1:1~8 (w/w)混合攪拌，在10?98°C，提取10?600分鐘，得到梔子葉漿；
(2)梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液制備將梔子葉楽離心或過濾，在離心沉淀或過濾殘澄中按料液體積比1:0.2?2 (w/w)加洗滌劑攪拌洗滌I?2次，并再次分別離心或過濾，合并離心上清液或?yàn)V液即為梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液；
(3)制得環(huán)烯醚萜苷類化合物
將梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液減壓濃縮到原體積的10?100%，過濾，然后進(jìn)行色譜法純化，色譜填料為樹脂或反相C18，濃縮的提取液樣品上到色譜柱中，先用I?10倍柱體積的水洗滌，然后，用5?90%的甲醇或乙醇溶液等度洗脫或梯度洗脫，收集目標(biāo)成分，脫去溶劑得到干燥的白色或類白色粉末，即為梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物，梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物中梔子苷(gardenoside)的含量為20?99.9%。
[0007]所述打漿劑為水或濃度為5?95%的甲醇或乙醇。
[0008]所述洗滌劑為水或濃度為5?95%的甲醇或乙醇。
[0009]所述梔子為梔子屬(Gardenia Ellis)植物山梔子或水梔子或小葉梔子。
[0010]所述步驟(2)中的離心轉(zhuǎn)速為3000?10000轉(zhuǎn)/分鐘，離心時(shí)間為5?30分鐘。
[0011]所述步驟(2)中的過濾為過20?80目篩的壓濾或抽濾。
[0012]所述步驟(3)中的洗脫為等度洗脫或梯度洗脫。
[0013]所述等度洗脫是:濃度為5?90%甲醇或濃度為5?90%乙醇溶液的洗脫，洗脫時(shí)間為10?600分鐘。
[0014]梯度洗脫條件為:起始以濃度為I?5%甲醇或乙醇洗脫，甲醇或乙醇的濃度隨洗脫時(shí)間均勻逐漸升高，最后醇的濃度達(dá)到50?100%，洗脫時(shí)間為10?600分鐘。
[0015]本發(fā)明的有益技術(shù)效果體現(xiàn)在下述幾個(gè)方面:
1、本發(fā)明利用梔子葉生產(chǎn)梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物，較傳統(tǒng)的以梔子果為原料的生產(chǎn)方法，可極大地降低生產(chǎn)成本。傳統(tǒng)的以果為原料加工時(shí)，果的原料成本目前每千克為25元左右，而葉的成本僅0.5元左右，因此本發(fā)明的原料成本僅是傳統(tǒng)的1/50。另一方面梔子的葉產(chǎn)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于果的產(chǎn)量。一畝梔子產(chǎn)鮮果100~400千克，而可產(chǎn)鮮葉2000~10000千克，還可利用修剪下的廢葉，因此以葉生產(chǎn)梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物，原料來源豐富并可巨大地提高產(chǎn)量降低生產(chǎn)成本；
2、本發(fā)明在前期研宄中發(fā)現(xiàn)梔子植物的葉子中同樣含有梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物，并且與梔子果一樣，其主要成分都是梔子苷。葉中梔子苷含量與果相近，由于梔子葉的組成較梔子果簡單，特別是沒有梔子黃色素的干擾，葉中干擾物質(zhì)較少；因此其環(huán)烯醚萜苷類化合物提取純化工藝較以果為原料果的提取純化工藝大大簡化，可使色譜分離效率提高一倍以上，工藝成本降低一倍以上；
3、由于梔子葉來源豐富，可全年供貨，從而可使梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物長年生產(chǎn)，大大提高設(shè)備利用率和資金周轉(zhuǎn)周期，降低生產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)，產(chǎn)生巨大經(jīng)濟(jì)效益；
4、因此按本發(fā)明工藝方法生產(chǎn)的產(chǎn)品成本低，工藝簡便、工藝穩(wěn)定、生產(chǎn)設(shè)備投資可大可小，生產(chǎn)靈活，適合多種規(guī)模的企業(yè)投資。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步地描述。
[0017]實(shí)施例1: 從梔子葉中制備梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的具體操作步驟如下:
1.梔子葉漿的制備
將100千克新鮮的山梔子(ferofeflia jasminoides Ellis)的葉子和20千克水(料液比1:0.2 (w/w))混合打漿，溫度10°C，提取600分鐘，得到梔子葉漿120千克；
(2)梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物提取液的制備
將120千克梔子葉漿在轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)/分鐘條件下離心30分鐘，得到離心沉淀60千克，在60千克離心沉淀中加入12千克水(料液比1:0.2 (w/w))攪拌洗滌I次，然后再次在轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)/分鐘條件下離心5分鐘，合并兩次離心上清液共80千克即為梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液；
(3)制得環(huán)烯醚萜苷類化合物
將80千克梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液減壓濃縮到8千克(等于原體積10%)，經(jīng)20目篩過濾，然后進(jìn)行色譜法純化，色譜填料為樹脂；將過濾后的梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的濃縮提取液上到色譜柱中后，先用I倍柱體積的水洗滌，然后用濃度5%的甲醇溶液等度洗脫，洗脫時(shí)間600分鐘，收集目標(biāo)成分，脫去溶劑，得到干燥的類白色粉末2800克，即為梔子環(huán)稀醚釀苷類化合物，梔子環(huán)稀醚釀苷類化合物中梔子苷(gardenoside)的含量為20%。
[0018]實(shí)施例2:
從梔子葉中制備梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的具體操作步驟如下:
1.梔子葉漿的制備
將 100 千克新鮮的水梔子(ferofeflia jasminoides var.rat/ica/75.的葉子和
300千克濃度5%的乙醇(料液比1:3)混合打漿，溫度98°C，提取10分鐘，得到梔子葉漿400千克；
(2)梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液的制備
將400千克梔子葉漿在轉(zhuǎn)速10000轉(zhuǎn)/分鐘條件下離心5分鐘，得到離心沉淀60千克，在60千克離心沉淀中加入120千克濃度5%的乙醇(料液比1:2)攪拌洗滌2次，并分別在轉(zhuǎn)速10000轉(zhuǎn)/分鐘條件下離心30分鐘，合并三次的離心上清液共460千克即為梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液；
(3)制得環(huán)烯醚萜苷類化合物
將460千克梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液減壓濃縮到460千克(等于原體積的100%,實(shí)際不濃縮)，過80目篩，然后進(jìn)行色譜法純化，色譜填料為樹脂，將過濾后的梔子環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取液上到色譜柱中后，后先用10倍柱體積水洗滌，然后用乙醇溶液梯度洗脫，即開始為1%的乙醇洗脫，乙醇濃度在600分鐘內(nèi)上升到濃度50%，洗脫洗脫時(shí)間為600分鐘，收集目標(biāo)成分，脫去溶劑后得到干燥的白色粉末640克，即為梔子環(huán)烯醚萜苷化合物，梔子環(huán)稀醚釀苷類