五味子在抑制ras原癌基因過(guò)表達(dá)中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明具體涉及五味子在抑制ras原癌基因過(guò)表達(dá)中的應(yīng)用，屬于中藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 五味子ScAisaWra 是落葉木質(zhì)藤本，性溫,味甘，微酸，具有收斂固潘， 益氣生津，補(bǔ)腎寧心等功效，是常用中藥之一。五味子具有廣泛的藥理作用，例如強(qiáng)心，抗肝 損傷，鎮(zhèn)靜安定，抗腫瘤，免疫調(diào)節(jié)等作用。
[0003] 約30%的人類腫瘤是由于ras原癌基因突變后過(guò)度激活導(dǎo)致Ras蛋白表達(dá)水平 增高造成的。若Ras蛋白持續(xù)處于活化狀態(tài)，可與下游的效應(yīng)蛋白結(jié)合，將信號(hào)傳遞到下 游信號(hào)元件，引起細(xì)胞的異常增殖，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。研究表明約90%胰腺癌、50%結(jié)腸癌、 30%-40%肺腺癌及5%-40%的白血病是由于ras基因的過(guò)度激活造成的。
[0004] 因此，以Ras蛋白和Ras蛋白所調(diào)控的信號(hào)通路為靶標(biāo)的腫瘤治療在治療由ras 原癌基因突變所導(dǎo)致的腫瘤中具有非常重要的價(jià)值，Ras已成為公認(rèn)的篩選抗相關(guān)惡性腫 瘤藥物的靶標(biāo)。如2005年12月20日美國(guó)FDA批準(zhǔn)的晚期腎細(xì)胞癌治療藥物Nexavar， 其直接靶標(biāo)就Ras信號(hào)途徑，可抑制Raf/MEK /ERK信號(hào)傳導(dǎo)通路，直接抑制腫瘤生長(zhǎng)。
[0005] 迄今為止，沒有文獻(xiàn)報(bào)道過(guò)五味子能夠抑制ras原癌基因的過(guò)表達(dá)，市場(chǎng)上也沒 有以五味子為原料的藥物，能夠?qū)Ｐ砸种朴蓃as原癌基因過(guò)表達(dá)導(dǎo)致的腫瘤。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種五味子的新用途，特別是五味子在抑制ras原癌基因過(guò) 表達(dá)中的應(yīng)用。
[0007] 另一個(gè)目的是提供一種五味子在制備抗腫瘤藥物中的新用途，其所述的腫瘤是由 ras原癌基因過(guò)表達(dá)導(dǎo)致的。
[0008] 由于ras信號(hào)通路從線蟲到人高度保守，在秀麗隱桿線蟲中l(wèi)et-60基因編碼保守 的Ras蛋白，它與人類的Ras蛋白相比具有83%的同源性。如果ras突變，在秀麗隱桿線蟲 中會(huì)引起線蟲產(chǎn)生多陰門，在人類中則是引起細(xì)胞的惡性增殖，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。因此，模 式生物秀麗隱桿線蟲) Ras/MAPK信號(hào)通路過(guò)度激活型突變體被 作為受試群體廣泛應(yīng)用于篩選抑制ras原癌基因通路過(guò)度激活的抗腫瘤藥物。因此，本實(shí) 驗(yàn)采用了一株秀麗隱桿線蟲突變株作為評(píng)估抑制ras原癌基因通路過(guò)度激活藥物的模型， 并得出了五味子對(duì)ras原癌基因過(guò)表達(dá)有明顯下調(diào)作用、具有抑制ras原癌基因通路過(guò)度 激活的結(jié)論。
[0009] 本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明提供了一種五味子的新用途，拓寬了五味子的用 藥范圍；五味子對(duì)ras原癌基因過(guò)表達(dá)有明顯下調(diào)作用，可以專性抑制ras原癌基因的過(guò) 表達(dá)，而不是直接抑制細(xì)胞的增殖分化，即五味子起作用是ras通路機(jī)制依賴地，而非廣泛 的細(xì)胞毒作用；且五味子無(wú)細(xì)胞毒性，僅僅作用于過(guò)度激活表達(dá)的Ras蛋白，不作用于野生 型的Ras蛋白。今后我們有望將五味子應(yīng)用在抗腫瘤藥物的制備中，其中，所述腫瘤是由 ras原癌基因的過(guò)表達(dá)導(dǎo)致的，從而為此類腫瘤患者提供更好的治療，為一些疑難癌癥的治 療提供新的途徑。
[0010] 以下提供具體實(shí)施例以實(shí)現(xiàn)本發(fā)明所述的五味子在制備由ras原癌基因過(guò)度表 達(dá)所致的抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，但不限于這些實(shí)施例。
【具體實(shí)施方式】
[0011] 實(shí)施例一五味子藥液的制備 五味子來(lái)源：購(gòu)自蘭州黃河藥市。
[0012] 稱取五味子9g ;先用蒸餾水浸泡20分鐘，然后文火煮沸，煎煮30min，定容，離心， 棄去沉淀，將上清無(wú)菌過(guò)濾，置4°C冰箱待用，使用時(shí)稀釋不同的濃度。
[0013] 實(shí)施例一五味子藥液對(duì)秀麗隱桿線蟲MT2124 (let-60過(guò)度激活突變）的作用 Ras是一種小分子蛋白，參與調(diào)控動(dòng)物發(fā)育過(guò)程中的很多重要環(huán)節(jié)。ras信號(hào)通路 從線蟲到人高度保守，在秀麗隱桿線蟲中l(wèi)et-60基因編碼保守的Ras蛋白，它與人類的 Ras蛋白相比具有83%的同源性。如果ras突變，在秀麗隱桿線蟲中會(huì)引起線蟲產(chǎn)生多陰 門，在人類中則是引起細(xì)胞的惡性增殖，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。因此，模式生物秀麗隱桿線蟲 (CaeflorAaM/iis e/egafls) Ras/MAPK信號(hào)通路過(guò)度激活型突變體被作為腫瘤模型廣泛應(yīng) 用于篩選抑制原癌基因 ras通路過(guò)度激活的抗腫瘤藥物。
[0014] MT2124是let-60/ras過(guò)度激活的秀麗隱桿線蟲，會(huì)產(chǎn)生多陰門的表型。將藥液稀 釋一定的濃度，作用于秀麗隱桿線蟲MT2124,如果能夠抑制受試線蟲群體多陰門產(chǎn)生個(gè)體 的比例，而只有一個(gè)真陰門的野生型線蟲個(gè)體比例上升，則說(shuō)明藥物作用于ras通路，下調(diào) 了該通路的過(guò)度激活，具有抗腫瘤活性。群體中野生型線蟲的比例越高，則藥物作用效果越 顯著。如以突變體比例表示則相反，其中，野生型比例（％) =1〇〇%_突變體比例（％) 實(shí)驗(yàn)材料：秀麗隱桿線蟲MT2124,基因型：let-60(nl046) IV，購(gòu)自CGC (Caenorhabditis Genetics Center);大腸桿菌0P50 (尿啼陡滲漏突變株)，作為秀麗隱桿 線蟲的食物，購(gòu)自 CGC (Caenorhabditis Genetics Center)。
[0015] 試劑制備： LNGM板的制備
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 五味子在抑制ras原癌基因過(guò)表達(dá)中的應(yīng)用。
2. 五味子在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，所述的腫瘤是由ras原癌基因過(guò)表達(dá)導(dǎo)致的。
【專利摘要】本發(fā)明涉及五味子在抑制ras原癌基因過(guò)表達(dá)中的應(yīng)用，具體講的是五味子在制備抑制ras原癌基因過(guò)表達(dá)的抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。研究表明約90%胰腺癌、50%結(jié)腸癌、30%-40%肺腺癌及5%-40%的白血病是由于ras原癌基因過(guò)表達(dá)造成的，Ras蛋白已成為公認(rèn)的篩選抗相關(guān)惡性腫瘤藥物的靶標(biāo)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明五味子可特異性下調(diào)ras原癌基因突變后所致的過(guò)表達(dá)，而不作用于野生型ras原癌基因，因此毒性低。本發(fā)明提供了一種五味子的新用途，可在制備抗腫瘤（由ras原癌基因過(guò)表達(dá)所致腫瘤）藥物中應(yīng)用。
【IPC分類】A61K36-79, A61K36-57, A61P35-00
【公開號(hào)】CN104706730
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201310688566
【發(fā)明人】李紅玉, 李孟惠, 萬(wàn)鳳奇, 支德娟, 李洋, 黃堅(jiān), 張占欣, 陳曉雨, 李瑩輝
【申請(qǐng)人】蘭州大學(xué)
【公開日】2015年6月17日
【申請(qǐng)日】2013年12月17日