[0019] 本發(fā)明提供的甘木通總黃酮，經(jīng)體內(nèi)外藥理實(shí)驗(yàn)證實(shí)，具有良好的抗心肌缺血作 用。甘木通總黃酮可增加心臟對缺氧狀態(tài)下的耐受性，改善心功能，顯著抵抗心肌缺氧，明 顯延長常壓缺氧狀態(tài)下小鼠的存活時(shí)間。實(shí)驗(yàn)采用多點(diǎn)注射異丙腎上腺素復(fù)制大鼠心肌缺 血模型，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明提供的甘木通總黃酮可明顯降低減少ST段偏移，降低模型大鼠血清中 LDHXPK含量。說明甘木通總黃酮可對抗異丙腎上腺素所致大鼠急性心肌缺血，對缺血心肌 細(xì)胞有一定的保護(hù)作用，具有較強(qiáng)的抗自由基、抗脂質(zhì)過氧化、提高心肌細(xì)胞膜穩(wěn)定性的作 用。本實(shí)驗(yàn)還觀察了甘木通總黃酮對異丙腎上腺素所致大鼠心肌缺血模型血黏度的影響以 及其對血小板聚集率的影響，發(fā)現(xiàn)甘木通總黃酮能降低大鼠的血黏度，改善其血液流變性， 降低了血小板的聚集率，提示甘木通總黃酮通過提高紅細(xì)胞、血小板的表面電荷，增加血液 有形細(xì)胞之間斥力使電泳減少，加快紅細(xì)胞及血小板在血中流速，促進(jìn)軸流，減少邊流和 聚集粘附，從而達(dá)到活血化瘀，降低血液黏度，減少聚集的作用。
[0020] 本發(fā)明提供的甘木通總黃酮含量在85%以上，可與藥用輔料制備成藥物制劑，如 片劑、膠囊、滴丸與粉針劑，具體應(yīng)用方法如下 ：
[0021] 在制備成片劑或膠囊時(shí)，將甘木通總黃酮與2~5倍量的淀粉、糖粉、糊精、微晶纖 維素、乳糖等稀釋劑混勻，以水、80%~60%的乙醇為潤濕劑，或以1 %~20%的淀粉糊、聚 維酮、羧甲基纖維素鈉等為粘合劑，必要時(shí)加入5%~10%的羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚維酮等 崩解劑，按濕法制粒，干燥后整粒，再加入〇. 5%~3%的硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠等為 潤滑劑，經(jīng)壓片制成片劑，或灌裝入空膠囊制成膠囊劑。
[0022] 在制備成滴丸時(shí)，將甘木通總黃酮與聚乙二醇-4000、聚乙二醇-6000等基質(zhì)加熱 熔融，以〇°C~KTC的液體石蠟、二甲基硅油為冷凝劑，滴制成丸，干燥，制成滴丸劑。
[0023] 在制備成粉針劑時(shí)，將甘木通總黃酮與甘露醇、乳糖為支撐劑混勻，以2~5倍量 的注射用水溶解，分裝，冷凍干燥，或噴霧干燥，制成粉針劑。
[0024] 本發(fā)明以甘木通藥材為原料，經(jīng)現(xiàn)代提取分離純化技術(shù)，制得高純度的甘木通總 黃酮。相比于目前甘木通研究和臨床應(yīng)用其粗提取物，本發(fā)明提供的甘木通總黃酮，純度高 (85%以上），具有良好的抗心肌缺血作用。本發(fā)明提供的甘木通總黃酮可與藥用輔料制備 成藥物制劑，如片劑、膠囊、滴丸與粉針劑，以口服和注射給藥方式應(yīng)用于隱匿性冠心病、心 絞痛、心肌梗死、缺血性心肌病等心肌缺血性疾病的防治。本發(fā)明公開的的甘木通總黃酮制 備方法，選用環(huán)保的乙醇為溶劑，無殘留，無污染；操作簡單易推廣，生產(chǎn)成本低，適合批量 大生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0025] 下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明，使本領(lǐng)域技術(shù)人員能更全面的理解本發(fā) 明，實(shí)施例所描述的具體物料配比、工藝條件及結(jié)果僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)也不以任 何方式限制本發(fā)明。
[0026] 實(shí)施例1:一種采用加熱回流提取法，經(jīng)大孔樹脂-硅膠層析二級分離，制備甘木 通總黃酮的方法，其步驟如下：
[0027] 取甘木通地上部分5kg，粉碎成粗粉，加入18倍量的70 %乙醇，加熱回流提取2 次，分別提取2h和lh，過濾，合并2次濾液，減壓回收乙醇，濃縮至比重1. 15,得甘木通浸 膏；將甘木通浸膏用12倍量水分散均勻，放置沉淀12h，濾過，濾液減壓濃縮至比重1. 12,得 甘木通醇提水沉液；將甘木通醇提水沉液上DlOl大孔樹脂吸附柱，用水洗雜質(zhì)，再用15% 乙醇洗雜質(zhì)，然后用60%乙醇洗脫，得甘木通總黃酮半成品洗脫液；總黃酮半成品洗脫液 減壓回收乙醇，濃縮干燥，得甘木通總黃酮半成品；將所得總黃酮半成品上硅膠層析柱，用 丙酮與甲醇的體積比為2 : 1的混合溶劑洗雜質(zhì)，再用丙酮與甲醇的體積比為6 : 1洗脫， 得總黃酮洗脫液IL;加入40g活性炭，40°C攪拌30min，濾過，濾液，減壓回收混合溶劑，濃縮 干燥的中間體21g;中間體以8倍量乙醇40°C熱溶，趁熱濾過，濾液靜置放涼，析出結(jié)晶，抽 濾，濾餅于50°C減壓干燥，得甘木通總黃酮成品12g，總黃酮含量為85. 6%。
[0028] 實(shí)施例2:-種采用超聲波-回流協(xié)同提取法，經(jīng)大孔樹脂-硅膠層析二級分離， 制備甘木通總黃酮的方法，其步驟如下：
[0029] 取甘木通地上部分5kg，粉碎成粗粉，加入12倍量的70 %乙醇，加入I. 0 %的十二 烷基硫酸鈉，超聲波加熱回流提取45min，超聲功率200W，過濾，濾液減壓回收乙醇，濃縮至 比重1. 15,得甘木通浸膏；將甘木通浸膏用10倍量水分散均勻，放置沉淀12h，濾過，濾液減 壓濃縮至比重1. 12,得甘木通醇提水沉液；將甘木通醇提水沉液上AB-8大孔樹脂吸附柱， 用水洗雜質(zhì)，再用16%乙醇洗雜質(zhì)，然后用60%乙醇洗脫，得甘木通總黃酮半成品洗脫液， 總黃酮半成品洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥，得甘木通總黃酮半成品；將所得總黃酮半成 品上硅膠層析柱，用丙酮與甲醇的體積比為I: 1的混合溶劑洗雜質(zhì)，再用丙酮與甲醇的體 積比為5 : 1洗脫，得總黃酮洗脫液0. 5L;加入20g活性炭，30°C攪拌30min，濾過，濾液，減 壓回收混合溶劑，濃縮干燥的中間體18g;中間體以10倍量乙醇40°C熱溶，趁熱濾過，濾液 靜置放涼，析出結(jié)晶，抽濾，濾餅于50°C減壓干燥，得甘木通總黃酮成品10g，總黃酮含量為 89. 2%。
[0030] 實(shí)施例3 :-種采用酶解-回流提取法，經(jīng)大孔樹脂-硅膠層析二級分離，制備甘 木通總黃酮的方法，其步驟如下：
[0031] 取甘木通地上部分5kg，粉碎成粗粉，加入12倍量的60 %乙醇，加入2. 0 %的纖維 素酶，調(diào)節(jié)PH值為5. 5,加熱60°C回流提取2次，分別提取2h和lh，過濾，濾液減壓回收乙 醇，濃縮至比重1. 14,得甘木通浸膏；將甘木通浸膏用10倍量水分散均勻，放置12h沉淀， 濾過，濾液減壓濃縮至比重1. 13,得甘木通醇提水沉液；將甘木通醇提水沉液上HPD400大 孔樹脂吸附柱，用水洗雜質(zhì)，再用17%乙醇洗雜質(zhì)，然后用55%乙醇洗脫，得總黃酮半成品 洗脫液，總黃酮半成品洗脫液減壓回收乙醇，濃縮干燥，得甘木通總黃酮半成品；將所得總 黃酮半成品上硅膠層析柱，用丙酮與甲醇的體積比為3 : 1的混合溶劑洗雜質(zhì)，再用丙酮與 甲醇的體積比為6 : 1洗脫，得總黃酮洗脫液1.5L;加入60g活性炭，40°C攪拌40min，濾 過，濾液，減壓回收混合溶劑，濃縮干燥的中間體26g;中間體以9倍量乙醇40°C熱溶，趁熱 濾過，濾液靜置放涼，析出結(jié)晶，抽濾，濾餅于50°C減壓干燥，得甘木通總黃酮成品13g，總 黃酮含量為87.7%。
[0032] 實(shí)施例4:一種采用濕法制粒法，制備甘木通總黃酮的片劑，其步驟如下：
[0033] 實(shí)施例2制備的甘木通總黃酮20g，與淀粉20g、糊精30g和乳糖30g于混合機(jī)中 混合15min;在混合粉末中，分次加入5%聚維酮乙醇溶液，混合均勻制成軟材；將軟材過20 目篩制濕顆粒，置烘箱50°C干燥4小時(shí)，干顆粒過16目篩整粒，篩除過60目的細(xì)粉。將 I. 〇 %硬脂酸鎂加入到干顆粒中，混合5分鐘；調(diào)節(jié)片重lOOmg，硬度6~10千克，脆碎度 0.6%以下，將總混物進(jìn)行壓制，制成片劑1000片。壓片過程中，對片重、硬度、脆碎度等跟 蹤測量，保證片劑要求的相應(yīng)指標(biāo)在可控范圍內(nèi)，將制得的甘木通總黃酮片薄膜包衣。
[0034] 實(shí)施例5:-種采用滴制法，制備甘木通總黃酮的滴丸，其步驟如下：
[0035] 實(shí)施例2制備的甘木