一種姜黃素膠束滴眼液及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種姜黃素滴眼液，特別涉及一種姜黃素膠束滴眼液及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 我國的糖尿病患病率近幾年快速增長，糖尿病已成為我國重大的公共衛(wèi)生問題。 患者長期的高血糖狀態(tài)導(dǎo)致全身各組織器官發(fā)生病變，引起嚴(yán)重的糖尿病相關(guān)并發(fā)癥，包 括糖尿病性角膜病變。此外，糖尿病患者在角膜外傷或接受角膜手術(shù)時(shí)極易出現(xiàn)角膜上皮 愈合延遲甚至不愈，臨床表現(xiàn)為持續(xù)性角膜上皮損失、反復(fù)性角膜上皮糜爛、淺層角膜潰瘍 形成、繼發(fā)嚴(yán)重角膜感染甚至失明，治療棘手，預(yù)后差，患者的經(jīng)濟(jì)和精神負(fù)擔(dān)嚴(yán)重。目前糖 尿病性角膜病變的臨床治療手段有限，因此，研究糖尿病性角膜病變新的治療靶標(biāo)和有效 防治措施具有重要的臨床意義。
[0003] 糖尿病性角膜神經(jīng)病變引起的角膜知覺減退為糖尿病周圍神經(jīng)病變的一部分，研 究表明線粒體產(chǎn)生過多的超氧化物是導(dǎo)致糖尿病所有慢性并發(fā)癥的共同發(fā)病機(jī)制。多種研 究發(fā)現(xiàn)，氧化應(yīng)激在糖尿病的發(fā)生發(fā)展中起著舉足輕重的作用，慢性高血糖誘導(dǎo)氧化應(yīng)激， 角膜和三叉神經(jīng)節(jié)氧化還原水平的失衡是糖尿病發(fā)生的重要病理生理學(xué)特征。山東省眼科 研究所的研究人員開展了糾正氧化應(yīng)激水平治療糖尿病性角膜病變的研究，取得了一定的 研究成果，進(jìn)一步印證了通過著眼于氧化應(yīng)激治療糖尿病性角膜病變的有效性與可行性。
[0004] 姜黃素（curcumin)是中藥姜黃的主要活性成分，具有抗氧化、抗炎、清除自由基等 廣泛的藥理學(xué)活性，在治療糖尿病及其并發(fā)癥方面有著廣闊的應(yīng)用前景。但是姜黃素親水 性和親脂性均差，吸收差，生物利用度低，且其分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，限制了其臨床應(yīng)用，因此， 很有必要進(jìn)一步探索既安全，又經(jīng)濟(jì)又有效的眼部治療糖尿病性角膜病變和角膜神經(jīng)病變 的姜黃素藥物。公開號為104644550A的中國專利公開了一種通過殼聚糖膠束包封姜黃素 制備成滴眼液，具有穩(wěn)定性好、生物利用度高的優(yōu)點(diǎn)。但其也存在一些不足：（1)殼聚糖作 為一種多糖性高分子材料，本身并不能形成膠束，因此需要加入了大量的表面活性劑和助 表面活性劑以幫助形成殼聚糖膠束，而加入大量的表面活性劑和助表面活性劑勢必引起眼 表刺激性和眼局部應(yīng)用的安全隱患；（2)因殼聚糖本身并不能形成膠束，加入大量的表面 活性劑和助表面活性劑后輔助形成膠束，導(dǎo)致膠束的載藥量低，直接導(dǎo)致滴眼液的主藥姜 黃素濃度低，因此該發(fā)明中主藥姜黃素濃度只有〇. 〇〇5%-〇. 02%，該濃度對糖尿病性角膜病 變的治療基本上是無效的。
[0005] 山東省眼科研究所采用其已申請并獲得授權(quán)的發(fā)明專利"一種環(huán)孢素A膠束滴眼 液及其制備方法"（ZL201210529616. 9)技術(shù)制備了姜黃素納米膠束滴眼液，在治療效果性 評價(jià)研究中，姜黃素納米膠束眼表給藥可部分糾正角膜中的氧化還原失衡，但是因膠束不 能有效靶向進(jìn)入線粒體，導(dǎo)致治療效果有限。此外，山東省眼科研究所在后續(xù)開發(fā)過程中， 研究發(fā)現(xiàn)單純基于聚乙烯己內(nèi)酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物構(gòu)建的膠束且其水溶 液在貯存過程中，環(huán)孢素A會(huì)逐漸從膠束中游離出來，其水溶液在室溫下的有效穩(wěn)定性只 有3個(gè)月。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 針對上述問題，本發(fā)明的目的是提供一種姜黃素膠束滴眼液，改善姜黃素分子穩(wěn) 定性，提高滴眼給藥后的藥物吸收率，同時(shí)提高滴眼液的貯存穩(wěn)定性。
[0007] 本發(fā)明的另外一個(gè)目的是提供上述姜黃素膠束滴眼液的制備方法。
[0008] 本發(fā)明技術(shù)構(gòu)思：將姜黃素制備為滴眼液能有效提高眼局部應(yīng)用的療效，將滴眼 給藥后的姜黃素進(jìn)一步有效地送至線粒體，則可進(jìn)一步增強(qiáng)療效，但如何改善姜黃素的水 溶性，又能保證其分子穩(wěn)定性，提高吸收后線粒體亞細(xì)胞器的靶向性，同時(shí)還需要提高滴眼 液的貯存穩(wěn)定性是該制劑問題的難點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，采用聚乙烯己內(nèi)酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚 乙二醇共聚物包合姜黃素制備成膠束并采用地喹氯銨修飾膠束，不但能解決姜黃素的水溶 性問題，提高姜黃素分子穩(wěn)定性，以及提高姜黃素膠束滴眼液的貯存穩(wěn)定性，還能進(jìn)一步改 變藥物的角膜吸收后的分布特性，有效靶向于線粒體，提高姜黃素治療糖尿病性角膜病變 的有效性。
[0009] 本發(fā)明的技術(shù)方案：一種姜黃素膠束滴眼液，包括姜黃素為主藥以及防腐劑、等滲 調(diào)節(jié)劑，其特征在于還包括聚乙烯己內(nèi)酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物為藥物輔料， 地喹氯銨為線粒體靶向修飾劑和穩(wěn)定劑，所述姜黃素主藥和聚乙烯己內(nèi)酰胺-聚乙酸乙烯 酯-聚乙二醇嵌段共聚物藥物輔料質(zhì)量比在1:12-1:20之間，所述地喹氯銨和聚乙烯己內(nèi) 酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物藥物輔料質(zhì)量比在1:20-1:40之間。
[0010] 所述聚乙烯己內(nèi)酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物中聚乙烯己內(nèi)酰胺、聚乙 酸乙烯酯、聚乙二醇三者的質(zhì)量比為57:30:13,共聚物總分子量100000-120000,臨界膠束 濃度為 5. 〇-15mg/L。
[0011] 本發(fā)明的滴眼液的制備方法如下：將姜黃素、地喹氯銨和聚乙烯己內(nèi)酰胺-聚乙 酸乙烯酯-聚乙二醇溶解到無水乙醇中，通過40°C水浴旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)乙醇在容器內(nèi)部均勻 成膜，再加入蒸餾水以充分洗膜，水浴超聲得膠束溶液，過濾冷凍干燥后得姜黃素膠束的干 粉制劑，再分散溶解于無菌緩沖液中，使得姜黃素最終質(zhì)量百分濃度為0.5%，并加入防腐 劑、pH調(diào)節(jié)劑，等滲調(diào)節(jié)劑之后無菌過濾分裝即可。其中防腐劑、pH調(diào)節(jié)劑，等滲調(diào)節(jié)劑可 以按照已有技術(shù)添加。
[0012] 上述姜黃素膠束滴眼液的制備方法，制得的姜黃素膠束粒徑范圍在70~150nm之 間。
[0013] 上述姜黃素膠束滴眼液的制備方法，使用的緩沖液為常用磷酸鹽緩沖液或硼酸鹽 緩沖液，pH值為7. 4。
[0014] 本發(fā)明制備的姜黃素膠束滴眼液，使得姜黃素在水溶液中有良好的溶解性，給藥 濃度可達(dá)5mg/ml，且膠束粒徑小，分布范圍均一，藥物穩(wěn)定性良好。該姜黃素滴眼液不但降 低了給藥刺激性、還提高了角膜對藥物的吸收、降低了給藥濃度、延長了藥物作用時(shí)間、減 少了給藥次數(shù)、提高了患者的順從性，具有很好的經(jīng)濟(jì)性。
【附圖說明】
[0015] 圖1是實(shí)施例1制備的0. 5%姜黃素膠束滴眼液與未用地喹氯銨修飾的0. 5%姜黃 素膠束滴眼液對糖尿病小鼠角膜損傷修復(fù)作用對比圖。
[0016] 圖2是對圖1各組小鼠角膜上皮缺損面積定量分析圖。
[0017] 圖3是實(shí)施例1制備的0. 5%姜黃素膠束滴眼液與未用地喹氯銨修飾的0. 5%姜黃 素膠束滴眼液細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
[0018] 圖4是實(shí)施例1制備的0.5%姜黃素膠束滴眼液與未用地喹氯銨修飾的0.5%姜黃 素膠束滴眼液的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 下面結(jié)合附圖并通過具體實(shí)施例來進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明。
[0020] 實(shí)施例1: 將50mg姜黃素、30mg地喹氯銨和900mg聚乙烯己內(nèi)酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇 (分子量118000)置于IOOmL圓底燒瓶中，加入IOmL無水乙醇，充分溶解后，40°C水浴旋轉(zhuǎn) 真空蒸發(fā)無水乙醇，得到藥物和共聚物的均勻分散薄膜，然后加入蒸餾水，充分洗膜，300w 功率水浴超聲lOmin，得膠束溶液。將膠束溶液過0. 22Mm微孔濾膜后，冷凍干燥得膠束粉 末。然后用IOmL硼酸鹽緩沖液分散溶解膠束粉末，加入防腐劑苯扎氯銨、等滲調(diào)節(jié)劑氯化 鈉，PH調(diào)節(jié)為7. 4,無菌過濾分裝即可。激光粒度儀測得姜黃素膠束平均粒徑為93nm，分散 指數(shù)TOI=O. 067,分散均一性良好。將該姜黃素膠束滴眼劑在室溫條件下保存5個(gè)月，姜黃 素從膠束中滲漏量小于10%。
[0021] 實(shí)施例2: 將50mg姜黃素、15mg地喹氯銨和600mg聚乙烯己內(nèi)酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇 (分子量100000)置于IOOmL圓底燒瓶中，加入IOmL無水乙醇，充分溶解后，40°C水浴旋轉(zhuǎn) 真空蒸發(fā)無水乙醇，得到藥物和共聚物的均勻分散薄膜，然后加入蒸餾水，充分洗膜，300w 功率水浴超聲lOmin，得膠束溶液。將膠束溶液過0. 22Mm微孔濾膜后，冷凍干燥得膠束粉 末。然后用IOmL硼酸鹽緩沖液分散溶解膠束粉末，加入防腐劑苯扎氯銨、等滲調(diào)節(jié)劑氯化 鈉，PH調(diào)節(jié)為7. 4,無菌過濾分裝即可。激光粒度儀測得姜黃素膠束平均粒徑為81nm，分散 指數(shù)TOI=O. 069,分散均一性良好。將該姜黃素膠束滴眼劑在室溫條件下保存5個(gè)月，姜黃 素從膠束中滲漏量小于10%。
[0022] 實(shí)施例3: 將50mg姜黃素、50mg地喹氯銨和1000 mg聚乙烯己內(nèi)酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇 (分子量120000)置于IOOmL圓底燒瓶中，加入IOmL無水乙醇，充分溶解后，40°C水浴旋轉(zhuǎn) 真空蒸發(fā)無水乙醇，得到藥物和共聚物的均勻分散薄膜，然后加入蒸餾水，充分洗膜，300w 功率水浴超聲lOmin