〇
[0148] 比旋度（c = lg/lOOml) [a ]D28= - 119. 0。。HPLC 純度：98. 57%。
[0149] 實(shí)施例3:bepecmL-精氨酸鹽（1:2)的制備，（縮寫：Arg-BPC)
[0150] Bepecin 乙酸鹽（lg，0? 705mmol)和 L-精氨酸（420mg，2. 41 mmol)溶解在 4ml 水中 (溶液的pH值為8. 92)，攪拌20分鐘。隨后用用稀乙酸（50 % )將pH值調(diào)節(jié)到7. 40 ±0. 05。 將該溶液施加在經(jīng)預(yù)先充分洗滌和用純水平衡的HPLC柱（ID = 2. 2cm，h = 25cm，吸附劑： Reprosil C18, IOym)的起始處。用具有增加濃度的異丙醇的水逐步洗脫：從0至5%的異 丙醇，30分鐘。棄去含有鹽和雜質(zhì)的級(jí)分。將主要級(jí)分冷凍干燥。獲得易溶于水的LlOg 白色無定形粉末。
[0151] 氨基酸分析對應(yīng)于如下組成：
[0152] 2-Ala, 1-Val, 3-Gly, 4-Pro, 1-Leu, 2-Asp, 1-Glu, 1-Lys, 2~Arg〇
[0153] MS(TOFMSES+) =M1= 1419. 8(十五肽+H+)
[0154] M2= 175. I (L-精氨酸 +H +)
[0155] FTIR3?(cm:) :3271, 3057, 2958, 2875, 1632(C0 NH), 1539, 1448, 1394, 1244, 1205, 1161, 1097, 1044, 919, 873, 652〇
[0156] 比旋度（c =lg/100ml)[a]D28= -124,3。。HPLC純度：99.54%。
[0157] 1H-NMR光譜示于圖4/B中。
[0158] 實(shí)施例4 :bepecin L-賴氨酸鹽（1:3)的制備，（縮寫：Lys-BPC)
[0159] Bepecin 乙酸鹽（500mg，0. 34mmol)和 L-賴氛酸（176mg，I. 2mmol)溶解于 3ml 水 中，攪拌20分鐘。將溶液施加在HPLC柱上并如實(shí)施例3所述純化。獲得易溶于水的283mg 白色無定形粉末。
[0160] 氨基酸分析對應(yīng)于如下組成：
[0161] 2-Ala, 1-Val, 3-Gly, 4-Pro, 1-Leu, 2-Asp, 1-Glu, 4~Lys
[0162] MS(T0FMSES+) =M1= 1419. 8(十五肽+H+)
[0163] M2= 147. I (L-賴氨酸 +H +)
[0164] FTIRS? (cm-:) : 3269, 3060, 2958, 2875, 1981, 1627 (CONH), 1532, 1447, 1393, 1315, 1241, 1203, 1160, 1008, 919, 873, 654〇
[0165] 比旋度（c = lg/lOOml) [a ]D28= - 130。。HPLC 純度：99.47%。
[0166] 1H-NMR光譜示于圖4/A中。
[0167] 實(shí)施例5 :bepecin L-鳥氨酸鹽（1:2)的制備，（縮寫：0rn-BPC)
[0168] Bepecin 乙酸鹽（5〇Omg，0. 34mmol)和 L-鳥氛酸（I. 77mg，I. 05mmol)溶解在 f5ml 水中，pH值用稀乙酸調(diào)節(jié)至7. 40±0. 05。如前面的實(shí)施例中所述將該溶液在HPLC柱上純 化。獲得易溶于水的412mg白色無定形粉末。
[0169] 氨基酸分析對應(yīng)于如下組成：
[0170] 2-Ala, 1-Val, 3-Gly, 4-Pro, 1-Leu, 2-Asp, 1-Glu, 1-Lys, 2-〇rn
[0171] MS(TOFMS ES+) =M1= 1419. 8(十五肽+H+)
[0172] M2= 170.I(L-鳥氨酸+H+)
[0173]FTIRS(cm-1) :3269, 2958, 2875, 2162, 1636(C0NH), 1522, 1442, 1389, 1311, 1243, 1203, 1160, 1094, 1040, 911, 873, 654, 610
[0174] 比旋度（c=lg/lOOml)[a]D28= - 137。。HPLC純度：99. 30%。
[0175]1H-NMR光譜示于圖4/C中。
[0176] 實(shí)施例6:片劑
[0177]
[0178] 實(shí)施例7:片劑-膜包衣的
[0179]
[0180]


[0190] 實(shí)施例12 :乳膏
[0191] 100g乳膏的親脂性成分：硬脂酸，鯨蠟硬脂醇和硬脂醇，具有辛酸和癸酸的飽和 中鏈甘油三酯，硅油Dimeticon和鯨錯(cuò)硬脂醇硫酸鈉總共16. 4g在60°C下溶解。
[0192] 親水成分：向無菌過濾的純水（70g)添加丙二醇（3g)和防腐劑丁基-4-羥基苯甲 酸酯（〇. 5g)，攪拌并加熱至60°C。通過使用0. 1摩爾的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6. 5。此 后，將親水相在攪拌下添加至親脂相，冷卻并攪拌直至達(dá)到30-35°C為止。將抗氧化劑生育 酚乙酸酯（0.05g)加入到該混合物中，充分?jǐn)嚢?，最后添加含有Arg-BPC (0.1 g)的IOg水溶 液。將混合物充分?jǐn)嚢璨⒀b入適當(dāng)?shù)娜萜髦小?br>[0193] 實(shí)施例13 :栓劑
[0196] 實(shí)施例14:口腔分散片劑
[0197]
[0198] 實(shí)施例15:透皮制劑-貼劑
[0199]活性成分：將 Arg_BPC(5. Omg)和doxocycline(1.0 g)溶解在水（IOg)、二甘醇單 乙基醚（1.8g)、聚乙二醇單月桂酸酯（0.5g)和二乙醇胺（0.2g)的混合物中。添加25g聚 合物溶液GELVA.RTM. 2484 (Monsanto)并充分?jǐn)嚢?。然后將溶液靜置20分鐘以除氣。然 后將其施加到不滲透膜（聚乙烯膜或鍍鋁的聚乙烯膜）例如3M-Sc〇tChpack1006)并在 40-50°C進(jìn)行干燥。該層隨后用多孔受控物質(zhì)釋放箱和保護(hù)膜覆蓋并切成合適的尺寸。
[0200] 實(shí)施例16 :具有延長的穩(wěn)定性的片劑
[0201]配制：
[0202] BepecinL-精氨酸鹽1:2(1. Og)和D-甘露糖醇（1.0 g)溶于20ml水中，無菌過濾 (0. 22ym過濾器），并冷凍干燥。得到的白色無定形粉末含有50%的bepecin鹽。
[0203] 片劑制備:
[0205]穩(wěn)宙件測試:
[0206] 將根據(jù)描述的方法制備的片劑在-15°C、+25°C和+50°C /RH 65%下溫育，b印ecin 的測定使用HPLC方法來測量。溫育持續(xù)時(shí)間：18個(gè)月。
[0207]溫度：-15°C +25°C +5(TC
[0208] b印ecin 的測定（HPLC) :99. 8% 96. 6% 92. 35%
[0209] 如果使用外推法，可得出結(jié)論，制備的片劑將在室溫下穩(wěn)定至少2年。
[0210] 實(shí)施例17:具有bepecin的食品添加劑-泡騰片劑
[0211]
[0212] 實(shí)施例18 :b印ecin對NO系統(tǒng)的活性
[0213] -氧化氮（NO)具有在內(nèi)皮和神經(jīng)細(xì)胞中的信號(hào)傳導(dǎo)分子以及所謂的殺死性分子 (通過免疫細(xì)胞活化）的作用。一般而言，在NO過量和缺乏的情況中，似乎NO強(qiáng)烈促成生 物體中不同異常和病癥的形成，例如高血壓，咽峽炎，陽萎，循環(huán)和膿毒性休克，心力衰竭， 心律失常，卒中，炎性過程，血小板和白血球的粘附和聚集，創(chuàng)傷和燒傷、肌肉、腱、韌帶和骨 損傷的不良愈合，胃腸道病損，糖尿病，胰腺炎，循環(huán)和感染性休克，內(nèi)皮功能紊亂，心臟缺 陷和帕金森氏病。
[0214] Bepecin具有影響NO的釋放和NO-水平的正?；约暗窒鸑O阻斷物質(zhì)例如 L-NAME的施用后的失調(diào)和對抗NO前體例如L-精氨酸施用的副作用的特征性質(zhì) 。B^cin 對NO系統(tǒng)的此活性在一定程度上闡明了其非常寬范圍的藥理學(xué)活性。
[0215] 通過使用在文獻(xiàn)中描述的方法：J. Physiol. Paris, 1007, 139 - 49 ; Regu I. Pept ?，2009, 156 (I - 3),83-89 ；J. Pharm. Sc i. , 2008, 108 (I) , 7 - I ； J. Clin. Exp. Cardiology, 2012, 3., 201, ReguI. Pept. 2013, 181C, 50-66, Med. Sci. Monit. 2006,1^, 36-45and Eur. J. Pharmacol. , 1997. 332(1). 23 - 33,已實(shí)驗(yàn)證明 b印ecin 可導(dǎo)致"體外"NO釋放并抵消L-精氨酸和L-NAME的效應(yīng)。因此，bepecin使血壓異常正常 化，這是由NO結(jié)果導(dǎo)致的。
[0216] 當(dāng)在IOng至10 y g/kg體重的劑量范圍中胃腸外或口服使用時(shí)，Bepecin還可防止 異丙腎上腺素-心肌梗塞以及由甲基地高辛（6mg/kg i.v.或i.p.)引起的心律失常。其 防止由NO阻斷劑L-NAME引起的病損的惡化。Bepecin抵消由過高和過低的NO-值造成的 失調(diào)并重新建立正常的NO-系統(tǒng)功能。
[0217] 如果IOng至IOy g/kg體重的劑量范圍中胃腸外或口服使用，B印ecin通常在 NO-系統(tǒng)中具有調(diào)制效應(yīng)。其防止由NOS阻斷劑L-NAME引起的病損的惡化。
[0218] 實(shí)施例19:對傷口愈合的效應(yīng)
[0219]通過使用在文獻(xiàn)中具體描述的方法：J. Physiol. Pharmacol.，2 009, 60.(Suppl. 7) , 191 - 196 ； J. Orthop. Re s. , 2010, 28, (9) , 1 1 5 5 - 1 1 6 I ； Burns, 2005, 3 1 (3)，310 - 315 ;Bone, 1999, 24 (3) , 1 95 - 202 ；Surg. Today, 2007,^1(9)，768 - 777,已發(fā)現(xiàn)，b印ecin因其改善血管生成和膠原產(chǎn)生而顯著促進(jìn) 下述病癥的愈合：
[0220] -皮膚切口；
[0221] -深層皮膚燒傷；
[0222] -各種吻合如腸道傷口；糖尿病創(chuàng)面；
[0223] -各種痿；
[0224] _各種組織橫斷，特別是韌帶、腱、肌肉和神經(jīng)橫斷；
[0225]-骨折，包括同時(shí)軟組織損傷；
[0226]-角膜創(chuàng)傷，即使具有完全的上皮磨損或角膜潰瘍。
[0227] 基于這些結(jié)果以及大鼠和人中愈合過程之間的很大相似性，bepecin將成功地用 于人中傷口、燒傷和骨折的愈合。
[0228] 實(shí)施例20:內(nèi)皮保護(hù)、血管生成、血栓形成和出血性病癥
[0229]基于廣泛綜述的證據(jù)（J Physiol Paris. 1993 ；87, 313-27, Inflammopharmacol 2006 ：14,214 - 21, Curr Pharm Des 2010 ：16, 1224 - 34, I. Physiol. Pharmacol. , 2009, De c. , 60. Suppl. 7. 161 - 5, Thromb. Res. , 2012, May, 129 (5). 652 - 9);證明了 bepecin 影響血 管完整性損失后的活動(dòng)。Bepecin在無水酒精胃內(nèi)灌注后恢復(fù)內(nèi)皮完整性維護(hù)（即其表現(xiàn) 出細(xì)胞保護(hù)效應(yīng)），而且，bepecin展示出在胃腸道和胃腸外組織病損中的快速傷口愈合效 應(yīng)。因此證實(shí)了在大鼠中的腹主動(dòng)脈吻合術(shù)之后，bepecin施用在至少24小時(shí)防止阻塞性 血栓形成，并且當(dāng)在已經(jīng)形成的血栓形成和血管阻塞的存在下給予時(shí)，其迅速破壞已形成 的阻塞性血栓并且恢復(fù)小腿功能。
[0230] 在對大鼠進(jìn)行的其它實(shí)驗(yàn)中，在截肢后，證明了 bepecin始終抵抗出血時(shí)間延長 和血小板減少癥以及阿司匹林_、華法林和肝素延長的出血。Bepecin腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)或胃 內(nèi)地施用（10 y g/kg, 10ng/kg體重）。
[0231]在預(yù)防和消除已形成的凝塊、出血時(shí)間延長和阿司匹林_、華法林和肝素延長的 出血導(dǎo)致的血小板減少癥以及由大劑量肝素（250mg/kg, 25mg/kg, 10mg/kg i. V.)、華法林 (1.5mg/kg i.g.，連續(xù)3天每天一次）、阿司匹林（0. lg/kg i.g.(每天一次/連續(xù)3天或 1.0g/kg i.p. -次）導(dǎo)致的血小板減少癥的過程中一個(gè)重要的發(fā)現(xiàn)是，bepecin其本身不 影響凝結(jié)參數(shù)。
[0232] 因此，使用bepecin的療法可擴(kuò)展至其中血栓形成或血液病癥任一存在的所有相 關(guān)病狀。Bepecin還可以是其中egr-1和/或naB2的功能受損的病狀的原始療法。
[0233] 實(shí)施例21:粘連形成
[0234] 我們以往的研究證實(shí)了 bepecin對炎癥過程及其結(jié)果的顯著效應(yīng)。此外，我們還 證實(shí)了 bepecin對粘連形成（粘結(jié)）的治療效應(yīng)和防止粘連的發(fā)展（或至少顯著減少）的 治療效應(yīng)。
[0235]通過幾個(gè)合適的方法（即根據(jù) Gastroenterology, 2010, 138, (5, Suppl. 1) 753 中 描述的大鼠中腹膜壁層的手術(shù)切除；根據(jù)Surg. Today, 2007, 37 (9)，768 - 777的回腸-回腸 吻合術(shù)；Dig. Dis. Sci.，2009, 54 (10)，2070 - 2083)的空腸-回腸吻合術(shù)），已顯示b印ecin 一般性地減少粘連形成（肉眼可見的和顯微鏡可見的），這與功能性改善相關(guān)（即吻合增 強(qiáng)，動(dòng)物體重增加到正常水平）。Bepecin以其IOng至10 yg/kg體重范圍的定期低劑量胃 腸外、口服或局部地使用。
[0236] 考慮到動(dòng)物模型與人有機(jī)體病狀之間的一致性，本申請請求保護(hù)bepecin在這些 病癥中的治療用途。
[0237] 實(shí)施例22:免疫調(diào)節(jié)
[0238]由天然或合成的物質(zhì)