一種核殼型多糖膠定位靶向載體材料的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明屬于緩控釋制劑載體材料領(lǐng)域，具體涉及一種核殼型多糖膠定位革El向載體材料的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]癌癥是人體的正常細(xì)胞在外部某些不良因素的誘導(dǎo)下發(fā)生突變，細(xì)胞生長(zhǎng)增殖機(jī)制失常而引起的疾病，因其治愈困難，已成為嚴(yán)重威脅人類健康的重大疾病。目前化療是治療癌癥的常規(guī)手段之一，它利用化學(xué)藥物殺死癌細(xì)胞、抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖，是一種全身性治療手段。由于抗癌藥物本身的選擇性不強(qiáng)，且在藥物濃度過量的情況下，殺死癌細(xì)胞的同時(shí)也會(huì)損害正常細(xì)胞，出現(xiàn)藥物的不良反應(yīng)，因此，需要藥物具有識(shí)別及緩釋功能。
[0003]近年來，隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展，各種新型的藥物載體層出不窮，其制備工藝逐步完善，作用機(jī)制進(jìn)一步闡明、劑型逐步改善、毒性和免疫原性大幅降低，特別是大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明大多數(shù)的藥物載體可以提高藥物治療指數(shù)、降低藥物毒性、減小藥物副作用、減小劑量。
[0004]盡管藥物載體發(fā)展迅速，且具備了許多優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)，其臨床應(yīng)用并不像預(yù)期的那樣廣泛，主要原因在于載體的引入極大的降低了載藥量、載體的存在給機(jī)體增加了額外的代謝負(fù)擔(dān)、載體的合成成本高且耗時(shí)，更重要的是，具有協(xié)同治療效果的多組分藥物很難同時(shí)且定量成比例的進(jìn)入同一劑型，另外，載體基藥物在體液環(huán)境中的分布和穩(wěn)定存在也面臨著極大的挑戰(zhàn)。隨著癌癥診斷和治療業(yè)的發(fā)展，制備安全無毒的磁靶向載藥體成為必要。
[0005]磁靶向載藥體是由骨架材料、藥物及磁性內(nèi)核制備而成的定位靶向載體，該磁性載體借助外磁場(chǎng)使藥物定位在病變部位、釋放藥物，減少正常組織中藥物含量，提高藥物利用率，降低藥物毒性。常見的磁性材料主要有Fe304、鐵氧體、碳包鐵等，這些材料相比鎳鹽和鈷鹽對(duì)人體的危害小。骨架材料必須具有良好的生物相容性、易降解且不能破壞藥物本身。常見的骨架材料有多糖類、蛋白質(zhì)類、脂質(zhì)等。果膠是一種水溶性多糖，因其具有很好的生物相容性和可生物降解性而廣泛應(yīng)用于載藥體中。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是即是使用的骨架材料為向日葵果膠，磁性材料為水基四氧化三鐵制備定位靶向多糖膠載體材料，一種定位靶向多糖膠載體材料的制備方法，所述制備方法為通過果膠鈣包覆水基四氧化三鐵，以低酯果膠載體為骨架材料制作載藥體，所述四氧化三鐵經(jīng)過親水性基團(tuán)修飾；
進(jìn)一步地，所述制備方法包括以下三個(gè)步驟:
51:制備水基四氧化二鐵磁性納米粒；
52:制備定位革El向多糖膠載體材料；
53:檢測(cè)上述定位革E向多糖膠載體材料；
進(jìn)一步地，所述S1:制備水基四氧化三鐵磁性納米粒的步驟為: (1)將檸檬酸鈉溶于去離子水中，得到0.05-0.2 g/mL的第一檸檬酸鈉溶液；
(2)將FeCljPFeSO4W摩爾比(1: 1~1.5:1)溶于50 mL蒸餾水中，配成Fe 2+和Fe 3+的混合溶液，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下，將上述混合溶液加熱到50~60°C，邊攪拌邊向混合液中滴加8%~12%的氨水，至pH值達(dá)到8~10，反應(yīng)10 min后，加入20 mL配置好的第二檸檬酸鈉溶液，于50~60 °C下持續(xù)反應(yīng)30 min ；
(3)將(2)得到的產(chǎn)物室溫冷卻，靜置磁吸，倒去上清液，水洗三次，分散在300mL水溶液中，即得水基四氧化三鐵磁性納米粒，粒徑為10 nm左右；
進(jìn)一步地，所述S2:制備定位革E向多糖膠載體材料的步驟為:
(1)配制Img/mL~4 mg/mL且果膠的pH為2~2.5的低酯果膠水溶液；
(2)向(I)中制備的低脂果膠水溶液中加入目標(biāo)藥物，藥物含量為0.1 mg/mL~0.4 mg/
mL ；
(3)配制10 mg/mL?50 mg/mL 的 CaCl2溶液；
(4)取水基四氧化三鐵磁流體5mL加入到(2)配制好的果膠-藥物水溶液中，超聲5min，使其均勻混合，在超聲條件下邊攪拌邊往混合液中滴加(3)中配置的CaCl2溶液，反應(yīng)30 min ；
(5)將(4)得到的產(chǎn)物離心，棄去上清液，下層沉淀物水洗三次，放入冷凍干燥箱中24h后取出，充分研磨，即得四氧化三鐵多糖膠載體材料，所述四氧化三鐵多糖膠載體的平均粒徑為15 nm ；
進(jìn)一步地，所述S3:檢測(cè)上述定位革E向多糖膠載體材料的步驟為
(1)利用傅里葉紅外光譜儀對(duì)水基四氧化三鐵的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定；
(2)利用傅里葉紅外光譜儀對(duì)磁性多糖膠載體材料的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定；
(3)利用透射電子顯微鏡對(duì)磁性多糖膠載體材料的形貌進(jìn)行鑒定；
(4)利用振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)對(duì)水基四氧化三鐵的磁性能進(jìn)行鑒定；
(5)利用振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)對(duì)磁性多糖膠載體材料的磁性能進(jìn)行鑒定；
(6)進(jìn)行環(huán)磷酰胺的載藥、釋藥試驗(yàn)；
進(jìn)一步地，所述第二檸檬酸鈉溶液的濃度為0.05-0.12 g/mL ;
進(jìn)一步地，所述果膠為低酯果膠，酯化度為35%~42%，濃度為I mg/mL~4 mg/mL ；
進(jìn)一步地，所述目標(biāo)藥物為環(huán)磷酰胺、阿霉素、奧沙利鉑、卡莫司汀、順鉑、5-氟尿嘧啶或卡鉑類抗癌藥物。
[0007]本發(fā)明的有益效果通過磁性四氧化三鐵來實(shí)現(xiàn)靶向作用，借助外磁場(chǎng)使藥物定位在病變部位、釋放藥物，減少正常組織中藥物含量，提高藥物利用率，降低藥物毒性，以低酯果膠載體為骨架材料無毒且安全，具有很好的生物相容性和可生物降解性，可以提高藥物治療指數(shù)、降低藥物毒性、減小藥物副作用。
【附圖說明】
[0008]圖1為本發(fā)明水基氧化三鐵傅里葉紅外光譜儀圖；
圖2為本發(fā)明磁性多糖膠載體材料的傅里葉紅外光譜儀圖；
圖3為本發(fā)明磁性多糖膠載體材料的透射電鏡圖；
圖4為本發(fā)明水基四氧化三鐵的磁性能圖； 圖5為本發(fā)明磁性多糖膠載體材料的磁性能圖。
具體實(shí)施例
[0009]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)描述。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用于解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。相反，本發(fā)明涵蓋任何由權(quán)利要求定義的在本發(fā)明的精髓和范圍上做的替代、修改、等效方法以及方案。進(jìn)一步，為了使公眾對(duì)本發(fā)明有更好的了解，在下文對(duì)本發(fā)明的細(xì)節(jié)描述中，詳盡描述了一些特定的細(xì)節(jié)部分。對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說沒有這些細(xì)節(jié)部分的描述也可以完全理解本發(fā)明。
[0010]下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限定。下面為本發(fā)明的舉出最佳實(shí)施例:
一種定位靶向多糖膠載體材料的制備方法，所述制備方法為通過果膠鈣包覆水基四氧化三鐵，以低酯果膠載體制為骨架材料制作載藥體，所述四氧化三鐵經(jīng)過親水性基團(tuán)修飾，所述制備方法包括以下三個(gè)步驟:
S1:制備水基四氧化二鐵磁性納米粒；
(1)將檸檬酸鈉溶于去離子水中，得到0.05-0.2 g/mL的第一檸檬酸鈉溶液；
(2)將FeCljPFeSO4W摩爾比(1: 1~1.5:1)溶于50 mL蒸餾水中，配成Fe 2+和Fe 3+的混合溶液，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)下，將上述混合溶液加熱到50~60°C，邊攪拌邊向混合液中滴加8%~12%的氨水，至pH值達(dá)到8~10，反應(yīng)10 min后，加入20 mL配置好的第二檸檬酸鈉溶液，于50~60 °C下持續(xù)反應(yīng)30 min ；
(3)將(2)得到的產(chǎn)物室溫冷卻，靜置磁吸，倒去上清液，水洗三次，分散在300mL水溶液中，即得水基四氧化三鐵磁性納米粒，粒徑為10 nm左右；
52:制備定位靶向多糖膠載體材料
(1)配制Img/mL~4 mg/mL且果膠的pH為2~2.5的低酯果膠水溶液；
(2)向(I)中制備的低脂果膠水溶液中加入目標(biāo)藥物，藥物含量為0.1 mg/mL~0.4 mg/
mL ；
(3)配制10 mg/mL?50 mg/mL 的 CaCl2溶液；
(4)取水基四氧化三鐵磁流體5mL加入到(2)配制好的果膠-藥物水溶液中，超聲5min，使其均勻混合，在超聲條件下邊攪拌邊往混合液中滴加(3)中配置的CaCl2溶液，反應(yīng)30 min ；
(5)將(4)得到的產(chǎn)物離心，棄去上清液，下層沉淀物水洗三次，放入冷凍干燥箱中24h后取出，充分研磨，即得四氧化三鐵多糖膠載體材料，所述四氧化三鐵多糖膠載體的平均粒徑為15 nm ；
53:檢測(cè)上述定位革E向多糖膠載體材料:
(1)利用傅里葉紅外光譜儀對(duì)水基四氧化三鐵的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定；
(2)利用傅里葉紅外光譜儀對(duì)磁性多糖膠載體材料的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定；
(3)利用透射電子顯微鏡對(duì)磁性多糖膠載體材料的形貌進(jìn)行鑒定；
(4)利用振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)對(duì)水基四氧化三鐵的磁性能進(jìn)行鑒定；
(5)利用振動(dòng)樣品磁強(qiáng)計(jì)對(duì)磁性多糖膠載體材料的磁性能進(jìn)行鑒定； (6)進(jìn)行環(huán)磷酰胺的載藥、釋藥試驗(yàn)；
實(shí)施例1:所用多糖膠為天然低酯多糖膠，藥物為環(huán)磷酰胺。
[0011]稱取1.1 g FeC13.6Η20、0.9 g FeS04.