1%TFA水溶液稀釋后通過OasisHLB柱；1SF-NFP吸附于OasisHLB柱上，接著用1mL水 淋洗HLB柱；淋洗后的OasisHLB柱用氮?dú)庖?0mL/min的速度吹干；1SF-NFP用8mL的無 水乙醚從OasisHLB柱上洗下，并通過自制的硫酸鈉柱干燥；將1SF-NFP收集在新的反應(yīng)瓶 中，在室溫下用氮?dú)獯蹈梢颐?，得到干燥?SF-NFP，檢測其放化純度>99%。
[0026] 4)向干燥的含1SF-NFP的反應(yīng)瓶中加入300yg的精氨酸乙酯鹽酸鹽，200yL 的DMS0和20yL的DIPEA，在40°C保持10min。用0.7mL5%醋酸水溶液淬滅反應(yīng)并 加10mL水進(jìn)行稀釋，稀釋液通過OasisHLB柱，并用2mL的水淋洗OasisHLB柱。用2 mL乙醇洗脫吸附在OasisHLB柱上的產(chǎn)物，用氮?dú)獯蹈梢掖?，制備得到的A(2-lsF-氟丙酰 基）精氨酸乙酯。進(jìn)一步用50yL濃度為lmol/L的NaOH在室溫下對其進(jìn)行水解10 min后，用50yL濃度為lmol/L的HC1中和，制備得到的A(2-1SF-氟丙?；?Z-精氨酸 溶液，用生理鹽水稀釋并通過0.22ym無菌濾膜后使用。
[0027] 對標(biāo)準(zhǔn)品FP-Arg與lsF_FP_Arg進(jìn)行鑒定色譜分析，見圖4。
[0028] 對荷瘤裸鼠（NCI-H1299)進(jìn)行PET/CT顯像實(shí)驗(yàn) 材料：人非小細(xì)胞肺癌NCI-H1299荷瘤裸鼠；其中人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株購自中科院 上海細(xì)胞所，本實(shí)驗(yàn)室通過體外細(xì)胞培養(yǎng)、胰酶處理后，于裸鼠前腋皮下接種，得到人非小 細(xì)胞肺癌NCI-H1299荷瘤裸鼠模型。
[0029]顯像劑：lsF-FP-Arg以及對比用 1SF-FDG。
[0030] 荷瘤裸鼠腹腔注射0. 2ml5%水合氯醛，顯像劑包括lsF-FP-Arg和1SF-FDG分別溶 解在適當(dāng)?shù)纳睇}水中，向荷瘤裸鼠尾靜脈注射3. 7-7. 4MBq(0. 1~0. 2mCi)的顯像劑，將 裸鼠置于PET上，分別于30min、60min、90min、120mim對荷瘤裸鼠（NCI-H1299)進(jìn)行PET/ CT的全身掃描，PET圖像和CT圖像自行融合，記錄橫斷面、冠狀面、全身三維斷層圖像、MIP (maxmium-intensityprojection)圖像以及SUV值。通過觀察腫瘤與其他組織放射性吸收 的強(qiáng)度，評價(jià)顯像劑的效果。結(jié)果見圖5,其中紅色箭頭是腫瘤的位置。
[0031] 從圖5顯像結(jié)果可知，顯像劑，(2-lsF_氟丙酰基）-Z-精氨酸主要集中在肺腫 瘤處，隨著時(shí)間的推移(包括30min、60min、90min、120min)，腫瘤中的放射活性比較好，腎 臟和肝臟中對顯像劑有中度攝取，而在腦部與肌肉的攝取比較低；通過對顯影圖的分析得 知：顯影劑lsF-FP-Arg在腫瘤與肌肉的放射活性比值大于2倍，最高達(dá)2. 71倍；而顯影劑 lsF-FP-Arg在腫瘤與腦部的放射活性比值在2. 8~3. 1倍之間。顯像劑lsF-FP-Arg隨著時(shí) 間的增長，與腫瘤部位的氨基酸受體結(jié)合的越來越多，其中90min~120min時(shí)，由于藥物在 腎臟和肝臟中被大部分代謝，顯像劑lsF-FP-Arg在腫瘤的濃聚最高。
[0032] 從顯影圖5中還可以看出，顯影劑f(2-18F_氣丙酰基）-Z-精氨酸在血、心、肺、 肝、胰、腎、脾、骨的分布較少，隨著時(shí)間的推移，分布越來越少，基本可以忽略不計(jì)，顯示出 良好的特異性和穩(wěn)定性。
[0033] 而圖5中對人非小細(xì)胞肺癌NCI-H1299荷瘤裸鼠注射1SF-FDG后60min的顯像圖 中，可以看出顯像劑1SF-FDG主要蓄積在腫瘤和腦部等位置，其中腫瘤與腦部的放射活性比 值約為0. 96倍，顯影劑1SF-FDG在腦部的攝取會影響其對腫瘤攝取的區(qū)分，造成假陽性。
[0034] 圖6為lsF-FP-Arg在荷瘤裸鼠（NCI-H1299)各部分放射性分析柱狀圖，是對圖5 結(jié)果的進(jìn)一步說明，其中A部分是PET/CT顯像實(shí)驗(yàn)中顯像劑lsF-FP-Arg隨著時(shí)間的推移在 人非小細(xì)胞肺癌NCI-H1299荷瘤裸鼠中的腫瘤/肌肉/大腦/肝臟中的放射活性（％ID/g) 分析，B部分為人非小細(xì)胞肺癌NCI-H1299荷瘤裸鼠中上述幾部分顯影劑放射性的比值。
[0035] 本發(fā)明用輔助基團(tuán)標(biāo)記精氨酸制備得到，(2-lsF_氟丙?；?Z-精氨酸，該顯像 劑在人非小細(xì)胞肺癌荷瘤裸鼠模型中對非小細(xì)胞肺癌具有較好的靶向性，腦部與肌肉的攝 取比較低，具有良好的安全性和穩(wěn)定性。因此本發(fā)明的lsF-FP-Arg顯像劑未來可能成為較 好的肺癌顯像劑。此外，因?yàn)閘sF-FP-Arg顯像劑在荷瘤裸鼠（NCI-H1299)大腦中的攝取不 高，未來有可能成為較好的特異性腦癌顯影劑，以及肝臟和腎臟外各種其他癌癥的顯像劑。
[0036] 對荷瘤裸鼠（SPC-A-1)進(jìn)行PET/CT顯像實(shí)驗(yàn) 材料：人肺腺癌SPC-A-1荷瘤裸鼠；其中人肺腺癌細(xì)胞株購自中科院上海細(xì)胞所，本實(shí) 驗(yàn)室通過體外細(xì)胞培養(yǎng)、胰酶處理后，于裸鼠前腋皮下接種，得到人肺腺癌SPC-A-1荷瘤裸 鼠模型。
[0037]顯像劑：lsF-FP-Arg以及對比用 1SF-FDG。
[0038] 荷瘤裸鼠腹腔注射0. 2ml5%水合氯醛，顯像劑包括lsF-FP-Arg和1SF-FDG分別 溶解在適當(dāng)?shù)纳睇}水中，向荷瘤裸鼠尾靜脈注射3. 7-7. 4MBq(0. 1~0. 2mCi)的顯像 劑，將裸鼠置于PET上，分別于30min、60min、90min、120mim對荷瘤裸鼠（SPC-A-1)進(jìn)行 PET-CT的全身掃描，PET圖像和CT圖像自行融合，記錄橫斷面、冠狀面、全身三維斷層圖像、 MIP(maxmium-intensityprojection)圖像以及SUV值。通過觀察腫瘤與其他組織放射性 吸收的強(qiáng)度，評價(jià)顯像劑的效果。結(jié)果見圖7,其中紅色箭頭是腫瘤的位置。
[0039] 從圖7顯像結(jié)果可知，顯像劑在SPC-A-1腫瘤的顯像隨著時(shí)間的推移（30min、 6〇1^11、9〇111111、12〇111111)，分別為2.69、3.61、4.23、4.76%10/^，也就是說隨著時(shí)間的增長， 顯像劑與腫瘤部位的氨基酸受體結(jié)合的越來越多，其中90min~120min時(shí)，由于藥物在腎 臟和肝臟中被大部分代謝，顯像劑lsF-FP-Arg在腫瘤的濃聚最高。此時(shí)，腫瘤與肌肉的放 射活性比值大于2倍（2.31~2.63倍)，腫瘤與腦部的放射活性比值約為2倍（1.7~2. 2 倍)。
[0040] 圖7中對人肺腺癌SPC-A-1荷瘤裸鼠注射1SF-FDG后60min的顯像圖中，可以看出 顯像劑1SF-FDG主要蓄積在腫瘤和腦部等位置，其中腫瘤與腦部的放射活性比值約為0. 67 倍，顯影劑1SF-FDG在腦部的攝取會影響其對腫瘤攝取的區(qū)分，造成假陽性。
[0041] 本發(fā)明用輔助基團(tuán)標(biāo)記精氨酸制備得到，(2-lsF_氟丙?；?Z-精氨酸，該顯像 劑在人肺腺癌荷瘤裸鼠模型中對人肺腺癌具有較好的靶向性，腦部與肌肉的攝取比較低。 因此本發(fā)明的lsF-FP-Arg顯像劑未來可能成為較好的肺癌顯像劑以及肝臟和腎臟外各種 其他癌癥的顯像劑。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于PET/CT的顯像劑，其特征在于，顯像劑為，(2-lsF-氟丙?；?Z-精氨酸， 其結(jié)構(gòu)式為2. -種用于肺癌的鑒別診斷和療效監(jiān)測中的顯像劑，其特征在于：顯像劑如權(quán)利要求 1所述。3. -種PET/CT用顯像劑的制備方法，其特征在于：顯影劑A(2-1SF-氟丙?；?Z-精 氨酸是由輔助基團(tuán)4-硝基苯-2-lsF-丙酸酯與Z-精氨酸乙酯鹽酸鹽進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，并進(jìn) 一步水解制備得到。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述酰胺化反應(yīng)中所使用的溶劑為 二甲基亞砜。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于：所述酰胺化反應(yīng)中需加入N，N-二異 丙基乙胺提供堿性環(huán)境。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于：酰胺化反應(yīng)條件為40°C反應(yīng)9~12 min〇
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于PET/CT的顯像劑。所述顯像劑為<i>N</i>-(2-18F-氟丙?；?-<i>L</i>-精氨酸，它是由輔助基團(tuán)4-硝基苯-2-18F-丙酸酯與<i>L</i>-精氨酸乙酯鹽酸鹽進(jìn)行酰胺化反應(yīng)，并進(jìn)一步水解制備得到。本發(fā)明的顯像劑在人肺癌荷瘤裸鼠模型中對肺癌具有較好的靶向性，在腦部與肌肉的攝取比較低，具有良好的安全性和穩(wěn)定性；且顯像效果優(yōu)于18F-FDG，顯像維持時(shí)間長。因此本發(fā)明的18F-FP-Arg顯像劑未來可能成為較好的肺癌顯像劑以及肝臟和腎臟外各種其他癌癥的顯像劑。
【IPC分類】C07C279/14, A61K51/04, A61K101/02, C07C277/08
【公開號】CN105214105
【申請?zhí)枴緾N201510451352
【發(fā)明人】臧林泉, 高思遠(yuǎn)
【申請人】廣東藥學(xué)院
【公開日】2016年1月6日
【申請日】2015年7月28日