Sns-032在抑制胰腺癌細(xì)胞增殖中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明屬于生物制藥領(lǐng)域，具體涉及SNS-032在抑制胰腺癌細(xì)胞增殖中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002]胰腺癌是惡性程度很高的消化系統(tǒng)腫瘤，近年來其發(fā)病率在我國呈現(xiàn)逐年升高的趨勢。胰腺癌臨床表現(xiàn)隱匿，發(fā)展迅速，具有高度侵襲性，預(yù)后極差。近幾十年來，國內(nèi)外學(xué)者利用不斷提高的外科手術(shù)技能和現(xiàn)代醫(yī)療手段，不斷擴(kuò)大手術(shù)切除范圍和加大淋巴結(jié)清除的徹底性，以期達(dá)到根治的目的。盡管胰腺癌的切除率有所提高，但5年生存期仍低于3%，主要原因是大多數(shù)胰腺癌難以早期發(fā)現(xiàn)，確診時(shí)多數(shù)已屬中晚期，失去了根治性手術(shù)切除的最佳時(shí)機(jī)。同時(shí)對(duì)化療、放療等綜合治療的敏感性較差也是導(dǎo)致胰腺癌患者高死亡率的重要因素。因此，發(fā)展新型安全有效的治療方法以提高胰腺癌患者生存期具有非常重要的意義。
[0003]溶瘤腺病毒(Oncolytic Adenovirus)是近年來發(fā)展起來的一種腫瘤治療新方法，其優(yōu)點(diǎn)在于能特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞，而對(duì)正常組織細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生影響。2005年，溶瘤腺病毒HlOl在國內(nèi)獲得治療頭頸部腫瘤的上市批準(zhǔn)，從而使中國成為世界上首個(gè)批準(zhǔn)將溶瘤腺病毒正式用于腫瘤臨床治療的國家。然而，盡管在體外實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中取得了令人振奮的結(jié)果，在臨床研究中，大多數(shù)溶瘤腺病毒的療效卻不理想。原因是多方面的，包括腫瘤、微環(huán)境、病毒和宿主免疫反應(yīng)及其之間的交互作用。因此，設(shè)計(jì)安全有效的藥物組合方案，提高溶瘤腺病毒抗胰腺癌的作用效應(yīng)，是當(dāng)前亟待解決的問題。
[0004]細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(cyclin-dependent-kinase，Q)K)是參與細(xì)胞周期調(diào)控和基因轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵分子之一。CDK是一組絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，包括⑶K2、CDK4、⑶Κ6、CDK7和CDK9等一系列重要的細(xì)胞周期調(diào)控蛋白，該酶通過與細(xì)胞周期蛋白相結(jié)合產(chǎn)生活性，促進(jìn)細(xì)胞周期中Gl期到S期和G2期到M期的轉(zhuǎn)變，是細(xì)胞周期啟動(dòng)、形成和結(jié)束的主導(dǎo)力量。由于CDK在調(diào)控惡性腫瘤細(xì)胞的增殖與凋亡中起關(guān)鍵性作用，理論上來講，對(duì)其進(jìn)行抑制可導(dǎo)致肺瘤細(xì)胞的增殖受到抑制，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡。與正常細(xì)胞不一樣，肺瘤細(xì)胞中常有活性異常，因此可以作為惡性腫瘤治療的新點(diǎn)。細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK)在調(diào)控細(xì)胞周期和基因轉(zhuǎn)錄中起重要作用，胰腺癌常有⑶K活性異常增高，因此⑶K抑制劑可能在治療胰腺癌中發(fā)揮重要作用。SNS-032是一種新型選擇性⑶K2抑制劑，可抑制調(diào)控RNA轉(zhuǎn)錄的⑶K2，同時(shí)抑制⑶K7和CDK9的活性。已有研究表明SNS-032對(duì)多種惡性腫瘤有顯著抗腫瘤作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為了更好的治愈胰腺癌，提高患者的預(yù)后或者生活質(zhì)量，本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過大量、堅(jiān)持不懈的篩選，發(fā)現(xiàn)SNS-032與其他活性成分的組合對(duì)胰腺癌或胰腺癌細(xì)胞的增殖具有協(xié)同的治療或者抑制作用，進(jìn)而為治療胰腺癌或抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖提供了新的療法或手段。
[0006]本發(fā)明采用SNS-032和ZD55-TIS聯(lián)合抑制胰腺癌細(xì)胞增殖作用影響進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示在(I?16)M0I ZD55-TIS:(5?80)ng/ml SNS-032的選定劑量范圍內(nèi)，兩者聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同抑制骨髓瘤細(xì)胞增殖的作用，隨著作用濃度的增高，協(xié)同抑制胰腺癌細(xì)胞增殖的作用逐漸增強(qiáng)。
[0007]本發(fā)明對(duì)ZD55-TIS和SNS-032聯(lián)合應(yīng)用藥物組合抑制胰腺癌增殖進(jìn)行相關(guān)作用機(jī)理研究，結(jié)果顯示該組合藥物能顯著抑制胰腺癌細(xì)胞BxPC-3抗凋亡蛋白Mcl-1、XIAP和Bcl-2的表達(dá)水平，上調(diào)線粒體凋亡通路標(biāo)記蛋白剪切型Caspase 9(半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9)、Caspase 3(半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9)和PARP的表達(dá)水平。因此，ZD55-TIS和SNS-032組合物能有效誘導(dǎo)胰腺癌線粒體凋亡發(fā)生，在制備抑制胰腺癌增殖藥物中具有廣闊的應(yīng)用開發(fā)前途。
[0008]本發(fā)明所述的ZD55-TIS(WangSB,Tan Y,Lei ff,ffang YG,Zhou XM,Jia XY,LiuXY,Qian WB.Complete eradicat1n of xenograft hepatoma by oncolytic adenovirusZD55harboring TRAIL-1ETD-Smac gene with broad antitumor effect.Hum GeneTher.2012;23(9):992-1002.)為同時(shí)攜帶抗癌基因TRAIL和Smac的復(fù)制型溶瘤腺病毒，具有腫瘤復(fù)制特異性，并對(duì)正常細(xì)胞無毒性。ZD55-TIS和SNS-032結(jié)構(gòu)式或基因組結(jié)構(gòu)見圖5。
[0009]本發(fā)明首先提供了SNS-032在制備用于在受試者中治療胰腺癌或抑制胰腺癌細(xì)胞增殖的藥物組合物或藥盒中的用途，其中所述藥物組合物或藥盒含有ZD55-TIS和SNS-032，任選地，所述藥物組合物或藥盒還含有用于治療胰腺癌或抑制胰腺癌細(xì)胞增殖的其他藥物活性成分，例如吉西他濱、普樂沙福(AMD3100)或紫杉醇等。任選地，所述的藥物組合物或藥盒中的ZD55-TIS和SNS-032分別在分開的容器中存放或者ZD55-TIS和SNS-032在同一容器中存放。
[0010]本發(fā)明還提供了SNS-032在制備用于在受試者中上調(diào)胰腺癌細(xì)胞中的剪切型caspase3、caspase9和PARP的表達(dá)水平的藥物組合物或藥盒中的用途，其中所述藥物組合物或藥盒含有ZD55-TIS和SNS-032，任選地，所述藥物組合物或藥盒還含有用于治療胰腺癌或抑制胰腺癌細(xì)胞增殖的其他藥物活性成分，例如吉西他濱、普樂沙福(AMD3100)或紫杉醇等。任選地，所述的藥物組合物或藥盒中的ZD55-TIS和SNS-032分別在分開的容器中存放或者ZD55-TIS和SNS-032在同一容器中存放。
[0011]本發(fā)明還提供了SNS-032在制備用于在受試者中下調(diào)胰腺癌細(xì)胞中的抑凋亡蛋白Mcl-1、XIAP和Bcl-2的蛋白表達(dá)水平的藥物組合物或藥盒中的用途，其中所述藥物組合物或藥盒含有ZD55-TIS和SNS-032，任選地，所述藥物組合物或藥盒還含有用于治療胰腺癌或抑制胰腺癌細(xì)胞增殖的其他藥物活性成分，例如吉西他濱、普樂沙福(AMD3100)或紫杉醇等。任選地，所述的藥物組合物或藥盒中的ZD55-TIS和SNS-032分別在分開的容器中存放或者ZD55-TIS和SNS-032在同一容器中存放。
[0012]本發(fā)明提供了在受試者中治療胰腺癌或抑制胰腺癌細(xì)胞增殖的方法，其包括向所述受試者同時(shí)或依次施用SNS-032和ZD55-TIS。任選地，在本發(fā)明的方法中，可以同時(shí)或者依次施用其他的治療胰腺癌或抑制胰腺癌細(xì)胞增殖的藥物活性成分，例如吉西他濱、普樂沙福(AMD3100)或紫杉醇等。
[0013]對(duì)于本發(fā)明所述的受試者，其優(yōu)選為哺乳動(dòng)物，更優(yōu)選為人。
[0014]對(duì)于本發(fā)明的SNS-032和ZD55-TIS，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)其作出任何修飾，前體是所述修飾不負(fù)面影響其活性。例如，可以對(duì)化合物進(jìn)行修飾或裝載在其他載體上，以提高其在體內(nèi)的半衰期;或者可以與已知的穿透肽連接，以促進(jìn)本發(fā)明化合物的透皮吸收或者越過血腦屏障等?？傊?，本領(lǐng)域技術(shù)人員可對(duì)本發(fā)明的化合物進(jìn)行各種修飾以提高遞送效率或用于其他目的并保持其活性。對(duì)于病毒的修飾，例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以進(jìn)行基因修飾，以使其表達(dá)其他的抵抗癌癥的活性成分。這類修飾也是在本發(fā)明的范圍之內(nèi)的。
[0015]本發(fā)明的作為活性成分的SNS-032和ZD55-TIS可以連同藥學(xué)上可接受的載體一起使用。除活性成分外，本發(fā)明的方法、用途和產(chǎn)品還可以包含合適的藥學(xué)上可接受的載體，包括促進(jìn)活性成分加工成制劑(例如適于注射或輸注的制劑)的賦形劑和助劑。
[0016]適于注射或輸注的制劑可包括水性和非水性無菌注射液和水性和非水性無菌混懸劑，所述無菌注射液可任選地包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和能使制劑與目的接收者的血液等壓的溶質(zhì)，所述無菌混懸劑可包括懸浮劑和增稠劑。所述制劑可存在于單位劑量或多劑量容器中，例如密封的安瓿，并且可以保存在凍結(jié)干燥的(凍干)條件，在立即使用前僅需要加入無菌液體載體，例如注射用水。
[0017]本發(fā)明的活性成分任選地可與固體賦形劑相組合，且任選地磨碎所得到的混合物，并且需要時(shí)，在加入合適的助劑后，加工顆粒的混合物，以獲得所需劑型。合適的賦形劑特別是填充劑例如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇;纖維素或淀粉制劑、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。需要時(shí)，可以加入崩解劑，例如交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或海藻酸或其鹽例如海藻酸鈉。
[0018]在本發(fā)明中施用SNS-032和ZD55-TIS的量可為能協(xié)同治療受試者中胰腺癌或抑制胰腺癌細(xì)胞增殖的任何量，其可以是相當(dāng)于約0.l-15mg SNS-032，優(yōu)選0.0l-20mg SNS-032和1-100M0IZD55-TIS的劑量。更優(yōu)選地，劑量單位包括約l-4mg的SNS-032和5-80M0IZD55-TIS。最優(yōu)選地，劑量單位包括約2-3mg的SNS-032和10-60M0IZD55-TIS。有效量的測定在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力內(nèi)，特別是根據(jù)本文提供的公開內(nèi)容的啟示下。
[0019]根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的藥學(xué)產(chǎn)品(藥物、藥劑)或藥物組合物可以以任意有效劑量施用給藥受試者。優(yōu)選地，本發(fā)明的藥學(xué)產(chǎn)品(藥物、藥劑或藥盒)或藥物組合物可以以多次劑量給藥，例如從約2至約15次劑量，更優(yōu)選從約4-10次劑量，最優(yōu)選約6次劑量。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案，在給藥過程中，以每三周給藥約一次的頻率將本發(fā)明的藥學(xué)產(chǎn)品(藥物、藥劑)或藥物組合物給藥至受試者，例如注射、輸注或口服。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案，給藥為通過靜脈注射施用SNS-032，通過腹腔注射ZD55-TIS。
[0020]應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明的藥學(xué)產(chǎn)品(藥物、藥劑或藥盒)或藥物組合物可以按用于通過任意適宜的途徑給藥的任意適宜的方式配制。
[0021]本發(fā)明的藥學(xué)產(chǎn)品(藥物、藥劑)或藥物組合物的劑量單位是基于常規(guī)進(jìn)行給藥受試者。例如，劑量單位可以給藥多于每日一次、每周一次、每月一次等。劑量單位可以是以兩次/周為基礎(chǔ)給藥，即每周兩次，例如每三天一次。
[0022]如本文所使用的，“包含”與“包括”、“含有”或“特征在于”同義，并且是包括在內(nèi)的或開放性的，并且不排除另外的未陳述的元件或方法步驟。術(shù)語“包含”在本文中的任何表述，特別是在描述本發(fā)明的方法、用途或產(chǎn)品時(shí)，應(yīng)理解為包括基本上由所述組分或元件或步驟組成和由所述組分或元件或步驟組成的那些產(chǎn)品、方法和用途。本文示例性描述的本發(fā)明適當(dāng)?shù)乜梢栽诓淮嬖诒疚奈淳唧w公開的任何一種或多種元件、一種或多種限制的情況下進(jìn)行實(shí)踐。
[0023]本發(fā)明的藥學(xué)產(chǎn)品(例如藥物組合物或藥盒)中可包含涉及該藥學(xué)產(chǎn)品的說明書，且該說明書可以含有如下內(nèi)容:適應(yīng)癥(例如胰腺癌)、施用劑量(例如上述所示例性說明的)以