六味石榴片在制備抑制B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞Daudi細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種六味石榴片在制備抑制B淋巴細(xì)胞瘤細(xì) 胞Daudi細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用及六味石榴片的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 六味石榴膠囊標(biāo)準(zhǔn)號(hào)WS-10474(ZD-0474)-2002,記載于國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編外科 婦科分冊。由石榴子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒45g、紅花45g、大托葉云實(shí)45g作為原料 藥制成，具有溫腎，噯腰膝的功效。用于婦女白帶病。
[0003] 現(xiàn)有技術(shù)中，尚未有六味石榴片在在制備抑制人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞Daudi細(xì)胞增殖 藥物中的應(yīng)用的報(bào)道，也未見有六味石榴片提取制備方面采用超臨界萃取的報(bào)道，而傳統(tǒng) 粉碎的方法，工藝粗糙、落后，雜質(zhì)多，導(dǎo)致患者用量過大，不方便服用，嚴(yán)重影響了本品在 臨床上應(yīng)用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 發(fā)明目的：本發(fā)明的目的在于提供一種六味石榴片在制備抑制B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞 Daudi細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種六味石榴片的制備方法。
[0006] 本發(fā)明的目的是通過如下的方案實(shí)現(xiàn)的： 六味石榴片在制備抑制B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞Daudi細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用，所述六味石榴 片由石植子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒45g、紅花45g、大托葉云實(shí)45g作為原料藥制成， 所述六味石榴片的制備方法包括如下步驟:取石榴子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒45g、紅 花45g、大托葉云實(shí)45g，加入到C〇2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑 的體積百分比為4-6%，萃取壓力15-30MPa，溫度30-50°C，C〇2流量l_3ml/g生藥· min，萃取 時(shí)間300-400min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制膠囊，干燥，壓片， 制成500片，每片重0.30g。
[0007] 優(yōu)選的，上述的六味石榴片在制備抑制B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞Daudi細(xì)胞增殖藥物中的 應(yīng)用，所述六味石榴片的制備方法包括如下步驟:取石榴子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒 45g、紅花45g、大托葉云實(shí)45g，加入到⑶2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃 取溶劑的體積百分比為5%，萃取壓力25MPa，溫度40°C，C0 2流量2ml/g生藥· min，萃取時(shí)間 350min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制膠囊，干燥，壓片，制成500 片，每片重0.30g。
[0008] 現(xiàn)有技術(shù)中，六味石榴膠囊口服，一次5粒，一日3次。六味石榴膠囊服藥量大。采用 本發(fā)明方法制備成的六味石榴片每片重0.30g，每次僅需1片，一日服用3次。在具有更多活 性成分的條件下大大減少了服用量。此結(jié)論可以通過下述試驗(yàn)證明。
[0009] 試驗(yàn)一、不同方法制備的六味石榴片中胡椒堿含量的比較 1、儀器及試藥本發(fā)明六味石榴片:按實(shí)施例1方法制備，使用315g原料藥，經(jīng)提取制成 500片，每片重0.30g。原六味石榴膠囊，按照WS-10474(ZD-0474)-2002標(biāo)準(zhǔn)方法制備。 Agi 1 ent 1200高效液相色譜儀;METTLERAE240電子分析天平；胡椒堿對照品（中國藥品生物 制品檢定所）。
[0010] 2、方法 照高效液相色譜法(中國藥典2015年版第四部凡例十五)測定。
[0011]色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水(77: 23)為流動(dòng)相;檢測波長為343nm。理論板數(shù)按胡椒堿峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。
[0012] 對照品溶液的制備精密稱取胡椒堿對照品適量，置棕色量瓶中，加無水乙醇制成 每lml含20此的溶液，即得。
[0013] 本發(fā)明的六味石榴片的供試品溶液的制備取本發(fā)明的六味石榴片6g，混勻，取 0.12g，精密稱定，置50ml棕色量瓶中，加無水乙醇40ml，超聲處理30分鐘，放冷，加無水乙醇 稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
[0014] 對照產(chǎn)品供試品溶液的制備取對照六味石榴膠囊6g，混勻，取0.3g，精密稱定，置 50ml棕色量瓶中，加無水乙醇40ml，超聲處理30分鐘，放冷，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻， 濾過，取續(xù)濾液，即得。
[0015] 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測定， 即得。
[0016] 3、結(jié)果 結(jié)果表明，本發(fā)明六味石植片中胡椒堿的含量為4.10-8.05mg/片;而原六味石植膠囊 中胡椒堿的含量為〇.81mg/粒，每次服用量2片的胡椒堿含量為原膠囊劑5粒含量的2-4倍， 在服用量減少的情況下，胡椒堿含量有很大提高。
[0017] 上述研究表明，采用本發(fā)明制備方法制備的六味石榴片，有效成分含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于 WS-10474(ZD-0474)-2002標(biāo)準(zhǔn)記載的方法制備的六味石榴膠囊。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作更進(jìn)一步的說明，以便本領(lǐng)域的技術(shù)人員更了解 本發(fā)明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例，凡基于本發(fā)明上述 內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
[0019] 實(shí)施例1 取石榴子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒45g、紅花45g、大托葉云實(shí)45g，加入到C02超臨 界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%，萃取壓力25MPa，溫 度40°C，C02流量2ml/g生藥· min，萃取時(shí)間350min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入 淀粉，70%乙醇制膠囊，干燥，壓片，制成500片，每片重0.30g。
[0020] 經(jīng)檢測，成品中胡椒堿的含量為8.05mg/片。
[0021] 實(shí)施例2 取石榴子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒45g、紅花45g、大托葉云實(shí)45g，加入到C02超臨 界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4%，萃取壓力15MPa，溫 度30°C，C02流量lml/g生藥· min，萃取時(shí)間300min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入 淀粉，70%乙醇制膠囊，干燥，壓片，制成500片，每片重0.30g。
[0022] 經(jīng)檢測，成品中胡椒堿的含量為4.15mg/片。
[0023] 實(shí)施例3 取石榴子90g、肉桂45g、肉豆蔻45g、胡椒45g、紅花45g、大托葉云實(shí)45g，加入到C02超臨 界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為6%，萃取壓力30MPa，溫 度60°C，C02流量3ml/g生藥· min，萃取時(shí)間400min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入 淀粉，70%乙醇制膠囊，干燥，壓片，制成500片，每片重0.30g。
[0024]