Cbp/ep300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑用于癌癥免疫療法的用圖
【專利摘要】本發(fā)明涉及CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑用于治療癌癥的用途。
【專利說(shuō)明】
CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑用于癌癥免疫療法的用途
[0001] 相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002] 本申請(qǐng)要求2013年10月11日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)系列號(hào)61/890,041的權(quán)益和優(yōu) 先權(quán)，通過(guò)引用的方式將其整體并入。
[0003] 序列表
[0004] 本申請(qǐng)包含已以ASCII形式電子提交的序列表且通過(guò)引用的方式將其整體并入。 所述2014年10月10日生成的ASCII拷貝命名為01075.004W01_SL.txt且大小為53,084字節(jié)。
技術(shù)領(lǐng)域
[0005] 本申請(qǐng)涉及CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑用于治療癌癥的用途。
[0006] 背景
[0007] 染色質(zhì)是組成染色體的DNA和蛋白的復(fù)雜組合。已發(fā)現(xiàn)其在真核細(xì)胞核內(nèi)且分為 異染色質(zhì)（聚集)和常染色質(zhì)（伸展)形式。染色質(zhì)的主要組分為DNA和蛋白。組蛋白是染色質(zhì) 的主要蛋白組分，其作為DNA纏繞在其周圍的卷軸發(fā)揮作用。染色質(zhì)的功能是將DNA包裝成 為較小體積來(lái)適合細(xì)胞、強(qiáng)化DNA以允許有絲分裂和減數(shù)分裂并作為控制表達(dá)和DNA復(fù)制的 機(jī)制發(fā)揮作用。染色質(zhì)結(jié)構(gòu)通過(guò)對(duì)組蛋白的一系列翻譯后修飾控制，特別是組蛋白H3和H4， 且大多在延伸超過(guò)核心核小體結(jié)構(gòu)的〃組蛋白尾〃內(nèi)。組蛋白尾傾向于無(wú)蛋白-蛋白相互作 用且也是組蛋白最易于發(fā)生翻譯后修飾的部分。這些修飾包括乙?；?、甲基化、磷酸化、泛 素化、SUMO化。這些表觀遺傳標(biāo)志物通過(guò)將標(biāo)簽置于組蛋白尾內(nèi)特定殘基上的特定酶寫入 和清除，由此形成表觀遺傳密碼，其隨后由細(xì)胞解讀以允許對(duì)染色質(zhì)進(jìn)行基因特異性調(diào)節(jié) 并由此進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。
[0008] 對(duì)于全部種類的蛋白，組蛋白是對(duì)翻譯后修飾最敏感的蛋白。組蛋白修飾是動(dòng)態(tài) 的，這是由于其可響應(yīng)特定刺激進(jìn)行添加或去除，且這些修飾指導(dǎo)染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化以及 在基因轉(zhuǎn)錄中的改變。不同種類的酶即組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白脫乙酰酶(HDAC) 乙?；蛎撘阴；囟ǖ慕M蛋白賴氨酸殘基（Struhl K. ,Genes Dev.，1989，12,5,599-606) 〇
[0009] 組蛋白的共價(jià)修飾是控制基因表達(dá)的根本機(jī)制，且為真核細(xì)胞中起作用的主要表 觀遺傳機(jī)制之一 (Kouzarides ,Cell, 128,693-705(2007))。由于不同的轉(zhuǎn)錄狀態(tài)限定根本 的細(xì)胞過(guò)程，諸如細(xì)胞類型特異化、譜系承擔(dān)、細(xì)胞活化和細(xì)胞死亡，因此其異常調(diào)節(jié)是一 系列疾病的核心（Medzhitov等人，Nat · Rev · Immunol ·，9，692-703(2009);PorteIa等人， Nat.Biotech.，28,1057-1068(2010))?；虮磉_(dá)表觀遺傳控制的根本部分是通過(guò)含有與這 種修飾結(jié)合的特定基序的蛋白對(duì)組蛋白修飾進(jìn)行解讀。其中，布羅莫結(jié)構(gòu)域演變?yōu)榕c乙酰 化組蛋白結(jié)合且由此其表示染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因轉(zhuǎn)錄間的根本連接(Fi Ilipakoppoulos等 人，Cell ,149,214-231 (2012))。
[0010] 約110個(gè)氨基酸長(zhǎng)的布羅莫結(jié)構(gòu)域發(fā)現(xiàn)于大量的染色質(zhì)-相關(guān)蛋白中且已在約70 個(gè)人蛋白中得以識(shí)別，其經(jīng)常鄰近其他蛋白基序（Jeanmougin F.，等人，Trends Biochem. Sci. ,1997,22,5,151-153;和Tamkun J.W·，等人，Cell ,1992,7,3,561-572)。布羅 莫結(jié)構(gòu)域和修飾的組蛋白間的相互作用可能是染色質(zhì)結(jié)構(gòu)改變和基因調(diào)節(jié)下的重要機(jī)制。 包含布羅莫結(jié)構(gòu)域的蛋白已牽涉包括癌癥、炎癥和病毒復(fù)制的疾病過(guò)程。參見例如Prinjha 等人，Trends Pharm. Sci · ,33(3): 146-153(2012)和MulIer等人，Expert Rev.，13(29): 1-20(2011 年9月）。
[0011]細(xì)胞類型特異性和適當(dāng)?shù)慕M織功能性需要受環(huán)境密切影響的不同轉(zhuǎn)錄程序的嚴(yán) 密控制。該轉(zhuǎn)錄動(dòng)態(tài)平衡的改變直接與多種疾病狀態(tài)相關(guān)，尤其是癌癥、免疫炎癥、神經(jīng)系 統(tǒng)病癥和代謝性疾病。布羅莫結(jié)構(gòu)域位于發(fā)揮控制不同疾病相關(guān)轉(zhuǎn)錄通路功能的核心染色 質(zhì)修飾復(fù)合物中。其通過(guò)包含布羅莫結(jié)構(gòu)域的蛋白中的突變與癌癥以及免疫和神經(jīng)系統(tǒng)功 能異常相關(guān)而凸顯。因此，貫穿該家族對(duì)布羅莫結(jié)構(gòu)域的選擇性抑制將創(chuàng)造作為人功能異 常的新型治療劑的各種機(jī)會(huì)。
[0012]對(duì)于癌癥、免疫學(xué)病癥和其他布羅莫結(jié)構(gòu)域相關(guān)疾病的治療存在需求。
[0013] 發(fā)明概述
[0014]本發(fā)明一方面是用于在動(dòng)物中治療癌癥的方法，其包括施用有效量的CBP/EP300 布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑至動(dòng)物。
[0015] 本發(fā)明的另一方面是在個(gè)體中用于治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的方法，其包括施用 有效量的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑至所述個(gè)體。
[0016] 本發(fā)明的一方面是在患有癌癥的個(gè)體中增強(qiáng)免疫功能的方法，其包括施用有效量 的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑。
[0017]在一些實(shí)施方案中，個(gè)體中的⑶8 T細(xì)胞相對(duì)施用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑 前具有增強(qiáng)的致敏、活化、增殖和/或細(xì)胞殺傷活性。
[0018] 在一些實(shí)施方案中，⑶8 T細(xì)胞的數(shù)目相對(duì)施用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑前 有所升高。
[0019] 在一些實(shí)施方案中，所述⑶8 T細(xì)胞是抗原特異性⑶8 T細(xì)胞。
[0020] 在一些實(shí)施方案中，所述癌癥具有升高的T-細(xì)胞浸潤(rùn)水平。
[0021 ]在一些實(shí)施方案中，所述癌癥與增加的腫瘤內(nèi)Treg細(xì)胞密度相關(guān)。
[0022]在一些實(shí)施方案中，所述癌癥選自下組：聽神經(jīng)瘤、急性白血病、急性淋巴細(xì)胞性 白血病、急性髓細(xì)胞性白血病、急性T-細(xì)胞白血病、基底細(xì)胞癌、膽管癌、膀胱癌、腦癌、乳腺 癌、支氣管癌、子宮頸癌、軟骨肉瘤、脊索瘤、絨毛膜癌、慢性白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、 慢性髓細(xì)胞性白血病、慢性骨髓性白血病、結(jié)腸癌、結(jié)腸直腸癌、顱咽管瘤、囊腺癌、彌漫性 大B細(xì)胞淋巴瘤、不良增生性改變、胚胎性癌、子宮內(nèi)膜癌、內(nèi)皮性肉瘤、室管膜瘤、上皮癌、 紅白血病、食道癌、雌激素受體陽(yáng)性乳腺癌、原發(fā)性血小板增多癥、尤因氏瘤（Ewing's tumor)、纖維肉瘤、濾泡型淋巴瘤、生殖細(xì)胞睪丸癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、膠質(zhì)肉瘤、 重鏈病、頭頸癌、成血管細(xì)胞瘤、肝癌、肝細(xì)胞癌、激素不敏感性前列腺癌、平滑肌肉瘤、白血 病、脂肪肉瘤、肺癌、淋巴管內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、成淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤、T-細(xì)胞或B-細(xì)胞來(lái)源的淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤、髓樣癌、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、黑素瘤、腦膜瘤、間皮瘤、多發(fā)性 骨髓瘤、髓細(xì)胞性白血病、骨髓瘤、粘液肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、NUT中線癌(NMC)、非小細(xì)胞肺 癌(NSCLC)、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、口腔癌、骨源性肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳頭狀腺癌、乳頭狀癌、 松果體瘤、真性紅細(xì)胞增多癥、前列腺癌、直腸癌、腎細(xì)胞癌、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、 肉瘤、皮脂腺癌、精原細(xì)胞瘤、皮膚癌、小細(xì)胞肺癌、實(shí)體瘤(癌和肉瘤）、小細(xì)胞肺癌、胃癌、 鱗狀細(xì)胞癌、滑膜瘤、汗腺癌、甲狀腺癌、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血癥（Waldenstrom's
[0023] 在一些實(shí)施方案中，所述癌癥是黑素瘤、NSCLC、腎癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、肝 細(xì)胞癌或乳腺癌。
[0024] 在一些實(shí)施方案中，所述癌癥是NSCLC、卵巢癌、胰腺癌、肝細(xì)胞癌或乳腺癌。
[0025] 在一些實(shí)施方案中，所述癌癥是黑素瘤、NSCLC或腎細(xì)胞癌。
[0026] 在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑抑制CBP。
[0027] 在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑抑制EP300。
[0028]在一些實(shí)施方案中，所述方法抑制Treg功能。
[0029] 在一些實(shí)施方案中，所述方法減少⑶8+T細(xì)胞的T細(xì)胞衰竭。
[0030] 在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑不與CBP和/或EP300的 HAT結(jié)構(gòu)域結(jié)合。
[0031] 在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是人，例如女性或男性。
[0032]本發(fā)明的一方面是CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑，其用于包括療法的醫(yī)學(xué)治療 或診斷和/或治療癌癥。
[0033] 本發(fā)明的一方面是用于選擇抗癌化合物的方法，其包括確定受試化合物是否為 CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑化合物，其中將為CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑的化合物 的受試化合物選為抗癌化合物。
[0034] 在一些實(shí)施方案中，本文公開的方法進(jìn)一步包括確定受試化合物是否與CBP和/或 EP300的HAT結(jié)構(gòu)域結(jié)合，其中將不與CBP和/或EP300的HAT結(jié)構(gòu)域結(jié)合的受試化合物選為抗 癌化合物。
[0035]在一些實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括確定受試化合物是否抑制Treg功能，其 中將抑制Treg功能的受試化合物選為抗癌化合物。
[0036]在一些實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括確定受試化合物是否減少⑶8+T細(xì)胞的T 細(xì)胞衰竭，其中將減少CD8+T細(xì)胞的T細(xì)胞衰竭的受試化合物選為抗癌化合物。
[0037]在一些實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑化合物可包括式I的化合物、 其異構(gòu)體或異構(gòu)體的混合物(例如，對(duì)映異構(gòu)體)或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或前藥。 這種化合物、可用于制備該化合物的方法和中間體以及相應(yīng)的支持信息描述于 Angew.Chem. Int.Ed.，2014，v53,第1-6頁(yè)。在一些實(shí)施方案中，式I的化合物包括：
[0038]
[0039] 其中：
[0040] X 是 NH或 0;
[0041 ] m是 1 或2;
[0042] η是 1 或2;
[0043] R1獨(dú)立地選自下組:取代或非取代的C1-C6烷基、取代或非取代的C 2-6烯基、取代或 非取代的C2-6炔基和取代或非取代的C3-6碳環(huán)基；
[0044] R2獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的C1-C6烷基、取代或非取代的C 2-6烯基 和取代或非取代的C2-6炔基；
[0045] R3獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的Ci_C6烷基、取代或非取代的C2-6烯基 和取代或非取代的C2- 6炔基；
[0046] R4獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的Ci_C6烷基、取代或非取代的C2-6烯基 和取代或非取代的C2-6炔基；
[0047] R5獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的C1-C6烷基、取代或非取代的C 2 - 6烯 基、取代或非取代的C26炔基和OC1-C6烷基；
[0048] R6獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的C1-C6烷基、取代或非取代的C 2 - 6烯 基、取代或非取代的C26炔基和OC1-C6烷基；
[0049] R7獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的C1-C6烷基、取代或非取代的CV 6烯 基、取代或非取代的C26炔基和OC1-C6烷基;且
[0050] R8獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的C1-C6烷基、取代或非取代的CV 6烯 基、取代或非取代的C26炔基和OC1-C6烷基；
[0051 ]或其鹽。
[0052]在一些實(shí)施方案中，式I的化合物選自下組：
[0054] 或其鹽。
[0055] 附圖簡(jiǎn)述
[0056]圖1.未受過(guò)攻擊的人T細(xì)胞在靶向CBP/EP300的布羅莫結(jié)構(gòu)域的活性化合物或非 活性對(duì)照化合物存在下于Treg-分化環(huán)境下培養(yǎng)。如圖1所述，CBP/EP300抑制劑CBP/EP300 (1)而不是非活性化合物CBP/EP300(A)減少了生成的F0XP3+細(xì)胞數(shù)目，如通過(guò)流式細(xì)胞術(shù) 所見。
[0057]圖2.劑量響應(yīng)曲線使用來(lái)自不同化學(xué)骨架的示例性活性化合物CBP/EP300(1)和 CBP/EP300 (2)確定。這些活性化合物而不是非活性化合物CBP/EP300 (A)和CBP/EP300 (B)以 劑量依賴性方式減少了F0XP3+細(xì)胞的數(shù)目（圖2，上圖）?；罨瘶?biāo)志物CD25未受到任何化合物 處理的影響，表明這些細(xì)胞是功能性的，盡管不能分化成為Treg譜系（圖2,下圖）。
[0058]圖3.如圖3(上圖）所示，人CD8細(xì)胞與CBP/EP300(1)而不是非活性化合物的溫育導(dǎo) 致LAG3、HM3和CTLA4表達(dá)的劑量依賴性減少。使用CBP/EP300(1)抑制CBP/EP300布羅莫結(jié) 構(gòu)域未影響CD8細(xì)胞中的效應(yīng)功能，這是由于編碼穿孔蛋白、顆粒酶B和EOMES的基因在化合 物處理時(shí)未發(fā)生顯著變化(圖3，下圖）。
[0059] 圖4.如圖4所示，效應(yīng)細(xì)胞因子IFN-γ和TNFa的產(chǎn)生未受到化合物處理的影響。
[0060] 圖5.未受過(guò)攻擊的T細(xì)胞的增殖通過(guò)染料基于FACS的量化監(jiān)測(cè)。如圖5中所示，~ 50 %的未受過(guò)攻擊的T細(xì)胞能夠在Treg細(xì)胞不存下經(jīng)CD3/CD28刺激時(shí)增殖。然而，當(dāng)未受過(guò) 攻擊的T細(xì)胞與Treg細(xì)胞組合時(shí)，不足10 %能夠增殖。與CBP/EP300 (1)的溫育導(dǎo)致Treg抑制 能力的劑量依賴性抑制，如通過(guò)相應(yīng)的能夠增殖的未受過(guò)攻擊的T細(xì)胞百分比的增加所見。 非活性化合物CBP/EP300(A)無(wú)影響，證明了特異性。
[0061] 圖6.抗腫瘤免疫性的生成和調(diào)節(jié)。腫瘤細(xì)胞可規(guī)避多種免疫校驗(yàn)點(diǎn)，且本文所述 的免疫療法的目的在于使免疫系統(tǒng)再次抵抗癌細(xì)胞(參見例如Mellman等人.，Nature,480， 480(2011))。
[0062] 圖7.08?抑制劑08?/^?300(3)和08?/^?300(4)以劑量依賴性方式減少丨1'^ 8細(xì)胞 中Foxp3表達(dá)。數(shù)據(jù)顯示iTreg分化細(xì)胞中Foxp3表達(dá)與未刺激的未受過(guò)攻擊的天然T細(xì)胞中 相比的倍數(shù)變化。
[0063] 圖8.08?抑制劑08?/^?300(3)和08?/^?300(4)減少丨1>68細(xì)胞中？(《口3蛋白表達(dá)。 數(shù)據(jù)顯示刺激4天后，使用經(jīng)DMSO單獨(dú)作為對(duì)照(A)和不同濃度的CBP/EP300(4) (B)或CBP/ EP300(3) (C)處理的iTreg分化細(xì)胞的Foxp3表達(dá)的流式細(xì)胞術(shù)斑馬圖。
[0064]圖9.08?抑制劑導(dǎo)致1^3工1'1^4和1'頂3表達(dá)的劑量依賴性減少。數(shù)據(jù)顯示在經(jīng)刺 激的⑶8+T細(xì)胞中Lag3、CTLA4和??Μ3的表達(dá)與未刺激的⑶8+T細(xì)胞中相比的倍數(shù)變化。
[0065] 圖10.08?抑制劑08?/^?300(3)和08?/^?300(4)未影響0)8+1'細(xì)胞的效應(yīng)功能。數(shù) 據(jù)顯示經(jīng)刺激的⑶8+T細(xì)胞中GZMB表達(dá)與未刺激的⑶8+T細(xì)胞中相比的倍數(shù)變化。
[0066] 發(fā)明詳述
[0067] 本發(fā)明涉及通過(guò)使用下列蛋白中的一種或多種中所含的布羅莫結(jié)構(gòu)域的藥理學(xué) 干擾治療癌癥和/或延遲癌癥進(jìn)展的方法:CBP和/或EP300，在本文也稱為CBP/EP300。本發(fā) 明的實(shí)施方案涉及對(duì)人免疫系統(tǒng)的操縱以靶向和消除/減少癌細(xì)胞的數(shù)目，后文稱為癌癥 免疫療法。本文所述的發(fā)現(xiàn)特別聚焦于T淋巴細(xì)胞的兩個(gè)亞群，即調(diào)節(jié)性CD4+T細(xì)胞(后文稱 為Treg細(xì)胞)和CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞（后文稱為CD8細(xì)胞），這是因?yàn)檫@些細(xì)胞被認(rèn)作是免疫 系統(tǒng)抗腫瘤活性的核心調(diào)節(jié)劑。由此，本發(fā)明的一些實(shí)施方案提供用于在癌癥的預(yù)防性或 治療性治療中使用的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑。
[0068] 定義
[0069]本文使用的術(shù)語(yǔ)"CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑"指與CBP布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或 EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合并抑制和/或減少CBP和/或EP300的生物學(xué)活性的化合物。在一些 實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑主要(例如僅僅)通過(guò)與CBP布羅莫結(jié)構(gòu)域和/ 或EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域接觸和/或相互作用與CBP和/或EP300結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，CBP/ EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑通過(guò)與CBP布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域以及額外的 CBP和/或EP300殘基和/或結(jié)構(gòu)域接觸和/或相互作用與CBP和/或EP300結(jié)合。在一些實(shí)施方 案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑基本上或完全抑制CBP和/或EP300的生物學(xué)活性。在 一些實(shí)施方案中，生物學(xué)活性是CBP和/或EP300的布羅莫結(jié)構(gòu)域與染色質(zhì)（例如與DNA相關(guān) 的組蛋白）和/或另一乙?；鞍椎慕Y(jié)合。在一些實(shí)施方案中，抑制劑具有少于約50μΜ、少于 約ΙμΜ、少于約500ηΜ、少于約IOOnM或少于約IOnM的IC 5q或結(jié)合常數(shù)。在一些實(shí)施方案中， CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑阻斷CBP/EP300活性進(jìn)而通過(guò)由T-細(xì)胞的功能異常狀態(tài)(例 如增殖、細(xì)胞因子產(chǎn)生、靶細(xì)胞殺傷)至抗原刺激恢復(fù)功能性響應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，CBP/ ΕΡ300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與CBP布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合并抑制CBP布羅莫結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施 方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與ΕΡ300布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合并抑制ΕΡ300布羅莫結(jié) 構(gòu)域。
[0070]除非另外表明，本文使用的術(shù)語(yǔ)"CBP"和"CREB結(jié)合蛋白"指來(lái)自任何脊椎動(dòng)物來(lái) 源的任何天然CBP，包括哺乳動(dòng)物諸如靈長(zhǎng)類動(dòng)物（例如人)和嚙齒類動(dòng)物（例如小鼠和大 鼠）。該術(shù)語(yǔ)涵蓋"全長(zhǎng)"未加工的CBP以及來(lái)自細(xì)胞中加工的任何CBP形式。該術(shù)語(yǔ)還涵蓋天 然存在的CBP變體，例如剪切變體或等位基因變體。在一些實(shí)施方案中，示例性的人CBP氨基 酸序列是UNIPROT Q92793-1。在一些實(shí)施方案中，示例性的人CBP氨基酸序列是UNIPROT Q92793-2。在一些實(shí)施方案中，示例性的人CBP氨基酸序列示于SEQ ID NO: 1。
[0071] 除非另外表明，本文使用的術(shù)語(yǔ)"EP300"和"E1A結(jié)合蛋白p300"指來(lái)自任何脊椎動(dòng) 物來(lái)源的任何天然EP300,包括哺乳動(dòng)物諸如靈長(zhǎng)類動(dòng)物(例如人)和嚙齒類動(dòng)物(例如小鼠 和大鼠）。該術(shù)語(yǔ)涵蓋"全長(zhǎng)"未加工的EP300以及以及任何來(lái)自細(xì)胞中加工的EP300的形式。 該術(shù)語(yǔ)還涵蓋天然存在的EP300的變體，例如剪切變體或等位基因變體。在一些實(shí)施方案 中，示例性的人EP300是UNIPROT Q09472。在一些實(shí)施方案中，示例性的人EP300的氨基酸序 列示于SEQ ID NO:2。
[0072] 本文使用的術(shù)語(yǔ)"可測(cè)量的親和力"和"可測(cè)量地抑制"指下列樣品間布羅莫結(jié)構(gòu) 域活性可測(cè)量的減少：（i)包含CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其組合物和該布羅莫結(jié)構(gòu) 域的樣品，和(ii)包含該布羅莫結(jié)構(gòu)域而不存在該化合物或其組合物的等同樣品。
[0073] "藥學(xué)上可接受的鹽"包括酸和堿加成鹽兩者。能夠理解的是當(dāng)化合物或本文實(shí)施 例以特定的鹽顯示時(shí)，相應(yīng)的游離堿以及其他相應(yīng)的游離堿的鹽(包括相應(yīng)游離堿的藥學(xué) 上可接受的鹽)是預(yù)期在內(nèi)的。
[0074] "藥學(xué)上可接受的酸加成鹽"指保留游離堿的生物功效和性質(zhì)且并非為生物學(xué)上 或其他不期望的由無(wú)機(jī)酸諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸等形成的那些鹽，且有 機(jī)酸可選自脂族、環(huán)脂族、芳族、芳脂族、雜環(huán)、羧酸和磺酸類的有機(jī)酸諸如甲酸、乙酸、丙 酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、馬來(lái)酸、丙二酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、 檸檬酸、天冬氨酸、抗壞血酸、谷氨酸、鄰氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、雙羥萘酸、苯 乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、水楊酸等。
[0075] "藥學(xué)上可接受的堿加成鹽"包括源自無(wú)機(jī)堿諸如鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、 錳、鋁鹽等的那些。具體的堿加成鹽為銨、鉀、鈉、鈣和鎂鹽。源自藥學(xué)上可接受的有機(jī)無(wú)毒 堿的鹽包括伯胺、仲胺和叔胺，包括天然存在的取代胺的取代胺、環(huán)胺和堿性離子交換樹脂 諸如異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、氨基丁三醇、二 環(huán)己胺、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡因、普魯卡因、海巴明、膽堿、甜菜堿、乙二胺、葡糖胺、 甲基葡萄糖胺、可可堿、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺樹脂等。具體的有機(jī)非毒性堿為 異丙胺、二乙胺、乙醇胺、氨基丁三醇、二環(huán)己胺、膽堿和咖啡因。
[0076] "溶劑合物"指一種或多種溶劑分子與本發(fā)明化合物的締合物或復(fù)合物。溶劑的實(shí) 例包括水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMS0、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。術(shù)語(yǔ)〃水合物〃指其中所述溶 劑分子是水的復(fù)合物。
[0077] 術(shù)語(yǔ)"藥學(xué)上可接受的載體、佐劑或媒介物"指使用其配制化合物而不破壞化合物 的藥理學(xué)活性的非毒性的載體、佐劑或媒介物?？捎糜诒景l(fā)明組合物的藥學(xué)上可接受的載 體、佐劑或媒介物包括但不限于離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白諸如人血 清白蛋白、緩沖物質(zhì)諸如磷酸鹽、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的部分甘油酯 混合物、水、鹽或電解質(zhì)諸如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠體二氧 化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、基于纖維素的物質(zhì)、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯 酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。
[0078] 本文使用的短語(yǔ)"基本上相似"指兩數(shù)值(一般而言與分子相關(guān)的一個(gè)和與參照/ 比較分子相關(guān)的另一個(gè)）間相似度足夠高，由此本領(lǐng)域的技術(shù)人員將考慮兩個(gè)值間的差異 在由所述值測(cè)量的生物學(xué)特性內(nèi)并非具有顯著性差異(例如Kd值）。所述兩個(gè)值間的差異作 為參照/比較值的函數(shù)可舉例來(lái)說(shuō)少于約20 %、少于約10 %和/或小于約5 %。短語(yǔ)"基本上 正常"指與參照基本上相似(例如正常參照）。
[0079] 短語(yǔ)"基本上不同"指兩數(shù)值（一般而言與分子相關(guān)的一個(gè)和與參照/比較分子相 關(guān)的另一個(gè)）間差異程度足夠高，由此本領(lǐng)域的技術(shù)人員將考慮兩個(gè)值間的差異在由所述 值測(cè)量的生物學(xué)特性內(nèi)具有顯著性差異(例如Kd值）。所述兩個(gè)值間的差異作為參照/比較 值的函數(shù)可舉例來(lái)說(shuō)大于約10%、大于約20%、大于約30%、大于約40%和/或大于約50%。
[0080] 與個(gè)體增加的臨床益處相關(guān)的生物標(biāo)志物的"存在"、〃量〃或〃水平〃是生物樣品中 可檢測(cè)的水平。這些可通過(guò)本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知以及本文公開的方法測(cè)量。評(píng)估的生物 標(biāo)志物的表達(dá)水平或量可用于確定對(duì)治療的響應(yīng)。
[0081] -般而言術(shù)語(yǔ)〃表達(dá)的水平〃或〃表達(dá)水平〃可交換使用且一般指生物樣品中生物 標(biāo)志物的量。"表達(dá)"一般指通過(guò)其信息（例如基因編碼的和/或表觀遺傳的）轉(zhuǎn)化成為細(xì)胞 中存在和操作的結(jié)構(gòu)的過(guò)程。因此本文使用的"表達(dá)"可指轉(zhuǎn)錄成為多核苷酸、翻譯成為多 肽或甚至多核苷酸和/或多肽修飾(例如多肽的翻譯后修飾）。還將轉(zhuǎn)錄的多核苷酸、翻譯的 多肽或多核苷酸和/或多肽修飾(例如多肽的翻譯后修飾)的片段視作表達(dá)的，無(wú)論其源自 通過(guò)選擇性剪接或降解轉(zhuǎn)錄物或例如通過(guò)蛋白水解來(lái)自多肽的翻譯后加工生成的轉(zhuǎn)錄物 與否。〃表達(dá)的基因〃包括轉(zhuǎn)錄成為mRNA的多核苷酸且隨后翻譯成為多肽的那些，以及轉(zhuǎn)錄 成為RNA但不翻譯成為多肽的那些(例如轉(zhuǎn)移和核糖體RNA)。
[0082] "升高的表達(dá)"、"升高的表達(dá)水平"或"升高的水平"指?jìng)€(gè)體中相比對(duì)照(諸如未罹 患疾病或病癥(例如癌癥)的個(gè)體或多個(gè)個(gè)體或內(nèi)部對(duì)照(例如管家基因））生物標(biāo)志物增加 的表達(dá)或增加的水平。
[0083] "減少的表達(dá)"、"減少的表達(dá)水平"或"減少的水平"指?jìng)€(gè)體中相比對(duì)照(諸如未罹 患疾病或病癥(例如癌癥)的個(gè)體或多個(gè)個(gè)體或內(nèi)部對(duì)照(例如管家基因））生物標(biāo)志物減少 的表達(dá)或減少的水平。
[0084] 術(shù)語(yǔ)"管家生物標(biāo)志物"指生物標(biāo)志物或生物標(biāo)志物組（例如多核苷酸和/或多 肽），其通常在全部細(xì)胞類型中相似地存在。在一些實(shí)施方案中，管家生物標(biāo)志物是"管家基 因"。"管家基因"在本文指編碼活性對(duì)于維持細(xì)胞功能為必需且通常在全部細(xì)胞類型中相 似存在的蛋白的基因或基因組。
[0085] 本文使用的術(shù)語(yǔ)"樣品"指源自包含待表征和/或識(shí)別（例如基于物理、生化、化學(xué) 和/或生理特性）的細(xì)胞和/或其他分子實(shí)體的感興趣的受試者和/或個(gè)體或從其獲得的組 合物。舉例來(lái)說(shuō)，短語(yǔ)"疾病樣品"和其變化指從預(yù)期或已知包含待表征的細(xì)胞和/或分子實(shí) 體的感興趣的受試者獲得的任何樣品。樣品包括但不限于原代或培養(yǎng)的細(xì)胞或細(xì)胞系、細(xì) 胞上清、細(xì)胞裂解物、血小板、血清、血漿、玻璃體液、淋巴液、滑液、濾泡液、精液、羊膜液、 乳、全血、源自血的細(xì)胞、尿、腦脊髓液、唾液、痰、淚液、汗液、粘液、腫瘤裂解物和組織培養(yǎng) 基、組織提取物諸如勻漿的組織、腫瘤組織、細(xì)胞提取物及其組合。
[0086] 〃組織樣品"或"細(xì)胞樣品〃意為從受試者或個(gè)體的組織獲得的相似細(xì)胞的集合。組 織或細(xì)胞樣品的來(lái)源可以是實(shí)體組織如來(lái)自新鮮、冷凍和/或保存的器官、組織樣品、活檢 和/或吸出物;血液或任何血液組分諸如血漿;體液諸如腦脊液、羊水、腹膜液或間質(zhì)液;來(lái) 自受試者妊娠或發(fā)育中任何時(shí)間的細(xì)胞。組織樣品還可以是原代或培養(yǎng)的細(xì)胞或細(xì)胞系。 任選地，所述組織或細(xì)胞樣品從疾病組織/器官獲得。所述組織樣品可包含并非天然與組織 原本混合的化合物諸如防腐劑、抗凝劑、緩沖劑、固定劑、營(yíng)養(yǎng)物、抗生素等。
[0087] 本文使用的"參照樣品"、"參照細(xì)胞"、"參照組織"、"對(duì)照樣品"、"對(duì)照細(xì)胞"或"對(duì) 照組織"指用于比較目的的樣品、細(xì)胞、組織、標(biāo)準(zhǔn)或水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，參照樣品、參 照細(xì)胞、參照組織、對(duì)照樣品、對(duì)照細(xì)胞或?qū)φ战M織從相同受試者或個(gè)體機(jī)體的健康和/或 非疾病部分(例如組織或細(xì)胞)獲得。舉例來(lái)說(shuō)，與疾病細(xì)胞或組織鄰近的健康和/或非疾病 細(xì)胞或組織（例如與腫瘤鄰近的細(xì)胞或組織）。在另一個(gè)實(shí)施方案中，參照樣品從相同受試 者或個(gè)體機(jī)體的未治療組織和/或細(xì)胞獲得。在另一實(shí)施方案中，參照樣品、參照細(xì)胞、參照 組織、對(duì)照細(xì)胞或?qū)φ战M織從非受試者或個(gè)體的個(gè)體機(jī)體的健康和/或非疾病部分(例如組 織或細(xì)胞)獲得。在另一實(shí)施方案中，參照樣品、參照細(xì)胞、參照組織、對(duì)照樣品、對(duì)照細(xì)胞或 對(duì)照組織從非受試者或個(gè)體的個(gè)體機(jī)體的未治療組織和/或細(xì)胞獲得。
[0088] 就本文而言，組織樣品"切片"意為組織樣品的單一部分或片，例如從組織樣品切 下的組織或細(xì)胞薄片。假設(shè)理解組織樣品的相同切片可在形態(tài)學(xué)和分子水平都進(jìn)行分析， 或?qū)τ诙嚯幕蚨嗪塑账徇M(jìn)行分析，可以理解的是可取得組織樣品的多重切片并對(duì)其進(jìn)行分 析。
[0089] "關(guān)聯(lián)"或"相關(guān)"意為以任何方式對(duì)第一分析或方案的實(shí)施和/或結(jié)果與第二分析 或方案的實(shí)施和/或結(jié)果進(jìn)行比較。舉例來(lái)說(shuō)，實(shí)施者可將第一分析或方案的結(jié)果用于實(shí)施 第二方案和/或?qū)嵤┱呖墒褂玫谝环治龌蚍桨傅慕Y(jié)果以確定是否實(shí)施第二分析或方案。對(duì) 于多核苷酸分析或方案的實(shí)施方案，實(shí)施者可使用多核苷酸表達(dá)分析或方案以確定是否實(shí) 施特定的治療方案。
[0090] 藥劑例如藥物制劑的"有效量"指以劑量和持續(xù)所需時(shí)間的時(shí)段實(shí)現(xiàn)預(yù)期的治療 或預(yù)防結(jié)果的量。在一些實(shí)施方案中，有效量指（i)治療特定疾病、病況或病癥，（ii)衰減、 改善或消除特定疾病、病況或病癥的一種或多種癥狀或（iii)預(yù)防或延遲本文所述特定疾 病、病況或病癥的一種或多種癥狀發(fā)作的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑的量。在一些實(shí)施 方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑的有效量可減少癌細(xì)胞的數(shù)目；減少腫瘤大小;抑 制（即在某種程度上減緩且優(yōu)選終止)癌細(xì)胞浸潤(rùn)至周邊器官；抑制（即在某種程度上減緩 且優(yōu)選終止)腫瘤轉(zhuǎn)移;在某種程度上抑制腫瘤生長(zhǎng)和/或在某種程度上緩解一種或多種與 癌癥相關(guān)的癥狀。對(duì)于癌癥療法，效力可例如通過(guò)評(píng)估疾病進(jìn)展的時(shí)間（TTP)和/或確定響 應(yīng)率(RR)進(jìn)行測(cè)量。在免疫系統(tǒng)病癥的情況中，治療有效量是足以減少或緩解過(guò)敏病癥、自 身免疫和/或炎癥疾病的癥狀或急性炎癥反應(yīng)的癥狀(例如哮喘）的量。在一些實(shí)施方案中， 有效量是足以顯著減少耐藥或持續(xù)耐藥癌細(xì)胞的活性或數(shù)目的本文所述化學(xué)實(shí)體的量。
[0091] 免疫功能障礙上下文中的術(shù)語(yǔ)"功能障礙"指對(duì)抗原性刺激減少的免疫響應(yīng)狀態(tài)。 該術(shù)語(yǔ)包括衰竭(exhaustion)和/或無(wú)能(anergy)兩者的共同元素，其中抗原識(shí)別可發(fā)生， 但確保免疫響應(yīng)不足以控制感染或腫瘤生長(zhǎng)。
[0092] 本文使用的術(shù)語(yǔ)〃功能障礙的〃還包括對(duì)抗原識(shí)別耐受或不響應(yīng)，具體地，受損的 將抗原識(shí)別翻譯成下游T-細(xì)胞效應(yīng)功能諸如分化、細(xì)胞因子產(chǎn)生(例如IL-2)和/或靶細(xì)胞 殺傷的能力。
[0093]術(shù)語(yǔ)"無(wú)能"指由于通過(guò)T-細(xì)胞受體遞送的不完全或不足信號(hào)導(dǎo)致的對(duì)抗原刺激 不響應(yīng)的狀態(tài)(例如無(wú) ras-活化的細(xì)胞內(nèi)Ca+2增加）J細(xì)胞無(wú)能還可在當(dāng)無(wú)共同刺激存在時(shí) 施用抗原的刺激時(shí)發(fā)生，導(dǎo)致即使在共刺激存在背景下細(xì)胞對(duì)隨后通過(guò)抗原的活化耐受。 不響應(yīng)狀態(tài)可經(jīng)常通過(guò)白細(xì)胞介素-2的存在而改寫。無(wú)能T-細(xì)胞不經(jīng)歷克隆擴(kuò)增和/或需 要效應(yīng)功能。
[0094] 術(shù)語(yǔ)"衰竭"指T細(xì)胞衰竭，作為T細(xì)胞功能障礙的狀態(tài)其由在許多慢性感染和癌癥 過(guò)程中發(fā)生的維持的TCR信號(hào)產(chǎn)生。衰竭與無(wú)能不同在于其不通過(guò)不完全或缺陷信號(hào)傳導(dǎo) 但由維持的信號(hào)傳導(dǎo)產(chǎn)生。衰竭通過(guò)不良的效應(yīng)功能、抑制受體的維持表達(dá)和不同于功能 效應(yīng)器或記憶T細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄狀態(tài)限定。衰竭阻止對(duì)感染和腫瘤的最佳控制。衰竭可由外在的 負(fù)調(diào)節(jié)通路(例如免疫調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子）以及細(xì)胞的內(nèi)在負(fù)調(diào)節(jié)(共刺激)通路(PD-1、B7-H3、B7-H4等)兩者導(dǎo)致。
[0095] "增強(qiáng)的T-細(xì)胞功能"意為誘導(dǎo)、引發(fā)或刺激T-細(xì)胞以具有維持的或擴(kuò)大的生物學(xué) 功能，或更新或再次活化的衰竭或非活化T-細(xì)胞。增強(qiáng)的T-細(xì)胞功能實(shí)例包括:相對(duì)干預(yù)前 的這些水平增加的來(lái)自CD8+T-細(xì)胞的γ -干擾素的分泌、增加的增殖、增加的抗原響應(yīng)(例 如清除）。在一個(gè)實(shí)施方案中，增強(qiáng)的水平為至少50%，可替換地60%、70%、80%、90%、 100%、120%、150%、200%。測(cè)量該增強(qiáng)的方式為本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員已知。
[0096] "Τ細(xì)胞功能障礙病癥"是T細(xì)胞的病癥或病況，其通過(guò)對(duì)抗原性刺激減少的響應(yīng)表 征。在具體的實(shí)施方案中，T-細(xì)胞功能障礙病癥是特異性與不適當(dāng)?shù)腃BP和/或ΕΡ300活性相 關(guān)的病癥。在另一實(shí)施方案中，T-細(xì)胞功能障礙病癥是一種其中T-細(xì)胞無(wú)能或具有減少的 分泌增殖或執(zhí)行細(xì)胞殺傷活性的細(xì)胞因子能力的病癥。在特定的方面中，減少的響應(yīng)導(dǎo)致 表達(dá)免疫原的病原或腫瘤無(wú)效的控制。由T細(xì)胞功能障礙表征的T細(xì)胞功能障礙病癥的實(shí)例 包括腫瘤免疫力。
[0097] "腫瘤免疫力"指其中腫瘤規(guī)避免疫識(shí)別和清除的過(guò)程。因此，作為治療概念，當(dāng)該 規(guī)避減弱時(shí)腫瘤免疫力"受到治療"，且腫瘤由免疫系統(tǒng)識(shí)別并攻擊。腫瘤識(shí)別的實(shí)例包括 腫瘤結(jié)合、腫瘤萎縮和腫瘤清除。
[0098] "免疫原性〃指特定物質(zhì)刺激免疫響應(yīng)的能力。腫瘤是免疫原性的且增強(qiáng)腫瘤免疫 原性有助于在通過(guò)免疫響應(yīng)清除腫瘤細(xì)胞。
[0099] "持續(xù)響應(yīng)〃指治療終止后持續(xù)的減少腫瘤生長(zhǎng)的效應(yīng)。舉例來(lái)說(shuō)，可保持腫瘤大 小以與施用階段初始時(shí)的大小相同或更小。在一些實(shí)施方案中，持續(xù)的響應(yīng)具有至少與治 療持續(xù)時(shí)間相同、至少為治療持續(xù)時(shí)間的1.5X、2.0X、2.5Χ或3. OX長(zhǎng)的持續(xù)時(shí)間。
[0100] "治療"（和變化諸如"進(jìn)行治療"或"進(jìn)行的"）指嘗試改變進(jìn)行治療的個(gè)體或細(xì)胞 的天然過(guò)程的臨床干預(yù)，且可用于預(yù)防或在臨床病理過(guò)程中。治療的預(yù)期效果包括一種或 多種預(yù)防疾病發(fā)生或復(fù)發(fā)、減輕癥狀、消除任何直接或間接的疾病病理性后果、穩(wěn)定疾病狀 態(tài)（即不使其惡化）、預(yù)防轉(zhuǎn)移、減少疾病進(jìn)展速率、改善或緩解疾病狀態(tài)、與不接受治療的 預(yù)期生存率相比延長(zhǎng)生存率和緩解或改善的預(yù)后。在一些實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié) 構(gòu)域抑制劑用于延遲疾病或病癥的發(fā)展或減緩疾病或病癥的進(jìn)展。需要治療的那些個(gè)體包 括已患有病況或病癥的那些以及易患有所述病況或病癥的那些(例如通過(guò)基因突變或基因 或蛋白的異常表達(dá))或其中所述病況或病癥有待預(yù)防的那些。
[0101] 本文使用的〃延遲疾病進(jìn)展〃意為推遲、阻礙、減緩、延緩、穩(wěn)定和/或延遲疾?。ㄖT 如癌癥)的發(fā)展。該延遲可以是不同的時(shí)間長(zhǎng)度，取決于病史和/或待治療的個(gè)體。對(duì)本領(lǐng)域 技術(shù)人員顯而易見的是，足夠或顯著的延遲可實(shí)際上涵蓋在不發(fā)展所述疾病的個(gè)體中的預(yù) 防。舉例來(lái)說(shuō)，晚期癌癥諸如轉(zhuǎn)移的發(fā)展可延遲。
[0102] 本文使用的術(shù)語(yǔ)"患者"或"個(gè)體"指動(dòng)物，諸如哺乳動(dòng)物，諸如人。在一個(gè)實(shí)施方案 中，患者或個(gè)體指人。
[0103] 本文使用的術(shù)語(yǔ)〃細(xì)胞毒性劑〃指抑制或預(yù)防細(xì)胞功能和/或引起細(xì)胞死亡或毀滅 的物質(zhì)。細(xì)胞毒性劑包括但不限于放射性同位素(例如At 211、I131、I125、Y9()、Re 186、Re188、Sm153、 Bi212、P32、Pb212和Lu的放射性同位素）；化療劑;生長(zhǎng)抑制劑;酶及其片段諸如核酸水解;和毒 素諸如小分子毒素或細(xì)菌、真菌、植物或動(dòng)物來(lái)源的酶活性毒素，包括其片段和/或變體。示 例性的細(xì)胞毒性劑可選自抗微管劑、鉑配位復(fù)合物、烷化劑、抗生素劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制 劑、抗代謝物、拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑、激素和激素類似物、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制劑、非受體酪氨 酸激酶血管生成抑制劑、免疫治療劑、促凋亡劑、LDH-A抑制劑;脂肪酸生物合成抑制劑;細(xì) 胞周期信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑;HDAC抑制劑、蛋白酶體抑制劑;和癌癥代謝抑制劑。
[0104] 在一個(gè)實(shí)施方案中，細(xì)胞毒性劑選自抗微管劑、鉑配位復(fù)合物、烷化劑、抗生素制 劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑、抗代謝物、拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑、激素和激素類似物、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通 路抑制劑、非受體酪氨酸激酶血管生成抑制劑、免疫治療劑、促凋亡劑、LDH-A抑制劑;脂肪 酸生物合成抑制劑;細(xì)胞周期信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑;HDAC抑制劑、蛋白酶體抑制劑;和癌癥代謝 抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述細(xì)胞毒性劑是紫杉烷。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述紫杉烷是 紫杉醇或多西紫杉醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述細(xì)胞毒性劑是鉑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中， 所述細(xì)胞毒性劑是EGFR的拮抗劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述EGFR的拮抗劑是N-(3-乙炔基苯 基)-6,7_二(2-甲氧基乙氧基)喹唑啉-4-胺(例如厄洛替尼(erlotinib))。在一個(gè)實(shí)施方案 中，所述細(xì)胞毒性劑是RAF抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述RAF抑制劑是BRAF和/或CRAF抑 制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述RAF抑制劑是維羅非尼(vemurafenib)。在一個(gè)實(shí)施方案中， 所述細(xì)胞毒性劑是P13K抑制劑。
[0105] "化療劑"包括治療癌癥中有效的化學(xué)化合物?；焺┑膶?shí)例包括厄洛替尼（ T ARCE V A?，Genentech/osi Pharm·)、硼替佐米（b〇rtez〇mib)( VELC A D E1.， Millennium Pharm·)、雙硫侖、兒茶素酸酯、salinosporamide A、卡菲偌米布 (carf ilzomib)、17_AAG(格爾德霉素(geldanamycin))、根赤殼菌素(radicicol)、乳酸脫氫 酶八(1^-厶）、氟維司群（如]^81：抑111：)([/\81_.01)￡又_'，;\81：瓜261^3)、舒尼替尼（81111；[1：；[13) (.SUTBNT?,Pf izer/Sugen)、來(lái)曲唑（Ietrozole) (FEMARA?1,Novartis)、甲磺酸伊馬替 尼（imatinib mesylate)( GLEEVEC?，No var t i s)、finasunate( VATA-LANffi?， Novartis)、奧沙利鉬（oxaliplatin) (ELOXATiNR:，Sanof i)、5_FU(5_氟尿啼啶）、亞葉酸 鈣、雷帕霉素（SiroIimus，RAPAMUNE?,Wyeth)、拉帕替尼（Lapatinib) (TYKERB' GSK572016, Glaxo Smith Kline)、Lonafamib(SCH 66336)、索拉非尼（sorafenib)( HEXAVAR@，Bayer Labs)、gef itinib(lRESSA?，AstraZeneca)、AG1478、烷化基諸如噻 替哌和CYTOXANK)環(huán)磷酰胺；烷基磺酸鹽諸如白消安（b u s u I f a η )、英丙舒凡 (；[1]^1'0 811]^311)和哌泊舒凡（口1口0 811]^311);氮丙啶包括苯佐替哌(^61120(1(^3)、卡波醌 (carboquone)、美妥替哌（meturedopa)和烏瑞替哌（uredopa);乙稀亞胺和甲基蜜胺 (methy lame lamine)包括六甲密胺、三亞胺嗪、三亞乙基磷酰胺、三亞乙基硫化磷酰胺和三 輕甲基蜜胺（trimethy IomeIamine);番蒸枝內(nèi)酯類化合物(尤其是布拉它辛和布拉它辛 酮）；喜樹堿(包括拓?fù)涮婵岛鸵亮⑻婵担惶μ\抑素;callystatin;CC-1065(包括其阿多來(lái) 新（adozelesin)、卡折來(lái)新（carzelesin)和比折來(lái)新（bizelesin)合成性類似物）； cryptophycin類化合物（特別是cryptophycin 1和cryptophycin 8);腎上腺皮質(zhì)激素（包 括潑尼松和潑尼松龍）；乙酸環(huán)丙孕酮;5α_還原酶包括非那雄胺和度他雄胺）；伏立諾他、羅 米地辛、帕比司他、丙戊酸，mocetinostat dolastatin;阿地白介素(aldesleukin);talc (111〇〇&1'1115^;[11(包括合成性類似物1(￥-2189和031-1]\11);艾槽塞洛素4&11(^&1:丨8丨&1:;[11; 8&1^0(1；[(^7；[11 ;8?01^18丨31：；[11;氮芥類化合物諸如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺、雌莫司 汀、異環(huán)磷酰胺、雙氯乙基甲胺、鹽酸氧氮芥、美法侖、新氮芥、苯芥膽留醇、潑尼莫司汀、曲 磷胺、尿嘧啶氮芥;硝基脲類化合物諸如卡莫司汀、氯脲菌素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫斯 汀和雷莫司汀;抗生素諸如烯二炔抗生素(例如刺孢霉素尤其是刺孢霉素 γ II和刺孢霉素 ω lI(Angew Chem. Intl .Ed.Engl · (1994)33:183-186);蒽環(huán)類抗生素，包括dynemicin Α; 二膦酸鹽諸如氯膦酸鹽;埃斯培拉霉素；以及新抑癌蛋白生色團(tuán)和相關(guān)色蛋白烯二炔抗生 素生色團(tuán)、ac lacinomy s in、放線菌素 、authramy c in、偶氮絲氨酸、博來(lái)霉素、放線菌素 C、 carabicin、去甲柔紅霉素、嗜癌素、色霉素、放線菌素 D、柔紅霉素、地拖比星、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸、Adriamyctnk (多柔比星）、嗎啉代-多柔比星、氰基嗎啉代-多柔比 星、2-吡咯啉子基-多柔比星和去氧多柔比星、表柔比星、依索比星、伊達(dá)比星、麻西羅霉素、 絲裂霉素諸如絲裂霉素 c、麥考酚酸、諾拉霉素、橄欖霉素、培洛霉素、泊非霉素、嘌羅霉素、 三鐵阿霉素、羅多比星、鏈黑霉素、鏈佐星、殺結(jié)核菌素、烏苯美司、凈司他丁、佐柔比星;抗 代謝劑諸如甲氨喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU);葉酸類似物諸如二甲葉酸、甲氨喋呤、喋羅呤、 三甲曲沙;嘌呤類似物諸如氟達(dá)拉濱、6-巰嘌呤、硫咪嘌呤、硫鳥嘌呤;嘧啶類似物諸如安西 他濱、阿扎胞苷、6-氮鳥苷、卡莫氟、阿糖胞苷、二脫氧尿苷、去氧氟尿苷、伊諾他濱、氟尿苷； 雄激素諸如卡普睪酮、丙酸甲雄烷酮、環(huán)硫雄醇、美雄烷、睪內(nèi)酯;抗腎上腺藥物諸如氨魯米 特、米托坦、曲洛司坦;葉酸補(bǔ)充劑諸如亞葉酸;醋葡醛內(nèi)酯;醛磷酰胺糖苷;氨基乙酰丙酸； 恩尿啼啶；安吖啶；bestrabuci 1 ;比生群；伊達(dá)曲殺；地磷酰胺；秋水仙胺；地吖醌； elf ornithine;依利醋銨;埃坡霉素;依托格魯;硝酸鎵;羥基脲;香菇多糖;氯尼達(dá)明；美登醇 類化合物諸如美登素和安絲菌素;米托胍腙;米托蒽醌;mopidanmol;根瘤菌劑;噴司他??； 蛋氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基肼；丙卡巴肼；PSK x多糖復(fù)合物（JHS Natural Products ,Eugene, OR);雷佐生;根霉素；西佐喃;鍺螺胺;細(xì)交鏈孢菌酮酸;三亞胺 醌；2，2 '，2" -三氯三乙胺；單端孢菌毒素（尤其是T-2毒素 、verracurin A、桿孢菌素 A和 anguidine);烏拉坦;長(zhǎng)春地辛；達(dá)卡巴嗪；甘露莫司?。欢甯事洞?；二溴衛(wèi)矛醇；哌泊溴 烷;gacytosine ;阿糖胞苷（"Ara-C"）；環(huán)磷酰胺;塞替派;紫杉烷例如TAX0L? (紫杉醇） (Bristol-Myers Squibb Oncology，Princeton，N.J·)、ABR AXANE!<> (不含 Cremophor)、紫杉醇的白蛋白工程化納米粒制劑（American Pharmaceutical Partners， Schaumberg，111 ·)和TAX0.TE.RE? (多西紫杉醇）（Sanofi-Aventis);苯丁酸氮芥； GEMZARK)(吉西他濱）；6-硫代鳥嘌呤;疏嘌呤；甲氨喋呤；鉬類似物諸如順鉑和卡鉑;長(zhǎng) 春堿;依托泊苷(VP-16);異環(huán)磷酰胺;米托蒽醌;長(zhǎng)春新堿;NAVELBESTE? (長(zhǎng)春瑞濱）； 諾消靈；替尼泊苷;伊達(dá)曲殺;柔紅霉素；氨基喋呤；卡培他濱(XELODA >伊班膦酸鹽； CPT-11;拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑RFS 2000;二氟甲基鳥氨酸(DMFO);類視黃醇諸如視黃酸;及上 述任何物質(zhì)的藥學(xué)上可接受的鹽、酸和衍生物。
[0106]化療劑還包括(i)調(diào)節(jié)或抑制激素對(duì)腫瘤作用的抗激素劑諸如抗雌激素和選擇性 雌激素受體調(diào)節(jié)劑（SERM)，包括例如他莫昔芬（tamoxifen)(包括NOLVADEX'.枸櫞酸 他莫昔芬）、雷洛昔芬(1^1<^丨€6]16)、屈洛昔芬((11'〇1(?丨€6116)、吲噪昔芬（；[0(1(?7€6116)、4-羥基他莫昔芬、曲沃昔芬（trioxifene)、屈洛昔芬（keoxifene)、1^117018、奧那司酮 (onapristone)和(枸橡酸托瑞米芬）；（ii)抑制芳香化酶的芳香化酶抑制 劑，其在腎上腺中調(diào)節(jié)雌激素的產(chǎn)生，如舉例來(lái)說(shuō)4(5)-咪唑、氨魯米特、MEGASE u (乙酸 甲地孕酮）、AROMASIIST (依西美坦；Pfizer)、福美司坦（f ormestanie )、法倔挫 (fadrozo I e)、RiviSOR? (伏氯唑）、FEMARAf5 (來(lái)曲唑；No var t i s)和 ARIMIDEX? (阿那曲唑；AstraZeneca);(iii)抗雄激素諸如氟他胺（flutamide)、尼魯米特 (ni Iut amide)、比卡魯胺（bicalut amide)、乙酸亮丙瑞林（leuprol ide)和戈舍瑞林 (goserel in);布舍i^i#(buserelin)、triptereIin、乙酉愛甲輕孕酉同(medroxyprogesterone acetate)、己稀雌酸（diethylstilbestrol)、普力馬（premarin)、氣甲睪酮 (；1^111(?50116 8七61'0116)、全反維甲酸、芬維厶胺（€61^61：；[111(16)以及曲沙他濱（1：1'(?&(3；^&13；[116) (1,3-二氧六環(huán)胞啼啶核苷類似物）；（iv)蛋白激酶抑制劑；（V)脂質(zhì)激酶抑制劑；（Vi)反義 寡核苷酸，特別是抑制參與異常細(xì)胞增殖信號(hào)傳導(dǎo)通路的基因表達(dá)的那些，如舉例來(lái)說(shuō) PKC-a、Ralf和H-Ras; (vii)核酶諸如VEGF表達(dá)抑制劑（例如ANGIOZYME? )和HER2表達(dá) 抑制劑；（V i i i)疫苗諸如基因療法疫苗，例如ALL.OVECTINi;、LEUVECT丨Nκ _和 VAXID?; PROIEUKIN氣rIL-2;拓?fù)洚悩?gòu)酶 1 抑制劑i者如UJRTOTECAN?; ABAREUK? rmRH;和（ix)上述任何的藥學(xué)上可接受的鹽、酸和衍生物。
[0107] 化療劑還包括抗體如阿侖珠單抗（alemtuzumab) (Campath)、貝伐珠單抗（ OWASTIN?，Genentech );西妥昔單抗（ERBITUX?, Imc lone);帕尼單抗（ VE.CTIBIX?,Amgen)、利妥昔單抗（RITUXAN?，Genentech/Biogen Idee)、帕妥珠單抗（ OMMTARG?，2C4，Genentech )、曲妥珠單抗（HERCEPTN? , Genentech )、托西莫單抗 (Bexxaar ,Corixia)和所述抗體的藥物偶聯(lián)物，吉妥珠單抗奧佐米星（ _MYLOTARG\ Wyeth)。具有作為與本發(fā)明化合物組合的藥劑的治療潛力的其他人源化單克隆抗體包括： 阿泊珠單抗（apo I i zumab )、阿塞珠單抗（aselizumab)、atlizumab、巴匹珠單抗 (bapineuzumab)、bivatuzumab mertansine、莫坎妥珠單抗（cantuzumab mertansine)、西 利珠單抗（cede I i zumab )、培舍珠單抗（certol i zumab pego I)、c idf us i tuzumab、 cidtuzumab、達(dá)克珠單抗（dacl izumab )、依庫(kù)珠單抗（ecul izumab )、依法珠單抗 (efalizumab )、依帕珠單抗（epratuzumab )、厄利珠單抗（er Iizumab )、非維珠單抗 (f e Ivi zumab )、芳妥珠單抗（fontol i zumab )、吉妥珠單抗奧佐米星（gem tuzumab ozogamicin)、英妥珠單抗奧佐米星（inotuzumab ozogamicin)、伊匹木單抗（ipilimumab)、 拉貝珠單抗(Iabetuzumab)、林妥珠單抗(Iintuzumab)、馬妥珠單抗(matuzumab)、美泊利單 ir[(mepolizumab) N^ifl3^Jp-irL(motavizumab) NmotovizumabN^P'itki^Jp-iilCnatalizumab) n 尼妥珠單抗（nimotuzumab)、nolovizumab、numavizumab、ocre I izumab、奧馬珠單抗 (omalizumab)、i(^^lj3^Jp^jt(palivizumab)、if^；%3^Jp^jt(pascolizumab)、pecfusituzumab、 pectuzumab、培克珠單抗（pexeI izumab)、ral i vizumab、雷珠單抗（ranibizumab)、 代81；^丨2111]1&13、瑞利珠單抗(代81丨2111]1&13)、代85^丨2111]1&13、羅維珠單抗(1'0￥61丨2111]1&13)、盧利 珠單抗(ruplizumab)、西羅珠單抗(sibrotuzumab)、西利珠單抗(siplizumab)、索土珠單抗 (sontuzumab)、tacatuzumab tetraxetan、tadoci zumab、他利珠單抗（taI i zumab)、特非珠 單抗（tefibazumab)、托珠單抗（tocilizumab)、托利珠單抗(toralizumab)、tucotuzumab西 莫白介素 （tucotuzumab celmoleukin)、tucusi tuzumab、umavizumab、烏珠單抗 (111"1：0132111]^13)、優(yōu)特克單抗(118〖61^11111]^13)、維西珠單抗(>18；[112111]^13)，和抗白細(xì)胞介素-12(ABT_874/J695,Wyeth Research and Abbott Laboratories)，其為經(jīng)遺傳修飾以識(shí)別 白細(xì)胞介素-12p40蛋白的重組專有人序列全長(zhǎng)IgGiA抗體。
[0108]化療劑還包括"EGFR抑制劑"，其指結(jié)合EGFR或以其他方式直接與EGFR相互作用并 抑制或降低其信號(hào)傳導(dǎo)活性的化合物，且其可替換地稱為"EGFR拮抗劑"。這種藥劑的實(shí)例 包括結(jié)合EGFR的抗體和小分子。結(jié)合EGFR的抗體的實(shí)例包括MAb579(ATCC CRL HB8506)、 MAb455(ATCC CRL HB8507)、MAb225(ATCC CRL8508)、MAb528(ATCCCRL8509)(參見美國(guó)專利 號(hào)4,943，533 ,Mendelsohn等人）及其變體諸如嵌合的2 25 ( C225或西妥昔單抗； ERBUT[XV_)和重構(gòu)的人225(H225)(參見W096/40210, Imclone Systerms Inc.) ;MC- 11F8，其為完全的人EGFR靶向抗體（Imc I one);結(jié)合II型突變體EGFR的抗體(美國(guó)專利號(hào)5， 212，290);結(jié)合EGFR的人源化和嵌合抗體，如美國(guó)專利號(hào)5，891，996中所述；和結(jié)合EGFR的 人抗體，諸如ABX-EGF或帕尼單抗（Panitumumab)(參見W098/50433 ,Abgenix/Amgen); EMD55900(Stragliotto等人，Eur · J · Cancer 32A: 636-640(1996)); EMD7200(matuzumab)， 其為針對(duì)EGFR且與EGF和TGF-α競(jìng)爭(zhēng)EGFR結(jié)合的人源化EGFR抗體(EMD/Merck);人EGFR抗體， HuMax-EGFR(GenMab);稱為El · 1、Ε2 · 4、E2 · 5、E6 · 2、Ε6 · 4、E2 · 11、E6 · 3和E7 · 6 · 3且描述在6， 235，883中的完全人抗體;MDX-447 (Medarex Inc);和mAb806或人源化mAb806(Johns等人， J. Biol. Chem. 279(29): 30375-30384(2004))?？笶GFR抗體可與細(xì)胞毒性劑偶聯(lián)，由此產(chǎn)生 免疫偶聯(lián)物(參見例如EP659,439A2，Merck Patent GmbH) AGFR拮抗劑包括小分子，諸如美 國(guó)專利號(hào) 5,616,582、5,457，105、5,475,001、5,654,307、5,679,683、6,084,095、6,265， 410、6,455,534、6,521，620、6,596,726、6,713,484、5,770,599、6，140,332、5,866,572、6， 399,602、6,344,459、6,602,863、6,391，874、6,344,455、5,760,041、6,002,008和5,747， 498 以及下列 PCT 公開 W098/14451、W098/50038、W099/09016 和 W099/24037 中所述的化合物。 具體的小分子EGFR拮抗劑包括0SI-774(CP-358774,厄洛替尼（erlotinib)，TARCEVA@ (Genentech/OSI Pharmaceuticals) ;PD 183805(CI1033,2-丙烯酰胺，N-[4-[ (3-氯-4-氟 苯基)氨基]-7_[3-(4-嗎啉基)丙氧基]-6-喹唑啉基]-，二鹽酸鹽，Pfizer Inc.);ZD1839、 吉非替尼(丨RESSAr)4-(3'_氯-4'-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(3-嗎啉代丙氧基）喹唑琳， Zeneca) ;ZM105180( (6-氨基-4-(3-甲基苯基-氨基）-喹唑啉，Zeneca) ;BIBX-1382(N8-(3-氯-4-氟-苯基）-N2-( 1-甲基-哌啶-4-基）-嘧啶并[5，4-d]嘧啶-2，8-二胺，Boehringer 1即611^加）；？1(1-166((1〇-4-[4-[(1-苯基乙基)氨基]-1!1-吡略并[2,3-(1]嘧啶-6-基]-苯 酚）；（R)-6-(4-羥基苯基)-4-[(l-苯基乙基)氨基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶）；CL-387785 (N-[4-[(3-溴苯基)氨基]-6-喹唑啉基]-2-丁炔酰胺）；EKB-569(N-[4-[(3-氯-4-氟苯基） 氨基]-3-氰基-7-乙氧基-6-喹啉基]-4-(二甲氨基）-2-丁烯酰胺）（Wyeth );AG1478 (Pfizer) ;AG1571(SU 5271 ;Pfizer);雙重EGFR/HER2酪氨酸激酶抑制劑諸如拉帕替尼 (1&?&衍1^)(丁丫1(1^1^仰1(572016或1[3-氯-4-[(3-氟苯基）甲氧基]苯基]-6[5[[[2-甲基磺?；┮一鵠氨基]甲基]-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺）。
[0109] 化療劑還包括"酪氨酸激酶抑制劑"，其包括前文中提到的EGFR靶向藥物；小分子 HER2酪氨酸激酶抑制劑，諸如可從Takeda獲得的TAK165; CP-724，714，其為一種口服ErbB2 受體酪氨酸激酶選擇性抑制劑(Pfizer和OSI);優(yōu)先結(jié)合EGFR但抑制HER2和EGFR過(guò)表達(dá)細(xì) 胞的雙重HER抑制劑，諸如EKB-569(可從Wyeth獲得）；拉帕替尼（Iapatinib) (GSK572016;可 從Glaxo-SmithKline獲得），其為一種口服HER2和EGFR酪氨酸激酶抑制劑；PKI-166(可從 Novartis獲得）；pan_HER抑制劑，諸如canertinib(Cl-1033;Pharmacia);Raf-I抑制劑，如 可從ISIS Pharmaceuticals獲得的、抑制Raf-I信號(hào)傳導(dǎo)的反義藥劑ISIS-5132;非-HER靶 向TK抑制劑，諸如甲磺酸伊馬替尼（GLEEVEC'可從Glaxo SmithKline獲得）；多靶標(biāo)酪 氨酸激酶抑制劑諸如舒尼替尼（SUTENT?，可從Pfizer獲得）；VEGF受體酪氨酸激酶抑制 劑諸如瓦他拉尼（vatalanib)(PTK787/ZK222584,可從Novartis/Schering AG獲得）；MAPK 胞外調(diào)控激酶I抑制劑Cl_1040(可從Pharmacia獲得）；喹唑啉類，諸如Η)153035,4-(3-氯苯 胺基)喹唑啉；吡啶并嘧啶類;嘧啶并嘧啶類;吡咯并嘧啶類，諸如CGP 59326、CGP 60261和 CGP 62706;吡唑并嘧啶類，4-(苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶類;姜黃素（二阿魏酰甲 烷，4,5-雙（4-氟苯胺基）-酞酰亞胺）；含丨 7印11〇#丨11^的硝基噻吩部分；？0-0183805 (Warner-Lamber);反義分子(例如那些與編碼HER的核酸結(jié)合的反義分子）；喹喔啉類(美國(guó) 專利號(hào)5,804,396) ;tryphostins(美國(guó)專利號(hào)5,804,396);206474(48讓&26116〇3) ;?1'1(-787(Novartis/Schering AG); pan-HER抑制劑諸如 Cl-1033(Pfizer);Affinitac (ISIS3521; Isis/Lilly);甲磺酸伊馬替尼(GLEEVEC_() ;PKI 166(Novartis) ;GW2016 (Glaxo SmithKline)；CI-1033(Pfizer)；EKB-569(Wyeth)；Semaxinib(Pfizer)；ZD6474 (Astra Zeneca) ;PTK-787(Novartis/Schering AG); INC-lCll(Imclone)，雷帕霉素（西羅 莫司，RAPAMUNE? );或下列任何專利公開中所描述的藥劑：美國(guó)專利號(hào)5，804,396; W01999/09016(American Cyanamid)；W01998/43960(American Cyanamid)；W01997/38983 (Warner Lambert)；W01999/06378(ffarner Lambert)；W01999/06396(ffarnerLambert)； W01996/30347(Pfizer，Inc);W01996/33978(Zeneca);W01996/3397(Zeneca)和W01996/ 33980(Zeneca)〇
[0110] 化療劑還包括地塞米松、干擾素、秋水仙素、氯苯氨啶(metoprine)、環(huán)孢菌素、兩 性霉素、甲硝挫、阿侖單抗(&1611^1121111^13)、阿利維八酸(31；^代丨；!_110；!_11)、別卩票呤醇、氨磷汀、 三氧化二砷、天冬酰胺酶、活卡介苗（BCG live)、貝伐單抗（bevacuzimab)、貝沙羅汀 (bexarotene)、克拉屈濱(cladribine)、氯法拉濱(clofarabine)、c[達(dá)貝泊汀(darbepoetin alfa)、地尼白介(deniIeukin)、右雷佐生(dexrazoxane)、α依伯?。╡poetin alfa)、厄洛替 尼（elotinib)、非格司亭(filgrastim)、乙酸組氨瑞林(histrelin acetate)、替伊莫單抗 (ibri tumomab )、干擾素 a-2a、干擾素 a-2b、來(lái)那度胺（Ienalidomide)、左旋咪挫 (Ievamisole)、美司鈉（mesna)、甲氧沙林（methoXsaIen)、諾龍（nandrolone)、奈拉濱 (nelarabine )、若莫單抗(nofetumomab )、奧普瑞白介素（opreIvekin)、pal if ermin、帕米 (pam i dr οna t e )、甲氧聚乙二醇琥拍酰胺腺苷脫氨酶（p e gadema s e )、培門冬酶 (pegaspargase)、培非司亭（pegfiIgrastim)、培美曲塞二鈉 （pemetrexed disodium)、普卡 霉素（plicamycin)、卟吩姆鈉 （porf imer sodium)、奎納克林（quinacrine)、拉布立酶 (quinacrine)、沙格司亭（sargramostim)、替莫挫胺（temozolomide)、VM_26、6_TG、托瑞米 芬（tor emifene)、維甲酸（tretinoin)、ATRA、戊柔比星（va lrubi c in)、挫來(lái)膦酸鹽 (zoledronate)和挫來(lái)膦酸(zoledronic acid)，及其藥學(xué)上可接受的鹽D
[0111] 化療劑還包括氫化可的松、乙酸氫化可的松、乙酸可的松、戊酸替可的松新 (t ixocortol pivalate)、曲安奈德（triamcinolone acetonide)、曲安西龍酉享 (triamcinolone alcohol )、莫米松（mometasone)、安西縮松（amcinonide)、布地奈德 (budesonide)、地奈德(desonide)、氣輕松乙酸酯（f Iuocinonide)、氣輕松（f Iuocinolone acetonide)、倍他米松（betamethasone)、倍他米松磷酸鈉 （betamethasone sodium phosphate)、地塞米松（dexamethasone)、地塞米松磷酸鈉 （dexamethasone sodium phosphate)、氣可龍（f luocorto lone)、氫化可的松-17-丁酸酯（hydro cortisone-17-butyrate)、氫化可的松-17-戊酸酯(hydrocortisone-17-valerate)、阿氯米松二丙酸酯 (aclometasone dipropionate)、倍他米松戊酸酯（betamethasone valerate)、倍他米松二 丙酸酯（betamethasone di propionate )、潑尼松（prednicarbate)、氯倍他松-17-丁酸酯 ((31(^6七&80116-17-131^7從七6)、氯倍他索-17-丙酸酯（(31(^6七&8〇1-17-。1'(^；!_011&七6)、己酸氣 可龍(fluocortolone caproate)、特戊酸氣可龍(fluocortolone pivalate)和乙酸氣潑尼 定(f luprednidene acetate);免疫選擇性抗炎癥肽（ImSAID)諸如苯丙氨酸-谷氨酰胺-甘 氨酸(FEG)及其D-異構(gòu)體形式(feG)aMULAN BioTherapeuticS，LLC);抗風(fēng)濕藥諸如硫唑嘌 呤、環(huán)孢素（環(huán)孢素 A)、D-青霉胺、金鹽、羥氯喹、來(lái)氟米特（lef lunomide)米諾環(huán)素 (minocycline)、柳氮磺胺啦啶(sulfasalazine)、腫瘤壞死因子a(TNFa)阻斷劑諸如依那西 普（etanercept) (Enbrel)、英利昔單抗（infliximab) (Remicade)、阿達(dá)木單抗 (adalimumab) (Humira) ^certolizumab pegoI (Cimz ia)、戈利木單抗（gol imumab) (Simponi )、白細(xì)胞介素 I(IL-I)阻斷劑諸如阿那白滯素(anakinra) (Kineret)、T細(xì)胞共刺 激阻斷劑諸如阿貝西普（Orencia)、白細(xì)胞介素6 (IL-6)阻斷劑諸如托珠單抗 (t〇ciliZUmab)(ACTEMERA?);白細(xì)胞介素 13(IL-13)阻斷劑諸如lebrikizumab;干擾素 a (IFN)阻斷劑諸如Rontalizumab ;β7整合素阻斷劑諸如rhuMAbP7; IgE通路阻斷劑諸如抗-ΜΓ ;分泌的同源三聚體LTa3和膜結(jié)合異源三聚體LTal/f32阻斷劑諸如抗-淋巴毒素 a(LTa); 放射性同位素(例如△#11、1131、1125、￥9()、1^ 186、1^188、3111153、81212、？ 32、？13212和1^的放射性同位 素）；各類研究性藥劑諸如也1叩1&^11、？5-341、丁酸苯酯41'-18-0〇1 3或法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制 劑(L-739749、L-744832);多酚諸如槲皮素、白藜蘆醇、白皮杉醇、表沒食子兒茶素沒食子酸 酯（epigal locatechine gal late)、茶黃素、黃燒醇、原花青素、白樺脂酸及其衍生物；自吞 噬抑制劑諸如喹J-9-四氫大麻酚（屈大麻酚，MARINOLx ) ;β-拉帕醌（beta-lapachone);拉帕醇（Iapachol);秋水仙素;樺木酸；乙酰喜樹堿、scopolectin和9_氨基喜 樹堿）；鬼臼毒素；替加氟（t e g a f u r ) (UF TO R A LK);仿薩羅?。?b e x a r o t e n e ) (TARGRETIN?);雙膦酸鹽諸如氯膦酸鹽(例如BONEFOS?或OSTAC?')、依替膦酸鈉 (DIDROCAL?)、N E - 5 8 0 9 5、唑來(lái)膦酸/唑來(lái)膦酸鹽(ZOMETA?1)、阿侖膦酸鈉 (FOSAMAX?)、帕米膦酸二鈉（pamidr 〇nate)(AREDIA?)、替魯膦酸鈉（tiludronate) iSKELID?：)或利塞膦酸鈉(riSedr〇nate)(ACTONELK);和表皮生長(zhǎng)因子受體(EGF-R); 疫苗諸如THERATOPE?疫苗；哌立福辛（perif〇sine)、C0X-2抑制劑（例如塞來(lái)昔布 (celecoxib)或依托昔布（etoricoxib))、蛋白酶體抑制劑（例如PS341);CCI_779; 1^卩11^1']1113(1?11577);(^&1^11；[13、厶131510;13(31-2抑制劑諸如奧利默森鈉（0131;[1116^611 sodium)(GET\TASENSEK);pixantrone;法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑諸如onafarnib(SCH 6636， SARASAR?)和上述任何的藥學(xué)上可接受的鹽、酸或衍生物；以及兩種或多種上述藥劑的組 合，諸如CHOP(環(huán)磷酰胺、阿霉素、長(zhǎng)春新堿和潑尼松龍組合療法的縮寫）；和F0LF0X(奧沙利 鉑(ELOXATIN?)與5-FU和亞葉酸鈣組合的治療方案的縮寫）。
[0112] 化療劑還包括具有鎮(zhèn)痛、解熱和抗炎作用的非留體類抗炎藥。NSAID包括環(huán)氧合酶 的非選擇性抑制劑。NSAID的具體實(shí)例包括阿司匹林;丙酸衍生物諸如布洛芬（ibuprofen)、 非諾洛芬（fenoprofen)、酮洛芬（ketoprofen)、氟比洛芬（flurbiprofen )、奧沙普秦 (oxaprozin)和萘普生（naproxen);乙酸衍生物諸如吲噪美辛（indomethacin)、舒林酸 (8111；[11(^0)、依托度酸(61：0(10130)、雙氯芬酸((1；[01(^61^0) ;稀醇酸衍生物諸如炎痛昔康 (piroxicam)、美洛昔康(meloxicam)、替諾昔康(tenoxicam)、屈噁昔康(droxicam)、氯諾昔 康（Iornoxicam)和伊索昔康（isoxicam);滅酸衍生物諸如甲芬那酸(mefenamic acid)、甲 氯芬那酸（meclofenamic acid)、氣芬那酸（f lufenamic acid)、托芬那酸（tolfenamic acid);和⑶X-2抑制劑諸如塞來(lái)昔布（celecoxib)、依托昔布（eto;ricoxib)、羅美昔布 (Iumiracoxib)、帕瑞昔布(parecoxib)、羅非昔布(rofecoxib)、羅非昔布(rofecoxib)和伐 地昔布(valdecoxib) ASAID可適用于病況的癥狀性緩解，諸如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、炎 性關(guān)節(jié)病、強(qiáng)直性脊柱炎、銀肩病關(guān)節(jié)炎、萊特爾氏綜合征(Reiter ' s syndrome)、急性痛 風(fēng)、痛經(jīng)、轉(zhuǎn)移性骨痛、頭痛和偏頭痛、手術(shù)后疼痛、由于炎癥和組織損傷的輕度至中度疼 痛、發(fā)熱、腸梗阻和腎絞痛。
[0113] 術(shù)語(yǔ)"PD-1軸結(jié)合詰抗劑"是抑制PD-I軸結(jié)合伴侶與一種或多種其結(jié)合伴侶的相 互作用的分子，進(jìn)而去除由對(duì)ro-ι信號(hào)傳導(dǎo)軸上的信號(hào)導(dǎo)致的T-細(xì)胞功能障礙一結(jié)果將恢 復(fù)或增強(qiáng)T-細(xì)胞功能(例如增殖、細(xì)胞因子產(chǎn)生、靶細(xì)胞殺傷）。如本文使用，PD-I軸結(jié)合拮 抗劑包括ro-ι結(jié)合拮抗劑、PD-Ll結(jié)合拮抗劑和ro-L2結(jié)合拮抗劑。
[0114] 術(shù)語(yǔ)"PD-1結(jié)合拮抗劑"是減少、阻斷、抑制、廢除或干擾由ro-i與一種或多種其結(jié) 合伴侶諸如roLl、PDL2的相互作用導(dǎo)致的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子。在一些實(shí)施方案中，所述ro-Ι結(jié) 合拮抗劑是抑制PD-I與其結(jié)合伴侶結(jié)合的分子。在特定的方面中，所述PD-I結(jié)合拮抗劑抑 制PD-I與PDLl和/或PDL2的結(jié)合。例如，PD-I結(jié)合拮抗劑包括抗-PD-I抗體、其抗原結(jié)合片 段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽和其他減少、阻斷、抑制、廢除或干擾由PD-I與PDLl和/或 PDL2相互作用導(dǎo)致的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子。在一個(gè)實(shí)施方案中，PD-I結(jié)合拮抗劑減少通過(guò)Η)-1 減少陰性共刺激信號(hào)介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)進(jìn)而賦予功能障礙性T-細(xì)胞較少的功能障礙(例如， 增強(qiáng)對(duì)抗原識(shí)別的效應(yīng)響應(yīng)），其中所述陰性共刺激信號(hào)由或通過(guò)表達(dá)在T淋巴細(xì)胞上的細(xì) 胞表面蛋白介導(dǎo)。在一些實(shí)施方案中，所述F1D-I結(jié)合詰抗劑是抗-PD-I抗體。在特定方面中， ro-Ι結(jié)合拮抗劑是本文所述的納武單抗(nivolumab)(也稱為MDX-1106-04、MDX-1106、0N0- 4538、BMS-936558和OPDIVOk )。在另一特定方面中，PD-I結(jié)合拮抗劑是本文所述的哌姆 單抗(pembrolizumab)(也稱為MK-3475、Merck SATSUCEYTRUDA、和§〇1-900475)。在另 一特定方面中，PD-I結(jié)合拮抗劑是本文所述的CT-OlU也稱為hBAT或hBAT-Ι)。在另一特定 的方面中，PD-I結(jié)合拮抗劑是本文所述的AMP-224(也稱為B7-DCIg)。
[0115]術(shù)語(yǔ)"PDLl結(jié)合拮抗劑〃是減少、阻斷、抑制、廢除或干擾由TOLl與一種或多種其結(jié) 合伴侶諸如ro-l、B7-l的相互作用導(dǎo)致的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子。在一些實(shí)施方案中，PDL-I結(jié)合 拮抗劑是抑制roL-1與其結(jié)合伴侶結(jié)合的分子。在特定的方面中，PD-I結(jié)合拮抗劑抑制TOLl 與ro-Ι和/或B7-1的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，PDLl結(jié)合拮抗劑包括抗-PDLl抗體、其抗原結(jié) 合片段、免疫粘附素、融合蛋白、寡肽和其他減少、阻斷、抑制、廢除或干擾由PDLl與一種或 多種其結(jié)合伴侶諸如如Η)-1、Β7-1的相互作用導(dǎo)致的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子。在一個(gè)實(shí)施方案中， rou結(jié)合拮抗劑減少通過(guò)roL-1減少陰性共刺激信號(hào)介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)進(jìn)而賦予功能障礙性 T-細(xì)胞較少的功能障礙(例如，增強(qiáng)對(duì)抗原識(shí)別的效應(yīng)響應(yīng)），其中所述陰性共刺激信號(hào)由 或通過(guò)表達(dá)在T淋巴細(xì)胞上的細(xì)胞表面蛋白介導(dǎo)。在一些實(shí)施方案中，PDLl結(jié)合拮抗劑是 抗-PDLl抗體。在特定的方面中，抗-PDLl抗體是本文所述的YW243.55. S70。在另一特定的方 面中，抗-PDLl抗體是本文所述的MDX-1105(也稱為BMS-936559)。在另一特定的方面中，抗_ PDLl抗體是本文所述的MPDL3280A。在另一特定的方面中，抗-PDLl抗體是本文所述的 MEDI4736。
[0116] 術(shù)語(yǔ)〃 PDL2結(jié)合拮抗劑〃是減少、阻斷、抑制、廢除或干擾由PD-L2與一種或多種其 結(jié)合伴侶諸如ro-Ι的相互作用導(dǎo)致的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子。在一些實(shí)施方案中，PD-L2結(jié)合拮抗 劑是抑制ro-L2與其結(jié)合伴侶結(jié)合的分子。在特定的方面中，PD-L2結(jié)合拮抗劑抑制ro-L2與 ro-Ι的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，PD-L2拮抗劑包括抗-PD-L2抗體、其抗原結(jié)合片段、免疫粘 附素、融合蛋白、寡肽和其他減少、阻斷、抑制、廢除或干擾由TO-L2與一種或多種其結(jié)合伴 侶諸如ro-Ι的相互作用導(dǎo)致的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子。在一個(gè)實(shí)施方案中，PD-L2結(jié)合拮抗劑減少 通過(guò)PD-L2減少陰性共刺激信號(hào)介導(dǎo)的信號(hào)進(jìn)而賦予功能障礙性T-細(xì)胞較少的功能障礙 (例如，增強(qiáng)對(duì)抗原識(shí)別的效應(yīng)響應(yīng)），其中所述陰性共刺激信號(hào)由或通過(guò)表達(dá)在T淋巴細(xì)胞 上的細(xì)胞表面蛋白介導(dǎo)。在一些實(shí)施方案中，PD-L2結(jié)合拮抗劑是免疫粘附素。
[0117] 除非本文另外表明，本文記載的數(shù)值范圍僅意在作為單獨(dú)指代每個(gè)單獨(dú)落入該范 圍的不同值的簡(jiǎn)寫方法，且如果在本文中單獨(dú)記載，則每個(gè)不同的值都并入本說(shuō)明書中。
[0118] 本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以理解的是，本文〃約〃某值或參數(shù)的提述包括(并描述)針對(duì) 值或參數(shù)本身的實(shí)施方案。例如，"約X"的表述包括"X"的表述。
[0119] 除非在本文另外表明或在上下文中明顯不符，否則本發(fā)明所述的實(shí)施方案上下文 中術(shù)語(yǔ)"一種"和"一個(gè)"及"所述"以及相似術(shù)語(yǔ)的使用應(yīng)理解為包括單數(shù)和復(fù)數(shù)形式。除非 另外表明，術(shù)語(yǔ)"包含"、"具有"、"包括"和"含有"應(yīng)理解為開放式術(shù)語(yǔ)(即意為"包括但不限 于"）?？梢岳斫獾氖潜疚乃龅谋景l(fā)明的方面和實(shí)施方案包括〃組成〃和/或〃基本上組成" 的方面和實(shí)施方案。
[0120] CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑的用途
[0121] 本文提供了使用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑用于抑制CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域(體外或體內(nèi)）的方法。例如，本文提供了用于在個(gè)體中治療布羅莫結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的病癥的 方法，其包括施用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑至所述個(gè)體。在一些實(shí)施方案中，布羅莫 結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的病癥為癌癥。
[0122] 本文提供了在個(gè)體中用于治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的方法，其包括向個(gè)體施用有 效量的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域 抑制劑與CBP的布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制 劑與氨基酸序列SEQ ID N0:5的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合(UniProt No.Q9279的氨基酸殘基 1082-1197)。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與氨基酸序列SEQ ID N0:3的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合(UniProt No.Q92793的氨基酸殘基1103-1175)。在一些實(shí)施方 案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與EP300的布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合。在一些實(shí)施方案 中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與氨基酸序列SEQ ID N0:6的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合 (UniProt No. Q09472的氨基酸殘基1040-1161)。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫 結(jié)構(gòu)域抑制劑與氨基酸序列SEQ ID NO:4的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合(UniProt No.Q09472的氨 基酸殘基1067-1139)。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與EP300的 布羅莫結(jié)構(gòu)域和CBP的布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域抑制劑結(jié)合SEQ ID N0:5和SEQ ID N0:6。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域抑制劑結(jié)合SEQ ID N0:3和SEQ ID N0:4。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域抑制劑抑制和/或減少CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域與染色質(zhì)的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所 述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑不抑制CBP/EP300的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶活性。
[0123] 此外，本文提供了在具有癌癥的個(gè)體中增強(qiáng)免疫功能的方法，其包括施用有效量 的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制 劑與CBP的布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與 SEQ ID N0:3氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅 莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與SEQ ID NO: 5氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所 述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與EP300的布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述 CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與SEQ ID N0:4的氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合。在一 些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與SEQ ID N0:6的氨基酸序列的一個(gè)或 多個(gè)殘基結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與EP300的布羅莫 結(jié)構(gòu)域和CBP的布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制 劑結(jié)合SEQ ID NO: 5和SEQ ID NO:6。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制 劑結(jié)合SEQ ID NO: 3和SEQ ID NO:4。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制 劑抑制和/或減少CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域與染色質(zhì)的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/ EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑不抑制CBP/EP300的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶活性。
[0124] 在任何方法的一些實(shí)施方案中，個(gè)體中各⑶8T細(xì)胞相比施用CBP/EP300布羅莫結(jié) 構(gòu)域抑制劑前具有增強(qiáng)的致敏、活化、增殖和/或殺傷活性。在一些實(shí)施方案中，CD8 T細(xì)胞 的數(shù)目相對(duì)施用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑前有所增加。在一些實(shí)施方案中，CD8 T細(xì) 胞相對(duì)施用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑前具有減少的一種或多種下列生物標(biāo)志物的表 達(dá)水平：IFNA17、IGFl、FSCNl、SUM02、Clorf!29、EIF2S2、TDGFl、AIDA、CCR4、CD160、MC4R、 KRTAP2-2、MT1JP、0R4N2、KRTAP4-5、MT1L//MT1L、IL13、LCE1D、KIR2DL2、L0C158696、LIF、 IL28A、TAS2R13、CTLA4和/或F0XP3。在一些實(shí)施方案中，CD8 T細(xì)胞相對(duì)施用CBP/EP300布羅 莫結(jié)構(gòu)域抑制劑前具有減少的⑶160和/或KIR2DL2表達(dá)水平。
[0125] 在任何方法的一些實(shí)施方案中，增強(qiáng)的免疫功能由相對(duì)施用CBP/EP300布羅莫結(jié) 構(gòu)域抑制劑前個(gè)體中（例如在一個(gè)或多個(gè)腫瘤位點(diǎn)）的Treg細(xì)胞具有減少的一種或多種下 列標(biāo)志物的表達(dá)水平表征：IL28A、GPR87、ANKRD37、CABLES1、RAPGEF2、TRIM69、MT1L//MT1L、 FAM113B、F0XP3、CSF2、0CM2、GLIPR1、FGFBP2、CTLA4、CST7、G0LGA6L1、IFIT3、FAM13A、AP0D、 AK2、CLDNl、HSD11BI、DNAJC12、PHEX、IL2、F0XD4L3、GNA15、ZBTB3 2、RDHl0、0R5 2E5、CYP2A6、 GZMH、CCL20、ADM、L0C100131541、RNF122、FAM36A、AMY2B、GPR183、MY0F、IL29、AIDA、SPRY1、 ENOPHl、IL1RN、SLAMFl、PGM2L1、SSBP3、MMP23B、HIST1H3J、MY01B、BEND5、SlPRl、CDK6、 GPR56、ZC3H12A、D0K5、DUSP1、CYB5R2、KCNAB2、LAG3、KLF10、GK、SHC4、IL12RB2、CD109、 HAVCR2(TIM-3)、LTA、FAM40B、HMGCS1、HSPA1A、ZNF705A、CMAH、KIF3A、CHN1、KBTBD8、TNF、 MOP-1、RASGRP4、INSIGl、SLAMF7、0R10H4、LPL、HIST1H2BJ、LIF、IGF1、IL18RAP、0R52N4、 0R1D2、CCR4、CXCR5、IL1R1、MICAL2、NRN1、PICALM、B3GNT5、IFI44L、CXCR3、K0S、IFIT2、 NCR3、HSPAlB、CD80、GNG2、C7orf68、GPR171、RPS10P7、IL23A、L0C283174、PLK2、EMPl、 FNBPlL、CD226、RBMS3、IL23R、PTGER4、GZMB、F5和/或HISTlH2BK。在一些實(shí)施方案中，Treg細(xì) 胞生物標(biāo)志物是LAG3、CTLA4和/或F0XP3中的一種或多種。
[0126] 在任何方法的一些實(shí)施方案中，增強(qiáng)的免疫功能由Treg細(xì)胞存在的對(duì)⑶3/⑶28刺 激增強(qiáng)的未受過(guò)攻擊的T細(xì)胞響應(yīng)表征。
[0127] 在一些實(shí)施方案中，CD8 T細(xì)胞致敏由增加的T細(xì)胞增殖和/或CD8 T細(xì)胞中增強(qiáng)的 殺傷活性表征。在一些實(shí)施方案中，CD8 T細(xì)胞活化由升高的Y-IFN+CD8 T細(xì)胞頻率表征。 在一些實(shí)施方案中，CD8 T細(xì)胞是抗原特異性T-細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，抑制了免疫規(guī)避。
[0128] 本文提供的方法可用于治療其中預(yù)期用于治療癌癥的增強(qiáng)的免疫原性諸如增強(qiáng) 的腫瘤免疫原性的病況。例如，本文提供可用于增強(qiáng)T細(xì)胞功能向上調(diào)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫響應(yīng) 和用于治療T細(xì)胞功能障礙性病癥、腫瘤免疫力的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑。在一些 實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑通過(guò)在慢性刺激的CD8+T細(xì)胞上抑制調(diào)節(jié)性T (Treg)細(xì)胞和/或緩解T細(xì)胞衰竭的抑制性功能促進(jìn)抗腫瘤免疫力。
[0129] CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑可進(jìn)一步用于減少額外的胸腺Treg細(xì)胞分化過(guò)程 中Foxp3的表達(dá)。持續(xù)的Foxp3表達(dá)對(duì)于在Treg細(xì)胞中維持抑制活性至關(guān)重要。在一些實(shí)施 方案中，通過(guò)CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域的減少的Foxp3表達(dá)破壞了Treg細(xì)胞的抑制活性并刺 激腫瘤的抗免疫力。Treg細(xì)胞在源自多種癌癥適應(yīng)癥的腫瘤中富集，其包括黑素瘤、NSCLC、 腎癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、肝細(xì)胞癌和乳腺癌。在這些適應(yīng)癥的亞組中，增加的腫瘤內(nèi) Treg細(xì)胞密度與患者的不良預(yù)后相關(guān)。這些適應(yīng)癥包括NSCLC、卵巢癌、胰腺癌、肝細(xì)胞癌和 乳腺癌。預(yù)測(cè)CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑在這些癌癥適應(yīng)癥中可破壞腫瘤內(nèi)Treg細(xì)胞 功能以增強(qiáng)效應(yīng)T細(xì)胞活性。
[0130] T細(xì)胞衰竭由不存在抗原清除的慢性CD8+T細(xì)胞刺激表征。與未受過(guò)攻擊的或活化 的效應(yīng)T細(xì)胞相比，衰竭的T細(xì)胞由于增加的抑制性受體(包括PD-I、LAG-3和??Μ-3)的表達(dá) 對(duì)T細(xì)胞受體刺激耐受。阻斷這些抑制性受體的拮抗性抗體緩解T細(xì)胞抑制，由此促進(jìn)腫瘤 細(xì)胞殺傷。CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑減少抑制性受體LAG-3和??Μ-3的表達(dá)。
[0131] 另一實(shí)施方案包括增加個(gè)體中癌癥治療(例如，癌癥治療包括第二治療劑)效力的 方法，其包括向個(gè)體施用有效量的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑。
[0132] 另一實(shí)施方案包括在個(gè)體中延長(zhǎng)對(duì)癌癥療法(例如第二治療劑）響應(yīng)持續(xù)時(shí)間的 方法，其包括向經(jīng)歷癌癥療法的個(gè)體施用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑，其中當(dāng)施用CBP/ EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽時(shí)，對(duì)癌癥療法的響應(yīng)持續(xù)時(shí)間相比未 施用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽對(duì)癌癥療法響應(yīng)的持續(xù)時(shí)間延 長(zhǎng)。
[0133] 另一實(shí)施方案包括在個(gè)體中治療癌癥的方法，其包括向個(gè)體施用(a)CBP/EP300布 羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑和(b)-種或多種第二治療劑。本文進(jìn)一步提供了在患有癌癥的個(gè)體中 延長(zhǎng)響應(yīng)持續(xù)時(shí)間的方法，其包括向個(gè)體施用(a)有效量的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑 和(b)有效量的一種或多種第二治療劑。在一些實(shí)施方案中，第二治療劑是細(xì)胞毒性劑和/ 或化療劑。在一些實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑和第二治療劑同時(shí)施用。在 一些實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑在一種或多種第二治療劑之前和/或與其 同時(shí)施用。在一些實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑和第二治療劑共同施用。在 一些實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑和第二治療劑共同配制。
[0134] 在組合療法的任何方法的一些實(shí)施方案中，一種或多種第二治療劑是阿侖單抗、 屈大麻酸、達(dá)利珠單抗、米托蒽醌、鹽酸扎利羅登（xaliproden)、氨吡啶、乙酸格拉替雷 (glatiramer acetate )、那他珠單抗、sinnabidol、immunokine NNSO3、ABR_215062、 AnergiX.MS、趨化因子受體拮抗劑、BBR-2778、卡拉古林（calagualine)、CPI-1189、LEM(月旨 質(zhì)體包封的米托蒽醌）、THC. CBD(大麻素激動(dòng)劑）、MBP-8298、mesopram(PDE4抑制劑）、MNA-715、抗-11^-6受體抗體、116111'〇￥&1、吡非尼酮（口;^€611丨(1〇116)&11〇1:抑口 1258(1^)?-1258)、 sTNF-Rl、他侖帕奈（talampanel)、特立氟胺（ter if Iunomide )、TGF-02、替利莫肽 (tiplimotide)、VLA_4詰抗劑（例如TR-I4O35、VLA 4Ultrahaler或Antegran-ELAN/Biogen)， 干擾素 γ拮抗劑或IL-4激動(dòng)劑。
[0135] 在組合療法的任何方法的一些實(shí)施方案中，一種或多種第二治療劑是T細(xì)胞信號(hào) 傳導(dǎo)抑制劑(例如酪氨酸激酶抑制劑)或靶向T細(xì)胞活化的分子(例如CTLA-4-IgG、抗Β7家族 抗體或抗ro-i家族抗體）。舉例來(lái)說(shuō)，在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的方法包括施用有 效量的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑和靶向T細(xì)胞活化的分子。此外，本發(fā)明提供了在患 有癌癥的個(gè)體中增強(qiáng)免疫功能的方法，其包括向所述個(gè)體施用有效量的CBP/EP300布羅莫 結(jié)構(gòu)域抑制劑和有效量的靶向T細(xì)胞活化的分子。在一些實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié) 構(gòu)域抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽和第二治療劑同時(shí)施用。在一些實(shí)施方案中，CBP/EP300 布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽和第二治療劑共同施用。在一些實(shí)施方案中， CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑在一種或多種第二治療劑之前和/或與其同時(shí)施用。在一些 實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其藥學(xué)上可接受的鹽和第二治療劑共同配 制。
[0136] 例如，本發(fā)明提供了使用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與PD-I軸結(jié)合拮抗劑組 合治療癌癥和/或延遲癌癥進(jìn)展的方法。本文還提供了在患有癌癥的個(gè)體中增強(qiáng)免疫功能 的方法，其包括向所述個(gè)體施用有效量的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑和有效量的ro-i 軸結(jié)合拮抗劑。ro-1軸結(jié)合拮抗劑包括PD-I結(jié)合拮抗劑、PDLl結(jié)合拮抗劑和PDL2結(jié)合拮抗 劑。"PD-?？商鎿Q的名稱包括CD279和SLEB2Z'PDL1"可替換的名稱包括B7-H1、B7-4、CD274 和B7-H。"H)L2"可替換的名稱包括B7-DC、Btdc和CD273。在一些實(shí)施方案中，PD-I、H)L1和 TOL2是人PD-UPDLl和TOL2。在一些實(shí)施方案中，PD-I結(jié)合拮抗劑是抑制Η)-1與其配體結(jié)合 伴侶結(jié)合的分子。在特定的方面中，PD-I配體結(jié)合伴侶是PDLl和/或PDL2。在另一實(shí)施方案 中，PDLl結(jié)合拮抗劑是抑制TOLl與其結(jié)合伴侶結(jié)合的分子。在特定的方面中，PDLl結(jié)合伴侶 是Η)-1和/或B7-1。在另一實(shí)施方案中，PDL2結(jié)合拮抗劑是抑制TOL2與其結(jié)合伴侶結(jié)合的分 子。在特定的方面中，pdl2結(jié)合伴侶是ro-i。拮抗劑可以是抗體、其抗原結(jié)合片段、免疫粘附 素、融合蛋白或寡肽。在一些實(shí)施方案中，PD-I結(jié)合拮抗劑是抗-PD-I抗體(例如人抗體、人 源化抗體或嵌合抗體）。在一些實(shí)施方案中，抗-PD-I抗體選自下組:納武單抗、哌姆單抗和 CT-011。在一些實(shí)施方案中，PD-I結(jié)合拮抗劑是免疫粘附素(例如包含與恒定區(qū)（例如免疫 球蛋白序列的Fc區(qū)）融合的TOLl或TOL2的胞外或PD-I結(jié)合部分的免疫粘附素。在一些實(shí)施 方案中，I 3D-I結(jié)合拮抗劑是AMP-224。納武單抗，也稱為MDX-1106-04、MDX-1106、0N0-4538、 BMS-936558和OPDIVOu,是描述于W02006/121168的抗PD-I抗體。哌姆單抗也稱為做-3475、Merck 3475、lambrol izumab、KEYTRUDA'K 和3(^-900475，是描述于W02009/ 114335 的抗 PD-I 抗體。CT-011，也稱為 hBAT 或 hBAT-Ι，是描述于 W02009/101611 的抗 PD-I 抗 體。AMP-224，也稱為 B7-DCIg，是描述于 W02010/027827 和 W02011/066342 的 PDL2-FC 融合可 溶性受體。在一些實(shí)施方案中，所述抗ro-Ι抗體是納武單抗(CAS注冊(cè)號(hào)：946414-94-4)。在 一些實(shí)施方案中，所述癌癥是黑素瘤、NSCLC和腎細(xì)胞癌。
[0137] 在組合療法的任何方法的一些實(shí)施方案中，一種或多種第二治療劑是IL-Il抗體、 抗細(xì)胞因子抗體(例如f ono to I i zumab (抗IFNg抗體））或抗-受體受體抗體(例如抗-I L-6受 體抗體或B細(xì)胞表面分子抗體）。
[0138] 在組合療法的任何方法的一些實(shí)施方案中，一種或多種第二治療劑是下列一種或 多種:LJP 394(阿貝莫司（abetimus))(其耗盡或滅活B-細(xì)胞(例如利妥昔單抗(Rituximab) (抗-CD20抗體)或Iymphostat-B(抗-BlyS抗體））、TNF詰抗劑(例如抗-TNF抗體）、D2E7(阿達(dá) 木單抗（3(1&1;[1]1111]1&13))、042(英利昔單抗（;[11；1^1丨1；[1]1&13))、00?571、1即1?-18構(gòu)建體、 (p75TNFRigG(依那西普（etanerc 印 t))或 p55TNFRigG(LENERCEPT?)。
[0139] 在組合療法的任何方法的一些實(shí)施方案中，一種或多種第二治療劑是靶向療法。 在一些實(shí)施方案中，所述靶向療法是一種或多種EGFR拮抗劑、RAF抑制劑和/或PI3K抑制劑。
[0140] 在組合療法的任何方法的一些實(shí)施方案中，所述靶向療法是EGFR拮抗劑。在任何 方法的一些實(shí)施方案中，所述EGFR拮抗劑是N-(3-乙炔基苯基)-6,7_二(2-甲氧基乙氧基)-4_喹唑啉胺和/或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一些實(shí)施方案中，所述EGFR拮抗劑是N-(3-乙炔 基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺。在一些實(shí)施方案中，所述EGFR拮抗劑是N-(4-(3-氟芐基氧基)-3-氯苯基)-6-(5-((2-(甲基磺?；┮一被┘谆?呋喃-2-基)喹唑 啉-4-胺、二-4-甲基苯磺酸鹽(例如拉帕替尼）。在任何方法的一些實(shí)施方案中，靶向療法是 RAF抑制劑。在一些實(shí)施方案中，所述RAF抑制劑是BRAF抑制劑。在一些實(shí)施方案中，所述RAF 抑制劑是CRAF抑制劑。在一些實(shí)施方案中，所述BRAF抑制劑是維羅非尼。在一些實(shí)施方案 中，所述RAF抑制劑是3-(2-氰基丙-2-基)-N-(4-甲基-3-(3-甲基-4-氧代-3，4_二氫喹唑 啉-6-基氨基)苯基)苯甲酰胺(例如AZ628(CAS#878739-06-l))。在任何方法的一些實(shí)施方 案中，所述靶向療法是PI3K抑制劑。
[0141] 在組合療法的任何方法的一些實(shí)施方案中，所述一種或多種第二治療劑是紫杉 烷。在一些實(shí)施方案中，所述紫杉烷是紫杉醇。在一些實(shí)施方案中，所述紫杉烷是多西紫杉 醇。在組合療法的任何方法的一些實(shí)施方案中，所述一種或多種第二治療劑是鉑制劑。在一 些實(shí)施方案中，所述鉑制劑是卡鉑。在一些實(shí)施方案中，所述鉑制劑是順鉑。在任何方法的 一些實(shí)施方案中，所述細(xì)胞毒性劑是紫杉烷和鉑制劑。在一些實(shí)施方案中，所述紫杉烷是紫 杉醇。在一些實(shí)施方案中，所述紫杉烷是多西紫杉醇。在一些實(shí)施方案中，所述鉑制劑是卡 鉑。在一些實(shí)施方案中，所述鉑制劑是順鉑。在組合療法的任何方法的一些實(shí)施方案中，所 述一種或多種第二治療劑是長(zhǎng)春花生物堿。在一些實(shí)施方案中，所述長(zhǎng)春花生物堿是長(zhǎng)春 瑞濱。在任何方法的一些實(shí)施方案中，所述化學(xué)療法是核苷類似物。在一些實(shí)施方案中，所 述核苷類似物是吉西他濱。在組合療法的任何方法的一些實(shí)施方案中，所述一種或多種第 二治療劑是放射治療。
[0142] 在一些實(shí)施方案中，治療可在一種或多種癥狀發(fā)展后施用。在其他實(shí)施方案中，治 療可在無(wú)癥狀時(shí)施用。例如，治療可施用至癥狀發(fā)作前的易感個(gè)體(例如按照癥狀史和/或 按照基因或其他易感因素）。治療還可在癥狀解決后持續(xù)，例如以預(yù)防或延遲癥狀復(fù)發(fā)。
[0143] 在任何方法的一些實(shí)施方案中，所述癌癥具有升高的T-細(xì)胞浸潤(rùn)水平。在任何方 法的一些實(shí)施方案中，所述癌癥與增加的腫瘤內(nèi)Treg細(xì)胞密度相關(guān)。在任何方法的一些實(shí) 施方案中，與參照相比，所述癌癥表達(dá)升高的一種或多種下列生物標(biāo)志物的水平：IL28A、 GPR87、ANKRD37、CABLES1、RAPGEF2、TRIM69、MT1L//MT1L、FAM113B、F0XP3、CSF2、0CM2、 GLIPRl、FGFBP2、CTLA4、CST7、G0LGA6L1、IFIT3、FAM13A、AP0D、AK2、CLDNl、HSD1IBl、 DNAJC12、PHEX、IL2、F0XD4L3、GNA15、ZBTB32、RDH10、0R52E5、CYP2A6、GZMH、CCL20、ADM、 L0C100131541、RNF122、FAM36A、AMY2B、GPR183、MY0F、IL29、AIDA、SPRY1、EN0PH1、IL1RN、 SLAMFl、PGM2L1、SSBP3、MMP23B、HIST1H3J、MY01B、BEND5、S1PR1、CDK6、GPR56、ZC3H12A、 D0K5、DUSPI、CYB5R2、KCNAB2、LAG3、KLF10、GK、SHC4、IL12RB2、CD109、HAVCR2(TIM-3)、LTA、 FAM40B、HMGCS1、HSPA1A、ZNF705A、CMAH、KIF3A、CHN1、KBTBD8、TNF、M0P-1、RASGRP4、INSIGl、 SLAMF7、0R10H4、LPL、HIST1H2BJ、LIF、IGF1、IL18RAP、0R52N4、0R1D2、CCR4、CXCR5、IL1R1、 MICAL2、NRN1、PICALM、B3GNT5、IFI44L、CXCR3、K0S、IFIT2、NCR3、HSPA1B、CD80、GNG2、 C7orf68、GPR171、RPS10P7、IL23A、L0C283174、PLK2、EMPl、FNBPlL、CD226、RBMS3、IL23R、 PTGER4、GZMB、F5和/或HIST1H2BK。在任何方法的一些實(shí)施方案中，與參照相比，所述癌癥表 達(dá)升高水平的一種或多種LAG3、CTLA4和/或F0XP3。在任何方法的一些實(shí)施方案中，與參照 相比，所述癌癥表達(dá)升高水平的一種或多種下列生物標(biāo)志物：IFNA17、IGF1、FSCN1、SUM02、 Clorfl29、EIF2S2、TDGFl、AIDA、CCR4、CD160、MC4R、KRTAP2-2、MTlJP、0R4N2、KRTAP4-5、 11'117/]\〇'比、11^13、1^^10、1(11?201^、11)(：158696、1^正、11^28厶、了厶521?13、(：1'1^4和/或卩(^?3。在 任何方法的一些實(shí)施方案中，與參照相比，所述癌癥包含CD8細(xì)胞，其中所述CD8細(xì)胞表達(dá)升 高水平的一種或多種下列生物標(biāo)志物：IFNA17、IGFl、FSCNl、SUM02、Clorfl29、EIF2S2、 TDGFl、AIDA、CCR4、CD160、MC4R、KRTAP2-2、MT1JP、0R4N2、KRTAP4-5、MT1L//MT1L、IL13、 1^^10、1(11?201^2、11)(：158696、1^?、11^284、了4521?13、(：1'1^4和/或？(^?3。在任何方法的一些實(shí) 施方案中，與參照相比，所述癌癥包含CD8細(xì)胞，其中所述CD8細(xì)胞表達(dá)升高的CD160和/或 KIR2DL2水平。在任何方法的一些實(shí)施方案中，所述參照是具有已知表達(dá)水平的的感興趣的 生物標(biāo)志物的細(xì)胞或組織。在任何方法的一些實(shí)施方案中，所述組織是具有低T細(xì)胞浸潤(rùn) 和/或低腫瘤內(nèi)Treg細(xì)胞密度的癌癥組織。
[0144] CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的病癥實(shí)例包括癌癥，其包括但不限于聽神經(jīng)瘤、急 性白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、急性髓細(xì)胞白血?。▎魏思?xì)胞性、成髓細(xì)胞性、腺癌、血 管肉瘤、星形細(xì)胞瘤、骨髓單細(xì)胞性和早幼粒細(xì)胞性）、急性T-細(xì)胞白血病、基底細(xì)胞癌、膽 管癌、膀胱癌、腦癌、乳腺癌癌、支氣管癌、子宮頸癌、軟骨肉瘤、脊索瘤、絨毛膜癌、慢性白血 病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性髓細(xì)胞性(粒細(xì)胞性）白血病、慢性骨髓性白血病、結(jié)腸癌、 結(jié)腸直腸癌、顱咽管瘤、囊腺癌、彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤、異常增殖性改變（發(fā)育異常和化 生）、胚胎癌、子宮內(nèi)膜癌、內(nèi)皮瘤、室管膜瘤、上皮癌、紅白血病、食道癌、雌激素受體陽(yáng)性乳 腺癌、原發(fā)性血小板增多癥、尤因氏瘤、纖維肉瘤、濾泡型淋巴瘤、生殖細(xì)胞睪丸癌、神經(jīng)膠 質(zhì)瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、膠質(zhì)肉瘤、重鏈病、成血管細(xì)胞瘤、肝癌、肝細(xì)胞癌、激素不敏感性前列 腺癌、平滑肌肉瘤、白血病、脂肪肉瘤、肺癌、淋巴管內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、成淋巴細(xì)胞白血 病，淋巴瘤(霍奇金與非霍奇金淋巴瘤）、膀胱、乳腺、結(jié)腸、肺、卵巢、胰腺、前列腺、皮膚和子 宮的惡性和過(guò)度增殖性病癥、T-細(xì)胞或B-細(xì)胞來(lái)源的淋巴惡性腫瘤、白血病、淋巴瘤、髓樣 癌、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、黑素瘤、腦膜瘤、間皮瘤、多發(fā)性骨髓瘤、髓細(xì)胞性白血病、骨髓瘤、粘 液肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、NUT中線癌(匪C)、非小細(xì)胞肺癌、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、口腔癌、骨源性 肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳頭狀腺癌、乳頭狀癌、松果體瘤、真性紅細(xì)胞增多癥、前列腺癌、直 腸癌、腎細(xì)胞癌、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、肉瘤、皮脂腺癌、精原細(xì)胞瘤、皮膚癌、小細(xì) 胞肺癌、實(shí)體瘤(癌和肉瘤）、小細(xì)胞肺癌、胃癌、鱗狀細(xì)胞癌、滑膜瘤、汗腺癌、甲狀腺癌、瓦 爾登斯特倫巨球蛋白血癥、睪丸腫瘤、子宮癌和維爾姆斯瘤。
[0145] 在任何方法的一些實(shí)施方案中，所述癌癥是肺癌、乳腺癌、胰腺癌、結(jié)腸直腸癌和/ 或黑素瘤。在一些實(shí)施方案中，所述癌癥是肺癌。在一些實(shí)施方案中，所述肺癌是NSCLC。在 一些實(shí)施方案中，所述癌癥是乳腺癌。在一些實(shí)施方案中，所述癌癥是黑素瘤。
[0146] 生物標(biāo)志物的存在和/或表達(dá)水平/量可以基于任何本領(lǐng)域已知的合適的標(biāo)準(zhǔn)定 性和/或定量確定，包括但不限于DNA、mRNA、cDNA、蛋白、蛋白片段和/或基因拷貝數(shù)。在一些 實(shí)施方案中，第一樣品中生物標(biāo)志物的存在和/或表達(dá)水平/量與第二樣品中的存在/不存 在和/或表達(dá)水平/量相比有所增加。在一些實(shí)施方案中，第一樣品中生物標(biāo)志物的存在/不 存在和/或表達(dá)水平/量相比第二樣品中的存在和/或表達(dá)水平/量有所減少。在一些實(shí)施方 案中，第二樣品是參照樣品、參照細(xì)胞、參照組織、對(duì)照樣品、對(duì)照細(xì)胞或?qū)φ战M織。本文描 述了其他用于確定基因存在/不存在和/或表達(dá)水平/量的內(nèi)容。
[0147] 在任何方法的一些實(shí)施方案中，升高的表達(dá)水平指與參照樣品、參照細(xì)胞、參照組 織、對(duì)照樣品、對(duì)照細(xì)胞或?qū)φ战M織相比，生物標(biāo)志物(例如蛋白或核酸(例如基因或mRNA)) 水平整體增加約 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、96%、97%、 98%、99%或更大中的任一種，其由本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法諸如本文所述的那些方法檢測(cè)。 在一些實(shí)施方案中，升高的表達(dá)指樣品中生物標(biāo)志物表達(dá)水平/量的增加，其中所述增加是 至少約參照樣品、參照細(xì)胞、參照組織、對(duì)照樣品、對(duì)照細(xì)胞或?qū)φ战M織中對(duì)應(yīng)的生物標(biāo)志 物的表達(dá)水平 / 量的 1.5X、1.75X、2X、3X、4X、5X、6X、7X、8X、9X、10X、25X、50X、75X，S100X* 的任一種。在一些實(shí)施方案中，升高的水平指與參照樣品、參照細(xì)胞、參照組織、對(duì)照樣品、 對(duì)照細(xì)胞、對(duì)照組織或內(nèi)部對(duì)照(例如管家基因）相比，整體增加多于約1.5倍、約1.75倍、約 2倍、約2.25倍、約2.5倍、約2.75倍、約3.0倍或約3.25倍。
[0148] 在任何方法的一些實(shí)施方案中，降低的表達(dá)指與參照樣品、參照細(xì)胞、參照組織、 對(duì)照樣品、對(duì)照細(xì)胞或?qū)φ战M織相比，生物標(biāo)志物（例如蛋白或核酸（例如基因或mRNA))水 平整體降低約 10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、96%、97%、98%、 99%或更大的任一種，其通過(guò)本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法諸如本文所述的那些方法檢測(cè)。在一 些實(shí)施方案中，降低的表達(dá)指樣品中生物標(biāo)志物表達(dá)水平/量的減少，其中所述減少是至少 約參照樣品、參照細(xì)胞、參照組織、對(duì)照樣品、對(duì)照細(xì)胞或?qū)φ战M織中對(duì)應(yīng)的生物標(biāo)志物的 表達(dá)水平/量的0.9父、0.8父、0.7父、0.6父、0.5父、0.4父、0.3父、0.2父、0.1父、0.05父或0.01父中的任 一種。
[0149] 樣品中多種生物標(biāo)志物的存在和/或表達(dá)可通過(guò)多種方法學(xué)分析，其中的許多為 本領(lǐng)域技術(shù)人員已知和理解，包括但不限于免疫組化（"IHC"）、蛋白免疫印跡分析、免疫沉 淀、分子結(jié)合測(cè)定、ELISA、ELIFA、熒光激活細(xì)胞分選（"FACS"）、MassARRAY、蛋白質(zhì)組學(xué)、基 于定量采血的測(cè)定(例如血清ELI SA )、生化酶活性測(cè)定、原位雜交、Southern分析、Northern 分析、全基因組測(cè)序、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（"PCR"）包括實(shí)時(shí)定量PCR( "qRT-PCR"）和其他擴(kuò)展類 型的檢測(cè)方法，例如分支DNA、SISBA、TMA等）、1?嫩-36卩^13!1、微陣列分析、基于表達(dá)分布和/ 或基因表達(dá)的連續(xù)分析（"SAGE"）以及多種可通過(guò)蛋白、基因和/或組織陣列分析實(shí)施的測(cè) 定中的任一種。例如在 Ausubel 等人，eds ·，1995，Current Protocol s In Molecular Biology,Units 2(Northern Blotting),4(Southern Blotting)，15(Immunoblotting)和 18(PCR Analysis)中發(fā)現(xiàn)了用于評(píng)價(jià)基因和基因產(chǎn)物狀態(tài)的典型方案。也可使用多重復(fù)合 免疫測(cè)定諸如可從Rules Based Medicine或Meso Scale Discovery("MSD"）獲得的那些。
[0150] 取決于治療的宿主和具體的施用模式，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽和 可與載體材料組合以產(chǎn)生單一劑量形式的額外藥劑(在包含如上文所述的其他治療劑的那 些組合物中）的量將發(fā)生變化。在一些實(shí)施方案中，配制本發(fā)明的組合物進(jìn)而可施用0.01-100mg/kg體重/天的本發(fā)明劑量。
[0151]額外的治療劑和CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑可協(xié)調(diào)發(fā)揮作用。因此，這種組合 物中額外的治療劑的量可少于僅利用治療劑的單一療法中所需，或?qū)τ诮o予較低劑量的患 者可能存在較少的副作用。在一些實(shí)施方案中，在這種組合物中可施用0.01-1，〇〇〇yg/kg體 重/天的額外治療劑的劑量。
[0152] CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑
[0153] 已發(fā)現(xiàn)一些化合物是可與CBP和/或EP300的一種或多種中含有的布羅莫結(jié)構(gòu)域基 序特異性結(jié)合的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑。
[0154] 在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與CBP的布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié) 合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與SEQ ID N0:5的氨基酸序列 的一個(gè)或多種殘基結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與SEQ ID NO: 3的氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域抑制劑與EP300的布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域 抑制劑與SEQ ID NO: 6的氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/ EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與SEQ ID N0:4的氨基酸序列的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合。在一些實(shí) 施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與EP300的布羅莫結(jié)構(gòu)域和CBP的布羅莫結(jié) 構(gòu)域結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑結(jié)合SEQ ID NO:5和SEQ ID N0:6。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑結(jié)合SEQ ID N0:3和SEQ ID N0:4。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與至少一個(gè)(例如1、2、3、 4、5、6、7、8、9、10、11、12或13個(gè)）下列〇8卩殘基結(jié)合：1^1]1109、？1?0 1110、？邢1111、￥八1^ 1115、LEU 1120、ILE 1122、TYR 1125、ALA 1164、TYR 1167、ASN 1168、ARG 1173、VAL 1174 或PHE 1177。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與至少一個(gè)(例如1、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13個(gè)）下列EP300殘基結(jié)合：LEU 1073、PR0 1074、PHE 1075、 VAL 1079、LEU 1084、ILE 1086、TYR 1089、ALA1128、TYR 1131、ASN 1132、ARG 1137、VAL 1138或TYR 1141。
[0155] 在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑干擾CBP和/或EP300與組 蛋白（特別是組蛋白中的乙?；嚢彼?的締合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫 結(jié)構(gòu)域抑制劑抑制CBP和/或EP300與染色質(zhì)（例如組蛋白相關(guān)DNA)的締合。在一些實(shí)施方案 中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑抑制和/或減少CBP布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或EP300布羅 莫結(jié)構(gòu)域與染色質(zhì)（例如組蛋白相關(guān)DNA)的締合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅 莫結(jié)構(gòu)域抑制劑不影響CBP和/或EP300的其他結(jié)構(gòu)域與染色質(zhì)的締合。在一些實(shí)施方案中， 所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與CBP和/或EP300主要(例如僅僅)通過(guò)與CBP布羅莫結(jié) 構(gòu)域和/或EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域接觸和/或相互作用結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，CBP/EP300布 羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑與CBP和/或EP300通過(guò)與CBP布羅莫結(jié)構(gòu)域和/或EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域以 及額外的CBP和/或EP300殘基和/或結(jié)構(gòu)域接觸和/或相互作用結(jié)合。與染色質(zhì)相關(guān)的測(cè)定 方法為本領(lǐng)域已知，包括但不限于染色質(zhì)分級(jí)、BRET測(cè)定(Promega)、FRAP測(cè)定、染色質(zhì)免疫 沉淀(ChIP)、生物物理結(jié)合測(cè)定和/或組蛋白締合測(cè)定。參見例如Das等人,BioTechniques 37:961-969(2004)。
[0156] 在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑不影響CD8細(xì)胞中的效應(yīng) 功能（即效應(yīng)功能在CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑存在和/或不存在時(shí)基本上相同）。在一 些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑不影響穿孔素、顆粒酶和/或EOMES的表 達(dá)水平（即穿孔素、顆粒酶和/或EOMES中的一種或多種的表達(dá)水平在CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域抑制劑存在和/或不存在時(shí)基本上相同）。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域抑制劑不影響效應(yīng)細(xì)胞因子IFN- γ和/或TNFa的表達(dá)水平（即效應(yīng)細(xì)胞因子IFN- γ和/或 TNFa的表達(dá)水平在CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑存在和/或不存在時(shí)基本上相同）。在一 些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑增強(qiáng)了Treg細(xì)胞存在時(shí)對(duì)CD3/CD28刺 激的未受過(guò)攻擊的T細(xì)胞響應(yīng)。
[0157] 在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑基本上不（例如并不）與 CBP和/或ΕΡ300的HAT結(jié)構(gòu)域結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑 基本上不（例如并不）與CBP和/或ΕΡ300的HAT結(jié)構(gòu)域結(jié)合，如在De Ivecchio等人， Nat. Struct .&Mol .Biol. 20:1040-1046(2013)中所鑒定，通過(guò)的方式將其整體并入。在一些 實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑基本上不與氨基酸序列SEQ ID Ν0:8 (UniProt No.Q92793的氨基酸殘基1321-1701)的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合。在一些實(shí)施方案 中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑基本上不與氨基酸序列SEQ ID N0:7(UniProt No.Q09472的氨基酸殘基1285-1664)的一個(gè)或多個(gè)殘基結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/ EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑不抑制CBP和/或EP300的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)催化活性。
[0158] 預(yù)期為CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑的化合物將具有相比其他化合物改善的 和/或不同的性質(zhì)，諸如"HAT"抑制劑化合物。HAT抑制預(yù)期將導(dǎo)致蛋白（組蛋白和非組蛋白） 乙?；恼w減少，可能以顯著的方式影響細(xì)胞活力。在一些實(shí)施方案中，CBP/EP300布羅 莫結(jié)構(gòu)域抑制保持這些蛋白的HAT活性同時(shí)導(dǎo)致靶基因相對(duì)小的亞組的轉(zhuǎn)錄活性的降低， 如在表2和表3中所示（Treg細(xì)胞中的244個(gè)基因和CD8細(xì)胞中的25個(gè)基因減少了2倍或更 多)。
[0159] 在一些實(shí)施方案中，所述CBP和/或EP300抑制劑在靶調(diào)節(jié)位點(diǎn)抑制轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄激 活。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域在Treg細(xì)胞和CD8細(xì)胞中于一個(gè)或多 個(gè)靶位點(diǎn)消除或減少CBP和/或EP300的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，Treg細(xì)胞和CD8細(xì)胞中的 靶位點(diǎn)是一個(gè)或多個(gè)下列基因座：IL28A、GPR87、ANKRD37、CABLES1、RAPGEF2、TRIM69、 MT1L//MT1L、FAM113B、F0XP3、CSF2、0CM2、GLIPR1、FGFBP2、CTLA4、CST7、G0LGA6L1、IFIT3、 FAM13A、APOD、AK2、CLDNI、HSD11BI、DNAJC12、PHEX、IL2、F0XD4L3、GNA15、ZBTB3 2、RDH10、 0R52E5、CYP2A6、GZMH、CCL20、ADM、L0C100131541、RNF122、FAM36A、AMY2B、GPR183、MY0F、 IL29、AIDA、SPRY1、EN0PH1、IL1RN、SLAMF1、PGM2L1、SSBP3、MMP23B、HIST1H3J、MY01B、BEND5、 SIPRl、CDK6、GPR56、ZC3H12A、D0K5、DUSPI、CYB5R2、KCNAB2、LAG3、KLF10、GK、SHC4、IL12RB2、 CD109、HAVCR2(TIM-3)、LTA、FAM40B、HMGCS1、HSPA1A、ZNF705A、CMAH、KIF3A、CHN1、KBTBD8、 TNF、M0P-1、RASGRP4、INSIG1、SLAMF7、0R10H4、LPL、HIST1H2BJ、LIF、IGF1、IL18RAP、0R52N4、 0R1D2、CCR4、CXCR5、IL1R1、MICAL2、NRN1、PICALM、B3GNT5、IFI44L、CXCR3、K0S、IFIT2、 NCR3、HSPAlB、CD80、GNG2、C7orf68、GPR171、RPS10P7、IL23A、L0C283174、PLK2、EMPl、 FNBP1L、CD226、RBMS3、IL23R、PTGER4、GZMB、F5、HIST1H2BK、IFNA17、IGF1、FSCN1、SUM02、 Clorfl29、EIF2S2、TDGFl、AIDA、CCR4、CD160、MC4R、KRTAP2-2、MTlJP、0R4N2、KRTAP4-5、 11^13、1^^10、1(11?201^、11)(：158696、11^84和/或了4521?13。在一些實(shí)施方案中，所述靶位點(diǎn)是 F0XP3、LAG3、HM3和CTLA4基因座中的一個(gè)或多個(gè)。在一些實(shí)施方案中，所述CBP/EP300布羅 莫結(jié)構(gòu)域抑制劑通過(guò)減少F0XP3處CBP和/或EP300的結(jié)合抑制CBP和/或EP300-介導(dǎo)的F0XP3 乙?；也挥绊懡M蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶催化活性。
[0160] CBP和EP300(也稱為p300)的描述可在Chrivia等人，Nature ,365,855(1993)和 Teufel等人，PNAS，104,7009(2007)中發(fā)現(xiàn)?？捎糜谝恍?shí)施方案實(shí)踐中的CBP/EP300布羅 莫結(jié)構(gòu)域抑制劑化合物的實(shí)例包括式I的化合物、其異構(gòu)體或異構(gòu)體的混合物(例如對(duì)映異 構(gòu)體)或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或前藥。這些化合物和可用于制備這些化合物的方 法和中間體描述于Angew.Chem. Int .Ed.，2014，v53 ,pages 1-6和相應(yīng)的支持性信息。這些 化合物與CBP/EP300的布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合，與CBP布羅莫結(jié)構(gòu)域的Rl 173殘基形成陽(yáng)離子-π 相互作用
[0161]
[0162] 其中：
[0163] X 是 NH或 0;
[0164] M是 1 或 2;
[0165] N是 1 或 2;
[0166] R1獨(dú)立地選自下組:取代或非取代的C1-C6烷基、取代或非取代的C 2-6烯基、取代或 非取代的C2-6炔基和取代或非取代的C 3-6碳環(huán)基；
[0167] R2獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的Ci_C6烷基、取代或非取代的C2-6烯基 和取代或非取代的C 2-6炔基；
[0168] R3獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的Ci_C6烷基、取代或非取代的C2-6烯基 和取代或非取代的C 2-6炔基；
[0169] R4獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的C1-C 6烷基、取代或非取代的C2-6烯基 和取代或非取代的C2- 6炔基；
[0170] R5獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的C1-C 6烷基、取代或非取代的C2-6烯基 和取代或非取代的C26炔基和OC 1-C6烷基；
[0171] R6獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的Ci_C6烷基、取代或非取代的C2-6烯基 和取代或非取代的C 26炔基和OC1-C6烷基；
[0172] R7獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的C1-C 6烷基、取代或非取代的C2-6烯基 和取代或非取代的C26炔基和OC 1-C6烷基;且
[0173] R8獨(dú)立地選自下組:氫、鹵素、取代或非取代的C1-C 6烷基、取代或非取代的C2-6烯基 和取代或非取代的C26炔基和OC 1-C6烷基；
[0174] 或其鹽。
[0175] 在一些實(shí)施方案中，式I的化合物選自下組：
[0180]藥物組合物和施用方法
[0181]本文進(jìn)一步提供了藥物組合物，其包含用于本文所述的方法的CBP/EP300布羅莫 結(jié)構(gòu)域抑制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物進(jìn)一步包含藥學(xué)上可接受的載體、佐劑或媒 介物。在另一實(shí)施方案中，所述組合物進(jìn)一步包含有效可測(cè)量地抑制CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域的量的化合物。在一些實(shí)施方案中，配制所述組合物用于施用至有此需要的患者。
[0182]包含CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽的組合物可口服、腸胃外、通過(guò)吸入噴 霧、局部、經(jīng)皮、直腸、經(jīng)鼻、口腔、舌下、經(jīng)陰道、腹膜內(nèi)、肺內(nèi)、皮內(nèi)、硬膜外或經(jīng)由植入容器 施用。本文使用的術(shù)語(yǔ)"腸胃外"包括皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、肝 內(nèi)、病灶內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)施用。
[0183]在一個(gè)實(shí)施方案中，將包含CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽的組合物配制 為固體劑型用于口服施用。用于口服施用的固體劑型包括膠囊、片劑、丸劑、粉末和顆粒。在 一些實(shí)施方案中，包含CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽的固體口服劑型進(jìn)一步包含 一種或多種下列物質(zhì)：（i)惰性的、藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體，諸如檸檬酸鈉或磷酸氫 二鈣;和（ii)填充劑或增容劑，諸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇或硅酸；（iii)粘合劑， 諸如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖或阿拉伯膠；（iv)濕潤(rùn)劑，諸如甘 油；（V)崩解劑，諸如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸鹽或碳酸鈉；（vi) 溶液阻滯劑，諸如石蠟；（vii)吸收促進(jìn)劑，諸如季銨鹽；（viii)濕潤(rùn)劑，諸如鯨蠟醇或單硬 脂酸甘油酯；（ix)吸收劑，諸如高嶺土或膨潤(rùn)土粘土;和(X)潤(rùn)滑劑，諸如滑石、硬脂酸鈣、硬 脂酸鎂、聚乙二醇或月桂基硫酸鈉。在一些實(shí)施方案中，將固體口服劑型配制為膠囊、片劑 或丸劑。在一些實(shí)施方案中，所述固體口服劑型進(jìn)一步包含緩沖劑。在一些實(shí)施方案中，用 于固體口服劑型的這種組合物可進(jìn)一步配制為軟或硬的填充明膠膠囊中的填充物，其包含 一種或多種賦形劑諸如乳糖（lactose)或奶糖(mi Iksugar )、聚乙二醇等。
[0184]在一些實(shí)施方案中，包含CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽的組合物的片劑、 糖錠劑、膠囊、丸劑和顆粒任選地包含包衣或殼體，諸如腸溶包衣。它們可任選地包含遮光 劑且可以任選地以延遲的方式優(yōu)選在腸道的某些部分僅釋放活性成分的組合物。包埋組合 物的實(shí)例包括聚合物質(zhì)和蠟狀物，其還可以在使用如乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇等 賦形劑的軟和硬的填充明膠膠囊中用作填充物。
[0185]在另一實(shí)施方案中，組合物包含微囊包封的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其 鹽，且任選地進(jìn)一步包含一種或多種賦形劑。
[0186]在另一實(shí)施方案中，組合物包含液體劑量制劑，其包含用于口服的CBP/EP300布羅 莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽，且任選地進(jìn)一步包含一種或多種藥學(xué)上可接受的乳液、微乳液、溶 液、懸浮液、糖漿和酏劑。在一些實(shí)施方案中，所述液體劑型任選地進(jìn)一步包含一種或多種 惰性稀釋劑諸如水或其他溶劑、增溶劑和乳化劑諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐 醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1，3_ 丁二醇、二甲基甲酰胺、油（具體地，棉籽油、花生油、玉米油、 胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油）、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇或山梨醇酐的脂肪酸酯及其 混合物。在一些實(shí)施方案中，液體口服組合物任選地進(jìn)一步包含一種或多種佐劑，諸如潤(rùn)濕 劑、懸浮劑、增甜劑、矯味劑和芳香劑。
[0187]可根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法使用適當(dāng)?shù)姆稚┗驖?rùn)濕劑和懸浮劑配制可注射的制 劑例如無(wú)菌可注射的水性或油性懸浮液。無(wú)菌可注射的制劑還可以是在無(wú)毒的腸胃外可接 受的稀釋劑或溶劑中的可注射的溶液、懸浮液或乳液，例如，作為在I，3-丁二醇中的溶液。 可使用的可接受的媒介物和溶劑為水、林格氏溶液，U. S. P.和等滲氯化鈉溶液。此外，無(wú)菌 的不揮發(fā)性油可方便地用作溶劑或懸浮培介質(zhì)。出于該目的，可使用任何溫和的不揮發(fā)性 油(包括合成的單或甘油二酯）。此外，脂肪酸諸如油酸可用于可注射物的制備。
[0188] 可注射的制劑可通過(guò)以下方式滅菌:例如，在使用前經(jīng)細(xì)菌保留過(guò)濾器過(guò)濾，或?qū)?摻入呈可溶解或分散于無(wú)菌水或其他無(wú)菌可注射介質(zhì)中的無(wú)菌固體組合物形式的滅菌劑。
[0189] 為延長(zhǎng)CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑的效果，經(jīng)常預(yù)期減緩化合物從皮下或肌 肉注射的吸收。該方式可通過(guò)使用具有不良水溶解度的結(jié)晶或無(wú)定形物質(zhì)的液體懸浮液實(shí) 現(xiàn)?；衔锏奈章蕜t取決于其溶解速率，其反過(guò)來(lái)將取決于晶體大小和晶形?？商鎿Q地， 腸胃外施用的化合物形式的延遲吸收通過(guò)將化合物溶解或懸浮于油媒介物中實(shí)現(xiàn)?？勺⑸?的貯存形式通過(guò)在生物可降解的聚合物諸如聚乳酸-聚乙醇酸中形成化合物的微膠囊基質(zhì) 制備。取決于化合物與聚合物的比率和采用的具體聚合物的特性，可控制化合物釋放的速 率。其他可降解聚合物的實(shí)例包括聚（原酸酯)和聚（酐）。貯存的可注射配制物也可通過(guò)將 化合物包埋于與機(jī)體組織兼容的脂質(zhì)體或微乳液制備。
[0190] 在一些實(shí)施方案中，將用于直腸或陰道施用的組合物配制為栓劑，其可通過(guò)將 CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽與適當(dāng)?shù)臒o(wú)刺激性的賦形劑或載體諸如可可脂、聚 乙二醇或栓劑用蠟(例如在環(huán)境溫度為固體但在體溫為液體且因此在直腸或陰道腔內(nèi)溶解 并釋放CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑的那些)混合制備。
[0191]用于局部或透皮施用的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑示例性的劑型包括軟膏 劑、糊劑、乳膏劑、洗劑、凝膠劑、粉劑、溶液、噴霧劑、吸入劑或貼劑。所述CBP/EP300布羅莫 結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽在無(wú)菌條件下與藥學(xué)上可接受的載體和任選的防腐劑或緩沖劑混合。 額外的制劑實(shí)例包括眼用制劑、滴耳劑、滴眼劑、透皮貼劑。透皮劑型可通過(guò)將CBP/EP300布 羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽溶解或分散于介質(zhì)例如乙醇或二甲亞砜制備。吸收增強(qiáng)劑還可用 于增加化合物穿透皮膚的通量。速率可由提供速率控制膜或通過(guò)將化合物分散于聚合物基 質(zhì)或凝膠控制。
[0192] CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽的鼻氣霧劑或吸入制劑可作為鹽水中的溶 液、采用芐醇或其它合適的防腐劑、增強(qiáng)生物利用度的吸收促進(jìn)劑、氟碳化合物和/或其他 常規(guī)增溶劑或分散劑制備。
[0193] 在一些實(shí)施方案中，藥物組合物與食物一起或不與食物一起施用。在一些實(shí)施方 案中，藥學(xué)上可接受的組合物不與食物一起施用。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥學(xué)上可接 受的組合物與食物一起施用。
[0194] 用于任何具體患者的特定劑量和治療方案將取決于多種因素，包括年齡、體重、一 般健康狀況、性別、飲食、施用時(shí)間、排泄速率、藥物組合、治療醫(yī)師的判斷和待治療具體疾 病的嚴(yán)重性。組合物中提供的CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽的量將取決于組合物 中的特定化合物。
[0195] 在一個(gè)實(shí)施方案中，腸胃外施用的每劑量的本發(fā)明化合物的有效量范圍將為約 0.01-100mg/kg患者體重/天，可替換地約0. l-20mg/kg患者體重/天，其中使用的化合物的 典型初始范圍為〇.3-15mg/kg/天。在另一實(shí)施方案中，口服單位劑型諸如片劑和膠囊包含 約5mg至約I OOmg本發(fā)明化合物。
[0196] 示例性的片劑口 服劑型包含約 2mg、5mg、25mg、50mg、100mg、250mgS500n^9CBP/ EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽，且進(jìn)一步包含約5-30mg的無(wú)水乳糖、約5-40mg羧甲基纖 維素鈉、約5_30mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30和約I-IOmg硬脂酸鎂。配制片劑的過(guò)程包括將 粉末成分共同混合且進(jìn)一步用PVP溶液混合?？蓪@得的組合物干燥、顆?；?、與硬脂酸鎂 混合并使用常規(guī)設(shè)備壓成片劑形式。氣霧制劑的實(shí)例可通過(guò)以下方式制備:將約2_500mg式 I的化合物或其鹽溶解于適當(dāng)?shù)木彌_溶液(例如鹽酸鹽緩沖液）中并添加張力劑(例如鹽，諸 如氯化鈉）?？墒褂美?.2微米過(guò)濾器過(guò)濾溶液以去除雜質(zhì)和污染物。
[0197] 所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽可單獨(dú)使用或與其他上文所述的用于 治療的藥劑組合使用。例如藥物組合配制物或給藥方案的第二藥劑可具有與CBP/EP300布 羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑互補(bǔ)的活性進(jìn)而其彼此不造成不利影響?；衔锟稍趩我凰幬锝M合物中 共同施用或分別施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物或藥學(xué)上可接受的鹽可與細(xì)胞毒性劑共 同施用以治療增殖性疾病或癌癥。
[0198] 術(shù)語(yǔ)〃共同施用〃指CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑或其鹽和一種或多種其他活性 藥物成分(包括細(xì)胞毒性劑和放射治療)的同時(shí)施用或以任何方式的分開依序施用。如果施 用不是同時(shí)的，則化合物以彼此接近的時(shí)間施用。此外，化合物是否以相同的劑型施用無(wú)關(guān) 緊要，例如，一種化合物可局部施用而另一種化合物可口服施用。
[0199] 通常，任何對(duì)于待治療的疾病或病況具有活性的藥劑可共同施用。這些藥劑的實(shí) 例可在 Cancer Principles and Practice of Oncology by V.T.Devita and S. He I Iman (editors),6th edit ion(February 15,2001),Lippincott Williams & Wilkins Publ i shers中獲得。基于涉及的藥物和疾病的具體特性，本領(lǐng)域技術(shù)人員將能夠辨別哪些 藥劑的組合可能是有用的。 實(shí)施例
[0200] 下列是本發(fā)明方法和組合物的實(shí)施例?？梢岳斫獾氖?，鑒于上文提供的一般性描 述，可實(shí)踐多種其他實(shí)施方案。
[0201] 實(shí)施例1:作為用于癌癥免疫療法的小分子靶標(biāo)的CBP/EP300
[0202]為發(fā)現(xiàn)CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域如何可用作治療癌癥的靶標(biāo)，研究了使用經(jīng)設(shè)計(jì) 以與CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域結(jié)合的強(qiáng)效和選擇性的小分子抑制劑化合物的功能性影響， 因此阻止其與染色質(zhì)中乙?；慕M蛋白締合。由于小分子抑制劑可具有脫靶效應(yīng)，檢驗(yàn)了 來(lái)自不同化學(xué)骨架的具有一系列生化效力的化合物的組合(活性化合物，表1)以排除這些 脫靶效應(yīng)。此外，將活性化合物享有相同骨架但不具有針對(duì)CBP/EP300的布羅莫結(jié)構(gòu)域的活 性的化合物(非活性化合物，表1)用作陰性對(duì)照。
[0203]表 1
[0205]在第一組實(shí)驗(yàn)中，制備了來(lái)自純化的未受過(guò)攻擊的人⑶4+T細(xì)胞的Treg細(xì)胞。這些 未受過(guò)攻擊的T細(xì)胞可通過(guò)標(biāo)志物CD45RA在其表面的表達(dá)識(shí)別，且隨后如方法部分所述使 用標(biāo)準(zhǔn)和業(yè)已確立的細(xì)胞因子混合物在體外分化成為Treg細(xì)胞。Treg細(xì)胞可通過(guò)其F0XP3 (一種這些細(xì)胞分化和功能所需的轉(zhuǎn)錄因子）的表達(dá)容易地識(shí)別 （Josef owicz等人， Immunity ,30,616-625(2009))。將未受過(guò)攻擊的人T細(xì)胞在靶向CBP/EP300的布羅莫結(jié)構(gòu)域 的活性化合物或非活性對(duì)照化合物存在時(shí)的Treg-分化條件下培養(yǎng)。如圖1所示，CBP/EP300 抑制劑CBP/EP300(1)而不是非活性化合物CBP/EP300(A)展示了減少在這些實(shí)驗(yàn)中生成的 F0XP3+細(xì)胞的數(shù)目，如通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)可見。這些觀察通過(guò)在如上文所述相同的培養(yǎng)條件 下使用來(lái)自不同化學(xué)骨架的兩種典型活性化合物CBP/EP300 (1)和CBP/EP300 (2)產(chǎn)生的劑 量響應(yīng)曲線確認(rèn)并擴(kuò)大。這些活性化合物而不是非活性化合物CBP/EP300(A)和CBP/EP300 (B)的確以劑量依賴方式減少了F0XP3+細(xì)胞的數(shù)目（圖2,上圖）。重要的是，活化標(biāo)志物CD25 未受任何化合物處理影響，表明這些細(xì)胞是功能性的，盡管不能分化成為Treg譜系（圖2,下 圖）。從這些組實(shí)驗(yàn)中，可以得出的結(jié)論是CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制導(dǎo)致未受過(guò)攻擊的T 細(xì)胞分化成為Treg細(xì)胞的損傷。
[0206]進(jìn)一步研究了CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制在Treg細(xì)胞基因表達(dá)中的影響。為了 該目標(biāo)，實(shí)施了全基因組轉(zhuǎn)錄分析，與在與圖1所述相同的條件下培養(yǎng)的樣品進(jìn)行了比較， 與活性化合物CBP/EP300 (1)或DMS0(化合物媒介物，對(duì)照)溫育。作為額外對(duì)照，未受過(guò)攻擊 的T細(xì)胞在無(wú)分化細(xì)胞因子下培養(yǎng)，此后稱為ΤΗ0(參見方法部分）。244個(gè)基因在轉(zhuǎn)錄水平下 調(diào)2倍或更多。下調(diào)的基因包括F0XP3(如從圖1和圖2中所示的數(shù)據(jù)所預(yù)測(cè)），但還有其他認(rèn) 為在Treg細(xì)胞功能中起重要作用的基因，諸如LAG3、HM3和CTLA4。由這些結(jié)果，可以得出的 結(jié)論是CPB/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制導(dǎo)致在很大程度上定義Treg細(xì)胞的基因網(wǎng)絡(luò)及其生物 學(xué)功能的抑制(包括常規(guī)T細(xì)胞的增殖的抑制）。
[0207] 表2 CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制導(dǎo)致Treg細(xì)胞中244個(gè)基因轉(zhuǎn)錄活性減少2倍或 更多倍
[0209]表3 CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制導(dǎo)致⑶8細(xì)胞中25個(gè)基因轉(zhuǎn)錄活性減少2倍或更 多倍
[0212]通過(guò)癌細(xì)胞的免疫系統(tǒng)規(guī)避的一種主要機(jī)制已知為T細(xì)胞衰竭。在該狀態(tài)中，癌細(xì) 胞在T細(xì)胞，特別是CD8+T細(xì)胞中誘導(dǎo)使這些細(xì)胞不響應(yīng)且不能發(fā)揮細(xì)胞毒性功能的轉(zhuǎn)錄狀 態(tài)。該過(guò)程的核心特性是這些⑶8細(xì)胞表面上抑制性受體的表達(dá)，諸如PD-I、LAG3、TIM3和 CTLA4(Wherry，Nat · Immuno 1 ·，12，492-499 (2011)。如上文所述，由于發(fā)現(xiàn)了LAG3、??Μ3和 CTLA4在CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄控制下，還研究了導(dǎo)致⑶8細(xì)胞中這些基因抑制的 CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域是否可作為這樣的方法:其用CBP/EP300抑制劑抑制其表達(dá)進(jìn)而逆 轉(zhuǎn)CD8衰竭。如圖3中所示（上圖），人CD8細(xì)胞與CBP/EP300 (1)而不是非活性化合物CBP/ EP300(A)的溫育導(dǎo)致LAG3、TIM3和CTLA4表達(dá)的劑量依賴性減少。相似地，如圖9中所示， CBP/EP300 (3)和CBP/EP300 (4)都導(dǎo)致LAG3、??Μ3和CTLA4的劑量依賴性減少。有趣的是，用 CBP/EP300(1)抑制CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域未影響CD8細(xì)胞中的效應(yīng)功能，這是由于編碼穿 孔素、顆粒酶B和EOMES的基因隨化合物處理未顯著改變（圖3,下圖）。此外，效應(yīng)細(xì)胞因子 IFN- γ和TNFa的產(chǎn)生（圖4)未受化合物處理的影響。如圖10所示，對(duì)于CBP/EP300 (3)和CBP/ ΕΡ300(4)觀察到相似的趨勢(shì)。此外，當(dāng)用CBP/EP300(1)處理時(shí)⑶8細(xì)胞的整體基因組的轉(zhuǎn)錄 分析表明參與衰竭的其他基因，諸如⑶160和KIR2DL2也有所減少。從這些結(jié)果，可以得出的 結(jié)論是CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制導(dǎo)致對(duì)于調(diào)節(jié)CD 8細(xì)胞衰竭至關(guān)重要的關(guān)鍵抑制受體 的選擇性阻斷。
[0213] 為研究CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制對(duì)Treg細(xì)胞的影響是否導(dǎo)致這些細(xì)胞抑制常 規(guī)T細(xì)胞增殖的功能性損傷，實(shí)施了結(jié)合Treg和CFSE-標(biāo)記的未受過(guò)攻擊的T細(xì)胞的抑制測(cè) 定。由于細(xì)胞隨每個(gè)細(xì)胞分裂循環(huán)稀釋，在這些研究中通過(guò)基于FACS的染料量化監(jiān)測(cè)了未 受過(guò)攻擊的T細(xì)胞的增殖。如圖5所示，~50%的未受過(guò)攻擊的T細(xì)胞能夠在Treg細(xì)胞不存在 時(shí)在CD3/CD28的刺激下增殖。然而，當(dāng)未受過(guò)攻擊的T細(xì)胞與Treg細(xì)胞組合時(shí)，少于10%能 夠增殖。用CBP/EP300 (1)的溫育導(dǎo)致Treg抑制能力的劑量依賴性抑制，如能夠增殖的未受 過(guò)攻擊的T細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的相應(yīng)增加所見。非活性的化合物CBP/EP300(A)無(wú)影響，證明了特異 性。
[0214] 總之，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域在Treg細(xì)胞和⑶8+T細(xì)胞中起到意想不到但至關(guān)重 要的作用。CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域控制Treg細(xì)胞的分化并控制在Treg細(xì)胞中控制關(guān)鍵生 物學(xué)功能的重要基因。此外，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制導(dǎo)致Treg細(xì)胞抑制能力的損傷。 在⑶8+T細(xì)胞中，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域控制包括控制衰竭的重要基因的基因的亞組。因 此，通過(guò)對(duì)協(xié)調(diào)功能的抑制Treg功能并逆轉(zhuǎn)⑶8+T細(xì)胞衰竭的協(xié)調(diào)，CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域抑制在通過(guò)癌癥免疫療法的人癌癥治療中具有益處。
[0215] 方法
[0216] 圖1 -6中給出的數(shù)據(jù)的方法
[0217] 人T細(xì)胞培養(yǎng)：使用Miltenyi未受過(guò)攻擊的人T細(xì)胞分離試劑盒（Cat#130-094_ 131)從健康人供體Ieukopak分離未受過(guò)攻擊的CD4+CD45RA+T細(xì)胞至純度>95 %。分離的細(xì) 胞以10~6個(gè)細(xì)胞/mL使用人打舌化Dynabead(以1:1的珠/細(xì)胞比率）（Invitrogen ;Cat# 11132D)在iTreg-極化條件下培養(yǎng)，其中人TGF0為IOng/mL且人IL-2為IOU/mL (R&D Cat#分 別為IOO-B和202-IL)?；罨?6h添加化合物;培養(yǎng)物中DMSO終濃度為0.5%。對(duì)于〃未極化 的"ThO培養(yǎng)物，僅使用Dynabead培養(yǎng)分離的細(xì)胞，而不添加外源性細(xì)胞因子。從健康人供體 Ieukopak使用Miltenyi人T細(xì)胞分離試劑盒(Cat#130-095-236)分離CD8 T細(xì)胞并在IOOU/ mL人IL-2存在下使用人T活化Dynabead(以1:1的珠/細(xì)胞比率）以I0-6個(gè)細(xì)胞/mL培養(yǎng)。
[0218] FACS:來(lái)自 iTreg培養(yǎng)物的細(xì)胞首先用CD25:PE(eBioscience;Cat#12-0259-42)染 色；隨后為固定/透化步驟并使用人F0XP3染色試劑盒(eBioscience;Cat#77-5774-40)根據(jù) 制造商的方案對(duì)細(xì)胞內(nèi)F0XP3染色。通過(guò)FACS的F0XP3表達(dá)通常在活化后4天測(cè)量。
[0219] 表達(dá)分析:使用RNeasy Plus試劑盒（Qiagen;Cat#74136)分離RNA。其隨后為cDNA 合成和使用Taqman引物和探針（Invitrogen)的qPCR。一式兩份或三份運(yùn)行反應(yīng)，且結(jié)果通 過(guò)deldelCT方法分析，針對(duì)DMSO對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)化;將葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)用作管家基因 (Roche;Cat#05 046 246 001)。對(duì)于整體轉(zhuǎn)錄分析，處理樣品并在Affymetrix外顯子陣列 上雜交化，并在ALMAC Diagnostics獲得數(shù)據(jù)。CEL文件在核心探針集上使用Affymetrix' Expression Console軟件用RMA算法處理。平均化并扣除重復(fù)的log2表達(dá)值以獲得log倍數(shù) 變化。對(duì)于加熱圖譜，選擇具有至少2倍改變的基因和未調(diào)整斯氏T檢驗(yàn)p值〈0.10。
[0220] 抑制試驗(yàn):按說(shuō)明培養(yǎng)iTreg細(xì)胞84小時(shí)并以1:1的比率添加已用CFSE(Molecular Probes ;Cat#C34554;制造商的方法)染色的未受過(guò)攻擊的CD4T細(xì)胞。在圓底96孔圓底板中 200uL終體積內(nèi)使用Dynabead活化細(xì)胞?；罨?6小時(shí)在培養(yǎng)物中添加化合物，DMSO終濃度 為0.5 %的。如通過(guò)CFSE稀釋的測(cè)定和較低密度峰值的出現(xiàn)，在活化后60小時(shí)測(cè)量增殖。 [0221]圖7-10所示數(shù)據(jù)的方法
[0222] 人T細(xì)胞培養(yǎng):從健康人PBMC使用Miltenyi Biotec未受過(guò)攻擊的人T細(xì)胞分離試 劑盒(cat#130-094-131)分離未受過(guò)攻擊的CD4+CD45RA+T細(xì)胞。分離的細(xì)胞以10e6個(gè)細(xì)胞/ mL使用Dynabead(Invitrogen;Cat#11132D)(以1:1的珠/細(xì)胞比率)+人重組IL_2(10ng/ml) (R&D，cat#202-IL-010)+人重組 TGFb( 10ng/ml)(Invitrogen; cat#PHG9204)在 iTreg-分化 條件下培養(yǎng)。16小時(shí)后，使用DMSO作為對(duì)照添加 CBP抑制劑CBP/EP300 (3)和CBP/EP300(4)。 從健康人PBMC使用Miltenyi Biotec人T細(xì)胞分離試劑盒（cat#130-095-236)分離CD8+T細(xì) 胞并以10e6個(gè)細(xì)胞/mL添加10ng/ml重組人IL-2使用人T活化Dynabead(以1:1的細(xì)胞/細(xì)胞 的比率)培養(yǎng)。⑶8+T細(xì)胞刺激3天后，收集上清液并通過(guò)Luminex分析⑶8+T細(xì)胞相關(guān)效應(yīng)功 能細(xì)胞因子IFNy和TNFa。圖10中的數(shù)據(jù)顯示使用DMSO作為對(duì)照用化合物CBP/EP300(3)和 CBP/EP300(4)刺激的CD8+T細(xì)胞的上清液中分泌的IFN γ (A)和TNFa(B) (pg/ml) XBP抑制劑 最小地影響由⑶8+T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。
[0223] FACS:首先使用CD4APC-CY7和CD25太平洋藍(lán)（都來(lái)自BD pharmigen，cat#分別為 557811和560355)對(duì)來(lái)自iTreg培養(yǎng)物的細(xì)胞染色；其隨后為固定/透化步驟并根據(jù)制造商 的方案使用人Foxp3染色試劑盒(eBioscience;cat#77-5774-40)對(duì)細(xì)胞內(nèi)的Foxp3FITC進(jìn) 行染色。通過(guò)FACS的F0XP3表達(dá)通常在活化后4天測(cè)量。
[0224] 表達(dá)分析：CD8 + T細(xì)胞刺激3天后，使用mRNA Catcher? PLUS純化試劑盒 (Invitrogen;K1570-02)提取 mRNA。在 CBP/p300 的轉(zhuǎn)錄控制下通過(guò) q-RT-PCR 分析了編碼 CD8 +T細(xì)胞表面上抑制性受體Lag3、CTLA4和??Μ3的基因表達(dá)。Foxp3表達(dá)和顆粒酶B(GZMB)表達(dá) (編碼CD8+T細(xì)胞效應(yīng)功能的基因）還通過(guò)q-RT-PCR進(jìn)行了分析。將β-2-微球蛋白（B2M)用作 管家基因。CBP抑制劑導(dǎo)致Lag3、CTLA4和??Μ3表達(dá)的劑量依賴性減少。
[0225] CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑:
[0226] CBP/EP300(3)具有如下結(jié)構(gòu)：
[0227]
[0228]
[0229]
[0230] 除本文詳細(xì)描述的次序，除非在本文清楚表明或換而言之在上下文明顯矛盾的情 況下，本文所述的方法可以任何適當(dāng)?shù)拇涡驅(qū)嵤?。本文提供的任一和全部?shí)施例或示例性 語(yǔ)言的使用僅意在更好地理解本發(fā)明的實(shí)施方案且無(wú)需理解為是對(duì)本發(fā)明的范圍強(qiáng)加限 制，除非在權(quán)利要求中具體記載。說(shuō)明書中的語(yǔ)言不應(yīng)理解為表明了任何非權(quán)利要求的元 素對(duì)本發(fā)明的實(shí)踐是至關(guān)重要的。
[0231] 通過(guò)引用的方式將本文引用的全部文件并入。
[0232] 盡管描述了多個(gè)實(shí)施方案，但這些實(shí)施例可發(fā)生變化以提供利用本文所述的化合 物和方法的其他實(shí)施方案。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)通過(guò)附加的權(quán)利要求而不是由實(shí)施 例的方式給出的具體實(shí)施方案進(jìn)行限定。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 用于在個(gè)體中治療癌癥或延遲癌癥進(jìn)展的方法，其包括施用有效量的CBP/EP300布 羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑至所述個(gè)體。2. 在患有癌癥的個(gè)體中增強(qiáng)免疫功能的方法，其包括施用有效量的CBP/EP300布羅莫 結(jié)構(gòu)域抑制劑至所述個(gè)體。3. 權(quán)利要求1或2的方法，其中所述個(gè)體中的CD8T細(xì)胞相對(duì)施用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域抑制劑前具有增強(qiáng)的致敏、活化、增殖和/或細(xì)胞殺傷活性。4. 權(quán)利要求3的方法，其中所述CD8T細(xì)胞的數(shù)目相對(duì)施用CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制 劑前是升高的。5. 權(quán)利要求3-4中任一項(xiàng)的方法，其中所述CD8T細(xì)胞是抗原特異性CD8T細(xì)胞。6. 權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的方法，其中所述癌癥具有升高的T-細(xì)胞浸潤(rùn)水平。7. 權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的方法，其中所述癌癥與增加的腫瘤內(nèi)Treg細(xì)胞密度相關(guān)。8. 權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)的方法，其中所述癌癥選自下組:聽神經(jīng)瘤、急性白血病、急性 淋巴細(xì)胞性白血病、急性髓細(xì)胞性白血病、急性T-細(xì)胞白血病、基底細(xì)胞癌、膽管癌、膀胱 癌、腦癌、乳腺癌、支氣管癌、子宮頸癌、軟骨肉瘤、脊索瘤、絨毛膜癌、慢性白血病、慢性淋巴 細(xì)胞白血病、慢性髓細(xì)胞性白血病、慢性骨髓性白血病、結(jié)腸癌、結(jié)腸直腸癌、顱咽管瘤、囊 腺癌、彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤、不良增生性改變、胚胎性癌、子宮內(nèi)膜癌、內(nèi)皮性肉瘤、室管膜 瘤、上皮癌、紅白血病、食道癌、雌激素受體陽(yáng)性乳腺癌、原發(fā)性血小板增多癥、尤因氏瘤、纖 維肉瘤、濾泡型淋巴瘤、生殖細(xì)胞睪丸癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、膠質(zhì)肉瘤、重鏈病、頭 頸癌、成血管細(xì)胞瘤、肝癌、肝細(xì)胞癌、激素不敏感性前列腺癌、平滑肌肉瘤、白血病、脂肪肉 瘤、肺癌、淋巴管內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、成淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤、T-細(xì)胞或B-細(xì)胞來(lái)源 的淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤、髓樣癌、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、黑素瘤、腦膜瘤、間皮瘤、多發(fā)性骨髓瘤、髓 細(xì)胞性白血病、骨髓瘤、粘液肉瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、NUT中線癌(NMC)、非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)、 少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、口腔癌、骨源性肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳頭狀腺癌、乳頭狀癌、松果體瘤、 真性紅細(xì)胞增多癥、前列腺癌、直腸癌、腎細(xì)胞癌、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、肉瘤、皮脂 腺癌、精原細(xì)胞瘤、皮膚癌、小細(xì)胞肺癌、實(shí)體瘤(癌和肉瘤）、小細(xì)胞肺癌、胃癌、鱗狀細(xì)胞 癌、滑膜瘤、汗腺癌、甲狀腺癌、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血癥、睪丸腫瘤、子宮癌和維爾姆斯 瘤。9. 權(quán)利要求1 _8中任一項(xiàng)的方法，其中所述癌癥是黑素瘤、NSCLC、腎癌、卵巢癌、結(jié)腸 癌、胰腺癌、肝細(xì)胞癌或乳腺癌。10. 權(quán)利要求1_9中任一項(xiàng)的方法，其中所述癌癥是NSCLC、卵巢癌、膜腺癌、肝細(xì)胞癌或 乳腺癌。11. 權(quán)利要求1_8中任一項(xiàng)的方法，其中所述癌癥是黑素瘤、NSCLC或腎細(xì)胞癌。12. 權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的方法，其中所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑抑制CBP。13. 權(quán)利要求1 -11中任一項(xiàng)的方法，其中所述C B P / E P 3 0 0布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑抑制 EP300。14. 權(quán)利要求1 -13中任一項(xiàng)的方法，其中所述方法抑制Tre g功能。15. 權(quán)利要求1 -14中任一項(xiàng)的方法，其中所述方法減少CD8+T細(xì)胞的T細(xì)胞衰竭。16. 權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的方法，其中所述CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑不與CBP 和/或EP300的HAT結(jié)構(gòu)域結(jié)合。17. 權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述個(gè)體是人。 18. CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑，其用于包括療法的藥物治療或診斷和/或治療癌 癥。19. 用于選擇抗癌化合物的方法，其包括確定受試化合物是否為CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu) 域抑制劑化合物，其中將為CBP/EP300布羅莫結(jié)構(gòu)域抑制劑化合物的受試化合物選為抗癌 化合物。20. 權(quán)利要求19的方法，其進(jìn)一步包括確定受試化合物是否與CBP和/或EP300的HAT結(jié) 構(gòu)域結(jié)合，其中將不與CBP和/或EP300的HAT結(jié)構(gòu)域結(jié)合的受試化合物選為抗癌化合物。21. 權(quán)利要求19或20的方法，其進(jìn)一步包括確定受試化合物是否抑制Treg功能，其中將 抑制Treg功能的受試化合物選為抗癌化合物。22. 權(quán)利要求19-21中任一項(xiàng)的方法，其進(jìn)一步包括確定受試化合物是否減少CD8+T細(xì)胞 的T細(xì)胞衰竭，其中將減少CD8+T細(xì)胞的T細(xì)胞衰竭的受試化合物選為抗癌化合物。
【文檔編號(hào)】A61K38/00GK105979958SQ201480067309
【公開日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2014年10月10日
【發(fā)明人】B·K·阿爾布雷克特, J·E·奧迪亞, S·拜隆, A·科克倫, A·科特, T·克勞福德, B·福伯, S·高希, J-C·哈曼格, G·哈齊瓦西利烏, H·賈亞拉姆, J·金, J·M·洛拉, S·馬格努森, I·梅爾曼, F·A·羅梅羅, A·M·泰勒, V·崔
【申請(qǐng)人】基因泰克公司, 星座制藥股份有限公司