20(R)-人參皂苷Rg3在制備緩解或/和治療類風濕病癥的藥物或保健品中的應(yīng)用及藥物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種20(R)-人參皂苷Rg3在制備類風濕藥物或保健食品中的新應(yīng)用。試驗證明，20(R)-人參皂苷Rg3類風濕的療效顯著，見效快、毒副作用小、是一種安全、高效、穩(wěn)定、制備工藝簡單的治療藥物或保健食品，適于工業(yè)化生產(chǎn)，易于推廣。本發(fā)明為類風濕提供新的藥物或保健食品來源。
【專利說明】
20 (R)-人參皂苷Rg3在制備緩解或/和治療類風濕病癥的 藥物或保健品中的應(yīng)用及藥物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種治療或緩解類風濕的藥物或保健食品，特別涉及 一種中藥人參提取成分在類風濕藥物或保健食品中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 類風濕性關(guān)節(jié)炎（RA)是一種累及周圍關(guān)節(jié)為主的多系統(tǒng)炎癥性的自身免疫性疾 病。主要侵犯人體各滑膜關(guān)節(jié)，關(guān)節(jié)病變呈慢性進行性，致殘率高。不同種族均可患RA，在 亞熱帶、寒帶地區(qū)發(fā)病率高。在美國被視為影響人類健康的五大疾?。ㄐ难懿　㈥P(guān)節(jié)炎 病、阿爾茨海默氏病、癌癥及艾滋?。┲?，它使數(shù)以萬計的病人喪失生活和工作能力，嚴 重的還會導致死亡。其特征性的癥狀為對稱性、周圍性多個關(guān)節(jié)炎性病變，在臨床表現(xiàn)上存 在病情與病程的個體差異，從短暫、輕微的少關(guān)節(jié)炎到急劇進行性多關(guān)節(jié)炎，受累關(guān)節(jié)以近 端指間關(guān)節(jié)、掌指關(guān)節(jié)、腕、肘、肩、膝和足趾關(guān)節(jié)最為多見，并伴活動受限。關(guān)節(jié)炎常表現(xiàn)為 對稱性、持續(xù)性腫脹和壓痛，晨僵常長達1小時以上，最為常見的關(guān)節(jié)畸形是腕和肘關(guān)節(jié)強 直、掌指關(guān)節(jié)的半脫位、手指向尺側(cè)偏斜和呈天鵝頸樣及鈕孔花樣表現(xiàn)、重癥患者關(guān)節(jié)呈纖 維性或骨性強直，并因關(guān)節(jié)周圍肌肉萎縮、痙攣失去關(guān)節(jié)功能，致使生活不能自理。除關(guān)節(jié) 癥狀外，還可出現(xiàn)關(guān)節(jié)外或內(nèi)臟損害，如類風濕結(jié)節(jié)，心、肺、腎、周圍神經(jīng)及眼等病變。病變 呈持續(xù)、反復發(fā)作。本病好發(fā)于青壯年及少兒，國內(nèi)成人患病率〇. 32% - 0. 36%，女性高于 男性2 - 4倍，是一種既有體液免疫，又有細胞免疫異常的自身性疾病。該病據(jù)WHO提供的 數(shù)字，全球有1 %的人患有類風濕性關(guān)節(jié)炎病，僅中國患者就達1000多萬。因此，解除患者 疾苦，恢復生活與工作的能力有一定的現(xiàn)實意義。
[0003] 在祖國醫(yī)學中，類風濕性關(guān)節(jié)炎屬于"痹證"范疇。最早的中醫(yī)學典籍《黃帝內(nèi)經(jīng)》 中就載有《痹論篇》，對痹證的病因、發(fā)病、證候分類及演變均有專門記載，如："風寒濕三氣 雜至，合而為痹也"，奠定了中醫(yī)學對痹證認識的基礎(chǔ)?！秱摗?、《金醫(yī)要略》則從濕病、歷 節(jié)、血痹論治，認為發(fā)病機理為風寒濕熱之邪侵襲人體肌表、經(jīng)絡(luò)、關(guān)節(jié)，以及機體陽氣、陰 液虧虛，致經(jīng)絡(luò)痹阻而成，臨證有表里寒熱虛實之分，治療有汗、溫、清、補等法。《千金要方》 與《千金翼方》治痹頗多新見。如孫思邀在《千金要方》首次提出"風毒"之概念，指出"著 人久不治者，令人骨節(jié)磋跌，，此是風之毒害也"。用毒邪的病理概念去認識歷節(jié)病的發(fā)病規(guī) 律，確立了清熱解毒的治療原則，以犀角湯治療"熱毒流于四膚，歷節(jié)腫痛"，發(fā)展了仲景治 痹方法。獨活寄生湯，首載于《千金要方·諸風》，至今仍為治痹名方。金元時期，張子和倡 用汗吐下法治痹，朱丹溪則明確提出從痰、風濕、風熱、血虛分證論治，主張除濕祛痰，疏通 氣血，創(chuàng)用"大法之方，蒼術(shù)、川芎、白芷、南星、當歸、酒黃芩。"并隨病變部位不同、病因不同 加減治療?！蹲C治準繩》論痹，廣集前賢學說，詳述其證治之要，兼發(fā)己見。云："風痹者，游 行上下…宜防風湯。寒痹者，四肢攣痛，關(guān)節(jié)浮腫，宜五積散，濕痹者，留而不移…宜伏苓川 芎湯。熱痹者，臟腑移熱，復遇外邪。"李中梓"醫(yī)宗必讀"對于痹證的治療原則予以較好地 概括："治外者散邪為急，治臟者養(yǎng)正為先。治行痹者散風為主，御寒利濕，仍不可廢，大抵參 以補血之劑，蓋治風先治血，血行風自滅也。治痛痹者散寒為主，疏風燥濕，仍不可缺，大抵 參以補火之劑，非大辛大溫，不能釋其寒凝之害也。治著痹者，利濕為主，祛風散寒，亦不可 缺，大抵參以補脾補氣之劑，蓋土強可以勝濕，而氣足自無頑麻也"。
[0004] 中藥對RA有較好的臨床療效，表現(xiàn)出整體調(diào)節(jié)，多環(huán)節(jié)、多途徑的作用，發(fā)揮著獨 特的優(yōu)勢，但中醫(yī)藥治療RA也存在不少問題，例如：①只能緩解癥狀、改變病情，不能制止 病情繼續(xù)發(fā)展。②缺乏明確的藥理、藥效學研究。至今尚不清楚中醫(yī)藥對RA的療效是因為 抗炎還是因為免疫抑制、抗炎是針對何種炎癥介質(zhì)、免疫抑制又是針對RA哪些免疫病理環(huán) 節(jié)等。
[0005] 現(xiàn)代醫(yī)學主要以非留體抗炎藥物加以治療，臨床上口服藥物多存在毒副作用較大 的情況，故尋求有效治療類風濕性關(guān)節(jié)炎的方法，仍是醫(yī)家不斷研究的方向。
[0006] 人參是中藥中名貴藥材，人參皂苷作為人參的主要有效成分，被廣泛研究和使用， 其中以20 (R)-人參皂苷Rg3最為引人矚目，其作為人參的主要有效成分，安全性良好，已經(jīng) 被制成抗腫瘤口服制劑應(yīng)用于臨床，作為注射劑被深入研究。
[0007] 本發(fā)明人通過大量的現(xiàn)代科學研究，采用先進的分離純化技術(shù)從人參藥材中提取 其治療類風濕的有效成分20 (R)-人參皂苷Rg3,可以為類風濕患者提供一種高效低毒的藥 物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的首要目的是提供20 (R)-人參皂苷Rg3治療或緩解類風濕的性能和功效， 并提供20 (R)-人參皂苷Rg3新的藥用用途，即在類風濕的藥物或保健食品中的新應(yīng)用。
[0009] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明一方面提供一種20 (R)-人參皂苷Rg3在制備用于緩解或 /和治療類風濕病的藥物或保健品中的應(yīng)用。
[0010] 在篩選具有緩解或/和治療類風濕作用的天然活性成分的過程中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)人 參的化學成分中20 (R)-人參皂苷Rg3具有較強的抗類風濕作用。
[0011] 其中，所述藥物由20 (R)-人參皂苷Rg3和藥學上可接受的載體組成。
[0012] 其中，所述的20 (R)-人參皂苷Rg3含量為1 %~98 % ;優(yōu)選為30~80 %，進一步 優(yōu)選為60 %。
[0013] 特別是，所述的20(R)_人參皂苷Rg3含量多1%，優(yōu)選為多30%，進一步優(yōu)選為 多60%，更進一步優(yōu)選為多80%，再更進一步優(yōu)選為多98%。
[0014] 特別是，藥學上可接受的載體通常被保健專家認可用于這一目的且作為藥劑 的非活性成分。有關(guān)藥學上可接受的載體的匯編可以在《藥物賦形劑手冊》（Handbook of Pharmaceutical excipients，第 2 版，由 A. Wade 和 P.J. Weller 編輯；American Pharmaceutical Association出片反，Washington and The Pharmaceutical Press，London， 1994)等工具書中找到。
[0015] 尤其是，所述的載體包括賦形劑，如淀粉、水等；潤滑劑，如硬脂酸鎂等；崩解劑， 如微晶纖維素等；填充劑，如乳糖等；粘結(jié)劑，如預(yù)膠化淀粉、糊精等；甜味劑；抗氧化劑；防 腐劑、矯味劑、香料等；
[0016] 其中，所述藥物以片劑、膠囊劑、丸劑、散劑、顆粒劑、糖漿劑形式存在。
[0017] 特別是，所述的20(R)_人參皂苷Rg3含量多1%，優(yōu)選為多30%，進一步優(yōu)選為 多60%，更進一步優(yōu)選為多80%，再更進一步優(yōu)選為多98%。
[0018] 本發(fā)明另一方面提供一種含有20 (R)-人參皂苷Rg3的緩解或/和治療類風濕病 癥的藥物或保健品。
[0019] 其中，所述的20(R)_人參皂苷Rg3含量彡1%，優(yōu)選為1%~98% ;優(yōu)選為30~ 80 %，更進一步優(yōu)選為60 %。
[0020] 特別是，所述的20(R)_人參皂苷Rg3含量多1%，優(yōu)選為多30%，進一步優(yōu)選為 多60%，更進一步優(yōu)選為多80%，再更進一步優(yōu)選為多98%。
[0021] 特別是，所述20 (R)-人參皂苷Rg3的重量與所述制劑的總重量之比為0. 01-10 : 100,優(yōu)選為0. 1~10 :1〇〇,進一步優(yōu)選為1~10 :1〇〇。
[0022] 特別是，所述藥物或保健品中還包括雪蓮提取物、獨活提取物、防風提取物、黃芪 提取物、丹參提取物、藏紅花提取物、白鮮皮提取物、土伏苓提取物，骨碎補提取物、五加皮 提取物、防己提取物、牛膝提取物、白術(shù)提取物、艾葉提取物，羌活提取物、熊果苷、維生素 C 及其衍生物或維生素 E及其衍生物中的一種或多種。
[0023] 所述藥物可以采用本領(lǐng)域公知的方法制成各種劑型，如片劑、膠囊劑、丸劑、散劑、 顆粒劑、糖衆(zhòng)劑等。
[0024] 本發(fā)明還提供了一種緩解或/和治療類風濕的方法，包括向受試者給予治療有效 量的20 (R)-人參皂苷Rg3的藥物組合物，其治療有效量為0. 06~12mg/kg. d，優(yōu)選為1~ 6mg/kg. d，進一步優(yōu)選為 L 5 ~3mg/kg. d。
[0025] 除非另外說明，本文所用的術(shù)語"治療有效量"為需要產(chǎn)生有效作用的藥物的用 量；"治療有效量"是可以調(diào)整和變化的，最終由醫(yī)務(wù)人員確定，其所考慮的因素包括給藥途 徑和制劑的性質(zhì)、接受者的體重、年齡等一般情況以及所治療疾病的性質(zhì)和嚴重程度。
[0026] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下的明顯優(yōu)點：
[0027] 1、本發(fā)明對已知化合物20 (R)-人參皂苷Rg3發(fā)掘了新的藥用價值，將其用于緩解 或/和治療類風濕病，并可制備成類風濕的藥物或保健食品，從而為人參藥材的應(yīng)用開拓 了一個新的領(lǐng)域。
[0028] 2、本發(fā)明的系列試驗研究證明20 (R)-人參皂苷Rg3具有顯著的抗類風濕的功效， 能夠顯著改善患者的生活質(zhì)量，增強患者體力。
[0029] 3、本發(fā)明的20 (R)-人參皂苷Rg3藥理作用強，用于緩解或/和治療類風濕的功效 顯著，見效快、毒副作用小、安全性好，能夠長期服用，具有良好的藥用前景。
[0030] 4、本發(fā)明的產(chǎn)品原料來源豐富、價廉、臨床使用安全，制備工藝簡單，可制成各種 劑型，且服量小，使用方便，因此易于推廣。
[0031] 5、本發(fā)明既可采用單一成分的20 (R)-人參皂苷Rg3活性成分制備緩解或/和治 療類風濕的藥物，又可采用20 (R)-人參皂苷Rg3與其它活性成分（例如與雪蓮、獨活、防 風、黃芪、丹參、藏紅花、白鮮皮、土伏苓，骨碎補、五加皮、防己、牛膝、白術(shù)、艾葉，羌活提取 物、熊果苷、維生素 C及其衍生物或維生素 E及其衍生物）共同組方，制備緩解或/和治療 類風濕的復方藥物或保健食品。
【具體實施方式】
[0032] 下面通過【具體實施方式】來進一步描述本發(fā)明所述配方的有益效果，這些實施例包 括了本發(fā)明的20 (R)-人參皂苷Rg3的膠囊、片劑、軟膠囊劑的藥效學試驗。這些實施例僅 是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離 本發(fā)明的配方思路、用途范圍下可以對本發(fā)明技術(shù)方案的細節(jié)和形式進行修改或替換，但 這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。
[0033] 實施例lRg3片劑
[0034] 按照如下配比準備原料
[0035] 人參皂苷Rg3 (純度63%) 500g 淀粉 1000 g 滑石粉 l%(15g) 硬脂酸鎂 l%(15g)
[0036] 將人參皂苷Rg3和淀粉混合均勻后，制成顆粒，加入滑石粉和硬脂酸鎂混合均勻 后壓制成10000片。
[0037] 實施例2Rg3膠囊劑
[0038] 按照如下配比準備原料
[0039] 人參皂苷Rg3 (純度63 % ) 200g
[0040] 淀粉 1000 g
[0041] 將人參皂苷Rg3和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0042] 實施例3Rg3顆粒劑
[0043] 按照如下配比準備原料
[0044] 人參皂苷Rg3 (純度89 % ) IOg
[0045] 淀粉 1000 g
[0046] 將人參皂苷Rg3和淀粉混合均勻后，制成顆粒裝袋，制成10000袋。
[0047] 實施例4Rg3片劑
[0048] 按照如下配比準備原料
[0049] 人參皂苷RgS (純度63%) 30g 丹參提取物 20g 維生素 C 4Q0g 淀粉 1000 g 滑石粉 l%(14.5g) 硬脂酸鎂 l%(14.5g)
[0050] 將人參皂苷Rg3、丹參提取物、維生素 C和淀粉混合均勻后制粒，加入滑石粉和硬 脂酸鎂混勻后壓制成10000片。
[0051] 實施例5Rg3膠囊劑
[0052] 1、按照如下配比準備原料
[0053] 人參皂苷RgS (純度97%) 30g 黃芪提取物 30g 維生素C 600g 淀粉 1000 g
[0054] 將人參皂苷Rg3、黃芪提取物、維生素 C和淀粉混合均勻后裝膠囊，制成10000粒。
[0055] 實施例6Rg3顆粒劑
[0056] 人參皂苷Rg3 (純度63%) 30g
[0057] 白鮮皮提取物 30g 維生素C 600g 蔗糖粉 5000g
[0058] 將人參皂苷Rg3、白鮮皮提取物、維生素 C和蔗糖粉混合均勻制成顆粒后裝袋，制 成10000袋。
[0059] 實施例7Rg3 口服液
[0060] 按照如下配比準備原料
[0061] 人參皂苷Rg3 (純度63%) 4g 土伏苓提取物 Sg 骨碎補提取物 Sg 葡萄糖糖漿 Sg
[0062] 全方最終加去離子水至100ml。
[0063] 取人參皂苷Rg3、土伏苓提取物、骨碎補提取物，用乙醇溶解后加入去離子水至 100ml，即得。
[0064] 試驗例lRg3對小鼠熱板致痛小鼠痛閡值的影響
[0065] 1材料與方法
[0066] I. 1藥物與試劑：
[0067] 人參皂苷Rg3(含量> 98% )，大連富生天然藥物開發(fā)有限公司生產(chǎn)，批號： 20120303 ;以中國藥品生物制品檢定所提供的人參阜甘Rg3標準品對照并進彳丁 HPLC標定， 含量為98. 2% ;
[0068] 雷公藤多甙片，湖南協(xié)力藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：20130706,規(guī)格為IOmg/片，用 生理鹽水配置成混懸液，濃度為lmg/ml ;
[0069] 生理鹽水：四川科倫藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號：20120819。
[0070] 1. 2實驗動物：
[0071] 昆明種小鼠，雌雄各半，體重18 - 22g，購自大連醫(yī)科大學實驗動物中心，質(zhì)量合 格證號：SCXK (13) 2013-0003。
[0072] 1. 3實驗方法
[0073] 將恒溫水浴箱的水浴槽加滿水，加熱，調(diào)節(jié)水溫為55 土 0. 5°C，并預(yù)熱10分鐘，一 次放一只小鼠到熱板上，取其舔后足的動作作為痛反應(yīng)指標。同時開始記時，記錄出現(xiàn)舔足 所需時間（S)，選擇50只30S以內(nèi)舔后足的小鼠做后面的實驗.將合格的小鼠隨機分為5 組，即空白生理鹽水組、陽性對照（雷公藤多甙）組、人參皂苷Rg3高、中、低劑量組，分別測 定各組的基礎(chǔ)痛閾（S)并記錄.給藥3天，空白組灌生理15ml/kg，陽性對照組灌雷公藤多 甙片0.1 Oml，人參皂苷Rg3高劑量6. Omg/kg，人參皂苷Rg3中劑3. Omg/kg，人參皂苷Rg3低 劑量I. 5mg/kg，第4天給藥后，分別測量15, 30分鐘后的痛閾值。超過60秒仍不舔后足的 記60秒，以上最后測定結(jié)果均以均數(shù)土標準差（一X土S)表示，采用t檢驗，顯著性標準定 為 P = 0· 05〇
[0074] 2實臉結(jié)果
[0075] 小鼠熱板致痛小鼠痛閡值的測定結(jié)果及分析見表1。
[0076] 表1人參皂苷Rg3對小鼠熱板致痛的影響（一X±S)
[0078] 注：與生理鹽水對照*P〈0. 05, #P〈0. 01 ;與雷公藤多甙對照Λ P〈0. 05。
[0079] 結(jié)果表明：與生理鹽水組對比，人參皂苷Rg3各劑量組能提高對熱板法致痛小鼠 的痛閾值，高、低劑量組P〈〇. 05,有顯著性差異，中劑量組P〈0. 01，有極顯著性差異，與雷公 藤對照組比較，中劑量組P (0.05,有顯著性差異。說明人參皂苷Rg3中劑量組鎮(zhèn)痛作用較 強。
[0080] 試驗例2Rg3對醋酸扭體反應(yīng)的影響
[0081] 1材料與方法
[0082] I. 1藥物與試劑：
[0083] 人參皂苷Rg3(含量> 98% )，大連富生天然藥物開發(fā)有限公司生產(chǎn)，批號： 20120303 ;以中國藥品生物制品檢定所提供的人參阜甘Rg3標準品對照并進彳丁 HPLC標定， 含量為98. 2% ;
[0084] 雷公藤多甙片，湖南協(xié)力藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：20130706,規(guī)格為IOmg/片，用 生理鹽水配置成混懸液，濃度為lmg/ml ;
[0085] 醋酸：天津市大茂化學試劑廠生產(chǎn)，批號：20120926 ;
[0086] 生理鹽水：四川科倫藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號：20120819。
[0087] I. 2實驗動物：
[0088] 昆明種小鼠，雌雄各半，體重18 - 22g，購自大連醫(yī)科大學實驗動物中心，質(zhì)量合 格證號：SCXK (13) 2013-0003。
[0089] 1. 3實驗方法
[0090] 選擇50只小鼠隨機分為5組，即空白生理鹽水組、陽性對照（雷公藤多甙）組、人 參皂苷Rg3高、中、低劑量組?？瞻捉M灌生理15ml/kg，陽性對照組灌雷公藤多甙片0. 10ml， 人參皂苷Rg3高劑量6. Omg/kg，人參皂苷Rg3中劑3. Omg/kg，人參皂苷Rg3低劑量I. 5mg/ 1^，于第4天給藥3〇111；[11后對各小鼠腹腔注射0.6%醋酸0.011]11/^，記錄1〇1]1；[11內(nèi)各組出現(xiàn) 扭體反應(yīng)（腹部內(nèi)凹，四肢伸展，臀部抬高）的小鼠數(shù)，記錄小鼠出現(xiàn)扭體所須時間即扭體 潛伏期（S)和各小鼠的扭體次數(shù)。
[0091] 以上最后測定結(jié)果均以均數(shù)土標準差（一X土S)表示，采用t檢驗。顯著性標準 定為 P = 0. 05。
[0092] 2實臉結(jié)果
[0093] 小鼠對醋酸扭體反應(yīng)的試驗結(jié)果及分析見表2。
[0094] 表2人參皂苷Rg3對醋酸扭體反應(yīng)的影響（一X±S)
[0096] 注：與生理鹽水對照**P〈0. 01 ;與雷公藤對照Λ P〈0. 05。
[0097] 由表2的試驗結(jié)果表明：人參皂苷Rg3各劑量對小鼠醋酸性扭體反應(yīng)的次數(shù)均明 顯的減少，潛伏期顯著延長，與生理鹽水對照組比，P〈〇. 01，有極顯著性差異，且中劑量組與 雷公藤對照，潛伏期變長，P〈〇. 05,有顯著性差異，說明人參皂苷Rg3有明顯的鎮(zhèn)痛作用。
[0098] 試驗例3Rg3人參皂苷Rg3對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響
[0099] 1材料與方法
[0100] 1. 1藥物與試劑：
[0101] 人參皂苷Rg3(含量> 98% )，大連富生天然藥物開發(fā)有限公司生產(chǎn)，批號： 20120303 ;以中國藥品生物制品檢定所提供的人參阜甘Rg3標準品對照并進彳丁 HPLC標定， 含量為98. 2% ;
[0102] 雷公藤多甙片，湖南協(xié)力藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號：20130706,規(guī)格為IOmg/片，用 生理鹽水配置成混懸液，濃度為lmg/ml ;
[0103] 生理鹽水：四川科倫藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號：20120819。
[0104] 1.2實驗動物：
[0105] 昆明種小鼠，雌雄各半，體重18 - 22g，購自大連醫(yī)科大學實驗動物中心，質(zhì)量合 格證號：SCXK (13) 2013-0003。
[0106] 1.3實驗方法
[0107] 選擇50只小鼠隨機分為5組，即空白生理鹽水組、陽性對照（雷公藤多甙）組、人 參皂苷Rg3高、中、低劑量組?？瞻捉M灌生理15ml/kg，陽性對照組灌雷公藤多甙片0. 10ml， 人參皂苷Rg3高劑量6. Omg/kg，人參皂苷Rg3中劑3. Omg/kg，人參皂苷Rg3低劑量I. 5mg/ kg，聯(lián)系給藥1周，于最后一次給藥后30分鐘，在小鼠的右耳正反兩面均勻涂上二甲苯 0.1 ml，1小時后脫頸椎處死小鼠，沿耳廓基線剪下兩耳，用打孔器在小鼠左右耳相同部位打 孔并分別稱重，記錄左右兩耳片重量差即腫脹度（g)。以上最后測定結(jié)果均以均數(shù)土標準 差（一X土 S)表示，采用t檢驗。顯著性標準定為P = 0. 05。
[0108] 2實臉結(jié)果
[0109] 人參皂苷Rg3對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響試驗結(jié)果及分析見表3。
[0110] 表3人參皂苷Rg3對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響（一X±S)
[0112] 注：與生理鹽水對照*Ρ〈0· 05, #Ρ〈0· 01 ;與雷公藤對照Λ Ρ〈0· 05。
[0113] 試驗結(jié)果表明：人參皂苷Rg3各劑量組和雷公藤多甙片對二甲苯所致小鼠耳廓腫 脹有非常顯著的抑制作用，與生理鹽水對照其P值小于0. 01和0. 05,有極顯著性差異，中， 高劑量組與雷公藤對照P〈〇. 05,有極顯著性差異，因而人參皂苷Rg3中，高劑量具有明顯的 抗炎作用，且優(yōu)于與雷公藤對照組。
[0114] 試驗例4人參皂苷Rg3治療類風濕關(guān)節(jié)炎的臨床療效觀察
[0115] 1材料與方法
[0116] 1.1藥物與試劑
[0117] 人參皂苷Rg3片：按照實施例1中的處方及工藝生產(chǎn)，大連富生天然藥物開發(fā)有限 公司生產(chǎn)，批號：20120503 ;
[0118] 來氟米特片：蘇州長征-欣凱制藥有限公司生產(chǎn)，批號：20120604,規(guī)格：10mg/ 片；
[0119] 甲氨蝶呤片：上海信誼藥廠有限公司生產(chǎn)，批號：20120905,規(guī)格：2. 5mg/片；
[0120] C反應(yīng)蛋白（CRP)試劑盒：上海捷門生物技術(shù)合作公司，批號：20120601 ;
[0121] 血沉（ESR)試劑盒：北京綠源博德生物科技有限公司，批號：20120707。
[0122] 1.2 -般資料
[0123] 從2013年6月至2014年6月間接受住院治療的124例類風濕關(guān)節(jié)炎患者，其中男 30例，女94例，年齡17-58歲，平均（36. 7±8. 3)歲，病程6個月~7年，平均（3. 8±2. 6) 年；所有患者均符合美國風濕病學院的診斷標準，且入院時未接受過慢作用抗風濕藥物治 療。排除合并其他免疫系統(tǒng)疾病、高血壓、糖尿病、心血管系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾病及嚴重肝腎功 能不全等，排除孕婦、哺乳期婦女。124例患者隨機分為實驗組和對照組，每組各62例，兩組 患者在年齡、性別、病程等方面均無顯著差異。
[0124] 美國風濕病學院的診斷標準：
[0125] 1、至少持續(xù)1小時以上的晨僵（6周以上）；2、三個以上關(guān)節(jié)腫脹（6周以上）；3、 手掌指關(guān)節(jié)、近側(cè)指間關(guān)節(jié)處腫脹（6周以上）；4、對稱性關(guān)節(jié)腫脹；5、手和手指的X線變 化；6、皮下結(jié)節(jié)；7、類風濕因子陽性。
[0126] 上述7項中只要具備4項即可診斷為類風濕關(guān)節(jié)炎，這個標準在全身各關(guān)節(jié)中特 別重視手的改變。
[0127] 1.3 方法
[0128] 對照組口服來氟米特20mg/次，1次/日，甲氨蝶呤10~15mg/次，1次/周。實 驗組口服人參皂苷Rg36mg/次，1次/日。兩組治療時間均至少持續(xù)3個月。
[0129] 1.4評價方法
[0130] 對兩組患者治療前和治療3個月后關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、晨僵等臨床表現(xiàn)及血沉 (ESR)、C反應(yīng)蛋白（CRP)等指標進行監(jiān)測和比較。
[0131] 臨床療效評價標準：
[0132] 顯效：ESR和CRP正?；蚪咏＃饕R床表現(xiàn)改善彡75% (4項診斷標準中3 項標準有改善）；
[0133] 進步：ESR和CRP接近正常或明顯改善，主要臨床表現(xiàn)改善彡50% (4項診斷標準 中2項標準有改善）；
[0134] 有效：ESR和CRP有改善或無改善，主要臨床表現(xiàn)改善多25% (4項診斷標準中1 項標準有改善）；
[0135] 無效：ESR和CRP無改善，主要臨床表現(xiàn)改善〈25%。
[0136] 總有效=顯效+進步+有效。
[0137] 1.5統(tǒng)計學
[0138] 使用SPSS15. 0軟件進行統(tǒng)計學分析，兩組間計數(shù)資料比較使用卡方檢驗，計量資 料比較使用t檢驗，當P〈0. 05時認為差異有統(tǒng)計學意義。
[0139] 2 結(jié)果
[0140] 2. 1兩組患者關(guān)節(jié)疼痛、腫脹個數(shù)及晨僵、ESR、CRP陽性率比較
[0141] 治療前兩組患者疼痛關(guān)節(jié)個數(shù)、腫脹關(guān)節(jié)個數(shù)、晨僵出現(xiàn)率、ESR陽性率、CRP陽性 率等均無顯著差異（P>〇. 05)。經(jīng)過3個月的治療后，實驗組平均疼痛、腫脹關(guān)節(jié)個數(shù)、晨僵 出現(xiàn)率和血沉陽性率等均顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義
[0142] (Ρ〈0·05)。見表 4。
[0143] 表4兩組患者關(guān)節(jié)疼痛、腫脹個數(shù)及晨僵、ESR、CRP陽性率比較
[0144]
[0145] 注：與治療后的對照組比較：*P〈0. 05
[0146] 2. 2兩組患者治療效果比較
[0147] 臨床試驗表明：實驗組患者顯效16例（25.8% )，顯著高于對照組的7例 (11.3% )，無效7例（11.3% )，顯著少于對照組的14例（22.5% )，差異均有統(tǒng)計學意 義（P〈0. 05)。實驗組總有效率88. 7%，顯著高于對照組的77. 5%，差異有統(tǒng)計學意義 (P〈0. 05)。臨床試驗結(jié)果如表5所示。
[0148] 表5兩組患者治療效果比較（％ )
[0150] 研究顯示，兩組患者經(jīng)過治療后癥狀均得到一定程度緩解，但實驗組在關(guān)節(jié)腫脹、 疼痛、晨僵等癥狀的緩解和ESR陽性率的降低上顯著優(yōu)于對照組（P〈0. 05)。臨床療效對比， 實驗組顯效率顯著高于對照組而無效率顯著低于對照組，總有效率高于對照組（P〈〇. 05)。 綜上所述，相比于來氟米特聯(lián)用甲氨蝶呤，人參皂苷Rg3能更顯著地降低關(guān)節(jié)腫痛癥狀，減 少晨僵發(fā)生率，對類風濕關(guān)節(jié)炎有更好的緩解和治療作用。
【主權(quán)項】
1. 20 (R)-人參皂苷Rg3在制備用于緩解或/和治療類風濕病癥的藥物或保健品中的應(yīng) 用。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征是所述藥物由20 (R)-人參皂苷Rg3和藥學上可 接受的載體組成。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征是所述藥物以片劑、膠囊劑、丸劑、散劑、顆 粒劑、糖漿劑形式存在。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用，其特征是所述的20 (R)-人參皂苷Rg3的純度 多1%〇5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征是所述所述的20 (R)-人參皂苷Rg3的純度為 1%~98%〇6. -種緩解或/和治療類風濕病癥的藥物或保健品，其特征是含有20 (R)-人參皂苷 Rg3〇7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物或保健品，其特征是所述20 (R)-人參皂苷Rg3的重量與 所述藥物或保健品的總重量之比為〇. 01-10 :1〇〇。8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物或保健品，其特征是所述的20 (R)-人參皂苷Rg3的純度 為彡1%〇9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物或保健品，其特征是所述的20 (R)-人參皂苷Rg3的純度 為1%~98%。10. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物或保健品，其特征是還包括雪蓮提取物、獨活提取物、 防風提取物、黃芪提取物、丹參提取物、藏紅花提取物、白鮮皮提取物、土伏苓提取物，骨碎 補提取物、五加皮提取物、防己提取物、牛膝提取物、白術(shù)提取物、艾葉提取物，羌活提取物、 熊果苷、維生素 C及其衍生物或維生素 E及其衍生物中的一種或多種。
【文檔編號】A61P19/02GK105982906SQ201510072406
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年2月11日
【發(fā)明人】惠敏, 富力, 王凱乾, 魯明明, 劉正賢, 王碩, 柳洋, 馮雪, 劉國友
【申請人】富力