專利名稱：用于口腔衛(wèi)生產(chǎn)品的抗微生物制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在口腔衛(wèi)生產(chǎn)品中使用的抗微生物制劑和使用這些制劑的方法。
背景技術(shù)：
牙周疾病和齲齒是全球主要的公眾健康和經(jīng)濟(jì)問(wèn)題。目前廣泛認(rèn)為這兩種牙周疾病都是由細(xì)菌引起的，細(xì)菌或團(tuán)狀滋生于牙齒上和牙齦區(qū)內(nèi)，對(duì)于這些細(xì)菌團(tuán)，通常所用的描述術(shù)語(yǔ)是“齒斑”。以牙周疾病為例，Schluger等(Schluger,Yuodelis,Page & Johonson，牙周疾病，第二版，153-262頁(yè)，Lea & Febiger,1990)報(bào)道了滋生于牙齒與牙齦組織交界區(qū)域的齒斑細(xì)菌引起牙齦的炎癥，稱為牙齦炎，其特征在于腫脹，水腫的牙齦(“齦”)，牙齦發(fā)紅并且易出血。如果齒斑未被完全清除，許多人的牙齦炎可能發(fā)展成牙周炎或牙周疾病。牙周炎的特征通常在于牙齒周圍組織的慢性炎癥，這種炎癥導(dǎo)致支持骨的吸收。牙周疾病是成人缺齒的首要原因。齲齒(牙洞)也是由細(xì)菌引起的，主要致病成分是變異鏈球菌(McGhee,Michalek & Cassell，牙齒微生物學(xué)，第279頁(yè)，Harper &Row,1982)。
防止齒斑或去除齒斑一直是研究的焦點(diǎn)，其最終目的是抑制齲齒和牙周疾病。雖然經(jīng)常刷牙能夠在一定程度上防止齒斑的形成，但是僅靠刷牙并不足以有效地防止齒斑的形成或基本上去除牙齒上已經(jīng)形成的齒斑。
既然刷牙本身不足以有效地防止和去除齒斑，那么現(xiàn)已提出使用抗細(xì)菌物質(zhì)如洗必太，氯化苯甲烴銨，氯化十六烷基吡啶鎓的化學(xué)方法。本領(lǐng)域古老技術(shù)是將天然物質(zhì)用于牙齒和牙齦的治療，這自19世紀(jì)80年代中期已有記載并已進(jìn)行應(yīng)用。從那時(shí)起，有許多專利公開(kāi)了含天然物質(zhì)提取物的口腔產(chǎn)品組合物。有許多天然精油可用。一些這樣的精油在KIRK OTHMER化學(xué)技術(shù)百科全書，第4版，17卷，頁(yè)數(shù)603-674，John Wiley & Sons.Inc.Morton Pader，于“口腔保健產(chǎn)品和應(yīng)用”化妝品科學(xué)和技術(shù)叢書，6卷，于頁(yè)數(shù)356-373中描述。Marcel Dekker.Inc.描述了具抗細(xì)菌特征的血紅堿(sanguinaria)提取物作為抗齒斑試劑。Pader也描述了具不同程度抗菌活性的揮發(fā)油如按葉醇，薄荷醇，麝香草酚，水楊酸甲酯，這些揮發(fā)油在適當(dāng)試驗(yàn)條件下的抗齒斑活性已有報(bào)道。Pader描述了桂皮油是非常弱的防腐劑，并且按葉油和按葉酚是防腐劑。Padder注意到一些精油已用于原來(lái)作為香料的其它產(chǎn)品。這樣的產(chǎn)品是桂皮(cinnamon)，桂皮(cassia)，蒜瓣(clove)，麝香草(thyme)，胡椒薄荷，洋茴香(anise)和茴香(anethol)。Padder也描述了這些精油具有可檢測(cè)到的抗微生物活性。
例如，已知cocamidopropyl甜菜堿、扁柏酚、和小檗堿和精油、檸檬醛、香葉醇、及刺柏子油(Juniper berries oil)單獨(dú)都表現(xiàn)對(duì)某種細(xì)菌的抗微生物效應(yīng)。
美國(guó)專利號(hào)3,940,476描述了一種抑制齒斑形成的方法，它包括以下列物質(zhì)中的一種或幾種的組合作為活性制劑局部施用給牙齒，這些物質(zhì)包括(a)異硫氰酸丙烯酯，(b)uranine,(c)obtusastyrene,(d)檸檬醛，(e)香茅醇，(f)橙花醇，或(g)香葉醇。
美國(guó)專利號(hào)4,913,895描述了一種口腔組合物，它在水性介質(zhì)含線性聚磷酸鹽或環(huán)狀聚磷酸鹽及薄荷醇，anethol，或其混合物。有報(bào)道這種組合物具有抗細(xì)菌效應(yīng)，并預(yù)防結(jié)石和牙周疾病的發(fā)生。
美國(guó)專利號(hào)4,966,754描述了某些香料油的它們的組合具有對(duì)黑曲霉、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌和銅綠假胞菌的抗微生物效應(yīng)，因而適合做化妝品組合物中的防腐劑。報(bào)道了14種精油的混合能夠提供針對(duì)普通微生物的抗微生物效力。
美國(guó)專利號(hào)4,999,184描述了含某種焦磷酸鹽的油組合物，據(jù)報(bào)道焦磷酸鹽提供抗結(jié)石效應(yīng)。
美國(guó)專利號(hào)5,316,760描述了含大蕁麻提取物和歐洲杜松提取物組合的口腔護(hù)理產(chǎn)品，據(jù)描述這些提取物的組合導(dǎo)致協(xié)同減少齒斑的形成和牙齦的炎癥或出血。也描述了千葉蕃提取物可作為大蕁麻提取物和歐洲杜松提取物組合的合適添加劑。
美國(guó)專利No.5,472,684描述了含丁子香酚和麝香草酚，及選擇性地倍半萜燃醇，如法呢醇的組合物。據(jù)報(bào)道這種組合物有抗齒斑和抗牙齦炎效應(yīng)。澳大利亞茶樹(shù)油、鼠尾草油和桉葉油已被描述為能增強(qiáng)漱口液的抗齒斑活性及抗牙齦炎活性，可配制在公開(kāi)的組合物中。
鑒定作為抗齒斑和抗結(jié)石制劑的抗微生物制劑的效果的一個(gè)特征是制劑的最小抑制濃度或MIC。MIC是當(dāng)沒(méi)有觀察到細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)以mg/ml表示的抗微生物制劑的最小濃度。當(dāng)濃度低于MIC時(shí)，抗微生物制劑不能有效殺死細(xì)菌或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖；當(dāng)濃度高于MIC時(shí)，抗微生物制劑能有效地殺死細(xì)菌或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖。
典型地，抗微生物制劑以初始濃度導(dǎo)入口腔。由于口腔中的動(dòng)態(tài)變化，初始濃度隨即開(kāi)始下降。實(shí)際上，口腔內(nèi)抗微生物制劑的濃度將降至低于MIC。因此，研究抗齒斑及抗結(jié)石配方工作的目標(biāo)是要使用MIC較低的抗微生物制劑。
洗必太的MIC約為1μg/ml，并且它是衡量其它抗微生物制劑的標(biāo)準(zhǔn)。雖然洗必太的MIC較為理想，但它有令人不快的味道，并有牙齒染色的副作用。
發(fā)明概述一方面，本發(fā)明是含抗微生物制劑的口腔衛(wèi)生組合物，抗微生物制劑選自香柏油，氯霉素，香茅油，光果甘草提取物，漿果羅勒油，檸檬羅勒油和迷迭香油。根據(jù)本發(fā)明，含這些抗微生物制劑的口腔衛(wèi)生組合物有效地抑制和防止口腔中細(xì)菌的生長(zhǎng)，如粘性放線菌，具核梭桿菌，牙齦卟啉單胞菌，變異鏈球菌和血鏈球菌的生長(zhǎng)。根據(jù)本發(fā)明配制的組合物的特征在于含有足以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)或殺死細(xì)菌含量的抗微生物制劑。
抗微生物制劑可以與在口腔衛(wèi)生產(chǎn)品中常有的典型成分如潔牙劑結(jié)合。這些成分包括磨擦劑，致濕劑，粘合劑，和表面活性劑。其它潔牙劑包括調(diào)味劑和增稠劑。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明的口腔衛(wèi)生組合物和產(chǎn)品可以在實(shí)施口腔保健的方法中應(yīng)用，包括用抗微生物制劑接觸口腔的步驟，抗微生物制劑選自香柏油，氯霉素，香茅油，光果甘草提取物，漿果羅勒油，檸檬羅勒油，檸檬油，或迷迭香油。優(yōu)選的實(shí)施方案的詳細(xì)描述如本文所用的，以下術(shù)語(yǔ)有下列含義“香柏油”是指從鉛筆柏(Jniperus virginiana)或Juniperus ashei的心材中提取的揮發(fā)性全油提取物，這一全油提取物的成分包括thujopsene，雪松醇，α-烯，α-雪松烯，β-雪松烯和韋得醇，香柏油的CAS號(hào)為8000-27-9。
“氯霉素”是指2,2-二氯-N-[2-羥基-1-(羥甲基)-2-(4-硝基苯基)乙基]乙酰胺，氯霉素來(lái)自委內(nèi)瑞拉鏈霉菌或經(jīng)有機(jī)合成。氯霉素的CAS號(hào)是56-75-7。
“香茅油”是指通過(guò)Cymbopogon nardus或Cymbopogonwinterianus蒸汽蒸餾生產(chǎn)的商業(yè)上可買到的油。香茅油的CAS號(hào)為8000-29-1。
“光果甘草提取物”也被稱作甘草根提取物，是指來(lái)自光果甘草的粗提取粉。存在包括G.typica和G.glandufifera的幾個(gè)品種。光果甘草提取物包含甘草酸和甘草次酸。全提取物可從商業(yè)來(lái)源得到或通過(guò)溶劑抽提法收集，如下述的乙醇提取法。
“漿果羅勒油”指具有漿果成分的所選羅勒屬品種的全提取物，漿果羅勒是矮糖羅勒的栽培品種。
“檸檬羅勒油”是指從具檸檬醛成分的所選羅勒屬品種中提取的揮發(fā)性全油提取物。檸檬羅勒是矮糖羅勒的人工栽培品種，該品種具有較高的檸檬醛含量。
“檸檬油”是指從檸檬新鮮果皮提取的揮發(fā)性全油提取物。檸檬油也稱為檸檬的油。檸檬油的CAS注冊(cè)號(hào)為8008-56-8。
“迷迭香油”是指從迷迭香的花頂端提取的全油提取物。迷迭香油也稱為迷迭香提取物或迷迭香油的提取物。迷迭香油的CAS注冊(cè)號(hào)為84606-14-8。
所有前述的都可從商業(yè)來(lái)源得到。
“最低抑制濃度或MIC”是指當(dāng)觀察不到細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)抗微生物制劑的最低濃度，該濃度以mg/ml表示。濃度低于最低抑制濃度時(shí)，抗微生物制劑不能有效地殺死細(xì)菌或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖，濃度高于最低抑制濃度時(shí)，抗微生物制劑能有效地殺死細(xì)菌或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖。
根據(jù)本發(fā)明配制的口腔衛(wèi)生組合物包含選自香柏油，氯霉素，香茅油，光果甘草提取物，漿果羅勒油，檸檬羅勒油，和迷迭香油的抗微生物制劑。這些口腔衛(wèi)生組合物可以摻入根據(jù)本發(fā)明配制的口腔衛(wèi)生產(chǎn)品，如牙膏，洗口液和漱口液。
優(yōu)選的口腔衛(wèi)生組合物包含選自香柏油，氯霉素，香茅油的抗微生物制劑。特別優(yōu)選的用于在根據(jù)本發(fā)明配制的口腔衛(wèi)生組合物中摻入的抗微生物制劑選自香柏油和光果甘草提取物。優(yōu)選的抗微生物制劑得到選擇是因?yàn)檫@些制劑令人驚訝地抑制和/或防止代表性的革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性口腔病原細(xì)菌，如粘性放線菌，具核梭桿菌，牙齦卟啉單胞菌，變異鏈球菌和血鏈球菌的生長(zhǎng)。以下實(shí)施例舉例說(shuō)明本發(fā)明的抗微生物制劑抵抗這些具體細(xì)菌的效果。優(yōu)選地，抗微生物制劑有效地抵抗多于一種上述的細(xì)菌，優(yōu)選地所有上述的細(xì)菌。
在根據(jù)本發(fā)明配制組合物中存在的抗微生物制劑具體含量并不限于任何特定的值，只要其含量能有效地抑制和/或預(yù)防細(xì)菌的生長(zhǎng)，即抗微生物制劑的含量大于對(duì)應(yīng)于特定功菌的MIC值。
如以下實(shí)施例說(shuō)明的，本發(fā)明的抗微生物制劑抵抗代表性的口腔病原體粘性放線菌，具核梭桿菌，牙齦卟啉單胞菌，變異鏈球菌和血鏈球菌時(shí)的MIC從約3.1到約156的范圍變動(dòng)。
牙膏通常是在水性致濕體系中含磨擦增亮劑的增稠漿液。典型地。牙膏含有磨擦劑(能夠去除污染的菌膜)，致濕劑(香味劑，磨擦劑和增稠劑的載體，以使牙膏具有一定的結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性)，表面活性劑(主要在使用時(shí)產(chǎn)生泡沫)，氟化物(預(yù)防牙洞)，和香味劑(賦予牙膏香味)。
有多種磨擦劑可用于牙膏中，其例子包括硅膠、硅沉淀物、磷酸氫二鈣、二水合磷酸氫二鈣、三水合氫氧化鋁、焦磷酸鈣、碳酸鈣和不溶性偏磷酸鈣。
合適的致溫劑的例子包括山梨糖醇，甘油和聚乙二醇。
硅氣凝膠，焦化硅、硅沉淀物、羧甲基纖維素、羧基乙烯多聚體、黃原膠和角叉藻聚糖適于作為增稠劑。
典型表面活性劑包括十二烷基硫酸鈉和十二烷基苯磺酸鹽。
許多香味劑可從商業(yè)上得到，含香味劑可提供薄荷味或其它清新香味，如通常使用的桂皮。
漱口液或洗口液通常是水性的可傾倒的具香味的乳劑，在大多數(shù)情況下，其中摻入了抗微生物物質(zhì)。漱口液的典型成分包括香味劑(使產(chǎn)品使用時(shí)受到歡迎并加強(qiáng)治療或保鮮質(zhì)量)，表面活性劑(使香味穩(wěn)定擴(kuò)散)，致濕劑(改進(jìn)口感)，增稠劑和活性成分。大多數(shù)時(shí)間表面活性用于帶給漱口液輕柔的泡沫。
根據(jù)本發(fā)明用于抑制口腔中細(xì)菌生長(zhǎng)的含抗微生物制劑的牙膏和漱口液以傳統(tǒng)方法配制，其中抗微生物制劑含約0.001％至約5.0％(重量百分比，基于牙膏的總重量)。優(yōu)選地含重量百分比約0.01％至約2.5％的抗微生物制劑。在本發(fā)明的含抗微生物制劑的牙膏和漱口液中使用的具體成分不限于以下列出的，然而，優(yōu)選地所選成分不對(duì)所選抗微生物制劑的抗微生物特性有拮抗效應(yīng)。
以下實(shí)施例說(shuō)明了本發(fā)明的口腔衛(wèi)生組合物抵抗口腔細(xì)菌的效果，在組合物中抗微生物制劑抵抗這些細(xì)菌的MIC，包含本發(fā)明的抗微生物組合物的牙膏配方，消費(fèi)者對(duì)這樣的牙膏配制物的偏愛(ài)，以及這樣的牙膏配制物的體內(nèi)效果。實(shí)施例1測(cè)定抗微生物制劑的最小抑制濃度以下實(shí)施例說(shuō)明了根據(jù)本發(fā)明的抗微生物制劑如何抑制或防止口腔中齒斑細(xì)菌的生長(zhǎng)。另外，這些實(shí)施例說(shuō)明了各種抗微生物制劑抑制特定細(xì)菌可見(jiàn)的體外生長(zhǎng)的最低濃度。
實(shí)驗(yàn)使用微量滴定板稀釋抗微生物制劑至不同的濃度，以測(cè)定MIC。
下表1提供了在本實(shí)施例中抗微生物制劑的目錄和其縮寫。表1抗微生物制劑和其縮寫。
香柏油(RC1)氯霉素(CR1)香茅油(CTR1)光果甘草提取物(GLY)漿果羅勒油(JFB1)檸檬羅勒油(LMB1)迷迭香油(ROF1)細(xì)菌培養(yǎng)物在37℃培養(yǎng)過(guò)液。在如下所述稀釋抗微生物制劑之前，將細(xì)菌培養(yǎng)物在2000rpm離心產(chǎn)生沉淀，并用磷酸緩沖液重新懸浮。接種液用分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)化至適當(dāng)濃度，即在550nm下光密度在0.18-0.22之間，相當(dāng)于5.0×107克隆形成單位(CFU)/ml。接種液放置一邊直到完成抗微生物制劑的稀釋。
使用無(wú)菌聚苯乙烯96-孔滴定板稀釋抗微生物制劑。使用無(wú)菌技術(shù)，將100μl雙蒸水加入每個(gè)檢測(cè)加樣孔，在每列的第一個(gè)加樣孔中加入100μl抗微生物制劑。用甲醇作為溶劑將抗微生物制劑配成溶液得到抗微生物制劑的貯備液。這就產(chǎn)生了貯備液的1/2稀釋。從這些第一個(gè)加樣孔將100μl轉(zhuǎn)移到這一列的下一個(gè)加樣孔，繼續(xù)這樣下去完成每一列加樣孔。每一樣轉(zhuǎn)移伴隨著前一個(gè)加樣孔濃度的1/2稀釋?？刮⑸镏苿┑南♂屚瓿芍?，將80μl與所測(cè)細(xì)菌對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)培養(yǎng)基加入每個(gè)加樣孔。對(duì)所給細(xì)菌對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)培養(yǎng)基在表2中列出。
接著，向兩個(gè)加樣孔加入20μl接種液。結(jié)果是每行第一個(gè)加樣孔的最終稀釋度是貯備液的1/4。其它的加樣孔是每次轉(zhuǎn)移的前一個(gè)加樣孔的1/2稀釋。
96孔滴定板在根據(jù)特定微生物變化的條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)條件在表2中列出。需氧細(xì)菌在正常室溫條件下培養(yǎng)，而壓氧細(xì)菌在10％氫氣，5％二氧化碳和其余是氮?dú)獾臍怏w中培養(yǎng)。48小時(shí)培養(yǎng)之后，用分光光度計(jì)讀出培養(yǎng)板微生物生長(zhǎng)的光密度(OD)。含有結(jié)果分光光度計(jì)讀出值低于OD0.05(即無(wú)可測(cè)的微生物生長(zhǎng))的最低稀釋液的加樣孔看作代表該抗微生物制劑。通過(guò)計(jì)算起始貯備液濃度和96孔滴定板的所得稀釋度確定該試劑的MIC。
在下表2中列出在96孔加樣板中接種的特定細(xì)菌，及該細(xì)菌的生長(zhǎng)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。
表2微生物/生長(zhǎng)培養(yǎng)基/培養(yǎng)條件
1．胰胨豆胨培養(yǎng)液3.0％(重量體積比)，酵母提取物0.1％，和999ml雙蒸水。2．胰胨豆胨培養(yǎng)液3.0％(重量體積比)，酵母提取物0.5％,L-半胱氨酸0.05％，氯高鐵血紅素0.0005％，維生素K30.00002％和990ml雙蒸水。3．胰胨豆胨培養(yǎng)液3.0％(重量體積比)，酵母提取物0.5％，蛋白胨1.0％,L-半胱氨酸提取物0.05％，氯高鐵血紅素0.0005％，維生素K30.0002％和990ml雙蒸水。4．腦心浸液培養(yǎng)液0.74％(重量體積比)，酵母提取物0.01％，甲酸鈉0.2％，延胡索酸鈉0.03％，氯高鐵血紅素0.005％和990ml雙蒸水。
在下表中，抗微生物制劑以對(duì)應(yīng)于表1中列出的縮寫識(shí)別。另外，表2中列出的五種微生物用表2中列出的縮寫代表。
表3抗微生物制劑針對(duì)所示細(xì)菌的MIC(μg/ml)
此實(shí)施例舉例說(shuō)明了代表性抗微生物制劑的最小抑制濃度和抗微生物制劑抑制特定細(xì)菌生長(zhǎng)的能力。實(shí)施例2牙膏配方此實(shí)施例描述了含本發(fā)明的抗微生物制劑的牙膏配方。配方18-88不包含根據(jù)本發(fā)明的抗微生物制劑。表4配方5-82:0.1％香柏油(重量/重量)成分 重量百分比山梨醇70％37.00泊洛沙姆407(PLURONICF127) 9.50去離子水 24.50卡波姆940(CARBOPOL940) 0.30氫氧化鈉 0.20黃原膠0.40甘油 4.75氟化鈉0.25糖精鈉0.30SYLODENT750(二氧化硅) 9.50SYLODENT15(二氧化硅) 9.50香柏油0.50香味劑0.90FD&C藍(lán)色#11％溶液 0.10二氧化鈦 0.90十二烷基磺酸鈉1.40表5配方5-81:0.01％香柏油(重量/重量)成分 重量百分比山梨醇70％ 58.63羧甲基纖維素鈉 0.35去離子水 3.00聚乙二醇600 5.00甘油 10.00氟化鈉 0.22糖精鈉 0.30苯甲酸鈉 0.50SYLODENT700(二氧化硅) 15.00AEROSIL200(二氧化硅) 3.00香味劑 0.80乙醇 1.50香柏油 0.10FD&C藍(lán)色#11％溶液0.10十二烷基磺酸鈉 1.50表6配方5-108:0.4％香柏油(重量/重量)成分重量百分比山梨醇70％ 50.00去離子水24.63卡波姆940(CARBOPOL940) 0.30氫氧化鈉0.20黃原膠 0.50氟化鈉 0.22糖精鈉 0.55SYLODENT750(二氧化硅)10.00DYLODENT15(二氧化硅) 10.00香柏油 0.40香味劑 0.80二氧化鈦1.00十二烷基磺酸鈉 1.40表7配方18-87:0.5％光果甘草提取物(重量/重量)成分 重量百分比山梨醇70％50.00去離子水 24.53卡波姆940(CARBOPOL940) 0.30氫氧化鈉 0.20黃原膠0.50氟化鈉0.22糖精鈉0.55SYLODENT750(二氧化硅) 10.00SYLODENT15(二氧化硅) 10.00光果甘草提取物0.50香味劑0.80二氧化鈦 1.00十二烷基磺酸鈉1.40表8配方18-90:1％香柏油(重量/重量)成分 重量百分比山梨醇70％ 50.00去離子水 24.03卡波姆940(CARBOPOL940)0.30氫氧化鈉 0.20黃原膠 0.50氟化鈉 0.22糖精鈉 0.55SYLODENT750(二氧化硅) 10.00SYLODENT15(二氧化硅) 10.00香柏油 1.00香味劑 0.80二氧化鈦 1.00十二烷基磺酸鈉 1.40表9配方18-25∶0.1％扁柏酚成分 重量百分比去離子水 92.02卡波姆940(CARBOPOL940)1.00氫氧化鈉 0.75糖精鈉 0.50氟化鈉 0.23香味劑 0.80扁柏酚 0.10乙醇 3.50十二烷基磺酸鈉 1.10表10配方18-88對(duì)照成分 重量百分比山梨醇70％ 37.70泊洛沙姆407(PLURONICF127) 9.50去離子水 25.50卡波姆940(CABOPOL940) 0.30氫氧化鈉 0.20黃原膠 0.40甘油 4.75氟化鈉 0.25糖精鈉 0.40SYLODENT750(二氧化硅) 9.50SYLODENT15(二氧化硅) 9.50二氧化鈦 1.00十二烷基磺酸鈉 1.00“卡波姆”指由丙烯酸和烯丙基蔗糖交聯(lián)組成的多聚體，可得到如CARBOPOL940。CARBOPOL940是可從B.F.Goodrich商業(yè)購(gòu)買。SYLODENT750,700和15是硅膠(二氧化硅)。SYLODENT從W.R.Grace&Co.Conn.Davison chemicalDivision商業(yè)購(gòu)買。
上述配方在真空混合器中通過(guò)邊抽真空邊加去離子水并分散卡波姆配制。當(dāng)卡波姆均勻分散時(shí)，加入氫氧化鈉。70％山梨醇和泊洛沙姆在另一容器中加熱并混勻。然后將泊洛沙姆混合物加入真空混合器中并與卡波姆混合。將黃原膠與甘油混合，然后加入到真空混合器的溶液中并摻入其中。然后將鹽類加入真空混合器中，接著加二氧化硅。緩慢地將這些成分混入。接著加入活性成分，香味劑，十二烷基磺酸鈉和著色劑，接著混合直到很好地?fù)饺搿?br> 此實(shí)施例說(shuō)明了幾種摻入了本發(fā)明的抗微生物制劑的牙膏配方。實(shí)施例3用戶認(rèn)可此實(shí)施例舉例說(shuō)明這些摻入了根據(jù)本發(fā)明的抗微生物制劑的牙膏配方的用戶認(rèn)可程度。
對(duì)在表4-9中列出的配方進(jìn)行用戶認(rèn)可評(píng)估。為了比較，也評(píng)估幾種商業(yè)上可得到的牙膏。這些包括Viadent膠(配方5-35)，可從Viadent公司得到；Crest Regular Blue Paste(配方5-97)，可從Proctor & Gamble公司得到；和Listerine Teal膠(配方5-99)，可從Warner wellcome得到。
對(duì)大約20人的組進(jìn)行偏受研究。一管牙膏配制物給每個(gè)人使用一周的時(shí)間，在這周末，參加者填寫調(diào)查表，研究結(jié)果總結(jié)于表11中。評(píng)分范圍是1-10,1為“差”，而10為“好”。記錄評(píng)分并計(jì)算平均值。
表11用戶評(píng)估
此實(shí)施例說(shuō)明了含有根據(jù)本發(fā)明的活性成分的配方的用戶總滿意度如何比商業(yè)上得到產(chǎn)品的用戶總滿意度高。實(shí)施例4體內(nèi)齦緣細(xì)菌的減少此實(shí)施例舉例說(shuō)明含本發(fā)明的組合物的牙膏配制物減少了齦緣內(nèi)的細(xì)菌水平。
在此實(shí)施例中，受實(shí)驗(yàn)者刷牙習(xí)慣保持不變。在取樣那天，受實(shí)驗(yàn)者在測(cè)試前16-18小時(shí)(過(guò)液)不刷牙。細(xì)菌水平通過(guò)提取體內(nèi)樣品并計(jì)算48小時(shí)后在瓊脂上形成的細(xì)菌克隆數(shù)來(lái)計(jì)數(shù)。
受實(shí)驗(yàn)者年齡18-65歲、有最少20顆牙齒，并且唾液分泌正常。有影響口腔組織的系統(tǒng)疾病如糖尿病，血細(xì)胞異常。唐氏綜合癥；或已知HIV感染；有舌炎，中度到重度齦炎，牙周炎或其它口腔感染；或正在服系統(tǒng)抗生素或在測(cè)試前兩周內(nèi)已服系統(tǒng)抗生素的人不能作為受實(shí)驗(yàn)者。
每一種配方對(duì)約20個(gè)受實(shí)驗(yàn)者進(jìn)行抗微生物功效測(cè)試。要求受實(shí)驗(yàn)者有過(guò)夜齒斑，在早晨進(jìn)行配制物的“單次刷牙效應(yīng)”取樣。
作為基準(zhǔn)，用無(wú)菌棉簽提取齦緣齒斑樣品，并放在1ml無(wú)菌磷酸鹽緩沖液(PBS)中。棉簽沿著下頜頰面切牙間的齦緣輕輕磨擦。在基準(zhǔn)取樣后，受實(shí)驗(yàn)者立即使用電動(dòng)牙刷用牙膏配制物刷兩分鐘。刷完牙后1和2小時(shí)間歇后，如上所述，提取齦緣菌斑樣品。
臨床設(shè)計(jì)是多次交叉實(shí)驗(yàn)，多次交叉實(shí)驗(yàn)是指實(shí)驗(yàn)中受實(shí)驗(yàn)者進(jìn)行第一項(xiàng)處理后，接著交換到接受第二項(xiàng)，然后第三項(xiàng)和最后第四項(xiàng)處理。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)使每個(gè)受實(shí)驗(yàn)者作為他或她自己的對(duì)照。在測(cè)試不同的抗細(xì)菌配制物之間，有2天的“洗凈”期。
齦樣品在試管中放置，保持在室溫，在1小時(shí)之內(nèi)進(jìn)行下面的處理。試管樣品用Spiral plater(Spiral系統(tǒng)，Cincinnati,ohio)在無(wú)菌PBS中進(jìn)行一系列稀釋，并在加35％綿羊血(BBL，Becton Dickinson,Cockeysville,Maryland)的血瓊脂上鋪板。鋪好的平板在37℃需氧條件下培養(yǎng)48小時(shí)。計(jì)算細(xì)菌的總需氧克隆形成單位。
細(xì)菌數(shù)轉(zhuǎn)換成log10單位。得到每種測(cè)試情況的平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。由受實(shí)驗(yàn)者比較相關(guān)對(duì)照的數(shù)據(jù)并通過(guò)非參數(shù)的wilcoxon跡象-排列比較分析顯著性水平。假設(shè)實(shí)驗(yàn)依賴于利用臨床實(shí)驗(yàn)的多次交叉設(shè)計(jì)的統(tǒng)計(jì)。
這些數(shù)據(jù)在表12中表示，配方18-25,18-27和18-90包含的成分分別在表9,7和8中列出。表18-88包含的成分在表10中列出(無(wú)抗細(xì)菌制劑)，并用作配方18-25,18-87和18-99的比較對(duì)照。
表12含抗微生物制劑的牙膏配制物對(duì)體內(nèi)細(xì)菌水平的影響
統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯著性分析針對(duì)對(duì)照(配方18-88)，在2小時(shí)測(cè)試。用log10轉(zhuǎn)化數(shù)據(jù)的Wilcoxon跡象-排列配對(duì)。***p＜0.01**p＜0.05,*p＜0.1NA=沒(méi)有此實(shí)施例說(shuō)明了含本發(fā)明的抗微生物制劑的牙膏配方如何減少體內(nèi)齦部細(xì)菌水平。實(shí)施例5光果甘草的乙醇抽提將25g粉狀光果甘草植物材料與250g 95∶5乙醇/水混合物結(jié)合，混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。用4號(hào)Whatman濾紙?jiān)诓际下┒分羞^(guò)濾從攪拌混合物中除去固體。用5號(hào)Whatman濾紙?jiān)诓际下┒分羞^(guò)濾進(jìn)一步除去固體。其它的固體用Whatman 1μm濾膜在布氏漏斗中過(guò)濾除去。最后用真空過(guò)濾裝置和0.2μm濾膜使溶液澄清。然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將澄清溶液濃縮得到固體。大約收集到2.5g銹色固體為光果甘草的粗提物。
雖然本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案已得到舉例說(shuō)明和描述，但應(yīng)當(dāng)理解在不超過(guò)本發(fā)明的精神和范圍的情況下可以進(jìn)行各種改變。
權(quán)利要求
1．一種口腔衛(wèi)生組合物，包含選自香柏油，氯霉素，香茅油，光果甘草提取物，漿果羅勒油，檸檬羅勒油，和迷迭香油的抗微生物制劑。
2．權(quán)利要求1的口腔衛(wèi)生組合物，其中抗微生物制劑選自香柏油，氯霉素，和光果甘草。
3．權(quán)利要求2的口腔衛(wèi)生組合物，其中抗微生物制劑選自香柏油和光果甘草。
4．權(quán)利要求1的口腔衛(wèi)生產(chǎn)品，其中抗微生物制劑以足以抑制口腔病原細(xì)菌生長(zhǎng)的含量存在。
5．權(quán)利要求4的口腔衛(wèi)生組合物，其中口腔病原細(xì)菌選自粘性放線菌，直腸彎曲桿菌，具核梭桿菌，牙齦卟啉單胞菌，變異鏈球菌和血鏈球菌。
6．權(quán)利要求1的口腔衛(wèi)生組合物，其中抗微生物制劑以足以殺死細(xì)菌的含量存在。
7．權(quán)利要求6的口腔衛(wèi)生組合物，其中細(xì)菌選自粘性放線菌直腸彎曲桿菌，具核梭桿菌，牙齦卟啉單胞菌，變異鏈球菌和血鏈球菌。
8．權(quán)利要求1的口腔衛(wèi)生組合物，其中抗微生物制劑以有效抑制齒斑形成的含量存在。
9．權(quán)利要求1的口腔衛(wèi)生組合物，其中抗微生物制劑以大于制劑的最小抑制濃度的含量存在。
10．一種牙膏，包含選自香柏油，氯霉素，香茅油，光果甘草，漿果羅勒油，檸檬羅勒油，檸檬油，和迷迭香油的抗微生物制劑；磨擦劑；致濕劑；粘合劑；和表面活性劑。
11．權(quán)利要求10的牙膏，其中抗微生物制劑選自香柏油，氯霉素，和光果甘草。
12．權(quán)利要求11的牙膏，其中抗微生物制劑選自香柏油和光果甘草。
13．權(quán)利要求10的牙膏，其中抗微生物制劑以足以抑制口腔病原細(xì)菌生長(zhǎng)的含量存在。
14．權(quán)利要求13的牙膏，其中細(xì)菌選自粘性放線菌，直腸彎曲桿菌，具核梭桿菌，牙齦卟啉單胞菌，變異鏈球菌和血鏈球菌。
15．權(quán)利要求10的牙膏，其中抗微生物制劑以足以殺死細(xì)菌的含量存在。
16．權(quán)利要求15的牙膏，其中口腔病原細(xì)菌選自粘性放線菌，直腸彎曲桿菌，具核梭桿菌，牙齦卟啉單胞菌，變異鏈球菌和血鏈球菌。
17．權(quán)利要求10的牙膏，其中抗微生物制劑以有效抑制齒斑形成的含量存在。
18．權(quán)利要求10的口腔衛(wèi)生產(chǎn)品，其中抗微生物制劑以大于制劑的最小抑制濃度的含量存在。
19．一種進(jìn)行口腔保健的方法，包括以下步驟用選自香柏油，氯霉素，香茅油，光果甘草，漿果羅勒油，檸檬羅勒油，檸檬油，和迷迭香油的抗微生物制劑接觸口腔。
20．權(quán)利要求19的方法，其中抗微生物制劑選自香柏油，氯霉素，和光果甘草。
21．權(quán)利要求18的方法，其中抗微生物制劑選自香柏油和光果甘草。
22．權(quán)利要求19的方法，其中接觸步驟進(jìn)一步包括用有效抑制口腔病原細(xì)菌生長(zhǎng)劑量的抗微生物制劑接觸口腔。
23．權(quán)利要求22的方法，其中口腔病原細(xì)菌選自粘性放線菌，直腸彎曲桿菌，具核梭桿菌，牙齦卟啉單胞菌，變異鏈球菌和血鏈球菌。
24．權(quán)利要求19的方法，其中接觸步驟進(jìn)一步包含用有效殺死口腔病原細(xì)菌劑量的抗微生物制劑接觸口腔。
25．權(quán)利要求24的方法，其中口腔病原細(xì)菌選自粘性放線菌，直腸彎曲桿菌，具核梭桿菌，牙齦卟啉單胞菌，變異鏈球菌和血鏈球菌。
26．權(quán)利要求19的方法，其中接觸步驟進(jìn)一步包含用有效抑制齒斑形成劑量的抗微生物制劑接觸口腔。
27．權(quán)利要求19的方法，其中接觸步驟進(jìn)一步包含用大于制劑的最小抑制濃度劑量的抗微生物制劑接觸口腔。
全文摘要
含選自香柏油,氯霉素,香茅油,光果甘草提取物,漿果羅勒油,檸檬羅勒油和迷迭香油的抗微生物制劑的口腔衛(wèi)生組合物。這些口腔衛(wèi)生組合物施用于口腔有效地減少或防止與齒斑,和齲齒和/或牙周疾病相關(guān)的細(xì)菌生長(zhǎng),如粘性放線菌,直腸彎曲桿菌,具核梭桿菌,牙齦卟啉單胞菌,變異鏈球菌和血鏈球菌的生長(zhǎng)。
文檔編號(hào)A61Q11/00GK1225576SQ98800556
公開(kāi)日1999年8月11日 申請(qǐng)日期1998年4月1日 優(yōu)先權(quán)日1997年4月4日
發(fā)明者L·M·伊爾, J·R·斯科特, D·F·懷特費(fèi)爾德 申請(qǐng)人:奧普蒂瓦公司