專利名稱：一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從植物種子中分別提取多種有效成份的方法，尤其是一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝。
眾所周知，包括柑桔、橙子、柚子、檸檬在內(nèi)的云香科柑桔類果實(shí)之種子是一類常用的中藥材，其主要原因在于它們含有多種藥物活性物質(zhì)，如以亞油酸、亞麻酸為主的活性脂肪酸；以檸檬苦素類化合物為主的抗癌活性物質(zhì)和以檸檬苦素配糖體為主的功能性活性物質(zhì)。前者是一種降血脂、抗衰老的藥物活性物質(zhì)，后者則是一類具有解毒作用和抗癌變的藥物活性物質(zhì)。然而，至今尚未見有關(guān)從柑桔類種子中有效提取上述藥物活性物質(zhì)的工業(yè)生產(chǎn)方法報(bào)道。中國專利CN1056804A公開了一種“含柑桔種子提取物的低溫或冷凍加工食品含柑桔種子提取物的組合物及其用途”，其主要技術(shù)特征是采用水提、醇提或水提與醇提相結(jié)合的傳統(tǒng)工藝方法將柑桔類果實(shí)、種子中的水溶性活性物質(zhì)提取出來，配合其他的化學(xué)添加劑或抗菌性提取物，組合成一種用于低溫或冷凍加工食品中的殺菌、保鮮劑。該工藝方法的含柑桔種子提取物的組合物是一種組份雜亂、由大量水提、醇提物及其他化學(xué)添加劑和抗菌性提取物混雜在一起而組成的液態(tài)混合物，而起殺菌、保鮮作用的僅僅是其中少數(shù)幾種活性化合物或是其他抗菌性提取物，剩余的大部分化合物則既不能被分離、提純，又不能起到有益的或輔助的作用；有的化合物還不太穩(wěn)定、易于發(fā)生物理或化學(xué)變化，進(jìn)而影響有效成份的殺菌、保鮮效果。此外，該工藝方法缺乏規(guī)范化的工藝和操作要求，其種子提取物的成分確定性、穩(wěn)定性及有效性均較難以保證。
本發(fā)明的目的就在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，提出一種工藝規(guī)范，流程合理，產(chǎn)品系列化且易于控制和操作，能夠充分提取柑桔類種子中的各種有效藥物活性物質(zhì)并將其分離、提純，其綜合利用率、產(chǎn)品制得率及產(chǎn)品純度均較高的從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝。
本發(fā)明的目的可以通過實(shí)施下列技術(shù)方案來達(dá)到將經(jīng)過洗滌、干燥的柑桔類種子粉碎至40-80目，置于索氏提取器中并使用醚類有機(jī)溶劑于30-60℃的溫度下進(jìn)行20-40小時的提取操作，經(jīng)過濾器分離出濾渣和濾液；上述濾液經(jīng)過加熱、減壓濃縮將醚類有機(jī)溶劑回收后，便得到含有多種活性脂肪酸的種子油；選擇性先用酮類或氯代烷烴類有機(jī)溶劑或選擇性先用醇類有機(jī)溶劑分別于30-60℃的溫度下，對所得濾渣進(jìn)行上述兩類溶劑先后互補(bǔ)且各為5--10小時的兩次提取操作，并先后用過濾器分離出濾渣和濾液；先后獲得的兩種濾液分別經(jīng)過加熱、減壓濃縮將酮類或氯代烷烴類有機(jī)溶劑或者醇類有機(jī)溶劑回收后，分別得到含有多種檸檬苦素類化合物的濃縮液和含有多種檸檬苦素配糖體化合物的濃縮液；再分別通過加入氯代烷烴溶解、加入異丙醇進(jìn)行結(jié)晶、分離得到含有多種檸檬苦素類化合物的粗結(jié)晶體或者經(jīng)過加入有機(jī)溶劑溶解、通過硅膠色譜柱進(jìn)行結(jié)晶、分離得到各種檸檬苦素配糖體化合物結(jié)晶體；最后，經(jīng)過先后兩次提取操作所剩余的濾渣通過造粒后成為顆粒肥料。為了獲得更佳的使用效果，本發(fā)明還可以進(jìn)一步采取下列措施在索氏提取器中用來提取被粉碎柑桔類種子的最佳有機(jī)溶劑是石油醚；在提取操作中所使用的最佳酮類有機(jī)溶劑是丙酮；在提取操作中所使用的最佳氯代烷烴類有機(jī)溶劑是二氯甲烷；在提取操作中所使用的最佳醇類有機(jī)溶劑是乙醇；在得到的含有多種檸檬苦素類化合物粗結(jié)晶體中，再加入醇類有機(jī)溶劑溶解，經(jīng)過硅膠色譜柱進(jìn)行分離、結(jié)晶，分別獲得各種檸檬苦素類化合物結(jié)晶。
附圖
為本發(fā)明的生產(chǎn)工藝流程方框示意圖。
以下結(jié)合實(shí)施例及附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)地描述。
實(shí)施例1取經(jīng)洗滌、干燥的柚子種籽100克粉碎至40目后，置于索氏提取器中用800毫升石油醚在45℃溫度下浸泡提取24小時，經(jīng)過濾器分離濾渣后，將濾液用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮，回收石油醚并獲得柚籽油約45克。經(jīng)測試柚籽油主要成分的重量百分比如下十四碳酸0．08油 酸22．4十五碳酸0．05亞油酸40．6十五碳烯酸 0．01亞麻酸6．34棕櫚酸 27．0芥子酸0．34十七碳酸0．11其 它0．11硬脂酸 3．14分離后的濾渣中加入300毫升丙酮，在40℃溫度下回流6小時，經(jīng)過負(fù)壓抽濾分離濾渣后，收集濾液并用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮，得膠狀濃縮物。加入為其等量的二氯甲烷溶解該濃縮物，再經(jīng)過濾除雜質(zhì)后，加入雙倍量的異丙醇充分混勻，靜置12小時，得粗結(jié)晶體約0．65克。將粗結(jié)晶體重復(fù)結(jié)晶兩次，獲得純檸檬苦素結(jié)晶約0．41克；收集結(jié)晶時的濾液，經(jīng)硅膠色譜柱分離，以三氯甲烷∶甲醇=9∶1為洗脫劑，分段收集洗脫液并分別減壓濃縮后，分別獲得諾米林結(jié)晶約146毫克和奧吧叩酮結(jié)晶31毫克。
上述經(jīng)過負(fù)壓抽濾分離后的濾渣中加入300毫升甲醇，在50℃溫度下回流6小時，經(jīng)過負(fù)壓抽濾分離濾渣后，收集濾液并用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮至40-50毫升，再經(jīng)硅膠色譜柱分離，以三氯甲烷∶甲醇=9∶1為洗脫劑，分段收集洗脫液并分別減壓濃縮后，可得到檸檬苦素配糖體結(jié)晶62毫克，諾米林配糖體45毫克和奧吧叩酮配糖體13毫克。最終的濾渣可以通過調(diào)配適當(dāng)?shù)牡?、磷、鉀比例和造粒工序制成顆粒肥料。
實(shí)施例2取經(jīng)洗滌、干燥的柑桔種籽100克粉碎至60目后，于索氏提取器中用700毫升石油醚在50℃溫度下浸泡提取20小時，經(jīng)過濾器分離濾渣后，將濾液用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮，回收石油醚并獲得桔籽油約44克。經(jīng)測試桔籽油主要成分的重量百分比如下十二碳酸0．04油 酸28．1十四碳酸0．01亞油酸36．8棕櫚酸 25．7亞麻酸6．62十七碳酸0．17芥子酸0．01硬脂酸 2．56其 它0．03分離后的濾渣中加入300毫升甲醇，在50℃溫度下回流6小時，經(jīng)過負(fù)壓抽濾分離濾渣后，收集濾液并用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮至40-50毫升，再經(jīng)硅膠色譜柱分離，以三氯甲烷∶甲醇=9∶1為洗脫劑，分段收集洗脫液并分別減壓濃縮后，可以得到檸檬苦素配糖體結(jié)晶68毫克，諾米林配糖體54毫克和奧吧叩酮配糖體23毫克。
上述經(jīng)過負(fù)壓抽濾分離后的濾渣中加入300毫升丙酮，在40℃溫度下回流6小時，經(jīng)過負(fù)壓抽濾分離濾渣后，收集濾液并用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮，得膠狀濃縮物。加入為其等量的二氯甲烷溶解該濃縮物，再經(jīng)過濾除雜質(zhì)后，加入雙倍量的異丙醇充分混勻，靜置12小時，得粗結(jié)晶體約0．62克。將粗結(jié)晶體重復(fù)結(jié)晶兩次，獲得純檸檬苦素結(jié)晶約0．394克；收集結(jié)晶時的濾液，經(jīng)硅膠色譜柱分離，以三氯甲烷∶甲醇=9∶1為洗脫劑，分段收集洗脫液并分別減壓濃縮后，可獲得諾米林結(jié)晶約134毫克和奧吧叩酮結(jié)晶27毫克。最終的濾渣可以通過調(diào)配適當(dāng)?shù)牡⒘住⑩洷壤驮炝９ば蛑瞥深w粒肥料。
實(shí)施例3取經(jīng)洗滌、干燥的橙子種籽100克粉碎至50目后，于索氏提取器中用900毫升石油醚在40℃溫度下浸泡提取30小時，經(jīng)過濾器分離濾渣后，將濾液用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮，回收石油醚并獲得橙籽油約44克。經(jīng)測試桔籽油主要成分的重量百分比如下十二碳酸0．03油 酸26．2十四碳酸0．02亞油酸37．8十五碳酸0．04亞麻酸6．45十七碳酸0．15芥子酸0．05棕櫚酸 26．3其 它0．06硬脂酸 2．83分離后的濾渣按實(shí)施例1用丙酮提取檸檬苦素類化合物粗晶體約0．65克。按實(shí)施例1進(jìn)一步精制得到純檸檬苦素結(jié)晶約0．408克，諾米林結(jié)晶約144毫克和奧吧叩酮結(jié)晶33毫克。將上述丙酮提取后過濾分離的濾渣用300毫升乙醇在50℃溫度下回流提取2次，每次2小時，待加熱回收乙醇后，置于冰箱中在6℃溫度下存放12小時，然后過濾除去沉淀析出的黃酮類化合物，將濾液通過樹脂色譜柱進(jìn)行分離處理，最后得到檸檬苦素配糖體65毫克，諾米林配糖體42毫克，奧吧叩酮配糖體14毫克。最終的濾渣可以通過調(diào)配適當(dāng)?shù)牡?、磷、鉀比例和造粒工序制成顆粒肥料。
實(shí)施例4取經(jīng)洗滌、干燥的柑桔種籽100克粉碎至60目后，置于索氏提取器中用900毫升乙醚在40℃溫度下浸泡提取28小時，經(jīng)過濾器分離濾渣后，將濾液用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮，回收乙醚并獲得種籽油約46克。分離后的濾渣中加入500毫升二氯甲烷，在45℃溫度下回流6小時，經(jīng)過負(fù)壓抽濾分離濾渣后，收集濾液并用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮，加入雙倍量的異丙醇充分混勻，靜置12小時，得檸檬苦素類化合物粗結(jié)晶體約0．63克。按實(shí)施例1進(jìn)一步精制得到純檸檬苦素結(jié)晶約0．402克，諾米林結(jié)晶約137毫克和奧吧叩酮結(jié)晶29毫克。再按實(shí)施例3用400毫升乙醇對濾渣進(jìn)行后處理，最后得到檸檬苦素配糖體60毫克，諾米林配糖體46毫克，奧吧叩酮配糖體15毫克。最終的濾渣可以通過調(diào)配適當(dāng)?shù)牡?、磷、鉀比例和造粒工序制成顆粒肥料。
實(shí)施例5取經(jīng)洗滌、干燥的柑桔種籽100克粉碎至70目后，置于索氏提取器中用800毫升乙醚在40℃溫度下浸泡提取30小時，經(jīng)過濾器分離濾渣后，將濾液用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮，回收乙醚并獲得種籽油約47克。分離后的濾渣中加入600毫升三氯甲烷，在45℃溫度下回流6小時，通過負(fù)壓抽濾分離濾渣，收集濾液并用旋轉(zhuǎn)蒸餾器進(jìn)行減壓濃縮，經(jīng)溶解、靜置后得檸檬苦素類化合物粗結(jié)晶體約0．66克。進(jìn)一步精制得到純檸檬苦素結(jié)晶約0．411克，諾米林結(jié)晶約139毫克和奧吧叩酮結(jié)晶33毫克。再按實(shí)施例1用400毫升甲醇對濾渣進(jìn)行后處理，最后得到檸檬苦素配糖體60毫克，諾米林配糖體44毫克，奧吧叩酮配糖體12毫克。最終的濾渣可以通過調(diào)配適當(dāng)?shù)牡?、磷、鉀比例和造粒工序制成顆粒肥料。
以上制得的各種籽油經(jīng)精練后可以直接食用或添加到缺少亞麻酸等活性脂肪酸的食用油中；檸檬苦素、諾米林和奧吧叩酮可用作抗癌藥物；檸檬苦素配糖體、諾米林配糖體和奧吧叩酮配糖體可用于食品飲料和日用化工品中；由濾渣配制成的顆粒肥料則可以直接施用于農(nóng)作物或園藝植物。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比較，具有工藝規(guī)范，流程合理，產(chǎn)品系列化且易于控制和操作，能夠充分提取柑桔類種子中的各種有效藥物活性物質(zhì)并將其分離、提純，其綜合利用率、產(chǎn)品制得率及產(chǎn)品純度均較高等特點(diǎn)，便于普及推廣應(yīng)用和工業(yè)化大批量生產(chǎn)。
權(quán)利要求
1．一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝，其工藝步驟為a．將經(jīng)過洗滌、干燥的柑桔類種子粉碎至40-80目，置于索氏提取器中并使用醚類有機(jī)溶劑于30-60℃的溫度下進(jìn)行20-40小時的提取操作，經(jīng)過濾器分離出濾渣和濾液；b．上述濾液經(jīng)過加熱、減壓濃縮將有機(jī)溶劑回收后便得到含有多種活性脂肪酸的種子油；c．選擇性先用酮類或氯代烷烴類有機(jī)溶劑或選擇性先用醇類有機(jī)溶劑分別于30-60℃的溫度下，對步驟a所得濾渣進(jìn)行上述兩類溶劑先后互補(bǔ)且各為5--10小時的兩次提取操作，并先后用過濾器分離出濾渣和濾液；d．先后獲得的兩種濾液分別經(jīng)過加熱、減壓濃縮將酮類或氯代烷烴類有機(jī)溶劑或者醇類有機(jī)溶劑回收后，分別得到含有多種檸檬苦素類化合物的濃縮液和含有多種檸檬苦素配糖體化合物的濃縮液；e．上述濃縮液再分別通過加入氯代烷烴溶解、加入異丙醇進(jìn)行結(jié)晶、分離得到含有多種檸檬苦素類化合物的粗結(jié)晶體或者經(jīng)過加入有機(jī)溶劑溶解、通過硅膠色譜柱進(jìn)行分離、結(jié)晶得到各種檸檬苦素配糖體化合物結(jié)晶體；f．經(jīng)過步驟c先后兩次提取操作所剩余的濾渣通過造粒后成為顆粒肥料。
2．根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝，其特征在于上述步驟a中用來提取被粉碎柑桔類種子的最佳醚類有機(jī)溶劑是石油醚。
3．根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝，其特征在于上述步驟c中處理濾渣所使用的最佳酮類有機(jī)溶劑是丙酮。
4．根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝，其特征在于上述步驟c中處理濾渣所使用的最佳氯代烷烴類有機(jī)溶劑是二氯甲烷。
5．根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝，其特征在于上述步驟c中處理濾渣所使用的最佳醇類有機(jī)溶劑是乙醇。
6．根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝，其特征在于上述步驟e所得到的含多種檸檬苦素類化合物粗結(jié)晶體中，再加入醇類有機(jī)溶劑溶解，經(jīng)過硅膠色譜柱進(jìn)行分離、結(jié)晶，分別獲得各種檸檬苦素類化合物結(jié)晶。
全文摘要
本發(fā)明提出了一種從柑桔類種子中提取藥物活性物質(zhì)的工藝,主要是將干燥的柑桔類種子粉碎,經(jīng)過反復(fù)的有機(jī)溶劑提取、過濾、分離操作,分別獲得種籽油、檸檬苦素類化合物、檸檬苦素配糖體及由濾渣配制成的顆粒肥料。本發(fā)明具有工藝規(guī)范,流程合理,產(chǎn)品系列化且易于控制和操作,能夠充分提取柑桔類種子中的各種有效藥物活性物質(zhì)并將其分離、提純,其綜合利用率、產(chǎn)品制得率及產(chǎn)品純度均較高等特點(diǎn),便于普及推廣應(yīng)用和工業(yè)化大批量生產(chǎn)。
文檔編號C07H1/08GK1293055SQ0013062
公開日2001年5月2日 申請日期2000年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月30日
發(fā)明者傅敏恭, 陸豫, 朱為英, 傅雪 申請人:傅敏恭