專利名稱：2,4－二氨基－3－羥基羧酸衍生物作為蛋白酶體抑制劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及式I的2，4-二氨基-3-羥基羧酸以游離形式、藥學(xué)上可接受的鹽或配合物(complex)的形式用于制備治療增殖性疾病如實(shí)體瘤的新用途，式I中的符號和取代基的含義由下文給出，下文將該化合物組統(tǒng)稱為本發(fā)明化合物；涉及一種溫血動物包括人的治療方法，其中將有效抗增殖劑量的本發(fā)明化合物給予患有增殖性疾病的患者；涉及新的2，4-二氨基-3-羥基羧酸及其藥學(xué)上可接受的鹽；涉及含有本發(fā)明化合物和藥用載體的藥物組合物；還涉及用在治療人或動物體的方法中的本發(fā)明化合物。
由多催化蛋白酶體復(fù)合物靶向降解的蛋白質(zhì)本身具有細(xì)胞周期控制(如細(xì)胞周期蛋白p21，p27)和編程性細(xì)胞死亡(如p53)的功能(Rolfe，M.，Chiu，I.M.和Pagano，M.，泛素介導(dǎo)的蛋白水解途徑作為治療區(qū)域(The ubiquitin-mediated proteolytic pathway astherapeutic area.)J.Mol.Med.75，1997，5-17)。因此蛋白酶體抑制劑適于治療對蛋白酶體活性的抑制應(yīng)答的增殖性疾病。這里可提及的增殖性疾病如牛皮癬特別是實(shí)體瘤如結(jié)腸瘤，乳房瘤，肺瘤和前列腺瘤。
本發(fā)明涉及式I的2，4-二氨基-3-羥基羧酸的新用途， 其中
A和B獨(dú)立地代表鍵或者未取代或取代的氨基?；糠?；R1代表氫、氨基保護(hù)基或式R5Y-的基團(tuán)，其中R5代表氫或者未取代或取代的烷基、鏈烯基、炔基、芳香基、芳烷基、雜芳香基、雜芳烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)烷基，而Y代表-CO-、-NH-CO-、-NH-CS-、-SO2-、-O-CO-或-O-CS-；R2代表天然氨基酸的側(cè)鏈、烷基、芳烷基、雜芳烷基或環(huán)烷基烷基或三甲基甲硅烷基甲基、2-噻吩基甲基或苯乙烯基甲基；R3代表鹵素、烷基、烷氧基或羥基烷氧基；和R4代表2(R)-羥基2，3-二氫化茚-1(S)-基、(S)-2-羥基-1-苯乙基或者未被取代或在4位被甲氧基取代的2-羥基芐基；其中該2，4-二氨基-3-羥基羧酸為游離的形式，藥學(xué)可接受的鹽或藥物組合物形式。
未取代或取代的烷基優(yōu)選1-5個碳原子、優(yōu)選1-4個碳原子的烷基，如甲基、乙基、異丙基或叔丁基；尤其是具有1或4個碳原子。取代基如苯氧基、羥基或未保護(hù)或保護(hù)的氨基。
未取代或取代的芳烷基如總共7-10個碳原子的苯基烷基，如芐基或2-苯乙基。它是未被取代的或在芳香基或烷基部分被如羥基取代，如芐基-CH(OH)-或苯基-CH(CH2OH)-，或者被烷基、氨基或烷基氨基取代；或者它為在亞烷基部分具有1-4個碳原子的萘基烷基，特別是萘基甲基。
氨基保護(hù)基優(yōu)選芐氧基羰基、環(huán)烷基烷氧基羰基，特別是環(huán)己基甲氧基羰基或叔丁氧基羰基。未取代或取代的雜芳烷基優(yōu)選吡啶基烷基，特別是2-吡啶基甲基和4-吡啶基甲基。
芳香基，雜芳香基，和芳烷基和雜芳烷基的芳香基部分可以是單-或多環(huán)，如吡啶基、萘基、9-芴基甲氧基羰基(FMOC)或苯并咪唑基。芳烷基或雜芳烷基的亞烷基部分可以被羥基取代。
雜環(huán)基，和雜環(huán)基烷基的雜環(huán)基部分為具有-或多個選自氮、氧和硫的雜原子的飽和雜環(huán)基。它優(yōu)選具有5或6環(huán)構(gòu)成原子，優(yōu)選至多3個雜原子。
環(huán)烷基烷基優(yōu)選環(huán)己基烷基，它優(yōu)選在亞烷基部分具有1-4個碳原子。
鹵素為氟、氯、溴或碘，優(yōu)選氯或溴。
烷基和烷氧基優(yōu)選含1-4個碳原子，特別是1或2個碳原子，更優(yōu)選甲基或甲氧基。
羥基烷氧基優(yōu)選2-4個碳原子的ω-羥基烷氧基，特別是2-羥基乙氧基。
鹽如酸加成鹽，例如鹽酸鹽。
式I的化合物具有多個手性中心，因此可以多種立體異構(gòu)體存在。除非另外特別指出，本發(fā)明提供了所有的立體異構(gòu)體和外消旋混合物。可以用常規(guī)技術(shù)如色譜法將這些異構(gòu)體解析或分離。從式I可以看出，在2位的碳原子的構(gòu)型為R，而在3和4的構(gòu)型為S。
R1優(yōu)選氫、吡啶基烷氧基羰基、萘基烷氧基羰基、萘基烷基羰基、芐基-CH(OH)-羰基、苯氧基甲基羰基、苯基烷基羰基或氨基保護(hù)基如叔丁氧基羰基、環(huán)烷基烷氧基羰基，特別是環(huán)己基甲氧基羰基、或者未被取代或被烷基或氨基取代的芐氧基羰基；尤其萘基甲氧基羰基、萘基甲基羰基、吡啶基甲氧基羰基、苯基丙?；?、氨基苯基丙酰基、叔丁氧基羰基、氨基芐氧基羰基、烷基芐氧基羰基、二烷基芐氧基羰基或芐氧基羰基，更優(yōu)選芐氧基羰基。
當(dāng)A為未取代或取代的氨基酰基部分時，它優(yōu)選未取代或取代的α-氨基?；糠秩绫彼?、亮氨酸、異亮氨酸、天門冬酰胺、纈氨酸、叔丁基甘氨酸、叔亮氨酸或組氨酸。優(yōu)選天然α-氨基酸，更優(yōu)選作為蛋白質(zhì)正常組分的氨基酸的保護(hù)或未保護(hù)部分或叔亮氨酸。它優(yōu)選L構(gòu)型。A特別是甘氨酸、L-纈氨酸、L-叔亮氨酸或鍵，更優(yōu)選L-叔亮氨酸(L-tert-leucine).
R2優(yōu)選天然氨基酸，更優(yōu)選α-氨基酸，進(jìn)一步優(yōu)選作為蛋白質(zhì)正常組分的氨基酸的側(cè)鏈。例如它是異丙基、氨基羰基甲基、甲基、1-甲基丙基、芐基、4-羥基芐基或異丁基，優(yōu)選芐基。
當(dāng)B為未取代或取代的氨基?；糠謺r，它優(yōu)選未取代或取代的α-氨基酰基部分，如苯基丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、丙氨酸或天門冬酰胺。它優(yōu)選天然α-氨基酸，更優(yōu)選作為蛋白質(zhì)正常組分的氨基酸的取代或未被取代部分。優(yōu)選用C1-C3-醇，特別是用甲醇將具有第二羧基的α-氨基酸如谷氨酸酯化。它優(yōu)選L構(gòu)型。B特別是L-纈氨酸、L-谷氨酸甲基酯或鍵，更優(yōu)選L-纈氨酸。
R3優(yōu)選鹵素、甲基或甲氧基，特別是甲氧基。
R4優(yōu)選如上述的未取代或取代的2(R)-羥基2，3-二氫化茚-1(S)-基或2-羥基芐基，特別是2-羥基-4-甲氧基-芐基。
Y優(yōu)選-CO-或-O-CO-，特別是-O-CO-。
R5優(yōu)選未取代或取代的烷基、芳烷基或雜芳烷基，特別是烷基；當(dāng)它是未取代或取代的雜芳烷基時，它優(yōu)選吡啶基烷基，特別是2-吡啶基甲基；當(dāng)它是未取代或取代的芳烷基時，它優(yōu)選芐基-CH(OH)-；當(dāng)它是取代的烷基時，優(yōu)選苯氧基甲基。
在專利申請EP 94810150.6和JP 041047/94，專利AU 672867、EC 961021、TW NI-74341和US 5,538,997中描述了本發(fā)明化合物由于能抑制HIV蛋白酶因而具有抗AIDS活性。
根據(jù)本發(fā)明，已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物令人驚訝地具有對增殖性疾病的有益效果，如對牛皮癬，特別是對實(shí)體瘤如結(jié)腸瘤、乳房瘤、肺瘤和前列腺瘤。
根據(jù)本發(fā)明的特別發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明還提供了一種溫血動物包括人的治療方法，其中將治療學(xué)上，特別是抗過度增殖的有效劑量的本發(fā)明化合物給予患有增殖性疾病的溫血動物。
本發(fā)明化合物可以根據(jù)上述專利和專利申請所述制備。特別是表1的化合物可以通過以下所述的方法制備(參照US 5,538,997)。
縮寫B(tài)n 芐基BOC 叔丁氧基羰基
ES-MS 電噴霧質(zhì)譜Glu谷氨酸Gly甘氨酸HPLC 高壓液相色譜Me 甲基TFA三氟乙酸t(yī)Leu 叔-亮氨酸Val纈氨酸Z 芐氧基羰基表1(R2＝Bn，R3＝OMe，R4＝2-OH，4-MeO-Bn)
實(shí)施例1-15的制備按照US 5,538,997所述的用于將式III的化合物轉(zhuǎn)化為式VII的化合物一般反應(yīng)方案。在上述的美國專利的實(shí)施例1-4，第6-8欄，和’進(jìn)一步的中間產(chǎn)物(Further Intermediates)’，第9-11欄中描述了不同構(gòu)件的合成。
通過在Nucleosil C18-柱(250×4mm，5mm，100A)上的反相分析HPLC來檢驗(yàn)化合物的純度體系A(chǔ)線性梯度7分鐘內(nèi)MeCN/0.09％TFA與H2O/0.1％TFA為1∶49-1∶0，3分鐘內(nèi)為1∶0；流速2.0mL/分，在215nm處檢測；體系B線性梯度10分鐘內(nèi)MeCN/0.09％TFA和H2O/0.1％TFA為1∶49-1∶0；流速2.0mL/分，在215nm處檢測。體系C在Nucleosil C18AB-柱(125×3mm，3m，120A)上的反相分析HPLC；線性梯度7分鐘內(nèi)MeCN/0.09％TFA和H2O/0.1％TFA為1∶49-1∶0，3分鐘內(nèi)為1∶0；流速1.15mL/分，在215nm處檢測。
實(shí)施例1N-{4(S)-[N-芐氧基羰基-叔亮氨酰基]氨基}-3-(S)-羥基-2(R)-(4-甲氧基芐基氨基)-5-苯基}戊?；?L-纈氨酸-N-[(2-羥基-4-甲氧基)芐基]酰胺實(shí)施例1的化合物對應(yīng)于US 5,538,997實(shí)施例4的化合物。
實(shí)施例24-[4-(2-芐氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰氨基)-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酰氨基]-4-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲酰基)-丁酸甲基酯該標(biāo)題化合物的制備類似于US 5,538,997的實(shí)施例4。根據(jù)’進(jìn)一步的中間產(chǎn)物(Further Intermediates)’，在步驟C.c)中使用BOC-L-谷氨酸γ-甲基酯α-對硝基苯基酯代替BOC-L-纈氨酸對-硝基苯基酯，而在步驟B)中使用BOC-L-纈氨酸代替BOC-L-叔亮氨酸來制備其構(gòu)件。ES-MS 856[M+H+]。
實(shí)施例3{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸叔丁基酯實(shí)施例3的化合物對應(yīng)于US 5,538,997實(shí)施例11的化合物。
實(shí)施例4{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸萘-1-基甲基酯該標(biāo)題化合物的制備類似于US 5,538,997的實(shí)施例4，使用碳酸萘-1-基甲基酯4-硝基-苯基酯代替N-(芐氧基-羰基氧)-琥珀酰亞胺。從1-萘甲醇(Aldrich，Buchs，瑞士)開始，根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)已知的方法(P.Furet et al.，J.Med.Chem.1997，40，3551-3556)合成碳酸萘-1-基甲基酯4-硝基-苯基酯。ES-MS(標(biāo)題化合物)877.3[M+H+]，899.4[M+Na+]；HPLC(體系A(chǔ))在tR＝7.30分鐘處產(chǎn)生單峰。
實(shí)施例5{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2.2-二甲基-丙基}-氨基甲酸萘-2-基甲基酯該標(biāo)題化合物的制備類似于US 5,538,997的實(shí)施例4，使用碳酸萘-2-基甲基4-硝基-苯基酯代替N-(芐氧基-羰基氧)-琥珀酰亞胺。從2-萘甲醇(Aldrich，Buchs，瑞士)開始，根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)已知的方法(P.Furet et al.，J.Med.Chem.1997，40，3551-3556)合成碳酸萘-2-基甲基酯4-硝基-苯基酯。ES-MS(標(biāo)題化合物)877.3[M+H+]，899.4[M+Na+]；HPLC(體系A(chǔ))在tR＝7.38分鐘處產(chǎn)生單峰。
實(shí)施例6{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸吡啶-4-基甲基酯該標(biāo)題化合物的制備類似于US 5,538,997的實(shí)施例4，使用碳酸4-硝基-苯基酯吡啶-4-基甲基酯代替N-(芐氧基-羰基氧)-琥珀酰亞胺。從4-(羥基甲基)吡啶(Fluka，Buchs，瑞士)開始，根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)已知的方法(P.Furet et al.，J.Med.Chem.1997，40，3551-3556)合成碳酸4-硝基-苯基酯吡啶-4-基甲基酯。ES-MS(標(biāo)題化合物)828.3[M+H+]，849.2[M+Na+]；HPLC(體系B)在tR＝6.80分鐘處產(chǎn)生單峰。
實(shí)施例7{]1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-甲基}-氨基甲酸芐基酯該標(biāo)題化合物的制備類似于US 5,538,997的實(shí)施例4。根據(jù)’進(jìn)一步的中間產(chǎn)物(Further Intermediates)’，在步驟B)中使用Z-L-甘氨酸代替BOC-L-叔亮氨酸來制備一個構(gòu)件。ES-MS771.0[M+H+]；HPLC(體系B)在tR＝9.45分鐘處產(chǎn)生單峰。
實(shí)施例8{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2-甲基-丙基}-氨基甲酸芐基酯實(shí)施例8的化合物對應(yīng)于US 5,538,997的實(shí)施例22化合物。ES-MS813.0[M+H+]；HPLC(體系A(chǔ))，在tR＝7.53分鐘處的單峰。
實(shí)施例9{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基]丙基}-氨基甲酸芐基酯該標(biāo)題化合物的制備類似于US 5,538,997的實(shí)施例4。根據(jù)’進(jìn)一步的中間產(chǎn)物(Further Intermediates)’，在步驟C.c)中使用BOC-L-叔亮氨酸對硝基苯基酯代替BOC-L-纈氨酸對-硝基苯基酯來制備一個構(gòu)件。ES-MS(標(biāo)題化合物)841.0[M+H+]；HPLC(體系A(chǔ))在tR＝7.22分鐘處產(chǎn)生單峰。
實(shí)施例104-[3，3-二甲基-2-(2-萘-1-基-乙酰氨基)-丁酰氨基]-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酸[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲?；?-2-甲基-丙基]-酰胺該標(biāo)題化合物的制備與US 5,538,997的實(shí)施例4類似，但使用1-萘基乙酸(Fluka，Buchs，瑞士)以結(jié)合最終的N-末端基團(tuán)。首先在二異丙基乙基胺(2.2當(dāng)量)的存在下并使用N，N-二甲基乙酰胺作為溶劑將R1.1-萘基乙酸(1.1當(dāng)量)與2-(2-吡啶酮-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓-四氟硼酸鹽(1.1當(dāng)量；Fluka)偶合。ES-MS(標(biāo)題化合物)861.0[M+H+]，883.1[M+Na+]；HPLC(體系A(chǔ))在tR＝7.17分鐘處產(chǎn)生單峰。
實(shí)施例11{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸3-甲基芐基酯該標(biāo)題化合物的制備與US 5,538,997的實(shí)施例4類似，通過使用碳酸3-甲基-芐基酯4-硝基-苯基酯代替N-(芐氧基羰基-氧)-琥珀酰亞胺。從3-甲基芐基醇(Aldrich，Buchs，瑞士)開始，根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)已知的方法(P.Furet et al.，J.Med.Chem.1997，40，3551-3556)合成碳酸3-甲基-芐基酯4-硝基-苯基酯。ES-MS(標(biāo)題化合物)841.0[M+H+]，843.0[M+Na+]；HPLC(體系A(chǔ))在tR＝7.17分鐘處產(chǎn)生單峰。
實(shí)施例124-{2-[3-(3-氨基-苯基)-丙酰氨基]-3，3-二甲基-丁酰氨基}-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酸[1-(2-羥基-4-甲氧基芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基]-酰胺該標(biāo)題化合物的制備與US 5,538,997的實(shí)施例4類似，但使用3-(3-叔丁氧基羰基氨基-苯基)-丙酸(Fluka，Buchs，瑞士)以結(jié)合最終的N-末端基團(tuán)。從3-(3-氨基苯基)丙酸(Trans World Chemicals，Inc.，Roekville，U.S.A.)開始，根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法(P.Furet et al.，J.Med.Chem.1997，40，3551-3556)合成R1.3-(3-叔丁氧基羰基氨基-苯基)-丙酸，并采用與實(shí)施例10類似的方案將其結(jié)合到N-末端。通過三氟乙酸的處理除去叔丁氧基羰基。ES-MS(標(biāo)題化合物)840.0[M+H+]，862.1[M+Na+]；HPLC(體系A(chǔ))在tR＝5.74分鐘處產(chǎn)生單峰。
實(shí)施例13{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}氨基甲酸3-氨基-芐基酯該標(biāo)題化合物的制備與US 5,538,997的實(shí)施例4類似，通過使用碳酸3-叔丁氧基羰基氨基-芐基酯4-硝基-苯基酯代替N(芐氧基羰基氧)-琥珀酰亞胺。從3-氨基芐基醇(Aldrich)開始，根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中的已知的方法(P.Furet et al.，J.Med.Chem.1997，40，3551-3556)合成碳酸3-叔丁氧基羰基氨基-芐基酯4-硝基-苯基酯。通過三氟乙酸的處理除去叔丁氧基羰基ES-MS(標(biāo)題化合物)842.0[M+H+]，864.0[M+Na+]，tR＝5.85分鐘(HPLC，體系A(chǔ))。
實(shí)施例14{1-[1-芐基-2-羥基-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}氨基甲酸3，5-二甲基-芐基酯該標(biāo)題化合物的制備與US 5,538,997的實(shí)施例4類似，通過使用碳酸3，5-二甲基-芐基酯4-硝基-苯基酯代替N-(芐氧基-羰基氧)-琥珀酰亞胺。從3，5-二甲基芐基醇(Aldrich，瑞士)開始，根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法(P.Furet et al.，J.Med.Chem.1997，40，3551-3556)合成碳酸3，5-二甲基-芐基酯4-硝基-苯基酯。ES-MS(標(biāo)題化合物)855.0[M+H+]，877.0[M+Na+]，tR＝7.32min(HPLC，體系A(chǔ))。
實(shí)施例15{(S)-1-[(1S，2S，3R)-1-芐基-2-羥基-3-[(S)-1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸環(huán)己基甲基酯該標(biāo)題化合物的制備與US 5,538,997的實(shí)施例4類似，通過使用碳酸3，5-二甲基-芐基酯4-硝基-苯基酯代替N-(芐氧基-羰基氧)-琥珀酰亞胺。從環(huán)己基-甲醇(Fluka，Buchs，瑞士)開始，根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法(P.Furet et al.，J.Med.Chem.1997，40，3551-3556)合成碳酸環(huán)己基甲基酯4-硝基-苯基酯(1.1當(dāng)量)。ES-MS(標(biāo)題化合物)833.0，tR＝7.55分鐘(體系C)。
實(shí)施例16口服組合物如下制備20.0g口服溶液(％指重量成分/總重量溶液)Cremophor RH 40 9.6g(48％)，玉米油-單-雙-三-甘油酯、5.8g(29％)，丙二醇 3.8g(19％)，式I的化合物 0.8g(4％)將溶液室溫下保存至使用。
在下文所描述的試驗(yàn)方法中可證明本發(fā)明化合物在治療以上例舉的增殖性疾病中的應(yīng)用。
抑制20S蛋白酶體本發(fā)明化合物抑制20S蛋白酶體.
多催化蛋白酶體復(fù)合物負(fù)責(zé)大部分細(xì)胞內(nèi)蛋白的ATP依賴性蛋白水解。雖然20S蛋白酶體含有蛋白水解核，但它在體內(nèi)不能降解蛋白質(zhì)，除非其與本身含有多ATP酶活性的19S帽結(jié)構(gòu)的任-末端復(fù)合。已知該更大的結(jié)構(gòu)為26S蛋白酶體，它將快速地降解已通過加入許多分子8.5kDa的多肽遍在蛋白而靶向降解的蛋白質(zhì)。靶向蛋白酶體降解的蛋白具有細(xì)胞周期控制(如細(xì)胞周期蛋白，p21，p27)和編程性細(xì)胞死亡(如p53)的功能(Rolfe，M.，Chiu，I.M.和Pagano，M.，see above)。因此本發(fā)明化合物非常適于治療對20S蛋白酶體的活性抑制應(yīng)答的疾病，即上述增殖性疾病的情況。
20S蛋白酶體的胰凝乳蛋白酶樣活性抑制可以通過以下實(shí)驗(yàn)證明。它是以螢光肽Suc-LLVY-AMC(琥珀酰-亮氨酸-亮氨酸-纈氨酸-酪氨酸-7-氨基-4-甲基-香豆素)的水解為基礎(chǔ)的，采用20S蛋白酶體僅在Y-AMC鍵處將該螢光肽斷裂。這種肽的水解伴隨著熒光密度(355nm，Rem 460nm)的增大，因?yàn)閮?nèi)部猝滅的2-氨基苯甲酰基熒光伴隨著水解產(chǎn)物Suc-LLVY的擴(kuò)散分離而釋放。
將2μl在DMSO(二甲基亞砜，20 RM每孔最終濃度)中的1mM受試化合物溶液在室溫下在黑色的96孔微滴平皿中與1μl的純化的人體胎盤20S蛋白酶體(Diabetes Forschungsinstitut，Dusseldorf，Germany；大約100ng蛋白酶體，取決于蛋白酶體的制備)和47μl緩沖劑-Ca(5 mM CaCl2，20 mM Tris/HCl(Tris(羥基甲基)-氨基-甲烷鹽酸鹽)pH 8.0)的混合物一起預(yù)溫育60分鐘。混合并加入3μl在DMSO(8011M每孔中的最終濃度)中的2.67 mM SucLLVY-AMC(Bachem，瑞士)溶液和47μl緩沖劑-Ca。將所得混合物在37℃下溫育3-24小時。如果需要，可以通過加入50μl終止溶液(100mM單氯乙酸，130mMNaOH，100mM乙酸，pH＝4.3)而終止反應(yīng)物的水解。用FLUOROSKANASCENTTM微滴平皿閱讀器監(jiān)測熒光。
每一測定系列必須進(jìn)行兩組對照實(shí)驗(yàn)1.)0％值使用2μl DMSO代替2μl在DMSO中的1mM受試化合物溶液，48μl緩沖劑-Ca代替47μl緩沖劑-Ca和1μl純化蛋白酶體的混合物進(jìn)行上述的測定。
2.)100％值在上述的測定中，使用2μl DMSO代替2μl在DMSO中的1mM受試化合物溶液。計算
IC50值定義為保留活性是50％的化合物濃度。在下表(表2)中給出了在該測試中測得的本發(fā)明化合物的例舉性的IC50。
表2(R2＝Bn，R3＝OMe，R4＝2-OH，4-MeO-Bn)。
還可以在體內(nèi)證明本發(fā)明化合物的抗腫瘤作用。
采用人腫瘤異種移植體內(nèi)評價裸鼠上的抗腫瘤作用將皮下移植人腫瘤的雄性或雌性BALB/c nu/nu(Novartis動物農(nóng)場，Sisseln，瑞士或Bomholtgaard，Copenhagen，丹麥)小鼠用于評價本發(fā)明化合物對來自以下四種腫瘤類型的細(xì)胞系的抗腫瘤作用乳房瘤MCF-7；肺瘤NCI H596結(jié)腸瘤HCT 116；和前列腺瘤PC3。
材料從美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC，Rockville，USA)得到人結(jié)腸癌HCT 116(ATCC CCL 247)、人鱗狀細(xì)胞肺癌NCI H596(ATCC HTB178)、雌激素依賴性乳房癌MCF-7(A TCC HTB 22)和人前列腺癌PC 3細(xì)胞系。37℃下在5％v/v CO2和80％相對濕度氣氛下在以下介質(zhì)中在培養(yǎng)這些細(xì)胞NCl H 596RPM11640，20％v/vFBS(胎牛血清)，1％w/v谷酰胺，HCT-116McCoy’s 5A，10％v/vFBS，1％w/v谷酰胺；PC 3RPM11640，20％v/vFBS，1％w/v谷酰胺；MCF-7，RPM11640，20％v/v FBS，1％w/v谷酰胺。所有這些細(xì)胞系是粘著的并可以通過Hank’s平衡鹽的洗滌和0.25％w/v的胰蛋白酶的處理而釋放。制備所有這些細(xì)胞作為主細(xì)胞儲備物(在培養(yǎng)基中加至含有20％v/v FBS和7％v/v DMSO)，并在-125℃下貯存(液體氮蒸氣)。通過以下方法由主儲備物制備工作細(xì)胞儲備物融化并擴(kuò)散細(xì)胞三個傳代以上，然后將其分配到小瓶中并冷凍。所有細(xì)胞系在冷凍前的生存力(采用0.5％w/v臺盼藍(lán)的臺盼藍(lán)排出試驗(yàn))＞90％。
在裸鼠上產(chǎn)生實(shí)體瘤將小鼠在受控條件(最佳衛(wèi)生條件，[OHC])下保持游離獲取無菌食物和水。在皮下注射細(xì)胞(最少為在100μlPBS(磷酸鹽緩沖鹽水)或培養(yǎng)基中的2×106細(xì)胞)后在載體小鼠(4-8只小鼠每個細(xì)胞系)上產(chǎn)生腫瘤。在小鼠的頭尾之間的中路的左脅腹的半月瓣閉合處注射。所得的腫瘤在開始治療前可連續(xù)地傳代至少三次連續(xù)的移植。當(dāng)腫瘤達(dá)到800-1000mm3的體積時移植腫瘤。
在裸鼠上移植實(shí)體瘤將供體小鼠麻醉(ForeneNE，Abbott，瑞士)并通過宮頸脫位處死。將皮膚消毒并通過解剖移出腫瘤。用解剖刀除去腫瘤團(tuán)的外緣并將所得的腫瘤團(tuán)調(diào)整到約3-4mm重量的碎片。切除3-4mm2的部分并將其置于無菌0.9％w/v NaCl中。不使用壞死的腫瘤部分。
將腫瘤碎片植入到受體小鼠的左脅腹內(nèi)的半月瓣閉合處。將受體小鼠麻醉(Forene，Abbott，瑞士)并消毒小鼠的整個背部和側(cè)面的皮膚。在尾巴上出現(xiàn)0.5-1cm的皮膚并作單一的1-1.5cm的切口。將腫瘤切片推至13-標(biāo)準(zhǔn)度量的套管針內(nèi)。將套管針推至皮膚的開口，并在皮膚下推進(jìn)至頭尾之間的中路點(diǎn)。通過推進(jìn)套管針而將腫瘤碎片沉積。采用一或兩個金屬夾將傷口縫合。
在雌激素依賴性乳房瘤的情況下，將雌激素小丸(17b-雌二醇，5mg/小丸提供60天的連續(xù)釋放，得自Innovative Research ofAmerica，Sarasota，USA)置于另一脅腹的皮下。
讓腫瘤增長直至在開始治療前其大小為100-150mm3。然后測定該腫瘤并將其分組(通常n＝6-8)，這些組根據(jù)腫瘤體積的平均大小和范圍來平衡。
制備和應(yīng)用該受試化合物將40mg/ml的化合物儲備液溶于100％DMSO并在室溫下攪拌直至得到澄清的溶液。在每次給藥前，往儲備液加入10％Tween 80(FLUKA，Buchs，瑞士)，然后用無菌0.9％w/v NaCl或水稀釋1∶20(v/v)。每天在用藥前制備溶液和稀釋液。一周用藥7天(p.o.，i.p.，s.c.或i.v.)。用藥的體積為p.o.，25 ml/kg，i.p.，25ml/kg，s.c.10ml/kg，i.v.，10ml/kg。
測定腫瘤體積每周和在最后一次治療的24小時后通過測定垂直直徑而測定腫瘤生長，次數(shù)為一次、兩次或三次(取決于腫瘤系的生長速率)。使用能測定mm距離的測徑器。根據(jù)式L×D2×π/6計算腫瘤的體積。抗腫瘤活性表示為T/C％(治療動物的平均腫瘤體積增大除以對照組動物的平均腫瘤體積增大并乘以100)。腫瘤消退(％)代表與起始治療時的平均腫瘤體積相比的最小平均腫瘤體積。Delta()腫瘤體積比較實(shí)驗(yàn)期間腫瘤體積的變化(最后治療日的-最初治療日的體積)。將任何腫瘤大小達(dá)到大于約1500-2000mm3的動物處死。
其它測定還收集體重和存活數(shù)據(jù)。計算Delta()體重作為對治療耐受性的指示(最后治療日的體重-最初治療日的體重)。認(rèn)為統(tǒng)計學(xué)上顯著的體重?fù)p失或死亡率表明對治療的耐受性差。此外，還每日一次或兩次監(jiān)測小鼠的常規(guī)健康狀態(tài)。
統(tǒng)計學(xué)分析基本的統(tǒng)計學(xué)分析方法采用多重比較試驗(yàn)以判定治療組之間的差異以及在治療誘發(fā)穩(wěn)定的疾病或腫瘤的消退的情況下確定的組內(nèi)差異的統(tǒng)計學(xué)顯著性。由于皮下腫瘤體積總是不能正常分布，因此治療組間的皮下腫瘤體積的差異的測定采用對分級數(shù)據(jù)的非參數(shù)Kruskal-Wallis單向方差分析試驗(yàn)，而治療組與對照組相比的統(tǒng)計學(xué)顯著性差異的測定采用Dunnett試驗(yàn)。采用Student Newman-Keuls(SNK)方法進(jìn)行所有組之間的成對比較。如果只比較兩組，則使用Ranksum試驗(yàn)。
動物的體重正常分布，通過成對t檢驗(yàn)分析組內(nèi)的體重變化，并用單向方差分析和采用Tukey試驗(yàn)的的成對比較分析組間的差異。所有的試驗(yàn)的顯著性水平設(shè)定在p＜0.05。
另一種測定本發(fā)明化合物的抗腫瘤活性的體內(nèi)試驗(yàn)為以下的中空纖維測定中空纖維測定評價在裸鼠上的抗腫瘤活性在該測定中，將封裝在中空纖維中的四種不同人腫瘤細(xì)胞皮下和/或腹膜內(nèi)植入到裸鼠上(無胸腺雌性遠(yuǎn)系繁殖小鼠(Ncr nu/nu))。然后用在適宜的賦形劑中制成的受試化合物治療，同時單獨(dú)用賦形劑治療對照組動物。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時回收纖維，并采用新陳代謝分析(MTT，3-[4，5-二甲基噻唑-2-基]-2，5-二苯基四唑鎓溴化物)來測定存活細(xì)胞的數(shù)量。通過比較實(shí)驗(yàn)動物(T)中的細(xì)胞生長和單獨(dú)用賦形劑處理的對照動物(C)的細(xì)胞生長而測定受試化合物的活性，并表示為％T/C。
材料人結(jié)腸癌SW620和LS 174T，以及乳腺癌MDA-MB435S得自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC，Rockyille，USA)。最初從Dana FarberCancer Institute，Boston，USA的患者建立表達(dá)高水平pgp-1的結(jié)腸癌MIP 101。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)技術(shù)所有細(xì)胞系在含有以下添加物的RPMI 1640中生長5％FBS(胎牛血清)、5mg/ml胰島素、5mg/ml轉(zhuǎn)鐵蛋白、5ng/ml亞硒酸、1 nM P-雌二醇、1nM睪酮。
測定設(shè)計將四種人實(shí)體瘤細(xì)胞系封裝在1mm內(nèi)徑的PVDF(聚偏二氟乙烯)中空纖維(Biopore，Spectrum Medical，CA，USA)中。在封裝之后和植入到動物之前，通過在組織培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時使細(xì)胞附著在該纖維的內(nèi)表面。然后將四種中空纖維植入到某一動物的腹膜內(nèi)或皮下。在實(shí)驗(yàn)計劃中每組采用4-6只動物，且該實(shí)驗(yàn)由最少三組組成1.″時間0″組2.對照(安慰劑)組3.″治療″(受試化合物)組。
在植入纖維的24小時以后開始治療。在第1、3、5天每天治療動物一次。同時在開始治療時，將″時間0″組的動物處死，回收纖維，并測定實(shí)驗(yàn)開始時存活細(xì)胞的數(shù)量(T0)。在植入7天后將所有動物處死，回收纖維并測定對照組(Cv)和″治療″組(Tv)存活細(xì)胞的數(shù)量。然后根據(jù)下式計算％T/C
％T/C＝(Tv-T0)/(Cv-T0)×100％將腫瘤細(xì)胞封裝到中空纖維中將纖維切割成所需長度并在70％乙醇中浸泡至少72小時。然后消毒纖維和用于封裝的器具。使在組織培養(yǎng)物中生長的人實(shí)體瘤細(xì)胞系受胰蛋白酶作用，將其懸浮在少量的培養(yǎng)基中并采用注射器將其轉(zhuǎn)移到纖維。加熱密封纖維并于37℃下在含有5％的CO2氣氛中溫育24小時。然后將該纖維植入到裸鼠的皮下和/或腹膜內(nèi)。
測定中空纖維中的存活細(xì)胞將1gMTT加到200ml PBS(磷酸鹽緩沖的鹽水)，攪拌20分鐘并過濾(0.22微米過濾器)。將10ml的該溶液與40ml的含添加劑的RPMI 1640混合得到MTT工作溶液。37℃下在5％CO2的穩(wěn)定下在5mlRPMI 1640中溫育該纖維。將0.5ml的MTT工作溶液加到試樣平皿的每一個孔中。37℃下將該平皿在5％CO2下溫育4小時。從試樣平皿的每一孔中抽出MTT。將2ml 2.5％的含水魚精蛋白硫酸鹽溶液加到試樣平皿的每個孔中。將該平皿在4℃下溫育24小時。從試樣平皿的每一孔中抽出魚精蛋白硫酸鹽。將2ml的魚精蛋白硫酸鹽加到每一孔中并將該平皿在4℃下進(jìn)一步溫育2-4小時。將每一纖維轉(zhuǎn)移到24孔平皿的孔中。切斷纖維以使其存在于該孔的底部并干燥過夜。將250μl的DMSO加到每一孔中。將該平皿放置在配有保護(hù)MTT免受光照的蓋子的軌道震動器上4小時。將150μl的每一試樣轉(zhuǎn)移到96孔平皿的適宜的孔中。在540nm處采用DMSO作為空白孔對該平皿讀數(shù)。
根據(jù)文獻(xiàn)已知，基于肽的藥物特征性表現(xiàn)為不良的口服生物利用率。這是在研制這種肽結(jié)構(gòu)類的有效藥物的一個主要障礙。令人驚奇的是，本發(fā)明化合物在口服后表現(xiàn)出優(yōu)異的生物利用率。這可以如以下的試驗(yàn)所示為進(jìn)行口服給藥，要在適宜的溶劑如Cremophor RH40R/MaisineR/丙二醇/乙醇(38/32/15/15)中制備試驗(yàn)物質(zhì)的溶液(25mg/ml)。將雌性Balb/c小鼠在試驗(yàn)開始前禁食24小時，并在實(shí)驗(yàn)過程中任意給予水。在給藥后的各時間，在麻醉下通過切斷頸靜脈，然后通過宮頸脫位處死動物而獲得血樣。將試樣收集到肝素化管(一般0.4-0.6ml)。為進(jìn)行試樣分析，使用固相提取和HPLC。通過最小平方線性回歸分析峰形血液標(biāo)準(zhǔn)對濃度的峰面積率(抑制劑/內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn))來計算試樣中的藥物濃度。根據(jù)濃度對時間的數(shù)據(jù)，采用梯形規(guī)則計算″曲線下的面積″(AUC)值。
在該試驗(yàn)中，在US 5,538,997中公開的化合物在125mg/kg的劑量時表現(xiàn)出從約25μM.h到約160μM.h的AUC-值。
該試驗(yàn)表明本發(fā)明化合物可以用作藥物。
本發(fā)明特別涉及本發(fā)明化合物的用途，其中A和B獨(dú)立地代表鍵或氨基?；糠郑幢蝗〈虮煌榛蛲檠趸驶榛〈?；R1代表氫、氨基保護(hù)基、或式R5Y-的基團(tuán)，其中R5代表氫或者未取代或取代的烷基、鏈烯基、炔基、芳香基、芳烷基、雜芳香基、雜芳烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基；Y代表-CO-、-NH-CO-、-NH-CS-、-SO2-、-O-CO-、或-O-CS-；R2代表天然氨基酸的側(cè)鏈、烷基、芳烷基、雜芳烷基或環(huán)烷基烷基、或者三甲基甲硅烷基甲基、2-噻吩基甲基或苯乙烯基甲基；R3代表鹵素、烷基、烷氧基或羥基烷氧基；R4代表2(R)-羥基2，3-二氫化茚-1(S)-基、(S)-2-羥基-1-苯乙基、或者未被取代或在4位被甲氧基取代的2-羥基-芐基。
本發(fā)明特別優(yōu)選涉及本發(fā)明化合物的應(yīng)用，其中A和B獨(dú)立地代表鍵或氨基酰基部分，它未被取代或者被烷基或烷氧基羰基烷基取代；R1代表氫、氨基保護(hù)基、或式R5Y-的基團(tuán)，其中R5代表氫或者未取代或取代的烷基、鏈烯基、炔基、芳香基、芳烷基、雜芳香基、雜芳烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)烷基，和Y代表-CO-、-NH-CO-、-NH-CS-、-SO2-、-O-CO-、或-O-CS-；
R2代表芳烷基；R3代表鹵素、烷基、烷氧基或羥基烷氧基；R4代表未被取代或在4位被甲氧基取代的2-羥基芐基。
而且，本發(fā)明優(yōu)選涉及本發(fā)明化合物用途，其中A和B獨(dú)立地代表未被取代或者被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基羰基C1-C4烷基取代的氨基酰基部分；R1代表氫或式R5Y-的基團(tuán)，其中R5代表氫；未被取代或被苯氧基、羥基或氨基取代的C1-C4烷基；C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、C6-C10芳香基、未被取代或被羥基、C1-C4烷基、氨基或C1-C4烷基氨基取代的C7-C12芳烷基、；吡啶基C1-C4烷基，而Y代表-O-CO-或-CO-；R2代表C7-C12芳烷基；R3代表鹵素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基或羥基C1-C4烷氧基；R4代表未被取代或在4位被甲氧基取代的2-羥基芐基。
更優(yōu)選，本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物的用途，其中A和B獨(dú)立地代表未被取代或者被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基羰基C1-C4烷基取代的氨基酰基部分；R1代表氫或式R5Y-的基團(tuán)，其中R5代表氫；未被取代或被苯氧基、羥基或氨基取代的C1-C4烷基；C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、C6-C10芳香基；未被取代或被羥基、C1-C4烷基、氨基或C1-C4烷基氨基取代的C7-C12芳烷基；吡啶基C1-C4烷基；Y代表-O-CO-或-CO-；R2代表C7-C12芳烷基；R3代表C1-C4烷氧基；R4代表在4位被甲氧基取代的2-羥基芐基。
在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，該溫血動物為人。
在本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，該治療學(xué)有效劑量抑制腫瘤的細(xì)胞增殖。
優(yōu)選的本發(fā)明化合物的亞組為上述的式I的化合物，其中R4為2-羥基芐基或優(yōu)選2-羥基4-甲氧基芐基。
本發(fā)明特別涉及式I*的本發(fā)明化合物， 其中A和B獨(dú)立地代表未取代或取代的氨基酰基部分；R2代表芳香基烷基；R3代表鹵素、烷基、烷氧基或羥基烷氧基；R4代表未被取代或者在4位被甲氧基取代的2-羥基-芐基；R5代表芳烷基而Y代表-CO-；或R5代表被環(huán)烷基、萘基、吡啶基或苯基取代的烷基，其中苯基被烷基或氨基取代，而Y代表-O-CO-。
式I*的本發(fā)明化合物優(yōu)選如下的化合物，其中A和B獨(dú)立地代表L-叔-亮氨酸、L-纈氨酸、L-谷氨酸甲基酯或甘氨酸；R2代表芳基烷基；R3代表烷氧基；R4代表2-羥基-4-甲氧基芐基；R5代表芳烷基而Y代表-CO-；或R5代表被環(huán)烷基、萘基、吡啶基或苯基取代的烷基，其中苯基被烷基或氨基取代，而Y代表-O-CO-。
式I*的本發(fā)明化合物最優(yōu)選如下的化合物，其中
A和B獨(dú)立地代表L-叔-亮氨酸、L-纈氨酸、L-谷氨酸甲基酯或甘氨酸；R2代表C7-C12芳基烷基；R3代表C1-C4烷氧基；R4代表2-羥基-4-甲氧基芐基；R5代表C7-C12芳基烷基而Y代表-CO-；或R5代表被C5-C7環(huán)烷基、萘基、吡啶基或苯基取代的C1-C4烷基，其中苯基被C1-C4烷基或氨基取代，而Y代表-O-CO-。
本發(fā)明的另一優(yōu)選的實(shí)施方案涉及以下化合物之一或這些化合物之一的藥學(xué)上可接受的鹽的用途{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2-甲基-丙基}-氨基甲酸芐基酯；N-{4(S)-[N-芐氧基羰基-叔亮氨?；鵠氨基}-3-(S)-羥基-2(R)-(4-甲氧基芐基-氨基)-5-苯基}戊酰基-L-纈氨酸-N-[(2-羥基-4-甲氧基)芐基]酰胺；或{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸叔丁基酯。
進(jìn)一步地，本發(fā)明涉及選自以下的化合物4-[4-(2-芐氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰氨基)-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酰氨基]-4-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-丁酸甲基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲酰基)-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸萘-1-基甲基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸萘-2-基甲基酯；
{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸吡啶-4-基甲基酯；{[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-甲基}-氨基甲酸芐基酯；或{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2，2-二甲基-丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸芐基酯；4-[3，3-二甲基-2-(2-萘-1-基-乙酰氨基)-丁酰氨基]-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酸[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲酰基)-2-甲基-丙基]-酰胺；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-2-甲基丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸3-甲基芐基酯；4-{2-[3-(3-氨基-苯基)-丙酰氨基]-3，3-二甲基-丁酰氨基}-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酸[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-2-甲基-丙基]-酰胺；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸3-氨基-芐基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲?；?-2-甲基丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}氨基甲酸3，5-二甲基-芐基酯；或這些化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
在本發(fā)明的更為優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及4-[4-(2-芐氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰氨基)-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酰氨基]-4-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-丁酸甲基酯或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
進(jìn)一步地，本發(fā)明特別涉及用在人或動物體的治療方法中的選自以下的化合物或這些化合物的藥學(xué)可接受的鹽4-[4-(2-芐氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰氨基)-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酰氨基]-4-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-丁酸甲基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲酰基)-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸萘-1-基甲基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸萘-2-基甲基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸吡啶-4-基甲基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-甲基}-氨基甲酸芐基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2，2-二甲基-丙基氨基甲酰基]-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸芐基酯；和{1-[(1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸環(huán)己基甲基酯；本發(fā)明特別涉及一種治療患有增殖性疾病，特別是腫瘤疾病，尤其是對多催化蛋白酶體復(fù)合物的抑制應(yīng)答的疾病的溫血動物，特別是人的方法，該方法包括給予需要這種治療的溫血動物一定數(shù)量的有效抑制腫瘤的本發(fā)明化合物；或者本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物用于這種治療的用途。進(jìn)一步地，本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物治療增殖性疾病的用途。本發(fā)明還涉及本發(fā)明化合物在抑制溫血動物，尤其是人身上的多催化蛋白酶體復(fù)合物的用途。
本發(fā)明化合物可與常規(guī)的化學(xué)治療上可接受的稀釋劑和載體混合，并通過腸道外或靜脈內(nèi)給藥，優(yōu)選以溶液、片劑或膠囊的形式口服?；钚晕镔|(zhì)的濃度當(dāng)然取決于所用的本發(fā)明化合物、期望的治療和劑型的性質(zhì)。
這些組合物構(gòu)成本發(fā)明的一部分。因此本發(fā)明還涉及包括式I*的本發(fā)明化合物和藥用載體的組合物，特別用于治療增殖性疾病，更特別是用于人或動物體的治療。
可以通過配制本發(fā)明的藥劑與包括親水相、親脂相和表面活性劑的載體而獲得提供高吸收率和藥物裝載量的口服用穩(wěn)定組合物。該組合物的優(yōu)選劑型為″微乳劑預(yù)濃縮物″或″乳劑預(yù)濃縮物″，特別是提供o/w(水包油)型的微乳劑或乳劑。但是，該組合物可以是額外含有含水相，優(yōu)選水的微乳劑或乳劑的劑型。″微乳劑預(yù)濃縮物″是一種自發(fā)地在含水介質(zhì)中例如在水中或在口服后的胃液中形成微乳劑的制劑?！逦⑷閯迨且环N當(dāng)其組分發(fā)生接觸時自發(fā)或基本上自發(fā)地形成的不透明的或基本上不透明的膠體分散體。微乳劑是熱力學(xué)穩(wěn)定的。
″乳劑預(yù)濃縮物″是一種在含水介質(zhì)中如在水中或在口服后的胃液中自發(fā)形成乳劑的制劑。所形成的乳劑為透明的和熱力學(xué)穩(wěn)定的。其親脂相約占載體介質(zhì)重量的10-85％；其表面活性劑約占載體介質(zhì)重量的5-80％o；親水相約占載體介質(zhì)重量的10-50％。
本發(fā)明化合物優(yōu)選存在量約為該組合物重量的1-15％，更優(yōu)選約為2-8％。
親水相可以選自如Transcutol(C2H5-[O-(CH2)2]2-OH)、Glycofurol(還已知作為四氫喃甲基醇聚乙二醇醚)和1，2-丙二醇，或它們的混合物，并且它優(yōu)選1，2-丙二醇。它可以進(jìn)一步包括親水性共有組分如C1-C5阿卡諾爾。
優(yōu)選的親脂相組分為中等鏈脂肪酸甘油三酯、混合的單、雙、三甘油酯和酯交換的乙氧基化植物油。適宜的中等鏈脂肪酸甘油三酯是已知的且可以根據(jù)商品名Miglyol、Captex、Captex、Neobee和Mazol而商購得到；最優(yōu)選Miglyol 812?；旌系膯?、雙、三甘油酯優(yōu)選含有C12-20脂肪酸單、雙和三甘油酯的混合物。該混合的單、雙和三甘油酯可以含有飽和與不飽和脂肪酸殘基。酯交換的乙氧基化植物油包括如杏仁油、棕櫚油或優(yōu)選的玉米油、向日葵油或紅花油和最優(yōu)選的玉米油與甘油的酯交換產(chǎn)物。除單、雙和三甘油酯組分以外，該酯交換產(chǎn)物一般還包括較少量的游離甘油。優(yōu)選首先除去其中一些甘油以在要制備軟膠囊時得到“基本上不含甘油的批料”。
玉米油和甘油的酯交換產(chǎn)物特別提供了適宜混合的單、雙和三甘油酯。適宜混合的甘油酯產(chǎn)物的實(shí)例為根據(jù)商品名Maisine[購自Etablissements Gattefoss é，69804 Saint-Priest，Cedex(法國)]而商購得到。Maisine的脂肪酸含量一般為約11％棕櫚酸、約2.5％硬脂酸、約29％油酸、約56％亞油酸和1.5％的其它酸。
如果本發(fā)明藥劑的給藥形式為微乳劑或乳劑，則優(yōu)選混合的單、雙和三甘油酯為澄清的并且在20℃-25℃的溫度下儲藏時保持至少20天的澄清。而且，單、雙，和三甘油酯的試樣在約2℃-8℃的冷藏庫中保存24小時，隨后在室溫下保存1小時后應(yīng)該是澄清的。而且單、雙、三甘油酯優(yōu)選具有低飽和脂肪酸含量?？梢圆捎矛F(xiàn)有技術(shù)中已知的分離技術(shù)除去飽和脂肪酸組分并提高不飽和脂肪酸組分含量而由商購的產(chǎn)物獲得符合這些要求的混合的單、雙、三甘油酯。一般總飽和脂肪酸組分的重量小于親脂相總重的15％。適宜的方案如在WO 93/09211中所述。
該親脂相可選擇含有適宜的酯交換的乙氧基化植物油如通過各種天然植物油與分子量為200-800的聚乙二醇在適宜的催化劑下反應(yīng)而得到的物質(zhì)。該方法是已知的，它的一個實(shí)例如在US Patent 3 288 824中所述。特別優(yōu)選酯交換的乙氧基化玉米油。優(yōu)選的酯交換的乙氧基化植物油為Labrafil M 2125 CS。
適宜的表面活性劑的實(shí)例為i)天然或氫化的海貍油和氧化乙烯的反應(yīng)產(chǎn)物。根據(jù)商品名Cremophor而購得的油特別合適。特別適宜的為Cremophor RH 40和Cremophor RH60。還適宜為聚乙二醇海貍油如根據(jù)商品名Cremophor EL而獲得?？墒褂玫念愃苹蛳嗤漠a(chǎn)物可以根據(jù)商品名Nikkol、Mapeg、Incrocas和Tagat獲得。
ii)聚氧乙烯-脫水山梨糖醇-脂肪酸酯，如已知類型的和根據(jù)商品名名Tween而獲得的酯。
iii)聚氧乙烯脂肪酸酯，如已知類型的和根據(jù)商品名Myrj而獲得的聚氧乙烯硬脂酸。
iv)聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物和嵌段共聚物，如已知類型的和根據(jù)商品名Pluronic，Emkalyx和Poloxamer，特別優(yōu)選PluronicF68和Poloxamer 188而商購得到的該共聚物。
v)二辛基磺基琥珀酸酯或二-[2-乙基己基]-琥珀酸酯。
vi)磷脂，特別是卵磷脂。
vii)丙二醇單和雙脂肪酸酯。
優(yōu)選的表面活性劑的HLB(親水/親脂平衡)至少為10。
可以從以下文獻(xiàn)中獲知這里以商路引用的產(chǎn)品的完整的物理特征如H.P.Fiedler，″Lexikon der Hilfsstoffe fur Pharmazie，Kosmetik und Angrenzende Gebiete″，Editio Cantor，D-7960Aulendorf，Germany，第三次修訂和擴(kuò)展編輯(1989)。優(yōu)選的親水相組分、親脂相和表面活性劑的相對比例處于標(biāo)準(zhǔn)三路圖案(three wayplot)的“微乳劑”區(qū)的范圍內(nèi)。如此得到的組合物為高穩(wěn)定性的微乳劑預(yù)濃縮物。
可以其它方式選擇這些組分以提供乳劑預(yù)濃縮物。乳劑預(yù)濃縮物組合物還表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定特征。
該藥物組合還可以進(jìn)一步包括添加劑或成分，例如抗氧劑。它們在口服給藥時表現(xiàn)出特殊的優(yōu)良性能，例如在稠度和在標(biāo)準(zhǔn)生物利用率試驗(yàn)中獲得的高水平生物利用率方面。藥代動力學(xué)參數(shù)如吸收度和血液濃度還可以變得令人驚奇地更為可預(yù)測性并且可以消除或減少具有不穩(wěn)定吸收給藥中的問題。此外，該藥物組合物對表面活性劑(tenside)材料如存在于胃腸道中的膽汁鹽有效。
口用藥物組合物優(yōu)選以單元劑型復(fù)合，如將它們填充到可口服的膠囊殼中。該膠囊殼可以是軟或硬的凝膠膠整殼。但是，如果需要，該藥物組合物可以是飲用溶液的形式，并可以包括水或任何其它含水體系以提供適于飲用的乳劑或微乳劑體系。
本發(fā)明化合物良好地耐受在本發(fā)明的用途和方法中所需的劑量。根據(jù)種族、年齡、個體條件、給藥方式和特定的臨床圖象、有效劑量，將日劑量約0.05-10g，優(yōu)選約0.1-5g如0.15g-1.5g的本發(fā)明化合物給予約70kg體重的溫血動物。
本發(fā)明特別涉及本發(fā)明化合物，尤其是式I*的本發(fā)明化合物在制備治療增殖性疾病如實(shí)體瘤的藥物組合物中的用途以及它們用于治療這種增殖性疾病的用途。
權(quán)利要求
1.式I的2，4-二氨基-3-羥基羧酸以其游離的形式或者以藥學(xué)上可接受的鹽或配合物的形式用于制備治療增殖性疾病的藥物組合物的用途 其中A和B獨(dú)立地代表鍵或者未取代或取代的氨基?；糠郑籖1代表氫、氨基保護(hù)基或式R5Y-的基團(tuán)，其中R5代表氫或者未取代或取代的烷基、鏈烯基、炔基、芳香基、芳烷基、雜芳香基、雜芳烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基，而Y代表-CO-、-NH-CO-、-NH-CS-、-SO2-、-O-CO-或-O-CS-；R2代表天然氨基酸的側(cè)鏈、烷基、芳烷基、雜芳烷基或環(huán)烷基烷基或三甲基甲硅烷基甲基、2-噻吩基甲基或苯乙烯基甲基；R3代表鹵素、烷基、烷氧基或羥基烷氧基；和R4代表2(R)-羥基2，3-二氫化茚-1(S)-基、(S)-2-羥基-1-苯乙基或者未被取代或在4位被甲氧基取代的2-羥基芐基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的式I的2，4-二氨基-3-羥基羧酸的用途，其中A和B獨(dú)立地代表鍵或氨基酰基部分，它未被取代或者被烷基或烷氧基羰基烷基取代；R1代表氫、氨基保護(hù)基或式R5Y-的基團(tuán)，其中R5代表氫或者未取代或取代的烷基、鏈烯基、炔基、芳香基、芳烷基、雜芳香基、雜芳烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基；Y代表-CO-、-NH-CO-、-NH-CS-、-SO2-、-O-CO-或-O-CS-；R2代表天然氨基酸的側(cè)鏈、烷基、芳烷基、雜芳烷基或環(huán)烷基烷基、或者三甲基甲硅烷基甲基、2-噻吩基甲基或苯乙烯基甲基；R3代表鹵素，烷基，烷氧基或羥基烷氧基；R4代表2(R)-羥基2，3-二氫化茚-1(S)-基、(S)-2-羥基-1-苯乙基或者未被取代或在4位被甲氧基取代的2-羥基芐基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的式I的2，4-二氨基-3-羥基羧酸的用途，其中A和B獨(dú)立地代表鍵或氨基酰基部分，它未被取代或者被烷基或烷氧基羰基烷基取代；R1代表氫、氨基保護(hù)基或式R5Y-的基團(tuán)，其中R5代表氫或者未取代或取代的烷基、鏈烯基、炔基、芳香基、芳烷基、雜芳香基、雜芳烷基，雜環(huán)基或雜環(huán)基烷基；Y代表-CO-、-NH-CO-、-NH-CS-、-SO2-、-O-CO-或-O-CS-；R2代表芳烷基；R3代表鹵素、烷基、烷氧基或羥基烷氧基；和R4代表未被取代或在4位被甲氧基取代的2-羥基芐基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的式I的2，4-二氨基-3-羥基羧酸的用途，其中A和B獨(dú)立地代表未被取代或者被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基羰基C1-C4烷基取代的氨基?；糠?；R1代表氫或式R5Y-的基團(tuán)，其中R5代表氫、未被取代或者被苯氧基、羥基或氨基取代的C1-C4烷基；C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、C6-C10芳香基、未被取代或者被羥基、C1-C4烷基、氨基或C1-C4烷基氨基取代的C7-C12芳烷基；吡啶基C1-C4烷基；和Y代表-O-CO-或-CO-；R2代表C7-C12芳烷基；R3代表鹵素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基或羥基C1-C4烷氧基；R4代表未被取代或在4位被甲氧基取代的2-羥基芐基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的式I的2，4-二氨基-3-羥基羧酸的用途，其中A和B獨(dú)立地代表未被取代或者被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基羰基C1-C4烷基取代的氨基?；糠?；R1代表氫或式R5Y-的基團(tuán)，其中R5代表氫；未被取代或被苯氧基、羥基或氨基取代的C1-C4烷基；C2-C4鏈烯基、C2-C4炔基、C6-C10芳香基、未被取代或者被羥基、C1-C4烷基、氨基或C1-C4烷基氨基取代的C7-C12芳烷基；吡啶基C1-C4烷基；而Y代表-O-CO-或-CO-；R2代表C7-C12芳烷基；R3代表C1-C4烷氧基；R4代表在4位被甲氧基取代的2-羥基芐基。
6.一種治療溫血動物，包括人的方法，其中給予患有增殖性疾病的溫血動物治療有效劑量的式I的2，4-二氨基-3-羥基羧酸，式I中的符號和取代基的含義由權(quán)利要求1給出，藥物的形式為游離形式或藥學(xué)上接受的鹽或配合物的形式。
7.權(quán)利要求6的方法，其中該治療有效劑量抑制了腫瘤內(nèi)的細(xì)胞增殖。
8.式1*的化合物， 其中A和B獨(dú)立地代表未取代或取代的氨基?；糠郑籖2代表芳烷基；R3代表鹵素、烷基、烷氧基或羥基烷氧基；R4代表未被取代或者在4位被甲氧基取代的2-羥基-芐基；R5代表芳烷基；Y代表-CO-；或R5代表被環(huán)烷基、萘基、吡啶基或苯基取代的烷基，其中苯基被烷基或氨基取代；Y代表-O-CO-；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的式I*的化合物，其中A和B獨(dú)立地代表L-叔-亮氨酸、L-纈氨酸、L-谷氨酸甲基酯或甘氨酸；R2代表芳基烷基；R3代表烷氧基；R4代表2-羥基-4-甲氧基芐基；R5代表芳基烷基；Y代表-CO-；或R5代表被環(huán)烷基、萘基、吡啶基或苯基取代的烷基，其中苯基被烷基或氨基取代；Y代表-O-CO-；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的式I*的化合物，其中A和B獨(dú)立地代表L-叔-亮氨酸，L-纈氨酸，L-谷氨酸甲基酯或甘氨酸；R2代表C7-C12芳基烷基；R3代表C1-C4烷氧基；R4代表2-羥基-4-甲氧基芐基；R5代表C7-C12芳基烷基；Y代表-CO-；或R5代表被C5-C7環(huán)烷基、萘基、吡啶基或苯基取代的C1-C4烷基，其中苯基被C1-C4烷基或氨基取代；Y代表-O-CO-；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
11.根據(jù)權(quán)利要求8的式I*的化合物，選自以下化合物4-[4-(2-芐氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰氨基)-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酰氨基]-4-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-丁酸甲基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲酰基)-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸萘-1-基甲基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸萘-2-基甲基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸吡啶-4-基甲基酯；{[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-甲基}-氨基甲酸芐基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-2，2-二甲基-丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸芐基酯；和這些化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
12.根據(jù)權(quán)利要求8的式I*的化合物，它是4-[4-(2-芐氧基羰基氨基-3-甲基-丁酰氨基)-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊?；被鵠-4-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-丁酸甲基酯或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
13.根據(jù)權(quán)利要求8的式I*的化合物，選自以下化合物4-[3，3-二甲基-2-(2-萘-1-基-乙酰氨基)-丁酰氨基]-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酸[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲酰基)-2-甲基-丙基]-酰胺；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲酰基)-2-甲基丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸3-甲基芐基酯；4-{2-[3-(3-氨基-苯基)-丙酰氨基]-3，3-二甲基-丁酰氨基}-3-羥基-2-(4-甲氧基-芐基氨基)-5-苯基-戊酸[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基-丙基]-酰胺；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸3-氨基-芐基酯；{1-[1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基-氨基甲酰基)-2-甲基丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲酰基]-2，2-二甲基-丙基}-氨基甲酸3，5-二甲基-芐基酯；{1-[(1-芐基-2-羥基-3-[1-(2-羥基-4-甲氧基-芐基氨基甲?；?-2-甲基丙基氨基甲?；鵠-3-(4-甲氧基-芐基氨基)-丙基氨基甲?；鵠-2，2-二甲基-丙基]-氨基甲酸環(huán)己基甲基酯；和這些化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
14.根據(jù)權(quán)利要求8的式I*的化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽，用于治療人或動物體。
15.一種含有權(quán)利要求8的式I*的化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽以及藥用載體的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的2,4－二氨基－3－羥基羧酸在制備治療增殖性疾病如實(shí)體瘤的藥物組合物中的新用途,其中A和B獨(dú)立地代表鍵或者未取代或取代的氨基酰基部分;R
文檔編號C07C271/22GK1351587SQ00807741
公開日2002年5月29日 申請日期2000年4月25日 優(yōu)先權(quán)日1999年4月27日
發(fā)明者D·弗朗斯, P·弗斯特, J·齊默爾曼, C·加西亞－?？烁＠飦? D·肖爾茨, P·福里特, P·伊姆巴克 申請人:諾瓦提斯公司