專利名稱：高含量EGCg兒茶素的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域具體涉及一種可直接用于藥物原料的高含量EGCg兒茶素提取方法。
茶多酚中的主要成分兒茶素，包括了表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCg)、表沒食子兒茶素(EGC)、表兒茶素沒食子酸酯(ECg)和表兒茶素(EC)等幾種主要成分，其中表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCg)兒茶素的含量最高，占兒茶素50％以上。但因茶葉采摘期、產(chǎn)地及品種等條件的不同，兒茶素中主要成分的組成比例也有所不同。自從發(fā)現(xiàn)茶葉提取物(茶多酚)具有優(yōu)良的清除自由基、防護(hù)脂質(zhì)過氧化和預(yù)防化學(xué)致癌活性等多種藥效以來，其生物活性和藥理功能最強(qiáng)的EGCg兒茶素也越來越受到國內(nèi)外的重視。目前，國內(nèi)外發(fā)展以天然植物的有效成分作為藥用原料，開發(fā)“綠色技術(shù)”，發(fā)展“綠色工程”已成為熱門課題。茶多酚的進(jìn)一步提取和應(yīng)用也不例外。雖然茶多酚的生產(chǎn)在國內(nèi)已較為普及，通常以該產(chǎn)品作為天然抗氧化添加劑和保健品形式面市，但由于提取工藝的限制，產(chǎn)品中往往雜質(zhì)含量高，有些還含有危害健康的諸如氯仿等有機(jī)溶劑殘留和農(nóng)藥殘留，因此市場(chǎng)開發(fā)受到了極大的限制。為了進(jìn)一步拓展?jié)撛诘氖袌?chǎng)，并滿足生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用要求，迫切需要無有機(jī)溶劑殘留和農(nóng)殘的高含量EGCg兒茶素。因此，作為可直接用于藥物原料的高含量EGCg兒茶素產(chǎn)品，需求量將會(huì)越來越大，其市場(chǎng)前景廣闊。
本發(fā)明的目的在于提供一種能生產(chǎn)無有機(jī)溶劑殘留和農(nóng)藥殘留的、品質(zhì)純正的、可直接用于藥物原料的、白色至淺黃色的絮狀高含量EGCg兒茶素的提取方法。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是這樣的以黃色茶多酚為原料，在室溫、壓力范圍為0.1MPa～1.0MPa的條件下，經(jīng)過一系列的惰性溶劑多步逆流萃取后，調(diào)整溶液的pH值在2.5～7.5之間，進(jìn)行二價(jià)或三價(jià)金屬鹽沉淀反應(yīng)，沉淀經(jīng)過濾、熱水洗滌和酸溶后，用乙酸乙酯萃取，萃取的有機(jī)溶劑相進(jìn)行水洗脫酸、減壓濃縮、重結(jié)晶，養(yǎng)晶后的結(jié)晶物經(jīng)過濾、冷凍雙重水洗滌，最后進(jìn)行冷凍干燥，可獲得具有高生物活性的、無有機(jī)溶劑殘留和農(nóng)藥殘留的、白色至淺黃色的絮狀固體；上述無害惰性有機(jī)溶劑可以是指正己烷、環(huán)己烷、石油醚、乙醚、乙醇、正丁醇、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、丁酸丙酯、丁酸丁酯中的任一種或任意種以任意比例混合，且最佳可以是正己烷、石油醚、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯中的任一種或任意種以任意比例混合；上述沉淀反應(yīng)的金屬鹽可以是氯化鈣、硫酸鋁、硫酸鋁鉀、乙酸鋁、乙酸鉛中的任一種，最佳選擇是硫酸鋁；上述沉淀反應(yīng)溶液的pH值范圍的最佳選擇可以是4.5～5.5。
上述黃色茶多酚可以是指多酚含量不低于80％的普通黃色茶多酚中的任一種；上述逆流萃取可以是指不用固態(tài)吸附劑的兩溶劑相以反向流動(dòng)形式連續(xù)進(jìn)行混合萃取的過程；上述逆流萃取的壓力范圍的最佳選擇可以是0.2～0.6MPa。
本發(fā)明提供的提取方法，所提取的高含量EGCg兒茶素產(chǎn)品，生物活性高，無有機(jī)溶劑殘留和農(nóng)藥殘留，兒茶素中EGCg有效含量達(dá)90％以上，可直接用于藥物原料。并且，提取率高，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，工藝過程無三廢污染。
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。
實(shí)施例1.取100克80％的黃色茶多酚，溶于1000mL的丁酸乙酯中，不溶物離心棄去，分離出的丁酸乙酯相用1500mL的水逆流萃取1次，將所得水相蒸發(fā)濃縮至原體積的1/2～1/3，以脫除水相中殘留的丁酸乙酯。然后用1/2～1/4體積的乙酸丁酯相逆流萃取上述水相3～4次，所得水相用0.1mol/dm3的硫酸鋁溶液進(jìn)行沉淀反應(yīng)，并用0.5mol/dm3的氫氧化鈉溶液調(diào)整溶液的pH值至5.0～5.5，此時(shí)應(yīng)有大量的沉淀析出，沉淀經(jīng)一段時(shí)間的陳化(老化)，然后抽濾得沉淀物。沉淀物用1000～2000mL的70℃熱水洗滌2～3次，所得沉淀物用3～5℃的2.0mol/dm3的鹽酸(HCl)溶液酸化溶解，抽濾以除去少量不溶物。然后再用等體積的的乙酸丙酯相逆流萃取上述酸化液3～4次，合并有機(jī)相并水洗脫酸，真空蒸發(fā)濃縮、重結(jié)晶，5℃以下養(yǎng)晶12h～72h后，趁冷過濾，冷凍雙重水水洗1～2次，最后將所得固形物進(jìn)行冷凍干燥，即為白色至淺黃色的絮狀高含量EGCg兒茶素產(chǎn)品。
實(shí)施例2.取100克95％的黃色茶多酚，溶于2000mL的水中，直接用1/2～1/4體積的丁酸乙酯相逆流萃取3～4次，棄去丁酸乙酯相。將所得水相蒸發(fā)濃縮至原體積的1/2～1/3，以脫除水相中殘留的丁酸乙酯。然后用等體積的乙酸丙酯相逆流萃取2～3次，合并有機(jī)相，真空蒸發(fā)濃縮干燥。將干燥后的粗提物溶于2000mL的水中，用0.1mol/dm3的硫酸鋁溶液進(jìn)行沉淀反應(yīng)，并用0.5mol/dm3的氫氧化鈉溶液調(diào)整溶液的pH值至6.0左右，此時(shí)應(yīng)有大量的沉淀析出，沉淀經(jīng)一段時(shí)間的陳化，過濾，60℃熱水洗滌2～3次后，用3℃～5℃的2.0mol/dm3的鹽酸(HCl)溶液酸化溶解，抽濾以除去少量不溶物。然后再用等體積的的乙酸乙酯相逆流萃取上述酸化液3～4次，合并有機(jī)相并水洗脫酸，真空蒸發(fā)濃縮、重結(jié)晶。5℃以下養(yǎng)晶12h～72h后，趁冷過濾，冷水洗1～2次，冷凍干燥，即為品質(zhì)純正的白色絮狀高含量EGCg兒茶素產(chǎn)品。
實(shí)施例3.取200克95％的黃色茶多酚，溶于1000mL的水中，用含有正己烷(或石油醚)的乙酸乙酯相(正己烷或石油醚∶乙酸乙酯＝1∶10)逆流萃取，所得水相用0.1mol/dm3的硫酸鋁溶液進(jìn)行沉淀反應(yīng)，以下同實(shí)施例2，即可獲得白色絮狀的高含量EGCg兒茶素產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種高含量EGCg兒茶素的提取方法，其特點(diǎn)是以普通的黃色茶多酚為原料，在室溫、壓力范圍為0.1MPa～1.0MPa的條件下，經(jīng)過一系列惰性溶劑多步逆流萃取后，調(diào)整溶液的pH值在2.5～7.5之間，進(jìn)行二價(jià)或三價(jià)金屬鹽沉淀反應(yīng)，沉淀經(jīng)過濾、熱水洗滌和酸溶后，用乙酸乙酯萃取，萃取的有機(jī)溶劑相進(jìn)行水洗脫酸、減壓濃縮、重結(jié)晶的結(jié)晶物經(jīng)過濾、冷凍雙重水洗滌，最后進(jìn)行冷凍干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高含量EGCg兒茶素的提取方法，其特征是所述無害惰性有機(jī)溶劑是指正己烷、環(huán)己烷、石油醚、乙醚、乙醇、正丁醇、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、丁酸丙酯、丁酸丁酯中的任一種或任意種以任意比例混合，且最佳選擇是正己烷、石油醚、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯中的任一種或任意種以任意比例混合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的高含量EGCg兒茶素的提取方法，其特征是所述沉淀反應(yīng)的金屬鹽是氯化鈣、硫酸鋁、硫酸鋁鉀、乙酸鋁、乙酸鉛中的任一種，且最佳選擇是硫酸鋁。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的高含量EGCg兒茶素的提取方法，其特征是所述沉淀反應(yīng)溶液的pH值的最佳控制范圍為4.5～5.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的高含量EGCg兒茶素的提取方法，其特征是所述黃色茶多酚是指多酚含量不低于80％的普通黃色茶多酚中的任一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的高含量EGCg兒茶素的提取方法，其特征是所述逆流萃取是指不用固態(tài)吸附劑的兩溶劑相以反向流動(dòng)形式連續(xù)進(jìn)行混合萃取的過程。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或6所述的高含量EGCg兒茶素的提取方法，其特征是所述逆流萃取的壓力范圍的最佳選擇是0.2MPa～0.6MPa。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種可直接用于藥物原料的高含量EGCg兒茶素的提取方法,其以普通的黃色茶多酚為原料,在室溫、壓力范圍為0.1～1.0MPa的條件下,經(jīng)過一系列的無害惰性有機(jī)溶劑多步逆流萃取后,調(diào)整溶液的pH值在2.5～7.5之間,進(jìn)行二價(jià)或三價(jià)金屬鹽沉淀反應(yīng),沉淀經(jīng)過濾、熱水洗滌和酸溶后,用乙酸乙酯萃取,萃取的有機(jī)溶劑相再進(jìn)行水洗脫酸、減壓濃縮、重結(jié)晶,養(yǎng)晶后的結(jié)晶物經(jīng)過濾、冷凍雙重水洗滌,最后進(jìn)行冷凍干燥而成。采用該工藝提取的產(chǎn)品,無有機(jī)溶劑殘留和農(nóng)藥殘留,兒茶素中EGCg有效含量達(dá)90%以上,可直接用于藥物原料。
文檔編號(hào)C07D311/62GK1367171SQ01139179
公開日2002年9月4日 申請(qǐng)日期2001年12月21日 優(yōu)先權(quán)日2001年12月21日
發(fā)明者鄭亞津, 陳平 申請(qǐng)人:浙江一新制藥股份有限公司