專利名稱：用作erk抑制劑的吡唑組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，并涉及屬于蛋白激酶抑制劑、尤其是ERK抑制劑的吡唑化合物，含有這類化合物的組合物及其使用方法。這類化合物可用于治療能通過蛋白激酶抑制劑減輕的癌和其他疾病狀態(tài)。
背景技術(shù)：
哺乳動物促分裂原活化蛋白(MAP)1激酶是介導(dǎo)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的絲氨酸/蘇氨酸激酶(Cobb和Goldsmith，1995年，《生物化學(xué)雜志》270，14843；Davis，1995年，《Mol.Reprod.Dev.》42，459)。MAP激酶族的成員共享序列相似性和保守結(jié)構(gòu)域，并包括ERK(胞外信號調(diào)節(jié)激酶)、JNK(Jun N端激酶)和p38激酶。JNK和p38激酶響應(yīng)促炎細(xì)胞因子TNF-α和白介素-1并通過細(xì)胞應(yīng)力諸如熱震、高摩爾滲透壓濃度、紫外線照射、脂多糖類和蛋白合成抑制劑而活化(Derijard等，1994年，《細(xì)胞》76，1025；Han等，1994年，《科學(xué)》265，808；Raingeaud等，1995年，《生物化學(xué)雜志》270，7420；Shapiro和Dinarello，1990年，《美國國家科學(xué)院院報》92年，12230)。與此對照，ERK通過促分裂原和生長因子活化(Bokemeyer等，1996年，《國際腎臟學(xué)》49，1187)。
ERK2是一種廣泛分布的蛋白激酶，當(dāng)Thr183和Tyr185被上游MAP激酶MEK1磷酸化時，它達(dá)到最大活性(Anderson等，1990年，《自然》343，651；Crews等，1992年，《科學(xué)》258，478)。一旦活化，ERK2就磷酸化許多調(diào)節(jié)蛋白，包括蛋白激酶Rsk90(Bjorbaek等，1995年，《生物化學(xué)雜志》270，18848)和MAPKAP2(Rouse等，1994年，《細(xì)胞》78，1027)，以及轉(zhuǎn)錄因子諸如ATF2(Raingeaud等，1996年，《分子與細(xì)胞生物學(xué)》16，1247)、ElK-1(Raingeaud等，1996年)、c-Fos(Chen等，1993年，《美國國家科學(xué)院院報》90，10952)和c-Myc(Oliver等，1995年，《實驗生物學(xué)與實驗醫(yī)學(xué)會會志》210，162)。ERK2還是依賴于Ras/Raf的途徑的下游目標(biāo)(Moodie等，1993年，《科學(xué)》260，1685)，并可幫助從這些潛在的致癌蛋白交接信號。ERK2已顯示在乳癌細(xì)胞的陰性生長對照中起作用(Frey和Mulder，1997年，《癌癥研究》57，628)，并且還報道了ERK2在人乳癌中的過度表達(dá)(Sivaraman等，1997年，《臨床檢查雜志》99，1478)?；罨疎RK2還牽涉到內(nèi)皮素刺激的氣道平滑肌細(xì)胞的增殖，提示了這種激酶在哮喘中的作用(Whelchel等，1997年，《美國呼吸細(xì)胞與分子生物學(xué)雜志》16，589)。
JNK族的(MAP)1激酶已涉及在介導(dǎo)對多種疾病的細(xì)胞反應(yīng)中起作用，所述疾病包括癌(《致癌基因》1996年，13，135-42)、肝病(《肝臟學(xué)》1998年，28，1022-30)、心血管疾病(《循環(huán)系研究》1998年，83，167-78；《循環(huán)》1998年，971731-7；《生物化學(xué)雜志》1997年，272，28050-6；《循環(huán)系研究》1996年，79，162-73；《循環(huán)系研究》1996年，78，947-53；《臨床檢查雜志》1996年，97，508-14)，和免疫學(xué)疾病(《免疫學(xué)雜志》1999年，162，3176-87；《歐洲免疫學(xué)雜志》1998年，28，3867-77；《實驗醫(yī)學(xué)雜志》1997年，186，941-53；《歐洲免疫學(xué)雜志》1996年，26，989-94，等等)。
Aurora2是和人的癌癥諸如結(jié)腸癌、乳癌和其他固體腫瘤有牽連的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。這種激酶據(jù)信與調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的蛋白磷酸化事件有關(guān)。具體地說，Aurora2可在控制有絲分裂期間染色體的精確分離中起作用。細(xì)胞周期的錯誤調(diào)節(jié)可導(dǎo)致細(xì)胞增殖和其他異常。在人的結(jié)腸癌組織中，已發(fā)現(xiàn)了過度表達(dá)的Aurora2蛋白。參見Bischoff等，《歐洲分子生物學(xué)組織雜志》1998年，17，3052-3065；Schiumacher等，《細(xì)胞生物學(xué)雜志》1998年，143，1635-1646；Kimura等，《生物化學(xué)雜志》1997年，272，13766-13771。
糖原合酶激酶-3(GSK-3)是由各自由不同基因編碼的α和β同種型構(gòu)成的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶〔Coghlan等，《化學(xué)與生物學(xué)》7，793-803(2000)；Kim和Kimmel，遺傳學(xué)發(fā)展流行觀點》10，508-514(2000)〕。GSK-3和多種疾病包括糖尿病、早老性癡呆、CNS疾病諸如躁狂抑郁性疾病和神經(jīng)變性疾病、以及心肌突出肥大等有牽連〔WO99/65897；WO00/38675；和Haq等，《細(xì)胞生物學(xué)雜志》(2000)151，117〕。這些疾病可由其中GSK-3起作用的某些細(xì)胞信號途徑的異常動作引起或?qū)е逻@種異常。
KDR是也結(jié)合VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)的酪氨酸激酶受體(Neufeld等，1999年，《美國實驗生物學(xué)會聯(lián)合會會志》13，9)。VEGF與KDR受體的結(jié)合導(dǎo)致血管生成，這是毛細(xì)管從先存在的血管的萌芽。在引起腫瘤血管生成并允許癌性細(xì)胞迅速生長的各種癌中發(fā)現(xiàn)了高濃度的VEGF。因此，抑制VEGF活性是抑制腫瘤生長的一個手段，據(jù)顯示這可以通過抑制KDR受體酪氨酸激酶實現(xiàn)。
AKT，也稱作蛋白激酶B，是在促進(jìn)各式各樣的細(xì)胞類型的存活中起重要作用的絲氨酸/蘇氨酸激酶〔Khwaja，A.，《自然》，33-34頁(1990)〕。據(jù)Zang等人顯示，人卵巢癌細(xì)胞顯示出抬高濃度的AKT-1和AKT-2。抑制AKT導(dǎo)致這些人卵巢癌細(xì)胞的編程性細(xì)胞死亡，證明AKT可能是卵巢癌治療〔Zang，Q.Y.等，《致癌基因》，19(2000)〕和其他增殖性疾病的重要目標(biāo)。AKT途徑也和運動神經(jīng)元存活和神經(jīng)再生有牽連〔Kazuhiko，N.等，《神經(jīng)科學(xué)雜志》，20(2000)〕。
對于尚未得到滿足的開發(fā)蛋白激酶抑制劑的醫(yī)學(xué)需要有很高的需求，尤其是對于可用于治療與ERK活化有關(guān)的各種疾病的ERK抑制劑，特別是考慮到對于這些疾病中的大多數(shù)來說目前可獲得的、相當(dāng)不夠的治療選擇。
因此，仍然非常需要開發(fā)蛋白激酶的強抑制劑，包括ERK抑制劑，它們可用于治療與蛋白激酶活化有關(guān)的各種疾病。
發(fā)明的描述現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物及其組合物是有效的蛋白激酶抑制劑，尤其是ERK的抑制劑。這些化合物具有通式I 或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R1選自R、鹵素、N(R8)2、OR、NRCOR、NRCON(R8)2、CON(R8)2、SO2R、NRSO2R或SO2N(R8)2；T選自價鍵或連接基；R各自獨立地選自氫或具有1至6個碳的可選取代的脂族基；R2選自氫、CN、鹵素、芳基、芳烷基、雜芳基、雜環(huán)基、具有1至6個碳的可選取代的無環(huán)脂族鏈基、或具有4至10個碳的可選取代的環(huán)脂族基；R3選自R、OH、OR、N(R8)2、鹵素或CN；Q是價鍵、J、或可選取代的C1-6亞烷基鏈，其中該亞烷基鏈的最多兩個非相鄰碳各自可選地并獨立地被J取代；J選自-C(＝O)-、-CO2-、-C(O)C(O)-、-NRCONR8-、-N(R)N(R8)-、-C(＝O)NR8-、-NRC(＝O)-、-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-N(R)O-、-ON(R8)-、-OC(＝O)N(R8)-、-N(R)COO-、-SO2N(R8)-、-N(R)SO2-或-N(R8)-；R4選自-R8、-R5、-NH2、-NHR5、-N(R5)2或-NR5(CH2)yN(R5)2；R5各自獨立地選自R6、R7、-(CH2)yCH(R6)(R7)、-(CH2)yR6、-(CH2)yCH(R6)2、-(CH2)yCH(R7)2或-(CH2)yR7；y是0-6；R6各自是可選取代的基團(tuán)，獨立地選自脂族基、芳基、芳烷基、芳烷氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基烷氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基或雜環(huán)基烷氧基；R7各自獨立地選自可選取代的羥基烷基、烷氧基烷基、芳氧基烷基或烷氧基羰基；R8各自獨立地選自R，或者同一氮上的兩個R8與氮一起可選地構(gòu)成具有1至3個雜原子的4至8元飽和或不飽和雜環(huán)；并且各個可取代的環(huán)氮可選地被R、NR2、COR、CO2(C1-C6可選取代的烷基)、SO2(C1-C6可選取代的烷基)、CONR2和SO2NR2取代。
除非另有說明，否則本文中將采用以下定義。另外，取代基或變量的組合只有產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物時才是允許的。
本文中所用的術(shù)語“脂族”是指完全飽和或含有1個或多個不飽和單元的直鏈、支鏈或環(huán)C1-C12烴。例如，合適的脂族基包括取代或未取代的直鏈、支鏈或環(huán)烷基、烯基、炔基及其混合物，諸如(環(huán)烷基)烷基、(環(huán)烯基)烷基或(環(huán)烷基)烯基。單獨使用或作為較大基團(tuán)的一部分的術(shù)語“烷基”和“烷氧基”指的是含有1至12個碳原子的直鏈和支鏈。單獨使用或作為較大基團(tuán)的一部分的術(shù)語“烯基”和“炔基”將包括含有2至12個碳原子的直鏈和支鏈。術(shù)語“鹵代烷基”、“鹵代烯基”和“鹵代烷氧基”是指根據(jù)具體情況被1個或多個鹵素原子取代的烷基、烯基或烷氧基。術(shù)語“鹵素”是指F、Cl、Br或I。術(shù)語“雜原子”是指N、O或S，并且將包括任何氧化形式的氮和硫，以及季銨化形式的任何堿性氮。
單獨使用或作為較大基團(tuán)的一部分如在“芳烷基”中所用的術(shù)語“芳基”指的是具有5至14個成員的芳環(huán)基，諸如苯基、芐基、1-萘基、2-萘基、1-蒽基和2-蒽基，以及雜環(huán)芳基或雜芳基諸如2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、3-異噁唑基、4-異噁唑基、5-異噁唑基、2-噁二唑基、5-噁二唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、3-噠嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、5-四唑基、2-三唑基、5-三唑基、2-噻吩基或3-噻吩基。術(shù)語“芳環(huán)”也指被可選地取代的環(huán)。
芳基還包括稠合多環(huán)芳環(huán)系統(tǒng)，其中碳環(huán)芳環(huán)或雜芳基環(huán)與一個或多個其他環(huán)稠合。實例包括四氫萘基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、異喹啉基、異吲哚基、吖啶基、苯并異噁唑基，等等。如本文中所用的，在術(shù)語“芳基”的范圍內(nèi)還包括這樣的基團(tuán)其中一個或多個碳環(huán)芳環(huán)和/或雜芳基環(huán)與環(huán)烷基或非芳族雜環(huán)稠合，例如2，3-二氫化茚基或四氫苯并吡喃基。
非芳族雜環(huán)是其中一個或多個環(huán)碳在環(huán)中被雜原子諸如氮、氧或硫取代的非芳族碳環(huán)。環(huán)可以是5、6、7或8元環(huán)和/或與另一個環(huán)、諸如環(huán)烷基或芳環(huán)稠合。實例包括3-1H-苯并咪唑-2-酮、3-(1-烷基)-苯并咪唑-2-酮、2-四氫呋喃基、3-四氫呋喃基、2-四氫噻吩基、3-四氫噻吩基、2-嗎啉基、3-嗎啉基、4-嗎啉基、2-硫代嗎啉基、3-硫代嗎啉基、4-硫代嗎啉基、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-哌嗪基、2-哌嗪基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、4-噻唑烷基、diazolonyl、N-取代diazolonyl、1-苯并[c]吡咯酮基、苯并噁烷、苯并三唑-1-基、苯并吡咯烷、苯并哌啶、苯并氧雜環(huán)戊烷基、苯并硫雜環(huán)戊烷基和benzothiane。術(shù)語“雜環(huán)”，無論是飽和的還是不飽和的，也指被可選取代的環(huán)。
芳基(碳環(huán)和雜環(huán))或芳烷基，諸如芐基或苯乙基，可含有一個或多個取代基。芳基的不飽和碳原子上的適宜取代基的實例包括鹵素、-R、-OR、-SR、被護(hù)OH(諸如酰氧基)、苯基(Ph)、取代Ph、-OPh、取代-OPh、-NO2、-CN、-N(R)2、-NRN(R)2、-NRCON(R)2、-NRCOR、-NRCO2(脂族的)、-CO2R、-COR、-C(O)C(O)R、-CON(R)2、-CONRN(R)2、-S(O)2R、-SON(R)2、-S(O)(脂族的)、-SO2N(R)2或-NRS(O)2R，其中R各自獨立地選自氫、脂族基或取代脂族基。
脂族基或非芳族雜環(huán)可以含有一個或多個取代基。脂族基或非芳族雜環(huán)的飽和碳上的適宜取代基的實例包括上文中對不飽和碳列出的那些以及下列這些＝O、＝S、＝NNHR、＝NNR2、＝N-、OR、＝NNHCOR、＝NNHCO2(脂族的)、＝NNHSO2(脂族的)或＝NR，其中R各自獨立地選自氫、脂族基或取代脂族基。
術(shù)語“亞烷基鏈”指的是可選取代的直鏈或支鏈碳鏈，它可以是完全飽和的或者具有一個或多個不飽和單元?？蛇x取代基是如上文中對脂族基所述的。Q的C1-6亞烷基鏈的可選取代基包括上文中對脂族基所述的那些。
芳族或非芳族雜環(huán)上的可取代的氮可以是可選取代的。氮上的適宜取代基包括R、COR、N(R)2、CON(R)2、CONRN(R)2、S(O)2R和CO2R，其中R獨立地選自氫、可選取代的芳基或脂族基。
術(shù)語“連接基”是指連接兩部分化合物的有機部分。連接基一般由原子諸如氧或硫、單元諸如-NH-或-CH2-、或原子鏈諸如亞烷基鏈組成。連接基的分子質(zhì)量一般在約14至200范圍內(nèi)。連接基的實例包括飽和或不飽和C1-6亞烷基鏈，它是可選取代的，并且其中該鏈的最多兩個飽和碳可選地被-C(＝O)-、-CONH-、-CONHNH-、-CO2-、-NHCO2-、-O-、-NHCONH-、-OC(＝O)-、-OC(＝O)NH-、-NHNH-、-NHCO-、-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-NH-、-SO2NH-或NHSO2-取代。
對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說顯而易見的是，本發(fā)明的某些化合物可以互變異構(gòu)形式存在，所有這類互變異構(gòu)形式的化合物都在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
除非另有說明，否則本文中描述的結(jié)構(gòu)還意味著包括該結(jié)構(gòu)的所有立體化學(xué)形式，即每個不對稱中心的R和S構(gòu)型。因此，本發(fā)明化合物的單一立體化學(xué)異構(gòu)體以及對映體和非對映體的混合物也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。除非另有說明，否則本文中描述的結(jié)構(gòu)還意味著包括僅在存在一個或多個同位素富原子方面有所不同的化合物。例如，具有現(xiàn)在的結(jié)構(gòu)但氫被氘或氚取代、或者碳被富集13C或14C的碳取代的化合物也在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明的一個實施方案涉及式II化合物 其中R1、R2、R3、R4、T和Q如上所述。
本發(fā)明的優(yōu)選實施方案涉及式II-A化合物 其中T、R2和R4如上所述，而R1和R3各自為氫。
優(yōu)選的化合物包括具有一項或多項、首選全部下列特征的那些(a)Q是-CO-、-CO2-或-CONH-；(b)T是價鍵；(c)R1是氫或NHR；(d)R2是可選取代的芳環(huán)，更優(yōu)選可選取代的苯環(huán)；(c)R3是氫；(e)R4選自R5、-NHR5、-N(R5)2、-NR5R6、-NHCHR5R6、或-NHCH2R5；和/或(f)R5是可選取代的基團(tuán)，選自芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、(CH2)yR6、(CH2)yR7、或(CH2)yCH(R6)(R7)。
R2苯基的取代基的實例包括鹵素、硝基、烷氧基和氨基。
當(dāng)R4為R5時，優(yōu)選的R5基的實例包括吡咯烷-1-基、嗎啉-1-基、哌啶-1-基和哌嗪-1-基，其中各個基團(tuán)是可選取代的。當(dāng)R4是-NHR5或-N(R5)2時，優(yōu)選的R5基還包括(CH2)yR6、(CH2)yR7和(CH2)yCH(R6)(R7)。優(yōu)選的R6和R7的實例包括吡啶-3-基、吡啶-4-基、咪唑基、呋喃-2-基、四氫呋喃-2-基、環(huán)己基、苯基、-CH2OH、-(CH2)2OH和異丙基，其中各個基團(tuán)是可選取代的。其中R1和R3各自為氫的式II的例舉性結(jié)構(gòu)列在下表1中。表1.化合物II

本發(fā)明的另一個優(yōu)選實施方案涉及式II-B化合物
其中T、R、R2和R4如上所述。
優(yōu)選的II-B化合物包括具有一項或多項、首選全部下列特征的那些(a)T是價鍵；(b)R3是氫；和/或(c)R2是可選取代的芳環(huán)，更優(yōu)選可選取代的苯環(huán)。
其中R3為H的式II-B的例舉性結(jié)構(gòu)列在下表2中。
表2.化合物II-B

本發(fā)明化合物一般可以用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的制備類似化合物的方法加以制備，如通用方案I和II以及下文中所示的合成實施例所說明的。
方案I 試劑和條件(a)PhCH2COCl，AlCl3，CH2Cl2，2小時，室溫(b)DMF，24小時，室溫(c)(Me2N)2-Ot-Bu，THF，24小時，室溫(d)H2NNH2，EtOH，12小時，回流上述方案I顯示了用于制備R2為可選取代的苯基時的本發(fā)明化合物的一般合成途徑。在步驟(a)中，可選取代的苯甲酰氯在二氯甲烷和三氯化鋁中與化合物1化合形成化合物2。苯環(huán)上的各種取代基都可經(jīng)受該反應(yīng)。合適的R2基的實例包括但不限于上文表1中列出的那些。
在DMF中用胺3處理化合物2而形成酰胺4。當(dāng)胺3為伯胺時，該反應(yīng)在室溫下進(jìn)行。當(dāng)胺3為仲胺時，該反應(yīng)在50℃下加熱以使反應(yīng)完全并得到酰胺4。
在步驟(c)，通過在室溫下用(Me2N)2-Ot-Bu處理酰胺4而形成烯胺5。另一方面，在步驟(c)形成烯胺5的反應(yīng)也可以通過使用二甲基甲酰胺-二甲基乙縮醛(DMF-DMA)實現(xiàn)。使用DMF-DMA的反應(yīng)需要抬高的溫度以得到烯胺5，而使用(Me2N)2-OtBu則有在室溫下進(jìn)行反應(yīng)以更高純度得到烯胺5的優(yōu)點。
在步驟(d)，通過在抬高的溫度下用水合肼處理烯胺5而形成吡唑化合物6。如表1中所例舉的、用該方法合成的式II化合物通過制備HPLC(逆相，10→90％MeCN的水溶液，15分鐘)分離。用于生產(chǎn)這些化合物的具體條件陳述在實施例中。
方案II 試劑和條件(a)3-Cl-PhCH2COCl，AlCl3，CH2Cl2，2小時，室溫(b)DMF，24小時，室溫(c)NBS，CCl4，回流(d)iPrOH，回流(e)甲酸，回流，2小時。
上述方案II顯示了可用于制備式II-B化合物的一般合成方法，以化合物II-B-16為例。該方法是從Jira，T.等在《Pharmazie》第401-406頁(1994)中公開的方法改良的。式II-B化合物也可以用與下列文獻(xiàn)中公開的類似方法制備Woller，J.等，《Pharmazie》第937-940頁(1996)；Rychmans，T.等，《四面體》第1729-1734頁(1997)；和Tupper，D.E.等，《合成》第337-341頁(1997)。
按照另一個實施方案，本發(fā)明提供了抑制生物學(xué)樣品中激酶活性的方法。該方法包括使所述生物學(xué)樣品與本發(fā)明化合物接觸的步驟。
本文中所用的術(shù)語“生物學(xué)樣品”包括細(xì)胞培養(yǎng)物或其提取物；從哺乳動物得到的活組織檢查物質(zhì)或其提取物；以及血液、唾液、小便、糞便、精液、眼淚、或其他體液或其提取物。術(shù)語“生物學(xué)樣品”還包括活有機體，在這種情況下，“使本發(fā)明化合物與生物學(xué)樣品接觸”與術(shù)語“對哺乳動物給藥所述化合物(或包含所述化合物的組合物)”是同義的。
本發(fā)明的另一個方面涉及哺乳動物的可通過用蛋白激酶抑制劑治療而減輕的疾病狀態(tài)的治療方法，該方法包括對需要這種治療的哺乳動物給藥治療有效量的式I化合物 或其藥學(xué)上可接受的衍生物，其中R1選自R、鹵素、N(R8)2、OR、NRCOR、NRCON(R8)2、CON(R8)2、SO2R、NRSO2R或SO2N(R8)2；T選自價鍵或連接基；R各自獨立地選自氫或具有1至6個碳的可選取代的脂族基；R2選自氫、CN、鹵素、芳基、芳烷基、雜芳基、雜環(huán)基、具有1至6個碳的可選取代的無環(huán)脂族鏈基、或具有4至10個碳的可選取代的環(huán)脂族基；R3選自R、OH、OR、N(R8)2、鹵素或CN；Q是價鍵、J、或可選取代的C1-6亞烷基鏈，其中該亞烷基鏈的最多兩個非相鄰碳各自可選地并獨立地被J取代；J選自-C(＝O)-、-CO2-、-C(O)C(O)-、-NRCONR8-、-N(R)N(R8)-、-C(＝O)NR8-、-NRC(＝O)-、-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-N(R)O-、-ON(R8)-、-OC(＝O)N(R8)-、-N(R)COO-、-SO2N(R8)-、-N(R)SO2-或-N(R8)-；R4選自-R8、-R5、-NH2、-NHR5、-N(R5)2或-NR5(CH2)yN(R5)2；R5各自獨立地選自R6、R7、-(CH2)yCH(R6)(R7)、-(CH2)yR6、-(CH2)yCH(R6)2、-(CH2)yCH(R7)2或-(CH2)yR7；y是0-6；R6各自是可選取代的基團(tuán)，獨立地選自脂族基、芳基、芳烷基、芳烷氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基烷氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基或雜環(huán)基烷氧基；R7各自獨立地選自可選取代的脂族基、羥基烷基、烷氧基烷基、芳氧基烷基或烷氧基羰基；R8各自獨立地選自R，或者同一氮上的兩個R8與氮一起可選地構(gòu)成具有1至3個雜原子的4至8元飽和或不飽和雜環(huán)；并且各個可取代的環(huán)氮可選地被R、NR2、COR、CO2(C1-C6可選取代的烷基)、SO2(C1-C6可選取代的烷基)、CONR2和SO2NR2取代。
一個實施方案包括給藥式II化合物。優(yōu)選實施方案包括給藥式II-A化合物，首選表1中所列的化合物。另一個優(yōu)選實施方案包括給藥式II-B化合物，更優(yōu)選表2中所列的化合物。下面描述用于這類方法的藥物組合物。
本發(fā)明方法尤其可用于治療能通過使用ERK、JAK、JNK、Aurora、GSK、KDR或AKT的抑制劑來減輕的疾病狀態(tài)。除非另有說明，否則本文中所用的術(shù)語“ERK”、“JAK”、“JNK”、“Aurora”、“GSK”、“KDR”和“AKT”指的是各個酶的所有同種型，包括但不限于ERK1、ERK2、ERK3、ERK4、ERK5、ERK6、ERK7、JAK1、JAK2、JAK3、JAK4、JNK1、JNK2、JNK3、Auroral、Aurora2、GSK3-α、GSK3-β、KDR、AKT-1、AKT-2和AKT-3。
化合物作為蛋白激酶抑制劑、例如作為ERK抑制劑的活性可以在體外、在體內(nèi)或在細(xì)胞系中進(jìn)行測定。用ERK為例，體外測定包括測定活化ERK的激酶活性或ATP酶活性的抑制情況。另一項體外測定法定量測定抑制劑結(jié)合ERK的能力，并可通過在結(jié)合前對抑制劑進(jìn)行放射性標(biāo)記、分離抑制劑/ERK復(fù)合物和測定放射性標(biāo)記結(jié)合的量來測量，或者通過進(jìn)行競爭實驗來測量，其中新的抑制劑與結(jié)合到已知放射性配體上的ERK一起培養(yǎng)。根據(jù)要抑制的ERK類型或同種型，可以使用任何類型或同種型的ERK。
根據(jù)酶測定法的測定，本發(fā)明化合物是ERK的強抑制劑。這些化合物還在細(xì)胞增殖測定中顯示能抑制ERK。用于酶測定和細(xì)胞增殖測定的具體條件陳述在下文中的實施例中。
根據(jù)酶測定法的測定，本發(fā)明化合物還是JNK、Aurora、GSK、KDR和AKT的抑制劑。用于該測定的具體條件陳述在下文中的實施例中。不受理論的束縛，本發(fā)明化合物還預(yù)期能抑制其他蛋白激酶。
本發(fā)明的蛋白激酶抑制劑或其可藥用鹽可以配制成用于對動物或人給藥的藥物組合物。包含足以可檢測地抑制蛋白激酶活性量的蛋白激酶抑制劑和藥學(xué)上可接受的載體的、能有效地治療或預(yù)防蛋白激酶介導(dǎo)的疾病的這些藥物組合物是本發(fā)明的另一個實施方案。本文中所用的術(shù)語“可檢測地抑制”是指含有所述抑制劑的樣品和只含有蛋白激酶的樣品間活性的可測量的變化。
本文中所用的術(shù)語“ERK介導(dǎo)的疾病”是指其中已知ERK起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害病況。這類疾病非限制性地包括癌、中風(fēng)、糖尿病、肝腫大、心血管疾病包括心肥大、早老性癡呆、囊纖維變性、病毒疾病、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化、再狹窄、牛皮癬、變應(yīng)性疾病包括哮喘、炎癥、神經(jīng)病學(xué)疾病和與激素有關(guān)的疾病。術(shù)語“癌”包括但不限于下列癌乳癌、卵巢癌、宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胃癌、皮膚癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮樣癌、大細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌、肺腺癌、骨癌、結(jié)腸癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲狀腺癌、濾泡癌、未分化癌、乳頭狀癌、精原細(xì)胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽道癌、腎癌、骨髓疾病、淋巴樣疾病、何杰金氏病、毛細(xì)胞、口腔前庭和咽(口腔)癌、唇癌、舌癌、口腔癌、咽癌、小腸癌、結(jié)腸-直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦癌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌，以及白血病。
本發(fā)明化合物還可用作相關(guān)激酶的抑制劑。術(shù)語“相關(guān)激酶”指的是具有與連接ERK結(jié)合位點的那些殘基類似的殘基的蛋白激酶。不希望受到理論的束縛，申請人推測這種抑制活性是由ERK和相關(guān)激酶的活性位點之間的緊密的結(jié)構(gòu)相似性導(dǎo)致的。ERK序列與其他激酶的對齊可以從普通的軟件程序諸如可從Genetics ComputerGroup購得的“bestfit”程序產(chǎn)生。這種程序使用Smith和Waterman在《應(yīng)用數(shù)學(xué)進(jìn)展》2；482(1981)中描述的局部同源性算法。
利用上述標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)序列對齊軟件確定，受本發(fā)明化合物抑制的相關(guān)激酶將含有與ERK殘基相對應(yīng)的殘基I31、E33、G34、A35、Y36、G37、M38、V39、A52、K54、R67、T68、E71、L75、I84、I86、I103、Q105、D106、L107、M108、E109、D111、K114、D149、K151、S153、N154、L156、C166和D167，相似性得分為80％或更高。相似性得分可以使用標(biāo)準(zhǔn)氨基酸置換表確定，諸如由Dayhoff(Dayhoff，M.O.等，《蛋白質(zhì)序列和結(jié)構(gòu)圖譜》，1979年)和Blosom-Henikoff(Blosom-Henikoff，S和Henikoff，J.D.，PNAS，1992，8910915-10919)描述的那些。術(shù)語“相關(guān)激酶”還包括含有與下列ERK殘基的相似性得分為80％或更高的殘基的那些I31、G37、A52、I103、E109和N154。
本發(fā)明化合物還可用作JAK族激酶的抑制劑。不希望受到理論的束縛，申請人推測這種抑制活性是由于如上述標(biāo)準(zhǔn)方法確定的ERK和JAK的活性位點之間的緊密的結(jié)構(gòu)相似性導(dǎo)致的。
從用ERK結(jié)合抑制劑進(jìn)行的內(nèi)部X射線晶體結(jié)構(gòu)實驗來看，ERK活性部位中的三個氨基酸殘基構(gòu)成了與這些類型的抑制劑的關(guān)鍵氫鍵鍵合作用。這三個氨基酸殘基是M108、D106和Q105。此氨基酸編號對應(yīng)于Swiss-Prot資料庫中的登記號#P28482。Swiss-Prot資料庫是由瑞士日內(nèi)瓦的歐洲生物信息學(xué)協(xié)會(EBI)發(fā)布的國際蛋白質(zhì)序列資料庫。該資料庫可以在www.ebi.ac.uk/swissprot上找到。
M108和D106的主鏈原子以及伴隨的相互作用是所有激酶共有的。M108提供氫鍵供體和受體，D106通過其主鏈CO提供氫鍵受體。能與活性部位中的一個或多個這些氫鍵鍵合基團(tuán)形成氫鍵的抑制劑預(yù)期將與酶結(jié)合，并因此顯示出抑制作用。
通過檢查從上述軟件程序獲得的對齊數(shù)據(jù)，確定Q105谷氨酰胺殘基和包括ERK和JAK的激酶子集有關(guān)。Q105提供關(guān)鍵的氫鍵接受側(cè)鏈CO。模型化實驗顯示，對于ERK和JAK，Ht環(huán)的氫鍵供體在Q105殘基遠(yuǎn)處的氫鍵鍵合部位中。由于這些類似的活化-位點相互作用，本發(fā)明的ERK抑制劑也抑制JAK。因此，這些化合物可用于治療JAK介導(dǎo)的疾病。
本文中所用的術(shù)語“JAK介導(dǎo)的疾病”是指其中已知JAK起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害病況。這類疾病非限制性地包括變應(yīng)性疾病諸如哮喘和特應(yīng)性皮炎、自身免疫疾病諸如SLE狼瘡和牛皮癬、以及與器官移植有關(guān)的疾病。
本發(fā)明化合物還可用作JNK族激酶的抑制劑。因此，這些化合物可用于治療JNK介導(dǎo)的疾病。本文中所用的術(shù)語“JNK介導(dǎo)的疾病”是指其中已知JNK起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害病況。這類疾病非限制性地包括驅(qū)動編程性細(xì)胞死亡的神經(jīng)變性疾病諸如早老性癡呆、帕金森氏病、ALS(肌萎縮性側(cè)索硬化)、癲癇和癲癇發(fā)作、杭廷頓氏舞蹈病、外傷性腦損傷、以及缺血性和出血性中風(fēng)、心臟病、免疫缺陷疾病、炎性疾病、變應(yīng)性疾病、自身免疫疾病、破壞性骨疾病諸如骨質(zhì)疏松癥、增殖性疾病、傳染病、病毒疾病、涉及細(xì)胞死亡的疾病和增生包括中風(fēng)、心臟病發(fā)作和器官氧不足中的再充滿/局部缺血、凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集、慢性骨髓性白血病(CML)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、骨關(guān)節(jié)炎、局部缺血、癌、肝臟疾病包括肝局部缺血、心臟病諸如心肌梗死和充血性心力衰竭、牽涉T細(xì)胞活化的病理性免疫疾病和神經(jīng)變性疾病。
本發(fā)明化合物還可用作Aurora抑制劑。因此，這些化合物可用于治療Aurora介導(dǎo)的疾病。本文中所用的術(shù)語“Aurora介導(dǎo)的疾病”是指其中已知Aurora起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害病況。這類疾病非限制性地包括癌。術(shù)語“癌”包括但不限于下列癌結(jié)腸癌和卵巢癌。
本發(fā)明化合物還可用作GSK族激酶的抑制劑。因此，這些化合物可用于治療GSK介導(dǎo)的疾病。本文中所用的術(shù)語“GSK介導(dǎo)的疾病”是指其中已知GSK起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害病況。這類疾病非限制性地包括糖尿病、早老性癡呆、神經(jīng)變性疾病和CNS疾病諸如躁狂抑郁性疾病和精神分裂癥。
本發(fā)明化合物還可用作KDR族激酶的抑制劑。因此，這些化合物可用于治療KDR介導(dǎo)的疾病。本文中所用的術(shù)語“KDR介導(dǎo)的疾病”是指其中已知KDR起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害病況。KDR介導(dǎo)的疾病或病況包括但不限于癌諸如腦癌、泌尿生殖道癌、淋巴系統(tǒng)癌、胃癌、喉癌、肺癌、胰腺癌、乳癌、卡波濟(jì)氏肉瘤和白血病；子宮內(nèi)膜異位，良性前列腺增生；血管疾病諸如再狹窄和動脈粥樣硬化；自身免疫疾病諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和牛皮癬；眼病諸如增殖性或血管生成性視網(wǎng)膜病和黃斑變性；和炎性疾病諸如接觸性皮炎、哮喘和遲發(fā)性過敏反應(yīng)。
本發(fā)明化合物還可用作AKT族激酶的抑制劑。因此，這些化合物可用于治療AKT介導(dǎo)的疾病。本文中所用的術(shù)語“AKT介導(dǎo)的疾病”是指其中已知AKT起作用的任何疾病狀態(tài)或其他有害病況。AKT介導(dǎo)的疾病或病況包括但不限于增殖性疾病、癌和神經(jīng)變性疾病。
除了本發(fā)明的化合物以外，本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的衍生物或藥物前體也可以用于組合物中來治療或預(yù)防上述疾病。
“藥學(xué)上可接受的衍生物或藥物前體”是指本發(fā)明化合物的任何藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或其他衍生物，一旦對接受者給藥，它們就能直接或間接提供本發(fā)明化合物或其抑制性活性代謝物或殘余物。特別有利的衍生物或藥物前體是當(dāng)這類化合物對哺乳動物給藥時能提高本發(fā)明化合物的生物利用度(例如通過使口服給藥的化合物更容易地吸收到血液中)或能增強母化合物向與母物質(zhì)有關(guān)的生物學(xué)房室(例如腦或淋巴系統(tǒng))的釋放的那些。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的藥物前體非限制性地包括酯、氨基酸酯、磷酸酯、金屬鹽和磺酸酯。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括從藥學(xué)上可接受的無機和有機酸和堿衍生的那些。適宜的酸鹽的實例包括乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天門冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、酸式硫酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、月桂基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡糖庚酸鹽、甘油磷酸鹽、羥乙酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、palmoate、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。其他酸，諸如草酸，盡管自身不是藥學(xué)上可接受的，但可以在得到本發(fā)明化合物和它們的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽中作為中間體用于鹽的制備。
從適宜的堿衍生的鹽包括堿金屬(例如鈉和鉀)鹽、堿土金屬(例如鎂)鹽、銨鹽和N+(C1-4烷基)4鹽。本發(fā)明還預(yù)想了本文中公開的化合物的任何堿性含氮基團(tuán)的季銨化。季銨化可得到水或水溶或分散的產(chǎn)物。
可以用于這些藥物組合物的藥學(xué)上可接受的載體包括但不限于離子交換劑、礬土、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白諸如人血清白蛋白、緩沖物質(zhì)諸如磷酸鹽、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、鹽或電解質(zhì)諸如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠體二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素基物質(zhì)、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。
本發(fā)明組合物可以口服給藥、胃腸外給藥、通過吸入噴霧給藥、局部給藥、直腸給藥、經(jīng)鼻給藥、經(jīng)頰給藥、鞘內(nèi)給藥或經(jīng)由植入貯器給藥。本文中所用的術(shù)語“胃腸外”包括皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑液內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、肝內(nèi)、損害內(nèi)和顱內(nèi)注射或滴注技術(shù)。優(yōu)選組合物口服、腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥。
本發(fā)明組合物的無菌注射用形式可以是含水或油質(zhì)的懸浮液。這些懸浮液可以按照本領(lǐng)域中的已知技術(shù)使用合適的分散劑或潤濕劑和懸浮劑進(jìn)行配制。無菌注射用制劑還可以是在無毒的胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌注射用溶液或懸浮液，例如用1，3-丁二醇制成溶液。在可接受的賦形劑和溶劑中可以采用的是水、Ringer溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌的不揮發(fā)油常常用作溶劑或懸浮介質(zhì)。為此目的，可以采用任何溫和的不揮發(fā)油包括合成的一-或二-甘油酯。脂肪酸諸如油酸及其甘油酯衍生物可用于注射用制劑，天然的藥學(xué)上可接受的油也可以，諸如橄欖油或蓖麻油，尤其是它們的聚氧乙基化變型。這些油溶液或懸浮液還可含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，諸如羧甲基纖維素或常用于配制藥學(xué)上可接受的劑型包括乳劑和懸浮液的類似分散劑。為了制劑的目的，還可以使用其他常用表面活性劑諸如吐溫類、司盤類和其他乳化劑或常用于制備藥學(xué)上可接受的固體、液體或其他劑型的生物利用度增強劑。
本發(fā)明的藥物組合物可以任何口服可接受的劑型口服給藥，包括但不限于膠囊劑、片劑、含水懸浮液或溶液。就用于口服的片劑而言，常用載體包括乳糖和玉米淀粉。通常還加入潤滑劑諸如硬脂酸鎂。對于以膠囊形式的口服給藥，有用的稀釋劑包括乳糖和干燥玉米淀粉。當(dāng)需要口服含水懸浮液時，將活性成分與乳化劑和懸浮劑混合。如果需要，還可加入某些甜味劑、調(diào)味劑或著色劑。
另一方面，本發(fā)明的藥物組合物可以直腸給藥用的栓劑形式給藥。這些可以通過將藥劑與適宜的在室溫下為固體但在直腸溫度下為液體并因此將在直腸中熔化而釋放出藥物的非刺激性賦形劑混合加以制備。這類物質(zhì)包括椰子油、蜂蠟和聚乙二醇。
本發(fā)明的藥物組合物還可以局部給藥，尤其是當(dāng)治療目標(biāo)包括通過局部應(yīng)用就可容易地進(jìn)入的區(qū)域或器官時，包括眼睛、皮膚或下腸道的疾病。合適的局部制劑可針對各種區(qū)域或器官容易地制備。
對于下腸道的局部應(yīng)用可以用直腸栓劑制劑(參見上文)完成，或者用適宜的灌腸劑制劑完成。也可使用局部透皮貼片。
對于局部應(yīng)用，藥物組合物可以配制成合適的含有懸浮或溶于一種或多種載體中的活性成分的軟膏劑。用于本發(fā)明化合物的局部給藥的載體包括但不限于礦物油、液體礦脂、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟和水。另一方面，藥物組合物可以配制成合適的含有懸浮或溶于一種或多種藥學(xué)上可接受的載體中的活性成分的洗液或膏霜。適宜的載體包括但不限于礦物油、脫水山梨糖醇一硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鯨蠟基酯蠟、鯨蠟硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。
對于眼科應(yīng)用，藥物組合物可以配制成在等滲的pH調(diào)節(jié)好的無菌鹽水中的微粉化懸浮液，或者優(yōu)選配制成在等滲的pH調(diào)節(jié)好的無菌鹽水中的溶液，加或不加防腐劑諸如氯芐烷銨。另一方面，對于眼科應(yīng)用，藥物組合物可以配制成軟膏劑諸如在凡士林中的。
本發(fā)明的藥物組合物還可以通過鼻氣霧劑或吸入給藥。這類組合物按照藥物制劑領(lǐng)域中眾所周知的技術(shù)制備，并可制備成在鹽水中的溶液，使用苯甲醇或其他適宜的防腐劑、增強生物利用度的吸收促進(jìn)劑、碳氟化合物、和/或其他常規(guī)增溶劑或分散劑。
可以與載體物質(zhì)結(jié)合生產(chǎn)單一劑型的本發(fā)明的蛋白激酶抑制劑的量將根據(jù)所治療的主體、特定的給藥方式變化。優(yōu)選應(yīng)配制組合物使得可以對接受這些組合物的病人給藥劑量在約0.01-100mg/kg體重/天之間的抑制劑。
還應(yīng)當(dāng)理解對于任何特定病人的具體劑量和治療方案將取決于多種因素，包括所用的具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時間、排泄速率、藥物組合、以及主治醫(yī)師的判斷和所治療的特定疾病的嚴(yán)重程度。抑制劑的量還將取決于組合物中的特定化合物。
本發(fā)明的激酶抑制劑或其藥物組合物還可以摻入到用于涂敷可植入醫(yī)學(xué)裝置諸如假體、人工瓣膜、血管移植物、斯滕特氏固定模和導(dǎo)管的組合物中。例如，血管斯滕特氏固定模已用于克服再狹窄(損傷后血管壁的再狹窄)。但是，使用斯滕特氏固定?；蚱渌芍踩胙b置的病人有形成凝血塊或血小板活化的危險。這些不希望的作用可以通過用包含激酶抑制劑的組合物預(yù)先涂敷裝置來防止或緩和。適宜的涂層和可植入包衣裝置的一般制備記載在美國專利5,099,562；5,886,026和5,304,121中。涂層一般是生物相容性聚合材料諸如水凝膠聚合物、聚甲基二硅氧烷、聚己內(nèi)酯、聚乙二醇、聚乳酸、乙烯基乙酸乙烯酯、及其混合物。涂層可以可選地進(jìn)一步用適宜的氟聚硅氧烷、多糖、聚乙二醇、磷脂或其結(jié)合物的表層涂層覆蓋，以便賦予組合物能可控釋放的特性。用本發(fā)明的激酶抑制劑涂敷的可植入裝置是本發(fā)明的另一個實施方案。
按照另一個實施方案，本發(fā)明提供了治療或預(yù)防ERK、JAK、JNK、Aurora、GSK、KDR或AKT介導(dǎo)的病況或疾病狀態(tài)的方法，它包括對病人給藥上述一種藥物組合物的步驟。本文中所用的術(shù)語“病人”是指哺乳動物，優(yōu)選人。
優(yōu)選該方法用于治療或預(yù)防選自下列成員的病況或疾病狀態(tài)癌諸如乳癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、皮膚癌、胰腺癌、腦癌、生殖泌尿道癌、淋巴系統(tǒng)癌、胃癌、喉癌和肺癌包括肺腺癌和小細(xì)胞肺癌、中風(fēng)、糖尿病、肝腫大、心肥大、心血管疾病、早老性癡呆、囊纖維變性、和病毒疾病，或者任何上述具體疾病或紊亂。
根據(jù)要治療或預(yù)防的特定病況或疾病狀態(tài)，通常給藥用于治療或預(yù)防該病況的其他治療劑可以與本發(fā)明的抑制劑一起給藥。例如，化療劑或其他抗增殖劑可以與本發(fā)明的抑制劑結(jié)合來治療增殖性疾病和癌。已知化療劑的實例包括但不限于阿霉素、地塞米松、長春新堿、環(huán)磷酰胺、氟尿嘧啶、托泊替堪、紫杉醇、干擾素和鉑衍生物。
還可以與本發(fā)明的抑制劑結(jié)合給藥的藥劑的其他實例非限制性地包括抗炎劑諸如皮質(zhì)類固醇、TNF阻滯劑、IL-1RA、硫唑嘌呤、環(huán)磷酰胺和柳氮磺胺吡啶；免疫調(diào)節(jié)劑和免疫抑制劑諸如環(huán)孢菌素、藤霉素、雷怕霉素、霉酚酸莫非替克、干擾素、皮質(zhì)類固醇、環(huán)磷酰胺、硫唑嘌呤和柳氮磺胺吡啶；神經(jīng)營養(yǎng)因子諸如乙酰膽堿酯酶抑制劑、MAO抑制劑、干擾素、抗驚厥劑、離子通道阻滯劑、利魯唑和抗帕金森氏病藥劑；用于治療心血管疾病的藥劑諸如β阻滯劑、ACE抑制劑、利尿劑、硝酸鹽、鈣通道阻滯劑和他汀類；用于治療肝臟疾病的藥劑諸如皮質(zhì)類固醇、考來烯胺、干擾素和抗病毒劑；用于治療血液疾病的藥劑諸如皮質(zhì)類固醇、抗白血病藥和生長因子；用于治療糖尿病的藥劑諸如胰島素、胰島素類似物、α葡萄糖甙酶抑制劑、雙胍類和胰島素敏化劑；以及用于治療免疫缺陷疾病的藥劑諸如γ球蛋白。
這些附加藥劑可以作為多劑方案的一部分與含有抑制劑的組合物分開給藥。另一方面，這些藥劑可以是單一劑型的一部分，與抑制劑一起混合在單一組合物中。
為了能更全面地理解本發(fā)明，給出下列實施例。應(yīng)當(dāng)理解這些實施例只是為了說明的目的，而不解釋為以任何方式對本發(fā)明的限制。實施例實施例1 2，2，2-三氯-1-(4-苯基乙?；?1H-吡咯-2-基)-乙酮(1)在一個干燥燒瓶中，苯基乙酰氯(1當(dāng)量)與2-三氯乙?；量?1當(dāng)量)在最小量的二氯甲烷(DCM)中化合。在室溫下，向所得溶液中加入三氯化鋁(1當(dāng)量)。2小時后，將該反應(yīng)混合物直接加到硅膠柱上。用在己烷中的10％乙酸乙酯至50％乙酸乙酯梯度洗脫，得到化合物1，收率60％。1H NMR(CDCl3)δ4.0(s，2H)，7.1-7.35(m，7H)，9.7(brs，NH)。使用方法B進(jìn)行的HPLC(如下文中實施例5所述)提供了4.9分鐘的保留時間。LC/MS(M+1)330.2，(M-1)328.1。實施例2 4-苯基乙?；?1H-吡咯-2-羧酸芐基酰胺(2)在室溫下，向化合物1(1當(dāng)量)的DMF溶液中加入芐胺(1.2當(dāng)量)。24小時后，蒸除溶劑，粗產(chǎn)物2不經(jīng)純化就使用。使用方法B進(jìn)行的HPLC(如下文中實施例5所述)提供了3.8分鐘的保留時間。FIA/MS(M+1)319.3，(M-1)317.2。實施例3 4-(3-二甲氨基-2-苯基-丙烯?；?-1H-吡咯-2-羧酸芐基酰胺(3)在室溫下，向化合物2(1當(dāng)量)的THF溶液中加入(Me2N)2CHOt-Bu(3當(dāng)量)。24小時后，蒸除溶劑，粗產(chǎn)物3不經(jīng)純化就使用。1H NMR(CDCl3)δ4.4(s，2H)，4.8(s，NH)，6.8-7.4(m，13H)。實施例4 4-(4-苯基-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯-2-羧酸芐基酰胺(II-5)在室溫下，向化合物3(1當(dāng)量)的乙醇溶液中加入水合肼(3當(dāng)量)并將所得混合物加熱回流。12小時后，蒸除溶劑，粗產(chǎn)物用制備HPLC(逆相；10→90％MeCN的水溶液；15分鐘)純化，得到所需化合物II-5。LC/MS(M+1)343.3，(M-1)341.2。
實施例5利用基本上與上述實施例1-4中所述的和方案I說明的類似方法，我們已制備了其他式II化合物。這些化合物的特性資料總結(jié)在下表3中，包括LC/MS，HPLC和1H NMR數(shù)據(jù)。
對于HPLC方法指定為“A”的化合物，采用以下方法水∶MeCN，0.1％TFA(95∶5→0∶100)梯度洗脫22分鐘，在1mL/分鐘和214nm下進(jìn)行。對于HPLC方法指定為“B”的化合物，采用以下方法水∶MeCN，0.1％TFA(90∶10→0∶100)梯度洗脫8分鐘，在1mL/分鐘和214nm下進(jìn)行。方法A和B各自使用大小為3.0×150mm的YMC ODS-AQ 55 120A柱。術(shù)語“Tret(分鐘)”指的是使用指定HPLC方法得到的化合物的保留時間，以分鐘計。
合適時，1H NMR數(shù)據(jù)也總結(jié)在下表3中，其中“Y”表示可以獲得1H NMR數(shù)據(jù)并且該數(shù)據(jù)與結(jié)構(gòu)一致?；衔锞幪枌?yīng)于表1中所列的化合物編號。表3.選定化合物的特性資料
實施例6ERK抑制測定通過分光光度偶聯(lián)酶測定法(Fox等(1998)《蛋白質(zhì)科學(xué)》7，2249)測定化合物對ERK2的抑制。在該測定中，固定濃度的活化ERK2(10mM)與在DMSO(2.5％)中的不同濃度的化合物一起在30℃下在含有10mM MgCl2、2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、200μM NADH、150μg/mL丙酮酸激酶、50μg/mL乳酸脫氫酶和200μM erktide肽的0.1M HPEPS緩沖液，pH7.5中培養(yǎng)10分鐘。監(jiān)測在340nm下的吸光度的下降率。從該數(shù)據(jù)作為抑制劑濃度的函數(shù)來評估IC50。
表4顯示了在ERK2抑制測定中選定的本發(fā)明化合物的活性結(jié)果?；衔锞幪枌?yīng)于表1中的化合物編號。具有指定為“A”的活性的化合物提供1微摩爾以下的Ki值；具有指定為“B”的活性的化合物提供1至5微摩爾之間的Ki值；具有指定為“C”的活性的化合物提供大于5微摩爾的Ki值。表4.選定化合物的ERK2抑制活性
實施例7ERK抑制細(xì)胞增殖測定利用細(xì)胞增殖測定法測定化合物對ERK2的抑制。在該測定中，完全培養(yǎng)基通過向RPMI 1640培養(yǎng)基(JRH Biosciences)中加入10％胎牛血清和青霉素/鏈霉素溶液來制備。將結(jié)腸癌細(xì)胞(HT-29細(xì)胞系)加入到96孔平板的84個孔中，種植密度為10,000細(xì)胞/孔/150μL。通過在37℃下培養(yǎng)2小時使細(xì)胞附著到平板上。用完全培養(yǎng)基制備測試化合物的溶液，通過系列稀釋得到以下濃度20μM、6.7μM、2.2μM、0.74μM、0.25μM和0.08μM。將測試化合物溶液(50μL)加入到含有細(xì)胞的72個孔中。向其余的12個含有細(xì)胞的孔中僅加入完全培養(yǎng)基(200μL)構(gòu)成對照組，以測量最大增殖。向剩余的12個空白孔中加入完全培養(yǎng)基構(gòu)成載體對照組，以測量背景底數(shù)。平板在37℃下培養(yǎng)3天。將3H-胸苷儲備溶液(1mCi/mL，NewEngland Nuclear，Boston，MA)用RPMI培養(yǎng)基稀釋到20μCi/mL，然后將20μL該溶液加入到各個孔中。平板在37℃下再培養(yǎng)8小時，然后收獲并使用液體閃爍計數(shù)器分析3H-胸苷攝取。
在結(jié)腸細(xì)胞增殖測定中抑制ERK并具有小于10μM的IC50的選定的本發(fā)明化合物包括II-43、II-48和II-45。
實施例8JAK抑制測定化合物對JAK的抑制可以利用G.R.Brown等在《Bioorg.Med.Chem.Lett.》2000年，第10卷，575-579頁中描述的方法用以下方式測定。向先前在4℃下用Poly(Glu，Ala，Tyr)6∶3∶1涂敷然后用磷酸緩沖鹽水0.05％和吐溫(PBST)洗滌的Maxisorb平板中加入2μM ATP、5mM MgCl2和化合物的DMSO溶液。反應(yīng)用JAK酶開始，平板在30℃下培養(yǎng)60分鐘。然后這些平板用PBST洗滌，加入100μLHRP綴合4G10抗體，該平板在30℃下培養(yǎng)90分鐘。平板再次用PBST洗滌，加入100μL TMB溶液，然后這些平板在30℃下再培養(yǎng)30分鐘。加入硫酸(100μL，1M)終止反應(yīng)，平板在450nM下讀數(shù)，得到光學(xué)密度用于分析確定IC50值。
實施例9JNK抑制測定用以下方式使用分光光度偶聯(lián)酶測定法就化合物抑制JNK的能力對化合物進(jìn)行篩選。向含有0.1M HPEPS緩沖液(pH7.5)、10mMMgCl2、2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、200μM NADH、150μg/mL丙酮酸激酶、50μg/mL乳酸脫氫酶和200μM EGF受體肽(具有序列KRELVEPLTPSGEAPNQALLR)的測定儲備緩沖溶液中加入化合物的不同濃度的DMSO溶液和固定濃度(10nM)的活化JNK。所得混合物在30℃下培養(yǎng)10分鐘，然后通過加入10μM ATP引發(fā)反應(yīng)。在30℃下在340nM下的吸光度的下降作為時間的函數(shù)加以監(jiān)測，使所得數(shù)據(jù)與競爭性抑制動力學(xué)模型相配合來確定Ki。
表5顯示了在JNK抑制測定中選定的本發(fā)明化合物的活性結(jié)果?；衔锞幪枌?yīng)于表1中的化合物編號。具有指定為“A”的活性的化合物提供1微摩爾以下的Ki值；具有指定為“B”的活性的化合物提供1至5微摩爾之間的Ki值；具有指定為“C”的活性的化合物提供大于5微摩爾的Ki值。
表5.選定化合物的JNK抑制活性
實施例10Aurora抑制測定用以下方式使用標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)酶測定法就化合物抑制Aurora的能力對化合物進(jìn)行篩選。向含有0.1M HPEPS，pH7.5、10mM MgCl2、25mMNaCl、2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μg/mL丙酮酸激酶、10μg/mL乳酸脫氫酶、40μM ATP和800μM肽(LRRASLG，AmericanPeptide，Sunnyvale，CA)的測定儲備緩沖溶液中加入30μM化合物的DMSO溶液，所得混合物在30℃下培養(yǎng)10分鐘。通過加入10μL70nM Aurora和1mM DTT引發(fā)反應(yīng)。在30℃下使用BioRad Ultramark平板讀數(shù)器(Hercules，CA)在5分鐘讀數(shù)時間里監(jiān)測340nM下的吸光度而得到反應(yīng)率。從該數(shù)據(jù)作為抑制濃度的函數(shù)來確定IC50。
表6顯示了在Aurora2抑制測定中選定的本發(fā)明化合物的活性結(jié)果?；衔锞幪枌?yīng)于表1中的化合物編號。具有指定為“A”的活性的化合物提供5微摩爾以下的IC50值；具有指定為“B”的活性的化合物提供5至10微摩爾之間的IC50值；具有指定為“C”的活性的化合物提供大于10微摩爾的IC50值。
表6.選定化合物的Aurora2抑制活性
實施例11GSK-3抑制測定用以下方式使用標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)酶測定法(Fox等(1998)《蛋白質(zhì)科學(xué)》7，2249)就化合物抑制糖原合成酶激酶3(GSK-3)的能力對化合物進(jìn)行篩選。向含有0.1M HPEPS，pH7.5、10mM MgCl2、25mM NaCl、2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、1mM DTT、30μg/mL丙酮酸激酶、10μg/mL乳酸脫氫酶、300μM肽(HSSPHQp-SEDEEE，AmericanPeptide，Sunnyvale，CA)和60nM GSK-3的測定儲備緩沖溶液中加入30μM化合物的DMSO溶液，所得混合物在30℃下培養(yǎng)5分鐘。通過加入10μL ATP引發(fā)反應(yīng)。在30℃下使用Molecular Devices平板讀數(shù)器(Sunnyvale，CA)在5分鐘讀數(shù)時間里監(jiān)測340nM下的吸光度而得到反應(yīng)率。從該數(shù)據(jù)作為抑制濃度的函數(shù)來確定IC50。
表7顯示了在GSK-3抑制測定中選定的本發(fā)明化合物的活性結(jié)果?；衔锞幪枌?yīng)于表1中的化合物編號。具有指定為“A”的活性的化合物提供10微摩爾以下的IC50值；具有指定為“B”的活性的化合物提供10至20微摩爾之間的IC50值；具有指定為“C”的活性的化合物提供大于20微摩爾的IC50值。
表7.選定化合物的GSK-3抑制活性
實施例12KDR抑制測定使用標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)酶測定法(Fox等，《蛋白質(zhì)科學(xué)》，(1998)7，2249)就化合物抑制KDR的能力對化合物進(jìn)行篩選。測定在200mMHPEPS，pH7.5、10mM MgCl2、25mM NaCl、1mM DTT和1.5％DMSO的混合物中進(jìn)行。測定中的終底物濃度為300μM ATP(SigmaChemicals)和10μM聚E4Y(Sigma)。測定在37℃和30nM KDR下進(jìn)行。偶聯(lián)酶系統(tǒng)各成分的終濃度為2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、200μM NADH、30μg/mL丙酮酸激酶和10μg/mL乳酸脫氫酶。
制備含有上列所有試劑但不含ATP和測試化合物的測定儲備緩沖溶液。將177μL該儲備溶液置于96孔平板中，接著加入3μl含有測試化合物(化合物終濃度為30μM)的2mM DMSO儲備液。平板在37℃下預(yù)培養(yǎng)約10分鐘，反應(yīng)通過加入20μl ATP(終濃度300μM)引發(fā)。使用Molecular Devices平板讀數(shù)器(Sunnyvale，CA)在5分鐘讀數(shù)時間里在37℃下得到反應(yīng)率。對與含有測定混合物和DMSO但不含測試化合物的標(biāo)準(zhǔn)孔相比顯示大于50％抑制的化合物進(jìn)行滴定，以確定IC50值。
在上述測定中在2μM濃度下抑制KDR并具有大于40％的抑制百分?jǐn)?shù)的選定的本發(fā)明化合物包括II-43、II-48、II-304和II-305。
實施例13AKT抑制測定使用標(biāo)準(zhǔn)偶聯(lián)酶測定法(Fox等，《蛋白質(zhì)科學(xué)》，(1998)7，2249)就化合物抑制AKT的能力對化合物進(jìn)行篩選。測定在100mMHPEPS，pH7.5、10mM MgCl2、25mM NaCl、1mM DTT和1.5％DMSO的混合物中進(jìn)行。測定中的終底物濃度為170μM ATP(SigmaChemicals)和200μM肽(RPRAATF，American Peptide，Sunnyvale，CA)。測定在37℃和45nM AKT下進(jìn)行。偶聯(lián)酶系統(tǒng)各成分的終濃度為2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μg/mL丙酮酸激酶和10μg/mL乳酸脫氫酶。
制備含有上列所有試劑但不含AKT、DTT和測試化合物的測定儲備緩沖溶液。將56μL該儲備溶液置于384孔平板中，接著加入1μl含有測試化合物(化合物終濃度為30μM)的2mM DMSO儲備液。平板在30℃下預(yù)培養(yǎng)約10分鐘，反應(yīng)通過加入10μl酶(終濃度45nM)和1mM DTT引發(fā)。使用BioRad Ultramark平板讀數(shù)器(Hercules，CA)在5分鐘讀數(shù)時間里在30℃下得到反應(yīng)率。對與含有測定混合物和DMSO但不含測試化合物的標(biāo)準(zhǔn)孔相比顯示大于50％抑制的化合物進(jìn)行滴定，以確定IC50值。
抑制AKT的選定的本發(fā)明化合物包括II-89、II-94和II-305。
雖然我們已描述了本發(fā)明的許多實施方案，但很明顯，我們的基本實施例可以加以改變得到使用本發(fā)明化合物和方法的其他實施方案。因此，應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會本發(fā)明的范圍將由所附的權(quán)利要求書而不是已利用實施例進(jìn)行表述的具體實施方案確定。
權(quán)利要求
1.式I化合物 或其藥學(xué)上可接受的衍生物或藥物前體，其中R1選自R、鹵素、N(R8)2、OR、NRCOR、NRCON(R8)2、CON(R8)2、SO2R、NRSO2R或SO2N(R8)2；T選自價鍵或連接基；R各自獨立地選自氫或具有1至6個碳的可選取代的脂族基；R2選自氫、CN、鹵素、芳基、芳烷基、雜芳基、雜環(huán)基、具有1至6個碳的可選取代的無環(huán)脂族鏈基、或具有4至10個碳的可選取代的環(huán)脂族基；R3選自R、OH、OR、N(R8)2、鹵素或CN；Q是價鍵、J、或可選取代的C1-6亞烷基鏈，其中該亞烷基鏈的最多兩個非相鄰碳各自可選地并獨立地被J取代；J選自-C(＝O)-、-CO2-、-C(O)C(O)-、-NRCONR8-、-N(R)N(R8)-、-C(＝O)NR8-、-NRC(＝O)-、-O-、-S-、-SO-、-SO2-、-N(R)O-、-ON(R8)-、-OC(＝O)N(R8)-、-N(R)COO-、-SO2N(R8)-、-N(R)SO2-或-N(R8)-；R4選自-R8、-R5、-NH2、-NHR5、-N(R5)2或-NR5(CH2)yN(R5)2；R5各自獨立地選自R6、R7、-(CH2)yCH(R6)(R7)、-(CH2)yR6、-(CH2)yCH(R6)2、-(CH2)yCH(R7)2或-(CH2)yR7；y是0-6；R6各自是可選取代的基團(tuán)，獨立地選自脂族基、芳基、芳烷基、芳烷氧基、雜芳基、雜芳基烷基、雜芳基烷氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基或雜環(huán)基烷氧基；R7各自獨立地選自可選取代的脂族基、羥基烷基、烷氧基烷基、芳氧基烷基或烷氧基羰基；R8各自獨立地選自R，或者同一氮上的兩個R8與氮一起可選地構(gòu)成具有1至3個雜原子的4至8元飽和或不飽和雜環(huán)；并且各個可取代的環(huán)氮可選地被R、NR2、COR、CO2(C1-C6可選取代的烷基)、SO2(C1-C6可選取代的烷基)、CONR2和SO2NR2取代；條件是當(dāng)R1和R3各自為氫和當(dāng)TR2是附著在吡唑環(huán)4位上的未取代苯環(huán)時QR4不是CON(CH3)2。
2.具有結(jié)構(gòu)式II的按照權(quán)利要求1的化合物 或其藥學(xué)上可接受的衍生物或藥物前體。
3.具有一項或多項以下特征的按照權(quán)利要求2的化合物(a)Q是-CO-、-CO2-或-CONH-；(b)T是價鍵；(c)R1是氫或NHR；(d)R2是可選取代的芳環(huán)；(c)R3是氫；(e)R4選自R5、-NHR5、-N(R5)2、-NR5R6、-NHCHR5R6、或-NHCH2R5；或(f)R5是可選取代的基團(tuán)，選自芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、(CH2)yR6、(CH2)yR7、或(CH2)yCH(R6)(R7)。
4.具有式II-A的按照權(quán)利要求3的化合物 或其藥學(xué)上可接受的衍生物或藥物前體。
5.具有以下特征的按照權(quán)利要求4的化合物(a)T是價鍵；(b)R2是可選取代的芳環(huán)；(c)R4選自R5、-NHR5、-N(R5)2、-NR5R6、-NHCHR5R6、或-NHCH2R5；和(d)R5是可選取代的基團(tuán)，選自芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、(CH2)yR6、(CH2)yR7、或(CH2)yCH(R6)(R7)。
6.按照權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物選自表1中列出的那些，所述化合物不是編號1化合物。
7.具有式II-B的按照權(quán)利要求1的化合物 或其藥學(xué)上可接受的衍生物或藥物前體。
8.按照權(quán)利要求7的化合物，其中所述化合物具有一項或多項以下特征(a)T是價鍵；(b)R2是可選取代的芳環(huán)；(c)R4選自R5、-NHR5、-N(R5)2、-NR5R5、-NHCHR5R6、或-NHCH2R5；或(d)R5是可選取代的基團(tuán)，選自芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、(CH2)yR6、(CH2)yR7、或(CH2)yCH(R6)(R7)。
9.按照權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物選自表2中列出的那些。
10.包含足以可檢測地抑制蛋白激酶活性量的權(quán)利要求1-9任一項所述的化合物和藥學(xué)上可接受的載體的組合物，所述蛋白激酶選自ERK、JAK、JNK、Aurora、GSK、KDR、AKT或與此相關(guān)的蛋白激酶中的一個或多個。
11.按照權(quán)利要求10的組合物，其中所述化合物以藥學(xué)上可接受的方式配制成用于對病人給藥。
12.按照權(quán)利要求11的組合物，它進(jìn)一步包含或者作為與所述化合物一起的多劑形式的一部分或者作為分離的劑型的治療劑。
13.抑制生物學(xué)樣品中蛋白激酶活性的方法，其中所述蛋白激酶選自ERK、JAK、JNK、Aurora、GSK、KDR、AKT或與此相關(guān)的蛋白激酶，該方法包括使所述樣品與按照權(quán)利要求1-9任一項的化合物接觸的步驟。
14.治療病人的蛋白激酶介導(dǎo)的疾病狀態(tài)的方法，其中所述蛋白激酶選自ERK、JAK、JNK、Aurora、KDR、AKT或與此相關(guān)的蛋白激酶中的一個或多個，該方法包括對所述病人給藥按照權(quán)利要求11的組合物的步驟。
15.按照權(quán)利要求14的方法，還包括另外的對所述病人給藥或者作為與所述化合物一起的多劑形式的一部分或者作為分離的劑型的治療劑的步驟。
16.治療病人的疾病狀態(tài)的方法，其中所述疾病狀態(tài)選自癌、中風(fēng)、糖尿病、肝腫大、心血管疾病、早老性癡呆、囊纖維變性、病毒疾病、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化、再狹窄、牛皮癬、變應(yīng)性疾病、炎癥、神經(jīng)病學(xué)疾病、與激素相關(guān)的疾病、與器官移植有關(guān)的疾病、免疫缺陷疾病、破壞性骨疾病、增殖性疾病、傳染病、涉及細(xì)胞死亡的疾病、凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集、慢性骨髓性白血病(CML)、肝臟疾病、牽涉T細(xì)胞活化的病理性免疫疾病或CNS疾病，該方法包括對所述病人給藥按照權(quán)利要求10的組合物的步驟。
17.按照權(quán)利要求16的方法，其中疾病狀態(tài)是癌。
18.按照權(quán)利要求17的方法，其中疾病狀態(tài)是選自下列種類的癌乳癌、卵巢癌、宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、胃癌、皮膚癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮樣癌、大細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌、肺腺癌、骨癌、結(jié)腸癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲狀腺癌、濾泡癌、未分化癌、乳頭狀癌、精原細(xì)胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽道癌、腎癌、骨髓疾病、淋巴樣疾病、何杰金氏病、毛細(xì)胞、口腔前庭和咽(口腔)癌、唇癌、舌癌、口腔癌、咽癌、小腸癌、結(jié)腸-直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦癌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌，或白血病。
19.按照權(quán)利要求17或18的方法，還包括另外的對所述病人給藥或者作為與所述化合物一起的多劑形式的一部分或者作為分離的劑型的化學(xué)治療劑的步驟。
20.按照權(quán)利要求16的方法，其中疾病狀態(tài)是心血管疾病。
21.按照權(quán)利要求20的方法，其中疾病狀態(tài)是選自再狹窄、心肥大、動脈粥樣硬化、心肌梗死或充血性心力衰竭的心血管疾病。
22.按照權(quán)利要求20或21的方法，還包括另外的對所述病人給藥或者作為與所述化合物一起的多劑形式的一部分或者作為分離的劑型的用于治療心血管疾病的治療劑的步驟。
23.一種用于涂敷可植入裝置的組合物，它包含按照權(quán)利要求1的化合物和適于涂敷所述可植入裝置的載體。
24.一種用按照權(quán)利要求23的組合物包衣的可植入裝置。
全文摘要
本發(fā)明公開了用作蛋白激酶抑制劑的式(I)化合物,其中R
文檔編號C07D231/38GK1362953SQ01800374
公開日2002年8月7日 申請日期2001年2月5日 優(yōu)先權(quán)日2000年2月5日
發(fā)明者J·格林, J·曹, M·黑爾, C·貝克爾, F·瑪爾泰斯, J·珍尼特卡, M·穆里肯, G·比米斯, X·謝, J·斯特勞布, Q·唐, R·馬歇爾 申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司