專利名稱：用作髓過氧化物酶抑制劑的2-硫代黃嘌呤衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的硫代黃嘌呤衍生物，含有它們的組合物以及它們在治 療中的用途。
背景技術(shù)：
髓過氧化物酶(MPO)是主要在多形核白細胞(PMNs)中發(fā)現(xiàn)的含血紅素 的酶。MPO是哺乳動物過氧化物酶的不同蛋白質(zhì)家族的成員之一，還包括 嗜酸性粒細胞過氧化物酶、曱狀腺過氧化物酶、唾液過氧化物酶、乳過氧 化物酶、前列腺素H合酶等。成熟酶是相同半分子的二聚體。每個半分子 含有共價結(jié)合的血紅素，其顯示出與MPO的特征綠色有關(guān)的不尋常光譜性 質(zhì)。連接MPO的兩個半分子的二辟^化物橋斷裂，得到半酶(hemi-enzyme), 其顯示與完整酶不可分辨的光i普和催化性質(zhì)。酶使用過氧化氫以將氯化物 氧化為次氯酸。其它鹵化物和類鹵化物(pseudohalide)(如硫氰酸酯)也是MPO 的生理學(xué)底物。
PMNs對于對抗感染是尤其重要的。這些細胞含有MPO，具有文獻充 分證明的殺菌作用。PMNs通過吞噬作用非特異性地作用以吞沒微生物，將 它們結(jié)合至稱為吞噬體的液泡中，這些液泡與含有髓過氧化物酶的顆粒融 合以形成吞嗟溶酶體。在吞喧溶酶體中，髓過氧化物酶的酶活性導(dǎo)致形成 次氯酸，其是一種有效的殺菌化合物。次氯酸自身氧化，并且與硫醇和硫 醚發(fā)生最急切的反應(yīng)，而且將胺轉(zhuǎn)化為氯胺并且使芳族氨基酸氯化。巨噬 細胞是大的吞噬細胞，如同PMNs,其能夠吞噬微生物。巨噬細胞可產(chǎn)生過 氧化氫，并且活化時還產(chǎn)生髓過氧化物酶。MPO和過氧化氫還可被釋放至 細胞的外部，在那里與氯化物反應(yīng)，可導(dǎo)致?lián)p害鄰近組織。
髓過氧化物酶活性與疾病的聯(lián)系已經(jīng)牽涉在帶有神經(jīng)炎性響應(yīng)的神經(jīng) 疾病中，所述疾病包括多發(fā)性硬化、阿爾茨海默氏病、帕金森病和中風(fēng)以 及其它炎性疾病或病癥，如哮喘、慢性阻塞性肺病、嚢性纖維化、動脈粥 沖羊石更化、缺血性心臟病(ischemic heart disease)、心力衰竭、炎癥性腸病
5(inflammatory bowel disease)、 腎小球損害(renal glomerular damage)和類風(fēng)濕 性關(guān)節(jié)炎。肺癌也被認為與高MPO水平有關(guān)。
MPO陽性細胞大量存在于循環(huán)中和經(jīng)受炎癥的組織中。更具體地說， 已經(jīng)文獻記載了含MPO的巨噬細胞和小膠質(zhì)細胞在疾病期間存在于CNS 中多發(fā)性硬化(Nagra RM, et al. Journal of Neuroimmunology 1997; 78(l-2):97-107)、 帕金森病 (Choi D-K. et al. J. Neurosci. 2005; 25(28):6594-600)和阿爾茨海默氏病 (Green PS. et al. Journal of Neurochemistry. 2004; 90(3):724-33)。據(jù)推測，'f曼性不間斷性炎癥的某些方面 導(dǎo)致壓倒性破壞，其中來自MPO反應(yīng)的藥劑具有重要的作用。
所述酶被釋放到細胞外，以及釋放到嗜中性白細胞中的吞噬溶酶體中 (Hampton MB， Kettle AJ， Winterboum CC. Blood 1998; 92(9):3007-17)。 MPO 活性的前提是存在過氧化氬，其由NADPH氧化酶以及隨后的超氧化物歧化 作用生成。被氧化的酶能夠使用大量不同的氯化物被充分識別的底物。從 該反應(yīng)中，形成了強非自由基氧化劑-次氯酸(HOCl)。 HOCl非常有效地氧 化含硫的氨基酸如半胱氨酸和甲硫氨酸(Peskin AV, Winterboum CC. Free Radical Biology and Medicine 2001; 30(5):572-9)。次氯酸還與存在于蛋白質(zhì) 和其它生物分子中的氨基形成氯胺(Peskin AV, et al. Free Radical Biology and Medicine 2004; 37(10):1622-30)。它使酚類(如酪氨酸)氯化(Hazen SL. et al. Mass Free Radical Biology and Medicine 1997; 23(6):909-16)以及4吏脂質(zhì)中的 不飽和鍵氧化(Albert CJ. et al. J. Biol. Chem. 2001; 276(26):23733-41)，使鐵中 心氧化(Rosen H， Klebanoff SJ. Journal of Biological Chemistry 1982; 257(22):13731-354)并且使蛋白交聯(lián)(Fu X, Mueller DM， Heinecke JW. Biochemistry 2002; 41(4):1293畫301)。
蛋白水解級聯(lián)(Proteolytic cascades)不僅參與細胞經(jīng)過BBB的浸潤(cell infiltration through the BBB)，而且參與BBB、髓鞘質(zhì)和神經(jīng)細胞的破壞 (Cuzner ML, Opdenakker G. Journal of Neuroimmunology 1999; 94(1-2):1-14; Yong VW. et al. Nature Reviews Neuroscience 2001; 2(7):502-ll.)?；|(zhì)金屬蛋 白酶(MMPs)的激活可以通過級聯(lián)中上游蛋白酶的作用以及通過二硫鍵的氧 化來實現(xiàn)(Fu X. et al. J. Biol. Chem. 2001; 276(44):41279陽87; Gu Z. et al.Science 2002; 297(5584): 1186-卯)。這種氧化作用可以是亞硝基化作用或 HOCl-介導(dǎo)的氧化作用。兩種反應(yīng)可以是MPO活性的結(jié)果。 一些才艮道已經(jīng) 提出了 ，普通的MMP，s,具體的是MMP-9在MS和EAE中影響細胞浸潤 以及組織損傷(BBB破壞和脫髓鞘作用)的作用(參見上文Yong VW. et al)。 MS中這些特定類型的機理的重要性來自在MS腦組織和CSF中已經(jīng)鑒別出 蛋白酶活性增加和存在的研究。通過利用缺乏涉及參與MS病理學(xué)中的某些 蛋白酶的小鼠進行EAE研究，也產(chǎn)生了支持性的數(shù)據(jù)，或者使用藥理學(xué)方 法產(chǎn)生了支持性數(shù)據(jù)。
脫髓鞘作用被認為是取決于細胞毒性T-細胞并且由激活的吞噬細胞所 生成的有毒產(chǎn)物(Lassmann H. J Neurol Neurosurg Psychiatry 2003; 74(6):695-7)。因此，軸突損失受蛋白酶和活性氧和氮中間體的影響。當(dāng)存 在MPO時，它顯然具有激活蛋白酶(直接激活和通過影響蛋白酶抑制劑的 抑制解除作用而激活)和生成活性物種的能力。
度#膽JV^^病(T
慢性阻塞性肺病(COPD)是一種疾病狀態(tài)，其特征為不是完全可逆的氣 流受限(airflow limitation)。所述氣流受限通常是進行性的并且與肺對無毒顆 ?；驓怏w的異常炎癥反應(yīng)有關(guān)。COPD成為一種嚴重的公眾健康問題。在美 國，它是慢性發(fā)病和死亡的第四位主導(dǎo)病因，而且預(yù)計在2020年它世界級 疾病負擔(dān)中排第五位。在英國，COPD的發(fā)病率為男性1.7%,女性1.4%。 COPD疾病的嚴重程度從輕度到非常嚴重，隨嚴重程度增加，其治療成本迅 速上升。
與正常不吸煙的對照者相比，COPD患者中唾液和BAL的MPO水平 要高4艮多(Keatings V.M.， Barnes P丄 Am J Respir Crit Care Med 1997;155:449-453; Pesci, A. et al. Eur Respir J 1998;12:380-386)。 MPO水平在 該疾病惡4匕期間進一步增力口(Fiorini G. et al. Biomedicine & Pharmacotherapy 2000; 54:274-278; Crooks S.W. et al. European Respiratory Journal. 15(2):274-80， 2000)。 MPO的作用4艮可能在COPD惡化時變得更為重要 (Sharon S.D. et al. Am J Respir Crit Care Med. 2001;163:349-355)。
除MPO的破壞性性能外，還存在與血管病有關(guān)的強臨床聯(lián)系(Baldus S. et al. Circulation 2003;108:1440-5)。功能異常的MPO多型現(xiàn)象與冠狀動脈病死亡率的危險降低有關(guān)(NikpoorB. et al. Am Heart J 2001; 142:336)，高MPO 血清水平的患者患急性冠狀動脈綜合征的危險增加。MPO對血管病的作用 可以延伸至COPD，因為存在強有力證據(jù)表明，肺脈管系統(tǒng)是與吸煙者肺中 牽涉的最早部位之一。對肺動脈內(nèi)膜中驚人的變化已進行了描述，這表明 了與吸煙的劑量關(guān)系(Hale K.A., Niewoehner D.E.， Cosio M.G. Am Rev Resp Dis 1980;122:273-8)。 MPO的生理功能與先天宿主防;卿有關(guān)。然而，如同 MPO缺乏的患者具有相對良性癥狀的大多數(shù)情況一樣，這種作用并不是關(guān) 鍵性的(Parry M.F. et al. Ann Int Med. 1981; 95:293-301， Yang， K.D., Hill， H.R. PediatrlnfectDis J. 2001 ;20: 889-900)?？傊?，存在大量證據(jù)表明，COPD患 者中MPO水平增加可以通過一些機理促成該疾病。因此，MPO的選4奪性 抑制劑被期望用于減輕COPD的急性和慢性炎性方面并可以減少肺氣腫的 形成。
娜《沐硬/A
易損性，并因此降低急性心肌梗塞、不穩(wěn)定性心絞痛或中風(fēng)的危險，以及 減小急性冠狀動脈綜合征和缺血性腦血管事件期間的缺血/再灌注損傷。一 系列數(shù)據(jù)支持MPO在動脈粥樣硬化中的作用。MPO在人動脈粥樣硬化損 傷的肩部區(qū)域和壞死核中表達，已經(jīng)從人損傷的尸體解剖樣品中分離得到 活性酶(Daugherty， A. et al.(1994)J Clin Invest 94(1): 437-44)。在腐爛和破裂的 人損傷中，與脂肪條紋相比，表達巨噬細胞的MPO數(shù)目增加已經(jīng)得到了證 明，表明MPO在急性冠狀動脈綜合征中的特定作用(Sugiyama， S. et al.(2001)Am J Pathol 158(3): 879-91)。與健康的對照組相比，確診患冠狀動 脈病的患者具有更高的血漿和白細胞MPO水平(Zhang， R. et al.(2001)Jama 286(17): 2136-42)。此外，在兩種大的預(yù)期研究中，MPO的血漿水平預(yù)測未 來冠狀動脈發(fā)作或血管再形成的危險(Baldus, S. et al.(2003)Circulation 108(12): 1440-5; Brennan， M. et al.(2003) N Engl J Med 349(17): 1595-604)。人 體中總MPO缺乏的患病率為2000-4000個個體中存在一個病例。這些個 體看上去大體上是健康的，但是少數(shù)情況下報道了有嚴重的念珠菌屬感染 (Candida infection)。有趣地是，與具有正常MPO水平的對照組相比，MPO 缺乏的患者較少受心血管疾病的影響(Kutter, D. et al.(2000)Acta Haematol104(1))。 MPO啟動子的多型現(xiàn)象影響表達，從而導(dǎo)致高和低MPO表達的 個體。在三種不同的研究中，高表達基因型與心血管疾病危險增加有關(guān) (Nikpoor, B. et al.(2001)Am Heart J 142(2): 336-9; Makela, R.， P. J. Karhunen， et al.(2003)Lab Invest 83(7): 919-25; Asselbergs, F. W.， et al.(2004)Am J Med 116(6): 429-30)。在最近十年累積的數(shù)據(jù)表明，MPO的促致動脈粥樣化作用 (proatherogenic actions)包括氧化脂蛋白、通過消庫毛氧化氮誘導(dǎo)內(nèi)皮功能障礙 以及通過激活蛋白酶使動脈粥樣硬化損傷脫穩(wěn)定(Nicholls， S. J. and S. L. Hazen(2005)Arterioscler Thromb Vase Biol 25(6): 1102-11)。最近， 一些研究 已經(jīng)集中在LDL和HDL脂蛋白的硝基-和氯酪氨酸修飾。由于體內(nèi)氯酪氨 酸修飾僅僅可以通過由MPO產(chǎn)生的次氯酸生成，所以這些修飾被認為是 MPO活性的特異性標(biāo)記(Hazen, S. L. and J. W. Heinecke(1997)J Clin Invest 99(9): 2075-81)。體外暴露于MPO的LDL顆粒變成聚集的，導(dǎo)致促進通過 巨噬細胞消除劑受體攝取和泡沫細胞形成(Hazell, L. J. and R. Stocker(1993)Biochem J 290(Pt 1): 165-72)。 apoAl(HDL膽固醇的主要載脂蛋 白)的氯酪氨酸修飾，導(dǎo)致膽固醇受體功能受損(Bergt, C.， S. et al.(2004)Proc Natl Acad Sci USA; Zheng, L, et al.(2004)J Clin Invest 114(4): 529-41)。這些 機理的系統(tǒng)性研究已經(jīng)表明，MPO在血漿中與apoAl結(jié)合并移動。此外， MPO特異性地靶向apoAl的那些酪氨酸殘基，其在膽固醇從巨噬細胞流出 期間與巨噬細胞ABCA1盒轉(zhuǎn)運蛋白發(fā)生物理相互作用(Bergt， C. et al.(2004)J Biol Chem 279(9): 7856-66; Shao, B. et al.(2005)J Biol Chem 280(7): 5983-93; Zheng et al.(2005)J Biol Chem 280(1): 38-47)。因此，在動脈粥樣硬 化損傷中，MPO似乎具有雙重惡化作用，即通過LDL顆粒的凝集增加脂質(zhì) 積累，以及通過攻擊HDL蛋白apoAl減少反轉(zhuǎn)膽固醇轉(zhuǎn)運。
本發(fā)明披露了新的硫代黃嘌呤衍生物，其表現(xiàn)出作為酶MPO抑制劑的 有用性質(zhì)。此外，與已知的硫代黃嘌呤相比，本發(fā)明的新化合物還表現(xiàn)出 一種或多種以下特征(i)對TPO的選擇性得到改善；(ii)對PMO的抑制活 性意料不到地高；(iii)改善的腦透過性；(iv)改善的溶解度和/或(v)改善的半 衰期。這些已知的硫代黃嘌呤披露于，例如WO 03/089430和WO 05/037835 中。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了式(I)的化合物或其藥用鹽、溶劑化物或其鹽的溶劑化物
其中
R/選自CVC6烷基，以及所述d-C6烷基取代有d-C6烷氧基；
以及所述d-C6烷基或所述d-C6烷氧基中至少一個是支化的。
根據(jù)本發(fā)明的一個方面，R1定義中的d-C6烷基表示C2_4烷基。 根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案，所述烷基選自異丁基、乙基和丙基。 根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案，所述烷基取代有Cw烷氧基。 根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案，所述烷基取代有CV烷氧基。 根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案，所述烷基取代有Cr烷氧基。 根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案，所述烷基取代有丙氧基或異丙氧基。 本發(fā)明還涉及選自下列的化合物或其藥用鹽、溶劑化物或其鹽的溶劑 化物
3 -(2-乙氧基-2-曱基丙基)-2-硫代黃嘌呤； 3-(2-丙氧基-2-曱基丙基)-2-硫代黃嘌呤； 3-(2-甲氧基-2-曱基丙基)-2-硫代黃嘌呤； 3-(2-異丙氧基乙基)-2-硫代黃嘌呤； 3-(2-乙氧基丙基)-2-硫代黃嘌呤； 3-(2S-乙氧基丙基)-2-硫代黃嘌呤； 3-(2^-乙氧基丙基)-2-硫代黃嘌呤。
式(I)化合物可以以互變異構(gòu)體形式存在。所有這些互變異構(gòu)體及其互 變異構(gòu)體的混合物都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
式(I)化合物可以以對映異構(gòu)體形式存在。應(yīng)該理解，所有的對映異構(gòu) 體、非對映異構(gòu)體、外消旋體及其混合物都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
除非另有說明，本申請中涉及的術(shù)語"d-C6烷基"表示具有1-6個碳原 子的直鏈或者支鏈烷基。所述基團的實例包括曱基、乙基、正丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、戊基和己基。術(shù)語"CVC4烷基"類似地進行解釋。應(yīng) 該理解，當(dāng)烷基表示d或C2烷基時，所述烷基不能是支化的。
除非另有說明，本申請中涉及的術(shù)語"CVC6烷氧基"表示具有1-6個碳
原子的直鏈或者支鏈烷氧基。所述基團的實例包括曱氧基、乙氧基、1-丙氧
基、2-丙氧基、l-丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基和戊氧基。術(shù)語"d-C3烷氧
基"類似地進行解釋。應(yīng)該理解，當(dāng)烷氧基表示d或C2-烷氧基時，所述烷
氧基不能是支化的。本發(fā)明還涉及新的式(I)化合物或其藥用鹽作為藥物的用途。
本發(fā)明的另一方面為式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽的
溶劑化物在制備用于治療或預(yù)防對酶MPO的抑制是有益的疾病或病癥的藥 物中的用途。
本發(fā)明的另一方面提供式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽 的溶劑化物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療或預(yù)防神經(jīng)炎性疾病 (neuroinflammatory disorder)、 心月齒血管動樂:K粥才羊石更化疾病(cardio畫and cerebrovascular atherosclerotic disorders)、夕卜周動脈疾病(peripheral artery disease)、心力衰竭以及呼吸系統(tǒng)疾病如慢性阻塞性肺病(COPD)。
本發(fā)明的另一方面提供式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽 的溶劑化物在制備用于治療或預(yù)防多發(fā)性硬化的藥物中的用途。治療可以 包括減緩疾病的進展。
本發(fā)明的另一方面提供式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽 的溶劑化物在制備用于治療或預(yù)防帕金森病(Parkinson's disease)的藥物中 的用途。治療可以包括減纟爰疾病的進展。
本發(fā)明的另一方面提供式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽 的溶劑化物在制備藥物中的用途，所述藥物通過防止和/或減少新的動脈粥 樣硬化損傷或斑塊的形成和/或通過防止或減緩現(xiàn)有損傷和斑塊的進展來治 療或預(yù)防動脈粥樣^t/f匕。
本發(fā)明的另一方面提供式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽 的溶劑化物在制備藥物中的用途，所述藥物通過改變斑塊的組成以降低斑 塊破裂和動脈粥樣硬化血栓形成事件來治療或預(yù)防動脈粥樣硬化。
本發(fā)明的另一方面提供式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽 的溶劑化物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療或預(yù)防呼吸系統(tǒng)疾病，如慢性阻塞性肺病。治療可以包括減緩疾病的進展。
根據(jù)本發(fā)明，還提供了一種治療對酶MPO的抑制是有益的疾病或病癥 或降低所述疾病或病癥危險的方法，其包括將治療有效量的式(I)化合物， 或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽的溶劑化物給藥于患有所述疾病或病癥或 面臨所述疾病或病癥危險的人。
此外，本發(fā)明還提供一種在患有神經(jīng)炎性疾病、心腦血管動脈粥樣硬
化疾病或外周動脈疾病或呼吸系統(tǒng)疾病如慢性阻塞性肺病(COPD)或面臨所 述疾病或病癥危險的人中，治療所述疾病或降低所述疾病危險的方法，所 述方法包括將治療有效量的式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽 的溶劑化物給藥于人。
此外，本發(fā)明還提供在患有多發(fā)性硬化或面臨所述疾病或病癥危險的 人中治療所述疾病或病癥或降^^所述疾病或病癥危險的方法，所述方法包 括將治療有效量的式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽的溶劑化 物給藥于人。
此外，本發(fā)明還提供在患有帕金森病或面臨所述疾病或病癥危險的人
將治療有效量的式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽的溶劑化物 給藥于人。
本發(fā)明還提供在患有動脈粥樣硬化或面臨所述疾病或病癥危險的人
或減緩現(xiàn)有損傷和斑塊的進展，來治療動脈粥樣硬化或降低所述疾病或病 癥危險的方法，所述方法包括將治療有效量的式(I)化合物，或其藥用鹽、 溶劑化物，或其鹽的溶劑化物給藥于人。
本發(fā)明還提供在患有動脈粥樣硬化或面臨所述疾病或病癥危險的人 中，通過改變斑塊的組成以降低斑塊破裂和動脈粥樣硬化血栓形成事件的 危險，來治療動脈粥樣^硬化或降低所述疾病或病癥危險的方法，其中所述 方法包括將治療有效量的式(I)化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽的 溶劑化物給藥于人。
在另一方面中，本發(fā)明提供一種藥物制劑，其包含治療有效量的式(I) 化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽的溶劑化物，以及混合有藥用輔 料、稀釋劑或載體，該藥物制劑用于治療或預(yù)防對酶MPO的抑制是有益的
12疾病或病癥。
在另一方面中，本發(fā)明提供一種藥物制劑，其包含治療有效量的式(I) 化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽的溶劑化物，以及混合有藥用輔 料、稀釋劑或載體，該藥物制劑用于治療或預(yù)防神經(jīng)炎性疾病。
在另一方面中，本發(fā)明提供一種藥物制劑，其包含治療有效量的式(I) 化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽的溶劑化物，以及混合有藥用輔 料、稀釋劑或載體，該藥物制劑用于治療或預(yù)防多發(fā)性硬化、心腦血管動 脈粥樣硬化疾病、外周動脈疾病、心力衰竭，以及呼吸系統(tǒng)疾病如慢性阻 塞性肺病。
在另一方面中，本發(fā)明提供一種藥物制劑，其包含治療有效量的式(I) 化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽的溶劑化物，以及混合有藥用輔 料、稀釋劑或載體，該藥物制劑通過防止和/或減少新的動脈粥樣硬化的損 傷和/或斑塊的形成和/或通過防止或減緩現(xiàn)有損傷和斑塊的進展，從而治療 或預(yù)防動脈粥樣;更化。
在另一方面中，本發(fā)明提供一種藥物制劑，其包含治療有效量的式(I) 化合物，或其藥用鹽、溶劑化物，或其鹽的溶劑化物，以及混合有藥用輔 料、稀釋劑或載體，該藥物制劑通過改變斑塊的組成以降低斑塊破裂和動 脈粥樣硬化血栓形成事件的危險，從而治療或預(yù)防動脈粥樣硬化。
本發(fā)明還涉及對以下疾病的治療
神經(jīng)變性疾病，包括但不P艮于阿爾茲海默氏病(Alzheimer's Disease ， AD)、癡呆、精神分裂癥中的認知缺陷(Cognitive Deficit in Schizophrenia， CDS)、輕度認知缺損(Mild Cognitive Impairment, MCI)、年齡相關(guān)的記憶缺 損(Age-Associated Memory Impairment, AAMI)、 年齡相關(guān)的認知衰退 (Age-Related Cognitive Decline, ARCD)、非癡呆型認知缺損(Cognitive Impairement No Dementia, CIND)、多發(fā)性硬化、帕金森病(PD)、腦炎后帕 金森綜合征(postencephalitic parkinsonism)、 亨廷頓病(Huntington's Disease), 肌萎縮性側(cè)索硬化(amyotrophic lateral sclerosis, ALS)、運動神經(jīng)元病(motor neuron diseases, MND)、多系統(tǒng)萎縮癥(Multiple System Atrophy, MSA)、皮 質(zhì)基底變性(Corticobasal Degeneration)、進4亍性才亥上性輕癱(Progressive Supranuclear Paresis)、吉隱巴綜合4正(Guillain-Barr6 Syndrome, GBS)，以及'f曼 性炎性脫髓革肖性多神經(jīng)病(Chronic Inflammatory DemyelinatingPolyneuropathy, CIDP)。癡呆包括但不限于唐氏綜合征(Down syndrome)、 血管性癡呆、盧伊體癡呆(dementiawithLewybodies)、 HIV癡呆、帕金森型 額顳癡呆(Frontotemporal dementia Parkinson's Type, FTDP)、 皮克病(Pick's Disease)、尼-皮病(Niemann-Pick，s Disease)、創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)、拳擊員癡 呆(dementia pugilistica)、克-雅綜合征(Creutzfeld-Jacob Disease)和阮病毒病。 本發(fā)明還涉及對以下疾病的治療
神經(jīng)炎性疾病，包括但不限于多發(fā)性硬化(MS)、帕金森病、多系統(tǒng)萎 縮癥(MSA)、皮質(zhì)基底變性、進行性核上性輕癱、吉-巴綜合征(GBS)、慢性 炎性脫髓鞘性多神經(jīng)病(CIDP)。多發(fā)性硬化(MS)包括復(fù)發(fā)性間歇性多發(fā)性 硬化(Relapse Remitting Multiple sclerosis, RRMS)、繼發(fā)性進行性多發(fā)性硬 化(Secondary Progressive Multiple sclerosis, SPMS)以及原發(fā)性進行性多發(fā)性 硬化(Primary Progressive Multiple sclerosis, PPMS)。
本發(fā)明還涉及對以下疾病的治療
認知疾病包括但不限于
a) 癡呆，包括但不限于阿爾茲海默氏病、唐氏綜合征(Down syndrome)、 血管性癡呆、帕金森病(PD)、腦炎后帕金森綜合征、盧伊體癡呆、HIV癡呆、 亨廷頓病、肌萎縮性側(cè)索硬化、運動神經(jīng)元病、帕金森型額顳癡呆、進行 性核上性麻痹(progressive supranuclear palsy, PSP)、皮克病、尼陽皮病、皮質(zhì) 基底變性、創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)、拳擊員癡呆、克-雅綜合征和阮病毒??；
b) 精神分裂癥中的認知缺陷(CDS);
c) 輕度認知缺損(MCI);
d) 年齡相關(guān)的記憶缺損(AAMI);
e) 年齡相關(guān)的認知衰退(ARCD);
f) 非癡呆型認知缺損(CIND)。 本發(fā)明還涉及對以下疾病的治療
注意力缺陷和分裂性行為障礙(Disruptive Behavior Disorder)包括4旦不 限于注意力缺陷障礙(attention deficit disorder, ADD)、注意力缺陷多動癥 (attention deficit hyperactivity disorder, ADHD)和情感障礙。
本發(fā)明還涉及治療以下疾病和病癥，其可用本發(fā)明的化合物進4亍治療 呼吸道氣道阻塞性疾病，包括哮喘，包括支氣管哮喘、過敏性哮 喘、內(nèi)源性哮喘、外源性哮喘、運動誘發(fā)津喘、藥物誘發(fā)哮喘(包括阿司匹林和NSAID-誘發(fā)的)和粉塵誘發(fā)哞喘，間歇性的和持續(xù)性的，所有都是嚴重 度的；和其它原因的氣道高反應(yīng)性；慢性阻塞性肺病(COPD);支氣管炎， 包括傳染性支氣管炎和嗜酸性支氣管炎；肺氣腫；支氣管擴張；嚢性纖維 化；結(jié)節(jié)??；農(nóng)民肺和相關(guān)疾??；超敏感性肺炎；肺纖維化，包括隱原性 纖維化肺泡炎、特發(fā)性間質(zhì)性肺炎、并發(fā)抗腫瘤治療和慢性感染的纖維化， 包括結(jié)核病和喂鴒者病和其它真菌感染；肺移植并發(fā)癥；肺脈管系統(tǒng)血管 炎和血栓形成疾??；和肺動脈高壓；鎮(zhèn)咳活性，包括治療與氣道炎癥和分 泌情況相關(guān)的久嗽和醫(yī)源性咳嗽；急性和慢性鼻炎，包括藥物性鼻炎和血 管舒縮性鼻炎；全年性鼻炎和季節(jié)性過敏性鼻炎，包括神經(jīng)性鼻炎(花粉癥)； 鼻息肉?。患毙圆《靖腥?，包括感冒和因呼吸道合胞病毒、流行性感冒、 冠形病毒(包括SARS)和腺病毒引起的感染；
骨和關(guān)節(jié)與骨關(guān)節(jié)炎/骨關(guān)節(jié)病相關(guān)或包括骨關(guān)節(jié)炎/骨關(guān)節(jié)病的關(guān)節(jié) 炎，包括原發(fā)性和繼發(fā)性關(guān)節(jié)炎，例如先天性髖關(guān)節(jié)發(fā)育不良；頸和腰脊 推炎及腰背痛和頸部疼痛；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和斯蒂爾病(Still，s disease);血 清陰性脊柱關(guān)節(jié)病，包括強直性脊柱炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎 和未分化脊柱關(guān)節(jié)??；膿毒性關(guān)節(jié)炎和其它感染相關(guān)的關(guān)節(jié)病和骨疾病， 例如結(jié)核病，包括波特病(Potts， disease)和蓬塞綜合征(Poncet，s syndrome); 晶體誘發(fā)的急性和慢性滑膜炎，包括尿酸鹽沉積病、焦磷酸鈣沉積病和鈣 磷灰石相關(guān)的腱、粘液嚢和滑膜炎癥；貝切特病(Behcet，s disease);原發(fā)性 和繼發(fā)性斯耶格倫綜合征(Sjogren，s syndrome);全身性硬化和局限性硬皮 ??；系統(tǒng)性紅斑狼瘡、混合性結(jié)締組織病和未分化結(jié)締組織病；炎性肌病， 包括皮肌炎和多肌炎；風(fēng)濕性多肌痛；幼年型關(guān)節(jié)炎，包括分布在任何關(guān) 節(jié)的特發(fā)性炎性關(guān)節(jié)炎及相關(guān)綜合征和風(fēng)濕熱及其全身性并發(fā)癥；血管炎 (vasculitis),包括巨細胞性動脈炎、高安動脈炎(Takayasu，s arteritis)、丘-施 綜合征(Churg-Strauss syndrome)、結(jié)節(jié)性多動脈炎、顯微鏡性多動脈炎和與 病毒感染、超敏反應(yīng)、冷球蛋白和異蛋白相關(guān)的血管炎；腰背痛；家族性 地中海熱、穆-韋綜合征(Muckle-Wells syndrome)和家族性愛爾蘭熱(Familial Hibernian Fever)、菊池病(Kikuchi disease);藥物誘發(fā)性關(guān)節(jié)痛、腱炎和肌病。
本發(fā)明還涉及聯(lián)合治療，其中式(I)化合物或其藥用鹽或包含式(I)化合 物的藥物組合物或制劑，與用于治療心腦血管動脈粥樣硬化疾病和外周動 脈疾病中任一項治療和/或藥劑 一起同時或依次給藥。本發(fā)明包括式(I)化合物，并且還包括鹽形式的所述化合物。適宜的鹽 包括化合物與有機酸或無機酸形成的鹽或者化合物與有積J咸或無機堿形成 的鹽。這些鹽通常將是藥用鹽，但是非藥用酸或堿的鹽在制備和純化所述 化合物時可以是有用的。由此，酸加成鹽尤其包括化合物與鹽酸形成的鹽。 堿加成鹽包括陽離子尤其為鈉或鉀的那些鹽。
本發(fā)明的化合物及其中間體可從其反應(yīng)混合物中分離，并且必要時通 過采用標(biāo)準技術(shù)進一步純化。
式(I)化合物可以以對映異構(gòu)體形式存在。因此，所有的對映異構(gòu)體、 非對映異構(gòu)體、外消旋體、互變異構(gòu)體及其混合物都包括在本發(fā)明的范圍
內(nèi)。各種旋光異構(gòu)體可通過采用常規(guī)技術(shù)(例如分級結(jié)晶或HPLC)從化合物 的外消旋體混合物分離。或者，各種旋光異構(gòu)體可直接用旋光原料制備。
式(I)化合物和其藥用鹽是有用的，因為它們具有作為酶MPO抑制劑的 藥理學(xué)活性。
對于上述的治療適應(yīng)癥，給藥的劑量當(dāng)然將隨所使用的化合物、給藥 方式和所需的治療變化。然而，通常當(dāng)化合物以每天lmg-2000mg的固體形 式劑量給藥時，就獲得令人滿意的結(jié)果。
式(I)化合物和其藥用衍生物可以單獨使用或以合適藥物組合物的形式 使用，在組合物中，該化合物或衍生物與藥用輔料、賦形劑或載體混合。 因此，本發(fā)明的另 一方面涉及包含新的式(I)化合物或其藥用鹽以及混合有 藥用輔料、稀釋劑或載體的藥物組合物?？赏ㄟ^，但不限于，經(jīng)腸(包括經(jīng) 口、經(jīng)舌下或經(jīng)直腸)、經(jīng)鼻內(nèi)、吸入、靜脈內(nèi)、局部或其它腸胃外途徑來 給藥。選擇和制備合適藥物制劑的常規(guī)方法例如描述于"Pharmaceuticals-The Science of Dosage Form Designs", M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988 中。藥物組合物優(yōu)選含有低于80°/。，更優(yōu)選低于50%的式(1)化合物或其藥 用鹽。
本發(fā)明還提供了制備該藥物組合物的方法，其包括混合各成分。 式(I)化合物或其藥用鹽可以與下組中的一種或多種化合物一起給藥 1)抗炎藥，例如
a) NSAIDs(例如乙酰水楊酸、布洛芬、萘普生、氟比洛芬、雙氯芬酸、 吲哚美辛)；
b) 白細胞三烯合成抑制劑(5-LO抑制劑，例如AZD4407、棄留通、licofelone、 CJ13610、 CJ13454; FLAP抑制劑，例如BAY隱Y-1015、 DG-031、 MK591、 MK886、 A81834; LTA4水解酶抑制劑，例如SC56938、 SC57461A);
c)白細胞三烯受體拮抗劑(例如，CP 195543、阿美盧班(amelubant)、 LY293U1、扎魯司特(accolade)、 MK571);
2) 抗高血壓藥，例如
a) 卩-阻滯劑(例如美托洛爾、阿替洛爾、索他洛爾)；
b) 血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(例如卡托普利、雷米普利、唾那普利、依 那普利)；
c) 鈣通道阻滯劑(例如維拉帕米、地爾硫卓、非洛地平、氨氯地平)；
d) 血管緊張素II受體拮抗劑(例如依貝沙坦、坎地沙坦、替米沙坦 (telemisartan)、 氯沙坦)；
3) 抗;疑血劑，例如
a) 凝血酶抑制劑(例如美拉加群(ximelagatran))、肝素、凝血因子Xa抑
制劑；
b) 血小板聚集抑制劑(例如氯吡格雷(clopidrogrel)、噻氯匹定、prasugel、 AZ4160);
4) 脂類代謝調(diào)節(jié)劑，例如
a) 胰島素敏化劑如PPAR激動劑(例如匹格列酮、羅才各列酮、Galida、 muraglitazaar、 gefemrozil、 非諾貝特)；
b) HMG-CoA還原酶抑制劑，他汀類(例如辛伐他汀、帕伐他汀、阿托 伐他汀、羅蘇伐他汀、氟伐地汀)；
c) 膽固醇吸收抑制劑(例如依澤替米貝)；
d) IBAT抑制劑(例如，AZD-7806);
e) LXR激動劑(例如，GW-683965A， T-0901317);
f) FXR受體調(diào)節(jié)劑；
g) 磷脂酶抑制劑；
5) 抗心絞痛藥，例如，硝酸鹽和亞硝酸鹽；
6) 氧化應(yīng)激調(diào)節(jié)劑，例如，抗氧化劑(例如普羅布考,AGI 1067)。根據(jù)本發(fā)明，進一步提供了制備式(I)的化合物，或其藥用鹽、溶劑化 物、對映體、非對映體或外消旋體的方法，其中W如式(I)中所定義。
在下面對這些方法的描述中，應(yīng)當(dāng)理解，適當(dāng)?shù)臅r候，可按照有機合 成領(lǐng)域的普通技術(shù)人員容易理解的方式加入合適的保護基團，并隨后從各 種反應(yīng)物和中間體中除去保護基團。使用這些保護基團的常規(guī)操作以及合
適的保護基團的實例描述在，例如"Protective Groups in Organic Synthesis", T.W. Green, P.G.M. Wuts， Wiley隱Interscience, New York, (1999)中。也應(yīng)該理 解，通過化學(xué)操作可將一種基團或取代基轉(zhuǎn)化為另一種基團或取代基，這 種轉(zhuǎn)化可在最終產(chǎn)物的合成路徑上的任何中間體或最終產(chǎn)物上進行，其中 可能的轉(zhuǎn)化類型僅受限于在該階段分子所攜帶的其它官能團對轉(zhuǎn)化中所 使用的條件或試劑的內(nèi)在不相容性(inherent incompatibility)。這種內(nèi)在不相 容性以及通過以合適的順序進行適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)化和合成步驟以規(guī)避這些內(nèi)在不 相容性的方式，對有機合成領(lǐng)域的技術(shù)人員而言，是容易理解的。以下給 出轉(zhuǎn)化的實例，并且應(yīng)該理解的是，所述的轉(zhuǎn)化并非只限于示例為轉(zhuǎn)化的 通式基團(generic group)或取代基。其它合適轉(zhuǎn)化的引用和說明參見 "Comprehensive Organic Transformations- A Guide to Functional Group Preparations" R. C Larock， VHC Publishers, Inc. (1989)。有關(guān)其它合適反應(yīng)的 引用和說明描述在有機化學(xué)教科書，例如"Advanced Organic Chemistry", March, 4th ed. McGraw Hill (1992)或"Organic Synthesis", Smith, McGraw Hill， (1994)中。本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解的是，中間體和最終產(chǎn)物的純化技術(shù) 包括例如，在柱或旋轉(zhuǎn)板上的正相和反相色譜，重結(jié)晶，蒸餾和液-液萃取 或固-液萃取。除了定義不同之處，這些取代基和基團的如式(I)所定義。除 非另有說明，術(shù)語"室溫，，和"環(huán)境溫度，，表示16至25。C之間的溫度。除 非另有說明，術(shù)語"回流，，表示關(guān)于所用的溶劑，采用指定溶劑的沸點溫度或 稍高于沸點的溫度。應(yīng)該理解，可使用微波對反應(yīng)混合物進行加熱。術(shù)語"快 速色鐠(flash chromatography),，或"快速柱色語(flash column chromatography)" 表示使用有機溶劑或其混合物作為流動相在硅膠上進行制備性色譜。
終產(chǎn)物的制備
1.制備式(I)化合物的方法示于方案1中，其中R'如式(I)中所定義<formula>formula see original document page 19</formula>(VI) (V)
方案1
式(n)、 (m)、 (iv)、 (v)和(vi)是制備式(i)化合物時有用的中間體，其中 R'如式(i)中所定義。式(n)-(vi)的化合物要么為市售的，要么可從市售化合
物或文獻中描述的化合物制備(Ouwerkerk " a/. ￡wt 乂 (>g. O^m. 2002, 14, 2356)。
a) 使氰基乙酸乙酯(n)與式(m)的硫脲反應(yīng)，在式(m)中r4口式(i)中所 定義。在所述方法中，將氰基乙酸乙酯(n)和適當(dāng)?shù)牧螂?m)溶于或懸浮于
適當(dāng)?shù)拇既缫掖贾?，然后加入醇鹽，如乙醇鈉。溫度通常為70。C至反應(yīng)混
合物的回流溫度。
b) 使式(iv)的硫脲嘧啶與亞硝酸鈉在酸性條件下反應(yīng)，在式(iv)中r1 如上文所定義。在所述方法中，將硫脲嘧啶(iv)懸浮于溶劑如乙酸(10-100% 的水溶液)或鹽酸(1M水溶液)中，然后在0。C至85。C之間的適當(dāng)溫度攪拌 10-20分鐘，然后滴加溶于水中的亞硝酸鈉。
c) 將式(v)的亞硝基化合物還原，在式(v)中W如上文所定義。在所述 方法中，式(v)的亞硝基化合物的還原可用適當(dāng)?shù)倪€原劑如連二亞硫酸鈉或 氫氣(H2 (氣體))，在適當(dāng)?shù)娜軇┗旌衔锶缢彼芤夯驓溲趸c((1N水溶 液)中，在室溫至75。C之間的溫度進行30分鐘至24小時?？晒┻x擇地，可 將連二亞硫酸鈉直接加到步驟b所用的條件中。d)式(VI)的二胺與i)甲酸、ii)乙酸曱脒(formamidhie acetate)或與iii)原 酸三烷基酯的反應(yīng)描述如下，在式(VI)中R'如上文所定義
(i) 在方法(d)中，用甲酸(98%)在環(huán)境溫度和反應(yīng)混合物的回流溫度之 間的適當(dāng)溫度處理式(VI)的二胺。所述方法進行一段適當(dāng)?shù)臅r間，通常進行 20-30分鐘。除去曱酸后，用適當(dāng)?shù)膲A水溶液，例如用10%氫氧化鈉水溶液 處理，然后得到式(I)的化合物。用^ 咸進行的處理在適當(dāng)?shù)臏囟冗M行適當(dāng)?shù)?時間，例如在環(huán)境溫度和反應(yīng)混合物的回流溫度之間的溫度進行30分鐘至 90分鐘?？晒┻x擇地，反應(yīng)可在加入有甲酸和石克酸的溶劑如水中進行。然 后將反應(yīng)混合物回流加熱過夜，中和之后得到式(I)的化合物。
(ii) 在方法(d)中，用乙酸曱脒在溶劑如二甲基亞砜(DMSO)中，在適當(dāng) 的溫度例如70。C處理式(VI)的二胺，直到反應(yīng)結(jié)束，通常處理l-3h。
(iii) 在方法(d)中，用過量的適當(dāng)原酸酯如原曱酸三乙酯和原曱酸三丙 酯，任選在適當(dāng)?shù)娜軇┤绱嫉拇嬖谙?，在適當(dāng)?shù)臏囟忍幚硎?VI)的二胺，直 到反應(yīng)結(jié)束。溫度通常為至多反應(yīng)混合物的回流溫度，以及反應(yīng)時間通常 從30分鐘至過夜。
將式(VI)的二胺轉(zhuǎn)化為式(I)化合物的其它方法描述在文獻中并對于本 領(lǐng)域技術(shù)人員而言是公知的。
2.制備式(I)化合物的方法示于方案2中，其中W如式(I)中所定義 。uzuki ef a/. C^em. P/iarm. _Bm//. 2002, 50，(VII)
(VIII)
(IX)
(X)
方案2
式(vn)、 (vin)、 (ix)和(x)的化合物是制備式(i)化合物時有用的中間體，
其中R'如式(I)中所定義。式(VII)-(X)的化合物要么為市售的，要么可從市
售的化合物或文獻中描述的化合物制備。
a) 使5-氨基-4-咪唑曱酰胺(VII)與適當(dāng)?shù)氖?VIII)的醛(其中R1如式(I) 中所定義)和適當(dāng)?shù)呐饸浠锶缜杌饸浠c或乙酰氧基硼氫化鈉，在適當(dāng) 的溶劑如曱醇中，任選加入乙酸，在室溫或加熱至10-50。C反應(yīng)，得到中間 體(IX)。
b) 使中間體(IX)(其中R1如式(I)中所定義)與異硫氰酸酯如異硫氰酸苯 甲酰西旨(benzoylisothiocyanate)或異石克氰酸乙氧,炭酉旨(ethoxycarbonyl isothiocyanate),在溶劑如二氯曱烷和曱醇中，在室溫反應(yīng)，得到中間體(X)。
c) 使中間體(X)(其中R^如式(I)中所定義)與堿如氫氧化鈉或氨(7N的曱 醇溶液)，在環(huán)境溫度至80。C或溶劑的回流溫度之間的溫度反應(yīng)，得到式(I) 的化合物，其中Ri如式(I)中所定義。
一般方法
使用的所有溶劑都是分析級的，并且市售的無水溶劑是反應(yīng)常規(guī)所使用的。反應(yīng)通常在氮氣或氬氣的惰性氣氛中進行。
'H和I3C NMR光譜使用配備Z梯度的5mm BBO探頭的Varian Unity十 400 NMR光譜儀、配備Z梯度的60 pi雙反流探頭的Bruker Avance 400 NMR 光譜儀或者配備Z梯度的4-核探頭的Bruker DPX400 NMR光譜儀，記錄400 MHz(質(zhì)子)的NMR光譜和100 MHz(碳-13)的13C NMR光譜。除非在實 施例中具體說明，記錄400 MHz(質(zhì)子)光譜和100 MHz(碳-13)光譜。使用 如下參比信號DMSO-d6中線S 2.50(111)， 5 39.51(13C); CD3OD中線S 3.31('H)或5 49.15(13C);丙酮"6 2.0《H), 206.5(13C);和CDC13 5 7.26(!H)， CDCl3中線5 77.16("C)(除非另有說明)。
質(zhì)鐠在由Alliance 2795(LC)， Waters PDA 2996和ELS檢測器(Sedex 75)
正離子模式或負離子模式操作的電噴霧離子源(ES)。毛細管電壓為3 kV， 錐電壓為30V。質(zhì)譜儀在m/z 100-600之間掃描，掃描時間為0.7s。柱溫設(shè) 定為40°C。 二極管陣列檢測器在200-400nm之間掃描。將ELS檢測器的溫 度調(diào)節(jié)到40。C,以及將壓力設(shè)為1.9巴。對LC分離，應(yīng)用線性梯度，起始 于100%A(A: 10mM乙酸銨(NH40ac)/5。/o乙腈(MeCN)溶液)并且四分鐘后終 止于100% B(B: MeCN)。所使用的柱是X-Terra MS C8, 3.0 x 50; 3.5 ^lm(^^/raters)， 以1.0 mL/min的力t速運4亍。
或者，在由Agilent Technologies提供的GC-MS(GC 6890, 5973NMSD) 上進行質(zhì)譜分析。所使用的柱是VF-5 MS， ID 0.25 mm x 30m， 0.25 (um(Varian Inc.)。應(yīng)用線性溫度梯度，起始于40匸(保持1 min)并且終止于300。C(保持 1 min), 25。C/分鐘。MS配備有CI離子源，以及反應(yīng)氣體是甲烷。MS在 m/z 50-500之間掃描，并且掃描速度設(shè)為3.25掃描/秒。MS配備有EI離子 源。MS在m/z 50-500之間掃描，并且掃描速度設(shè)為3.25掃描/秒。將電子 電壓設(shè)為70 eV。
HPLC分析用由G1379A微真空脫氣器、G1312A 二元泵、G1367A 孔板自動取樣器、G1316A恒溫柱室和G1315B 二極管陣列檢測器組成的 Agilent HP 1000系統(tǒng)上進行HPLC分析。柱X-Terra MS, Waters, 3.0 x 100 mm: 3.5 |dm。將柱溫設(shè)定為40°C,流速1.0mL/分鐘。二極管陣列檢測器從210-300 nm掃描，步長和峰寬度分別設(shè)為2 nm和0.05分鐘。應(yīng)用線性梯度，由 100%A開始(A: 10 mM NH4OAc/5 % MeCN中)，100%B(B: MeCN)結(jié)束，歷
22時6分鐘。
GC-MS分析在由Agilent Technologies提供的GC 6890, 5973N MSD 上進行GC-MS分析。所使用的柱是VF-5 MS, ID 0.25 mm x 30m, 0.25 pm(Varian Inc，)。應(yīng)用線性溫度梯度，起始于々0。C(保持1 min)并且終止于 30(TC(保持1 min), 25。C/分鐘。MS配備有CI離子源，以及反應(yīng)氣體是曱 烷。MS在m/z 50-500之間掃描，并且掃描速度設(shè)為3.25掃描/秒。將電子 電壓設(shè)為70 eV。
在Initiator或Smith Synthesizer單模式微波諧振腔中進行微波加熱，在 2450 MHz產(chǎn)生連續(xù)輻射。
典型的反應(yīng)后處理方法(typical workup procedure)包括用溶劑(例如乙 酸乙酯)提取產(chǎn)物；用水洗滌，隨后經(jīng)硫酸鎂(MgS04)或硫酸鈉(Na2S04)干燥 有機相，過濾并且對溶液進行真空濃縮。
薄層色譜分析(TLC):在Merck TLC-板(硅膠60 F254)上進行薄層色譜 分析(TLC),斑點由UV顯現(xiàn)。在Combi Flash CompanionTM上進行快速 柱色語，使用RediSepTM正相快速柱?？焖僦Z的典型溶劑是氯仿/甲醇、 二氯曱烷/曱醇以及庚烷/乙酸乙酯的混合物。
制備性色譜用配備二極管陣列檢測器的Waters自動純化HPLC進行。 柱XTerra MS C8, 19x300mm, 10|um。使用窄梯度，MeCN/(95:5 0.1M NH4OAc:MeCN)，流速20 ml/min?；蛘?，使用另 一種柱；Atlantis CI8 19 x 100 mm, 5 |im 柱。在MilliQ Water中具有乙腈/0.1M乙酸銨的5。/。乙腈溶液的梯 度從0%運行至35至50%乙腈，歷時15min。流速15mL/min?；蛘撸?化在半制備性Shimadzu LC-8A HPLC上進行，其裝有Waters Symmetry⑧柱 (C 18 ， 5 |Lim, 100 mm x 19 mm)的Shimadzu SPD-1 OA UV-vis.4企測器。
使用窄梯度，在MilliQ Water中的MeCN/0.1。/。三氟乙酸，流速為10 ml/min。
使用以下縮寫
aq. 水溶液；
m-CPBA 3-氯過氧苯曱酸；
equiv. 當(dāng)量；
DEAD偶氮二羧酸二乙酯DMFN,N-二曱基甲酰胺；
DMSO二甲基亞砜；
HOAc乙酸；
NaCNBH3氰基硼氫化鈉；
Na2S04硫酸鈉；
r.t室溫;
o.n.過夜；
THF四氫吹喃
Boc20一縮二碳酸二叔丁酯(0"6^-1
MeOH曱醇；
EtOH乙醇；
EtOAc乙酸乙酯；
TFA三氟乙酸；
DIPEAiV^-二異丙基乙胺
CH2C12二氯曱烷；
CHC13氯仿；
TEMPO2,2,6，6-四曱基-l-哌啶氧化物;
HC1鹽酸
所用的原料是商業(yè)來源獲得的或根據(jù)文獻操作制備的，并具有與報道一致的實驗數(shù)據(jù)。
具體的實施方式
實施例
通過以下實施例來闡明本發(fā)明，但本發(fā)明決不限于以下實施例:
實施例1 3-(2-乙氧基-2-曱基丙基)-2-硫代黃嘌呤
2-^'-/，7-二乙歲差-2-該產(chǎn)物是根據(jù)US 3，652，579中描述的改進操作來合成的。將溴水(2.95 mL, 57.6 mmol)逐滴加入異丁醛(4.82 g， 66.8 mmol)于EtOH(22mL)中的溶液中，然后將得到的混合物在室溫攪拌40分鐘。加入更多的溴水(0.3 mL， 5.86 mmol)。反應(yīng)混合物通過加入碳酸4丐(3.5 g， 25.3 mmol)來中
和。濾除剩余的碳酸鈣，然后將濾液倒在冰水混合物上。水相用CH2Cl2萃
取，經(jīng)Na2S04干燥，過濾并濃縮。真空蒸餾后以67% (10.10 g)的收率得到標(biāo)題產(chǎn)物。
!H NMR (400 MHz, DMSO-d6) S ppm 4.43 (s, 1 H), 3.80-3.73 (m, 2 H)，1.64 (s，6H), 1.15(t，6H).
")2-乙歲名-2- f名丙^
該產(chǎn)物是根據(jù)US 3,652,579中描述的操作來合成的。歷時50分鐘將從la獲得的2-溴-1，1-二乙氧基-2-甲基丙烷(5.63 g, 25mmol)逐滴加入酒石酸氬鉀(2.35 g, 12.5 mmol)于回流的去離子水(22.5 mL)中的溶液中。將得到的混合物回流1小時IO分鐘。餾出溶劑和產(chǎn)物。將硫酸銨(共8.5 g)加到產(chǎn)物-溶劑的混合物中。將混合物攪拌一段時間。分離兩相，上層相由氯化鈣蒸餾，得到55%(1.60 g)標(biāo)題產(chǎn)物。MS (CI) m/z 117(M+l)。
4-^-乙歲差-2- f差丙差)^差^^-5-甲教展將NaCNBH3 (0.077 g， 1.23 mmol)加到5-氨基-4-咪唑曱酰胺鹽酸鹽(0.200 g， 1.23 mmol)和乙酸(141 (iL, 2.46 mmol)于甲醇(1.5 mL)中的溶液中。逐滴加入從實施例l(b)獲得的2-乙氧基-2-甲基丙醛(0.286 g， 2.46 mmol)。1.5 h后，加入更多的2-乙氧基-2-曱基丙醛(0.300g， 2.58 mmol),接著在0.5h后加入更多的2-乙氧基-2-曱基丙醛(0.424 mg, 3.65 mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌17h，之后將其濃縮，然后經(jīng)快速硅膠色譜(CHCyMeOH;20:l至9.1)進行純化，以90%的收率(0.251 g)得到標(biāo)題化合物，其為油狀物。MS (ESI)m/z 227 (M+l)。
W J-^-乙歲差-2-冗基丙差)-2-碗W斧禁呤
歷時0.5h在室溫將異硫氰酸乙氧羰酯(0.171 g, 1.30 mmol)加到攪拌的4-[(2-乙氧基-2-曱基丙基)氨基]-l/Z-咪唑-5-甲酰胺(0.246 g， 1.09 mmol，從實施例l(c)獲得)于CH2C12 (1.1 mL)中的溶液中，然后使反應(yīng)混合物不進行攪拌在4。C保持16h。將反應(yīng)混合物加熱至室溫并保持lh，然后蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于2%氫氧化鈉(水溶液)(27 mL)中，然后將反應(yīng)混合物在5(TC加熱5.5h。 pH用濃HCl和1MHC1調(diào)節(jié)至中中性。經(jīng)過濾收集沉淀物，用水洗滌，然后經(jīng)快速硅膠色譜(CHCl3/MeOH;20:l)進行純化，以47%的收率(96mg)得到標(biāo)題化合物。
畫R (400 MHz, DMSO-d6) S ppm 13.76 (br s, 1 H), 12.42 (s, 1 H),8.13 (s, 1 H)， 4.69 (br s, 2 H), 3.54 (q， 2 H)， 1.21 (s， 6 H)， 1.02 (t， 3 H). MS (ESI)m/z 267 (M-l).
實施例2 3-(2-丙氧基-2-甲基丙基)-2-硫代黃嘌呤
2-;;1-2- ^差-,7-二丙歲差丙處2-溴-2-曱基-l,l-二丙氧基丙烷是根據(jù)US 3,652,579中描述的改進方法來制備的。
將異丁醛(7.2g, 0.10mol)和l-丙醇(12mL)在水浴中冷卻。歷經(jīng)20分鐘逐滴加入溴(4.4 mL， 0.086 mol)。在環(huán)境溫度繼續(xù)攪拌5分鐘，然后在55°C攪拌30分鐘。分批加入碳酸鈣(3 g， 0.030 mol)。將得到的混合物在環(huán)境溫度攪拌lh。將混合物過濾，固體用乙醚洗滌。然后加入水(15mL)。分離有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥并在環(huán)境溫度真空濃縮。該粗產(chǎn)物(13.5g，53。/。)不經(jīng)進一步純化就用于下一步。
^麗R (CDC13) S ppm 4.40 (s, 1 H)， 3.73-3.79 (m， 2H)， 3.51-3.57 (m， 2H),1.73 (s, 6H), 1.60-1.66 (m, 4H)， 0.93-0.97 (m, 6H).
W 2- ^吝-2-丙歲差矛^
2-曱基-2-丙氧基丙醛是根據(jù)US 3,652,579中描述的改進方法來制備的。將由從實施例2(a)獲得的2-溴-2-曱基-1，1-二丙氧基丙烷(6.5 g, 0.026 mol)、酒石酸氫鉀(4.8 g， 0.026 mol)的水(75 mL)溶液組成的漿料回流加熱7 h。安裝蒸餾裝置，然后收集在82-90。C之間餾出的液體。分離有機相。所獲得的粗產(chǎn)物(1.9 g， 56 %)不經(jīng)進一步純化就使用。
!HNMR(CDCl3) 5ppm9.58 (s, 1H), 3.31-3.34 (m, 2H)， 1.54-1.64 (m, 2H)，1.26 (s, 6H)， 0.92-0.96 (m, 3H).
f差丙歲差丙差)凌差7-7//-喊^-5- f瘋應(yīng)將從實施例2(b)獲得的2-甲基-2-丙氧基丙醛(1.0 g， 8.3 11111101)、5-氨基-4-咪唑曱酰胺(0.5 g， 4.0 mmol)、氰基硼氫化鈉(0.25 g， 4.0 mmol)和乙酸(0.45mL, 7.9 mmol)于10 mL曱醇中的反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度攪拌1 h。真空除去溶劑。加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)。分離有機相，然后真空除去溶劑。經(jīng)ISCO快速色譜(EtOAc:庚烷，梯度洗脫1:1至100% EtOAc)進行純化，得到0.19 g (20 %)標(biāo)題化合物。
NMR (CDC13) 5 ppm 6.98 (s， 1H)， 6.39 (br s, 1H), 3.40 (t， 2H， J=6.7 Hz):3.14 (d， 2H, J=4.3 Hz), 1,56-1.65 (m， 2H)， 1.22 (s， 6H), 0.95 (t， 3H, J=7.5 Hz);MS (ESI)m/z241 (M+l).
幼3-廣2-丙歲差-2- ^差丙羞)-
將從實施例2(c)獲得的4-[(2-甲基-2-丙氧基丙基)氨基]-1//-咪唑-5-曱酰胺(0.19 g, 0.78 mmol)溶于7 mL 二氯曱烷中。將獲得的溶液在環(huán)境溫度攪拌。歷經(jīng)6h分批加入異硫氰酸苯曱酰酯(0.50 g， 3.1 mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜，然后真空除去溶劑。加入氨的甲醇溶液(7mL7M的溶液)，將獲得的溶液在耐壓瓶(pressure flask)中在50。C加熱3h，然后在80。C加熱3 h。將冷卻的反應(yīng)混合物濃縮，粗產(chǎn)物經(jīng)反相HPLC進行純化。以22%(48 mg)的后來獲得產(chǎn)物。
'H麗R (DMSO-d6) 5 ppm 13.70 (very br s, 1H)， 12.39 (br s, 1H), 8.12 (s，1H)， 4.69 (br s， 2H), 3.41 (t， 2H, J=6.6 Hz)， 1.36-1.44 (m, 2H)， 1.21 (s， 6H)， 0.81(t， 3H, J=7.5 Hz); 13C畫R (DMSO-d6) S ppm 175.3, 152.5， 149.9， 140.7， 111.0，75.9， 62.7, 53.5, 25.4， 23.2, 10.6; MS (ESI) m/z 283 (M+l)
實施例3 3-(2-曱氧基-2-曱基丙基)-2^危代黃嘌呤
該產(chǎn)物是根據(jù)US 3,652,579中描述的操作來合成的。
f歲差-2- f差丙差〗羞差7-7//-f應(yīng)麼將5-氨基-4-咪唑曱酰胺鹽酸鹽(0.162 g, 1.0 mmol)和從實施例3(a)獲得的2-曱氧基-2-曱基丙醛(0.204 g, 2.0 mmol)在室溫在曱醇(3 mL)中混合。然后加入乙酸(141 fiL， 2.46 mmol)，將混合物攪拌30 min ， 4妄著力口入NaCNBH3(0.063 g, 1.0 mmol)。 3 h后，加入額外的2-曱氧基-2-曱基丙醛 (0.060 g, 0.59 mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫攪拌17h，然后濃縮，并經(jīng)快速 硅膠色譜(CHCl3:MeOH二5:l)進行純化。以73%的收率(0.155 g)獲得標(biāo)題化合 物，其為油狀物。MS(ESI)m/z213 (M+l)。
廣c)ff差為差)-2-碗A'斧禁呤
將異硫氰酸乙氧羰酯(0.144 g， 1.1 mmol)在室溫加到攪拌的4-[(2-曱氧基 -2-曱基丙基)氨基]-1//-咪唑-5-曱酰胺(0.155 g， 0.73 mmol，從實施例3(b)獲 得)于CH2Cl2(2.5mL)中的溶液中，并繼續(xù)攪拌16h。蒸發(fā)溶劑，然后將殘 余物溶于2。/。氫氧化鈉(NaOH)水溶液(10 mL)中，在50。C加熱3 h。 pH用2M HC1調(diào)節(jié)至中性，經(jīng)過濾收集得到的沉淀物，接著進行制備性HPLC純化。 以32%的收率(60 mg)獲得標(biāo)題化合物，其為白色固體。
H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 12.41 (s, 1 H)， 8.13 (s， 1 H)， 4.68 (s, 2 H), 3.21 (s， 3 H), 1.20 (s, 6 H). MS (ESI) m/z 255 (M+l).
實施例4 3-(2-異丙氧基乙基)-2-硫代黃嘌呤
^^-#丙歲差乙差)羞^7-尹教發(fā)
將三氯氰尿酸(1.23 g， 5.29 mmol)加到2-異丙氧基乙醇(0.50 g, 4.80 mmol)于CH2C12 (3 mL)的溶液中。將反應(yīng)混合物冷卻至0°C,然后分成小批 量加入TEMPO (0.015 g, 0.09 mmol)。將混合物在室溫攪拌20分鐘，然后經(jīng) 過硅藻土過濾，并用CH2Cl2洗滌。在過濾過程中濾液保持冰冷，0°C。將獲 得的醛溶液在0"加到攪拌的4-氨基-1//-咪唑-5-曱酰胺鹽酸鹽(0.78 g, 4.80 mmol,由實施例3(b)獲得)于MeOH (5 mL)中的混合物中。將混合物攪拌20 分鐘，然后加入NaCNBH4 (0.30 g， 4.80 mmol)。在室溫攪拌5h后，將混合 物濃縮，然后經(jīng)快速色譜(CH2CV甲醇梯度液；0-5%曱醇)進行純化，得到 標(biāo)題化合物(0.39 g， 38%)，其為油狀物。
&麗R (DMSO-d6) 5 ppm 7.58-7.45 (1 H， m), 6.84-6.66 (2 H， m)， 6.23 (1 H, br s)， 3.59-3.49 (1 H, m)， 3.49-3.43 (2 H, m)， 3.35-3.28 (2 H, m)， 1.10-1.06 (6 H， m);
MS (ESI) m/z 213 (M+l).
28W 3-。-^丙褒差乙差-2-碗/七-7,么丄7-4￥
將從實施例4(a)得到的4-[(2-異丙氧基乙基)氨基]-lH-咪唑-5-曱酰胺 (0.37 g， 1.74 mmol)溶于CH2C12 (5 mL)中。加入異硫氰酸乙氧羰酯(0.27 g， 2.09 mmol),然后將混合物在室溫攪拌30分鐘。將混合物真空濃縮，然后 溶于2M氫氧化鈉(2mL)中。反應(yīng)在樣b皮中在12(TC進^f亍IO分鐘。將溶液的 pH用2M HC1調(diào)節(jié)至中性pH,經(jīng)過濾收集沉淀物，然后用水洗滌。經(jīng)制 備性HPLC進行純化，獲得標(biāo)題化合物(0.14g，32。/。)，其為固體。
& NMR (DMSO-d6) 5 ppm 13.82 (1 H, br s)， 12.44 (1 H, br s)， 8.16 (1 H， s), 4.72-4.51 (2 H, m)， 3.80-3.67 (2 H， m), 3.67-3.56 (1 H, m), 1.04 (6 H， d, J=6.0 Hz); MS (ESI) m/z 255 (M +1).
實施例5 3-(2-乙氧基-丙基)-2-硫代黃嘌呤 。-乙歲差-丙差)-磁靡
將2_乙氧基-丙胺(1.50 g， 14.5 mmol)和異硫氰酸苯曱酰酯(2.61 g， 16.0 mmol)于氯仿(50mL)中的溶液在75。C加熱1 h。減壓除去溶劑，然后加入曱 醇(15 mL)和水(30 mL)。加入碳酸鉀(2.0 g， 14.5 mmol)，然后將混合物在75°C 加熱2h。冷卻至室溫后，混合物用2M硫酸中和，然后減壓除去溶劑。將 粗產(chǎn)物溶于曱醇中，然后經(jīng)過濾除去不溶物質(zhì)。鎦出溶劑，得到的固體用 二氯曱烷洗滌，然后溶于乙醇中。經(jīng)過濾除去不溶物質(zhì)，然后減壓除去溶 劑。這得到標(biāo)題化合物，其為白色固體(1.6g,59o/。收率)。
& NMR (DMSO-d6) S ppm 7.52 (1 H,寬單峰)，7.02 (2 H,寬單峰), 3.58-3.33 (5 H， m), 1.09 (3 H， t， J=6.95 Hz)， 1.03 (3 H， d， 《/=6.06 Hz); MS (ES) m/z 161 (M-l).
<^ 乙歲差-丙差)-2-碗/七-么3-二羞-7//-
將從實施例5(a)獲得的(2-乙氧基-丙基)-硫脲(1.5 g, 1.4 mmol)和氰基乙 酸乙酯(1.75 g， 15.5 mmol)加到乙醇鈉[從鈉(0,35 g， 15.2 mmol)和無水乙醇 (15mL)制得]溶液中。將得到的混合物回流過夜。冷卻至室溫后，加入水， 然后將獲得的混合物用2M硫酸中和。經(jīng)過濾收集得到的沉淀物，固體用水 洗滌，得到期望的產(chǎn)物(1.2g,71。/。收率)。
'HNMR(DMSO-d6)Sppm 11.86(1 H，寬單峰)，6.73 (2 H，寬單峰)，4.91 (1 H， s)， 4.54 (1 H，寬單峰)，4.00-3.85 (1 H， m)， 3,66-3.46 (1 H, m)， 3.39-3.23(2 H， m)， 1.12 (3 H, d, J=6.32 Hz), 1.03 (3 H, t, J=7.07 Hz);MS (ES) m/z 230 (M +1).
6-瘋差-乙袤差-丙差)-5-jg^C^-2-碗^-么3-二產(chǎn)-7/f-^焚-4-^ 將從實施例5b獲得的6-氨基-l-(2-乙氧基-丙基)-2-硫代-2,3-二氫-lH-嘧啶_4—酮(i.i g， 4.8 mmol)懸浮于10%乙酸(20 mL)中，然后將混合物攪拌 15分鐘。加入亞硝酸鈉(0.36 g, 5.3 mmol),然后將得到的混合物在75。C加熱 1 h。反應(yīng)混合物變成粉色，之后變成紫色。將混合物冷卻至室溫，然后經(jīng) 過濾收集紫色固體，并用水洗滌，得到標(biāo)題化合物(1.05g，70。/o收率)。該固 體不經(jīng)進一步純化就用于實施例5(d)。
'H畫R (DMSO-d6) S ppm 13.16 (1 H,寬單峰)，12.61 (1 H,寬單峰), 4.50 (1 H，寬單峰)，4.24 (1 H， broads)， 3.96-3.84 (1 H， m), 3.56-3.43 (1 H， m)， 3.34-3.20 (2 H, m)， 1.13 (3 H， d， J=6.32 Hz), 0.95 (3 H, t， J=6.95 Hz); MS (ES) m/z259(M+l).
5力-二4差-7-n乙處名-丙差)-2-孩n么3-二產(chǎn)-///-^定-^釈 將從實施例5(c)獲得的6-氨基-1-(2-乙氧基-丙基)-5-亞硝基-2-硫代-2,3-二氫-lH-嘧啶-4-酮(1.0 g, 3.9 mmol)懸浮于32%氨(5 mL)中，然后加入水(IO mL)。將該混合物在75。C加熱，然后分成小批量加入連二亞硫酸鈉(1.7g,9.7 mmol)。再次加熱5分鐘后，將反應(yīng)混合物從油浴中移除，然后在環(huán)境溫度 攪拌2h。將混合物的pH用2MH2S04調(diào)節(jié)至中性pH。經(jīng)過濾收集固體并 用水洗滌，然后干燥得到標(biāo)題二胺(0.6 g, 41%收率)。該產(chǎn)物不經(jīng)進一步純 化就用于實施例5(e)中。
'H NMR (DMSO-d6) 5 ppm 5.91 (2 H,寬單峰)，4.59 (1 H，寬單峰)，4,11 (1 H,寬單峰)，3.99-3.85 (1 H， m), 3.68-3.42 (3 H, m), 3.39-3.20 (2 H， m), 1.14 (3 H, d， J=6.32 Hz), 1.03 (3 H, t, J=6.95 Hz); MS (ES) m/z 245 (M +1).
J-G-乙歲名-丙名)-2-碗/七斧禁^ 將從實施例5(d)獲得的5,6-二氨基-1-(2-乙氧基-丙基)-2-硫代-2,3-二氫 -1H-嘧啶-4-酮(0.60g, 2.45mmol)懸浮于曱酸(6mL)中，然后將獲得的溶液 在70。C加熱2h。減壓蒸除過量曱酸。向固體中加入10。/。氫氧化鈉(^mL),然后將獲得的溶液在7(TC加熱2 h。將溶液的pH用2M疏酸調(diào)節(jié)至中性pH。 經(jīng)過濾收集獲得的沉淀物，然后用水洗滌。經(jīng)制備性HPLC進行純化，獲 得標(biāo)題化合物(0.18g,29。/o收率)，其為固體。
'H NMR (DMSO-d6) 5 ppm 13.77 (1 H,寬單峰)，12.41 (1 H，寬單峰), 8.13 (1 H, s), 4.64-4.51 (1 H, m)， 4.47-4.33 (1 H, m), 4.25-4.12 (1 H, m), 3.58-3.42 (1 H， m), 3.43-3.31 (1 H, m)， 1.06 (3 H， d, J=6.32 Hz)， 0.95 (3 H， t, J=6.95 Hz); 13C麗R (DMSO-d6) S ppm 174.22, 152.96, 150.18， 141.54， 111.16， 71.15, 63.78， 52.13, 18.33, 15.80; MS (ES) m/z 255 (M +1).
實施例6 3-(2S-乙氧基-丙基)-2-硫代黃嘌呤和3-(2及-乙氧基-丙基)-2-硫代黃嘌呤
通過在Chiralpak AD柱(21.2 x 250 mm; lO)iim)上使用手性HPLC,將從 實施例6獲得的外消旋3-(2-乙氧基-丙基)-2-硫代黃嘌呤(5 mg/mL)溶液分 離為它的兩種對映體。流動相為100%甲醇，流速為8mL/min。注入體積為 2mL。
首先洗脫出的對映體為3-(25"-乙氧基-丙基)-2-硫代黃嘌呤，這種異構(gòu)體 是通過單晶衍射技術(shù)在200K確定的，e.e， 98%; MS (ES) "Vz 255 (M+l)。
第二次洗脫出的對映體為3-(2i -乙氧基-丙基)-2-硫代黃嘌呤，e.e. 98%; MS (ES)7z255 (M+l)。
謬遞
用于測定MPO抑制活性的方法公開于專利申請WO 02/090575中。在 如下篩選中測試本發(fā)明的化合物的藥理學(xué)活性，其中化合物單獨測試或在 添加的酪氨酸存在下測試。
測定緩沖液20mM磷酸鈉/磷酸鉀緩沖液，pH6.5,含有10mM牛磺 酸和100mMNaCl。
展開劑2mM3，3，,5,5，-四曱基聯(lián)苯胺(TMB),200iiMKI，200mM乙酸 鹽緩沖液，pH5.4，含有20。/。DMF。
向10 nl稀釋的化合物測定緩沖液中，加入含或不含20 酪氨酸(如 果存在，則最終濃度為8 fxM)的40 pl人MPO(最終濃度2.5 nM)，混合物 在環(huán)境溫度培養(yǎng)10分鐘。隨后加入50 pl &02(最終濃度100 pM)或作為對照的單獨測定緩沖液。在環(huán)境溫度培養(yǎng)10分鐘后，通過加入10 pi 0.2mg/ml 的過氧化氫酶(最終濃度18嗎/ml)停止反應(yīng)。反應(yīng)混合物再放置5分鐘后， 加入100 |il TMB展開劑。在約5分鐘后，在約650 nM下用吸收光譜測量 所形成的被氧化的3，3，,5,5，-四曱基聯(lián)苯胺的量。然后用標(biāo)準操作測定IC50值。
當(dāng)在至少一種模式的上述篩選中進行測試時，實施例l-6的化合物所產(chǎn) 生的IC5。值低于60^iM，這表明，如所期望的，該化合物顯示出有用的治療 活性。代表性的結(jié)果顯示于下表中。
化合物對MPO的抑制(在酪氨酸存在下) IC50
實施例50.權(quán)利要求
1. 式(I)的化合物或其藥用鹽、溶劑化物或其鹽的溶劑化物，R1選自C1-C6烷基，以及所述C1-C6烷基被C1-C6烷氧基取代；以及所述C1-C6烷基或所述C1-C6烷氧基中至少一個是支化的。
2. 權(quán)利要求1的化合物，其中W定義中的d-C6烷基表示Cw烷基。
3. 權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中所述烷基選自異丁基、乙基和丙基。
4. 權(quán)利要求1-3中任一項的化合物，其中所述烷基被d.3烷氧基取代。
5. 權(quán)利要求1-3中任一項的化合物，其中所述烷基被d-烷氧基取代。
6. 權(quán)利要求1-3中任一項的化合物，其中所述烷基被C2-烷氧基取代。
7. 權(quán)利要求1-3中任一項的化合物，其中所述烷基被丙氧基或異丙氧 基取代。
8. —種化合物或其藥用鹽、溶劑化物或其鹽的溶劑化物，所述化合物為3-(2-乙氧基-2-曱基丙基)-2-硫代黃嘌呤； 3 -(2-丙氧基-2-曱基丙基)-2-硫代黃嘌呤； 3 -(2-甲氧基-2-曱基丙基)-2-硫代黃嘌呤； 3-(2-異丙氧基乙基)-2_硫代黃嘌呤； 3-(2-乙氧基丙基)-2-硫代黃嘌呤； 3-(2&乙氧基丙基)-2-硫代黃嘌呤； 3-(27 -乙氧基丙基)-2-硫代黃。票呤。
9. 權(quán)利要求1-8中任一項的化合物，或其藥用鹽，其用作藥物。
10. —種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1-8中任一項的化合物或其藥用 鹽，任選混合有藥用輔料、稀釋劑或載體。
11. 治療對酶MPO的抑制是有益的疾病或病癥或者降〗氐所述疾病或病癥的危險的方法，包括將治療有效量的如權(quán)利要求1-8中任一項所定義的化 合物或其藥用鹽給藥于患有所述疾病或病癥或面臨所述疾病或病癥危險的 人。
12. 治療炎性疾病或降低所述疾病危險的方法，包括將治療有效量的如 權(quán)利要求1-8中任一項所定義的化合物或其藥用鹽給藥于患有所述疾病或 面臨所述疾病危險的人。
13. 權(quán)利要求12的方法，其中所述炎性疾病為神經(jīng)炎性疾病。
14. 權(quán)利要求13的方法，其中所述神經(jīng)炎性疾病為多發(fā)性硬化。
15. 權(quán)利要求13的方法，其中所述神經(jīng)炎性疾病為帕金森病。
16. 權(quán)利要求11的方法，其中所述疾病或病癥為心腦血管動脈粥樣石更 化疾病、外周動月永疾病、心力衰竭或呼吸系統(tǒng)疾病。
17. 權(quán)利要求16的方法，其中所述疾病或病癥為動脈粥樣硬化。
18. 權(quán)利要求16的方法，其中所述疾病或病癥為慢性阻塞性肺病 (COPD)。
19. 權(quán)利要求16的方法，其中所述疾病或病癥為支氣管炎，包括傳染 性支氣管炎和嗜酸性支氣管炎；肺氣腫；支氣管擴張或嚢性纖維化。
20. 治療中風(fēng)或降低所述疾病危險的方法，包括將治療有效量的如權(quán)利要求1-8中任一項所定義的化合物或其藥用鹽給藥于患有所述疾病或面臨所述疾病危險的人。
21. 如權(quán)利要求1-8中任一項所定義的化合物或其藥用鹽在制備用于治 療或預(yù)防對酶MPO的抑制是有益的疾病或病癥的藥物中的用途。
22. 如權(quán)利要求1-8中任一項所定義的化合物或其藥用鹽在制備用于 治療或預(yù)防炎性疾病的藥物中的用途。
23. 權(quán)利要求22的用途，其中所述炎性疾病為神經(jīng)炎性疾病。
24. 權(quán)利要求23的用途，其中所述神經(jīng)炎性疾病為多發(fā)性硬化。
25. 權(quán)利要求23的用途，其中所述神經(jīng)炎性疾病為帕金森病。
26. 權(quán)利要求21的用途，其中所述疾病或病癥為心腦血管動脈粥樣硬 化疾病、外周動脈疾病、心力衰竭或呼吸系統(tǒng)疾病。
27. 權(quán)利要求26的用途，其中所述疾病或病癥為動脈粥樣硬化。
28. 權(quán)利要求26的用途，其中所述疾病或病癥為慢性阻塞性肺病 (COPD)。
29. 權(quán)利要求26的用途，其中所述疾病或病癥為支氣管炎，包括傳染性支氣管炎和嗜酸性支氣管炎；肺氣腫；支氣管擴張或嚢性纖維化。
30. 如權(quán)利要求1-8中任一項所定義的化合物或其藥用鹽在制備用于 治療或預(yù)防中風(fēng)的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中R¹選自C₁-C₆烷基，以及所述C₁-C₆烷基被C₁-C₆烷氧基取代；以及所述C₁-C₆烷基或所述C₁-C₆烷氧基中至少一個是支鏈的；或其藥用鹽、溶劑化物或其鹽的溶劑化物，本發(fā)明還涉及含有所述化合物的組合物及其在治療中的用途。
文檔編號C07D473/22GK101460498SQ200780020990
公開日2009年6月17日 申請日期2007年6月4日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月5日
發(fā)明者安娜-卡林·蒂登 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司