專(zhuān)利名稱：：異唑啉衍生物及其制備新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用作半胱天冬酶抑制劑的具有環(huán)狀羧酸半縮酮基團(tuán)的異P惡唑啉衍生物、其制備方法、含有它的藥物組合物以及它的用途。
背景技術(shù)：
：半胱天冬酶抑制劑是指可以抑制半胱天冬酶活性，從而調(diào)節(jié)由半胱天冬酶功能引起的炎癥或細(xì)胞凋亡的化合物。在半胱天冬酶抑制劑中，已知不可逆抑制劑顯示出更加有效的抑制活性，這是因?yàn)樗豢赡娴厥姑笢缁顝亩刂萍?xì)胞凋亡(WuJ.等人，Methods:ACompaniontoMethodsinEnzymology1999,17,320)。已知下面的化合物是不可逆的抑制劑，它們共同具有3-氨基-5-氟-4-氧代戊酸部分。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage9</formula>對(duì)于可以通過(guò)施用上述化合物治療或緩解的疾病而言，有類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸疾病、移植物-宿主疾病、敗血癥、骨關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松、急性和慢性髓細(xì)胞性白血病、髓膜炎、輸卵管炎、敗血癥性休克、膽管炎、結(jié)腸炎、腦炎、心內(nèi)膜炎、血管球性腎炎、肝炎、心肌炎、胰腺炎、I型糖尿病、多發(fā)性硬化、阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、肝硬化等。[參考文獻(xiàn)癡呆ArchNeurol2003Mar;60(3):369-76，CaspasegeneexpressioninthebrainasafunctionoftheclinicalprogressionofAlzheimerdisease.PomplPN，YemulS，XiangZ，HoL，HaroutunianV，PurohitD，MohsR，PasinettiGM.;腦卒中ProcNatlAcadSciUSA2002Nov12;99(23):15188-93，caspaseactivationandneuroprotectioninCaspase-3-deficientmiceafterinvivocerebralischemiaandinvitrooxygenglucosedeprivation.LeDA，WuY，HuangZ，MatsushitaK，PlesnilaN，AugustinackJC，HymanBT，YuanJ，KuidaK，F(xiàn)lavellRA,MoskowitzMA.j由AIDS引起的腦損傷JNeurosci2002May15;22(10):4015-24Caspasecascadesinhumanimmunodeficiencyvirus-associatedneurodegeneration.GardenGA，BuddSL，TsaiE，HansonL，KaulM，D'EmiliaDM，F(xiàn)riedlanderRM，YuanJ，MasliahE，LiptonSA.;糖尿病Diabetes2002Jun;51(6):1938-48，Hyperglycemia—inducedapoptosisinmousemyocardium:mitochondrialcytochromeC-mediatedcaspase-3activationpathway.CaiL，LiW，WangG，GuoL，JiangY，KangYJ".;胃潰瘍JPhysiolPharmacol1998Dec;49(4):489-500，Roleofbasicfibroblastgrowthfactorinthesuppressionofapoptoticcaspase-3duringchronicgastriculcerhealing.SlomianyBL,PiotrowskiJ，SlomianyA.;肝炎引起的腦損傷JViralHepat2003Mar;10(2):81-6，CerebraldysfunctioninchronichepatitisCinfection.FortonDM,Taylor-Robi誰(shuí)nSD，ThomasHC"爆發(fā)性肝功能衰竭Gastroenterology2000Aug;119(2):446-60，Tumornecrosisfactoralphainthepathogenesisofhumanandmurinefulminanthepaticfailure.StreetzK,LeifeldL，GrundmannD，RamakersJ，EckertK,SpenglerU，BrennerD，MannsM，TrautweinC.;敗血癥NatImmunol2000Dec;1(6):496—501，Caspaseinhibitorsimprovesurvivalinsepsis:acriticalroleofthelymphocyte.HotchkissRS,ChangKC，SwansonPE，TinsleyKW，HuiJJ，KlenderP,XanthoudakisS,RoyS，BlackC，GrimmE，AspiotisR，HanY，NicholsonDW，KarlIE.;器官移植排斥Xenotransplantation2001May;8(2):115-24，Invitropreventionofeell-mediatedxeno-graftrejectionviatheFas/FasL-pathwayinCrmA-transductedporcinekidneycells.FujinoM，LiXK，SudaT，HashimotoM，OkabeK，YaginumaH,MikoshibaK，GuoL，0kuyamaT，EnosawaS，AmemiyaH，AmanoT，SuzukiS.;類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎ProgMedChem2002;39:1-72，Caspaseinhibitorsasanti-inflammatoryandantiapoptoticagents.GraczykPP.j缺血性心臟病AmJPhysiolHeartCircPhysiol2002Sep;283(3):H990-5，Hypoxia-inducedcleavageofcaspase-3andDFF45/ICADinhumanfailedcardiomyocytes.TodorA，SharovVG，TanhehcoEJ，SilvermanN,BernabeiA,SabbahHN.;抗炎JImmunol2003Mar15;170(6):3386-91,Abroad—spectrumcaspaseinhibitorattenuatesallergicairwayinflammationinmurineasthmamodel.IwataA，NishioK，WinnRK，ChiEY，HendersonWRJr，HarlanJM.;肝石更化i)JPharmacolExpTher.2004Mar;308(3):1191-6，ThecaspaseinhibitorIdn—6556attenuateshepaticinjuryandfibrosisinthebileductligatedmouse.CanbayA.，F(xiàn)ledsteinA.，Baskin-BeyE.，BronkFS.GoresGJ.jii)Hepatology.2004Feb.，39(2):273-8，Apoptosis:thenexusofliverinjuryandfibrosis.CanbayA，F(xiàn)riedmanS，GoresGJ.;iii)Hepatology.2003Nov;38(5):1188-98，Kupffercellengulfmentofapoptoticbodiesstimulatesdeathligandandcytokineexpression.CanbayA，F(xiàn)eldsteinAE，HiguchiH，WerneburgN，GrambihlerA，BronkSF，GoresGJ.]另一方面，對(duì)于半胱天冬酶抑制劑的3-氨基-5-氟-4-氧代戊酸部分，本領(lǐng)域已知下面反應(yīng)流程圖l的制備方法(Revesz等人，7W"力ed層Ze〃.1994,35，9693):反應(yīng)流程圖1發(fā)明概述化合物、及其制備方法。結(jié)果他們發(fā)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的具有環(huán)狀羧酸半縮酮部分的異嗜、唑啉衍生物具有良好的半胱天冬酶抑制活性，并且可以通過(guò)使用結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)化高收率制備得到，從而完成了本發(fā)明。因此，本發(fā)明一目的在于提供下式(l)的具有異嚅唑啉結(jié)構(gòu)和環(huán)狀羧酸半縮酮部分的化合物、以及有效制備它的新方法。本發(fā)明另一目的在于提供下式(1)化合物的中間體下式(4)的胺衍生物、及其制備方法。本發(fā)明另一目的在于提供用于治療炎癥或預(yù)防細(xì)胞凋亡的藥物組合物，其中含有下式(l)化合物和可藥用載體。本發(fā)明另一目的在于提供在對(duì)象中治療炎癥或預(yù)防細(xì)胞凋亡的方法，所述方法包括向?qū)ο笫┯弥委熡行Я康南率?l)化合物。本發(fā)明另一目的在于提供下式(1)化合物制備用于治療炎癥或預(yù)防細(xì)胞凋亡的藥物的用途。本發(fā)明另一目的在于提供具有良好穩(wěn)定性的下式(1)化合物的結(jié)晶形式。附圖簡(jiǎn)述圖1是根據(jù)本發(fā)明的式(1)化合物(R1=異會(huì)啉基，R2=異丙基)的結(jié)晶形式的X-射線衍射光語(yǔ)。圖2是示出根據(jù)本發(fā)明的式(1)化合物(R1=異會(huì)啉基，R2-異丙基)的結(jié)晶形式和無(wú)定形形式的穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果的圖。本發(fā)明中使用的部分重要術(shù)語(yǔ)可以如下定義。在本發(fā)明使用的結(jié)構(gòu)式和反應(yīng)流程圖中，烷基是指由l-8個(gè)碳原子組成的直鏈或支鏈烷基，或者由3-IO個(gè)碳原子組成的環(huán)烷基。另外，芳基包括所有芳香基團(tuán)、雜芳香基團(tuán)及其部分還原衍生物。所述芳香基團(tuán)是指簡(jiǎn)單或稠合環(huán)狀形式的5-至15-元不飽和烴，所述雜芳香基團(tuán)是指具有l(wèi)-5個(gè)選自氧、硫和氮中的雜原子的芳香基團(tuán)。此外，所述烷基和所述芳基中的一個(gè)或多個(gè)氫可以被其它取代基取代?？蛇x擇的取代基的實(shí)例包括?；?、氨基、烷氧基、羧基、羧氨基(carboxyaraino)、氰基、卣素、羥基、硝基、巰基(thiol)、烷基、環(huán)烷基、烷氧基、芳氧基、硫氧基(sulfoxy)、胍基等。本發(fā)明涉及用作半胱天冬酶抑制劑的下式(1)的具有環(huán)狀羧酸半縮酮基團(tuán)的異p惡唑啉衍生物其中W是烷基或芳基，以及R2是烷基。優(yōu)選地，R'是異喹啉基、喹啉基或萘基，以及ie是甲基、乙基、丙基或丁基。更優(yōu)選地，W是異喹啉基，以及W是異丙基。
發(fā)明內(nèi)容其中!^是異喹啉基以及W禾異丙基的式CD化合物可AA示出T述X-射線衍射圖案的結(jié)晶形式存在D(X)相對(duì)強(qiáng)度u/w20角9.6650.5559.157.2840.39712.155.8250.26015.215.5630.22815.935.3720.30216.54.8401細(xì)18.334.6950.47718.94.3410.45420.463.6630.23024.33.4140.21926.1另外，本發(fā)明涉及制備式a)化合物的方法，所述方法包括(a)活化下式(2)化合物，然后將其與下式(4)化合物反應(yīng)生成下式(13)化合物；(b)水解下式(13)化合物生成下式(14)化合物；(c)脫保護(hù)下式(14)化合物；以及(d)進(jìn)行結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)化；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>其中，W是烷基或芳基，R2是烷基，R3和R"各自是烷基，或者Fe和R。與和它們相連的氧原子一起形成雜環(huán)，以及W是烷基。優(yōu)選地，W是異喹啉基、喹啉基或萘基，W是曱基、乙基、丙基或丁基，W和R。各自是甲基、乙基或丙基，或者R3和R'3與和它們相連的氧原子一起形成二氧戊環(huán)或二氧雜環(huán)己烷，以及!^是甲基、乙基、丙基或丁基。式(l)化合物的上述制備方法中的每步可以如下進(jìn)行更詳細(xì)的描述。至于在上述步驟(a)中活化式(2)化合物的活化試劑，優(yōu)選使用選自草酰氯、三甲基乙酰氯、磷酰氯和亞硫酰氯中的一種。另外，優(yōu)選步驟(a)中的反應(yīng)在選自三乙胺、三(正丁基)胺、二異丙基乙基胺、吡啶、4-二甲氨基吡啶和4-(4-甲基-哌啶-l-基)-吡啶中的堿的存在下進(jìn)行，優(yōu)選所述堿以式(2)化合物的1.0-10.0當(dāng)量的用量使用。此外，優(yōu)選步驟(a)中的反應(yīng)在一種或多種選自二氯曱烷、氯仿、四氫呋喃、二甲氧乙烷、二氧雜環(huán)己烷和乙酸乙酯中的溶劑中進(jìn)行。另一方面，優(yōu)選步驟(a)中的式(4)化合物以式(2)化合物的1.0-3.0當(dāng)量的用量使用。優(yōu)選步驟(b)中的水解在選自氫氧化鋰(優(yōu)選無(wú)水或一水合物結(jié)晶)、氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鈣中的堿的存在下進(jìn)行，還優(yōu)選所述堿以式(13)化合物的0.1-10.O當(dāng)量的用量使用。此外，優(yōu)選步驟(b)中的反應(yīng)在一種或多種選自曱醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、四氫呋喃、二甲氧乙烷、二氧雜環(huán)己烷和二氯甲烷中的溶劑、或者在上述溶劑和水的混和溶劑中進(jìn)行。優(yōu)選步驟(c)中的脫保護(hù)反應(yīng)在選自鹽酸、硫酸和三氟乙酸中的酸的存在下進(jìn)行，優(yōu)選所述酸以式(14)化合物的0.1-20.O當(dāng)量的用量使用。另外，優(yōu)選步驟(c)中的脫保護(hù)反應(yīng)在存在或不存在選自二氯甲烷或氯仿中的溶劑的條件下進(jìn)行。步驟(d)中的結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)化反應(yīng)可以通過(guò)加入式(l)化合物作為晶種進(jìn)行，或者在晶種和催化用量的堿的存在下進(jìn)行，其中所述堿優(yōu)選為選自三乙胺、三(正丁基)胺、二異丙基乙基胺、二異丙基胺、吡啶、4-二曱氨基吡啶、4-(4-曱基-哌啶-l-基)-吡啶、旋光l-苯基乙胺和旋光l-萘基乙胺中的胺。在步驟(d)中，所述胺優(yōu)選以式(14)化合物的0.001-1.O當(dāng)量的用量使用，更優(yōu)選使用O.03-0.5當(dāng)量。如果所使用胺的用量太少，反應(yīng)速率變得較慢，如果用量太大，則式(l)化合物收率將降低。另外，優(yōu)選步驟(d)中的結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)化反應(yīng)在一種或多種選自甲苯、苯、二氯苯、四氫呋喃、二甲氧乙烷、二氧雜環(huán)己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、乙腈、甲基叔丁基醚和乙醚中的溶劑中進(jìn)行。下面參照反應(yīng)流程圖2，將對(duì)根據(jù)本發(fā)明的制備式(1)化合物的方法進(jìn)行更詳細(xì)的解釋。按照由本申請(qǐng)人于2004年8月17日提交的PCT/KR2004/002060中公開(kāi)的方法制備具有高旋光活性的式(2)的異嗜唑啉衍生物，然后將其與式(4)化合物合并生成式(13)化合物。式(13)化合物隨后酯水解生成式(14)化合物，式(14)化合物中的縮酮部分進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)得到式(15)和式(16)化合物的混合物，將其通過(guò)選擇性動(dòng)態(tài)結(jié)晶有效轉(zhuǎn)化為式(l)化合物。特別地，如果將式(15)和式(16)化合物的混合物溶解于有機(jī)溶劑中，向溶液中加入式(l)化合物的晶種，則只有混合物中的式(15)化合物轉(zhuǎn)化為以固體形式分離的式(1)化合物。反應(yīng)流程圖2其中，W是烷基或芳基，R2是烷基，R3和IT各自是烷基，或者W和R。與和它們相連的氧原子一起形成雜環(huán)，以及W是烷基。另外，如果將式(15)和式(16)化合物的混合物使用催化用量的堿以及晶種處理，式(15)化合物和式(16)化合物均轉(zhuǎn)化為式(1)化合物，高收率地生成式(1)化合物(反應(yīng)流程圖3)。由于溶液中存在堿，因此式(15)化合物與式(16)化合物平衡。另外，式(15)化合物與式(17)和式(1)化合物平衡，式(16)化合物與式(18)和式(19)化合物平衡。其中，具有良好結(jié)晶特性的式(l)化合物選擇性沉淀析出，使得全部化合物的平衡向式(l)化合物移動(dòng)，從而選擇性地由式(15)和式(16)化合物的混合物僅僅高收率地得到式(1)化合物。反應(yīng)流程圖3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>另外，本發(fā)明涉及下式(4)化合物，它是用于制備式(l)化合物的中間體<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其中R3和R'3各自是烷基，或者RS和R"與和它們相連的氧原子一起形成雜環(huán)，以及以及R4是烷基。優(yōu)選地,r和R"各自是甲基、乙基或丙基，或者R3和R'3與和它們相連的氧原子一起形成二氧戊或二氧雜環(huán)己烷:R"是曱基、乙基、丙基或丁基。另外，本發(fā)明還涉及制備式(4)化合物的方法，所述方法包括:(a)將下式(9)化合物保護(hù)和脫保護(hù)生成下式(1G)化合物；(b)式(1G)化合物進(jìn)行碳碳偶聯(lián)反應(yīng)生成下式(11)化合物；(c)式(ll)化合物與節(jié)胺反應(yīng)，然后還原生成式(12)化合物；以及(d)氫化式(12)化合物；(9)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>其中R3和R'3各自是烷基，或者f和R'3與和它們相連的氧原子一起形成雜環(huán)，以及IT是烷基。優(yōu)選地，W和R"各自是曱基、乙基或丙基，或者RS和R"與和它們相連的氧原子一起形成二氧戊或二氧雜環(huán)己烷，以及R^是曱基、乙基、丙基或丁基。下面將更具體地描述上述制備式(4)化合物的方法。在步驟(a)中，優(yōu)選將式(9)化合物通過(guò)使用原曱酸三甲酯或原甲酸三乙酯保護(hù)，脫保護(hù)反應(yīng)在選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉和碳酸氫鈉中的堿的存在下進(jìn)行。此外，優(yōu)選上述脫保護(hù)反應(yīng)中的堿以式(9)化合物的1.0-2.0當(dāng)量的用量使用。另外，優(yōu)選步驟(a)中的保護(hù)反應(yīng)在曱醇或乙醇溶劑中進(jìn)行，脫保護(hù)反應(yīng)在一種或多種選自曱醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿和水中的溶劑中進(jìn)行。另外，優(yōu)選步驟(b)中的反應(yīng)通過(guò)使用氯代甲酸乙酯或氯代甲酸甲酯，在選自正丁基鋰、二異丙基胺化鋰或六甲基二硅氮烷化鋰(Lithiumhexamethyldisilazide)中的堿的存在下進(jìn)行,所述堿以式(IO)化合物的O.5-3.0當(dāng)量的用量使用，所述氯代甲酸乙酯或氯代曱酸甲酯以式(IO)化合物的O.5-3.0當(dāng)量的用量使用。另外，優(yōu)選步驟(b)中的反應(yīng)在選自四氫呋喃、乙醚和甲基叔丁基醚中的溶劑中進(jìn)行。優(yōu)選步驟(c)中的還原反應(yīng)通過(guò)使用乙酸和硼氬化鈉進(jìn)行，所述硼氫化鈉以式(ll)化合物的1.0-5.0當(dāng)量的用量使用，所述乙酸以式(ll)化合物的l.0-20.O當(dāng)量的用量使用。另夕卜，優(yōu)選步驟(c)中的所述千胺以式(ll)化合物的l.O-IO.O當(dāng)量的用量使用。另外，優(yōu)選步驟(c)中的反應(yīng)在存在或不存在選自乙酸乙酯、四氫呋喃、乙醚和甲基叔丁基醚中的溶劑的條件下進(jìn)行，如果需要的話，可以以一鍋反應(yīng)的形式進(jìn)行。優(yōu)選步驟(d)中的反應(yīng)在金屬催化劑、更優(yōu)選鈀族催化劑或蘭尼氏鎳族催化劑的存在下進(jìn)行。具體地說(shuō)，承載在選自碳、二氧化硅和氧化鋁中的載體上的具有1-20重量％鈀(Pd)的鈀族催化劑或者具有l(wèi)重量%或更多蘭尼氏鎳的蘭尼氏鎳族催化劑以其金屬組分計(jì)算，可以以式(12)化合物的0.01-10重量°/。的用量使用。另外，優(yōu)選步驟(d)中的反應(yīng)在一種或多種選自曱醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、四氫呋喃、二曱氧乙烷、二氧雜環(huán)己烷、乙酸乙酯和二氯甲烷中的溶劑中進(jìn)行。此外，優(yōu)選步驟(d)中的氫化反應(yīng)在0-50X:的溫度和1-100atm的氫氣壓下進(jìn)行。如下面的反應(yīng)流程圖4所示，本發(fā)明人已經(jīng)開(kāi)發(fā)出一種高收率制備式(4)化合物、用于式(l)化合物的中間體的新方法。反應(yīng)流程圖4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>其中R3和R"各自是烷基，或者RS和R"與和它們相連的氧原子一起形成雜環(huán)，以及R4是烷基。另外，本發(fā)明涉及用于治療炎癥或預(yù)防細(xì)胞凋亡的藥物組合物，其中含有上述式(l)化合物和可藥用載體，尤其是用于治療癡呆、腦卒中、由AIDS引起的腦損傷、糖尿病、胃潰瘍、由肝炎病毒引起的腦損傷、由肝炎病毒引起的肝病、急性肝炎、爆發(fā)性肝功能衰竭、肝硬化、敗血癥、器官移植排斥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或由于缺血性心臟病引起的心臟細(xì)胞壞死的藥物組合物。另外，本發(fā)明涉及在對(duì)象中治療炎癥或預(yù)防細(xì)胞凋亡的方法，所述方法包括向?qū)ο笫┯弥委熡行Я康纳鲜鍪?l)化合物，尤其是治療癡呆、腦卒中、由AIDS引起的腦損傷、糖尿病、胃潰瘍、由肝炎病毒引起的腦損傷、由肝炎病毒引起的肝病、急性肝炎、爆發(fā)性肝功能衰竭、肝硬化、敗血癥、器官移植排斥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或由缺血性心臟病引起的心臟細(xì)胞壞死的方法。另外，本發(fā)明涉及上述式(1)化合物制備用于治療炎癥或預(yù)防細(xì)胞凋亡的藥物的用途，尤其，是用于治療癡呆、腦卒中、由AIDS引起的腦損傷、糖尿病、胃潰瘍、由肝炎病毒引起的腦損傷、由肝炎病毒引起的肝病、急性肝炎、爆發(fā)性肝功能衰竭、肝硬化、敗血癥、器官移植排斥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或由于缺血性心臟病引起的心臟細(xì)胞壞死的藥物。根據(jù)本發(fā)明的式(l)化合物可以配制成實(shí)現(xiàn)給藥目的的各種藥形式。為了制備根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物，將有效量的式(l)化合物與可藥用載體混和，其中可藥用載體可以根據(jù)待制備的制劑采取各種各樣的形式。式(l)化合物根據(jù)其應(yīng)用目的，可以配制為非腸道注射劑或經(jīng)皮或口服制劑。為了方便給藥和保證劑型均勻性，將組合物配制成單位劑型是特別有利的。對(duì)于口服制劑，可以使用任意的常用藥物栽體。例如，水、乙二醇、油類(lèi)、醇類(lèi)等可用于口服液體制劑例如混懸劑、糖漿劑、酏劑和溶液劑；或者淀粉、糖類(lèi)、高呤土、潤(rùn)滑劑、粘合劑、崩解劑等可用于固體制粒例如散劑、丸劑、膠嚢劑和片劑。由于方便給藥，片劑和膠嚢劑是最有利的單元?jiǎng)┬?。另外還希望將片劑和丸劑配制成腸溶衣包衣制劑。對(duì)于非腸道制劑，通常使用無(wú)菌水作為載體，但是也可以使用其它成分例如助溶劑。注射劑例如無(wú)菌水性或油性注射混懸劑可以按照已知步驟，使用適宜的分散劑、潤(rùn)濕劑或助懸劑制備。可用于制備注射劑的溶劑包括水、Ringer，s流體和等滲NaCl溶液，無(wú)菌不揮發(fā)油通常也被用作溶劑或助懸介質(zhì)。任何無(wú)刺激性不揮發(fā)油包括甘油單酯、甘油二酯可用于實(shí)現(xiàn)上述目的。脂肪酸例如油酸也可以用于注射劑。對(duì)于經(jīng)皮制劑，載體可以包括助滲劑和/或適宜的潤(rùn)濕劑，同時(shí)任選與不具有明顯皮膚刺激性的適宜添加劑合并。所述添加劑可以促進(jìn)通過(guò)皮膚給藥和/或有助于所需組合物的制備。這些經(jīng)皮制劑通過(guò)各種方式例如透皮貼劑、點(diǎn)灑劑(spot-on)或軟骨劑給藥。當(dāng)式(1)化合物用于臨床目的時(shí)，優(yōu)選以0.1-100mg/kg體重/天的用量施用給患者對(duì)象?？偟娜談┝靠梢砸淮位蚍?jǐn)?shù)次給藥。然而，針對(duì)個(gè)體患者的具體給藥劑量可能隨所使用的具體化合物、患者對(duì)象的體重、性別、衛(wèi)生條件或飲食、給藥時(shí)間或方法、排泄速率、藥劑的混和比例、待治療的疾病嚴(yán)重程度等變化而變化。下文中將參照下面的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)的描述，但是本發(fā)明的范圍不能理解為以任何方式受其限制。制備實(shí)施例l1-氟-4-三曱基曱硅烷基-3-丁炔-2-酮(9)將49.1g(499mmol)三甲基甲硅烷基乙炔溶解于250mL無(wú)水四氫呋喃中，內(nèi)部溫度降至大約-55r，然后在25分鐘內(nèi)向其中加入210mL(525mmol)2.5M/-BuLi的正己烷溶液，同時(shí)保持內(nèi)部溫度低于-30。C。攪拌大約40分鐘后，在5分鐘內(nèi)向反應(yīng)混合物中加入52.9g(499mmol)氟代乙酸乙酯，同時(shí)保持內(nèi)部溫度低于-25。C，然后在15分鐘內(nèi)向其中加入74.4g(524mmol)BF3.OEt，同時(shí)保持內(nèi)部溫度為-55。C至-65。C。加料完成后，反應(yīng)混合物在20'C下攪拌2小時(shí)，向其中加入250mL10%氯化銨水溶液結(jié)束反應(yīng)。有機(jī)層分離后，水層用200mL乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用250mL鹽水洗滌，然后減壓濃縮。殘余物在IOmbar和68匸下真空蒸餾，得到式(9)化合物(67.3g，85%)，為透明油狀物。'HNMR(500MHz，CDCU:4.90(d，J=47.1Hz，2H)，0.26(s，9H)13CNMR(125MHz，CDCU:181.0(d，J=21.5Hz)，104.0，98.1，84.8(d,J=187Hz)制備實(shí)施例24-氟-3，3-二甲氧基-1-丁炔(IO，R3，R'3=甲基)將33.6g(316mmol)原甲酸三甲酯和6.0g(31.5mmol)/7"TsOH-H20以及50.0g(316mmol)由制備實(shí)施例l得到的式(9)化合物一起投入260mL甲醇中，在回流溫度(內(nèi)部溫度6064"C)下攪拌大約6小時(shí)。反應(yīng)混合物減壓濃縮除去大約130mL溶劑，然后用260mL二氯曱烷洗滌。向其中加入130mL10%碳酸氫鈉水溶液，分離各層，水層使用130mL二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層減壓濃縮得到中間體4-氟-3，3-二甲氧基-1-三甲基曱硅烷基丁炔(59.0g，92%)，即目標(biāo)化合物(10)的前體化合物。該化合物直接用于接下來(lái)的反應(yīng)中不再進(jìn)一步純化。!H證(500MHz,CDC13):4.38(d，J=47.1Hz，2H)，3.40(s，6H)，0.20(s，9H)將59.0g(289mmol)前面得到的目標(biāo)化合物(10)的前體化合物4-氟-3，3-二甲氧基-l-三甲基甲硅烷基丁炔溶解于280mL二氯甲烷中，用59mg(0.183mmol)四溴化正丁基銨和347mL(347mmol)IN氬氧化鈉水溶液處理，同時(shí)攪拌大約2小時(shí)。有機(jī)層分離后，水層用110mL二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層用110mL鹽水洗滌，減壓濃縮得到目標(biāo)化合物(10，R3，R'3=甲基；40.9g,定量收率)。該化合物直接用于接下來(lái)的反應(yīng)中不再進(jìn)一步純化。HNMR(500MHz,CDC13):4.42(d，J=47.1Hz，2H)，3.42(s,6H)，2.64(s，1H)13CNMR(125MHz,CDC13):96.1(d，J=20.3Hz)，82.9(d，J=180Hz)，77.5，75.5，51.0制備實(shí)施例35-氟-4，4-二甲氧基-2-戊炔酸乙酯(11，R3，R'3-甲基，R4=乙基)將40.9g(405mmol)二異丙基胺在270mL四氫呋喃中的溶液冷卻至0匸，在大約1小時(shí)內(nèi)向其中加入112g(405mmol)2.5M/^BuLi的正己烷溶液，同時(shí)保持內(nèi)部溫度低于i4x:。反應(yīng)混合物在ox:下攪拌大約30分鐘，同時(shí)溫度調(diào)節(jié)至-78lC。將41.0g(311mmol)由前面制備實(shí)施例2得到的化合物(10，R3，R'3=甲基)溶解于160mL四氬呋喃中的溶液在大約2小時(shí)內(nèi)加入至反應(yīng)混合物中，同時(shí)保持內(nèi)部溫度低于-40r，然后在大約1小時(shí)內(nèi)向其中加入60.4g(557mmol)氯代甲酸乙酯，同時(shí)保持內(nèi)部溫度低于-40X:，反應(yīng)混合物進(jìn)一步在0'C下攪拌大約2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入250mL10°/。氯化銨水溶液結(jié)束反應(yīng)，分離有機(jī)層。水層用100mL乙酸乙酯萃取，合并的有機(jī)層用100mL鹽水洗滌，減壓濃縮得到粗目標(biāo)化合物(ll，R3，R'3=曱基，R4=乙基；95.0g，計(jì)算收率70%)。該化合物直接用于接下來(lái)的反應(yīng)中不再進(jìn)一步純化。腿(500MHz,CDC1》4.45(d，J=46.5Hz，2H)，4.25(q，J=7.1Hz，2H)，3.43(s,6H)，1.31(t，J=7.3Hz,3H)制備實(shí)施例43-(芐氨基)-5-氟-4，4-二甲氧基戊酸乙酯(12，R3，R'3=甲基，R4=乙基)將88g(431mmol)來(lái)自前面制備實(shí)施例3的粗化合物(11，R3，R'3=曱基，114=乙基)溶解于430mL甲基叔丁基醚(MTBE)中，同時(shí)溫度調(diào)節(jié)至0。C。向反應(yīng)混合物中加入31.4g(293mmol)千胺，在20。C下攪拌大約1小時(shí)，用450mL甲基叔丁基醚稀釋。再次調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物的溫度至0。C，向反應(yīng)混合物中加入33g(873mmol)NaB比，然后在大約30分鐘內(nèi)向其中加入259g(4320mmol)乙酸。反應(yīng)混合物保持于Ot:，在大約2小時(shí)內(nèi)向其中緩慢加入880mL(2640mmol)3N氫氧化鈉水溶液。分離有機(jī)層，分離后的有機(jī)層用880mL10%氯化銨水溶液洗涂，然后向其中加入880mL1N鹽酸水溶液。分離水層，用400mL曱基叔丁基醚洗滌，使用246mL10N氫氧化鈉水溶液堿化，用700mLx2曱基叔丁基醚萃取。合并的有機(jī)層用400mL鹽水洗滌，減壓濃縮得到目標(biāo)化合物[12,R3，R'3=曱基，R4=乙基；60.0g，44%，根據(jù)式(10)化合物計(jì)算為65%]。該化合物直接用于接下來(lái)的反應(yīng)中不再進(jìn)一步純化。^NMR(400MHz，CDC13):7.35-7.21(m，5H)，4.53(2dd,J=46.8,10.4Hz，2H)，4.13(q，J=7.2Hz，2H)，3.80(2d，J=12.8Hz，2H)，3.53(dd，J=8.4，4.0Hz，1H)，3.30(s，3H)，3.22(s，3H)，2.79(dd，J=15.6，3.6Hz，1H)，2.40(ddd，J=15.6，8.0，1.6Hz，1H)，1.25(t，J=7.2Hz，3H)實(shí)施例l3-氨基-5-氟-4,4-二曱氧基戊酸乙酯(4，R3，R'3=曱基，R4=乙基)將18.3g(58.5mmol)由前面制備實(shí)施例4得到的化合物(12，R3，R'3=甲基，R4=乙基)溶解于180mL乙醇中，使用活性炭5%鈀催化劑(5%Pd/C)在50psi氫氣壓下進(jìn)行大約4小時(shí)的脫節(jié)基反應(yīng)。反應(yīng)混合物通過(guò)5.0g硅藻土墊過(guò)濾，用90mL乙醇洗滌，濾液減壓濃縮得到目標(biāo)化合物(4，12.8g，98。/。)。該化合物直接用于接下來(lái)的步驟中不再進(jìn)一步純化。HNMR(500MHz,CDC13):4.53(2dd，J-46.5，10.4Hz，2H)，4.14(q，J=7.3Hz，2H)，3.57(dd，J=11.0，1.9Hz，1H)，3.29(d，J=11.7Hz,6H)，2.73(dd,J-16.5，2.5Hz，1H),2.36(線J=16.5，10.4，2.5Hz，1H)，1.25(t，J-7.3Hz，3H)制備實(shí)施例55-氟-3-[((R)-5-異丙基-3-(l-異喹啉基)-4，5-二氫-異嚅唑-5-羰基)-氨基]-4，4-二甲氧基-戊酸乙酯(13，R^l-異喹啉基，R2=異丙基，R3，R'3=曱基，R4=乙基)將15.5g(54.5mmol)(5"-5-異丙基-3-(l-異喹啉基)-4，5-二氫-5-異嗜唑羧酸(2，R1-1-異喹啉基，R2=異丙基)溶解于150mL二氯曱烷中，溫度調(diào)節(jié)至OX:，然后向其中加入7.1mL(81.7mmol)草酰氯和0.2inL(2.6mmol)DMF，同時(shí)保持內(nèi)部溫度低于12。C。反應(yīng)混合物在20t:下攪拌大約2小時(shí)，然后減壓濃縮。反應(yīng)混合物溶解于150mL二氯曱烷中，溫度調(diào)節(jié)至OTC，向其中加入三乙胺，然后在20分鐘內(nèi)向其中緩慢加入12.8g(57.4mmol)由實(shí)施例l得到的化合物(4，R3，R'3=甲基，R4=乙基)溶解于30mL二氯曱烷中的溶液。反應(yīng)混合物在25C下攪拌1.5小時(shí)，向其中加入120mL10°/。碳酸氫鈉水溶液和60mL1N氫氧化鈉水溶液的混合溶液，結(jié)束反應(yīng)。有機(jī)層分離后，水層用150mLx3二氯甲烷萃取。合并的有機(jī)層減壓濃縮得到目標(biāo)化合物(13，R^l-異喹啉基，R2=異丙基，R3，R'3=甲基，R4-乙基；30.1g，定量收率)。該化合物直接用于接下來(lái)的步驟中不再進(jìn)一步純化。!HNMR(500MHz,CDCh):9.12(q，1H)，8.53(m,1H)，7.85-7.25(m，4H)，4.80(m，1H)，4.54-4.34(m，2H)，4.14(q，J=7.4Hz，2H)，3.99(2d，J=18.4Hz，1H)，3.81(m，1H)，3.78(2d，J=8.6Hz，1H)，3.33(d，3H)，3.20(d，3H)，2.75(m,3H)，2.53(m，1H)，2.39(七重峰，J-6.7Hz，1H)，1.27(t，J=7.4Hz，1.5H)，1.07(m，6H)，0.97(t，J=7.4Hz，1.5H)制備實(shí)施例65-氟-3-[((R)-5-異丙基-3-(1-異喹啉基)-4，5-二氫-異嗜唑-5-羰基)-氨基]-4，4-二甲氧基-戊酸(14，W-l-異喹啉基，112=異丙基，R3，R'3=曱基)將30.1g(61.6mmol)來(lái)自前面制備實(shí)施例5的化合物(13，r^l-異喹啉基，r2=異丙基，r3，r'3=曱基，r4=乙基)以及7.76g(185mmol)氫氧化鋰單水合物一起溶解于含有168mL四氫呋喃和42mL水的混合溶劑中，在大約4(TC下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物減壓濃縮除去溶劑中的四氫呋喃，向其中加入180mL1N氫氧化鈉水溶液，混合物用120mLx2曱苯洗滌。水層用66mL6N鹽酸水溶液酸化，用150mLx3二氯曱烷萃取，合并的有機(jī)層減壓濃縮得到目標(biāo)化合物(14，r^l-異喹啉基，r2=異丙基，r3，r'3-甲基；25.4g，89%)。該化合物直接用于接下來(lái)的步驟中不再進(jìn)一步純化。^NMR(400MHz,CDC13):9.10-8.92(m，1H)，8.52(m，1H)，7.86-7.13(m，4H)，4.77(m，1H)，4.54-4.34(m，2H),3.95(2d，J-8.0Hz，1H)，3.75(2d，J=18.4Hz，1H)，3.35-3.16(2d，6H)，2.78(2dd，J=16.0，4.4Hz1H)，2.54(m，1H)，2.39(m，1H)，2.35(s,1H)，1.06(m，6H)實(shí)施例2(4《55)-5-氟甲基-5-羥基-4-({[(5i)-5-異丙基-3-(l-異奮啉基)-4，5-二氫-5-異嗜唑基]羰基}氨基)-2-二氫呋喃酮(1，R1=l-異喹啉基，R2=異丙基)將17.0g(36.9mmol)由前面制備實(shí)施例6得到的化合物(14，R^l-異全啉基，R2=異丙基，R3，R'3=甲基)和6.6mL(110腿ol)乙酸溶解于123mL(738mmol)6N鹽酸水溶液中，攪拌大約4小時(shí)。調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物內(nèi)部溫度至0。C,向其中加入150mL乙酸乙酯。緩慢加入220mL(660mmol)3N氫氧化鈉水溶液，調(diào)節(jié)pH至大約3。有機(jī)層分離后，水層用150mLx2乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用100mL鹽水洗滌，然后減壓濃縮。殘余物用50mL甲苯稀釋?zhuān)俅螠p壓濃縮得到式(15)和式(16)化合物的混合物(R'-l-異喹啉基，R2=異丙基)(15.4g，定量收率，化學(xué)純度87.0%)。NMR(500MHz，DMS(W6):8.99(m，1H)，8.65(m，1H)，8.19—7.78(m，4H)，5.15(m，1.5H),4.77(m，1H)，4.42(m，0.5H)，3.91(2d，J=17.6Hz，1H)，3.74(m，1H)，2.99(m，0.2H)，2.82(m，1H)，2.63(m，0.8H)，2.33(m,1H)，0.97(m,6H)向146mL曱苯中加入14.6g(35.2mmol)式(15)和式(16)化合物的混合物(R^l-異喹啉基，R2=異丙基)(化學(xué)純度87.0%),混合物加熱至10(TC以完全溶解。然后，向其中加入14mg目標(biāo)化合物晶種(1，R1=l-異喹啉基，R2=異丙基)，溫度緩慢降至2(TC，反應(yīng)混合物攪拌生成固體。向其中加入O.25mL(1.8mmol)二異丙基胺，在20C下攪拌大約2周，通過(guò)HPLC證實(shí)式(15)化合物和式(16)化合物(1^=1-異壹啉基，R2=異丙基)之間的比例為92.8:7.2。反應(yīng)混合物減壓濃縮除去甲苯，向其中加入88mL乙酸乙酯，混合物加熱至651C以完全溶劑。然后向其中加入88mL正己烷，緩慢降低溫度，在大約20"C下攪拌2天。所得到的固體過(guò)濾后，用15mL乙酸乙酯和15mL正己烷的混和溶劑洗滌。固體用氮?dú)飧稍锖螅玫侥繕?biāo)化合物，為白色固體(l，R^l-異喹啉基，R2-異丙基)，按式(2)化合物計(jì)算收率為54.7%(8.0g，化學(xué)純度98.6W。該結(jié)晶形式的固體NMR數(shù)據(jù)使用VACPMAS(可變振幅交叉偏振磁角旋轉(zhuǎn))在9kH旋轉(zhuǎn)速率下獲得。HNMR(CDCU:9.02(bs，1H)，8.54(d，J-5.5Hz，1H)，7.85(d，J=7.95Hz，1H)，7.70(m，3H)，7.60(bs，1H)，4.86(bs，1H)，4.2-5.2(bs，2H)，4.05(b，J=19.0Hz，1H)，3.78(b，J=19.0Hz，1H)，2.7-3.1(bm，2H)，2.40(m，1H).1.08(dd，J-6.7，4.9Hz，6H)13C腿(CDC13):173.8，172.4，160.2，147.6，141.7，136.8，130.7，129.0，127.4，127.3，126.8，122.9，92.3，82.7(d，J=215Hz),48.9(b)，44.6，34.4，33.9，17.7，16.313CNMR(固體):176,4，171.8，160.3，150.2，139.5，137.5，132.3(2C)，127.7(3C)，123.0，104.3，94.1，86.4，48.8，42.9,32.7(2C)，19.6，15.4質(zhì)量(ESI):416.14(M+l)[a](c=1.o，乙腈)實(shí)驗(yàn)實(shí)施例l穩(wěn)定性測(cè)試如圖2所示，關(guān)于對(duì)式(l)化合物(R^l-異喹啉基，R2=異丙基)的無(wú)定形形式和結(jié)晶形式的穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果，觀察到50%的無(wú)定形形式在嚴(yán)苛條件(6ox:)下28天后被破壞，而定量的結(jié)晶形式在相同條件(60。C)下甚至28天幾乎沒(méi)有任何減少。因此，應(yīng)該理解結(jié)晶形式具有比無(wú)定形形式更好的穩(wěn)定性，足以用于抑制劑或治療劑的配制。實(shí)驗(yàn)實(shí)施例2對(duì)小鼠中由LPS誘導(dǎo)的急性肝炎的治療效果步驟l:制備血樣將雄性Balb/c小鼠(6周大，CharlesRiverLaboratory,大敗，曰本)在22匸和55%相對(duì)濕度下伺養(yǎng)，同時(shí)每隔12小時(shí)不斷改變黑夜/白天。無(wú)限制地供給食物和水。將LPS(脂多糖)和D-半乳糖胺溶解于無(wú)熱原鹽水中，濃度分別為O.4mg/mL和280mg/mL,然后以l:l比例混和。將溶液以5ml/kg的量注射入小鼠中。注射LPS和D-半乳糖胺后，立即向測(cè)試動(dòng)物注射溶解了測(cè)試化合物的溶酶(由PEG400:乙醇Tween80以15:7.5:2.5組成的混合物，用鹽水l/5稀釋)或者單獨(dú)的溶酶。藥物注射8小時(shí)后，由小鼠心臟獲得血樣。步驟2:血漿轉(zhuǎn)氨酶活性測(cè)試由步驟l得到的血樣的血漿ALT活性使用ALT測(cè)試試劑盒(Asanpharmaceuticalcompany)按照制造商說(shuō)明進(jìn)行測(cè)量。觀察到施用LPS和D-半乳糖胺迅速提高了血漿中的ALT活性，測(cè)試物質(zhì)以依賴于劑量的方式抑制上述酶活性的增加。根據(jù)這些結(jié)果，使用Prisra軟件(GraphPadCo.)計(jì)算每種測(cè)試物質(zhì)的EDs。值。實(shí)驗(yàn)實(shí)施例3對(duì)小鼠中由Fas抗體誘導(dǎo)的急性肝炎的治療效果將雄性Balb/c小鼠(6周大，CharlesRiverLaboratory,大敗，日本)在22。C和55。/。相對(duì)濕度下飼養(yǎng)，同時(shí)每隔12小時(shí)改變黑夜/白天。無(wú)限制地供給食物和水。將Fas抗體溶解于無(wú)熱原鹽水中，濃度為30ug/mL，然后以5ml/kg的量向小鼠中注射該溶液。注射Fas抗體之后，立即向測(cè)試動(dòng)物注射溶解了測(cè)試化合物的溶酶(由PEG400:乙醇Tween80以15:7.5:2.5組成的混合物，用鹽水l/5稀釋)或者單獨(dú)的溶酶。注射藥物8小時(shí)后，由小鼠心臟獲得血樣。所得到的血樣的EDs。值使用上述測(cè)試方法計(jì)算。下表l示出了根據(jù)由前面實(shí)施例2和3得到的式(1)化合物的給藥途徑在急性肝炎模型中的藥理學(xué)效果測(cè)試結(jié)果。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>工業(yè)實(shí)用性根據(jù)本發(fā)明式(1)的具有環(huán)狀羧酸半縮酮的異喁唑啉衍生物具有出色的半胱天冬酶抑制活性和出色的穩(wěn)定性。此外，根據(jù)本發(fā)明的方法通過(guò)使用結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)化制備僅僅得到一種高純度的非對(duì)映異構(gòu)體。另外，如果根據(jù)本發(fā)明的具有縮酮的胺衍生物作為中間體使用，則本領(lǐng)域技術(shù)人員可以方便地制備得到具有環(huán)狀羧酸半縮酮的異嗜唑啉衍生物，而不需另外純化。權(quán)利要求1.式(1)化合物其中R1是烷基或芳基，以及R2是烷基。2.權(quán)利要求l的化合物，其中W是異喹啉基、喹啉基或萘基，以及W是甲基、乙基、丙基或丁基。3.權(quán)利要求2的化合物，其中^是異喹啉基，以及112是異丙基。4.制備式(l)化合物的方法，所述方法包括(a)活化式(2)化合物，然后將其與式(4)化合物反應(yīng)生成式(13)化合物;(b)水解式(13)化合物生成式(14)化合物;(c)脫保護(hù)式(14)化合物；以及(d)進(jìn)行結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)化；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(4)其中，W是烷基或芳基，R2是烷基，R3和R"各自是烷基，或者RS和R"與和它們相連的氧原子一起形成雜環(huán)，以及R4是垸基。5.權(quán)利要求4的方法，其中W是異喹啉基、喹啉基或萘基，R'是甲基、乙基、丙基或丁基，R'和R"各自是甲基、乙基或丙基，或者W和R"與和它們相連的氧原子一起形成二氧戊環(huán)或二氧雜環(huán)己烷，以及IT是甲基、乙基、丙基或丁基。6.權(quán)利要求4或5的方法，其中在步驟(a)中式(2)化合物通過(guò)選自草酰氯、三曱基乙酰氯、磷酰氯和亞硫酰氯中的活化試劑活化。7.權(quán)利要求4或5的方法，其中步驟(a)中的反應(yīng)在選自三乙胺、三(正丁基)胺、二異丙基乙基胺、吡啶、4-二甲氨基吡啶和4-(4-甲基-哌啶-l-基)-吡啶中的堿的存在下進(jìn)行。8.權(quán)利要求4或5的方法，其中步驟(b)中的水解在選自氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鈣中的堿的存在下進(jìn)行。9.權(quán)利要求4或5的方法，其中步驟(c)中的脫保護(hù)反應(yīng)在選自鹽酸、疏酸和三氟乙酸中的酸的存在下進(jìn)行。10.權(quán)利要求4或5的方法，其中步驟(c)中的脫保護(hù)反應(yīng)在存在或不存在選自二氯甲烷或氯仿中的溶劑的條件下進(jìn)行。11.權(quán)利要求4或5的方法，其中步驟(d)中的結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)化反應(yīng)通過(guò)加入式(1)化合物作為晶種進(jìn)行。12.權(quán)利要求ll的方法，其中步驟(d)中的結(jié)晶誘導(dǎo)的動(dòng)態(tài)轉(zhuǎn)化反應(yīng)在晶種和催化用量的堿的存在下進(jìn)行。13.權(quán)利要求12的方法，其中所述堿為選自三乙胺、三(正丁基)胺、二異丙基乙基胺、二異丙基胺、吡啶、4-二甲氨基吡啶、4-(4-曱基-哌啶-1-基)-吡啶、旋光1-苯基乙胺和旋光l-萘基乙胺中的胺。14.權(quán)利要求13的方法，其中所述胺以式(14)化合物的0.001-1.0當(dāng)量的用量使用。15.式(4)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>其中R3和R"各自是烷基，或者r3和r"與和它們相連的氧原子一起形成雜環(huán)，以及W是烷基。16.權(quán)利要求15的化合物，其中rs和r"各自是甲基、乙基或丙基，或者113和11'3與和它們相連的氧原子一起形成二氧戊環(huán)或二氧雜環(huán)己烷，以及r"是甲基、乙基、丙基或丁基。17.制備式(4)化合物的方法，所述方法包括(a)將式(9)化合物保護(hù)和脫保護(hù)生成式(1Q)化合物；(b)式(10)化合物進(jìn)行碳碳偶聯(lián)反應(yīng)生成式(11)化合物；(c)式(ll)化合物與節(jié)胺反應(yīng)，然后還原生成式(12)化合物；以及(d)氫化式(12)化合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(9)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(10)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(11)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中R3和R"各自是烷基，或者R3和R"與和它們相連的氧原子一起形成雜環(huán)，以及R4是烷基。18.權(quán)利要求17的方法，其中rs和R。各自是甲基、乙基或丙基，或者R3和R。與和它們相連的氧原子一起形成二氧戊環(huán)或二氧雜環(huán)己烷，以及W是甲基、乙基、丙基或丁基。19.權(quán)利要求17或18的方法，其中步驟(a)中的保護(hù)反應(yīng)通過(guò)使用原甲酸三曱酯或原甲酸三乙酯進(jìn)行。20.權(quán)利要求17或18的方法，其中步驟(a)中的脫保護(hù)反應(yīng)脫保護(hù)反應(yīng)在選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉和碳酸氬鈉中的堿的存在下進(jìn)行。21.權(quán)利要求17或18的方法，其中步驟(b)中的反應(yīng)通過(guò)使用氯代甲酸乙酯或氯代曱酸曱酯進(jìn)行。22.權(quán)利要求21的方法，其中步驟(b)中的反應(yīng)在選自正丁基鋰、二異丙基胺化鋰或六甲基二硅氮烷化鋰中的堿的存在下進(jìn)行。23.權(quán)利要求17或18的方法，其中步驟(c)中的還原反應(yīng)通過(guò)使用乙酸和硼氫化鈉進(jìn)行。24.權(quán)利要求17或18的方法，其中步驟(d)中的反應(yīng)在金屬催化劑的存在下進(jìn)行。25.權(quán)利要求24的方法，其中所述金屬催化劑是鈀族催化劑或蘭尼氏鎳族催化劑。26.用于治療炎癥或預(yù)防細(xì)胞凋亡的藥物組合物，其中含有根據(jù)權(quán)利要求l的式(l)化合物和可藥用載體。27.權(quán)利要求26的藥物組合物，其中所述組合物用于癡呆、腦卒中、由AIDS引起的腦損傷、糖尿病、胃潰瘍、由肝炎病毒引起的腦損傷、由肝炎病毒引起的肝病、急性肝炎、爆發(fā)性肝功能衰竭、肝硬化、敗血癥、器官移植排斥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或由于缺血性心臟病引起的心臟細(xì)胞壞死。28.權(quán)利要求3的化合物，其中所述化合物是顯示出下面的X-射線衍射圖案的結(jié)晶形式<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>29.在對(duì)象中治療炎癥或預(yù)防細(xì)胞凋亡的方法，所述^法包括向該對(duì)象施用治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求l的式(l)化合物。30.權(quán)利要求29的方法，其中所述方法用于癡呆、腦卒中、由AIDS引起的腦損傷、糖尿病、胃潰瘍、由肝炎病毒引起的腦損傷、由肝炎病毒引起的肝病、急性肝炎、爆發(fā)性肝功能衰竭、肝硬化、敗血癥、器官移植排斥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或由于缺血性心臟病引起的心臟細(xì)l包壞死。31.根據(jù)權(quán)利要求l的式(l)化合物制備用于治療炎癥或預(yù)防細(xì)胞凋亡的藥物的用途。32.權(quán)利要求31的用途，其中所述藥物用于癡呆、腦卒中、由AIDS引起的腦損傷、糖尿病、胃潰瘍、由肝炎病毒引起的腦損傷、由肝炎病毒引起的肝病、急性肝炎、爆發(fā)性肝功能衰竭、肝硬化、敗血癥、器官移植排斥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或由于缺血性心臟病引起的心臟細(xì)l包壞死。全文摘要本發(fā)明涉及用作半胱天冬酶抑制劑的式(1)的具有環(huán)狀羧酸半縮酮部分的異唑啉衍生物，其制備方法以及含有它的藥物組合物。文檔編號(hào)C07D413/12GK101128459SQ200680005984公開(kāi)日2008年2月20日申請(qǐng)日期2006年2月21日優(yōu)先權(quán)日2005年2月26日發(fā)明者崔亨旭,樸基淑,李圭雄,李栽訓(xùn),申鉉翼,許太豪申請(qǐng)人:株式會(huì)社Lg生命科學(xué)