專利名稱：唑類化合物的單賴氨酸鹽的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的水溶性唑類化合物，其適用于治療如嚴重的全身性真菌感染并適于口服、局部和胃腸外給藥。更特別的，本發(fā)明涉及新穎的具有通式I的水溶性鹽前藥
在式I中，R和R1各自為氫或(C1-C6)烷基，和A是包含仲羥基或叔羥基的類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分。本發(fā)明還包括式I鹽化合物的藥學(xué)上可接受的溶劑化物，使用該物質(zhì)的和制備該物質(zhì)的方法。

背景技術(shù)：
三唑抗真菌化合物是本領(lǐng)域中已知的。在已知的幾種類別中，一類特別有效的類別包含叔羥基。例如，美國專利第5648372號公開了(2R，3R)-3-[4-(4-氰苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-醇化合物具有抗真菌活性。美國專利第5648372的化合物如下所示。

然而，該類化合物的效用受其低水溶性的限制。例如，上述三唑化合物在pH6.8的水中溶解度為0.0006mg/mL。這極大地阻礙了適宜的胃腸外劑型的開發(fā)。
歐洲專利申請第829478號公開了一種解決該問題的方法，其中通過在分子的唑部位上接一個連接的氨基酸來增加唑類抗真菌試劑的水溶性(如下所示)。

可選的，WO97/28169公開了可將磷酸酯部分直接接到抗真菌化合物的叔羥基部分，例如具有如下式的化合物。

另一方面，美國專利第5707977號和WO95/19983公開了具有如下通式的水溶性前藥。

在上面結(jié)構(gòu)式中，X是OP(O)(OH)2或易水解的酯OC(O)RNR1R2。
相反的，WO95/17407公開了如下通式所示的水溶性唑類前藥。

在上面結(jié)構(gòu)式中，X是P(O)(OH)2、C(O)-(CHR1)n-OP(O)(OH)2或C(O)-(CHR1)n-(OCHR1CHR1)mOR2。
已經(jīng)提出了其它的唑類化合物。例如，WO96/38443公開了如下所示通式的水溶性唑類前藥。

美國專利5883097公開了水溶性氨基酸唑類前藥，如甘氨酸酯，如下所示。

公開了將膦酰氧基甲基部分引入包含羥基的藥物中，作為制備包含羥基的藥物的水溶性前藥的方法。
歐洲專利申請第604910號公開了如下所示通式的膦酰氧基甲基紫杉烷衍生物。

在上面結(jié)構(gòu)式中，R1’、R2”、R3’、R6’或R7’中的至少一個是OCH2OP(O)(OH)2。
歐洲專利申請第639577號公開了式T-[OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2]n的膦酰氧基甲基紫杉烷衍生物，其中式中的T是在C13碳原子上接有一個取代的3-氨基-2-羥基丙酰氧基的紫杉烷部分，n是1，2或3，m是0或包含端值的1-6的整數(shù)。
WO99/38873公開了二芳基1，3，4-二唑酮鉀通道開放劑的O-膦酰氧基甲基醚前藥。
Golik，J.等人在Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters(1996)第6卷第1837-1842頁公開了新穎的紫杉醇水溶性前藥，例如如下所示的前藥。
美國專利第6362172號公開了具有如下所示通式的水溶性唑類前藥。

在上面結(jié)構(gòu)式中，A是包含仲羥基或叔羥基的類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分，R和R1各自獨立地為氫或(C1-C6)烷基。
然而，美國專第6362172號的前藥不易用作口服給藥。


發(fā)明內(nèi)容
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)包含仲羥基或叔羥基的三唑抗真菌磷酸酯化合物(包括((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯)的單賴氨酸鹽較之以前公開的化合物具有出人意料的優(yōu)越性質(zhì)。具體而言，本發(fā)明涉及式I化合物的單賴氨酸鹽，或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物
在式I中，R和R1各自為氫原子或(C1-C6)烷基，優(yōu)選其一或兩者均為氫。此外在式I中，A代表包含仲羥基或叔羥基的類型的三唑抗真菌鹽化合物的非羥基部分。
式I化合物中優(yōu)選的是那些A代表包含叔羥基的類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分。
在上述類型鹽化合物的另一個實施方案中，A可以是式(i)
其中式(i)的R3代表被一個或多個(優(yōu)選1-3個)鹵素原子取代的苯基；R4代表氫原子或甲基(CH3)；R5代表氫原子，或與R4一起可代表＝CH2；R6代表5元或6元含氮環(huán)，其可任選地被一個或多個選自鹵素、＝O、CH＝CH-(C6H4)-OCH2CF2CHF2、和被一個或多個選自CN和OCH2CF2CHF2的基團取代的苯基、或被一個或多個選自鹵素和甲基吡唑基的基團取代的苯基的基團所取代。
當R6代表含氮雜環(huán)時，這樣的例子包括三唑基、嘧啶基和噻唑基，其中每個環(huán)任選地被一個或多個選自鹵素、＝O、CH＝CH-(C6H4)-OCH2CF2CHF2、和被一個或多個選自CN和OCH2CF2CHF2的基團取代的苯基、或被一個或多個選自鹵素和甲基吡唑基的基團取代的苯基的基團所取代。
A的例子包括但不限于以下



和
上述那些具體化合物中，以下是優(yōu)選的實施方案

和
式I的單賴氨酸鹽化合物更優(yōu)選的實施方案具有如下所示的結(jié)構(gòu)
式I的鹽化合物的溶劑化物形式也是本發(fā)明進一步的實施方案。
除了本發(fā)明適用于包含叔醇的結(jié)構(gòu)，還應(yīng)該理解的是該發(fā)現(xiàn)可應(yīng)用于包含仲醇的抗真菌成分。包含仲羥基的類型的三唑抗真菌鹽化合物的非羥基部分的一些例子包括，但不限于以下
或者
附圖概述

圖1顯示了(2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷的雙賴氨酸乙醇溶劑化物的吸濕性。
圖2顯示了((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸乙醇溶劑化物的吸濕性。
圖3顯示了((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸異丙醇溶劑化物的吸濕性。
圖4顯示了單賴氨酸鹽較之雙賴氨酸鹽的吸濕性。
圖5是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸乙醇溶劑化物獲得的粉末X射線衍射(PXRD)數(shù)據(jù)圖。
圖6A-6C是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸乙醇溶劑化物的NMR數(shù)據(jù)圖。
圖7是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基基)1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸乙醇溶劑化物的差示掃描量熱法(DSC)曲線。
圖8是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸乙醇溶劑化物的熱重量分析(TGA)曲線。
圖9是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基基)1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸異丙醇溶劑化物的PXRD數(shù)據(jù)圖。
圖10是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸異丙醇溶劑化物的DSC曲線。
圖11是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸異丙醇溶劑化物的TGA曲線。
圖12是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸正丙醇溶劑化物的PXRD數(shù)據(jù)圖。
圖13是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸正丙醇溶劑化物的DSC曲線。
圖14是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸正丙醇溶劑化物的TGA曲線。
實施本發(fā)明的最佳方式 當通式I的單賴氨酸鹽化合物被施加到體內(nèi)時，其作為“前藥”發(fā)揮作用，在堿性磷酸酶的存在下轉(zhuǎn)化為具備生物活性的母體唑類。此外，通式I的單賴氨酸鹽化合物具有低的吸濕性從而具備出乎意料的改進的物理穩(wěn)定性，這使其在制備過程中更易處理，同時保持合適的溶解度，使得該前藥適于口服、局部和胃腸外給藥。
本發(fā)明的單賴氨酸鹽化合物可以是水合物、溶劑化物或非溶劑化物。還可以是幾種異結(jié)構(gòu)溶劑化物形式的晶體結(jié)構(gòu)。例如，這樣的溶劑化物形式包括由水、乙醇、甲醇、異丙醇和正丙醇形成的溶劑化物形式。此外，還可以是本發(fā)明單賴氨酸鹽或其溶劑化物的晶體多晶型物。
優(yōu)選的化合物溶劑化物中A為
或
這些化合物中的第一個是最優(yōu)選的。
本發(fā)明的單賴氨酸鹽可以制成高純度且具備出乎意料的良好溶解度和低吸濕性的結(jié)晶固體，這較之相同化合物的雙賴氨酸鹽具備更好的可處理性。例如，本發(fā)明的單賴氨酸鹽可以是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的結(jié)晶鹽。
本文中所用的“(C1-C6)烷基”指具有1到6個碳原子的直鏈或支鏈飽和脂肪族基團，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基等。
本文中所用的術(shù)語“鹵素”包括氯、溴、氟和碘，優(yōu)選氯或氟，最優(yōu)選氟。
如前所述，通式I中的R和R1各自可為氫原子或長度具有1到6個碳原子的烷基。例如，R和/或R1可以是甲基或乙基。優(yōu)選的，通式I中的R和R1各自代表氫。
此外，式(i)中的R3-R6可以是若干種可能的取代基。在一個實施方案中，單賴氨酸鹽或其溶劑化物的R3為2，4-二氟苯基。在另一個實施方案中，當R5為氫原子時，單賴氨酸鹽或其溶劑化物的R4為甲基。在又一個實施方案中，式(i)的R6是4-(4-氰苯基)-噻唑-2-基。
本發(fā)明的又一個實施方案是((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸鹽，或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物，如下所示。

本發(fā)明的單賴氨酸鹽和溶劑化物可以是結(jié)晶形式，并以片劑、膠囊、粉末、溶液、懸浮液、乳劑、軟膏、洗液、乳膏或噴霧劑形式的藥物組合物使用。例如，前藥可包含單賴氨酸鹽化合物的乙醇溶劑化物晶體。
另外，式I化合物的單賴氨酸鹽或溶劑化物較之其雙賴氨酸鹽形式令人驚奇地保持了其水溶性，且由于低吸濕性具有出乎意料的改善的可處理性，這使其可用于口服以及胃腸外給藥。
此外，單賴氨酸鹽和其溶劑化物在制備和壓制(壓縮行為)中較之雙賴氨酸鹽顯示出改善的可處理性，從而適用于固體劑型(即片劑)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)單賴氨酸鹽較之雙賴氨酸鹽形式具有更低的內(nèi)聚指數(shù)，而具有與母體化合物(即立?？颠?相似的內(nèi)聚指數(shù)。單賴氨酸鹽和其溶劑化物較之雙賴氨酸形式還顯示出更大的堆積密度和搖實密度。因此，單賴氨酸形式可用于壓制(成為片劑)，藥物負載量減少，并且較之雙賴氨酸形式具有對高濕度環(huán)境更低的敏感性(無論有無包衣)這些優(yōu)點。此外，單賴氨酸鹽和其溶劑化物在溶液中穩(wěn)定(無論以其藥物物質(zhì)形式還是以制劑形式)，可以結(jié)晶形式分離并容易在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為原藥。
單賴氨酸鹽和其溶劑化物還表現(xiàn)出更好的固態(tài)穩(wěn)定性。這里的固態(tài)穩(wěn)定性意指在環(huán)境和/或加速存儲條件下的API穩(wěn)定性。例如，單賴氨酸鹽和其溶劑化物較之雙賴氨酸具有更低的吸濕(和吸濕度)，從而具有改善的、更好的可處理性。這些性質(zhì)也導(dǎo)致更好的可處理性和長期穩(wěn)定性(更低的含水量，更少的降解等)。
單賴氨酸鹽或其溶劑化物的吸濕行為與對應(yīng)的雙賴氨酸鹽或其溶劑化物在更低的RH值下(例如0％直至50％RH)的吸濕行為相當，但在更高的高于50％RH的RH值下則令人驚奇地低很多(例如在60％RH下單賴氨酸單乙醇化物的重量變化為2-3％而雙賴氨酸單乙醇化物的重量變化為10％)。如圖1-4中所見，較之雙賴氨酸鹽化合物，單賴氨酸鹽化合物在相對濕度高和高溫條件下具有出乎意料的改善的可處理性和吸濕量。
圖1顯示了(2R，3R)-[4(4-氰苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷的雙賴氨酸乙醇溶劑化物的吸濕。給出了相比于相對濕度(x-軸)重量的變化(y-軸)，其中—○—所示為吸附，—●—為解吸附。
圖2顯示了((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸乙醇溶劑化物的吸濕，其中給出了相比于相對濕度(x-軸)的重量變化(y-軸)，其中—○—所示為吸附，—●—為解吸。
圖3顯示了((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸異丙醇溶劑化物的吸濕，其中給出了相比于相對濕度(x-軸)的重量變化(y-軸)，其中—○—所示為吸附，—●—為解吸。
圖4顯示了單賴氨酸鹽和雙賴氨酸形式(也稱為二賴氨酸)相比較的吸濕數(shù)據(jù)，其中給出了相比于相對濕度(x-軸)的重量變化(y-軸)，—◆—代表雙賴氨酸形式，—▲—代表單賴氨酸形式。
圖5顯示了((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸乙醇溶劑化物(實施例1)的PXRD重疊圖，其為單晶結(jié)構(gòu)的模擬圖對比堆積樣品的實驗收集圖。
圖6A-6C涉及實施例1的核磁共振數(shù)據(jù)。圖6A涉及H-1NMR數(shù)據(jù)；圖6B涉及F-19NMR數(shù)據(jù)；圖6C涉及P-31NMR數(shù)據(jù)。
圖7是實施例1的DSC曲線，其中y-軸為熱流(W/g)，x-軸為溫度(℃)。
圖8是實施例1的TGA曲線(y-軸為重量(％)，x-軸為溫度(℃))。
圖9描繪了((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸異丙醇溶劑化物(實施例5)的PXRD重疊圖，其為單晶結(jié)構(gòu)的模擬圖對比堆積樣品的實驗收集圖。
圖10是實施例5的DSC曲線，其中y-軸為熱流(W/g)，x-軸為溫度(℃)。
圖11是實施例5的TGA曲線(y-軸為重量(％)，x-軸為溫度(℃))。
圖12描繪了((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸正丙醇溶劑化物(實施例6)的PXRD重疊圖，其為單晶結(jié)構(gòu)的模擬圖對比堆積樣品的實驗收集圖。
圖13是實施例6的DSC曲線，其中y-軸為熱流(W/g)，x-軸為溫度(℃)。
圖14是實施例6的TGA曲線(y-軸為重量(％)，x-軸為溫度(℃))。
本發(fā)明的單賴氨酸鹽和其溶劑化物可通過以下一般反應(yīng)路線制備。在本方法中，A代表包含仲羥基或叔羥基的三唑抗真菌化合物的非羥基部分，Pr代表常規(guī)的羥基保護基例如叔丁基、芐基或烯丙基，R和R1各自獨立為氫或(C1-C6)烷基。最優(yōu)選R和R1都為氫。

為了詳細說明本方法，目標抗真菌母體化合物II通過在合適的堿存在下用氯化物中間體III進行O-烷基化，轉(zhuǎn)化為磷酸酯中間體IV(第一中間體)。所述合適的堿可以是氫化鈉、氫化鉀、氨基鈉、叔丁醇鈉、叔丁醇鉀、二(三甲基甲硅烷基)氨基鈉、二(三甲基甲硅烷基)氨基鉀、或者其聯(lián)合，例如氫化鈉加二(三甲基甲硅烷基)氨基鈉。該反應(yīng)步驟可以在惰性有機溶劑中進行，例如四氫呋喃、甲基四氫呋喃、甲基叔丁基醚、乙醚或者二甲基乙酰胺中，溫度為大約0℃到50℃，更優(yōu)選大約20℃到40℃，最優(yōu)選大約40℃。最優(yōu)選的堿是氫化鈉，最優(yōu)選的溶劑是四氫呋喃。最優(yōu)選的R是氫，而最優(yōu)選的R1也是氫。
磷酸酯中間體IV隨后進行常規(guī)的脫保護步驟以脫去羥基保護基Pr，隨后形成式V的(第二)中間體(參見T.W.Greene等人，Protecting Groups in OrganicSynthesis，John Wiley & Son(1991)，在此引入作為參考)。該步驟所用的試劑取決于所用的具體羥基保護基，但這是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。最優(yōu)選的羥基保護基是叔丁基，其可用三氟乙酸、鹽酸或甲酸在適宜的惰性有機溶劑中除去。所述惰性有機溶劑可以是，例如二氯甲烷、二氯乙烷、甲苯或者三氟甲基苯。在二叔丁酯的優(yōu)選脫保護步驟中，優(yōu)選在大約0℃到40℃下用三氟乙酸在二氯甲烷中進行脫保護步驟，最優(yōu)選的溫度為大約0-5℃。
中間產(chǎn)物V可隨后通過常規(guī)方法回收和純化，例如反相C18柱色譜法或溶劑萃取。當然，中間產(chǎn)物V也可通過常規(guī)方法轉(zhuǎn)化為如前所述的所需的藥學(xué)上可接受的鹽。中間產(chǎn)物V隨后與賴氨酸源混合得到本發(fā)明的單賴氨酸鹽。
特別的，中間產(chǎn)物V被溶于溶劑中(例如低級醇)以形成游離酸溶液。隨后，加熱該游離酸溶液(包含中間產(chǎn)物V)并用賴氨酸(即L-賴氨酸)水溶性溶液處理，其中pH調(diào)節(jié)到大約3.5到大約6.0之間，優(yōu)選大約4.2到大約5.5之間，得到最終產(chǎn)物I。該狹小的pH范圍有益于得到純的式I的單賴氨酸鹽而不會污染產(chǎn)生雙賴氨酸鹽雜質(zhì)。

上述反應(yīng)中純化的試劑III的使用導(dǎo)致中間體IV的收率相當?shù)?大約10-35％的收率)，從而導(dǎo)致產(chǎn)物I的總收率較低。然而，當在上述反應(yīng)的O-烷基化步驟中加入碘離子源時，中間體IV的收率出乎意料地增加到大約90％，因此也顯著增加了中間體產(chǎn)物V的收率。人們認為碘離子的加入可導(dǎo)致原位形成相應(yīng)的碘化物中間體式IIIa
且該試劑的使用大幅度增加了中間體IV的收率。然而，試圖在上面反應(yīng)的第一步中直接用中間體IIIa替代中間體III，卻因碘化物試劑IIIa較之氯化物中間體III極大降低的穩(wěn)定性而未能成功。一種成功的可選方法包括在堿例如NaH(其還可作為碘的還原劑起作用)存在下將碘和氯化物中間體III一起用于O-烷基化步驟中。人們認為碘被還原為碘離子，其隨后將氯化物中間體III原位轉(zhuǎn)化為碘化物中間體IIIa有助于該方法的這一步驟。下面的實施例顯示了利用碘元素的O-烷基化步驟，這是實施本反應(yīng)得到中間體IV的優(yōu)選方法。
通過加入碘離子源或通過碘和試劑III在強堿下反應(yīng)原位形成碘化物試劑IIIa，中間體IV收率的極大增加使得獲得中間產(chǎn)物V的收率加大增加。當然，這使得式I的單賴氨酸鹽及其溶劑化物的收率極大增加。
碘離子源優(yōu)選碘化鈉，但也包括碘化鋰、碘化銫、碘化鎘、碘化鈷、碘化銅、碘化銣、碘化鋇、碘化鋅和碘化鈣。每當量母體化合物A-OH通常使用大約2-3當量的碘化物鹽。
當偶合步驟使用碘元素時，每當量母體化合物A-OH使用大約0.1到1.0當量的碘，優(yōu)選0.5當量的碘。
使用碘或碘離子時所用的堿和溶劑與上面所述的使用試劑III時所用的實質(zhì)上相同。
可以理解的是上述反應(yīng)中所用的取代基團包括一些反應(yīng)敏感的官能團如氨基或羧酸酯基(其可能導(dǎo)致不希望的副反應(yīng))時，這些基團可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)保護基進行保護。適宜的保護基和其脫去方法，例如被闡述在Protective Groups in Organic Synthesis，Theodora W.Greene(John Wiley &Sons，1991)中。
可以理解的是式I范圍內(nèi)的一些產(chǎn)物可能具有能導(dǎo)致光學(xué)異構(gòu)體形成的取代基。本發(fā)明試圖在其范圍內(nèi)包括所有這些光學(xué)異構(gòu)體以及其差向異構(gòu)體混合物，即R-或S-或外消旋形式。
本發(fā)明的藥學(xué)活性的鹽或其溶劑化物可以單獨使用或配制為醫(yī)學(xué)或藥物組合物，其除了包括活性三唑成分外還包含藥學(xué)上可接受的載體、輔料或稀釋劑。
藥物組合物可以是固體形式例如膠囊、片劑、粉末等，或液體形式，如溶液、懸浮液或乳劑。這樣的膠囊、片劑等，可包含控釋的制劑。這樣的固體形式，例如明膠膠囊或壓制片，可以任何常規(guī)方法制備。例如，活性化合物可引入包含藥學(xué)上可接受的載體的制劑，例如賦形劑(例如淀粉、乳糖)、粘合劑(例如明膠、纖維素、樹膠)、崩解劑(例如藻酸鹽、Primogel和玉米淀粉)、潤滑劑(例如硬脂酸鎂、二氧化硅)以及甜味劑或者調(diào)味劑(例如葡萄糖、蔗糖、糖精、水楊酸甲酯和薄荷)。還可制備不同的包衣用于膠囊和片劑以改變膠囊和片劑的香味、味道、顏色和形狀。另外，液體載體例如脂肪油、無菌水、聚乙二醇、非離子型表面活性劑以及食用油如玉米、花生和芝麻油，都是與活性成分的性質(zhì)和所需要的特定給藥方式相適應(yīng)的。通常用于制備藥物組合物的助劑可有益地包括，例如調(diào)味劑、著色劑、防腐劑和抗氧化劑如維生素E、抗壞血酸、BHT和BHA。組合物可以是即可使用的形式或用于在給藥的時候用適當?shù)妮d體如無菌水重新配制的粉末形式。
例如，片劑可以通過任選與一種或多種助劑壓制或模塑制備。壓制片劑可通過在適當?shù)脑O(shè)備中壓縮自由流動形式的活性成分，包括但不限于粉末或顆粒(任選地與藥學(xué)可接受的載體混合)來制備，后者可包含一種或多種潤滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑或者分散劑等等。模制片劑可通過在適當?shù)脑O(shè)備中將用惰性液體稀釋劑濕化的粉末狀化合物的混合物模塑制備。組合物中發(fā)現(xiàn)的活性成分的含量可根據(jù)施加給病人的活性成分的量而變化。
此外，由于通式I的單賴氨酸鹽和/或其溶劑化物因其低吸濕性和良好的溶解性在加工過程中具有改善的可處理性，本發(fā)明的化合物可以凍干制劑的形式給藥。另外，這些性質(zhì)使得本發(fā)明化合物可以多種方式給藥。給藥在本文中意味著若干給藥方式。例如，給藥可以是口服、局部或胃腸外(包括靜脈內(nèi)、血管內(nèi)、腹腹內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、胸骨內(nèi)和輸注技術(shù))，其中該給藥使用有效或治療抗真菌量的鹽化合物。哺乳動物受治療者(例如人、狗、貓、馬、豬等)在需要它時可接受這樣的口服、局部或胃腸外給藥。
適于注射用的藥物溶液包括無菌水溶液或分散體和用于臨時制備無菌注射溶液或分散體的無菌粉末。添加劑包括助溶劑(例如水楊酸鈉、乙酸鈉)、緩沖劑(例如檸檬酸鈉、甘油)、等滲化劑(例如葡萄糖)和穩(wěn)定劑(例如聚乙二醇)?；钚喳}或溶劑化物作為游離堿的溶液或懸浮液可以在甘油、液體、聚乙二醇、其在油中的混合物，或一些其它的非毒性的胃腸外給藥可接受的稀釋劑或溶劑中制備，例如，在1，3-丁二醇中形成溶液。可以使用的可接受的載體和溶劑是水，林格溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，無菌、不揮發(fā)油類常用作溶劑或懸浮介質(zhì)。在常規(guī)的儲藏和使用條件下，這些制劑包含防腐劑。另外，用于注射的組合物可以單位劑型制備裝入安瓿或多劑量容器中，并可包含如懸浮、穩(wěn)定和分散劑等添加劑。在所有情況下，所述形式必須是無菌的并必須是流動的至容易注射的程度。其在制備和儲藏條件下必須穩(wěn)定并必須保存抵抗微生物如細菌的污染。所述載體可以是溶劑或分散介質(zhì)，包括如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇)、其合適的混合物和植物油。
另外，給藥劑量可以變化。給藥劑量在很大程度上取決于所使用的特定化合物，所制備的特定組合物、給藥途徑、宿主的屬性和情況以及治療的特定部位和生物。然后讓特定優(yōu)選劑量和應(yīng)用途徑的選擇由醫(yī)生或獸醫(yī)決定并可通過常規(guī)方法確定。
另外，給藥次數(shù)可以變化。然而通常所述鹽或溶劑化物化合物可以大約5mg/天到大約1.0g/天的劑量以胃腸外或口服形式向哺乳動物宿主給藥。這些劑量是具有代表性的平均情況，可能存在需要更高或更低劑量的個別情況，這些劑量都屬于本發(fā)明的范圍內(nèi)。另外，本發(fā)明化合物的給藥可以單次劑量或分次劑量進行。
當采用胃腸外或口服給藥時，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠確定所述鹽化合物的合適劑量和給藥次數(shù)。
當口服給藥時，所述鹽化合物的合適劑量為85mg到1020mg，大致每天一次到一天三次。
當胃腸外給藥時，所述鹽化合物的合適劑量為85mg到1020mg，大致每天一次到一天三次。
可選的，本發(fā)明的化合物可以栓劑或陰道栓劑的形式給藥，或者它們可以洗液、溶液或乳膏形式局部給藥。另外，可將其摻入(濃度直到10％)由白蠟或軟白石蠟基質(zhì)以及需要的穩(wěn)定劑和/或防腐劑組成的軟膏中。
對于局部給藥，所述組合物每天可用于被影響部位2到4次，或其一些其它變化形式。
適于局部給藥的制劑包括液體或半液體的適于透過皮膚的制劑(例如涂沫劑、洗液、軟膏、乳膏劑或者糊劑)。這樣的局部給藥的制劑可包括一種或多種增稠劑、濕潤劑、和/或潤膚劑包括然而并非限于黃原膠、軟石蠟、蜂蠟、或者聚乙二醇、山梨糖醇、礦物油、羊毛脂、角鯊烯等等。例如，在洗液或乳膏劑中，本發(fā)明的鹽或溶劑化物懸浮或溶解在如一種或多種如下物質(zhì)的混合物中礦物油、脫水山梨醇單硬脂酸酯、聚乙二醇、液體石蠟、聚山梨酯60、十六烷基酯蠟、十六十八醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。對于包含活性鹽或溶劑化物的軟膏制劑，活性成分懸浮或溶解在如一種或多種如下物質(zhì)的混合物中礦物油、液體凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧化乙烯聚氧化丙烯化合物、乳化蠟和水。本發(fā)明的活性成分鹽或溶劑化物的合適的局部給藥劑量是0.1mg到150mg，每天1到4次，優(yōu)選1到2次。對于局部給藥，活性成分可占0.001％到10％w/w，例如1％到2％，基于制劑的重量，盡管可以包含多達制劑的10％w/w，但優(yōu)選不超過5％w/w，更優(yōu)選0.1％到1％。
本發(fā)明的鹽或其溶劑化物還可以鼻內(nèi)或吸入方式給藥，并以干燥粉末吸入器或由增壓容器、泵、噴霧器或霧化器借助合適的推進劑，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、氫氟烷烴例如1，1，1，2-四氟乙烷(HFA 134A[商品名])或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷(HFA 227EA[商品名])、二氧化碳或者其他的適當?shù)臍怏w提供的氣溶膠噴射從而便利地給藥。在增壓氣霧劑的情況下，劑量單位可通過提供遞送定量的閥門來確定。增壓容器、泵、噴霧器或霧化器可包含活性鹽或溶劑化物的溶液或懸浮液，例如，利用乙醇和推進劑的混合物作為溶劑，其可額外包含潤滑劑，例如去水山梨糖醇三油酸酯。用于吸入器或吹藥器的膠囊和藥筒(如由明膠制備的)可以被配制以包含本發(fā)明化合物和適當?shù)姆勰┗|(zhì)例如乳糖或淀粉的粉末混合物。噴霧組合物例如包含式I的新穎鹽(或其溶劑化物)和上面提到的藥學(xué)上可接受的液體載體的溶液。噴霧也可用于局部給藥。吸入組合物也包含式I的新單賴氨酸鹽或其溶劑化物和上面提到的可接受的推進劑。
本發(fā)明的單賴氨酸鹽或其溶劑化物是有用的，因為其對動物具有藥理學(xué)活性，特別包括哺乳動物，最特別的是人類。特別的，本發(fā)明的鹽或溶劑化物可用于治療或預(yù)防局部的真菌感染，包括由念珠菌屬(Candida)、毛癬菌屬(Trichophyton)、小孢子菌屬(Microsporum)或者表皮癬菌屬(Epidermophyton)的物種引起的真菌感染。另外，其可用于治療或預(yù)防白色念珠菌(Candida albicans)引起的粘膜感染。其還可用于治療或預(yù)防由例如白色念珠菌、新型隱球菌(Cryptococcus neoformans)、黃曲霉(Aspergillus flavus)、煙曲霉(Aspergillus fumigatus)、球孢子菌屬(Coccidioides)、副球孢子菌屬(Paracoccidiodes)、組織胞漿菌屬(Histoplasma)或者芽生菌屬(Blastomyces)的物種引起的全身性真菌感染。
因此，根據(jù)本發(fā)明的另一個方面，提供治療真菌感染的方法，其包括對宿主施用藥學(xué)上或治療上有效量的所述化合物。該宿主特別是哺乳動物宿主，最特別是人類患者。
還提供本發(fā)明的鹽或其溶劑化物用作藥物的用途，以及本發(fā)明化合物在制備用于治療真菌感染的藥物中的用途。
本發(fā)明化合物的抗真菌活性的體外評估可通過測定最小抑制濃度(MIC)來進行。MIC是測試化合物抑制測試微生物生長的濃度。在測試中，一系列的瓊脂平板(各自摻入了特定濃度的測試化合物)被接種真菌株隨后各個平板在37℃下孵化48小時。檢查平板上真菌生長與否，并記錄相關(guān)濃度。可用于該試驗的微生物包括白色念珠菌、煙曲霉、毛癬菌屬物種、小孢子菌屬物種、絮狀表皮癬菌(Epidermophyton floccosum)、粗球孢子菌(Coccidioides immitis)和光滑球擬酵母(Torulopsos galbrata)。應(yīng)該認識到，作為前藥，本發(fā)明的某些鹽或其溶劑化物在體外測試中可能不具備活性。
本發(fā)明的鹽或其溶劑化物的活體內(nèi)評估可通過對接種了一種真菌株(如白色念珠菌)小鼠以一系列劑量水平腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)注射或口服來執(zhí)行?；钚酝ㄟ^比較在未處理組小鼠死亡后不同劑量水平的處理組小鼠的存活來測定。記錄測試鹽或溶劑化物提供50％的防感染致死效應(yīng)的劑量水平。
本發(fā)明的單賴氨酸鹽或其溶劑化物由于低吸濕性同時保持了母體三唑抗真菌化合物的良好溶解性而出乎意料地增加了可處理性并且還釋放生物活性化合物(例如作為前藥發(fā)揮作用)。例如，如圖2所示，乙醇溶劑化物形式在60％RH下具有＜2.5％的吸附重量變化和＜5％的解吸重量變化。作為另一個例子，異丙醇溶劑化物在60％RH下具有＜0.5％的吸附重量變化和＜1％的解吸重量變化。
實施例 下面的實施例對本發(fā)明進行說明但并無意限制本發(fā)明。實施例中所用的縮寫為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)縮寫。所使用的一些縮寫如下 h＝小時 rt＝室溫 mmol＝毫摩爾 g＝克 THF＝四氫呋喃 mL＝毫升 L＝升 Et2O＝乙醚 EtOAc＝乙酸乙酯 TFA＝三氟乙酸 CH2Cl2＝二氯甲烷 CH3CN＝乙腈 在隨后的實施例中，給出的所有溫度都為攝氐度(℃)。熔點由電熱儀器測量且沒有校正。質(zhì)子核核磁共振(1H NMR)光譜由Bruker-500、BrukerAM-300或Varian Gemini 300分光計記錄。除非另有指出，所有的光譜以CDCl3或D2O測量?；瘜W(xué)位移以相對于四甲基硅烷(TMS)或參考溶劑峰的δ單位(ppm)報告，質(zhì)子間偶合常數(shù)以赫茲(Hz)報告。分裂圖式如下所指示s，單峰；d，雙重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；br，寬峰；dd，雙重峰的雙重峰；dt，三重峰的雙重峰；和app d，明顯的雙重蜂，等。質(zhì)譜以利用直接化學(xué)電離(DCI，異丁烯)、快原子轟擊(FAB)或電子離子噴射(ESI)的Kratos MS-50或Finnegan 4500儀器來記錄。
分析型薄層色譜法(TLC)在預(yù)涂好的硅膠板(60F-254)上進行并利用紫外光、碘蒸汽和/或通過甲醇磷鉬酸加熱著色顯像。反相色譜法利用C18硅膠(Waters公司制備型C18 125A)在玻璃柱中以稍高于大氣壓的壓力進行。
實施例1 ((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯單賴氨酸鹽乙醇溶劑化物
步驟A 烘箱干燥的1L圓底燒瓶裝有機械攪拌器、氮氣入口轉(zhuǎn)接器、裝備橡膠隔片的壓力平衡添加漏斗和溫度探針，向其中加入氫化鈉(2.89g，0.069mol，60％)和THF(50mL)。將溶于30mL THF中的(2R，3R)-3-[4-(4-氰苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇(式B)(10g，0.023mol)在室溫下用20分鐘滴加到該攪拌后的懸浮液中。攪拌45分鐘后，將溶于30mLTHF中的碘(2.99g，0.0115mol)溶液用10分鐘滴加加入，隨后用15分鐘滴加加入二叔丁基氯甲基磷酸酯(式III)(13.29g，0.035mol，～68％純度)。反應(yīng)混合物在約41℃下攪拌4小時使反應(yīng)完成。以過程中HPLC判斷反應(yīng)是否完成。

將該反應(yīng)混合物倒入冰水(100mL)中。分離水相并以乙酸乙酯萃取(3×50mL)，混合的有機萃取物以10％的硫代亞硫酸鈉(50mL)、水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，硫酸鎂干燥并減壓濃縮，得到淺黃色油狀物(22.8g，過程中HPLC～97面積百分比)。粗產(chǎn)物(式IV)在步驟B中按原態(tài)使用。
步驟B 圓底燒瓶裝有磁性攪拌器、冷卻浴、pH探針和氮氣進出口，向其中加入溶于CH2Cl2(23mL)的上述步驟A的產(chǎn)物(式IV)(7.5g)并冷卻到0℃。向該攪拌的溶液中緩慢加入三氟乙酸(8.8mL)并攪拌3小時至完成反應(yīng)。以過程中HPLC判斷反應(yīng)是否完成。將該反應(yīng)混合物倒入2N NaOH(64mL)的冷卻溶液中。反應(yīng)混合物以乙酸叔丁酯萃取(2×65mL)去除所有的有機雜質(zhì)。含有雙鈉鹽產(chǎn)物的水層以活性炭(10g)處理并以硅藻土層過濾。清濾液以1N HCl酸化到pH2.5。游離酸產(chǎn)物被萃取到乙酸乙酯(2×50mL)中。混合的有機層以水洗滌，MgSO4干燥，過濾，濾液減壓濃縮得到3.39g粗產(chǎn)物V。可選地，在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，步驟B可以連續(xù)過程進行，其細節(jié)可由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來確定。

步驟C 將上面得到的產(chǎn)物V溶于甲醇(75mL)中。將L-賴氨酸(1.8g)加入該游離酸溶液中并維持pH在4.2到5.5，混合物在60℃加熱4.5小時。熱反應(yīng)物以硅藻土層過濾。濾液濃縮到大約5mL，與乙醇(100mL)混合并加熱到65℃以結(jié)晶出單賴氨酸鹽的溶劑化物。該溶劑化物收集到布氏漏斗上并真空干燥，得到3.71g呈結(jié)晶固體的標題溶劑化物化合物。

對于實施例1，收集粉末X射線衍射數(shù)據(jù)(PXRD)(見圖5)，單晶的X射線晶體學(xué)數(shù)據(jù)(表1-2)和核磁共振光譜數(shù)據(jù)(圖6A、6B、6C)，并獲得了差示掃描量熱曲線(圖7)和熱重量分析(TGA)曲線(圖8)。
表1實施例1的晶體數(shù)據(jù)和結(jié)構(gòu)細化 表2原子坐標(×104)和等量同位素置換參數(shù)(×103).U(eq)定義為正交化Uij張量的痕量的三分之一。
實施例2 1-((2S，3S)-3-(4-(4-(4-(4(((3S)-5-((1H-1，2，4-三唑-1-基)甲基)-5-(2，4-二氟苯基)-四氫呋喃-3-基)甲氧基)苯基)哌嗪-1-基)苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三唑-1-基)戊-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯單賴氨酸鹽 重復(fù)實施例1的步驟A，只是用下面化合物代替式B化合物
得到式IV’化合物的粗產(chǎn)物并原態(tài)用于步驟B
重復(fù)實施例1的步驟B，只是用式IV’化合物代替式IV化合物，得到粗產(chǎn)物V’
重復(fù)實施例1的步驟C，只是用式V’化合物代替式V化合物制備單賴氨酸鹽化合物
實施例3 ((2R，3R)-3-(3-((E)-4-(2，2，3，3-四氟丙氧基)苯乙烯基)-1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯單賴氨酸鹽 重復(fù)實施例1的步驟A，只是用下面化合物代替式B化合物
得到式IV”化合物的粗產(chǎn)物并原態(tài)用于步驟B
重復(fù)實施例1的步驟B，只是用式IV”化合物代替式IV化合物，得到粗產(chǎn)物V”
重復(fù)實施例1的步驟C，只是用式V”化合物代替式V化合物制備單賴氨酸鹽化合物
實施例4 1-(2S，3S)-3-(4-(4-(4-(4(((3S)-5-((1H-1，2，4-三唑-1-基)甲基)-5-(2，4-二氟苯基)-四氫呋喃-3-基)甲氧基)苯基)哌嗪-1-基)苯基)-5-氧代-4，5-二氫-1，2，4-三唑-1-基)戊-2-基氧基)丙基二氫磷酸酯單賴氨酸鹽 重復(fù)實施例1的步驟A，只是用下面化合物代替式B化合物
得到式IV化合物的粗產(chǎn)物，其中氯化物中間體III的R1是乙基且R是氫，并原態(tài)用于步驟B
重復(fù)實施例1的步驟B，只是用式IV化合物代替式IV化合物，得到粗產(chǎn)物V
重復(fù)實施例1的步驟C，只是用式V化合物代替式V化合物制備單賴氨酸鹽化合物
實施例5 ((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯單賴氨酸鹽異丙醇溶劑化物 重復(fù)實施例1的步驟A、B、C，只是將步驟C的濾液濃縮并與異丙醇(100mL)混合并加熱到65℃以使單賴氨酸鹽的溶劑化物結(jié)晶。將溶劑化物收集到布氏漏斗上并真空干燥，得到呈結(jié)晶固體的標題溶劑化物化合物。
對于實施例5，收集了粉末X射線衍射數(shù)據(jù)(PXRD)(見圖9)，單晶的X射線晶體學(xué)數(shù)據(jù)(表3-4)，并獲得了差示掃描量熱(DSC)曲線(圖10)和熱重量分析(TGA)曲線(圖11)。
表3實施例5的晶體數(shù)據(jù)和結(jié)構(gòu)細化 表4原子坐標(×104)和等量同位素置換參數(shù)(×103).U(eq)定義為正交化Uij張量的痕量的三分之一。
實施例6 ((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯單賴氨酸鹽正丙醇溶劑化物 重復(fù)實施例1的步驟A、B、C，只是將步驟C的濾液濃縮并與正丙醇(100mL)混合并加熱到65℃以使單賴氨酸鹽的溶劑化物結(jié)晶。將溶劑化物收集到布氏漏斗上并真空干燥，得到呈結(jié)晶固體的標題溶劑化物化合物。
對于實施例6，收集了粉末X射線衍射數(shù)據(jù)(PXRD)(見圖12)，單晶的X射線晶體學(xué)數(shù)據(jù)(表5-6)，并獲得了差示掃描量熱曲線(圖13)和熱重量分析(TGA)曲線(圖14)。
表5實施例6的晶體數(shù)據(jù)和結(jié)構(gòu)細化 表6原子坐標(×104)和等量同位素置換參數(shù)(×103).U(eq)定義為正交化Uij張量的痕量的三分之一。
對比實施例1 (2R，3R)-3-[4-(4-氰苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷的雙賴氨酸鹽 在步驟A和B之后將由實施例1得到的上述式V產(chǎn)物，溶于甲醇(75mL)。向其中加入L-賴氨酸(1.8g)，pH維持在7.0到9.0，混合物在60℃加熱4.5小時。熱反應(yīng)物以硅藻土層過濾。濾液濃縮到大約5mL，與乙醇(100mL)混合并加熱到65℃以結(jié)晶出雙賴氨酸鹽。該鹽收集到布氏漏斗上并真空干燥，得到3.71g呈灰白色結(jié)晶固體的標題化合物。
對比實施例2 (2R，3R)-3-[4-(4-氰苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷的雙-三羥甲基氨基甲烷鹽 將對比實施例1(10g，11.3mmol)溶于水中。加入22.6mL1N HCl使pH為2.65，并加入70mL乙酸乙酯用于萃取?；旌衔镉?0mL水洗滌。乙酸乙酯層的游離酸被分離，其中水層以乙酸乙酯萃取(30mL×2)，乙酸乙酯層真空濃縮得到380mg透明固體。加入溶于3.6mL水(70-80℃)中的2.596g的三羥甲基氨基甲烷胺鹽。得到乳狀懸浮液。反應(yīng)混合物加熱到50-55℃持續(xù)兩小時，冷卻到室溫并攪拌18小時。過濾并以乙酸乙酯漂洗。雙-三羥甲基氨基甲烷鹽收集到布氏漏斗上并真空干燥，得到7.92g呈灰白色結(jié)晶固體的化合物。
對比實施例3 (2R，3R)-3-[4-(4-氰苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷的叔丁胺鹽 在步驟A和B之后將由實施例1的產(chǎn)物IV的溶液，溶于50mL乙酸乙酯中并在氮氣氛中向其中加入叔丁胺(5.3mL)。反應(yīng)混合物在40℃下攪拌約1小時使產(chǎn)物結(jié)晶。雙叔丁胺鹽收集到布氏漏斗上并真空干燥，得到2.21g呈灰白色結(jié)晶固體的化合物。
對比實施例4 (2R，3R)-3-[4-(4-氰苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二氫膦酰氧基)甲氧基]丁烷，鈉鹽
步驟A
向(2R，3R)-3-[4-(4-氰苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-醇，2，(8.74g，20mmol)溶于THF(40mL)的溶液中在氮氣氛中和室溫下加入氫化鈉(0.80g，60％油溶液，20mmol)。所得混合物在室溫下攪拌0.25小時然后加入二叔丁基氯甲基磷酸酯，3，(10.3g，40mmol)。反應(yīng)混合物在50℃加熱16小時。該反應(yīng)混合物隨后冷卻到室溫并減壓濃縮。所得殘余物溶于Et2O中并以水和鹽水洗滌。有機層以MgSO4干燥并減壓濃縮得到17.0g膠狀物的粗化合物，4。小部分的該粗化合物通過C18反相色譜法純化。色譜柱依次以30％CH3CN/H2O，38％CH3CN/H2O，45％CH3CN/H2O和50％CH3CN/H2O洗脫。含產(chǎn)物的級分減壓濃縮以除去CH3CN。所得水層隨后以Et2O萃取。Et2O層以鹽水洗滌，干燥并減壓濃縮得到純化的白色固體狀的化合物，4。光譜數(shù)據(jù)如下1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，7.98(d，2H，J＝9)，7.76(s，1H)，7.71(d，2H，J＝9)，7.63(s，1H)，7.36-7.27(m，1H)，6.86-6.78(m，2H)，5.53(dd，1H，J＝28，6)，5.53(dd，1H，J＝9，6)，5.17(d，1H，J＝15)，5.03(d，1H，J＝15)，4.01(q，1H，J＝7)，1.47(s，9H)，1.45(s，9H)，1.37(d，3H，J＝7)。MS[ESI+(M+H+]測定值660.2。
步驟B
將粗制的(2R，3R)-3-[4-(4-氰苯基)噻唑-2-基]-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)-2-[(二叔丁基膦酰氧基)甲氧基]丁烷，4，(17g)溶于CH2Cl2(100mL)中。向該溶液中加入TFA(50mL)并在室溫下攪拌反應(yīng)混合物0.25小時。反應(yīng)混合物隨后減壓濃縮。向殘留物中加入H2O(200mL)，Et2O(100mL)和EtOAc(100mL)。水層的pH通過加入固體Na2CO3調(diào)節(jié)到7.6，隨后分離有機層和水層。水層隨后用400g C-18的反相色譜法處理，以水到5％CH3CN/H2O洗脫。含產(chǎn)物的級分減壓濃縮，冷凍并凍干得到1.5g白色固體狀的化合物，1.(1.5g，12％，兩步)。光譜數(shù)據(jù)如下1H NMR(500MHz，D2O)δ8.91(s，1H)，7.92(s，1H)，7.81(d，2H，J＝8)，7.80(s，1H)，7.77(d，2H，J＝8)，7.21(dd，1H，J＝15，9)，6.99(ddd，1H，J＝9，9，2)，6.91(ddd，1H，J＝9，9，2)，5.35(dd，1H，J＝6，6)，5.29(d，1H，J＝15)，5.21(dd，1H，J＝6，6)，5.19(d，1H，J＝15)，3.86(q，1H，J＝7)，和1.35(d，3H，J＝7)；MS[(ESI-(M-H)-546.1]；C23H18F2N5O5S1P1/Na2/3.5H2O的分析計算值C，42.21H，3.85N，10.70Na，7.03.測定值C，42.32H，3.83N，10.60Na，7.04。
二叔丁基氯甲基磷酸酯，3，可通過下列任意方法制備。
方法1 二叔丁基磷酸銀(6.34g，20mmol)，其通過混合二叔丁基磷酸酯(由二叔丁基亞磷酸酯通過Zwierzak和Kluba，Tetrahedron，第27卷，3163(1971)的方法制得)與1當量的碳酸銀在50％乙腈水溶液中混合并凍干制得，與氯碘甲烷(35g，200mmol)在苯中混合并在室溫下攪拌18小時。過濾反應(yīng)混合物并將濾液減壓濃縮。殘余物經(jīng)二氧化硅色譜法并以2∶1己烷-乙酸乙酯洗脫。適當?shù)募壏譂饪s至干得到副標題化合物3(3.7g，收率71％)1H NMR(CDCl3)δ5.63(d，2H，J＝17)，1.51(s，18H)；MS(MH+＝259)。
方法2 二叔丁基磷酸四丁銨通過將二叔丁磷酸酯(20g，94mmol(由二叔丁基亞磷酸酯通過Zwierzak和Kluba，Tetrahedron，第27卷，3163(1971)的方法制得))溶于甲醇氫氧化四丁銨(47mL的1M溶液，47mmol)得到。反應(yīng)混合物溫度為23℃，且pH為4.33。用0.2小時加入甲醇氫氧化四丁銨(48mL的1M溶液，48mmol)調(diào)節(jié)反應(yīng)混合物pH到6.5-7.0。反應(yīng)混合物在大約26℃下攪拌0.5小時隨后在低于40℃的浴溫度下減壓濃縮。粗殘留物通過加入甲苯(3×100mL)共沸三次，隨后將混合物減壓濃縮。粗殘留物隨后在冷己烷(0℃)中研磨1小時，然后過濾收集固體，以最小量的冷己烷洗滌，干燥得到第一批白色固體狀的二叔丁基磷酸四丁銨(24.0g)。母液減壓濃縮隨后在冷己烷(20mL)中研磨1小時。然后過濾收集固體，以最小量的冷己烷洗滌，干燥得到第二批白色固體狀的二叔丁基磷酸四丁銨((8.5g，總共32.5g(77％))。將二叔丁基磷酸四丁銨(218g，480mmol)在苯(200mL)中的溶液在室溫下用1.5小時滴加到攪拌的氯碘甲烷(800g，4535mmol)中。反應(yīng)混合物在室溫下再攪拌1.5小時隨后減壓濃縮。油狀殘留物溶于乙醚并過濾除去白色沉淀固體。有機層以飽和NaHCO3和H2O/鹽水(1/1)洗滌。有機層隨后以硫酸鎂干燥，過濾并減壓濃縮得到紅棕色油狀物(320g)。該紅棕色油狀物經(jīng)硅膠(800g)色譜法處理并以20％乙酸乙酯/己烷，25％乙酸乙酯/己烷，和30％乙酸乙酯/己烷洗脫。含產(chǎn)物的級分減壓濃縮得到金色油狀物。油狀物以CH2Cl2(30mL)稀釋，減壓濃縮并隨后真空干燥，得到化合物3(61.3g，收率49％)。1H NMR(苯-d6)δ5.20(2H，d，J＝15)，1.22(18H，s)。
方法3 碘氯甲烷(974g，402mL，5.53mol)在25℃下以二叔丁基磷酸四丁銨(250g，0.553mol)處理。用10分鐘分次加入該磷酸酯。大約15分鐘后該非均勻混合物變成澄清的淡紅的溶液。混合物攪拌3小時，碘氯甲烷隨后通過低于30℃的浴溫度旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除。殘留物置于1L叔丁基甲醚中并攪拌15分鐘以沉淀碘化四丁銨副產(chǎn)物。碘化四丁銨通過燒結(jié)玻璃漏斗真空過濾去除。濾液通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮得到油狀物，包含5∶1的3”和不期望的二聚物雜質(zhì)的混合物
混合物可通過硅膠色譜法純化以獲得純凈的油狀化合物3，產(chǎn)率約60％。
晶體數(shù)據(jù)和理化性質(zhì) 單賴氨酸鹽的溶劑化物的單晶通過結(jié)晶學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)乙醇溶劑化物和正丙醇溶劑化物與異丙醇溶劑化物為同晶的。(表7)表7結(jié)晶數(shù)據(jù) 得到的((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯單賴氨酸鹽的溶劑化物按比例增加且充分表征。物化性質(zhì)包括溶解度、穩(wěn)定性、吸濕性、緊密性等，都被評估并與對比實施例1的雙賴氨酸鹽比較。
單賴氨酸鹽或其溶劑化物證實了極大改善的吸濕性(圖1，2)，尤其在較高的RH值下(在90％RH下相對于對比實施例1的雙賴氨酸鹽50％的吸濕量)。例如，對比實施例1在60％RH具有大約10％的重量變化(圖1)，而實施例1在相同濕度水平下具有大約2-2.5％的重量變化(圖2)。平均起來，單賴氨酸鹽或其溶劑化物較之雙賴氨酸鹽形式具有更好的穩(wěn)定性(圖4)。
異丙醇溶劑化物的吸濕數(shù)據(jù)顯示了更大的改善(圖3)。例如，在60％RH下具有少于1％的重量變化(圖3)。
另外，實施例1保特了高水溶性(＞200mg/mL)，與對比實施例1的雙賴氨酸鹽的相似。
單賴氨酸鹽或其溶劑化物的結(jié)晶很容易生長并顯示出更理想的形態(tài)。物化研究表明其較之雙賴氨酸鹽具有更優(yōu)越的溶液和物理穩(wěn)定性。基于物質(zhì)存儲在受壓穩(wěn)定性條件下收集到的兩周的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，結(jié)晶乙醇溶劑化物顯示出相對較低濕度下良好的穩(wěn)定性和高溫下(表8)在40℃/75％RH(打開和封閉)下最小量的降解。在任何其它存儲條件下沒有見到分解。
本發(fā)明的低吸濕性依次提供物理穩(wěn)定性和原料可處理性，使得式I的單賴氨酸鹽及其溶劑化物適于作為口服固體以及靜脈內(nèi)劑型(圖8)。除了其改善的物理穩(wěn)定性，單賴氨酸鹽或其溶劑化物的另一個主要優(yōu)點是減少了藥物負載量從而相應(yīng)導(dǎo)致更好的加工性。
表8實施例1溶劑化物的物理穩(wěn)定性 實施例7-9 實施例1-3用于制備如下實施例4-6的藥物組合物。
實施例7 2.5mg實施例1的化合物與淀粉、甘露糖醇、微晶纖維素和硬脂酸鎂混合，其中合適的組分和數(shù)量可由本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員確定，然后壓制形成片劑。
實施例8 將2.5mg實施例2的化合物轉(zhuǎn)化為凍干形式，與無菌水、植物油和聚乙二醇混合，其中合適的組分和數(shù)量可由本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員確定，以制備藥物溶液。
實施例9 將2.5mg實施例3的化合物與礦物油、丙二醇、液體石蠟、乳化蠟和水混合(活性成分大約為制劑重量的大約0.01％w/w到1％)，其中合適的組分和數(shù)量可由本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員確定，以制備蠟狀軟膏。
實施例10-12 實施例7-9如下給予受治療者。
實施例10 實施例7通過口服施用給全身感染白色念珠菌的第一組小鼠，每天給藥兩次持續(xù)兩周。另一組全身感染白色念珠菌的小鼠每天四次給藥持續(xù)兩周。每天觀察每組的感染，持續(xù)7天。
實施例11 實施例8通過靜脈內(nèi)施用給全身感染新型隱球菌的小鼠每天兩次，持續(xù)一周。每天觀察感染，持續(xù)14天。
實施例12 實施例9的乳膏劑局部施用給感染毛癬菌屬物種的小鼠每天兩次，持續(xù)1周。每天觀察感染，持續(xù)7天。
不管是口服、胃腸外還是局部給藥，本發(fā)明的鹽及其溶劑化物都顯示出優(yōu)秀的抗真菌活性。
工業(yè)實用性 根據(jù)本發(fā)明，提供一種式I唑類化合物的單賴氨酸鹽，或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物
其中R和R1各自為氫原子或(C1-C6)烷基，且A代表包含仲羥基或叔羥基的類型的三唑抗真菌鹽化合物的非羥基部分。根據(jù)本發(fā)明的這些單賴氨酸鹽，或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物適用于治療，例如嚴重的全身性真菌感染。
權(quán)利要求
1.式I化合物的單賴氨酸鹽，或其溶劑化物
其中R和R1各自為氫原子或(C1-C6)烷基，和
A選自如下基團
和式(i)
其中，在式(i)中
R3代表被一個或更多鹵素原子取代的苯基；
R4代表氫或CH3；
R5代表氫，或與R4一起代表＝CH2；和
R6代表噻唑基、嘧啶基或三唑基，其中每個環(huán)任選被一個或多個選自鹵素、＝O、CH＝CH-(C6H4)-OCH2CF2CHF2、和被一個或多個選自CN和OCH2CF2CHF2的基團取代的苯基、或被一個或多個選自鹵素和甲基吡唑基的基團取代的苯基的基團所取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的單賴氨酸鹽或其溶劑化物，其中A代表式(i)
其中
R3代表被一個或多個鹵素原子取代的苯基；
R4代表氫或CH3；
R5代表氫，或與R4一起代表＝CH2；和
R6代表噻唑基、嘧啶基或三唑基，其中每個環(huán)任選被一個或多個選自鹵素、＝O、CH＝CH-(C6H4)-OCH2CF2CHF2、和被一個或多個選自CN和OCH2CF2CHF2的基團取代的苯基、或被一個或多個選自鹵素和甲基吡唑基的基團取代的苯基的基團所取代。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的單賴氨酸鹽或其溶劑化物，其中式(i)的R3是2，4-二氟苯基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項的單賴氨酸鹽或其溶劑化物，其中式(i)的R4是甲基和R5是氫。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項的單賴氨酸鹽或其溶劑化物，其中式(i)的R6是4-(4-氰苯基)-噻唑-2-基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項的單賴氨酸鹽或其溶劑化物，其中式I的R和R1各自為氫。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2的單賴氨酸鹽或其溶劑化物，其中A為
或
8.根據(jù)權(quán)利要求1的單賴氨酸鹽或其溶劑化物，其中A選自
9.根據(jù)權(quán)利要求1的單賴氨酸鹽或其溶劑化物，其中A選自
和
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項的單賴氨酸鹽的溶劑化物，其中所述其溶劑化物是乙醇溶劑化物。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項的單賴氨酸鹽的溶劑化物，其中所述其溶劑化物是異丙醇溶劑化物。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項的單賴氨酸鹽的溶劑化物，其中所述其溶劑化物是正丙醇溶劑化物。
13.一種藥物組合物，其包含
根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項的單賴氨酸鹽，或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物；和
藥學(xué)上可接受的輔料、稀釋劑、或載體。
14.一種治療真菌感染的方法，所述方法包括
對需要該治療的哺乳動物宿主施用有效抗真菌量的根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項的單賴氨酸鹽，或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物。
15.一種制備水溶性的式I的單賴氨酸鹽的方法
其中R和R1各自為氫或(C1-C6)烷基，和
A選自如下基團
和式(i)
其中，在式(i)中，
R3代表被一個或多個鹵素原子取代的苯基；
R4代表氫或CH3；
R5代表氫，或與R4一起代表＝CH2；和
R6代表噻唑基、嘧啶基或三唑基，其中每個環(huán)任選被一個或多個選自鹵素、＝O、CH＝CH-(C6H4)-OCH2CF2CHF2、和被一個或多個選自CN和OCH2CF2CHF2的基團取代的苯基、或被一個或多個選自鹵素和甲基吡唑基的基團取代的苯基的基團所取代；
所述方法包括
(a)將式A-OH化合物，其中A如上述式I中所定義，與式III化合物反應(yīng)
其中式III中的R和R1各自獨立地為氫或(C1-C6)烷基，Pr代表羥基保護基；所述反應(yīng)在惰性有機溶劑中，在堿存在下和大約25℃到50℃的溫度下進行，形成式IV第一中間體
式IV中的R和R1各自獨立為氫或(C1-C6)烷基，Pr代表羥基保護基，A如式I中定義；
(b)用有機溶劑除去式IV的羥基保護基Pr以形成式V第二中間體
式V中的R和R1各自獨立為氫或(C1-C6)烷基，A如式I中定義；和
(c)將所述式V第二中間體與賴氨酸在pH為4.2-5.5的溶劑中反應(yīng)以制備所述式I的單賴氨酸鹽。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中Pr保護基是叔丁基。
17.根據(jù)權(quán)利要求15或16的方法，其中步驟(a)的溶劑是四氫呋喃。
18.根據(jù)權(quán)利要求15-17任一項的方法，其中步驟(a)中使用的堿是氫化鈉。
19.一種制備水溶性單賴氨酸鹽的方法，所述單賴氨酸鹽具有式I
其中R和R1各自為氫或(C1-C6)烷基，和
A選自如下基團
和式(i)
其中，在式(i)中，
R3代表被一個或多個鹵素原子取代的苯基；
R4代表氫或CH3；
R5代表氫，或與R4一起代表＝CH2；和
R6代表噻唑基、嘧啶基或三唑基，其中每個環(huán)任選被一個或多個選自鹵素、＝O、CH＝CH-(C6H4)-OCH2CF2CHF2、和被一個或多個選自CN和OCH2CF2CHF2的基團取代的苯基、或被一個或多個選自鹵素和甲基吡唑基的基團取代的苯基的基團所取代；
所述方法包括
(a)將式A-OH化合物，其中A如上述式I中所定義，與式III化合物反應(yīng)
其中式III中的R和R1各自獨立為氫或(C1-C6)烷基，Pr代表羥基保護基；所述反應(yīng)在惰性有機溶劑中，在堿存在下和大約25℃到50℃的溫度下進行，形成式IV第一中間體
式IV中的R和R1各自獨立為氫或(C1-C6)烷基，Pr代表羥基保護基，A如式I中定義；
(b)用有機溶劑除去式IV的羥基保護基Pr以形成式V第二中間體
式V中的R和R1各自獨立為氫或(C1-C6)烷基，A如式I中定義；
(c)將所述式V第二中間體與賴氨酸在pH為4.2-5.5的溶劑中反應(yīng)以制備所述式I的單賴氨酸鹽；和
(d)將所述單賴氨酸鹽在溶劑中結(jié)晶以制備所述單賴氨酸鹽的溶劑化物。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中步驟(d)中的溶劑是含水乙醇。
21.根據(jù)權(quán)利要求19或20的方法，其中步驟(d)中的溶劑是含水異丙醇。
22.根據(jù)權(quán)利要求19-21任一項的方法，其中步驟(d)中的溶劑是含水正丙醇。
23.根據(jù)權(quán)利要求15-22任一項的方法，其中原料A-OH的A是式(i)
24.具有如下結(jié)構(gòu)的((2R，3R)-3-(4-(4-氰苯基)噻唑-2-基)-2-(2，4-二氟苯基)-1-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丁-2-基氧基)甲基二氫磷酸酯的單賴氨酸鹽
或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物。
25.根據(jù)權(quán)利要求23的單賴氨酸鹽或其溶劑化物，所述鹽或其溶劑化物是晶體形式。
26.根據(jù)權(quán)利要求24的單賴氨酸鹽的溶劑化物，其中所述其溶劑化物是乙醇溶劑化物。
27.根據(jù)權(quán)利要求24的單賴氨酸鹽的溶劑化物，其中所述其溶劑化物是異丙醇溶劑化物。
28.根據(jù)權(quán)利要求24的單賴氨酸鹽的溶劑化物，其中所述其溶劑化物是正丙醇溶劑化物。
29.一種藥物組合物，其包含
有效量的根據(jù)權(quán)利要求24的單賴氨酸鹽或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物，和
藥學(xué)上可接受的輔料、稀釋劑、或載體。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的藥物組合物，其中所述組合物為片劑、膠囊、粉末、溶液、懸浮液、乳液、軟膏、洗液、乳膏劑或噴霧劑。
31.一種治療真菌感染的方法，所述方法包括
對需要該治療的哺乳動物宿主施用有效抗真菌量的根據(jù)權(quán)利要求24的單賴氨酸鹽，或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物。
32.一種治療真菌感染的方法，所述方法包括
對需要該治療的哺乳動物宿主口服施用有效抗真菌量的根據(jù)權(quán)利要求24的單賴氨酸鹽，或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物。
33.一種治療真菌感染的方法，所述方法包括
對需要該治療的哺乳動物宿主胃腸外給藥施用有效抗真菌量的根據(jù)權(quán)利要求24的單賴氨酸鹽，或其藥學(xué)上可接受的溶劑化物。
34.一種制備具有如下結(jié)構(gòu)的水溶性單賴氨酸鹽的方法，
所述方法包括
(a)將式B化合物
與式III’化合物反應(yīng)
其中式III’的Pr代表羥基保護基；
所述反應(yīng)在惰性有機溶劑中，在堿存在下和大約25℃到50℃的溫度下進行，形成式IV’第一中間體
其中式IV’的Pr代表羥基保護基；
(b)用有機溶劑除去式IV’的羥基保護基Pr以形成式V’第二中間體
和
(c)將所述式V’第二中間體與賴氨酸在pH為4.2-5.5的溶劑中反應(yīng)以制備所述單賴氨酸鹽。
35.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中Pr保護基是叔丁基。
36.根據(jù)權(quán)利要求34或35的方法，其中步驟(a)的溶劑是四氫呋喃。
37.根據(jù)權(quán)利要求34-36任一項的方法，其中步驟(a)中使用的堿是氫化鈉。
38.一種制備水溶性單賴氨酸鹽的溶劑化物的方法，該單賴氨酸鹽具有下式
所述方法包括
(a)將式B化合物
與式III’化合物反應(yīng)
其中式III’的Pr代表羥基保護基；所述反應(yīng)在惰性有機溶劑中，在堿存在下和大約25℃到50℃的溫度下進行，形成式IV’第一中間體
其中式IV’的Pr代表羥基保護基；
(b)用有機溶劑除去式IV’的羥基保護基Pr以形成式V’第二中間體
(c)將所述式V’第二中間體與賴氨酸在pH為4.2-5.5的溶劑中反應(yīng)以制備所述單賴氨酸鹽，和
(d)將所述單賴氨酸鹽在溶劑中結(jié)晶以制備所述單賴氨酸鹽的溶劑化物。
39.根據(jù)權(quán)利要求38的方法，其中步驟(d)中的溶劑是含水乙醇。
40.根據(jù)權(quán)利要求38或39的方法，其中步驟(d)中的溶劑是含水異丙醇。
41.根據(jù)權(quán)利要求38-40任一項的方法，其中步驟(d)中的溶劑是含水正丙醇。
42.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項的單賴氨酸鹽在制備用于治療真菌感染的藥劑中的應(yīng)用。
43.根據(jù)權(quán)利要求24的單賴氨酸鹽在制備用于治療真菌感染的藥劑中的應(yīng)用。
全文摘要
提供具有仲羥基或叔羥基的三唑化合物的單賴氨酸鹽。更特別的，提供了新的水溶性的三唑抗真菌單賴氨酸鹽化合物，或其溶劑化物，其具有通式I其中通式I中的A代表包含仲羥基或叔羥基的類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分。通式I中的R和R1可各自為氫原子或具有1到6個碳原子的烷基。該新穎的水溶性唑類化合物被可于治療真菌感染并可口服、局部和胃腸外給藥。
文檔編號C07D405/14GK101213193SQ200680015029
公開日2008年7月2日 申請日期2006年5月1日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月3日
發(fā)明者琦 高, C-P·H·陳, M·G·法克斯, Y·R·彭德里, S·基亞烏, B·瓦卡拉加達 申請人:衛(wèi)材R&D管理有限公司