專利名稱：：預防和治療心血管疾病的新型喹啉化合物，以及含有蜈蚣提取物或從提取物中分離的化...的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及用于預防和治療心血管疾病的新型喹啉化合物和組合物，該組合物含有蜈蚣提取物或從提取物中分離的化合物。
背景技術：
：最近，隨著成人病的增加，包括動脈粥狀硬化的血管疾病也在增加。動脈粥狀硬化是血管疾病的代表性病癥之一，是動脈發(fā)生硬化，與脂質代謝有關，可歸咎于各種環(huán)境因素，如飲食習慣，吸煙，缺少運動等，多發(fā)于大腦動脈或冠狀動脈，可進一步發(fā)展為循環(huán)系統(tǒng)疾病，如心臟病和腦血管病。例如，腦動脈粥狀硬化的癥狀為頭疼，眩暈或心理失調，可能進一步發(fā)展為腦軟化；冠狀動脈粥狀硬化引起心臟疼痛和心律不齊，可能引發(fā)心絞痛和心肌梗塞。動脈粥狀硬化還可能引起高血壓，心臟病和中風等，因此，動脈粥狀硬化相關疾病已經成為現(xiàn)代社會50-60歲男性的首要死亡原因之一。原發(fā)性動脈粥狀硬化可大致描述為"損傷-應激假說"，包括對血管壁受損處慢性炎癥的解釋(NewEngl.J.Med.1999,340，115-126)，即內環(huán)境失穩(wěn)和血管內皮細胞失效，其由基因變異，過氧化，高血壓，糖尿病，血漿高半胱氨酸含量增加和/或微生物感染引起，可導致動脈硬化。更確切的說，由于上述原因，低密度脂蛋白(LDL)通過氧化、糖基化、整合、結合糖蛋白等方式，轉化為高度變性的LDL(HM-LDL)，導致血管內皮細胞和平滑肌的刺激和損傷。同時，血管細胞粘附分子-1(VCAM-1)的表達，以及內皮細胞內的炎癥細胞的炎癥介質的釋放加劇，由此LDL流入并積聚在內皮細胞，積聚的LDL和氧化的HM-LDL加速了諸如巨噬細胞和T-淋巴細胞的免疫細胞的流入和活化，導致?lián)p傷處的連續(xù)炎癥反應。然后，流入的巨噬細胞或淋巴細胞釋放水解酶、炎癥介質和生長因子，傷害損傷處，隨后，單核細胞流入，平滑肌細胞遷移、分化，在壞死損傷區(qū)形成纖維損傷。通過以上重復過程，損傷發(fā)展為具有復雜結構的纖維斑塊，其中含有HM-LDL的壞死組織被纖維覆蓋。巨噬細胞的基質金屬蛋白酶分泌作用和新血管形成作用弱化纖維斑塊，斑塊破裂，使血液成分向組織因子暴露，引起凝固，血小板匯集，形成血栓。血栓和動脈硬化引起包括血管功能不全的心血管疾病。LDL氧化被認為是包括動脈粥狀硬化的動脈硬化的最首要的原因(Circulation,1995，91，2488-2496;Arterioscler.Thromb,Vase.Biol.，1997，17，3338-3346),發(fā)生在活體內或活體外的氧化應激將LDL轉化為氧化-LDL，單核細胞附著在已經被氧化-LDL和炎癥細胞因子表達細胞粘附分子的內皮細胞上，附著的單核細胞遷移至上皮下間隙，分化為巨噬細胞，通過清道夫受體攝入的氧化LDL細胞引起泡沬細胞，結果引起脂肪紋的產生，脂肪紋是動脈粥狀硬化的原發(fā)性損傷。動脈粥狀硬化的原發(fā)性損傷的特征是動脈內皮細胞產生的粘附分子VCAM-1,ICAM-1(細胞內粘附分子-l)和MCP-1(單核細胞化學引誘蛋白-l)的表達，粘附分子的表達是通過NF-kB(核因子-kB),一種轉錄因子誘發(fā)的，nf-kb也引起斑塊形成和血管破裂，NF-kB被包括活性氧簇(ROS)和細胞因子的各種因子激活，為一種雜二聚體，由包含在細胞中、作為轉錄因子調節(jié)多類型靶基因的p50和p65組成，激活的NF-kb連接在特定啟動基因上，調節(jié)各種炎癥因子，如IL-1，VCAM-1，ICAM-1和其它參與動脈粥狀硬化過程的因子的表達。據(jù)報道，抗氧化劑和自由基清除劑抑制NF-KB的活性，因此，預計抗氧化劑抑制LDL的氧化和粘附分子的表達，降低NF-kB活性，從而阻止活體中的動脈粥狀硬化，為確認此預計，進行了研究(KoreanPatentPublicationNo.2003-0014155)，而且研究發(fā)現(xiàn)一種LDL過氧化形成因子以及從高脂血癥和動脈粥狀硬化病人體內清除此因子(Curr.Atheroscler.Res.,2000，2,363-372)。細胞因子參與各種生理和病理過程，特別是在免疫反應，炎癥，組織重組和種質遺傳中起重要作用(Akoumetal.，Hum.Reprod.11:2269-2275，1996;Inaderaetal.，Endocrinology141:50-59，2000;Xuetal.，LifeSci.64:2451-2462，1999)，在多種細胞因子中，IL-1a，IL-1IL-6,TNFa，和IFNY深度參與感染和組織損傷(Akoumetal,，H亂Reprod.11:2269-2275,1996;DanforthandSgagias,J.Endocrinol.138:517-528，1993;Deshpandeetal.，Am.J.Reprod.Immunol.38:46-5，1997),這些細胞因子作為細胞內熱源，通常被稱做炎癥細胞因子(Angeleetal.,J.Physiol.277:C35-42,1999;BradleyandTimothy,Environ.Toxicol,andChem.17:3-14,1998;D'Agostinoetal.,Ann.N.Y.Acad.Sci.876:426-429,1999;GalienandGarcia,NucleicAcidsRes.25:2424-2429，1997)。一氧化氮(NO)是免疫系統(tǒng)中炎癥細胞因子的產物之一，NO通常由乳房(mammaria)分泌，在血管緊張度調節(jié)，血小板作用，神經傳遞和宿主防御機制中起重要作用(Zancanetal.,Endocrinology140:2004-2009，1999)。一般，只有少量NO由某些細胞(上皮細胞，神經元)產生，但。3+-獨立^10合酶是由在多種細胞，如巨噬細胞，中性粒細胞，Kupffer細胞，干細胞中的脂多糖(LPS))誘發(fā)(Marlettaetal.,Biochemistry,27:8706-8711，1988;McCalletal.,Br.J.Pharmacol"102:234-238,1991;Curranetal.,J.Exp.Med.,170:1769-1774,1989)。特別是，在巨噬細胞中檢測到顯著量的誘生一氧化氣合酶(iNOS)(Hikietal.,Jpn.J.Pharmacol"56:217-220,1992;Lowensteinetal.，Proc,Natl,Acad.Sci.USA90:9730-9734，1993)。巨噬細胞是非常重要的因子，其通過吞噬各種癌細胞或微生物或抑制其在異物激活后的增殖，在宿主防御機制起重要作用。據(jù)報道，NO參與巨噬細胞的細胞溶解(Hibbsetal"Science,235,473-476，1987)，當巨嗟細胞被細胞因子例如IL-lcx或LPS激活，它們引起iNOS的表達，然后iNOS催化NO從左型精氨酸(L-arginine)和氧分子中合成(Palmeretal"Nature333:664-666，1988;Karupiahetal"Science261:1445-1448,1993;Kleemannetal.,FEBSLett.328:9-12，1993;Wongetal.，Adv.Pharmacol.34:155-170，1995)。巨口筮細胞還通過抗原呈遞(antigen-presenting)和產生諸如IL-loc的細胞因子，促進T-細胞免疫反應，除正常免疫反應外，iNOS和IL-lct過度表達將誘發(fā)炎性反應，說明基因表達的調節(jié)是控制免疫或炎性反應的關鍵因素(Wongetal"Adv.Pharmacol.34:155-170，1995;Evans,AgentsActionsSuppl.47:107-116,1995;Vaneetal"1994;Moilanenetal"Am.J.Pathol.150:881-887,1995)。炎癥細胞因子對基因表達的調節(jié)，很大程度上是在基因轉錄階段進行的，特別是，諸如轉錄因子的脫氧核糖結合蛋白(DNA-bindingprotein)識別啟動因子、基因的增強子元件并與之相互作用，調節(jié)表達(Nilletal.,J.Immunol.154:68-79，1995)。眾所周知，四種轉錄因子CREB，AP-l，NF-IL6和NF-kB參與炎癥細胞因子的轉錄調節(jié)(Cippitellietal.,J.Biol.Chem.270:12548-12556，1995;Dendorfer，Organs20:437-44，1996jGeistetal"Am.J.ReapirCell.Mol.Biol.16:31-37，1997;ShenkarandAbraham,Am.J.ReapirCell.Mol.Biol.14:198-206,1996;Xieetal.,J.Biol.Chem.269:4705-4708,1994)，尤其公知的是iNOS和IL-1a通過NF-kB的活性程度調節(jié)(Xieetal.，j.Biol.Chem.269:4705-4708,1994)。另一個冠心病的相關原因是高血膽固醇，因此，重要的是通過降低膽固醇和脂質攝入量的飲食治療，或通過抑制脂質代謝相關酶抑制膽固醇吸收，降低血液膽固醇水平。最后，進行了對負責膽固醇脂化的酶酰基輔酶A(acyl-CoA):膽固醇?；D移酶(ACAT)的研究。ACAT大部分作用于腸道、肝臟和血管壁細胞。首先，ACAT酯化肝臟中的膽固醇，促進其吸收；其次，吸收的或由體內合成的膽固醇，以一種肝臟中的載體，極低密度脂蛋白(VLDL)積累，然后通過血管遷移到各個器官；同時，通過膽固醇的酯化，即膽固醇轉化為膽固醇酯，膽固醇在載體中的積累成為可能；再次，ACAT將動脈血管壁形成細胞中的膽固醇轉化為膽固醇酯，促進細胞內膽固醇的積累，這是動脈粥狀硬化的直接原因。通過激活ACAT，泡沬細胞容易含有高含量的膽固醇轉化的膽固醇酯，因此，泡沬細胞在巨噬細胞和平滑肌細胞的形成，對臨床和實驗非常重要。血管壁中泡沫細胞的增殖與ACAT的活化密切相關，使ACAT抑制劑成為有效抗-動脈粥狀硬化藥劑的有前途的備選藥物。因此，期望ACAT抑制劑首先通過抑制腸道內膽固醇的吸收，降低膽固醇水平，其次通過抑制遷移自肝臟、血液中的膽固醇的釋放，降低血液膽固醇水平，然后通過防止血管壁的膽固醇積累，直接預防動脈粥狀硬化。目前已知的ACAT抑制劑是小鼠肝臟微粒體或巨噬細胞(J774)的抑制劑。目前發(fā)現(xiàn)的人類ACAT可看成兩種亞型ACAT-l(50kDa)和ACAT-2(46kDa),ACAT-l主要存在于肝臟的Kupffer細胞、腎上腺皮層細胞、巨噬細胞和腎臟中；而ACAT-2主要位于肝細胞和腸道粘膜細胞中(Rudel,L.L.etal.,Curr.Opin.Lipidol.12，121-127，2001),人類ACAT抑制劑可抑制來自食物的膽固醇的吸收和膽固醇酯在血管壁的累積，使其成為血膽固醇過多的預防和治療藥劑的成功候選藥物(Buhman,K.K.etal.，NatureMed.6，1341-1347，2000)。近期，高脂血癥的治療劑，如丙丁酚(probucol)，N,N'-二氨基聯(lián)苯(N，N'-Diphenylenediamine)，丁羥基茴香醚(butylatedhydroxyanisol(BHA))和丁羥甲苯(butylatedhydroxytoluene(BHT))，苯酚合成抗氧化劑(phenolsyntheticantioxidants)都有優(yōu)良的抗氧化活性，因此可降低LDL膽固醇的水平，阻止氧化和降低損傷發(fā)展，但有副作用。為無副作用地預防此類疾病，人們努力通過抑制膽固醇的吸收和合成,降低LDL水平(PrinciplesinBiochemistry,lipidbiosynthesis,770-817,3rdEdition,2000WorthPublishers,NewYork;Steinberg,N.Engl.J.Med.,1989,320,915-924),因此，LDL-抗氧化劑和降脂劑的聯(lián)合用藥的可能性已經成為治療高血脂癥或動脈粥狀硬化病人的主要關注點。蜈蚣被用作藥用動物，分離和純化來自大蜈蚣(Sco/o;^m/ra■s"^;/"*^mM加/ara)的血栓溶解酶的方法已經在韓國專利124438中描述，從蜈蚣中分離的化合物是3，8-二羥基喹啉(3,8-dihydroxyquinoline)[Moon，etal.,J.Nat.Prod.59:777-779,1996]，2-羥基-7-[(4-羥基-3-甲氧基苯基)甲基]-3-甲氧基-8-喹啉硫酸鹽(酯)(2-hydroxy-7-[(4-hydroxy畫3-methoxyphenyl)methyl]-3-methoxy-8誦quinolylsulfate)(Noda，etal.,Chem.Pharm.Bull.49(7):930-931,2001),以及8-羥基-1氫-2-苯并吡喃-1-酮(8-hydroxy-lH-2-benzopyran-l-one)(Kim,etal.,J.KoreanChem.Soc.42:236-239,1998)。但還沒有對蜈蚣抗氧化作用或膽固醇代謝-相關活性，以及蜈蚣用作心血管疾病治療藥劑的報道。在自然物質中尋找包括高血脂癥，動脈粥狀硬化，冠心病和心肌梗塞的心血管疾病的預防和治療藥物的過程中，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)蜈蚣提取物，以及從中分離的喹啉化合物和酚化合物顯示出優(yōu)良的LDL-抗氧化活性，ACAT抑制活性和抗炎活性；本發(fā)明人通過確定上述蜈蚣提取物和從中分離的化合物可用于有效預防和治療諸如高血脂癥，動脈粥狀硬化，冠心病和心肌梗塞的心血管疾病，進一步完成此發(fā)明
發(fā)明內容技術問題本發(fā)明的一個目的是提供一種新型喹啉化合物。本發(fā)明的另一目的是提供一種新型喹啉化合物的制備方法。本發(fā)明的另一目的是提供含有蜈蚣提取物或從中分離的喹啉化合物或酚化合物，預防和治療心血管疾病的組合物。技術方案為達到上述目的，本發(fā)明提供一種新型喹啉化合物。本發(fā)明也提供一種新型喹啉化合物的制備方法。本發(fā)明還提供含有蜈蚣提取物或從中分離的喹啉化合物或酚化合物，預防和治療心血管疾病的組合物。下文將詳述此發(fā)明。本發(fā)明提供一種式1所示的新型喹啉化合物式1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>式1所示的喹啉化合物是3,4-二甲氧基-喹啉-2，8-二醇(3,4-dimethoxy-quinoline-2,8-diol)，可以以藥學上可接受的鹽的形式使用，此時，它可以包括任何常規(guī)方法制備的鹽，水合物和溶劑化物。本發(fā)明也提供一種式1所示的喹啉化合物的制備方法，包括以下(a)用溶劑從干蜈蚣中制備蜈蚣提取物；(b)通過正己烷，氯仿和乙酸乙酯的順序分餾，從提取物的水懸浮液中制備氯仿可溶提取物；以及(c)通過用柱層析法分離和純化氯仿可溶提取物，制備喹啉化合物。步驟(a)中，蜈蚣提取物是用溶劑從干蜈蚣中提取的，蜈蚣(ScolopendrasubspinipesmutilansL.Koch;Scolopendridae)是節(jié)肢動物門的一種，少棘刺大蜈蚣的干體，也被稱做WuGong，其背為綠色，腹為黃色，頭和腿為紅色，雄性較大，雌性為黃色，較痩。蜈蚣扁平、細且長(14-16cm長，0.6-1cm寬)。聞起來有魚腥味，味苦并有點咸，蜈蚣已經用于傳統(tǒng)中國和韓國醫(yī)學。大蜈蚣(Scolopendrasubspinipes)和藍蜈蚣在四月至六月或八月收集，并將其頭部浸沸水后，懸掛在竹簽上或在陽光下干燥，去除頭和腿并切碎身體。蜈蚣也可用作驚風，胸膜炎和蛇咬的民間藥。根據(jù)藥物學經典"Hyangyakjipseongbang",蜈蚣味苦，性溫，有毒，可除去三種寄生蟲(蛔蟲，幼蚊和蟯蟲)并可調節(jié)瘧疾、精神錯亂和發(fā)冷(algor)。在本發(fā)明中，蜈蚣可巿購或自行收集。提取干蜈蚣的溶劑選自水，d-C6醇，Cs-C7烷烴，氯仿，乙酸乙酯，丙酮，醚，苯，二氯甲烷，環(huán)己烷，石油醚或它們的混合物，優(yōu)選選自水，CH36醇，正己烷，氯仿，乙酸乙酯，丙酮或它們的混合物，最優(yōu)選乙醇溶劑或丙酮溶劑。提取溶劑的量是干蜈蚣重量的1-20倍，可使用任何常規(guī)的提取法，但40-12(TC熱水提取法或乙醇或丙酮提取法是優(yōu)選方法。當釆用乙醇或丙酮作為溶劑時，將蜈蚣在室溫下，浸入溶劑l-5天，蜈蚣提取物最終通過用濾紙過濾，提純，濃縮得到。下一步驟(b)中，將步驟(a)得到的蜈蚣提取物，準確的說是乙醇提取物懸浮在水中，用正己烷，氯仿和乙酸乙酯順序分餾，在上述得到的溶劑可溶提取物中，可釆用氯仿-溶解相?？舍娪萌我怀Ｒ?guī)微分萃取法，但優(yōu)選使用分液漏斗。在步驟(c)中，將步驟(b)得到的氯仿-可溶相用層析分離法分離和提純，得到式1所示的新型喹啉化合物。硅膠柱層析法是通過常規(guī)方法，采用諸如水，氯仿，CVC4醇及其混合物作為流動相進行的。上述CrQ醇優(yōu)選甲醇，柱層析分離可進行一次至若干次，直到完成該單一化合物的提純，如有必要，可隨后進行濃縮和再結晶。特別地，蜈蚣乙醇提取物的氯仿-可溶相可釆用氯仿，甲醇或其混合物進行硅膠柱層析分離，得到ll個餾分，在這ll個餾分中，第6餾分(F6)用氯仿和甲醇的混合溶劑作為流動相，進行硅膠柱層析分離，此時，混合溶劑中氯仿和甲醇體積比是20:1，第二柱層析分離法獲得的餾分中，第二餾分(F6-2)用甲醇和水的混合溶劑作為流動相，進行反相柱層析分離，得到式l所示的喹啉化合物。此時，混合溶劑優(yōu)選體積比為55:45的甲醇和水混合液。以上制備的式1所示喹啉化合物顯示出優(yōu)異的LDL-抗氧化性和ACAT抑制活性，因此，該化合物可以包含在有效預防和治療心血管疾病的組合物中，所述心血管疾病包括通過LDL氧化或膽固醇酯合成和積聚產生的高脂血癥，動脈粥狀硬化，冠心病和心肌梗塞。本發(fā)明還提供預防和治療心血管疾病的，包含蜈蚣提取物的組合物。本發(fā)明的蜈蚣提取物優(yōu)先釆用水，CrQ醇，正己烷，氯仿，乙酸乙酯和丙酮或它們的混合物，更優(yōu)選乙醇或丙酮作為溶劑。此時，優(yōu)選的萃取溶劑的量是干燥蜈蚣的1-20倍，可釆用任一常規(guī)提取法，但40-120。C熱水提取法或乙醇或丙酮提取法是優(yōu)選方法。當使用乙醇或丙酮作為溶劑時，將蜈蚣在室溫下，浸入溶劑l-5天，蜈蚣提取物最終通過用濾紙過濾，提純，濃縮得到。更優(yōu)選地，蜈蚣提取物可以是對蜈蚣提取物經過柱層析分離獲得的餾分。此時，硅膠柱層析分離是通過常規(guī)方法，釆用諸如水，氯仿，d-C4醇或它們的混合物作為流動相進行的。此時CrC4醇優(yōu)選甲醇，混合溶劑是氯仿和甲醇或甲醇和水的混合物。本發(fā)明的蜈蚣提取物不僅具有優(yōu)良的針對LDL的抗氧化活性，對ACAT和膽固醇酯化酶活性的抑制作用，還有抗炎和抑制細胞內NO和ROS生成的作用，因此，本發(fā)明的蜈松提取物可以作為預防和治療由LDL氧化或膽固醇酯合成和積累引發(fā)的、諸如高血脂癥，動脈粥狀硬化，冠心病和心肌梗塞的心血管疾病的組合物的有效成分。本發(fā)明還提供含有式2所示的喹啉化合物和式3所示的酚化合物，預防和治療心血管疾病的組合物。喹啉化合物和酚化合物可巿購或以領域內公知的常規(guī)方法制備，或釆用本發(fā)明的方法制備，如必要，本發(fā)明方法可以改動。上述化合物優(yōu)選自蜈蚣中分離和提純。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>其中，R1，R2和R3獨立地為H,OH或dC4烷氧基。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>[式3]■2，■》'式3所示的酚化合物是2,4-二-叔-丁基-苯酚(2，4-di-tert-butyl-phenol)，式2所示的化合物優(yōu)選為3,8-二羥基喹啉(3，8-dihydroxyquinoline)或3，4-二甲氧基-喹啉-2,8-二醇(3，4-dimethoxy-quinoline-2,8-diol)。結構式見表1。[表1]化合物結構式12霄身啦n式2所示的喹啉化合物和式3所示的酚化合物顯示出優(yōu)良的針對LDL的抗氧化活性，對ACAT和膽固醇酯化酶活性的抑制作用，因此，這些化合物可作為預防和治療由LDL氧化或膽固醇酯合成和積聚造成的、諸如高血脂癥，動脈粥狀硬化，冠心病和心肌梗塞的心血管疾病的組合物的有效成分。本發(fā)明的組合物中除了新型喹啉化合物，蜈蚣提取物和自提取物分離的喹啉或酚化合物以外，還含有一種或多種具有相同或相似功能的有效成分。本發(fā)明的組合物中除了上述有效成分外，還含有一種或多種適于施用的藥學上可接受的載體。藥學上可接受的載體可選自或由選自以下的一種以上組分混合制備鹽水，消毒水，Ringer液，緩沖鹽水，右旋糖溶液，麥芽糖右旋糖溶液(maltodextrose)，甘油和乙醇。也可以添加其他諸如抗氧化劑，緩沖溶液，抑菌劑等等的通用添加劑。為制備注射液，丸劑，膠囊，顆粒劑或片劑，還可以添加稀釋劑，分散劑，表面活性劑，粘合劑和潤滑劑。本發(fā)明的組合物可針對各種疾病或根據(jù)成分，通過遵循Remington藥物科學(Remington,sPharmaceuticalScience,MackPublishingCompany,EastonPA，18th，1990)的方法進一步制備成適當形式。本發(fā)明的組合物可以口服或腸胃外(例如，靜脈內，皮下，局部或腹膜注射)施用，組合物的有效劑量可根據(jù)體重，年齡，性別，健康狀況，飲食，施用頻率，施用方法，排泄和疾病的嚴重程度來確定，蜈蚣提取物的劑量是10-2,000mg/kg/天，優(yōu)選50-500mg/kg/天。喹啉或酚化合物的劑量是0.01100mg/kg/天，優(yōu)選0.05~10mg/kg/天，施用頻率為一天一次或一天數(shù)次，優(yōu)選一天數(shù)次。將本發(fā)明的新型喹啉化合物，蜈蚣提取物和從該提取物分離的喹啉或酴化合物口服施用于小鼠以考察毒性，結果為，由于估計小鼠的LDso遠遠大于1000mg/kg，它們被評價為安全物質。本發(fā)明的組合物可單獨施用或與外科手術、激素治療、化學療法和生物反應調節(jié)劑聯(lián)合治療，以預防和治療心血管疾病。本發(fā)明的組合物可被包含在保健食品中，以改善心血管疾病。此時，新型喹啉化合物，蜈蚣提取物和從該提取物分離的喹啉或酚化合物可以根據(jù)常規(guī)方法，以原樣添加或與其他的食物或組分混合后添加。有效成份的混合比可根據(jù)用途(預防，保健或治療)確定。當生產食物或飲料時，本發(fā)明的新型喹啉化合物，蜈蚣提取物和從該提取物分離的喹啉或酚化合物可優(yōu)選以0.01-10Wtn/。加入原料，更優(yōu)選0.05~lwt%。然而，當長期服用以改善健康狀況時，本發(fā)明涉及的新型喹啉化合物，蜈蚣提取物和從該提取物分離的喹啉或酚化合物的含量可能小于上述含量，但有效劑量可以包含超過上述量，因為該新型喹啉化合物，蜈i^提取物和從該提取物分離的喹啉或酚化合物很安全。對應用的食物沒有限制，可以以肉，香腸，面包，巧克力，糖果，點心，餅干，比薩餅，云吞，面條，包括冰淇淋的乳制品，湯，飲料，茶，飲料，酒類和維生素組合物等為例，實際上包括所有常規(guī)生產的健康食品。含有本發(fā)明的組合物的保健飲料還可以像其他飲料一樣，包括各種香料或天然碳水化合物等。上述天然碳水化合物可以是諸如葡萄糖和果糖的單糖，諸如麥芽糖和蔗糖的二糖，諸如糊精和環(huán)糊精的聚糖，以及諸如xilytole，山梨糖醇和赤蘚醇的糖醇中的一種。甜味劑可釆用諸如索馬汀(thaumatin)，甜葉菊提取物的天然甜味劑，或諸如糖精和阿斯巴特的人工甜味劑。本發(fā)明的組合物中天然碳水化合物的比例優(yōu)選0.01~0.04g/100ml，更優(yōu)選0.02~0.03g/100ml。除上述組分外，本發(fā)明的組合物可以包含于各種營養(yǎng)素，維生素，電解質，增香劑，著色劑，果膠酸及其鹽，精氨酸及其鹽，有機酸，保護性膠體增粘劑，pH調節(jié)劑，穩(wěn)定劑，防腐劑，甘油，醇，用于添加到蘇打的碳酸化劑等，本發(fā)明的組合物也可以包含于天然果汁，水果飲料和/或添加果肉的蔬菜飲料中。上述所有組分可以單獨或共同添加，實際上組分的混合比無關緊要，通常，在ioo份本發(fā)明的組合物中，每種可以0.01~0.1重量份加入。通過參閱附圖可以更好的理解本發(fā)明優(yōu)選實施方案的應用，其中圖1說明本發(fā)明的蜈蚣乙醇提取物在LPS-處理的巨噬細胞中，抑制NO產生的活性。圖2說明本發(fā)明的蜈蚣乙醇提取物在LPS-處理的巨噬細胞中，抑制ROS產生的活性。具體實施例方式本發(fā)明實用的和目前優(yōu)選的實施方案通過以下實施例說明，然而也應該理解，本領域技術人員在考慮本發(fā)明的基礎上，在本發(fā)明精神和范圍內的修改和改進。實施例l蜈蚣提取物，喹啉和酚化合物的制備<1-1>蜈蚣提取物的制備在250g干蜈忪(/Sco/opem/raswfepz'm》esw7M"7a/wL.Koch，Daejeon，Korea)中，加入丙酮(CH3COCH3)或乙醇(700ml分別)，室溫放置3天，然后提取。提取物可用濾紙過濾，以得到提取物和固體殘留物，得到的提取物可減壓濃縮，得到85g油狀蜈蚣丙酮提取物和40g油狀蜈蚣乙醇提取物。釆用實驗實施例1和2描述的方法，測定油狀蜈蚣丙酮提取物和油狀蜈蚣乙醇提取物，結果為，兩種提取物顯示了優(yōu)良的對LDL的抗氧化活性和ACAT活性抑制能力，將具有更好的效果的乙醇提取物應用于以下實施例。<1-2>非極性溶劑-蜈蚣提取物可溶相的制備將上述實施例<1-1>制備的蜈蚣乙醇提取物懸浮在700ml水中，用正己烷，氯仿(CHCl3)和乙酸乙斷EtOAc)順序分餾，得到26g正己烷-可溶相，0.7gCHCl3-可溶相和1.5gEtOAc-可溶相。該可溶相采用與實驗實施例1和2描述一致的方法進行實驗，結果證實EtOAc-可溶相和CHClr可溶相具有優(yōu)異的LDL抗氧化活性和ACAT抑制效果，這些液相被用于實施例<1-3>或<1-4>中。<1-3>從蜈蚣EtOAc-可溶相分離化合物將實施例<1-2>制備的1.5gEtOAc-可溶相，用柱層析法處理。首先，將EtOAc-可溶相的棕色固體物質吸附在硅膠上；然后，用甲醇和氯仿的混合液(100:00:100,V/V)作為流動相，提高極性，進行硅膠層析分離(cj)55x250mm)，得到25個餾分(F1F10)，此25個餾分釆用與實驗實施例1和2描述一致的方法進行實驗，考察LDL抗氧化活性和ACAT抑制活性，結果為餾分2(F2)顯示出最好的效果，因此將此餾分用于下述分離過程。將活性餾分(F2，400mg)再次進行柱層析處理，特別的，用甲醇和氯仿的混合液(99:11:9，V/V)作為流動相，提高極性，進行第二硅膠柱層析分離((l)23x140mm),得到16個餾分(F2-1F2-16),此16個餾分釆用與實驗實施例1和2描述一致的方法進行實驗,考察LDL抗氧化活性和ACAT抑制活性，結果為第8餾分(F2-8)顯示出最好的效果，因此將此餾分用于下述分離過程。餾分2的第8餾分(F2-8，189mg)用C18柱層析分離((J)13x115mm),用甲醇和水的混合液(4:1，V/V)作為流動相，得到14個餾分。第2~6餾分(F-2-8-2F-2-8-6)顯示出優(yōu)良的LDL抗氧化活性和ACAT抑制活性，將第35餾分(F-2-8-3F-2-8-5)，用甲醇和水的混合液(7.5:3.5，V/V)作為流動相，進行C18柱層析，得到第3，4餾分(54mg)，其顯示出優(yōu)良的LDL抗氧化活性和ACAT抑制活性。這些餾分用甲醇和水的混合液(7:3，V/V)作為流動相，進行C-18(ODS)預-TLC處理得到化合物1(39.3mg)，其顯示出優(yōu)良的LDL抗氧化活性。<1-4>從蜈蚣提取物制備的氯仿-可溶相中分離化合物將實施例<1-2>制備的0.78蜈蚣提取物的氯仿-可溶相，用柱層析法分離本發(fā)明的化合物。將氯仿-可溶相的棕色固體物質吸附在硅膠上；然后，用甲醇和氯仿的混合液(100:01:9，V/V)作為流動相，提高極性，進行硅膠層析分離(cf)52x270mm)，得到11個餾分(F1~Fll),此11個餾分釆用與實驗實施例1和2的描述一致的方法進行實驗，考察LDL抗氧化能力和ACAT抑制能力，結果得到活性餾分第1(F1)和第6(F6)餾分。用甲醇和水的混合液(100:1，V/V)作為流動相，將餾分Fl進行C-18(ODSPrep-TLC)預-TCL，從餾分Fl得到活性化合物3(Fl-1，3mg)。用氯仿和甲醇的混合液(20:1，V/V)作為流動相，釆用預-TCL處理，從F6(40mg)提純第二餾分(F6-2),然后用甲醇和水的混合液(55:45，V/V)作為流動相進行C18預-HPLC處理得到化合物2，第6餾分(F6-2-6，6mg)。<1-5>本發(fā)明的化合物的結構分析上述實施例<1-3>和<1-4>得到的三種化合物的結構分析以下述方式進行。用VG高分辨率GC/MS光譜儀(ElectionIonizationMS，Autospec-Ultima,Micromass，UK)確定分子量和分子式，用DIP-181數(shù)字旋光儀(Jasco,Japan)測定旋光力，進行NMR(AMX500,Bruker,Germany)分析得到1HNMR，13CNMR，HOMO-COSY，NOE(核Overhauser交換譜，NuclearOverhauserExchange),HMQC(1H檢測異核多量子相干譜，1H-DetectedheteronuclearMultiple-QuantumCoherence),HMBC(異核多鍵相關譜，HeteronuclearMultiple-BondCoherence)和DEPT(無畸變極化轉移增強譜DistortionlessEnhancementbyPolarization)譜，然后確定分子結構。將上述分析結果與早期報道的文獻(Moon，etal.,59:777-779，1996;Pouchert,C.J.，1985.TheAldrichlibraryofFT-IRspectravaporphaseEdition1.Vol.1,1088B;Pouchert,C丄，Behnke,J.，1993.TheAldrichlibraryof13Cand1HNMRspectraedition1.Vol.2,267)對比，結果為，本發(fā)明的化合物l為3,8-二羥基喹啉，化合物2為3,4-二甲氧基喹啉-2，8-二醇，本發(fā)明的化合物3為2,4-二-叔-丁基酴。3,8_二羥基喹啉1)物理性質黃色固體；2)分子量161;3)分子式C9H7N02;4)!H畫R(CD3OD，500MHz)58.45(1H，d，J=2.42，H-2)，7.44(1H，d,J=2.38,H-4),7.29(1H,t,J=7.84,H-6),7.14(1H，d,J=8.13,H-5),6.86(1H，d,J=7.43,H-7);6)13C畫R(CD3OD,125MHz)5154.2(C-8),153.0(C-3)，142.3(C-2),134.9(C國8a)，131.9(C國4a)，129.0(C畫6),117.9(C-5)，117.2(C誦4),109.0(C國7);7)EI-MS(70ev);m/z(%):161(100)[M]+，133(90)，104(63)，91(10)。3,4-二甲氧基喹啉-2,8-二醇1)物理性質黃色固體；2)分子量221;3)分子式CnHuN04;4)&麗R(CD30D,500MHz)57.33(1H，d,J=8.16,H-5),7.05(1H,d，J=8.00,H畫6)，6.93(1H,t，J=7.78,H-7),4.22(3H),3.88(3H);6)13C醒R(CD30D，125MHz):5163.0(C-2)，155.6(C-8),145.2(C-4)，136.5(C-8a)，125.6(C-6)，123,9(C誦3),119.6(C-4a)，114.7(C-5)，114.5(C-7)，61.4(-OCH3),61.2(-OCH3);7)EI掘(70ev);m/z(%):221(82)[M]+,206(100)，192(17)，178(32)，161(23)。2，4-二-叔-丁基酚1)物理性質黃色固體；2)分子量206;3)分子式C14H220;4)&麗R(CD3OD，500MHz)57.28(1H，d,J=2.1，H畫3),7.05(1H，dd，J=8.2,2.2，H-5),6.57(1H，d，J=8.2,H-6)，4.58(1H,s,-OH),1.40(9H，s，H-2'，3'，4')，1.28(9H，s，H-2"，3"，4");6)13C麗R(CD30D，125MHz):153.5(C-l),143.7(C畫4),135.9(C-2)，124.8(C-3)，124.2(C-5),116.6(C-6),35.4(C-l")，35.0(C-l')，32.3(C-2"),32.3(C-3"),32.3(C-4")，30.4(C畫2')，30.4(C-3')，30.4(C-4');7)EIMS(rel.int.)m/z:EI-MS(70ev)m/z:206(16)[M]+，191(100)，149(5),119(8)，83(8),69(34),57(30)。實施例2:蜈蚣提取物的制備100g干蜈蚣中加入1，000ml95。/。乙醇，用實施例<1-1>描述的相同方法，在室溫提取72小時，過濾提取物并干燥得到蜈蚣提取物。實驗實施例1利用硫代巴比土酸反應物(TBARS(ThiobarbituricAcidReactiveSubstances))測定本發(fā)明化合物的LDL-抗氧化活性以下測定蜈蚣提取物，從中分離的喹啉和酴化合物對LDL-氧化的抗氧化活性。采用硫代巴比土酸(TBA(thiobarbituricacid))法，測定由于Cu2+-介導LDL-氧化生成的不飽和脂肪酸的氧化產物，雙醛，計算抗氧化活性(Packer,L.Ed.，MethodsinEnzymology.Vol.234,OxygenradicalsinbiologicalsystemsPartD.Academicpress,SanDiego，1994)。取300ml人血漿，然后用超速離心機以100,000xg離心24小時，去除浮在上層清液的VLDL/乳糜微粒層，將保留溶液的比重調節(jié)至1.063g/ml，然后以100,000xg離心24小時，在上清液分離約25ml(1.52.5mg蛋白質/ml)的LDL，將上述分離的20(il(蛋白質濃度50-100嗎/ml)LDL，與210pl10mM嫌酸鹽緩沖溶液(phosphate-bufferedsaline(PBS))混合，再加入10^1本發(fā)明的溶劑提取物，餾分和化合物溶液。此時，將化合物溶解在二甲基亞砜(dimethylsulfoxide(DMSO))并稀釋至不同濃度，以備實驗。DMSO單獨作為陰性對照，加入一種已知抗氧化劑，丙丁酚，作為陽性對照。每份溶液中加入10|il0.25mMCuSO4,，然后在37°C反應4小時，加入lml20。/。三氯乙酸(trichloroaceticacid(TCA))溶液終止反應，然后加入lml溶解在0.05NNaOH的0.67%TBA溶液，隨后攪拌10秒鐘，將溶液加熱到95'C,保溫5分鐘，以誘導顯色，然后用冰水冷卻。將溶液以3000rpm離心5分鐘分離上清液，用UV/VIS分光光度計測定OD540，測定由顯色產生的丙二醛(malondialdehyde(MDA))水平。同時，測定丙二醛的標準曲線，稀釋丙二醛二(二甲基乙縮醛)(malonaldehydebis(dimethylacetal))原液，得到含有0~10nmol丙二醛的PBS標準溶液，在每份250pl的PBS標準溶液中誘導顯色，測定OD540以確定丙二醛標準曲線，定量本發(fā)明化合物產生的丙二醛，并計算抑制活性和IC5。。結果見表2。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>如表1所示，實施例<1-1>得到的蜈蚣丙酮提取物，當濃度為40pg/ml時，顯示出73%的抗氧化作用，而同樣濃度的蜈蚣乙醇提取物顯示出80%的抗氧化作用，說明兩種提取物都有優(yōu)異的抗氧化活性。同時，濃度為20pg/ml的乙酸乙酯-可溶相顯示出針對LDL-氧化98%的抗氧化活性，說明在包括正己烷-可溶相和氯仿可溶相的是所有溶劑-提取物相中，具有最好的抗氧化活性。測定實施例<1-2>得到的化合物1:3，8-二羥基喹啉、化合物2:3,4-二甲氧基-喹啉-2，8-二醇和化合物3:2,4-二-叔-丁基-苯酚的抗氧化活性，結果為ICso分別為2.6juM,63yM和8.2]LiM。特別的，化合物1顯示出較陽性對照低的IC50,說明化合物1具有優(yōu)良的LDL-抗氧化活性?；衔?顯示出較陽性對照高的IC50，但仍顯示出LDL-抗氧化活性。化合物3雖然顯示出較陽性對照高的IC50,但也具有優(yōu)良的LDL-抗氧化活性。因此，已證實本發(fā)明的蜈蚣提取物，從中分離的喹啉化合物和酚化合物是本發(fā)明預防和治療LDL-氧化介入的、包括高脂血癥和動脈粥狀硬化的心血管疾病的組合物的有效組分。實驗實施例2:本發(fā)明提取物和化合物對ACAT活性的影響為考察本發(fā)明的蜈蚣提取物，從中分離的喹啉化合物和酚化合物ACAT抑制活性，進行以下實驗。<2-1>制備ACAT酶為考察對人類ACAT-1和ACAT-2活性的作用，利用桿狀病毒表達系統(tǒng)得到hACAT-l和hACAT-2蛋白質。通過對人類肝臟互補DNA文庫的篩選(cDNAlibrary),得到hACAT-l和hACAT-2的cDNAs，將它們插入桿狀病毒轉移載體，將其接種到昆蟲細胞系sf9制造病毒，然后將每一個hACAT-l和hACAT-2的重組病毒用噬斑純化分離，然后擴增三倍以提高病毒株的滴度。用重組病毒(1重性感染(lmultiplicityofinfection))感染具有高蛋白表達效率的Hi5昆蟲細胞，然后在27。C振蕩培養(yǎng)一天，500xg離心15分鐘，從Hi5細胞過度表達的hACAT-l和hACAT-2分離微粒體部分(microsomefractions)，將得到的細胞通過速凍-速融溶化在低滲緩沖液，然后在100,000xg超速離心1小時；將得到的微粒體部分懸浮在低滲緩沖液中，直至蛋白質濃度達到8mg/ml,深冷保存?zhèn)溆谩?lt;2-2>測定ACAT活性為測定ACAT活性，將[1-"C]油基-CoA([l-"C]oleoly-CoA)(56.0uCi/jumol;Amersham)用作底物，釆用少許改進的Brecher&Chan方法(RBrecherandC.Chan,Biochem.Biophys.Acta,617，458，1980)。l(Hll上述實驗制備的蜈松提取物或化合物，與4.(^1實驗實施例<2誦1>制備的微粒體溶液，20.(Hd活性分析緩沖液(0.5MKH2P04,10mMDTT,pH7.4;Sigma)，15.0|il無脂肪酸牛血清白蛋白(無脂肪酸BSA，原液濃度40mg/ml;Sigma)，2.0^1膽固醇(原液濃度20mg/ml;Sigma)和蒸僧水混合，在37匸預培養(yǎng)15分鐘。加入8|ilof[l-14C]油基-CoA(0.05juCi,終濃度10juM)引發(fā)反應，在37。C培養(yǎng)30分鐘，加入lml異丙醇和庚烷(4:l，v/v)的混合物終止反應，然后加入600pl庚烷和400ji10.1MKH2P04(pH7.4)，用漩渦混合器強力混合，然后以300xg離心5分鐘，將100^d離心得到的上層庚烷相置于閃爍瓶(scintillationbottle)中，力口入4ml閃爍雞尾酒(scintillationcocktail(Lipoluma))，用1450Microbeta液體閃爍計數(shù)計(Wallacoy)測定混合物的放射性。以一分鐘每lmg蛋白質合成的膽固醇基油酸酯的皮摩爾數(shù)pmol(pmol/分鐘/mg蛋白質)計算ACAT活性。結果見表3。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>如表3所示，證明本發(fā)明的蜈蚣提取物，從中分離的喹啉化合物和酚化合物具有優(yōu)良的hACAT-l和hACAT-2抑制活性。因此，本發(fā)明的蜈蚣提取物，從中分離的喹啉化合物和酚化合物是本發(fā)明預防和治療膽固醇酯合成和積聚介導的、包括高脂血癥、動脈粥狀硬化、冠心病和心肌梗塞的心血管疾病的組合物的有效組分。實驗實施例3:巨噬細胞的細胞毒性實驗<3-1>細胞培養(yǎng)在37°C的5%C02濕培養(yǎng)箱內，以補充10%FBS(Hyclone),2mML-谷酰胺，100單位/ml青霉素和100jJg/mL鏈霉素的DMEM(Gibco)為底物，培養(yǎng)RAW264.7細胞(鼠類巨嗟細胞細胞系murinemacrophagecellline,ATCC)。<3-2>巨噬細胞的細胞毒性實驗首先，制備LDH(乳酸脫氫酶，lactatedehydrogenase)分析介質作為背景對照(0^4￡]^+1%88+抗生素lx)，低對照(DMEM+P/。FBS+抗生素lx)和高對照(DMEM+1%FBS+2%TritonX-100(聚乙二醇辛基苯基醚)+抗生素lx),將實施例2制備的蜈蚣提取物以不同的濃度接種到每一個低對照介質，濃度分別為1,5，10,20，50,100和200jng/ml，調整DMSO的濃度，使DMEM低于0.1%。將DMEM和5x104個細胞/100ul的巨嗜細胞(RAW264.7)置于96孔板的各個孔中，然后在C02培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時，這些細胞不加入背景對照孔中，24小時后，將每個孔中的介質去除，然后將背景對照，低對照和高對照測定的介質以200)il/孔，加入每個孔內，然后進一步培養(yǎng)72小時，取100nl每個孔的上清液，轉移到新的96孔板。將100jul含有心肌黃酶(diaphorase)和NAD+的溶液C(TAKARACo.，LDH細胞毒性檢測盒)加入孔板的每個孔中，隨后反應30分鐘，然后使用自動定量繪圖酶標儀(microplatereader(Bio-RadCo.,USA))檢測490nm的吸光度(OD490)。結果為，每個樣品都在0~200jug/ml，顯示出100%的存活率，說明所有樣品都沒有細胞毒性。實驗實施例4:測定巨噬細胞生成的NO本發(fā)明考察蜈蚣乙醇提取物是否能夠抑制由LPS生成的一氧化氮(NO)。首先，在96孔板培養(yǎng)lxl0"田胞，當細胞增至孔的80%,以漸增濃度加入實施例2制備的蜈蚣提取物，用1Mg/mL的LPS刺激細胞約16小時，不離心，通過細胞的沉降得到上清液，釆用上清液，通過測定N(V，一種NO反應產物，定量NO生成量。特別的，在96孔組織培養(yǎng)板內混合50^培養(yǎng)上清液和等量的Greiss反應劑(0.5。/?；前?，0.05%N-(l-奈基)乙二胺二氫氯化物/2.5%H3PO4(0.5%sulfanilyamide，0.05%N-(l-naphthyl)ethylenediaminedihydrochloride/2.5%H3P04))，在室溫、黑暗中放置10分鐘，反應，釆用自動定量繪圖酶標儀(microplatereader(Bio-RadCo"USA))測定ODs4。，基于NaN03制作N(V的標準曲線，定量NO生成量，每個實驗重復三次以上，每次用Dunnet，st-實驗定量。結果為，以ljug/mL的LPS處理的對照組的NO生成量約提高10倍，而蜈蚣提取物處理組的NO生成劑量依賴型減少。Jeju島原生的蜈蚣的提取物顯示最高活性，此時NO生成抑制作用在200yg/ml約73%(見表4和圖1)。因此，證實蜈蚣提取物抑制LPS-誘導的巨噬細胞的NO生成，降低巨噬細胞活性，從而抑制其它炎癥因子或疾病爆發(fā)。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>實驗實施例5:測定巨噬細胞的ROS為測定在LPS-誘導的巨噬細胞，蜈蚣提取物對活性氧簇(ROS)產生的抑制作用，本發(fā)明人根據(jù)Hayakawa等人的方法(EMBOJ.22,3356-3366，2003),利用2'，7'-二氯熒光素維生素K4(dichlorofluoresceindiacetate(DCFH2-DA，分子探針))測定羥基，DCFH2-DA本身具有細胞透性(cytopermeability)但沒有熒光，但一旦進入細胞，它將被細胞酯酶分解，得到2'-7'-二氯二氫熒光素(DCFH2),然后由過氧化物酶，細胞色素C和F^+等氧化成熒光2'-7'-二氯熒光素(DCF)，DCF提示H202水平，具有細胞內過氧化物酶活性，即通過將由于外部刺激積聚的細胞內羥基過氧化物酶定量化，測定羥基水平。特別的，在96孔板培養(yǎng)lxl0"田胞，當細胞增至孔的80%，以漸增濃度加入實施例2制備的蜈蚣提取物，用lMg/mL的LPS刺激細胞約16小時，加入10juMDCFH2-DA反應約1小時，終止實驗，反應物用PBS沖洗5遍，用熒光自動定量繪圖酶標儀(1420VICTOR,Perkin-Elmer,Belgium)測定OD485(激發(fā))andOD530(發(fā)射)。結果為，DCF熒光，一種ROS的指示，在只用LPS處理的對照組，時間依賴型增加，而蜈蚣提取物處理組的DCF熒光劑量依賴型減弱(見表5和圖2)。表5樣品ROS生成抑制(％)蜈蚣乙醇提取物(100pg/ml)75%抑制實驗實施例6:本發(fā)明蜈蚣提取物和化合物的急性毒性為考察蜈蚣提取物，從中分離的喹啉化合物和酚化合物的急性毒性，進行以下實驗。將12對(一雌一雄)4周齡無特定病原體ICR小鼠(3對/組)詞養(yǎng)在溫度調節(jié)為22±3°C，濕度調節(jié)為55±10%，光照調節(jié)為12L/12D的動物實驗室，使用前，動物適應一周，滅菌后隨時提供實驗動物用食物(CJCorp.,Seoul,Korea,formouseandrat)和飲用水。將上述實施例制備的蜈蚣提取物，或從中分離的喹啉化合物或酚化合物，用0.5%吐溫80作為溶劑，配置成50mg/ml，然后分別以每20g小鼠體重0.04ml(100mg/kg)，0.2ml(500mg/kg)和0.4ml(1,000mg/kg)的濃度口服施用于小鼠，樣品僅被施用一次。施用后，隨后7天觀測副作用和死亡。特別的，在口服施用的第一天的l小時，4小時，8小時和12小時，觀察動物的任何癥狀變化和死亡，并從第二天開始直至第七天，早晨和下午觀察一次或多次，施用后第七天，處死小鼠，解剖，肉眼觀察內部組織。從施用后，根據(jù)施用量，每天測定體重變化。結果顯示對于小鼠，提取物和化合物未引起任何特定臨床癥狀，體重變化或死亡，也沒有在血液實驗，血液生化實驗和解剖觀察到任何變化。因此，由于直到1000mg/kg的水平，在小鼠體內未引起任何毒性變化，蜈蚣提取物，從中分離的喹啉化合物和酚化合物被評價為安全物質，估計小鼠的LD50值遠遠大于1，000mg/kg。本發(fā)明的組合物的制備實施例描述如下。制備實施例l:藥物配方的準備<1-1>粉末的制各蜈蚣提取物，喹啉化合物或酴化合物2g乳糖lg混合上述組分，制備粉末，將其裝入氣密袋。<1-2>片劑的制備蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物100mg玉米淀粉lOOmg乳糖lOOmg硬脂酸鎂2mg混合上述組分，以常用片劑制備方法制備片劑。<1-3>膠囊的制各蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物100mg玉米淀粉100mg乳糖100mg硬脂酸鎂2mg混合上述組分，裝填膠囊，根據(jù)常用膠囊制備方法制備膠囊。<1-4〉注射劑的制備蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物10pg/ml稀鹽酸BP加至pH為3.5氯化鈉注射液BP少于lml將蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物溶解在氯化鈉注射液BP中，然后用稀鹽酸BP調節(jié)溶液的pH為3.5,用氯化鈉注射液BP調整溶液的體積。將溶液裝入5ml類型l透明玻璃安瓿瓶中，熔融玻璃封口，將安瓿瓶在12(TC加熱15分鐘以上，制備得到注射液。制備實施例2:食品的制備含有本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物的食品如下制備。<2-1>面粉食物的制各通過向小麥粉中加入0.110.0重量份本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物，然后將面粉制成面包，蛋糕，餅干，脆餅(crackers)和面條，制備改善健康的面粉食物。<2-2>湯和肉汁的制備向湯和肉汁中加入0.1~l.O重量份本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物，制備改善健康的肉制品，面條湯和肉汁。<2-3>續(xù)細牛肉的制備向絞細牛肉中加入10重量份本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物，制備改善健康的統(tǒng)細牛肉。<2-4>乳制品的制備向乳奶中加入0.1l.O重量份本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物，制備改善健康的諸如黃油、冰激凌等的乳制品。<2-5〉生食(Sunsik)的制備將糙米，大麥，糯米和薏米(job，stear)用常用方法凝膠化，然后干燥，將干燥混合物分散并粉末化，得到60目大小的谷物粉末。將黑豆，黑芝麻和紫蘇，利用常用方法蒸制并干燥，將干燥混合物分散并粉末化，得到60目大小的谷物粉末。將本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物用真空濃縮機減壓真空濃縮，用熱風干燥法噴霧干燥，干燥材料用研磨機粉末化，得到60目大小的谷狀粉末。將制備的谷物，種子和干燥的草藥混合提取物粉末以下述比例混合。谷物(糙米30重量份，薏米15重量份，大麥20重量份)；種子(紫蘇7重量份，黑豆8重量份，，黑芝麻7重量份)；本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物的干燥粉末(l重量份)；靈芝(0.5重量份)，地黃(0.5重量份)制備實施例3:飲料的制備含有本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物的飲料如下制備。<3-1>保健飲料的制備將酸性果糖(0.5%),低聚糖(2%),蔗糖(2%),鹽(0.5%)和水(75%)與本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物均勻混合，然后滅菌，混合物裝入諸如玻璃瓶或patbottle的小型容器中，制得保健飲料。<3-2>蔬菜汁的制備將0.5g本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物加入1000ml西紅柿或胡蘿卜汁中制備健康蔬菜汁。<3-3>果汁的制備將O.lg本發(fā)明的蜈蚣提取物，喹啉化合物或酚化合物加入1000ml蘋果或葡萄汁中制備健康果汁。工業(yè)應用性如上文所示，新型喹啉化合物，蜈蚣提取物，以及從提取物中分離的喹啉化合物和酚化合物具有優(yōu)異的LDL抗氧化活性，ACAT抑制活性和抗炎活性，但對小鼠未產生副作用。因此本發(fā)明的組合物可有效用于預防和治療由LDL-氧化或膽固醇酯合成和積聚介導，包括高脂血癥，動脈粥狀硬化，冠心病和心肌梗塞的心血管疾病。本領域技術人員可以理解以上公開的概念和特定具體實施方式，可以容易地將其用作改進和設計實現(xiàn)本發(fā)明同樣目的的其它具體實施方式的基礎，本領域技術人員也可以理解不偏離權利要求提出的、本發(fā)明的精神和范圍的等同具體實施方式。權利要求1.一種如式1所示的喹啉化合物<式1>2、如權利要求l所述的化合物，是自蜈蚣提取和純化的。3、一種權利要求1所述的喹啉化合物的制備方法，包含以下步通過使用溶劑，從干蜈蚣中制備蜈蚣提取物；通過將上述提取物懸浮在水中，依次用正己垸，氯仿和乙酸乙酯分餾，制備氯仿-可溶相；以及采用柱層析法分離和提純氯仿-可溶相，制備喹啉化合物。4、如權利要求3所述的制備方法，其中溶劑選自水，CrC6醇，CVC7烷烴，氯仿，乙酸乙酯，丙酮，醚，苯，二氯甲烷，環(huán)己烷，石油醚或它們的混合物。5、如權利要求3所述的制備方法，其中用柱層析法，從氯仿-可溶相中分離和提純餾分的步驟中，所用的流動相選自水、氯仿、甲醇或它們的混合物。6、一種含有蜈蚣提取物的預防和治療心血管疾病的組合物。7、一種含有蜈蚣提取物的一氧化氮(NO)產生抑制劑。8、一種含有蜈蚣提取物的活性氧簇(ROS)生成和積聚抑制劑。9、如權利要求6-8任一所述的組合物，其中蜈蚣提取物是釆用溶劑提取，所述溶劑選自水，CVC6醇，CVC7烷烴，氯仿，乙酸乙酯，丙酮，醚，苯，二氯甲烷，環(huán)己烷，石油醚或它們的混合物。10、如權利要求9所述的組合物，其中蜈蚣提取物是通過柱層析法分餾蜈蚣提取物制得的餾分。11、如權利要求io所述的組合物，其中柱層析法使用的流動相選自水、氯仿、甲醇或它們的混合物。12、一種預防和治療心血管疾病的組合物，該組合物含有式2所示的喹啉化合物或式3所示的酚化合物<式2><formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中，Rl5R2和R3獨立地為H，OH或C廣C4烷氧基;<式3><formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>13、如權利要求12所述的組合物，其中式2所示的組合物為3,8-二羥基喹啉或3，4-二甲氧基-喹啉-2，8-二醇。14、如權利要求12或13所述的組合物，其中化合物分離自蜈松。15、如權利要求6或12所述的組合物，其中所述心血管疾病是高脂血癥，動脈粥狀硬化，冠心病或心肌梗塞。全文摘要本發(fā)明涉及一種用于預防和治療心血管疾病的組合物，該組合物含有新型喹啉化合物，蜈蚣提取物或從該提取物分離的化合物。本發(fā)明的新型喹啉化合物，蜈蚣提取物或自該提取物分離的喹啉化合物和酚化合物顯示出優(yōu)異的LDL-抗氧化活性，ACAT抑制活性和抗炎活性，因此它們可以作為有效成分，包含在用于預防和治療心血管疾病的組合物中，所述心血管疾病包括由LDL-氧化，膽固醇酯合成和積累，以及炎癥介導的高脂血癥，動脈粥狀硬化，冠心病和心肌梗塞。文檔編號C07D215/24GK101370781SQ200680043222公開日2009年2月18日申請日期2006年5月19日優(yōu)先權日2005年11月17日發(fā)明者吳賢宇,樸斗常,樸鎬用,李雨松,鄭泰淑,韓鐘旻申請人:韓國生命工學研究院