專利名稱：紫杉烷衍生物及其制法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的紫杉烷衍生物，其制備方法，含有該化合物的藥物組合物及其在制備抗惡性腫瘤藥物中應(yīng)用；還涉及在其制備治療多藥耐藥腫瘤的藥物和逆轉(zhuǎn)多藥耐藥腫瘤的藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：
癌癥是嚴(yán)重危害人類的重大疾病之一。約有半數(shù)的經(jīng)早期診斷的癌癥患者能夠得到手術(shù)或放射治療。而有相當(dāng)數(shù)量的癌癥及轉(zhuǎn)移癌必需進行化學(xué)治療。腫瘤化療近年來有了很大進展，能有效地治療多種癌癥，例如白血病，惡性淋巴瘤，惡性肉瘤等，能有效地延長某些癌癥患者的生存期。臨床常用的化療藥物有長春生物鹼如長春新堿(Vincristine，VCR)，阿霉素類如doxorubicin，順鉑，鬼臼毒素(etoposide)，紫杉醇(taxol)等(Ojima，Bounaud PY，Bernacki RJ.治療多藥耐藥腫瘤紫杉烷類化合物的設(shè)計，現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)雜志，1999，5/645(Designing taxanes to treatmultidrug-resistant tumors.Modern Drug Discovery，1999，May/June45))。
目前雖有近50種抗癌藥在供臨床應(yīng)用，但對每一種腫瘤而言，僅有少數(shù)藥對它有效，原因在于腫瘤細(xì)胞各自的特性及耐藥性。腫瘤化療最大的問題是，易使癌細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致化療的失敗。近年的研究發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生耐藥性的機制有多種；腫瘤細(xì)胞對某一化療藥物產(chǎn)生耐藥后，對其它化學(xué)結(jié)構(gòu)及機理不同的化療藥物也產(chǎn)生交叉耐藥，稱“多藥耐藥”(multi-drug-resistance，MDR)。當(dāng)癌細(xì)胞產(chǎn)生強耐藥性后，如增加藥量繼續(xù)化療，不僅療效未能改善，且因藥量加大而產(chǎn)生更大的毒副作用。這是許多癌癥患者不能得治的重要原因(Cao LP，Duchrow M，WindhovelU，Kujath P，Bruch HP，Broll R.編碼P-糖蛋白基因MDR1 mRNA在福爾馬林固定的、石蠟包埋的膀胱癌組織中的表達，歐洲癌癥雜志，1998，34(10)1612(Expession of MDR1 mRNA andencoding P-glycoprotein in archival formalin-fixed paraffin-embedded gall bladder cancer tissues.Eur J Cancer，1998，34(10)1612))。
目前正在研究中的作用于pgp的MDR逆轉(zhuǎn)劑有(1)鈣通道阻斷劑(calciumchannel blocker)，主要有Verapamil及其衍生物等，在mdr1翻譯水平抑制pgp合成及其活性；(2)鈣調(diào)蛋白拮抗劑(calmodulin antagonists)，包括Chlorpromazine等吩噻嗪類衍生物，已進入臨床試驗；(3)環(huán)孢菌素類，環(huán)孢菌素A(Cyclosporine A)及其結(jié)構(gòu)類似物PSC833，SDZ280-466等，阻斷P-glycoprotein，能改變抗癌藥物的藥代動力學(xué)；(4)喹啉類Quinidine等，已進入臨床試驗；(5)抗雌激素類化合物。其它MDR逆轉(zhuǎn)劑有(1)反義核酸與核酶針對mdr1的反義核酸或核酶，破壞腫瘤細(xì)胞pgp mRNA的表達；(2)細(xì)胞因子TNF-α；(3)GSH耗竭劑Vitamin K3，BSO(丁硫氨酸亞砜胺)；(4)蛋白藥物交聯(lián)劑等。
此外，據(jù)報道紫杉烷類化合物Taxinine及其衍生物具有很好的逆轉(zhuǎn)多藥耐藥癌細(xì)胞的活性(Hosoyama H，Shigemori H，Tomida A，Tsuruo T，Kobayashi J.taxinine衍生物對多藥耐藥腫瘤細(xì)胞株的調(diào)節(jié)，生物有機與藥物化學(xué)通訊，1999，9389(Modulation of multidrug resistance in tumor cells by taxinine derivatives. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters，1999，9389))，紫杉醇衍生物ICD5109具有很好的抗多藥耐藥癌的活性(Polizzi D，Praresi G，Tortoreto M，Supino R，Riva R，BombardelliE，Zunino F.一種對人移植腫瘤有更強耐受性及治療活性的紫杉烷類化合物，癌癥研究，1999，591036(A novel taxane with improved tolerability and therapeutic activity in a panel of humantumor xenografts.Cancer Research，1999，591036))，目前還未見到它們臨床試用的報道。
比較理想的MDR逆轉(zhuǎn)劑一般要求劑量有一定的耐受性，能夠重復(fù)給藥以保持所需的藥物濃度，能完全逆轉(zhuǎn)MDR且副作用較小。上述Verapamil，CyclosporineA和Quinidine等，由于用為逆轉(zhuǎn)MDR藥物時出現(xiàn)的毒副作用，實際上未能在臨床化療中應(yīng)用；其它報道過的藥物尚處于研究階段。因此開發(fā)新型的治療惡性腫瘤的藥物，尤其是開發(fā)療效好，副作用小的治療多藥耐藥腫瘤的藥物和逆轉(zhuǎn)多藥耐藥腫瘤的藥物是非常必要的。
中國專利(CN01129602.X)是我們以前申請的新的紫杉烷及用途專利，在我們最近的研究中發(fā)現(xiàn)，在此類化合物中，當(dāng)5位基團為脂環(huán)基C1-8烷基?；㈦s環(huán)基C1-8烷基?；鶗r其活性尤其突出。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種活性更優(yōu)的新的化合物及其衍生物，它可以成為治療惡性腫瘤的藥物，尤其是療效優(yōu)良，副作用小的治療多藥耐藥腫瘤的藥物和逆轉(zhuǎn)多藥耐藥腫瘤的藥物； 本發(fā)明的另一目的在于提供一種制備本發(fā)明所述化合物的方法； 本發(fā)明的另一目的在于提供一種含有本發(fā)明所述化合物的藥用組合物。
為了完成本發(fā)明的目的，本發(fā)明人經(jīng)過研究現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)下面通式(I)的新的紫杉烷化合物，其具有殺傷惡性腫瘤細(xì)胞的活性，殺傷多藥耐藥腫瘤細(xì)胞的活性和逆轉(zhuǎn)多藥耐藥腫瘤細(xì)胞的耐藥性的活性，因而可以開發(fā)作為治療惡性腫瘤的藥物，尤其是開發(fā)治療多藥耐藥腫瘤的藥物和逆轉(zhuǎn)多藥耐藥腫瘤的耐藥性的逆轉(zhuǎn)藥物。
本發(fā)明第一方面涉及通式(I)的化合物或其立體異構(gòu)體或其酸加成鹽或其藥用鹽。

其中， R1為氫，R2為氫或者R1＝R2為氧 R3為氫、C1-8烷基?；?、苯甲?；?、芳烴基甲?；? R4為氫、C1-8烷基?；?、苯甲?；⒎紵N基甲?；? R5為脂環(huán)基C1-8烷基?；?、雜環(huán)基C1-8烷基?；黄渲?，脂環(huán)基或雜環(huán)基為五員環(huán)或六員環(huán)，環(huán)上有0-2個相同或不同的取代基，取代基是疊氮基、甲氧基或鹵素；在C1-8烷基上有0-2個相同或不同的取代基，0-2個C＝C雙鍵或C≡C三鍵，其中，取代基是氧、羥基、甲氧基或鹵素，條件是取代基不在同一位置上， 當(dāng)R5為含氮雜環(huán)基C1-8烷基?；鶗r，可與酸形成酸加成鹽。
根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選式Ia化合物或其立體異構(gòu)體包括
根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選式Ib化合物或其立體異構(gòu)體包括
R3、R4、R5的定義如上。
最優(yōu)選的的脂環(huán)基選自環(huán)己烷； 最優(yōu)選的的雜環(huán)基選自2-噻吩、2-呋喃、2S-吡咯烷、3-吡啶； 最優(yōu)選的烷基?；x自甲酰基、乙?；?、丙?；?、丁?；⒈；?； 根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明通式(I)化合物優(yōu)選下面具體的化合物或其立體異構(gòu)體或其酸加成鹽 5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-噻吩乙酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-噻吩丙酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-噻吩丁酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-呋喃甲酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-呋喃丙烯酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2S-吡咯烷甲酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(3-吡啶甲酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(3-吡啶丙酰氧基)-新杉素A鹽酸鹽，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-環(huán)己烷乙酰氧基-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-環(huán)己烷丙酰氧基-新杉素A。

5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-5α-(3-吡啶甲酰氧基)-新杉素A
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-5α-(2-呋喃甲酰氧基)-新杉素A
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-5α-(2-呋喃丙烯酰氧基)-新杉素A
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-5α-(2-噻吩乙酰氧基)-新杉素A
術(shù)語 “℃1-8烷基酰基、脂環(huán)基C1-8烷基酰基、雜環(huán)基C1-8烷基?；敝械摹癈1-8烷基”是指含1-8個碳原子的飽和脂肪烷烴基或不飽和的烯烴基或炔烴基，如甲?；?，乙?；?，丙酰基，丙烯?；□；惗□；?，2-丁烯酰基，戊酰基，含支鏈的戊?；取?br> 以下將結(jié)合反應(yīng)路線圖和實施例具體說明制備本發(fā)明通式I化合物方法。
本發(fā)明通式I化合物由通式Ia和通式Ib兩個亞類化合物組成，下面將分類詳細(xì)說明通式I化合物制備方法 制備通式Ia化合物的反應(yīng)路線為
制備通式Ib化合物的反應(yīng)路線為
通過以上的的反應(yīng)路線可以明了，本發(fā)明事實上包括兩種制備方法，其中，以下涉及一種通式(Ia)化合物的制備方法，包括以下步驟 1.得到的式a-4化合物14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A水解，堿干燥后，于有機溶劑中，經(jīng)有機堿處理，與酸酐(R’CO)2O反應(yīng)，其中R’為C0-7烷基、苯甲基、芳烴基甲基；進行選擇性?；玫绞絘-5化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-2α-R3基-10β-R4基-新杉素A； 2.經(jīng)步驟5得到的式a-5化合物于干燥的有機溶劑中，在二環(huán)己基碳化二亞胺和有機堿存在下與R”COOH反應(yīng)，成酯得到通式Ia化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-2α-R3基-10β-R4基-5α-R5基-新杉素A。
換言之，本發(fā)明通式I化合物的制備方法包括以下步驟 步驟5式a-4化合物(14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A)用堿水解，得到產(chǎn)物，不需純化，干燥后，于有機溶劑中，經(jīng)有機堿處理，與酸酐(R’CO)2O反應(yīng)；該反應(yīng)分兩個階段，第一個階段，通常在甲醇或甲醇/四氫呋喃混合溶劑中進行，20-40℃下經(jīng)2-4mol/L KOH或K2CO3水溶液處理，得到全水解產(chǎn)物；第二個階段，一般有機溶劑和堿，有機溶劑選用二氯甲烷/4-二甲氨基吡啶DMAP；堿選用吡啶；酸酐為C1-8的低級烷基酸酐或者苯甲酸酐或者芳香基甲酸酐；反應(yīng)在溫度為20-50℃下進行，優(yōu)選為20-30℃。
步驟6得到式a-5化合物于干燥的有機溶劑中，在二環(huán)己基碳化二亞胺和有機堿存在下與R”COOH反應(yīng)，成酯得到通式Ia化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-2α-R3基-10β-R4基-5α-R5基-新杉素A，其中R3、R4、R5定義見通式Ia定義。本步反應(yīng)所用有機溶劑優(yōu)選甲苯、二氯甲烷等不干擾反應(yīng)的惰性有機溶劑，以甲苯最佳；有機堿采用DMAP，4-PP，三乙胺等，優(yōu)選4-二甲氨基吡啶DMAP；反應(yīng)一般在20-50℃條件下進行，優(yōu)選30-35℃。
說明在通式(Ia)化合物的制備的反應(yīng)路線中，步驟5，除可以制備2，10位雙R’?；衔锿?，還可以通過控制反應(yīng)條件，選擇性水解和選擇性?；?，得到2位或10位單R’?；衔?如a-4化合物用堿水解，得到的全水解產(chǎn)物即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A，在20℃下于吡啶溶液中與2倍當(dāng)量的乙酸酐((CH3CO)2O)反應(yīng)得到10位乙?；幕衔锛?α，5α-二去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A；又如a-4化合物在40℃下用6倍當(dāng)量的4mol/L KOH水溶液處理0.5h得到10位羥基化合物即5α，10β-二去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A)；隨后與不同酸縮合，得到2α或10β-羥基-5α-R”酰基產(chǎn)物。
本發(fā)明還包括一種通式(Ib)化合物的制備方法，包括 1.按照通式Ia制備方法得到的式a-3化合物，14-脫乙酰氧基-新杉素A，用堿水解，干燥后，于有機溶劑中，經(jīng)有機堿處理，與酸酐(R’CO)2O反應(yīng)，其中R’為C0-7烷基、苯甲基、芳烴基甲基，進行選擇性?；玫绞絙-1化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-2α-R3基-10β-R4基-新杉素A，其中R3、R4定義見通式Ib定義。
2.經(jīng)步驟1得到的式b-1化合物于干燥的有機溶劑中，在二環(huán)己基碳化二亞胺和有機堿存在下與R”COOH反應(yīng)成酯得到通式Ib化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-2α-R3基-10β-R4基-5α-R5基-新杉素A，其中R3、R4、R5定義見通式Ib定義。
換言之，本發(fā)明通式I化合物的制備方法包括以下步驟 步驟1式a-3化合物(14-脫乙酰氧基-新杉素A)用堿水解，得到產(chǎn)物，不需純化，干燥后，于有機溶劑中，經(jīng)有機堿處理，與酸酐(R’CO)2O反應(yīng)，其中R’為C0-7烷基、苯甲基、芳烴基甲基；進行選擇性?；玫绞絙-1化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-2α-R3基-10β-R4基-新杉素A，其中R3、R4定義見通式Ib定義。
該反應(yīng)分兩個階段，第一個階段，通常在甲醇或甲醇/四氫呋喃混合溶劑中進行，20-40℃下經(jīng)2-10，有選2-4mol/L KOH或K2CO3水溶液處理，得到全水解產(chǎn)物；第二個階段，一般有機溶劑和堿選用吡啶或二氯甲烷/DMAP等，酸酐為C1-8的烷基酸酐或者苯甲酸酐或者芳香基甲酸酐，反應(yīng)在溫度為20-50℃下進行，其中優(yōu)選20-30℃。
步驟2得到式b-1化合物于干燥的有機溶劑中，在二環(huán)己基碳化二亞胺和有機堿存在下與R”COOH反應(yīng)成酯得到通式Ib化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-2α-R3基-10β-R4基-5α-R5基-新杉素A，其中R3、R4、R5定義見通式Ib定義。
本步反應(yīng)所用有機溶劑選用不干擾反應(yīng)的惰性有機溶劑，優(yōu)選甲苯、二氯甲烷，最有選甲苯；有機堿采用DMAP，4-PP，三乙胺等，優(yōu)選4-二甲氨基吡啶(DMAP)；反應(yīng)一般在20-50℃條件下進行，優(yōu)選30-35℃。
本發(fā)明另一方面還涉及一種藥物組合物，它包括至少一種治療有效劑量的通式(I)化合物和/或立體異構(gòu)體或其藥用鹽例如藥用酸鹽和藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明再一方面還涉及以本發(fā)明化合物作為活性成份的藥物組合物。該藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備?？赏ㄟ^將本發(fā)明化合物與一種或多種藥學(xué)上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成適于人或動物使用的任何劑型。本發(fā)明化合物在其藥物組合物中的含量通常為0.1-95重量％。
本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮膚、陰道、直腸等。
給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以是溶液劑(包括真溶液和膠體溶液)、乳劑(包括o/w型、w/o型和復(fù)乳)、混懸劑、注射劑(包括水針劑、粉針劑和輸液)、滴眼劑、滴鼻劑、洗劑和搽劑等；固體劑型可以是片劑(包括普通片、腸溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊)、顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉)霧劑、噴霧劑等；半固體劑型可以是軟膏劑、凝膠劑、糊劑等。
本發(fā)明化合物可以制成普通制劑、也制成是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。
為了將本發(fā)明化合物制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種賦形劑，包括稀釋劑、黏合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑。稀釋劑可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣等；濕潤劑可以是水、乙醇、異丙醇等；粘合劑可以是淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纖維素、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、丙烯酸樹脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解劑可以是干淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉等；潤滑劑和助流劑可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸鹽、酒石酸、液體石蠟、聚乙二醇等。
還可以將片劑進一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。
為了將給藥單元制成膠囊劑，可以將有效成分本發(fā)明化合物與稀釋劑、助流劑混合，將混合物直接置于硬膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明化合物先與稀釋劑、黏合劑、崩解劑制成顆?；蛭⑼?，再置于硬膠囊或軟膠囊中。用于制備本發(fā)明化合物片劑的各稀釋劑、黏合劑、潤濕劑、崩解劑、助流劑品種也可用于制備本發(fā)明化合物的膠囊劑。
為將本發(fā)明化合物制成注射劑，可以用水、乙醇、異丙醇、丙二醇或它們的混合物作溶劑并加入適量本領(lǐng)域常用的增溶劑、助溶劑、pH調(diào)劑劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑。增溶劑或助溶劑可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羥丙基-β-環(huán)糊精等；pH調(diào)劑劑可以是磷酸鹽、醋酸鹽、鹽酸、氫氧化鈉等；滲透壓調(diào)節(jié)劑可以是氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、磷酸鹽、醋酸鹽等。如制備凍干粉針劑，還可加入甘露醇、葡萄糖等作為支撐劑。
此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑或其它添加劑。
為達到用藥目的，增強治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。
本發(fā)明化合物藥物組合物的給藥劑量依照所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動物的個體情況，給藥途徑和劑型等可以有大范圍的變化。一般來講，本發(fā)明化合物的每天的合適劑量范圍為0.001-150mg/Kg體重，優(yōu)選為0.1-100mg/Kg體重，更優(yōu)選為1-60mg/Kg體重，最優(yōu)選為2-30mg/Kg體重。上述劑量可以一個劑量單位或分成幾個劑量單位給藥，這取決于醫(yī)生的臨床經(jīng)驗以及包括運用其它治療手段的給藥方案。
本發(fā)明的化合物或組合物可單獨服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用。當(dāng)本發(fā)明的化合物與其它治療藥物存在協(xié)同作用時，應(yīng)根據(jù)實際情況調(diào)整它的劑量。
本發(fā)明還涉及上述通式I化合物或其立體異構(gòu)體在制備抗惡性腫瘤藥物，尤其是治療多藥耐藥腫瘤的藥物和逆轉(zhuǎn)多藥耐藥腫瘤的耐藥性藥物中的用途。

具體實施例方式 為了進一步理解本發(fā)明，下面的實施例及藥理實驗用來進一步說明本發(fā)明。
制備例 步驟114β-去乙酰-新杉素A SIA原料溶于甲醇中，0℃加入0℃攪拌0.5h。加入濃鹽酸調(diào)PH值至7，新杉素A(7.0g，13.9mmol)于150mL甲醇中，0℃下加入10mol/L氫氧化鉀溶液(14.0mL，139.0mmol)，攪拌0.5h，以5％HCl水溶液調(diào)PH至6-7，過濾，濾液減壓濃縮，殘余物以乙酸乙酯(5×50mL)提取，合并有機相，依次以飽和碳酸氫鈉溶液，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除溶劑，得到的粗產(chǎn)品用硅膠柱色譜純化，石油醚丙酮(10:1)的混合溶劑洗脫，得14β-去乙酰-新杉素A(2.3g)，收率35.8％，mp200-203℃。
步驟214β-去乙酰-14β-原磺酸酯-新杉素A 氮氣保護下，14β-去乙酰-新杉素A(9.0g，19.5mmol)于干燥的四氫呋喃150mL中，加入氫化鈉(60％于礦油中，5.2g，130.0mmol)，二硫化碳(26.2mL，430.0mmol)，回流20h，降至室溫，加入碘甲烷(7.5mL，120.5mmol)，升至40-50℃繼續(xù)攪拌3h，降至室溫，過濾，濃縮，用乙酸乙酯提取，依次用飽和氯化銨水溶液、飽和食鹽水洗、無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，硅膠柱色譜純化，石油醚:丙酮(10:1)的混合溶劑洗脫，得14β-去乙酰-14β-原磺酸酯-新杉素A(9.7g)，收率90.2％，mp43-45℃。
1HNMR(300MHz CDCl3，δ)6.07(dd，1H，J＝5.7Hz，12Hz，10-H)，5.80(dd，1H，J＝4.5Hz，9Hz，14-H)，5.39(dd，1H，J＝2.1Hz，6.6Hz，2-H)，5.29(t，1H，J＝2.7Hz，5-H)，5.27(s，1H，20-H)，4.84(s，1H，20-H)，3.02(dd，1H，J＝9Hz，18.9Hz，13-H)，2.90(d，1H，J＝6.3Hz，H，2.52(s，3H，14-OS2CMe)，2.49(dd，1H，J＝3.9Hz，18.9Hz，13-H)，2.39(dd，1H，J＝12Hz，14.7Hz，13-H)，2.18(s，3H，OAc-CH3),2.10(s，3H，18-CH3)，2.07(s，3H，OAc-CH3)，2.01(s，3H，OAc-CH3)，2.10-1.91(m，2H，6-H，1-H)，1.79(m，2H，6-H，7-H)，1.69(s，3H，16-CH3)，1.63(dd，1H，J＝5.4Hz，15Hz，9-H)，1.23(m，1H，7-H)，1.16(s，3H，17-CH3)，0.84(s，3H，19-CH3) 步驟314-脫乙酰氧基-新杉素A 氮氣保護下，14β-去乙酰-14β-原磺酸酯-新杉素A(8.6g，15.6mmol)于干燥脫氣的甲苯70mL中，升溫至80℃，穩(wěn)定后加入三正丁基氫化錫(Bu3SnH，40mL，148.4mmol)，偶誕二異丁氰(AIBN，256mg，1.6mmol)，攪拌4h。濃縮，直接上樣，硅膠柱色譜純化，石油醚丙酮(201)的混合溶劑洗脫，得14-脫乙酰氧基-新杉素A(6.3g)，收率90.6％，mp130℃。
[α]D20+54°(c＝0.83，CHCl3)； 1HNMR(500MHz，CDCl3，δ)6.06(dd，1H，J＝5.3Hz，12.3Hz，10-H)，5.38(dd，1H，J＝2Hz，6.3Hz，2-H)，5.27(t，1H，J＝3Hz，5-H)，5.25(s，1H，20-H)，4.89(s，1H，20-H)，3.08(d，1H，J＝6Hz，3-H)，2.45(m，1H，13-H)，2.37(dd，1H，J＝12Hz，14.5Hz，9-H)，2.12(s，3H，OAc-CH3)，2.06(s，3H，18-CH3)，2.04(s，3H，OAc-CH3)，2.03(s，3H，OAc-CH3)，2.09-1.87(m，3H，7-H，13-H，14-H)，1.80(m，3H，1-H，2×6-H)，1.68(m，1H，14-H)，1.59(s，3H，16-CH3)，1.58(m，1H，9-H)，1.22(m，1H，7-H)，1.05(s，3H，17-CH3)，0.85(s，3H，19-CH3)； 步驟414-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A 氮氣保護下，14-脫乙酰氧基-新杉素A(6.3g，14.1mmol)于干燥的苯450mL中，依次加入無水乙酸鈉(30g，365.9mmol)，硅藻土75g，鹽酸鉻酐吡啶(PCC，75g，348.9mmol)，加熱至95℃回流4h，過濾，殘渣用乙醚、乙酸乙酯先后洗，合并濾液，減壓濃縮，硅膠柱色譜純化，石油醚丙酮(201)的混合溶劑洗脫，得14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A(3.9g)，收率60.4％，mp72℃。
[α]D20+69°(c＝0.58，CHCl3)； 1HNMR(500MHz，CDCl3，δppm)6.06(dd，1H，J＝12Hz，5.5Hz，H-10)，5.46(dd，1H，J＝2Hz，6.5Hz，H-2)，5.27(s，1H，H-20)，5.23(t，1H，J＝3Hz，H-5)，4.82(s，1H，H-20)，3.19(d，1H，J＝6Hz，H-3)，2.87(dd，1H，J＝6.7Hz，19.7Hz，H-14)，2.48(dd，1H，J＝12Hz，15Hz，H-9)，2.33(d，1H，J＝19.5Hz，H-14)，2.20(s，3H，OAc-CH3-10)，2.14(dd，1H，J＝2Hz，6.7Hz，H-1)，2.10(s，3H，OAc-CH3-2)，2.06(s，3H，OAc-CH3-5)，1.99(s，3H，CH3-18)，2.14-1.85(m，1H，H-7)，1.79(m，3H，2×H-6，H-9)，1.69(s，3H，CH3-16)，1.21(m，1H，H-7)，1.13(s，3H，CH3-17)，0.90(s，3H，CH3-19)； 見(CN01129602.X) 實施例15α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-噻吩乙酰氧基)-新杉素A
步驟15α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A 14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A(1.3g，2.8mmol)于甲醇80ml中，加入10mol/L氫氧化鉀溶液(2.4mL，24mmol)1，60℃攪拌5h，以6mol/L HCl水溶液調(diào)PH值至6-7，濃縮，用乙酸乙酯(3×15ml)提取，合并有機相，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液，brine洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸去溶劑，真空干燥，得到1.0g粗產(chǎn)品。粗產(chǎn)品溶于20ml吡啶，加入2ml乙酸酐(21.2mmol)，室溫攪拌8h，加入甲醇2ml，繼續(xù)攪拌10min，減壓濃縮，乙酸乙酯100ml稀釋，1mol/L鹽酸，飽和CuSO4水溶液，飽和碳酸氫鈉水溶液，brine洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到的粗產(chǎn)品用硅膠柱色譜純化，石油醚丙酮(101)的混合溶劑洗脫，得5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A(420mg)，兩步收率36％，mp153℃。
ESIMSm/z 419(M+1)，441(M+Na)，457(M+K)； 1HNMR(500MHz，CDCl3，δppm)6.11(dd，1H，J＝12Hz，5.5Hz，H-10)，5.47(dd，1H，J＝2Hz，6.5Hz，H-2)，5.09(s，1H，H-20)，4.75(s，1H，H-20)，4.16(br.s，1H，H-5)，3.52(d，1H，J＝6Hz，H-3)，2.77(dd，1H，J＝7Hz，19.5Hz，H-14)，2.44(dd，1H，J＝12.3Hz，14.7Hz，H-9)，2.37(d，1H，J＝20Hz，H-14)，2.17(s，3H，OAc-CH3-10)，2.12(dd，1H，J＝1.7Hz，6.7Hz，H-1)，2.09(s，3H，OAc-CH3-2)，2.07(s，3H，CH3-18)，2.12-2.06(m，1H，H-7)，1.73(m，3H，2×H-6，H-9)，1.69(s，3H，CH3-16)，1.17(m，1H，H-7)，1.13(s，3H，CH3-17)，0.874(s，3H，CH3-19)； 步驟25α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-噻吩乙酰氧基)-新杉素A 5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A(20mg，0.048mmol)于甲苯4mL中，加入DCC(40mg，0.19mmol)，2-噻吩乙酸(27mg，0.19mmol)，室溫攪拌，加入DMAP(6mg，0.049mmol)繼續(xù)反應(yīng)，加入甲醇終止反應(yīng)，濃縮，用乙酸乙酯提取，依次用1mol/L的稀鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉溶液、飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，TLC純化，石油醚丙酮(41)的混合溶劑展開，得目標(biāo)化合物(22mg)，收率84.8％。
ESI-MS m/z543.5[M+H]+，560.5[M+NH4]+ 1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ ppm7.24-7.22(m，1H，噻吩-5’-H)，7.02-6.99(m，1H，噻吩-3’-H)，6.97-6.93(m，1H，噻吩-4’-H)，6.08(dd，1H，J＝12.0Hz，5.5Hz，10-H)，5.48(d，1H，J＝5.0Hz，2-H)，5.28(s，1H，20-H)，5.26(s，1H，5-H)，4.85(s，1H，20-H)，3.82-3.72(m，2H，2’-CH2)，3.19(d，1H，J＝6.0Hz，3-H)，2.82(dd，1H，J＝7.0Hz，20.0Hz，14-H)，2.50(dd，1H，J＝12.0Hz，14.5Hz，9-H)，2.36(d，1H，J＝20.0Hz，14-H)，2.24(s，3H，10-OAc-CH3)，2.16(d，1H，J＝6.5Hz，1-H)，2.10(s，3H，2-OAc-CH3)，2.06(s，3H，18-CH3)，1.99-1.92(m，1H，7-H)，1.83-1.74(m，3H，6-H，9-H)，1.70(s，3H，16-CH3)，1.36-1.22(m，1H，7-H)，1.15(s，3H，17-CH3)，0.91(s，3H，19-CH3) 實施例25α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-噻吩丙酰氧基)-新杉素A
按照實施例1描述的方法，步驟2中，用2-噻吩丙酸代替2-噻吩乙酸制備目標(biāo)產(chǎn)物。
ESI-MS m/z557.4[M+H]+，574.4[M+NH4]+，579.4[M+Na]+ 1H-NMR(500MHz，CDCl3)δppm7.15-7.13(m，1H，噻吩-5’-H)，6.96-6.94(m，2H，噻吩-3’-H，噻吩-4’-H)，6.06(dd，1H，J＝12.0Hz，5.5Hz，10-H)，5.48(dd，1H，J＝2.0Hz，6.5Hz，2-H)，5.29(s，1H，20-H)，5.26(t，1H，J＝3.0Hz，5-H)，4.85(s，1H，20-H)，3.17-3.13(m，3H，3-H，2’-CH2)，2.80(dd，1H，J＝7.0Hz，20.0Hz，14-H)，2.68-2.56(m，2H，3’-CH2)，2.49(dd，1H，J＝12.0Hz，14.5Hz，9-H)，2.32(d，1H，J＝19.5Hz，14-H)，2.18(s，3H，10-OAc-CH3)，2.15(dd，1H，J＝2.0Hz，7.5Hz，1-H)，2.11(s，3H，2-OAc-CH3)，2.08(s，3H，18-CH3)，1.96-1.89(m，2H，6-H，7-H)，1.81-1.74(m，2H，6-H，9-H)，1.70(s，3H，16-CH3)，1.30-1.27(m，1H，7-H)，1.14(s，3H，17-CH3)，0.92(s，3H，19-CH3) 實施例35α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-噻吩丁酰氧基)-新杉素A
按照實施例1描述的方法，步驟2中，用2-噻吩丁酸代替2-噻吩乙酸制備目標(biāo)產(chǎn)物。
ESI-MS m/z571.5[M+H]+，588.5[M+NH4]+ 1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ ppm7.12(d，1H，J＝5.0Hz，噻吩-5’-H)，6.92(d，1H，J＝4.0Hz，噻吩-3’-H)，6.86(s，1H，噻吩-4’-H)，6.05(dd，1H，J＝12.0Hz，5.5Hz，10-H)，5.46(d，1H，J＝6.5Hz，2-H)，5.27(s，1H，20-H)，5.23(s，1H，5-H)，4.82(s，1H，20-H)，3.15(d，1H，J＝6.5Hz，3-H)，2.94-2.87(m，2H，2’-CH2)，2.78(dd，1H，J＝7.5Hz，20.0Hz，14-H)，2.48(m，1H，9-H)，2.32-2.28(m，3H，3’-CH2，14-H)，2.16(s，3H，10-OAc-CH3)，2.14-2.11(m，1H，1-H)，2.09(s，3H，2-OAc-CH3)，2.06(s，3H，18-CH3)，2.04-1.89(m，3H，4’-CH2，7-H)，1.79-1.73(m，3H，2×6-H，9-H)，1.69(s，3H，16-CH3)，1.35-1.25(m，1H，7-H)，1.13(s，3H，17-CH3)，0.90(s，3H，19-CH3) 實施例45α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-呋喃甲酰氧基)-新杉素A
按照實施例1描述的方法，步驟2中，用2-呋喃甲酸代替2-噻吩乙酸制備目標(biāo)產(chǎn)物。
ESI-MS m/z513.6[M+H]+，530.7[M+NH4]+，535.6[M+Na]+ 1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ ppm7.69(s，1H，呋喃-5’-H)，7.16(d，1H，J＝3.5Hz，呋喃-3’-H)，6.55(t，1H，J＝2.0Hz，呋喃-4’-H)，6.06(dd，1H，J＝12.0Hz，5.5Hz，10-H)，5.50(dd，1H，J＝2.0Hz，7.0Hz，2-H)，5.40(s，1H，5-H)，5.34(s，1H，20-H)，4.78(s，1H，20-H)，3.27(d，1H，J＝7.0Hz，3-H)，2.78(dd，1H，J＝7.0Hz，19.5Hz，14-H)，2.54(dd，1H，J＝12.5Hz，14.5Hz，9-H)，2.42(d，1H，J＝19.5Hz，14-H)，2.18(d，1H，J＝4.0Hz，1-H)，2.13(s，3H，10-OAc-CH3)，2.09(s，3H，2-OAc-CH3)，2.06(s，3H，18-CH3)，1.99-1.76(m，4H，7-H，2×6-H，9-H)，1.71(s，3H，16-CH3)，1.36-1.30(m，1H，7-H)，1.11(s，3H，17-CH3)，0.95(s，3H，19-CH3) 實施例55α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-呋喃丙烯酰氧基)-新杉素A
按照實施例1描述的方法，步驟2中，用2-呋喃丙烯酸代替2-噻吩乙酸制備目標(biāo)產(chǎn)物。
ESI-MS m/z539.4[M+H]+ HRFAB-MS(Gly+Na)Calc.561.246438，C31H38O8Na；Found561.247543 1H-NMR(500MHz，CDCl3)δppm7.56(s，1H，呋喃-5’-H)，7.38(d，1H，J＝15.5Hz，3’-CH)，6.86(d，1H，J＝3.0Hz，呋喃-3’-H)，6.49(dd，1H，J＝1.5Hz，3.0Hz，呋喃-4’-H)，6.27(d，1H，J＝16.0Hz，2’-CH)，6.07(dd，1H，J＝12.0Hz，5.5Hz，10-H)，5.48(dd，1H，J＝2.0Hz，6.5Hz，2-H)，5.31(s，1H，5-H)，5.28(s，1H，20-H)，4.82(s，1H，20-H)，3.30(d，1H，J＝6.0Hz，3-H)，2.81(dd，1H，J＝7.0Hz，19.5Hz，14-H)，2.49(dd，1H，J＝12.0Hz，15.0Hz，9-H)，2.41(d，1H，J＝20.0Hz，14-H)，2.22(s，3H，10-OAc-CH3)，2.17-2.15(m，1H，1-H)，2.09(s，3H，2-OAc-CH3)，2.06(s，3H，18-CH3)，1.95-1.92(m，2H，6-H，7-H)，1.85-1.74(m，2H，6-H，9-H)，1.69(s，3H，16-CH3)，1.30-1.27(m，1H，7-H)，1.13(s，3H，17-CH3)，0.92(s，3H，19-CH3) 實施例65α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2S-吡咯烷甲酰氧基)-新杉素A
按照實施例1描述的方法，步驟2中，用L-脯氨酸代替2-噻吩乙酸制備目標(biāo)產(chǎn)物。
ESI-MS m/z516.4[M+H]+ 1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ ppm6.07(dd，1H，J＝12.0Hz，6.0Hz，10-H)，5.47(dd，1H，J＝7.0Hz，2-H)，5.34(s，1H，5-H)，5.31(s，1H，20-H)，4.84(s，1H，20-H)，3.78-3.74(m，1H，吡咯烷-2’-H)，3.18-3.15(m，2H，吡咯烷-5’-H)，3.09(t，1H，J＝7.0Hz，3-H)，2.80(dd，1H，J＝7.0Hz，19.5Hz，14-H)，2.51(dd，1H，J＝12.0Hz，15.0Hz，9-H)，2.37(d，1H，J＝20.0Hz，14-H)，2.20(s，3H，10-OAc-CH3)，2.19-2.16(m，3H，吡咯烷-3’-H，1-H)，2.10(s，3H，2-OAc-CH3)，2.07(s，3H，18-CH3)，1.98-1.91(m，2H，6-H，7-H)，1.88-1.76(m，4H，吡咯烷-4’-H，6-H，9-H)，1.70(s，3H，16-CH3)，1.31-1.27(m，1H，7-H)，1.15(s，3H，17-CH3)，0.92(s，3H，19-CH3) 實施例75α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(3-吡啶甲酰氧基)-新杉素A
按照實施例1描述的方法，步驟2中，用3-吡啶甲酸代替2-噻吩乙酸制備目標(biāo)產(chǎn)物。
ESI-MS m/z524.5[M+H]+ 1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ ppm9.226(br.s，1H，吡啶-2’-H)，8.955(br.s，1H，吡啶-6’-H)，8.386(br.s，1H，吡啶-4’-H)，7.916(br.s，1H，吡啶-5’-H)，5.988(dd，1H，J＝12.0Hz，5.5Hz，10-H)，5.505(d，1H，J＝5.5Hz，2-H)，5.427(s，1H，5-H)，5.427(s，1H，20-H)，4.912(s，1H，20-H)，3.098(d，1H，J＝6.5Hz，3-H)，2.798(dd，1H，J＝6.5Hz，20.5Hz，14-H)，2.538(m，1H，9-H)，2.326(d，1H，J＝20.0Hz，14-H)，2.196-2.171(m，1H，1-H)，2.083(s，3H，10-OAc-CH3)，2.068(s，3H，2-OAc-CH3)，1.980(s，3H，18-CH3)，1.955-1.936(m，3H，2×6-H，7-H)，1.803(dd，1H，J＝15.0Hz，5.5Hz，9-H)，1.699(s，3H，16-CH3)，1.421-1.383(m，1H，7-H)，1.117(s，3H，17-CH3)，0.963(s，3H，19-CH3) 實施例85α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(3-吡啶丙酰氧基)-新杉素A鹽酸鹽
按照實施例1描述的方法，步驟2中，用3-吡啶丙酸代替2-噻吩乙酸制備目標(biāo)產(chǎn)物。
3-吡啶丙酸(29mg，0.192mmol)置于干燥的反應(yīng)瓶中，加入新鮮蒸餾的氯化亞砜4mL，攪拌，80℃回流3小時。冷卻至室溫，加入無水硫酸鈉干燥過的石油醚，蒸餾除去過量的氯化亞砜，得到3-吡啶丙酰氯粗產(chǎn)物。
用干燥的吡啶2mL溶解3-吡啶丙酰氯產(chǎn)物，緩慢滴加化合物19(20mg，0.048mmol)的吡啶溶液1mL，室溫攪拌4h，至TLC顯示原料消失。滴加冰水1mL終止反應(yīng)，用乙酸乙酯提取，依次用1mol·L-1的稀鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉溶液、飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，TLC純化，石油醚丙酮(31)的混合溶劑展開，得化合物33(24mg)，收率85.4％。
ESI-MS m/z587.4[M-H]+ 1H-NMR(500MHz，CDCl3)δppm7.25-7.22(m，1H，吡啶-2’-H)，7.16(t，1H，J＝7.0Hz，吡啶-6’-H)，7.10-7.08(m，1H，吡啶-4’-H)，6.75-6.72(m，1H，吡啶-5’-H)，6.05(dd，1H，J＝11.5Hz，5.0Hz，10-H)，5.46(dd，1H，J＝7.0Hz，2.0Hz，2-H)，5.18(s，1H，20-H)，4.98(d，1H，J＝5.0Hz，5-H)，4.78(s，1H，20-H)，4.07(t，2H，J＝3.0Hz，2’-CH2)，3.81(t，2H，J＝7.0Hz，3’-CH2)，3.15(d，1H，J＝6.5Hz，3-H)，2.78(dd，1H，J＝7.0Hz，20.0Hz，14-H)，2.54(dd，1H，J＝6.5Hz，16.5Hz，9-H)，2.26(d，1H，J＝19.5Hz，14-H)，2.16(s，3H，10-OAc-CH3)，2.13(dd，1H，J＝7.0Hz，2.0Hz，1-H)，2.07(s，3H，2-OAc-CH3)，2.06(s，3H，18-CH3)，1.99-1.94(m，2H，6-H，7-H)，1.89-1.77(m，2H，6-H，9-H)，1.70(s，3H，16-CH3)，1.20-1.16(m，1H，7-H)，1.11(s，3H，17-CH3)，0.89(s，3H，19-CH3) 實施例95α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-環(huán)己烷乙酰氧基-新杉素A
按照實施例1描述的方法，步驟2中，用環(huán)己基乙酸代替2-噻吩乙酸制備目標(biāo)產(chǎn)物。
ESI-MS m/z543.5[M+H]+，560.5[M+NH4]+，565.4[M+Na]+ 1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ ppm6.07(dd，1H，J＝12.0Hz，5.5Hz，10-H)，5.46(d，1H，J＝5.5Hz，2-H)，5.26(s，1H，20-H)，5.23(s，1H，5-H)，4.81(s，1H，20-H)，3.15(d，1H，J＝6.0Hz，3-H)，2.77(dd，1H，J＝7.0Hz，19.5Hz，14-H)，2.48(dd，1H，J＝12.5Hz，14.5Hz，9-H)，2.32(s，2H，2’-CH2)，2.28(s，1H，14-H)，2.19(s，3H，10-OAc-CH3)，2.13(d，1H，J＝6.5Hz，1-H)，2.09(s，3H，2-OAc-CH3)，2.06(s，3H，18-CH3)，1.97-1.90(m，1H，7-H)，1.82-1.72(m，3H，2×6-H，9-H)，1.69(s，3H，16-CH3)，1.66-1.63(m，1H，環(huán)己基-1’-H)，1.56-1.41(m，5H，環(huán)己基-H)，1.29-0.96(m，6H，7-H，環(huán)己基-H)，1.12(s，3H，17-CH3)，0.90(s，3H，19-CH3) 實施例105α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-環(huán)己烷丙酰氧基-新杉素A
按照實施例1描述的方法，步驟2中，用環(huán)己基丙酸代替2-噻吩乙酸制備目標(biāo)產(chǎn)物。
ESI-MS m/z557.6[M+H]+ 1H-NMR(500MHz，CDCl3)δ ppm6.06(dd，1H，J＝12.0Hz，6.0Hz，10-H)，5.46(dd，1H，J＝2.0Hz，6.5Hz，2-H)，5.26(s，1H，20-H)，5.23(t，1H，J＝3.0Hz，5-H)，4.81(s，1H，20-H)，3.17(d，1H，J＝6.0Hz，3-H)，2.78(dd，1H，J＝7.0Hz，19.5Hz，14-H)，2.48(dd，1H，J＝12.0Hz，14.5Hz，9-H)，2.36(t，2H，J＝7.5Hz，2’-CH2)，2.31(d，1H，J＝20.0Hz，14-H)，2.23-2.21(m，2H，3’-CH2)，2.19(s，3H，10-OAc-CH3)，2.13(dd，1H，J＝1.5Hz，7.0Hz，1-H)，2.09(s，3H，2-OAc-CH3)，2.06(s，3H，18-CH3)，1.97-1.90(m，1H，7-H)，1.83-1.71(m，3H，2×6-H，9-H)，1.69(s，3H，16-CH3)，1.66-1.63(m，1H，環(huán)己基-1’-H)，1.56-1.46(m，5H，環(huán)己基-H)，1.31-1.14(m，6H，7-H，環(huán)己基-H)，1.12(s，3H，17-CH3)，0.90(s，3H，19-CH3) 藥理實驗 實驗例1 材料和方法 藥品及試劑經(jīng)上述實施例6，9得到的本發(fā)明新的紫杉烷類化合物和對照物Sy1221(來自專利CN01129602.X的實施例5化合物)以及通用測定耐藥活性的對照藥Verapamil，用DMSO溶解。DMSO為北京化工廠產(chǎn)品。長春新堿(VCR)為北京醫(yī)科大學(xué)實驗藥廠產(chǎn)品。RPMI1640為GIBCO產(chǎn)品。小牛血清為北京軍區(qū)獸醫(yī)防治中心產(chǎn)品。
細(xì)胞株KB/V200(人口腔上皮癌耐藥細(xì)胞株)，由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所建立，培養(yǎng)傳代。
儀器B10-RAD550型酶標(biāo)儀。
MTT法測定收集生長良好的腫瘤耐藥細(xì)胞，用含10％小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基配制成1×104/ml細(xì)胞懸液，于96孔培養(yǎng)板內(nèi)，每孔接種100μl(含1000個腫瘤細(xì)胞)，置37℃，5％CO2溫箱內(nèi)培養(yǎng)24小時后加藥。實驗設(shè)空白對照及溶劑對照，單獨VCR組及VCR+受試樣品組，每組4個劑量，每劑量3個平行孔。置37℃，5％CO2溫箱內(nèi)培養(yǎng)4天。棄去培養(yǎng)液，每孔加入MTT溶液(0.4mg/ml，RPMI1640配制)100μl，37℃孵育4小時。棄去上清液，每孔加入DMSO150μl，溶解Fomazan顆粒，輕度振蕩后，用B10-RAD550型酶標(biāo)儀，在波長540nm條件下測定OD值。
結(jié)果計算以藥物的不同濃度及對細(xì)胞的抑制率作圖可得到劑量反應(yīng)曲線，從中求出半數(shù)抑制濃度(IC50)。

a逆轉(zhuǎn)倍數(shù)＝IC50(VCR)/IC50(VCR+受試化合物) b來自專利CN01129602.X的實施例5化合物 注*以mdr-1基因表達增加，P-gp表達升高為主要耐藥機制，對長春新堿(VCR)耐藥100倍以上，對阿霉素，紫杉醇，秋水仙堿等交叉耐藥。
**對照藥 實驗結(jié)果 本專利合成的5位是脂環(huán)基烷酰氧基和雜環(huán)基烷酰氧基的紫杉烷類化合物的衍生物對多藥耐藥的人口腔上皮癌細(xì)胞，能夠顯著逆轉(zhuǎn)耐藥性，增強抗癌藥的活性。實施例6化合物及實施例9化合物的活性，顯著強于已知對照藥Verapamil.其中，實施例6化合物對耐藥細(xì)胞KB/V逆轉(zhuǎn)倍數(shù)達到1414.34倍，實施例9化合物對耐藥細(xì)胞KB/V逆轉(zhuǎn)倍數(shù)達到439.46倍，與5位是苯基烷酰氧基的紫杉烷類化合物的衍生物(其中Sy1221是5位苯基烷酰氧基的紫杉烷類化合物中逆轉(zhuǎn)活性最好的化合物之一)相比較，逆轉(zhuǎn)耐藥活性有著顯著提高。
權(quán)利要求
1.一種通式(I)化合物、其立體異構(gòu)體、其酸加成鹽，
其中，
R1＝R2為氫或者R1和R2為氧；
R3為氫、C1-8烷基?；⒈郊柞；⒎紵N基甲?；?br> R4為氫、C1-8烷基酰基、苯甲?；?、芳烴基甲?；?br> R5為脂環(huán)基C1-8烷基?；?、雜環(huán)基C1-8烷基酰基；其中，脂環(huán)基或雜環(huán)基為五員環(huán)或六員環(huán)，環(huán)上有0-2個相同或不同的取代基，取代基是疊氮基、甲氧基或鹵素；在C1-8烷基上有0-2個相同或不同的取代基，0-2個C＝C雙鍵或C≡C三鍵，其中，取代基是氧、羥基、甲氧基或鹵素，條件是取代基不在同一位置上；
當(dāng)R5為含氮雜環(huán)基C1-8烷基?；鶗r，可與酸形成酸加成鹽。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物或其立體異構(gòu)體，其特征在于，所述的化合物如通式Ia所示
R3、R4、R5的定義如權(quán)利要求1。
3.如權(quán)利要求1所述的化合物或其立體異構(gòu)體，其特征在于，所述的化合物如通式Ib所示
R3、R4、R5的定義如權(quán)利要求1。
4.如權(quán)利要求1-3任一所述的化合物或其立體異構(gòu)體或其酸加成鹽，其特征在于所述的化合物選自
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-噻吩乙酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-噻吩丙酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-噻吩丁酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-呋喃甲酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2-呋喃丙烯酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(2S-吡咯烷甲酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(3-吡啶甲酰氧基)-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-(3-吡啶丙酰氧基)-新杉素A鹽酸鹽，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-環(huán)己烷乙酰氧基-新杉素A，
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-5α-環(huán)己烷丙酰氧基-新杉素A。
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-5α-(3-吡啶甲酰氧基)-新杉素A
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-5α-(2-呋喃甲酰氧基)-新杉素A
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-5α-(2-呋喃丙烯酰氧基)-新杉素A
5α-去乙酰-14-脫乙酰氧基-5α-(2-噻吩乙酰氧基)-新杉素A
5.如權(quán)利要求1-4任一所述的化合物，其酸加成鹽選自鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、甲磺酸鹽、磷酸鹽、對甲苯磺酸鹽或苯磺酸鹽。
6.一種通式(Ia)化合物的制備方法，包括如下步驟
(1)式a-4化合物14-脫乙酰氧基-13-羰基-新杉素A用堿水解，干燥后，于有機溶劑中，經(jīng)有機堿處理，與酸酐(R’CO)2O反應(yīng)，其中R’為C0-7烷基、苯甲基、芳烴基甲基；進行選擇性酰化得到式a-5化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-2α-R3基-10β-R4基-新杉素A，其中R3、R4定義如權(quán)利要求1、2定義。
(2)經(jīng)步驟5得到的式a-5化合物于干燥的有機溶劑中，在二環(huán)己基碳化二亞胺和有機堿存在下與R”COOH反應(yīng)，成酯得到通式Ia化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-2α-R3基-10β-R4基-5α-R5基-新杉素A，其中R3、R4、R5定義如權(quán)利要求1、2定義。
Ia。
7.一種通式(Ib)化合物的制備方法，包括如下步驟
(1)按照通式Ia制備方法得到的式a-3化合物，14-脫乙酰氧基-新杉素A，
用堿水解，干燥后，于有機溶劑中，經(jīng)有機堿處理，與酸酐(R’CO)2O反應(yīng)，其中R’為C0-7烷基、苯甲基、芳烴基甲基，進行選擇性?；玫绞絙-1化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-2α-R3基-10β-R4基-新杉素A，其中R3、R4定義如權(quán)利要求1、2定義。
(2)經(jīng)步驟1得到的式b-1化合物于干燥的有機溶劑中，在二環(huán)己基碳化二亞胺和有機堿存在下與R”COOH反應(yīng)成酯得到通式Ib化合物，即2α，5α，10β-三去乙酰-14-脫乙酰氧基-13-羰基-2α-R3基-10β-R4基-5α-R5基-新杉素A，其中R3、R4、R5定義如權(quán)利要求1、2定義
8.一種藥用組合物，其特征在于，含有治療有效劑量的權(quán)利要求1-5中至少一種化合物和/或立體異構(gòu)體或其藥用鹽和藥學(xué)上可接受的載體。
9.如權(quán)利要求1-5中任一所述的化合物及其立體異構(gòu)體或其藥用鹽在制備抗惡性腫瘤藥物中的用途。
10.如權(quán)利要求1-5中任一所述的化合物及其立體異構(gòu)體或其藥用鹽在制備治療多藥耐藥腫瘤的藥物和逆轉(zhuǎn)多藥耐藥腫瘤的耐藥性藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了一類如通式(I)所示的紫杉烷衍生物，其制備方法，含有該化合物的藥物組合物及其在制備抗惡性腫瘤藥物中應(yīng)用；還涉及在其制備治療多藥耐藥腫瘤的藥物和逆轉(zhuǎn)多藥耐藥腫瘤的藥物中的應(yīng)用。
文檔編號C07D333/24GK101463029SQ20071030368
公開日2009年6月24日 申請日期2007年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月20日
發(fā)明者猛 黃, 猛 張, 軍 顧, 尹大力, 鑫 趙, 陳曉光 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所