本發(fā)明屬于藥物化學(xué)合成領(lǐng)域，具體涉及一種半合成紫杉醇及其中間體的制備方法。
背景技術(shù)：
紫杉醇(Paclitaxel，商品名Taxol)是從紅豆杉屬(Taxus)植物中分離出的一種紫杉烷二萜類化合物。其結(jié)構(gòu)新穎、抗癌機(jī)理獨(dú)特、抗癌效果顯著、抗癌譜廣，被認(rèn)為是迄今所發(fā)現(xiàn)最好的抗癌藥物之一。紫杉醇化學(xué)全合成獲得成功，但合成路線復(fù)雜，成本過高，僅具有研究意義，尚無商業(yè)價(jià)值相對紫杉醇全合成，紫杉醇半合成是具有實(shí)用價(jià)值的一種制備方法。紫杉醇半合成一般都是以與紫杉醇大環(huán)結(jié)構(gòu)類似的10-去乙?；涂ㄍあ?10-deacetylbaccatinⅢ，10-DABⅢ)為原料，通過與紫杉醇的側(cè)鏈基團(tuán)化合物對接而制得紫杉醇。10-DABⅢ可從來源豐富的紅豆杉屬植物中提取而獲得，且得率高，從而為紫杉醇半合成提供了充足的原料?，F(xiàn)有技術(shù)中在半合成紫杉醇的方法中除了使用溶劑外還會(huì)使用各種催化劑以提高反應(yīng)收率，如專利CN200580011712.2使用咪唑等催化劑，又如專利US193263中對C7羥基保護(hù)時(shí)需使用瓊斯試劑，并且對C10羥基保護(hù)時(shí)需要在-23℃下反應(yīng)，反應(yīng)試劑要求較高、體系組分復(fù)雜有雜質(zhì)產(chǎn)生，使得最終提純產(chǎn)品中紫杉醇的含量不高。
總之，現(xiàn)有專利技術(shù)中普遍存在的問題是：以10-DABⅢ為原料，最終獲得的紫杉醇收率低，其主要原因是：(1)對10-DABⅢ10位羥基進(jìn)行乙酰化的過程中，在反應(yīng)接近終點(diǎn)的時(shí)候容易產(chǎn)生副反應(yīng)生成其它雜質(zhì)；(2)在進(jìn)行最后一步開環(huán)脫保護(hù)反應(yīng)過程容易造成過反應(yīng)生成其它雜質(zhì)。
由于將原料大量的轉(zhuǎn)化為了雜質(zhì)，因此收率低；在進(jìn)行紫杉醇純化分離過程中，采用柱層析及重結(jié)晶的進(jìn)行純化，因此造成了部分紫杉醇產(chǎn)品損失且紫杉醇純度提高不大。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種收率高、產(chǎn)品純度高、易于產(chǎn)業(yè)化的一種半合成紫杉醇及其中間體的制備方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種半合成紫杉醇的制備方法包括步驟：
A.制備中間體I：10-DABⅢ溶于吡啶中，將10-DABⅢ上7位碳上羥基用三乙基甲硅烷基進(jìn)行保護(hù)得中間體I；
B.制備中間體II：將中間體I的10位碳上羥基乙?；弥虚g體II；
C.制備中間體III：將中間體II、側(cè)鏈基團(tuán)化合物、4-二甲氨基吡啶在有機(jī)溶劑中反應(yīng)制得中間體III；
D.制備紫杉醇粗品：將中間體III在酸性條件下與三氟乙酸反應(yīng)得紫杉醇粗品；
所述中間體Ⅰ分子式：C35H50O10Si，其結(jié)構(gòu)式如下：
所述中間體Ⅱ分子式：C37H52O11Si，其結(jié)構(gòu)式如下：
所述中間體Ⅲ分子式：C62H71NO15Si，其結(jié)構(gòu)式如下：
通過對10-DABIII分子結(jié)構(gòu)中的活性羥基進(jìn)行保護(hù)，并且選擇合適的側(cè)鏈基團(tuán)化合物化合物基團(tuán)使得紫杉醇的收率和純度大大提高，適于合成較高品質(zhì)的紫杉醇，對抗腫瘤藥物的開發(fā)提供支持。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟A至D具體如下：
A.制備中間體I：將10-DABⅢ加入吡啶中攪拌溶解，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加三乙基氯硅烷，當(dāng)反應(yīng)液中10-DABⅢ殘留小于0.2％時(shí)停止反應(yīng)，滴加水進(jìn)行淬滅反應(yīng)，用濃鹽酸中和吡啶，萃取二氯甲烷，濃縮干燥得到中間體I；
B.制備中間體Ⅱ：將中間體I加入吡啶中攪拌溶解，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加乙酰氯，然后在-15～5℃溫度下反應(yīng)至中間體I殘留為5～10％時(shí)停止反應(yīng)，滴加水進(jìn)行淬滅反應(yīng)，用濃鹽酸中和吡啶，萃取二氯甲烷，濃縮干燥得到中間體Ⅱ；
C.制備中間體Ⅲ：將中間體II、側(cè)鏈基團(tuán)化合物、4-二甲氨基吡啶加入甲苯中攪拌溶解，在10～30℃溫度及氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加縮合劑，然后在10～30℃溫度下反應(yīng)至中間體Ⅱ原料殘留小于0.2％停止反應(yīng)，加入正己烷攪拌結(jié)晶，過濾干燥得到中間體Ⅲ；
D.制備紫杉醇粗品：將中間體Ⅲ加入乙酸中，再加入水?dāng)嚢枞芙?，再將三氟乙酸加入體系，在10～30℃溫度下反應(yīng)至中間體Ⅲ原料殘留為5～10％時(shí)停止反應(yīng)，加入堿中和，用二氯甲烷萃取后經(jīng)水洗、濃縮、干燥得到紫杉醇粗品。
合成紫杉醇的方法中體系組分相對簡單，不需使用其他催化劑，且制備工藝均較常規(guī)易于工業(yè)化，分離簡單。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟A中滴加三乙基氯硅烷的滴加時(shí)間為30～60min，滴加溫度為10～20℃，滴加完成后反應(yīng)溫度為10～30℃；所述步驟C中加入正己烷攪拌結(jié)晶的時(shí)間為1～2小時(shí)。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟B中滴加乙酰氯的滴加時(shí)間為30～60min，滴加溫度為-15～5℃，滴加完成后反應(yīng)溫度為-15～5℃。
進(jìn)一步優(yōu)選的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟D中加入堿中和具體為加入弱堿調(diào)節(jié)pH至6～8。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟D后還包括步驟E，所述步驟E為：
E.制備紫杉醇：將紫杉醇粗品用有機(jī)溶劑溶解、過濾，然后經(jīng)液相色譜分離分別收集含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液，含有紫杉醇洗脫液濃縮干燥得紫杉醇產(chǎn)品。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟E中收集的含有中間體III的洗脫液經(jīng)濃縮干燥后加入步驟D中重復(fù)利用。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟B中濃縮干燥后的中間體II粗品經(jīng)過液相色譜分離分別收集含有中間體I的洗脫液和含有中間體II的洗脫液，含有中間體I的洗脫液經(jīng)過濃縮干燥后加入步驟B中重復(fù)利用，含有中間體II的洗脫液經(jīng)過濃縮干燥后用作步驟C的原料。
對于洗脫液的重復(fù)利用，不僅僅能夠提高原料的使用率，同時(shí)洗脫液的加入還能對反應(yīng)有促進(jìn)作用，使得最終產(chǎn)品收率更高、轉(zhuǎn)化率更高。
進(jìn)一步優(yōu)選的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟A中10-DABⅢ原料與吡啶的用量重量比為1：(3～6)，所述10-DABⅢ與三乙基氯硅烷的用量重量比為＝1：(0.8～2)；所述步驟B中所述中間體I和吡啶的用量重量比為1：(3～6)，中間體Ⅰ和乙酰氯的用量重量比為1：(0.5～2)；所述步驟C中中間體II和有機(jī)溶劑的用量重量比為1：(2～5)。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟C中有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、乙腈中的一種。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述提純中間體II粗品的液相色譜分離的制備柱所用填料為5～60um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，所述液相色譜的流動(dòng)相為50～70vol％的甲醇、50～70vol％的乙醇、50～70vol％的乙腈中的一種；所述步驟E中紫杉醇粗品和有機(jī)溶劑的用量重量比為1：(2～5)，所用液相色譜分離的制備柱所用填料為5～60um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，所述流動(dòng)相為40～60vol％的甲醇或40～60vol％的乙醇或40～60vol％的乙腈。
采用簡單的液相色譜分離方法對產(chǎn)品進(jìn)行分離能夠大大提高方法的實(shí)用性，通過選擇合適的填料和溶劑能夠最大程度地保證產(chǎn)品的收率。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟C中側(cè)鏈基團(tuán)化合物為(4S,5R)-3-苯甲酰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-惡唑啉羧酸。所述側(cè)鏈基團(tuán)化合物的分子式為：C24H21NO5，其結(jié)構(gòu)式如下：
側(cè)鏈基團(tuán)化合物基團(tuán)的選擇對于紫杉醇的合成至關(guān)重要，選擇所述側(cè)鏈基團(tuán)化合物能夠減少雜質(zhì)和副反應(yīng)產(chǎn)物的產(chǎn)生。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟C中中間體Ⅲ和側(cè)鏈基團(tuán)化合物的用量重量比為1：(0.63～1)。
進(jìn)一步的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟C中中間體Ⅲ和4-二甲氨基吡啶的用量重量比為1：(0.05～0.2)；所述步驟C中中間體Ⅲ和甲苯的用量重量比為1：(4～10)；所述步驟C中縮合劑為二環(huán)已基碳二亞胺或二異丙基碳二亞胺中；所述步驟C中中間體Ⅲ和縮合劑的用量重量比為1：(0.2～0.6)；所述步驟C中中間體Ⅲ和正己烷的用量重量比為1：(8～20)；所述步驟D中中間體Ⅲ和乙酸的用量重量比為1：(2～4)；所述步驟D中中間體Ⅲ和水的用量重量比為1：(0.1～0.5)；所述步驟D中中間體Ⅲ和三氟乙酸的用量重量比為1：(0.5～2)。
進(jìn)一步優(yōu)選的，上述半合成紫杉醇的方法中所述步驟D中弱堿為碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氨水中的一種，當(dāng)然還可以是其它溶于水后不完全電離的弱堿。
本發(fā)明還提供一種半合成紫杉醇中間體的制備方法，包括步驟：在10-DABⅢ原料中加入吡啶攪拌溶解，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加三乙基氯硅烷，當(dāng)反應(yīng)液中10-DABⅢ殘留小于0.2％時(shí)停止反應(yīng)，滴加水進(jìn)行淬滅反應(yīng)，用濃鹽酸中和吡啶，萃取二氯甲烷，濃縮干燥得到中間體I。
本發(fā)明提供的半合成紫杉醇及其中間體的制備方法具有如下有益效果：
1.本發(fā)明方法以10-DABⅢ為原料，先用三乙基氯硅烷進(jìn)行7位羥基保護(hù)得到中間體Ⅰ，再用中間體Ⅰ與乙酰氯反應(yīng)合成中間體Ⅱ，中間體Ⅱ通過制備液相色譜純化得到精制后的中間體Ⅱ，精制后的中間體Ⅱ再與側(cè)鏈基團(tuán)化合物反應(yīng)制得中間體Ⅲ，中間體Ⅲ開環(huán)脫保護(hù)后制得粗品紫杉醇，粗品紫杉醇經(jīng)過制備液相色譜純化后獲得紫杉醇產(chǎn)品。制備方法簡單易于工業(yè)化，且對10-DABIII原料活性羥基保護(hù)有效，使得最終的副產(chǎn)物少，制得的紫杉醇產(chǎn)品摩爾收率高達(dá)70％～81％，紫杉醇純度高達(dá)99.5％～99.9％。
2.本發(fā)明方法控制合成中間體Ⅱ和合成紫杉醇步驟中原料殘留為5～10％時(shí)停止反應(yīng)，即本發(fā)明制備方法提高了原料的選擇性，減少了副反應(yīng)的產(chǎn)生，使原料轉(zhuǎn)化為所需的產(chǎn)物，合成中間體Ⅱ反應(yīng)步驟的選擇性高達(dá)92％～97％，合成紫杉醇反應(yīng)步驟的選擇性高達(dá)93％～97％。
3.本發(fā)明方法利用制備液相色譜分離純化中間體Ⅱ和紫杉醇，將分離得到未反應(yīng)完的中間體Ⅰ和中間體Ⅲ作為下一步反應(yīng)的原料，充分利用了原料。
4.紫杉醇粗品的分離純化過程采用制備液相色譜一步純化獲得紫杉醇產(chǎn)品，操作簡單易控制，且利用本發(fā)明提供的液相色譜原料及溶液分離獲得的紫杉醇產(chǎn)品純度高，收率高。
5.本發(fā)明方法可廣泛應(yīng)用于10-DABⅢ半合成紫杉醇的實(shí)驗(yàn)室及工業(yè)化制備中，采用本發(fā)明方法生產(chǎn)的紫杉醇作為治療卵巢癌和乳腺癌等醫(yī)藥領(lǐng)域的原料。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明。需要說明的是，本發(fā)明所記載的實(shí)施例僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。基于本發(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。下述實(shí)施例中所述用量比除特殊說明外均為質(zhì)量比。
實(shí)施例一
(1)稱取10-DABⅢ原料，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加一定重量的三乙基氯硅烷，滴加時(shí)間保持在30min，滴加溫度控制在10℃，滴加完成后，控制反應(yīng)溫度為10℃，當(dāng)反應(yīng)液中10-DABⅢ殘留小于0.2％時(shí)停止反應(yīng)，滴加水進(jìn)行淬滅反應(yīng)，然后經(jīng)過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體I。
(2)稱取中間體I，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加一定重量的乙酰氯，滴加時(shí)間保持在30min，滴加溫度控制在-15℃，滴加完成后，控制反應(yīng)溫度為-15℃，當(dāng)反應(yīng)液中中間體I殘留為5％時(shí)停止反應(yīng)，滴加水進(jìn)行淬滅反應(yīng)，然后經(jīng)過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體Ⅱ。
(3)稱取中間體Ⅱ，用一定重量的有機(jī)溶劑溶解、過濾，然后經(jīng)制備液相色譜分離分別收集含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液，含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液分別經(jīng)濃縮干燥得到中間體I、中間體Ⅱ，中間體I作為合成中間體Ⅱ的原料，中間體Ⅱ作為合成中間體Ⅲ的反應(yīng)原料。
(4)稱取中間體Ⅱ，加入一定重量的側(cè)鏈基團(tuán)化合物、4-二甲氨基吡啶，再加入一定重量的干燥甲苯溶解，在溫度為10℃下氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加一定重量的縮合劑，滴加完成后在反應(yīng)溫度為10℃下反應(yīng)至中間體Ⅱ原料殘留小于0.2％以下停止反應(yīng)得到反應(yīng)液，向反應(yīng)液中加入一定重量的正己烷攪拌結(jié)晶1小時(shí)，過濾干燥得到中間體Ⅲ。
(5)稱取中間體Ⅲ，加入一定重量的乙酸、水?dāng)嚢枞芙?，再加入一定重量的三氟乙酸，在溫度?0℃下反應(yīng)至中間體Ⅲ原料殘留為5％時(shí)停止反應(yīng)，加入弱堿調(diào)節(jié)pH至6，用二氯甲烷萃取后，經(jīng)水洗、濃縮、干燥得到紫杉醇粗品。
(6)稱取紫杉醇粗品，用一定重量的有機(jī)溶劑溶解、過濾，然后經(jīng)制備液相色譜分離分別收集含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液，含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液分別經(jīng)濃縮干燥得到紫杉醇產(chǎn)品、中間體Ⅲ，中間體Ⅲ作為合成紫杉醇的反應(yīng)原料。
(7)所述第(1)步中一定重量的干燥吡啶為10-DABⅢ原料：干燥吡啶＝1：3，一定量的三乙基氯硅烷為10-DABⅢ原料：三乙基氯硅烷＝1：0.8。
(8)所述第(2)步中一定重量的干燥吡啶為中間體I：干燥吡啶＝1：3，一定重量的乙酰氯為中間體I：乙酰氯＝1：0.5。
(9)所述第(3)步中的有機(jī)溶劑為甲醇，一定重量的有機(jī)溶劑為中間體Ⅱ：有機(jī)溶劑＝1：2，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為5um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相為50vol％的甲醇。
(10)所述第(4)步中的側(cè)鏈基團(tuán)化合物為(4S,5R)-3-苯甲?；?2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-惡唑啉羧酸，一定重量的側(cè)鏈基團(tuán)化合物為中間體Ⅲ：側(cè)鏈基團(tuán)化合物＝1：0.63，一定重量的4-二甲氨基吡啶為中間體Ⅲ：4-二甲氨基吡啶＝1：0.05，一定重量的干燥甲苯為中間體Ⅲ：甲苯＝1：4，縮合劑為二環(huán)已基碳二亞胺，一定重量縮合劑為中間體Ⅲ：縮合劑＝1：0.2，一定重量正己烷為中間體Ⅲ：正己烷＝1：8。
(11)所述第(5)步中一定重量的乙酸為中間體Ⅲ：乙酸＝1：2，一定重量的水為中間體Ⅲ：水＝1：0.1，一定重量的三氟乙酸為中間體Ⅲ：三氟乙酸＝1：0.5，弱堿為碳酸氫鈉。
(12)所述第(6)步中的有機(jī)溶劑為甲醇，一定重量的有機(jī)溶劑為紫杉醇粗品：有機(jī)溶劑＝1：2，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為5um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相為40vol％的甲醇。
所得產(chǎn)品紫杉醇摩爾收率高達(dá)70％，紫杉醇純度高達(dá)99.5％。
實(shí)施例二
(1)稱取10-DABⅢ原料，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加一定重量的三乙基氯硅烷，滴加時(shí)間保持在60min，滴加溫度控制在20℃，滴加完成后，控制反應(yīng)溫度為30℃，當(dāng)反應(yīng)液中10-DABⅢ殘留小于0.2％時(shí)停止反應(yīng)，滴加水進(jìn)行淬滅反應(yīng)，然后經(jīng)過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體I。
(2)稱取中間體I，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加一定重量的乙酰氯，滴加時(shí)間保持在60min，滴加溫度控制在5℃，滴加完成后，控制反應(yīng)溫度為5℃，當(dāng)反應(yīng)液中中間體I殘留為10％時(shí)停止反應(yīng)，滴加水進(jìn)行淬滅反應(yīng)，然后經(jīng)過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體Ⅱ。
(3)稱取中間體Ⅱ，用一定重量的有機(jī)溶劑溶解、過濾，然后經(jīng)制備液相色譜分離分別收集含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液，含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液分別經(jīng)濃縮干燥得到中間體I、中間體Ⅱ，中間體I作為合成中間體Ⅱ的原料，中間體Ⅱ作為合成中間體Ⅲ的反應(yīng)原料。
(4)稱取中間體Ⅱ，加入一定重量的側(cè)鏈基團(tuán)化合物、4-二甲氨基吡啶，再加入一定重量的干燥甲苯溶解，在溫度為30℃下氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加一定重量的縮合劑，滴加完成后在反應(yīng)溫度為30℃下反應(yīng)至中間體Ⅱ原料殘留小于0.2％以下停止反應(yīng)得到反應(yīng)液，向反應(yīng)液中加入一定重量的正己烷攪拌結(jié)晶2小時(shí)，過濾干燥得到中間體Ⅲ。
(5)稱取中間體Ⅲ，加入一定重量的乙酸、水?dāng)嚢枞芙?，再加入一定重量的三氟乙酸，在溫度?0℃下反應(yīng)至中間體Ⅲ原料殘留為10％時(shí)停止反應(yīng)，加入弱堿調(diào)節(jié)pH至8，用二氯甲烷萃取后，經(jīng)水洗、濃縮、干燥得到紫杉醇粗品。
(6)稱取紫杉醇粗品，用一定重量的有機(jī)溶劑溶解、過濾，然后經(jīng)制備液相色譜分離分別收集含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液，含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液分別經(jīng)濃縮干燥得到紫杉醇產(chǎn)品、中間體Ⅲ，中間體Ⅲ作為合成紫杉醇的反應(yīng)原料。
(7)所述第(1)步中一定重量的干燥吡啶為10-DABⅢ原料：干燥吡啶＝1：6，一定量的三乙基氯硅烷為10-DABⅢ原料：三乙基氯硅烷＝1：2。
(8)所述第(2)步中一定重量的干燥吡啶為中間體I：干燥吡啶＝1：6，一定重量的乙酰氯為中間體I：乙酰氯＝1：2。
(9)所述第(3)步中的有機(jī)溶劑為乙腈，一定重量的有機(jī)溶劑為中間體Ⅱ：有機(jī)溶劑＝1：5，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為60um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相為50vol％的乙腈。
(10)所述第(4)步中的側(cè)鏈基團(tuán)化合物為(4S,5R)-3-苯甲酰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-惡唑啉羧酸，一定重量的側(cè)鏈基團(tuán)化合物為中間體Ⅲ：側(cè)鏈基團(tuán)化合物＝1：1，一定重量的4-二甲氨基吡啶為中間體Ⅲ：4-二甲氨基吡啶＝1：0.2，一定重量的干燥甲苯為中間體Ⅲ：甲苯＝1：10，縮合劑為二異丙基碳二亞胺，一定重量縮合劑為中間體Ⅲ：縮合劑＝1：0.6，一定重量正己烷為中間體Ⅲ：正己烷＝1：20。
(11)所述第(5)步中一定重量的乙酸為中間體Ⅲ：乙酸＝1：4，一定重量的水為中間體Ⅲ：水＝1：0.5，一定重量的三氟乙酸為中間體Ⅲ：三氟乙酸＝1：2，弱堿為氨水。
(12)所述第(6)步中的有機(jī)溶劑為乙腈，一定重量的有機(jī)溶劑為紫杉醇粗品：有機(jī)溶劑＝1：5，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為60um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相為40vol％的乙腈。
所得產(chǎn)品紫杉醇摩爾收率高達(dá)81％，紫杉醇純度高達(dá)99.9％。
實(shí)施例三
(1)稱取10-DABⅢ原料，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加一定重量的三乙基氯硅烷，滴加時(shí)間保持在45min，滴加溫度控制在15℃，滴加完成后，控制反應(yīng)溫度為20℃，當(dāng)反應(yīng)液中10-DABⅢ殘留小于0.2％時(shí)停止反應(yīng)，滴加水進(jìn)行淬滅反應(yīng)，然后經(jīng)過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體I。
(2)稱取中間體I，加入一定重量的干燥吡啶攪拌溶解，然后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加一定重量的乙酰氯，滴加時(shí)間保持在45min，滴加溫度控制在-5℃，滴加完成后，控制反應(yīng)溫度為-5℃，當(dāng)反應(yīng)液中中間體I殘留為7％時(shí)停止反應(yīng)，滴加水進(jìn)行淬滅反應(yīng)，然后經(jīng)過濃鹽酸中和吡啶，二氯甲烷萃取，濃縮干燥，得到中間體Ⅱ。
(3)稱取中間體Ⅱ，用一定重量的有機(jī)溶劑溶解、過濾，然后經(jīng)制備液相色譜分離分別收集含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液，含有中間體I、中間體Ⅱ的洗脫液分別經(jīng)濃縮干燥得到中間體I、中間體Ⅱ，中間體I作為合成中間體Ⅱ的原料，中間體Ⅱ作為合成中間體Ⅲ的反應(yīng)原料。
(4)稱取中間體Ⅱ，加入一定重量的側(cè)鏈基團(tuán)化合物、4-二甲氨基吡啶，再加入一定重量的干燥甲苯溶解，在溫度為20℃下氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加一定重量的縮合劑，滴加完成后在反應(yīng)溫度為20℃下反應(yīng)至中間體Ⅱ原料殘留小于0.2％以下停止反應(yīng)得到反應(yīng)液，向反應(yīng)液中加入一定重量的正己烷攪拌結(jié)晶1.5小時(shí)，過濾干燥得到中間體Ⅲ。
(5)稱取中間體Ⅲ，加入一定重量的乙酸、水?dāng)嚢枞芙?，再加入一定重量的三氟乙酸，在溫度?0℃下反應(yīng)至中間體Ⅲ原料殘留為7％時(shí)停止反應(yīng)，加入弱堿調(diào)節(jié)pH至7，用二氯甲烷萃取后，經(jīng)水洗、濃縮、干燥得到紫杉醇粗品。
(6)稱取紫杉醇粗品，用一定重量的有機(jī)溶劑溶解、過濾，然后經(jīng)制備液相色譜分離分別收集含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液，含有紫杉醇、中間體Ⅲ的洗脫液分別經(jīng)濃縮干燥得到紫杉醇產(chǎn)品、中間體Ⅲ，中間體Ⅲ作為合成紫杉醇的反應(yīng)原料。
(7)所述第(1)步中一定重量的干燥吡啶為10-DABⅢ原料：干燥吡啶＝1：5，一定量的三乙基氯硅烷為10-DABⅢ原料：三乙基氯硅烷＝1：1.5。
(8)所述第(2)步中一定重量的干燥吡啶為中間體I：干燥吡啶＝1：5，一定重量的乙酰氯為中間體I：乙酰氯＝1：1.5。
(9)所述第(3)步中的有機(jī)溶劑為乙醇，一定重量的有機(jī)溶劑為中間體Ⅱ：有機(jī)溶劑＝1：4，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為10um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相為50vol％的乙醇。
(10)所述第(4)步中的側(cè)鏈基團(tuán)化合物為(4S,5R)-3-苯甲酰基-2-(4-甲氧基苯基)-4-苯基-5-惡唑啉羧酸，一定重量的側(cè)鏈基團(tuán)化合物為中間體Ⅲ：側(cè)鏈基團(tuán)化合物＝1：0.8，一定重量的4-二甲氨基吡啶為中間體Ⅲ：4-二甲氨基吡啶＝1：0.1，一定重量的干燥甲苯為中間體Ⅲ：甲苯＝1：7，縮合劑為二異丙基碳二亞胺，一定重量縮合劑為中間體Ⅲ：縮合劑＝1：0.4，一定重量正己烷為中間體Ⅲ：正己烷＝1：12。
(11)所述第(5)步中一定重量的乙酸為中間體Ⅲ：乙酸＝1：3，一定重量的水為中間體Ⅲ：水＝1：0.3，一定重量的三氟乙酸為中間體Ⅲ：三氟乙酸＝1：1，弱堿為碳酸氫鉀。
(12)所述第(6)步中的有機(jī)溶劑為乙醇，一定重量的有機(jī)溶劑為紫杉醇粗品：有機(jī)溶劑＝1：4，制備液相色譜分離的制備柱所用填料為10um的十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相為40vol％的乙醇。
所得產(chǎn)品紫杉醇摩爾收率高達(dá)75％，紫杉醇純度高達(dá)99.8％。