專利名稱：：以基本不依賴pH的方式結(jié)合血清蛋白的氨基酸序列、包括其的化合物、及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及能夠結(jié)合血清蛋白諸如血清白蛋白的氨基酸序列；包括或基本由所述氨基酸序列組成的化合物、蛋白質(zhì)和多肽；編碼所述氨基酸序列、蛋白質(zhì)或多肽的核酸；包括所述氨基酸序列、蛋白質(zhì)和多肽的組合物，且特別是藥物組合物；和所述氨基酸序列、蛋白質(zhì)和多肽的用途。具體地，本發(fā)明涉及以這樣的方式結(jié)合血清蛋白的氨基酸序列(和包括所述氨基酸序列的化合物)，所述方式是當(dāng)處于生理pH值時，基本不依賴于pH(如本文中定義)。按照本發(fā)明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)所述氨基酸序列(以及包括至少一種所述氨基酸序列的化合物，如本文中進一步所述)與不基本獨立于pH的方式結(jié)合相同血清蛋白的氨基酸序列相比，在循環(huán)中具有有利(即，更長)的半衰期。由本文中進一步的描述，本發(fā)明的其他方面、實施方案、優(yōu)勢和應(yīng)用將變得清晰。
背景技術(shù)：
：能夠結(jié)合人血清蛋白諸如人血清白蛋白的氨基酸及其在多肽構(gòu)建體中增長治療相關(guān)蛋白質(zhì)和多肽半衰期的用途是本領(lǐng)域中已知的。例如，WO91/01743、WO01/45746和WO02/076489描述了與血清白蛋白結(jié)合的肽部分，所述血清白蛋白能夠與治療蛋白質(zhì)和其他治療化合物和實體相融合，從而增長其半衰期。然而，這些肽部分是細菌或合成來源的，其對于用在治療中是較不優(yōu)選的。埃博靈克斯股份有限公司(AblynxN.V.)的WO04/041865描述了針對血清白蛋白(和特別是針對人血清白蛋白)的納米體②(Nanobodies),它能夠與其他蛋白質(zhì)(諸如一種或多種針對理想靶標的其他納米體⑧)相連，從而增長所述蛋白質(zhì)的半衰期。新生Fc受體(FcRn)，也稱為"Brambell受體"，與延長白蛋白在循環(huán)中的壽命有關(guān)(見Chaudhury等，實驗醫(yī)學(xué)雜志(TheJournalofExperimentalMedicine),第3巻，第197號，315-322(2003))。FcRn受體是由可溶性輕鏈、跨膜區(qū)和約50個氨基酸的細胞質(zhì)尾部組成的完整膜糖蛋白，所述可溶性輕鏈由P2-微球蛋白組成，所述(32-微球蛋白通過三個細胞外結(jié)構(gòu)域與43kDa鏈非共價結(jié)合。所述細胞質(zhì)尾部包含參與受體內(nèi)在化的基于二核苷酸基序的胞吞作用信號。所述a鏈是蛋白質(zhì)非經(jīng)典MHCI家族的成員。f32m與a鏈的締合對FcRn的正確折疊和離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定向到內(nèi)體和細胞表面非常關(guān)鍵。RcRn的整體結(jié)構(gòu)類似于I類分子的整體結(jié)構(gòu)。a-1和oc-2區(qū)類似由8個反向平行P鏈組成的平臺，所述反向平行|3鏈形成以2個反平行a-螺旋為頂端的單P-折疊，所述a-螺旋非常類似于MHCI分子中的肽裂口。由于a-l螺旋的全面重新定位和a-2螺旋由于存在Prol62而在該螺旋中引入斷裂導(dǎo)致的C-末端部分彎曲，F(xiàn)cRn螺旋彼此相當(dāng)靠近，從而阻斷肽結(jié)合。FcRn的Argl64側(cè)鏈也阻斷肽N-末端與MHC口袋的潛在的相互作用。另外，a-1和a-2螺旋間的鹽橋和疏水性相互作用也對溝關(guān)閉作出貢獻。因此，F(xiàn)cRn不參與抗原呈遞，且所述肽裂口是空的。FcRn結(jié)合并運輸IgG由母體循環(huán)穿過胎盤合胞滋養(yǎng)層到達胎兒循環(huán)，并保護成人中IgG免于被降解。除體內(nèi)穩(wěn)態(tài)外，F(xiàn)cRn控制組織中IgG的胞轉(zhuǎn)作用。FcRn位于上皮細胞、內(nèi)皮細胞和肝細胞中。按照Chaudhury等(見上)，白蛋白結(jié)合FcRn從而形成具有IgG的三-分子復(fù)合物。白蛋白和IgG非協(xié)作地結(jié)合于FcRn上的不同位點。人FcRn與瓊脂糖-HSA和瓊脂糖-hlgG的結(jié)合是pH依賴性的，其在pH5.0時達到最大，并在pH7.0-pH8時接近零。關(guān)于FcRn以與其結(jié)合IgG相同的pH依賴性方式結(jié)合白蛋白的觀察提示白蛋白與FcRn相互作用并由此受到保護免于被降解的機理與IgG的相同，并通過與FcRn類似的pH-靈敏性相互作用受到介導(dǎo)。利用SPR測量各個HSA結(jié)構(gòu)域結(jié)合固定的可溶性hFcRn的能力，Chaudhury顯示FcRn和白蛋白通過白蛋白的D-III結(jié)構(gòu)域，以pH-依賴性方式，在與IgG結(jié)合位點不同的位點上相互作用(Chaudhury,PhD論文，見http:〃www.andersonlab.com/biosketchCC.htm;Chaudhury等，生物化學(xué)(Biochemistry),ASAP文章10.1021/bi052628yS0006-2960(05)02628-0(網(wǎng)頁公開日期2006年3月22日)；還參見Chaudhury，生物化學(xué)(Biochemistry),2006，第45巻，4983-49%)。本領(lǐng)域中已知的白蛋白結(jié)合劑的主要缺點是它們在靈長類動物中有限的體內(nèi)半衰期。在小鼠中，血清白蛋白的天然半衰期是大約2天，且已經(jīng)表明不同的血清白蛋白結(jié)合劑表現(xiàn)出相似的半衰期，即大約2天。然而，就已在靈長類動物(即，獼猴(iWacaca)屬的，諸如恒河猴和食蟹猴(cynomologusmonkeys))中測試的已知的血清白蛋白結(jié)合劑來說，它們表現(xiàn)出大約3天的半衰期。參考Domantis有限公司的LucyHolt博士在2006年6月1日的IBC會議"抗體及更多"("AntibodiesandBeyond")期間在2006年6月1日提出的"為了最佳實踐修整人結(jié)構(gòu)域抗體"("r"http://on'"g/z膽(2"Z)o附m'"j"幼o血:y)的演講中關(guān)于所謂的"AlbudAb's"(AlbudAbTM是英國劍橋Domantis有限公司的商標)的數(shù)據(jù)。換言之，本領(lǐng)域中已知其在靈長類動物中半衰期數(shù)據(jù)的血清白蛋白結(jié)合劑是有缺陷的，因為它們在靈長類動物中，在體內(nèi)表現(xiàn)出短血清半衰期。這些半衰期比這些動物中血清白蛋白的天然半衰期明顯更短，例如，是其25%。許多治療劑，特別是生物學(xué)劑(即，肽或多肽藥物、多核苷酸，等)在體內(nèi)經(jīng)歷不充分的血清半衰期。這使得以高頻率和/或更高劑量施用所述治療劑，或使用持續(xù)不變釋放制劑成為必需，以維持治療功效所需的血清水平。藥物的頻繁全身性施用與大量有害副作用相關(guān)。例如，頻繁的，例如每日的，全身性注射對受試者顯示出相當(dāng)大的不適，并引起與施藥有關(guān)的高危險性感染，且可能需要住院或頻繁去醫(yī)院，特別是在靜脈內(nèi)施用治療劑時。而且，在長期治療中，每日靜脈內(nèi)注射還可以引起大量由重復(fù)刺破血管引起的組織結(jié)疤和血管病理學(xué)副作用。已知對于所有頻繁的全身性施用治療劑，如例如，向糖尿病患者施用胰島素，或向患有多發(fā)性硬化的患者施用干擾素藥物存在類似的問題。所有這些因素對保健系統(tǒng)引起降低的患者順應(yīng)性和增高的成本。因此，存在對增長治療劑在靈長類動物，特別是在人中的血清半衰期的方法的需要。發(fā)明概述本發(fā)明通過提供以這樣的方式結(jié)合血清蛋白的氨基酸序列(和包括所述氨基酸序列的化合物)解決該需要，所述方式是當(dāng)處于生理pH值時基本不依賴于pH(如本文中所述)。本發(fā)明氨基酸序列結(jié)合(或在生理條件下能夠結(jié)合)的血清蛋白具體可以是在天然存在所述血清蛋白的人或動物體內(nèi)進行再循環(huán)或再循環(huán)機制的任意血清蛋白。所述血清蛋白的實例對于技術(shù)人員應(yīng)該是清楚的。更具體地，本發(fā)明氨基酸結(jié)合(或在生理條件下能夠結(jié)合)的血清蛋白可以選自由下列各項組成的組血清白蛋白、免疫球蛋白諸如IgG和運鐵蛋白。按照優(yōu)選但非限制性實施方案，本發(fā)明的氨基酸序列結(jié)合血清白蛋白。血清蛋白優(yōu)選地是人血清蛋白。然而，應(yīng)該理解按照本發(fā)明的一些特定但非限制性方面，本發(fā)明的氨基酸序列可以與來自至少另一種哺乳動物物種，諸如小鼠、大鼠、兔、狗或靈長類動物的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白交叉反應(yīng)。具體地，按照這些方面，本發(fā)明的氨基酸序列可以與來自至少另一種靈長類動物物種的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白交叉反應(yīng)，如本文中進一步所述。"基本不依賴于pH的"結(jié)合在本文中通常意指在動物或人體細胞內(nèi)存在的pH值下氨基酸序列關(guān)于血清蛋白(諸如血清白蛋白)的締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在所述細胞外存在的該pH值下關(guān)于相同血清蛋白締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%，更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%,諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%，諸如超過110%,超過120°/?；蛏踔?30%或更高，或甚至超過150%,或甚至超過200%)。備選地，"基本不依賴于pH的"結(jié)合在本文中通常意指在動物或人體細胞內(nèi)存在的pH值(如例如本文中進一步所述，例如pH5.5左右，例如5.3-5.7)下氨基酸序列關(guān)于血清蛋白(諸如血清白蛋白)的k。ff速率(通過Biacore測量-見例如實驗2)是該氨基酸序列在所述細胞外存在的pH值，例如pH7.2-7.4下關(guān)于少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%，更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%，諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高，或甚至超過150%，或甚至超過200%)。"動物或人體細胞內(nèi)存在的pH值"意指可能在細胞內(nèi)部，和具體地在參與血清蛋白再循環(huán)的細胞內(nèi)部存在的pH值。具體地，"動物或人體細胞內(nèi)存在的pH值"意指參與血清蛋白再循環(huán)(例如，作為胞飲作用、胞吞作用、胞轉(zhuǎn)作用，胞吐作用和吞噬作用或類似機理的吸收或內(nèi)在化進入所述細胞)的(亞)細胞區(qū)室或小泡，諸如內(nèi)體、溶酶體或胞飲泡內(nèi)部存在的pH值。例如，所述細胞可以是包含或表達FcRn受體的細胞，特別是當(dāng)本發(fā)明的氨基酸序列針對與FcRn結(jié)合的血清蛋白時。如從本文進一步的說明中應(yīng)該變得清楚地，所述細胞參與能夠與FcRn結(jié)合的某些血清蛋白，諸如血清白蛋白和免疫球蛋白諸如IgG的再循環(huán)。備選地，例如且不限于，所述細胞可以是包括或表達運鐵蛋白-受體的細胞，特別是當(dāng)本發(fā)明的氨基酸序列針對運鐵蛋白時。"所述細胞外存在的pH值"通常意指在存在所述細胞的人或動物體內(nèi)，但在所述細胞外，諸如在細胞表面上或在所述細胞緊鄰的周圍環(huán)境或在其附近中可能存在的pH值。具體地，"所述細胞外存在的pH值"通常意指在存在所述細胞的人或動物體環(huán)境中，諸如血液(流)中或淋巴系統(tǒng)中可能存在的pH值。具體地，所述氨基酸序列是這樣的，即它們在低于6.7的至少一種生理pH值下，以這樣的締合常數(shù)(KA)結(jié)合血清蛋白(諸如血清白蛋白)，所述這樣的締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在高于7.0的至少一種生理pH值下關(guān)于相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%，甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80°/。或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%，超過120%或甚至130%或更高)。"生理pH值"通常意指在人或動物體內(nèi)天然存在的(即，健康動物或人或患有疾病或病癥的動物或人的)任何pH值。所述生理pH值對于技術(shù)人員應(yīng)該是清楚的。技術(shù)人員還應(yīng)該清楚，不同的部分、組織、體液(諸如血液或淋巴液)、細胞、亞細胞區(qū)室等中可以存在不同的生理pH值。更具體地，所述氨基酸序列是這樣的，即它們在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值(諸如6.5,6.4,6.3,6.2,6.1,6.0，5.9,5.8,5.7或5.6)下，以這樣的締合常數(shù)(KA)結(jié)合血清蛋白(諸如血清白蛋白)，所述這樣的締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值(諸如7.2,7.3或7.4)下關(guān)于相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5。/。，諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。在另一個實施方案中，本發(fā)明的氨基酸序列是這樣的，即它們在5.5-4.5范圍內(nèi)的pH值(諸如5.5，5.4,5.3，5.2,5.1，5.0，4.9,4.8，4.7或4.6)下，以這樣的締合常數(shù)(KA)結(jié)合血清蛋白(諸如血清白蛋白)，所述這樣的締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在6.8-7.4范圍內(nèi)的pH值(諸如6.8,6.9,7.0,7.1,7.2,7.3或7.4)下關(guān)于相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。在另一個實施方案中，本發(fā)明的氨基酸序列是這樣的，即它們在5.5-4.5范圍內(nèi)的pH值(諸如5.5,5.4,5.3,5.2,5.1,5.0，4.9,4.8，4.7或4.6)下，以這樣的0ff-速率(k。ff速率)結(jié)合血清蛋白(諸如血清白蛋白)，所述這樣的off-速率(k。ff速率)是該氨基酸序列在6.8-7.4范圍內(nèi)的pH值(諸如6.8,6.9,7.0,7.1,7.2,7.3或7,4)下關(guān)于相同血清蛋白的k。ff速率的至少5%，諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%，更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%，超過120%，超過150%，超過170%，超過200%或甚至250%或更高)。在另一個實施方案中，本發(fā)明的氨基酸序列是這樣的，即所述氨基酸序列在5.5-4.5范圍內(nèi)的pH值(諸如5.5，5.4,5.3,5.2，5.1，5.0,4.9,4.8,4,7或4.6)下，以這樣的off-速率(k。ff速率)結(jié)合血清蛋白(諸如血清白蛋白)，所述這樣的off-速率(k。ff速率)是該氨基酸序列在6.8-7.4范圍內(nèi)的pH值(諸如6.8,6.9，7.0，7.1,7.2,7.3或7.4)下關(guān)于相同血清蛋白的U速率的至少50%或更少(即，50-150%)。更優(yōu)選地，所述氨基酸序列(例如，本發(fā)明的多價納米體，例如單價結(jié)合血清白蛋白，例如人血清白蛋白，和單價或多價結(jié)合靶蛋白的本發(fā)明納米體)在6.8-7.4范圍內(nèi)的pH值(諸如6.8，6.9,7.0，7.1，7.2，7.3或7.4)下的k。ff速率是該氨基酸序列在5:5-4.5范圍內(nèi)的pH值(諸如5.5，5.4,5.3,5.2,5.1，5.0,4.9，4.8,4.7或4.6)下的速率的約40%。更優(yōu)選地，所述氨基酸序列(例如，本發(fā)明的多價納米體，例如單價結(jié)合血清白蛋白，例如人血清白蛋白，和單價或多價結(jié)合靶蛋白的本發(fā)明納米體)在6.8-7.4范圍內(nèi)的pH值(諸如6.8，6.9,7.0,7.1，7.2，7.3或7.4)下的koff速率是該氨基酸序列在5.5-4.5范圍內(nèi)的pH值(諸如5.5,5.4,5.3,5.2,5.1，5.0,4.9,4.8,4.7或4.6)下的k。ff速率的約30%，更優(yōu)選地20%,更優(yōu)選地10%。如技術(shù)人員所清楚地，締合常數(shù)可以是實際或表觀締合常數(shù)。用于確定在特定pH值下締合常數(shù)的方法對技術(shù)人員應(yīng)該是清楚的，且例如包括本文中提到的技術(shù)。任選地，技術(shù)人員還應(yīng)該清楚，可以基于(實際或表觀)解離常數(shù)，通過關(guān)系[KA-1/KD]，計算(實際或表觀)締合常數(shù)。為了該目的，用于確定在特定pH值下的解離常數(shù)的方法對技術(shù)人員應(yīng)該是清楚的，且例如包括本文中提到的技術(shù)。親和性表示分子相互作用的強度或穩(wěn)定性。通常通過Kd，或解離常數(shù)表示親和性，其具有單位摩爾/升，簡單表示為M。還可以將親和性表示為締合常數(shù)，Ka，其等于1/Kd，且具有單位(摩爾/升)"，簡單表示為M"。貫穿本文獻，我們將通過其Kd值表示分子相互作用的穩(wěn)定性。但是應(yīng)該理解，由于關(guān)系Ka-l/Kd，通過其Kd值指定分子相互作用的強度，也自動指定Ka值。Kd也表征熱力學(xué)意義中的分子相互作用的強度，因為它通過眾所周知的關(guān)系DG-RT.ln(Kd)(等價地，DG--RT.ln(Ka))與結(jié)合自由能相關(guān)，其中R等于氣體常數(shù)，T等于絕對溫度且ln表示自然對數(shù)。有意義的生物學(xué)復(fù)合物的Kd典型地在10—1()M(O.lnM)-10—5M(10000nM)的范圍內(nèi)。相互作用越強，其Kd越低。還可以將Kd表示為復(fù)合物解離率常數(shù)(表示為k。ff)與其結(jié)合速率(表示為koJ的比。換言之，Kd-kofi/k。n。0ff-速率k。ff具有單位S"(其中S是秒的SI單位符號)。on-速率k。n具有單位M-V1。on-速率可以在1(^M"s"一約1(TM"s"之間變化，接近雙分子相互作用的擴散-限制性結(jié)合率常數(shù)。off-速率通過關(guān)系t1/2=ln(2)/koff，與給定分子相互作用的半衰期有關(guān)。off-速率可以在l(T6s"(接近具有數(shù)日的t1/2的不可逆復(fù)合物)一Is"(t1/2=0.69s)的范圍內(nèi)變化。兩分子之間分子相互作用的親和性可以通過不同的技術(shù)，諸如眾所周知的表面等離振子共振(SPR)生物傳感器技術(shù)(例如，Ober等，國際免疫學(xué)(Intern.Immunology),13，1551-1559,2001使用了Biacore3000SPR生物傳感器研究不同pH條件下白蛋白與FcRn的親和性)測量，其中將一個分子固定在生物傳感器芯片上，并在流動條件下使另一個分子經(jīng)過該固定的分子，從而產(chǎn)生kon、koff測量值和由此產(chǎn)生Kd(或Ka)值。應(yīng)該注意到，如果測量過程以某種方式影響所示分子固有結(jié)合親和性，例如通過與包被一個分子的生物傳感器相關(guān)的矯作物(artifact)影響，則測量的Kd對應(yīng)于表觀Kd。而且，如果一個分子包含多于一個關(guān)于另一個分子的識別位點，則可以測量表觀Kd。在所述情形中，測量的親和性可能受到兩分子相互作用親和力的影響。例如，關(guān)于固定的人FcRn的SPR實驗對人IgG顯示出比FcRn和固定的IgG相互作用親和性顯著更高的親和性(親和力)，相似于FcRn-IgG相互作用的2:l的化學(xué)定量關(guān)系(Sanchez等，生物化學(xué)(Biochemistry),38,9471-9476,1999)?？梢杂糜谠u估親和性的另一種方法是Priguet等的2-步ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)程序(免疫學(xué)方法雜志(J.Immunol.Methods)，77,305-19,1985)。該方法創(chuàng)建溶液相結(jié)合平衡測量法，并避免將所述分子之一吸附到支持物諸如塑料上可能涉及的矯作物。例如，Nguyen等(蛋白質(zhì)工程設(shè)計和選擇(ProteinEngDesSel),19,291-297,2006)近期利用Friguet測定測量了Fab構(gòu)建體對白蛋白的親和性。然而，精確測量Kd可能需要大量勞動，并且作為結(jié)果，通常確定表觀Kd值來評估兩分子的結(jié)合強度。應(yīng)該注意到只要以一致的方式進行所有測量(例如，保持測定條件不變)，則表觀Kd測量值可以用作真實Kd的近似值，且因此在本文件中，應(yīng)該認為Kd和表觀Kd是同等重要或相關(guān)的。最后，應(yīng)該注意到在許多情形中，有經(jīng)驗的科學(xué)家判斷相對于一些參考分子來確定結(jié)合親和性是方便的。例如，為了評估分子A和B之間的結(jié)合強度，人們可以例如使用參考分子C，已知所述參考分子C結(jié)合B并由熒光團或發(fā)色團或其他化學(xué)部分，諸如用于在ELISA或FACS中簡單檢測(熒光活化細胞分類)或其他形式(關(guān)于熒光檢測的熒光團、關(guān)于光吸收檢測的發(fā)色團、關(guān)于鏈霉抗生物素-介導(dǎo)的ELISA檢測)適當(dāng)標記。典型地，將所述參考分子C保持為固定濃度，且B的濃度由于給定的B濃度或量而變化。作為結(jié)果，對應(yīng)于A濃度獲得IC50值，在所述濃度時，在缺乏A的條件下，對C測量的信號減半。倘若Kd#,，即參考分子的Kd，以及參考分子的總濃度c"是已知的，則可以由下列公式Kd=IC50/(l+c參考/Kd參考)獲得關(guān)于相互作用A-B的表觀Kd。注意，如果c參考--Kd參考，則Kd-IC50。倘若人們以一致的方式(例如，保持c參考固定)進行IC50測量，則可以通過IC50評估分子相互作用的強度或穩(wěn)定性，并且貫穿本文將該測量判定為等價于Kd或表觀Kd。按照本發(fā)明，發(fā)現(xiàn)以基本不依賴于pH的方式結(jié)合血清蛋白的氨基酸序列(以及包括至少一種所述氨基酸序列的化合物，如本文中進一步所述)，在循環(huán)中具有比以不基本獨立于pH的方式結(jié)合于所述血清蛋白的氨基酸序列有利(即更長)的半衰期。在不受限于任何機制或解釋的條件下，推定pH的獨立性應(yīng)該基本提供最大量的氨基酸序列被再循環(huán)，這歸因于這樣的事實，即在再循環(huán)過程中的pH變化過程中，所述氨基酸序列保持其對血清蛋白的結(jié)合活性。如果氨基酸序列與血清蛋白的相互作用易受pH的影響，則這將導(dǎo)致減少或損失的相互作用，并且因此，所述氨基酸序列會與再循環(huán)血清蛋白分離，并在內(nèi)體和溶酶體區(qū)室中成為被降解的目標。具體地，本發(fā)明的氨基酸序列(以及包括所述氨基酸序列的化合物，如本文中定義)可以是這樣的，即它們以這樣的方式與血清蛋白(諸如血清白蛋白)結(jié)合或另外締合，所迷方式是當(dāng)所述氨基酸序列與靈長類動物中的所述血清蛋白分子(諸如血清白蛋白)結(jié)合或另外締合時，它表現(xiàn)出這樣的血清半衰期，所述血清半衰期是在所述靈長類動物中血清蛋白諸如血清白蛋白天然半衰期的至少約50%(諸如約50%-70%)，優(yōu)選地至少60%(諸如約60%-80%)或優(yōu)選地至少70%(諸如約70%-90%),更優(yōu)選地至少約80%(諸如約80%-90%)或優(yōu)選地至少約90%。例如，本發(fā)明的氨基酸序列可以以這樣的方式與人血清蛋白諸如血清白蛋白結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)所述氨基酸序列與人血清蛋白分子諸如血清白蛋白結(jié)合或另外締合時，所述氨基酸序列在人中表現(xiàn)出這樣的血清半衰期，所述血清半衰期是所述血清蛋白(諸如人血清白蛋白)天然半衰期的至少約50%(諸如約50%-70%),優(yōu)選地至少60%(諸如約60%-80%)或優(yōu)選地至少70%(諸如約70%-90%),更優(yōu)選地至少約80%(諸如約80%-90%)或優(yōu)選地至少約90%。而且，優(yōu)選地，本發(fā)明的氨基酸序列以如本文中定義的解離常數(shù)(KD)和/或以結(jié)合親和性(KA)，結(jié)合所述血清蛋白(諸如人血清白蛋白)。在人中，血清白蛋白的半衰期是約19天(PetersT(1996)關(guān)于清蛋白的一切(AllAboutAlbumin).學(xué)術(shù)出版社，圣地亞哥)。靈長類動物中的這種體內(nèi)半衰期使本發(fā)明的氨基酸序列成為延長與之附著的治療劑血清半衰期的理想候選者。組合的按照本發(fā)明的氨基酸序列和治療劑的長血清半衰期又容許降低施藥頻率和/或減少施藥量，從而對待治療的患者引起顯著的益處。因此，本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物，所述化合物包括氨基酸序列，并在人中具有這樣的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列在人中半衰期的至少80%，更優(yōu)選地至少90%，諸如95%或更長或基本相同。在一個特殊的方面，本發(fā)明的氨基酸序列可以是這樣的，即它們與來自至少一種其他靈長類動物物種的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白交叉反應(yīng)，且具體地，與來自至少一種這樣的靈長類動物物種的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白交叉反應(yīng)，所述這樣的靈長類動物物種選自由下列各項組成的組來自彌猴(M^ca)屬的猴(諸如，和具體地，食蟹猴(食蟹猴(M^ac^/osdc^an;s))和/或恒河猴(恒河猴(Macacamw/a"a)))和狒狒(豚尾狒狒wm'rn^))。優(yōu)選地，所述交叉反應(yīng)的氨基酸序列還是這樣的，即它們在所述靈長類動物中表現(xiàn)出這樣的血清半衰期，所述血清半衰期是所述靈長類動物中相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)天然半衰期的至少約50%(諸如約50%-70%)，優(yōu)選地至少60%(諸如約60°/。-80%)或優(yōu)選地至少70%(諸如約70%-90%)，更優(yōu)選地至少約80%(諸如約80%-90%)或優(yōu)選地至少約90%。本發(fā)明的所述氨基酸序列還優(yōu)選地以如本文中所定義的解離常數(shù)(KD)和/或結(jié)合親和性(KA)，結(jié)合來自所述靈長類動物的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物，所述化合物包括至少一種本發(fā)明的氨基酸序列，并在人和/或所述至少一種靈長類動物物種中具有這樣的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的本發(fā)明氨基酸序列分別在人和/或所述靈長類動物物種中半衰期的至少80%，更優(yōu)選地至少90%，諸如95%或更長或基本相同。按照本發(fā)明的另一個優(yōu)選但非限制性的方面，本發(fā)明的氨基酸序列是這樣的，即它們以這樣的方式與人血清蛋白(諸如人血清白蛋白)結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)氨基酸序列與所述血清蛋白結(jié)合或另外締合時，所述氨基酸在人中表現(xiàn)出的血清半衰期是至少約9天(諸如約9-14天)，優(yōu)選地至少約10天(諸如約10-15天)或至少11天(諸如約11-16天)，更優(yōu)選地至少約12天(諸如約12-18天或更長)或超過14天(諸如約14-19天)。本發(fā)明的所述氨基酸序列還優(yōu)選地以如本文中所定義的解離常數(shù)(KD)和/或結(jié)合親和性(KA)，結(jié)合所述人血清蛋白(諸如人血清白蛋白)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在人中具有這樣的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列在人中半衰期的至少80%，更優(yōu)選地至少90%，諸如95%或更長或基本相同。按照本發(fā)明的一個特殊但非限制性的方面，本發(fā)明的氨基酸序列是這樣的，即它們與來自至少一種其他靈長類動物物種的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)交叉反應(yīng)，且具體地，與來自至少一種這樣的靈長類動物物種的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)交叉反應(yīng)，所述這樣的靈長類動物物種選自由下列各項組成的組來自獼猴屬的猴(諸如恒河猴或食蟹猴)和狒狒。優(yōu)選地，所述交叉反應(yīng)的氨基酸序列在所述靈長類動物中表現(xiàn)出這樣的血清半衰期，所述血清半衰期是所述靈長類動物中相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)天然半衰期的至少約50%(諸如約50%-70%)，優(yōu)選地至少60%(諸如約60%-80%)或優(yōu)選地至少70%(諸如約70%-90%)，更優(yōu)選地至少約80%(諸如約80%-90%)或優(yōu)選地至少約90%。本發(fā)明的所述氨基酸序列還優(yōu)選地以如本文中所定義的解離常數(shù)(Kd)和/或結(jié)合親和性(KA)，結(jié)合來自所述靈長類動物的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在人和/或所述至少一種靈長類動物物種中具有這樣的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列分別在人和/或所述靈長類動物物種中半衰期的至少80%，更優(yōu)選地至少90%，諸如95%或更長或基本相同。在另一個特殊但非限制性的方面，本發(fā)明的氨基酸序列是這樣的，即它們與來自至少一種靈長類動物物種的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)結(jié)合或另外締合，且當(dāng)所述相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白在靈長類動物中半衰期是至少約10天，諸如10-15天，例如約11-13天(通過舉例，在恒河猴中，預(yù)期的血清白蛋白半衰期是約11-13天，具體地約11-12天)時，所述氨基酸序列在所述靈長類動物中具有的血清半衰期為至少約5天(諸如約5-9天)，優(yōu)選地至少約6天(諸如約6-10天)或至少7天(諸如約7-ll天)，更優(yōu)選地至少約8天(諸如8-12天)或超過9天(諸如約9-12天或更長)。本發(fā)明的所述氨基酸序列還優(yōu)選地是這樣的，即它們以如本文中所定義的解離常數(shù)(Kd)和/或結(jié)合親和性(KA)，結(jié)合來所述靈長類動物物種的血清白蛋白。在一個特別優(yōu)選的方面，所述氨基酸序列與人血清白蛋白交叉反應(yīng)，且更優(yōu)選地，以如本文中所定義的解離常數(shù)(KD)和/或結(jié)合親和性(KA)結(jié)合相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在所述至少一種靈長類動物物種中具有這樣的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列在所述靈長類動物物種中半衰期的至少80%，更優(yōu)選地至少90%，諸如95%或更長或基本相同。在另一個特殊但非限制性的方面，本發(fā)明的氨基酸序列還可以是這樣的，即它們與來自至少一種靈長類動物物種的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)結(jié)合或另外締合，且當(dāng)所述相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)在所述靈長類動物中半衰期是至少約13天，諸如13-18天(通過舉例，在狒狒中，血清白蛋白的半衰期是至少約13天，且通常是約16-18天)時，所述氨基酸序列在所述靈長類動物中具有至少約7天(諸如約7-13天)，優(yōu)選地至少約8天(諸如約8-15天)或至少9天(諸如約9-16天)，更優(yōu)選地至少約10天(諸如約10-16天或更長)或超過13天(諸如約13-18天)的血清半衰期。本發(fā)明的所述氨基酸序列還優(yōu)選地是這樣的，即它們以如本文中所定義的解離常數(shù)(KD)和/或結(jié)合親和性(KA)，結(jié)合來自所述靈長類動物物種的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在所述至少一種靈長類動物物種中具有這樣的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列在所述靈長類動物物種中半衰期的至少80%，更優(yōu)選地至少90%，諸如95%或更長或基本相同。在另一個特殊但非限制性的方面，本發(fā)明的氨基酸序列可以是這樣的，即它們a)以這樣的方式與人血清蛋白(諸如血清白蛋白)結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)氨基酸序列與所述人血清蛋白結(jié)合或另外締合時，所述氨基酸在人中表現(xiàn)出的血清半衰期是至少約9天(諸如約9-14天)，優(yōu)選地至少約10天(諸如約10-15天)或至少11天(諸如約11-16天)，更優(yōu)選地至少約12天(諸如約12-18天或更長)或超過14天(諸如約14-19天)；和b)與來自至少一種選自彌猴屬物種的靈長類動物的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)(且具體地，與來自食蟹猴和/或來自恒河猴的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白)交叉反應(yīng)；和c)在所述靈長類動物中具有的半衰期為至少約5天(諸如約5-9天)，優(yōu)選地至少約6天(諸如約6-10天)或至少7天(諸如約7-11天)，更優(yōu)選地至少約8天(諸如約8-12天)或超過9天(諸如約9-12天或更長)。優(yōu)選地，所述氨基酸序列以如本文中所定義的解離常數(shù)(Kd)和/或結(jié)合親和性(KA)結(jié)合人蛋白質(zhì)(諸如人血清白蛋白)和/或來自所述靈長類動物物種的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在人和/或所述至少一種靈長類動物物種中具有這樣的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列分別在人和/或所述靈長類動物物種中半衰期的至少80%，更優(yōu)選地至少90%，諸如95%或更長或基本相同。在另一個特殊但非限制性的方面，本發(fā)明的氨基酸序列可以是這樣的，即它們a)以這樣的方式與人血清蛋白(諸如血清白蛋白)結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)氨基酸序列與所述人血清蛋白結(jié)合或另外締合時，所述氨基酸在人中表現(xiàn)出的血清半衰期是至少約9天(諸如約9-14天)，優(yōu)選地至少約10天(諸如約10-15天)或至少11天(諸如約11-16天)，更優(yōu)選地至少約12天(諸如約12-18天或更長)或超過14天(諸如約14-19天)；和b)與來自狒狒的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)交叉反應(yīng)；和c)在狒狒中具有的半衰期為至少約7天(諸如約7-13天)，優(yōu)選地至少約8天(諸如約8-15天)或至少9天(諸如約9-16天)，更優(yōu)選地至少約10天(諸如約10-16天或更長)或超過13天(諸如約13-18天)。優(yōu)選地，所述氨基酸序列以如本文中所定義的解離常數(shù)(Kd)和/或結(jié)合親和性(KA)結(jié)合人血清蛋白(諸如人血清白蛋白)和/或來自狒狒的相應(yīng)(即直向同源)血清蛋白(諸如血清白蛋白)。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物，所述化合物包括所述氨基酸序列，并在人和/或所述至少一種靈長類動物物種中具有這樣的半衰期，所述半衰期是所述化合物中存在的氨基酸序列分別在人和/或所述靈長類動物物種中半衰期的至少80%，更優(yōu)選地至少90%，諸如95%或更長或基本相同。優(yōu)選地，而且，包括至少一種本發(fā)明的氨基酸序列的化合物、構(gòu)建體、融合蛋白等的半衰期優(yōu)選地是其中存在(即，在相同的靈長類動物中)的本發(fā)明氨基酸序列半衰期的至少80%，更優(yōu)選地至少90%，諸如95%過更長或基本相同。在本發(fā)明特殊但非限制性的方面，本發(fā)明的氨基酸序列(或包括所述氨基酸的化合物)針對與FcRn受體結(jié)合或能夠FcRn受體結(jié)合的血清蛋白(例如，作為所述血清蛋白質(zhì)再循環(huán)的一部分)，并且是這樣的，即它們能夠以這樣的方式與所述血清蛋白結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)氨基酸序列或多肽構(gòu)建體與所述血清蛋白分子結(jié)合或另外締合時，不(顯著)降低或抑制所述血清蛋白分子與FcRn的結(jié)合。能夠與FcRn結(jié)合的一些特殊但非限制性血清蛋白包括血清白蛋白和免疫球蛋白，諸如，具體地是IgG。在另一個實施方案中，本發(fā)明的氨基酸序列(或包括所述氨基酸序列的化合物)可以這樣的方式與血清蛋白(諸如血清白蛋白)結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)氨基酸序列或多肽構(gòu)建體與血清蛋白分子結(jié)合或另外締合時，不(顯著)縮短所述血清蛋白分子的半衰期。在另一個實施方案中，本發(fā)明的氨基酸序列(或包括所述氨基酸序列的化合物)能夠結(jié)合血清蛋白上不參與所述血清蛋白與FcRn結(jié)合的氨基酸殘基。例如，當(dāng)所述血清蛋白是血清白蛋白時，本發(fā)明的氨基酸序列(或包括所述氨基酸序列的化合物)能夠結(jié)合不形成血清白蛋白結(jié)構(gòu)域III部分的氨基酸殘基。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述氨基酸序列是免疫球蛋白序列或其片段，更具體地，免疫球蛋白可變區(qū)序列或其片段，例如，VH-、VL-或VHH-序列或其片段。本發(fā)明的氨基酸序列可以是結(jié)構(gòu)域抗體，"dAb"，單結(jié)構(gòu)域抗體或納米體，或其中任一項的片段。本發(fā)明的氨基酸序列可以是完全人的、人源化的、駱駝的、駱駝化的人的序列或人源化的駱駝的序列，且更具體地，可以包括4個框架區(qū)(分別地FR1-FR4)和3個互補決定區(qū)(分別地CDR1-CDR3)。更具體地，按照本發(fā)明的氨基酸序列是(單)結(jié)構(gòu)域抗體或納米體。在其他方面，本發(fā)明涉及用于生成本發(fā)明氨基酸序列的方法，和具體地用于生成針對理想或目的血清蛋白(諸如人血清白蛋白)的本發(fā)明氨基酸序列的方法。在一方面，所述方法至少包括下列步驟a)提供氨基酸序列組、集合或文庫；b)篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下，結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列；禾nc)篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值下，以這樣的締合常數(shù)(KA)，結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，所述締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下與相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%，諸如至少10%，優(yōu)選地至少25%，更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%,諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%，諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)；禾口d)分離在低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值下，以這樣的締合常數(shù)(KA)結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，所述締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下與相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%，甚至更優(yōu)選地至少60%，諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%，諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。具體地，所述方法可以包括下列步驟a)提供針對目的或理想血清蛋白的氨基酸序列組、集合或文庫；和b)篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下，結(jié)合于理想或預(yù)期血清蛋白的氨基酸序列；和c)篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值下，以這樣的締合常數(shù)(KA)，結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，所述締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下與相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%，更優(yōu)選地至少50%，甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%，超過120%或甚至130°/?；蚋?；禾口d)分離在低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值下，以這樣的締合常數(shù)(Ka)結(jié)合于理想或預(yù)期血清蛋白的氨基酸序列，所述締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下與相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%，更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%，諸如甚至更優(yōu)選地至少70%,諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。更具體地，所述方法可以包括下列步驟a)提供針對預(yù)期或理想血清蛋白的氨基酸序列組、集合或文庫；b)篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下，結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列；禾口c)篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值下，以這樣的締合常數(shù)(KA)，結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，所述締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下與相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%,諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)；禾口d)分離在低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值下，以這樣的締合常數(shù)(KA)結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，所述締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下與相同血清蛋白締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%,諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%，諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。通常，在這些方法中，所述步驟b)即篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在高于7.0的至少一種生理pH值(諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值)下，結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，是通過在高于7.0的生理pH值(諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值)下篩選而進行的。類似地，步驟C)即篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在低于6.7的至少一種生理pH值(諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值)下，結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，是在低于6.7的生理pH值(諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值)下篩選而進行的。如技術(shù)人員應(yīng)該清楚地，還可以將所述篩選步驟作為選擇步驟進行。例如，已知抗體-抗原相互作用通常易受緩沖液條件、pH和離子強度改變的影響，但最通常地，沒有對那些改變的評分或研究，并且不經(jīng)常使用它們設(shè)計藥物治療劑，因為變化總體上是不可預(yù)知的。例如通過針對靈敏相互作用的存在篩選結(jié)合蛋白的所有組成部分，發(fā)現(xiàn)了具有理想結(jié)合特征的結(jié)合蛋白，其中所述篩選是例如通過在兩種代表性條件(例如在pH7.4和在pH6.0下)，和確定的相對結(jié)合強度下進行結(jié)合測定而實現(xiàn)的?？梢岳萌魏魏线m的結(jié)合測試包括ELISA、基于BIAcore的方法、斯卡查德分析等，測量所述相對相互作用強度。所述測試將揭示哪種結(jié)合蛋白表現(xiàn)出易受所選參數(shù)(pH)影響的相互作用和影響程度。備選地，通過例如從噬菌體、核糖體、酵母或細胞文庫中，利用優(yōu)選富集理想靈敏性的選擇中的條件，選擇結(jié)合蛋白的所有組成部分，從而發(fā)現(xiàn)了具有理想結(jié)合特征的結(jié)合蛋白。以基本pH(例如，pH7.4)培養(yǎng)噬菌體抗體并利用較低pH(例如，6.0)大量清洗結(jié)合的噬菌體粒子，以及隨后進行酸洗脫(pH2.0)，應(yīng)該富集基本不依賴于pH而識別抗原的那些噬菌體抗體。還可以從設(shè)計者蛋白質(zhì)文庫中分離具有理想結(jié)合特征的結(jié)合蛋白，在所述蛋白質(zhì)文庫中將推定的結(jié)合位點改造為不包含某些"靈敏的"相互作用中優(yōu)選的氨基酸殘基或序列，例如關(guān)于pH-靈敏性的組氨酸。例如，已知FcRn和IgG的相互作用非常易受pH的影響，當(dāng)pH從pH6.7升至7.0時，相互作用降低2個數(shù)量級。親和性轉(zhuǎn)變的主要機制基礎(chǔ)是結(jié)合位點的組氨酸含量組氨酸殘基的咪唑側(cè)改變通常在pH6.0-7.0的范圍內(nèi)加質(zhì)子。預(yù)測在推定的結(jié)合位點中明顯排除組氨酸(例如，利用優(yōu)選消除文庫中該殘基的寡核苷酸，如使用三核苷酸和本領(lǐng)域中已知的，例如Knappik等，分子生物學(xué)雜志(J.MoLBiol)2000，巻296:57-86)以較高頻率產(chǎn)生基本不依賴于pH結(jié)合的氨基酸序列。因此，術(shù)語"篩選"，用于本說明書中時，可以包括選擇、篩選或選擇和/或篩選技術(shù)的任何合適組合。通常，可以作為單獨或獨立的篩選步驟，或作為單獨篩選過程的一部分執(zhí)行步驟b)和C)。當(dāng)作為單獨篩選過程的一部分執(zhí)行步驟b)和C)時，所述篩選過程可以例如包括下列步驟i)在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下，使氨基酸序列組、集合或文庫與血清蛋白相接觸；ii)除去在步驟O中不結(jié)合的氨基酸序列(即，不以理想締合常數(shù)結(jié)合血清蛋白的那些氨基酸序列，如本文中所述)；以便保留與血清蛋白結(jié)合的氨基酸序列組或集合；iii)使所述氨基酸序列組或集合經(jīng)歷低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH，這樣在所述pH值下，以理想締合常數(shù)結(jié)合血清蛋白的氨基酸序列保持與血清蛋白的結(jié)合，且同樣地，在所述pH值下，不以理想締合常數(shù)結(jié)合血清蛋白的氨基酸序列不保持與血清蛋白的結(jié)合.iv)除去步驟iii)中不結(jié)合的氨基酸序列(即，在所述pH值下，不以理想締合常數(shù)結(jié)合血清蛋白的那些氨基酸序列，如本文中所述)；和任選地，v)收集在步驟iii)中保持與血清蛋白結(jié)合的氨基酸序列。以上方法中使用的氨基酸序列組、集合或文庫可以是任何合適的氨基酸序列組、集合或文庫。例如，所述氨基酸序列組、集合或文庫可以是免疫球蛋白序列或免疫球蛋白序列片段的組、集合或文庫，免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列或其片段的組、集合或文庫，例如VH-、VL-或VHH-序列或其片段的組、集合或文庫。在一個特殊但非限制性方面，所述氨基酸序列組、集合或文庫是結(jié)構(gòu)域抗體、能被用作結(jié)構(gòu)域抗體的蛋白質(zhì)、"dAb"、單結(jié)構(gòu)域抗體、能被用作單結(jié)構(gòu)域抗體的蛋白質(zhì)、或納米體(或以上任一項的合適片段)的組、集合或文庫。所述氨基酸序列組、集合或文庫可以是首次用于實驗的組、集合或文庫；可以是合成的或半-合成的氨基酸序列組、集合或文庫(例如，不限于，通過親和性成熟產(chǎn)生的氨基酸序列組、集合或文庫)，或可以是免疫組、集合或文庫。在一個實施方案中，所述組、集合或文庫是通過用抗原適當(dāng)免疫哺乳動物(諸如兔、大鼠、小鼠、豬或狗、或駱駝)(這樣所述哺乳動物形成針對所述抗原的抗體)而獲得的免疫組、集合或文庫，并且然后從獲自所述哺乳動物的生物學(xué)樣品(諸如血液或B-細胞樣品)出發(fā)，產(chǎn)生免疫球蛋白序列組、集合或文庫。例如由本文中引用的現(xiàn)有技術(shù)，技術(shù)人員應(yīng)該清楚用于獲得和篩選所述免疫組、集合或文庫的方法和技術(shù)。在一個優(yōu)選的方法中，免疫球蛋白序列組、集合或文庫獲自受到目的血清蛋白(例如，血清白蛋白)適當(dāng)免疫的哺乳動物。在另一個優(yōu)選的方面，所述組、集合或文庫是獲自駱駝的VHH序列的組、集合或文庫，和具體地是獲自受到目的血清蛋白(例如，血清白蛋白)適當(dāng)免疫的駱駝的VHH序列的免疫組、集合或文庫。所述組、集合或文庫可以包括任何合適數(shù)量的氨基酸序列，諸如1、2、3或約5、10、50、100、500、1000、5000、104，105，106，107,108或更多序列。以上氨基酸序列組、集合或文庫可以包括一種或多種在選擇和/或篩選過程前未知的序列，例如如果這些序列是一種或多種給定氨基酸序列的隨機化步驟(例如通過易錯PCR或其他方法)的結(jié)果。而且，可以通過理性或半-經(jīng)驗的方法，諸如計算機建模技術(shù)或生物靜力學(xué)或數(shù)據(jù)-發(fā)掘技術(shù)，獲得或定義以上氨基酸序列組、集合或文庫中的一種或多種或全部氨基酸序列，其中可以將氨基酸序列定義或提議為被預(yù)期或認為賦有某些特性，諸如增高的穩(wěn)定性、pH最適度、蛋白酶靈敏性或其他特性或其組合。在所述組、集合或文庫中(和/或在本文中所述的篩選步驟中)，所述組、集合或文庫中存在的氨基酸序列還可以適當(dāng)?shù)爻霈F(xiàn)在合適的宿主或宿主細胞上，例如在噬菌體粒子、核糖體、細菌、酵母細胞等上。此外，利用由本文中引用的現(xiàn)有技術(shù)，技術(shù)人員應(yīng)該清楚合適的宿主或宿主細胞、用于在所述宿主或宿主細胞上展示氨基酸序列的合適技術(shù)、和用于篩選所述宿主或宿主細胞上展示的氨塞酸序列組、集合或文庫的合適技術(shù)。當(dāng)在合適的組織或宿主細胞上展示氨基酸序列時，還可能(和習(xí)慣)首先從所述宿主或宿主細胞分離編碼理想氨基酸序列的核苷酸序列，并且然后通過在合適的宿主生物體中適當(dāng)表達所述核苷酸序列獲得理想的氨基酸序列。此外，如技術(shù)人員應(yīng)該清楚地，這可以以任何本身已知的合適方式執(zhí)行。通過非-限制性實例的方法，所述組、集合或文庫可以包括1、2或多種彼此不同(例如，以設(shè)計的點突變或以隨機化位置)的氨基酸序列，包括源自天然多樣化氨基酸序列(例如免疫文庫)的不同組，或任何其他不同氨基酸序列來源(如例如Hoogenboom等，自然生物技術(shù)(NatBiotechnol)23:1105，2005和Binz等，自然生物技術(shù)(NatBiotechnol)2005,23:1247中所述)的多氨基酸序列。所述氨基酸序列組、集合或文庫可以展示在噬菌體粒子、核糖體、細菌、酵母細胞、哺乳動物細胞表面上，并且在這些載體中與編碼所述氨基酸序列的核苷酸序列相連。這使得所述組、集合或文庫可以按照選擇程序分離本發(fā)明的理想氨基酸序列。用于生成本發(fā)明氨基酸序列的方法還可以包括下列步驟a)提供關(guān)于在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列的氨基酸序列組、集合或文庫；和b)篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值下，以這樣的締合常數(shù)(KA)結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，所述締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH下與相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%，優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%,諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)；和c)分離在低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值下，以這樣的締合常數(shù)(KA)結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，所述締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下與相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90°/?；蚋?或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。具體地，所述方法可以包括下列步驟a)提供關(guān)于在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下，以105-1012升/摩爾或更高，和優(yōu)選地107-1012升/摩爾或更高或更優(yōu)選地108-1012升/摩爾的締合常數(shù)(Ka)，結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列的氨基酸序列組、集合或文庫；b)篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值下，以這樣的締合常數(shù)(ka)結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，所述締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在至少一種高于7.0的生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH下與相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%，更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%,諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)；和c)分離在低于6.7的至少一種生理pH值，諸如在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值下，以這樣的締合常數(shù)(KA)結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列，所述締合常數(shù)(KA)是該氨基酸序列在高于7.0的至少一種生理pH值，諸如在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值下與相同血清蛋白的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%，更優(yōu)選地至少50%，甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。用于生成本發(fā)明氨基酸序列的方法還可以包括下列步驟a)提供關(guān)于在處于6.5-7.5范圍內(nèi)的至少一種生理pH值下，諸如pH7或在7.2-7.4范圍內(nèi)，結(jié)合理想或目的血清蛋白的氨基酸序列的氨基酸序列組、集合或文庫；和b)篩選所述氨基酸序列組、集合或文庫，以獲得在處于5-6范圍內(nèi)的至少一種生理pH值下，諸如pH5.5或在5.3-5.7的范圍內(nèi)，以這樣的off-速率與理想或目的血清蛋白的氨基酸序列相互作用的氨基酸序列，所述off-速率是該氨基酸序列在處于5-6之間的至少一種生理pH值下，諸如例如pH5.5或在5.3-5.7范圍內(nèi)關(guān)于相同血清蛋白的off-速率的5-200%,諸如10-190%,例如50-150%，例如70-130%;禾口C)分離所述具有以上0ff-速率特征的氨基酸序列；和任選地，d)體內(nèi)評估所述氨基酸序列的半衰期。用于生成本發(fā)明氨基酸序列的方法中，所述氨基酸序列在不同pH條件下的off-速率在50-150%(更優(yōu)選地80-120%)，即基本不依賴于pH。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及包括至少一種本發(fā)明氨基酸序列的化合物(本文中也稱為"本發(fā)明的化合物")，該化合物還可以任選地至少包括一個治療部分，其包括選自由下列各項組成的組的至少一個治療部分小分子、多核苷酸、多肽或肽。本發(fā)明的化合物適合于以這樣的頻率，或，備選地，以這樣的間隔向靈長類動物施用，所述頻率對應(yīng)于所述靈長類動物中血清蛋白(諸如血清白蛋白)天然半衰期的低于50%(諸如約50%-70%),優(yōu)選地至少60%(諸如約60%-80%)或優(yōu)選地至少70%(諸如約70%-90%),更優(yōu)選地至少約80%(諸如約80°/。-90%)或優(yōu)選地至少約90%，所述間隔是至少4天(諸如約4-12天或更長)，優(yōu)選地至少7天(諸如約7-15天或更長)，更優(yōu)選地至少9天(諸如約9-17天或更長)，諸如至少15天(諸如約15-19天或更長，特別是為了施用于人)或至少17天(諸如約17-19天或更長，特別是為了施用于人)；其中進行所述施用具體是為了維持所述化合物在用該化合物治療的受試者血清中的理想水平(如技術(shù)人員應(yīng)該清楚地，這特別依賴于使用的化合物和/或待治療的疾病)。臨床醫(yī)生或醫(yī)師應(yīng)該能夠選擇理想的血清水平和選擇向待治療受試者施用的劑量和/或量，從而在以本文中提到的頻率施用本發(fā)明的化合物時，在所述受試者中獲得和/或維持理想的血清水平。例如，所述劑量可以在理想血清水平的1倍-10倍間變化，諸如理想血清水平的2倍-4倍(其中，以本身已知的方式重新計算理想血清水平，從而提供待施用的相應(yīng)劑量)。還可以將本發(fā)明的化合物配制為目的和/或被包裝(例如，與合適的使用說明書一起)為以上述頻率施用的單位劑量，并且所述單位劑量和包裝產(chǎn)品構(gòu)成本發(fā)明另外的方面。本發(fā)明另一方面涉及本發(fā)明化合物在提供所述單位劑量或包裝產(chǎn)品中的用途(即，通過適當(dāng)?shù)嘏渲坪?或包裝所述化合物)。在特殊的實施方案中，本發(fā)明的化合物是融合蛋白或構(gòu)建體。在所述融合蛋白或構(gòu)建體中，本發(fā)明的氨基酸序列可以直接與至少一種治療部分相連，或通過連接體或間隔區(qū)與至少一種治療部分相連。特殊的實施方案涉及包括免疫球蛋白序列或其片段的治療部分，更具體地，(單)結(jié)構(gòu)域抗體或納米體。本發(fā)明還涉及多價和多特異性納米體構(gòu)建體，其包括至少一種作為納米體的本發(fā)明氨基酸序列，和至少一種另外的納米體。所述納米體直接與所述至少一種另外的納米體相連，或通過連接體或間隔區(qū)與所述至少一種另外的納米體相連，優(yōu)選地，通過氨基酸序列連接體或間隔區(qū)與所述至少一種另外的納米體相連。此外，本發(fā)明涉及編碼按照本發(fā)明氨基酸序列、或按照本發(fā)明化合物的氨基酸序列、或本發(fā)明多價和多特異性納米體的核苷酸序列或核酸。本發(fā)明還提供包含本發(fā)明核苷酸序列或核酸和/或表達(或能夠表達)本發(fā)明氨基酸序列、或按照本發(fā)明化合物的氨基酸序列、或本發(fā)明多價和多特異性納米體的宿主或宿主細胞。而且，本發(fā)明涉及用于制備本發(fā)明氨基酸序列、化合物、或多價和多特異性納米體的方法，其包括在這樣的條件下培養(yǎng)或維持本發(fā)明的宿主細胞，在所述條件下所述宿主細胞產(chǎn)生或表達所述產(chǎn)物，并任選地進一步包括由此產(chǎn)生的所述產(chǎn)物。在一個實施方案中，本發(fā)明涉及藥物組合物，其包括選自由本發(fā)明氨基酸序列、化合物、或多價和多特異性納米體組成的組中的一種或多種，其中所述藥物組合物適合于對靈長類動物，以在所述靈長類動物中血清蛋白天然半衰期的至少約50%的間隔施用。所述藥物組合物還可以包括至少一種藥用載體、稀釋劑或賦形劑。本發(fā)明還包括包含本發(fā)明的氨基酸序列、化合物或多價和多特異性納米體的治療的醫(yī)學(xué)用途和方法，其中所述醫(yī)學(xué)用途或方法的特征在于所述藥物適合于對靈長類動物，以在所述靈長類動物中血清蛋白天然半衰期的至少約50%的頻率施用。本發(fā)明還涉及用于延長或增長治療劑血清半衰期的方法。所述方法包括使所述治療劑與任意前述的本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體(包括多價和多特異性納米體)相接觸，以使所述治療劑與本發(fā)明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體結(jié)合或另外締合。在一些實施方案中，所述治療劑是生物治療劑，優(yōu)選地是肽或多肽，在該情形中，接觸所述治療劑的步驟可以包括通過使所述肽或多肽與本發(fā)明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體相連接，而制備融合蛋白。這些方法可以進一步包括在治療劑與本發(fā)明的氨基酸、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體結(jié)合或另外締合后，向靈長類動物施用所述治療劑。在該方法中，所述治療劑在靈長類動物中的血清半衰期是治療劑本身半衰期的至少1.5倍，或與治療劑本身的半衰期相比增長至少1小時。在一些優(yōu)選的實施方案中，所述治療劑在靈長類動物中的血清半衰期是相應(yīng)治療部分本身半衰期的至少2倍、至少5倍、至少10倍或超過20倍。在其他優(yōu)選的實施方案中，所述治療劑在靈長類動物中的血清半衰期與相應(yīng)治療部分本身的半衰期相比，增長超過2小時，超過6小時或超過12小時。優(yōu)選地，增長所述治療劑在靈長類動物中的血清半衰期，以使所述治療劑具有如本文中對本發(fā)明的化合物所定義的半衰期(g卩，在人中和/或在至少一種靈長類動物物種中)。在另一方面，本發(fā)明涉及用于修飾治療劑的方法，所述方法使所述治療劑的理想治療水平，在適當(dāng)施用所述治療劑以獲得所述理想治療水平時，維持一段延長的時期。所述方法包括使所述治療劑與任意前述的本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體(包括多價和多特異性納米體)相接觸，從而使所述治療劑與本發(fā)明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體結(jié)合或另外締合。在一些實施方案中，所述治療劑是生物治療劑，優(yōu)選地是肽或多肽，在該情形中，接觸所述治療劑的步驟可以包括通過使所述肽或多肽與本發(fā)明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體相連接，而制備融合蛋白。這些方法可以進一步包括在治療劑與本發(fā)明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體結(jié)合或另外締合后，向靈長類動物施用該治療劑，從而根據(jù)所述施用獲得理想的治療水平。在該方法中，所述治療劑根據(jù)所述施用維持理想治療水平的時間是治療劑本身半衰期的至少1.5倍，或與治療劑本身的半衰期相比增長至少l小時。在一些優(yōu)選的實施方案中，所述治療劑根據(jù)所述施用維持理想治療水平的時間是相應(yīng)治療部分本身半衰期的至少2倍、至少5倍、至少10倍或超過20倍。在其他優(yōu)選的實施方案中，所述治療劑根據(jù)所述施用維持理想治療水平的時間與相應(yīng)治療部分本身的半衰期相比，增長超過2小時，超過6小時或超過12小時。優(yōu)選地，增長所述治療劑根據(jù)所述施用維持理想治療水平的時間，這樣可以以本文中關(guān)于本發(fā)明化合物定義的頻率施用所述治療劑。在另一方面中，本發(fā)明涉及本發(fā)明化合物生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物增高和/或延長在患者血清中所述化合物或構(gòu)建體中的治療劑水平，這樣能夠以與單獨治療劑相比更低的劑量(即，以基本相同的施藥頻率)施用所述化合物或構(gòu)建體中的所述治療劑。發(fā)明詳述在一方面，本發(fā)明通過提供在生理pH值下，以基本不依賴于pH的方式(如本文中定義)結(jié)合血清蛋白的氨基酸序列和具體地，免疫球蛋白序列，和更具體地，免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列，而實現(xiàn)該目的。所述氨基酸序列還優(yōu)選地是這樣的，即它們可以以這樣的方式與血清蛋白(諸如血清白蛋白)結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)所述氨基酸序列或多肽構(gòu)建體與靈長類動物中的血清蛋白分子結(jié)合或另外締合時，它們表現(xiàn)出這樣的血清半衰期，所述血清半衰期是所述靈長類動物中血清蛋白天然半衰期的至少約50%，優(yōu)選地至少約60%，優(yōu)選地至少約70%,更優(yōu)選地至少約80%和更優(yōu)選地至少約90%。本發(fā)明的氨基酸序列在向靈長類動物施用后的血清半衰期可以是所述靈長類動物中血清蛋白天然半衰期的至少50%,55%,60%，65%，70%,75%，80%,85%,90%,95%或至少100%。"所述靈長類動物中血清蛋白的天然血清半衰期"意指如下定義的血清半衰期，其中所述血清白蛋白在生理學(xué)條件下處于健康個體中。將血清白蛋白作為血清蛋白的實例，則血清白蛋白在人中的天然血清半衰期是19天。已知較小的靈長類動物具有較短的血清白蛋白天然半衰期，例如在8-19天的范圍內(nèi)。血清白蛋白的特殊半衰期可以是至少4，5,6,7,8，9，10，11，12,13,14，15,16，17，18,或19天或更長。由此，它遵從，例如在人個體中，本發(fā)明的氨基酸序列顯示出與血清白蛋白相關(guān)的血清半衰期，為19天的至少約50%，即7.6天。在較小的靈長類動物中，根據(jù)這些物種中血清白蛋白的天然半衰期，所述血清半衰期可能再短幾天。在本說明書中，術(shù)語"靈長類動物"指猴和猿物種，并包括猴物種，諸如來自彌猴屬(諸如，和具體地，食蟹猴(食蟹猴(^facaca/^"'cM/anX))和或恒河猴(恒河猴(MacocamM/Wto)))和狒狒(豚尾狒狒(尸a;7/0ww'"m力)的猴，以及狨猴(來自狨(Cfl/fe/^x)屬的物種)，松鼠猴(來自松鼠猴(&z'柳W)屬的物種)和絹毛猴(來自檉柳猴(&g^rn^)屬的物種)，以及猿物種，諸如黑猩猩(黑猩猩(尸fl"/rag/o辦&力)，并且還包括人。人是按照本發(fā)明優(yōu)選的靈長類動物。通?？梢詫被嵝蛄谢蚧衔锏陌胨テ诙x為例如由于由天然機制對序列或化合物降解和/或序列或化合物清除或螯合，而引起的多肽的血清濃度被降低50°/。所需的時間。可以以任何本身已知的方式，諸如通過藥物動力學(xué)分析，確定本發(fā)明氨基酸序列(和包括所述氨基酸序列的化合物)在相關(guān)靈長類動物物種中的半衰期。合適的技術(shù)對本領(lǐng)域中的技術(shù)人員應(yīng)該是清楚的，且通?？梢岳绨ㄏ铝胁襟E向靈長類動物適當(dāng)?shù)厥┯煤线m劑量的待處理的氨基酸序列或化合物；每隔一定間隔從所述靈長類動物中收集血液樣品或其他樣品；確定所述血液樣品中本發(fā)明氨基酸序列或化合物的水平或濃度；和由這樣獲得的數(shù)據(jù)(圖)計算直到本發(fā)明氨基酸序列或化合物的水平或濃度與給藥起始水平相比降低50%的時間。參考例如標準手冊，諸如Kenneth,A等藥品的化學(xué)穩(wěn)定性藥劑師手冊(ChemicalStabilityofPharmaceuticals:AHandbookforPharmacists)禾口Peters等，藥物動力學(xué)分析實踐方案(Pharmacokineteanalysis:APracticalApproach)(1996)。還參考"藥物動力學(xué)"("Pharmacokinetics"),MGibaldi&DPerron，由MarcelDekker出版，第2修訂版(1982)。如在WO04/003019的第6和7頁和在其中引用的其他參考文獻中所述地，可以利用參數(shù)諸如tl/2-a，tl/2-|3和曲線下面積(AUC)表示半衰期。在本說明書中，"半衰期的增長"指這些參數(shù)中任一項，諸如這些參數(shù)中任兩項，或基本全部三項參數(shù)的增大。"半衰期的增長"具體指在tl/2-a禾卩/或AUC或二者增大或不增大的條件下，tl/2-P的增大。在另一方面，針對血清蛋白(諸如血清白蛋白，優(yōu)選地，人血清白蛋白)的本發(fā)明的氨基酸序列，和特別地本發(fā)明的免疫球蛋白序列，和更特別地本發(fā)明的免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列是這樣的，即它們在恒河猴中具有至少約4天，優(yōu)選地至少約7天，更優(yōu)選地至少約9天的半衰期。在另一方面，本發(fā)明的氨基酸序列是這樣的，即它們在人中具有的半衰期是至少約7天，優(yōu)選地至少約15天，更優(yōu)選地至少約17天。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物，其在人中具有這樣的半衰期，所述半衰期是在所述化合物中存在的本發(fā)明的氨基酸序列的半衰期的至少80%,更優(yōu)選地至少90%,諸如95%或更多或基本相同。更具體地，本發(fā)明還涉及本發(fā)明的化合物，其在人中具有至少約7天，優(yōu)選地至少約15天，更優(yōu)選地至少約17天的半衰期。本發(fā)明還提供包括本發(fā)明的氨基酸序列的化合物，具體地，除本發(fā)明的氨基酸序列外包括至少一種治療部分的化合物。按照本發(fā)明的化合物的特征在于，在靈長類動物中表現(xiàn)出與本發(fā)明氨基酸序列在靈長類動物中相似的血清半衰期，更優(yōu)選地，至少是本發(fā)明氨基酸序列在靈長類動物中血清半衰期的半衰期，和更優(yōu)選地，大于本發(fā)明氨基酸序列在靈長類動物中半衰期的半衰期。在一方面，本發(fā)明通過提供本文中公開的氨基酸序列實現(xiàn)該目的，所述氨基酸序列可以結(jié)合能與FcRn結(jié)合的血清蛋白，該氨基酸序列還是這樣的，即它們以這樣的方式與血清蛋白結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)所述氨基酸序列或多肽構(gòu)建體與血清蛋白分子結(jié)合或另外締合時，不(顯著)降低或抑制所述血清蛋白分子與FcRn的結(jié)合(即，與當(dāng)氨基酸序列或多肽構(gòu)建體不與其結(jié)合時，所述血清蛋白分子與FcRn的結(jié)合相比)。在本發(fā)明的這一方面，通過"不顯著降低或抑制"意指關(guān)于血清蛋白針對FcRn的結(jié)合親和性不被降低超過50%，優(yōu)選地不被降低超過30%，甚至更優(yōu)選地不被降低超過10%，諸如不被降低超過5%，或基本完全不被降低。在本發(fā)明的這一方面，"不顯著降低或抑制"還可以意指(或另外意指)血清蛋白分子的半衰期不顯著縮短(如下定義)。如技術(shù)人員通常理解地，當(dāng)在本說明書中，提及結(jié)合時，所述結(jié)合優(yōu)選地是特異性結(jié)合。當(dāng)如本文中所述的氨基酸序列是單價免疫球蛋白序列(例如，單價納米體)時，所述單價免疫球蛋白序列優(yōu)選地以10—5-10—12摩爾/升或更小，和優(yōu)選地1(T7-10—12摩爾/升或更小和更優(yōu)選地10—8-10—12摩爾/升的解離常數(shù)(KD)(即，以105-1012升/摩爾或更大，和優(yōu)選地107-1012升/摩爾或更大和更優(yōu)選地108-1012升/摩爾的締合常數(shù)(KA),和/或以至少107M",優(yōu)選地至少108M",更優(yōu)選地至少1(^M—1,諸如至少1012M"的結(jié)合親和性(Ka》結(jié)合人血清白蛋白。通常認為任何大于1(^摩爾/升的KD(或任何小于1(^M"的Ka僮)表示非-特異性結(jié)合。優(yōu)選地，本發(fā)明的單價免疫球蛋白序列以小于500nM，優(yōu)選地小于200nM，更優(yōu)選地小于10nM,諸如小于500pM的親和性，結(jié)合理想的血清蛋白?？梢砸匀魏伪旧硪阎暮线m方式，包括，例如，斯卡查德分析和/或競爭結(jié)合測定，諸如放射性免疫測定(RIA)、酶免疫測定(EIA)和夾心競爭測定，以及本領(lǐng)域中本身已知方式的不同變化，確定抗原-結(jié)合蛋白與抗原或抗原決定簇的特異性結(jié)合。在另一方面，本發(fā)明的氨基酸序列(和具體地，免疫球蛋白序列，和更具體地，免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列)還可以是這樣的，即它們可以以這樣的方式與血清蛋白(諸如血清白蛋白)結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)氨基酸序列或多肽構(gòu)建體與所述血清蛋白分子結(jié)合或另外締合時，不(顯著)縮短所述血清蛋白分子的半衰期(即，與當(dāng)氨基酸序列或多肽構(gòu)建體不與其結(jié)合時，血清蛋白分子的半衰期相比)。在本發(fā)明的這個方面，通過"不顯著縮短"意指血清蛋白分子的半衰期(如利用本身已知的合適技術(shù)測量地)不被縮短超過50%，優(yōu)選地不被縮短超過30%，甚至更優(yōu)選地不被縮短超過10%，諸如不被縮短超過5%，或基本完全不被縮短。在另一方面，本發(fā)明的氨基酸序列(和具體地，免疫球蛋白序列，和更具體地，免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列)可以針對能夠與FcRn結(jié)合的血清蛋白，并且還可以是這樣的，即它們能夠結(jié)合在血清蛋白分子上不參與所述血清蛋白與FcRn的結(jié)合的氨基酸殘基(諸如血清白蛋白上的氨基酸殘基)。具體地，按照本發(fā)明的這個方面，當(dāng)本發(fā)明的氨基酸序列針對血清白蛋白時，它們是這樣的，即它們能夠結(jié)合不形成血清白蛋白結(jié)構(gòu)域III部分的血清白蛋白氨基酸序列。例如，但不限于，本發(fā)明的這個方面提供這樣的氨基酸序列，其能夠結(jié)合于形成結(jié)構(gòu)域I和/或結(jié)構(gòu)域II部分的血清白蛋白氨基酸序列。本發(fā)明的氨基酸序列優(yōu)選地是(單)結(jié)構(gòu)域抗體或適合于用作(單)結(jié)構(gòu)域抗體，并同樣地，可以是重鏈可變結(jié)構(gòu)域序列(VH序列)或輕鏈可變結(jié)構(gòu)域序列(VL序列)，且優(yōu)選地是VH序列。所述氨基酸序列可以例如是所謂的"dAbs"。然而，按照特別優(yōu)選的實施方案，本發(fā)明的氨基酸序列是納米體。對于納米體的進一步描述和定義，以及本說明書中使用的一些其他術(shù)語(諸如，例如且不限于，術(shù)語"針對")，參考埃博靈克斯股份有限公司(AblynxN.V.)的同時待審申請(諸如WO06/040153和同時待審的國際申請PCT/EP2006/004678));以及本文中引用的其他現(xiàn)有技術(shù)。同樣地，它們可以是屬于"KERE"-類、"GLEW"-類或"103-P,R，S"-類的納米體(也如埃博靈克斯股份有限公司(AblynxN.V.)的同時待審的專利申請中定義地)。優(yōu)選地，本發(fā)明的氨基酸序列是人源化的納米體(也如埃博靈克斯股份有限公司(AblynxN.V.)的同時待審專利申請中定義地)?？梢杂欣貙⒈疚闹泄_的氨基酸序列用作融合配偶體，從而增長治療部分，諸如蛋白質(zhì)、化合物(包括，但不限于，小分子)或其他治療實體的半衰期。因此，在另一方面，本發(fā)明提供包括或基本由如本文中公開的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)或多肽。具體地，本發(fā)明提供包括或基本由至少一種本發(fā)明的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)或多肽構(gòu)建體，所述本發(fā)明的氨基酸序列任選地，通過一種或多種合適的連接體或間隔區(qū)，與至少一種治療部分相連。如本文中進一步所述，所述蛋白質(zhì)或多肽構(gòu)建體可以例如(不限于)是融合蛋白。本發(fā)明還涉及蛋白質(zhì)或多肽構(gòu)建體或融合蛋白和構(gòu)建體的治療用途，以及包括所述蛋白質(zhì)或多肽構(gòu)建體或融合蛋白的藥物組合物。在一些實施方案中，所述至少一種治療部分包括或基本由治療性蛋白質(zhì)、多肽、化合物、因子或其他實體組成。在優(yōu)選的實施方案中，所述治療部分針對理想的抗原或靶標，能夠結(jié)合理想的抗原(和具體地，能夠特異性結(jié)合理想的抗原)，和/或能夠與理想的靶標相互作用。在另一個實施方案中，所述至少一種治療部分包括或基本由治療性蛋白質(zhì)或多肽組成。在另一個實施方案中，所述至少一種治療部分包括或基本由免疫球蛋白或免疫球蛋白序列(包括但不僅限于免疫球蛋白片段)，諸如抗體或抗體片段(包括但不限于ScFv片段)組成。在再一個實施方案中，所述至少一種治療部分包括或基本由抗體可變結(jié)構(gòu)域，諸如重鏈可變結(jié)構(gòu)域或輕鏈可變結(jié)構(gòu)域組成。在優(yōu)選的實施方案中，所述至少一種治療部分包括或基本由至少一種結(jié)構(gòu)域抗體或單結(jié)構(gòu)域抗體，"dAb"或納米體⑧組成。按照該實施方案，本發(fā)明的氨基酸序列優(yōu)選地還是結(jié)構(gòu)域抗體或單結(jié)構(gòu)域抗體，"dAb"或納米體，這樣由此產(chǎn)生的構(gòu)建體或融合蛋白是多價構(gòu)建體(如本文中所述)和優(yōu)選地是多特異性構(gòu)建體(也如本文中定義)，其包括至少2個結(jié)構(gòu)域抗體、單結(jié)構(gòu)域抗體、"dAbs"或納米體⑧(或其組合)，至少其中之一是本發(fā)明的氨基酸序列。在特殊的實施方案中，所述至少一種治療部分包括或基本由至少一個單價納米體⑧或二價、多價、雙特異性或多特異性納米體⑧構(gòu)建體組成。按照該實施方案，本發(fā)明的氨基酸序列優(yōu)選地還是納米體，這樣由此產(chǎn)生的構(gòu)建體或融合蛋白是多價納米體構(gòu)建體(如本文中所述)和優(yōu)選地是多特異性納米體構(gòu)建體(也如本文中定義)，其包括至少2個納米體，至少其中之一是本發(fā)明的氨基酸序列。按照本發(fā)明的一個實施方案，本發(fā)明的氨基酸序列是人源化的納米體。而且，當(dāng)本發(fā)明的氨基酸序列、蛋白質(zhì)、多肽或構(gòu)建體意欲用于藥物或診斷應(yīng)用時，上述各項優(yōu)選地針對人血清蛋白，諸如人血清白蛋白。當(dāng)所述氨基酸序列是免疫球蛋白序列，諸如免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列時，還可以使用所述序列的合適的(即，適合于本文中提到的目的)片段。例如，當(dāng)所述氨基酸序列是納米體時，所述片段可以基本如WO04/041865中所述。本發(fā)明還涉及包括或基本由本文中所述的氨基酸序列或其合適的片段組成的蛋白質(zhì)或多肽。本發(fā)明的氨基酸序列還可以包括一個或多個關(guān)于一種或多種其他抗原、抗原決定簇、蛋白質(zhì)、多肽或其他化合物的另外的結(jié)合位點。如本文中提及地，可以將本文中所述的氨基酸序列有利地用作融合配偶體，從而增長治療部分，諸如蛋白質(zhì)、化合物(包括，但不限于，小分子)或其他治療實體的半衰期。因此，本發(fā)明的一個實施方案涉及包括至少一種本發(fā)明氨基酸序列和至少一種治療部分的構(gòu)建體或融合蛋白。與所述治療部分本身相比，所述構(gòu)建體或融合蛋白優(yōu)選地具有增長的半衰期。通常，可以如以上引用的現(xiàn)有技術(shù)中所述(制備和使用)所述融合蛋白和構(gòu)建體，但是其具有本發(fā)明的氨基酸序列，而不是現(xiàn)有技術(shù)中所述的增長半衰期的部分。通常，本文中所述的構(gòu)建體或融合蛋白優(yōu)選地具有這樣的半衰期，所述半衰期高于相應(yīng)治療部分本身半衰期至少1.5倍，優(yōu)選地至少2倍，諸如至少5倍，例如至少10倍或超過20倍。而且，優(yōu)選地，任何所述融合蛋白或構(gòu)建體具有這樣的半衰期，所述半衰期與相應(yīng)治療部分本身的半衰期相比，增長超過1小時，優(yōu)選地超過2小時，更優(yōu)選地超過6小時，諸如超過12小時。而且，優(yōu)選地，任何所述融合蛋白或構(gòu)建體具有這樣的半衰期，所述半衰期是超過l小時，優(yōu)選地超過2小時，更優(yōu)選地超過6小時，諸如超過12小時，和例如約1天、2天、1周、2周或3周，且優(yōu)選地，不超過2個月，盡管后者不太關(guān)鍵。而且，如上所提及地，當(dāng)本發(fā)明的氨基酸序列是納米體時，可以使用它增長其他免疫球蛋白序列，諸如結(jié)構(gòu)域抗體、單結(jié)構(gòu)域抗體、"dAbs"或納米體的半衰期。因此，本發(fā)明的一個實施方案涉及這樣的構(gòu)建體或融合蛋白，其包括至少一種本發(fā)明的氨基酸序列和至少一種免疫球蛋白序列，諸如結(jié)構(gòu)域抗體、單結(jié)構(gòu)域抗體、"dAbs"或納米體。所述免疫球蛋白序列優(yōu)選地針對理想的靶標(其優(yōu)選地是治療靶標)，和/或有效于或適合于治療、預(yù)防和/或診斷目的其他免疫球蛋白序列。因此，在另一方面，本發(fā)明涉及多特異性(和具體地，雙特異性)納米體構(gòu)建體，其包括至少一種本文中所述的納米體，和至少一種其他納米體，其中所述至少一種其他納米體優(yōu)選地針對理想的靶標(其優(yōu)選地是治療靶標)，和/或有效于或適合于治療、預(yù)防和/或診斷目的其他納米體。關(guān)于包含一種或多種納米體的納米體和多價和多特異性多肽和它們的制備的一般性描述，參考埃博靈克斯股份有限公司(AblynxN.V.)的同時待審申請，諸如WO06/040153和共同待審國際申請PCT/EP2006/004678(以及這些申請中引用的其他現(xiàn)有技術(shù))，和還參考例如Conrath等，生物學(xué)化學(xué)雜志(J.BiolChem,),巻276,10.7346-7350，2001;Muyldermans,分子生物技術(shù)綜述(ReviewsinMolecularBiotechnology)74(2001),277-302;以及參考例如WO96/34103和WO99/23221。埃博靈克斯股份有限公司(AblynxN.V.)的同時待審申請中存在關(guān)于本發(fā)明一些特殊多特異性和/或多價多肽的一些其他實例。具體地，關(guān)于為了增長半衰期包括至少一種針對血清蛋白的納米體的多價和多特異性構(gòu)建體、編碼所述構(gòu)建體的核酸、包括所述構(gòu)建體的組合物、上述各項的制備、和上述各項的用途的一般性描述，參考埃博靈克斯股份有限公司(Ablynx.N.V.)的國際申請WO04/041S65。通?？梢耘c其中所述半衰期增長的納米體類似地使用本文中所述的氮基酸序列。在一個非-限制性實施方案中，所述其他納米體針對單體和或多聚體(即三體)形式的腫瘤壞死因子a(TNF-a)。所述納米體構(gòu)建體的一些實例可以存在于埃博靈克斯股份有限公司(Ablynx.N.V.)的同時待審國際申請中，其名稱為"改良的針對腫瘤壞死因子-a的納米體(/m;^m^^]Vano6o(iz'es7"應(yīng)or臉cra^Fa"or-a一a)"，其與本申請具有相同的優(yōu)先權(quán)和相同的國際遞交日。本發(fā)明還涉及編碼本文中所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白和構(gòu)建體的核苷酸序列或核酸。本發(fā)明還包括遺傳構(gòu)建體，所述遺傳構(gòu)建體包括上述核苷酸序列或核酸，和一種或多種本身已知的用于遺傳構(gòu)建體的元件。所述遺傳構(gòu)建體可以處于質(zhì)?；蜉d體的形式。而且，所述構(gòu)建體通常可以是如埃博靈克斯股份有限公司(Ablynx.N.V.)的同時待審專利申請和本文中提到的現(xiàn)有技術(shù)，以及其中引用的其他現(xiàn)有技術(shù)中所述的。本發(fā)明還涉及包含所述核苷酸序列或核酸，和/或表達(或能夠表達)本文中所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白和構(gòu)建體的宿主或宿主細胞。而且，所述宿主細胞通?？梢允侨绨２╈`克斯股份有限公司(Ablynx.N.V.)的同時待審專利申請和本文中提到的現(xiàn)有技術(shù)，以及其中引用的其他現(xiàn)有技術(shù)中所述的。本發(fā)明還涉及用于制備本文中所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體的方法，所述方法包括在這樣的條件下培養(yǎng)或維持本文中所述的宿主細胞，在所述條件下，所述宿主細胞產(chǎn)生或表達如本文中所述的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體，且任選地，還包括分離由此產(chǎn)生的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體。而且，通?？梢匀绨２╈`克斯股份有限公司(Ablynx.N.V.)的同時待審專利申請和本文中提到的現(xiàn)有技術(shù)，以及其中引用的其他現(xiàn)有技術(shù)中所述地執(zhí)行所述方法。本發(fā)明還涉及藥物組合物，其包括至少一種如本文中所述的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體，和任選地，至少一種藥用載體、稀釋劑或賦形劑。所述制劑、載體、賦形劑和稀釋劑通?？梢允侨绨２╈`克斯股份有限公司(Ablynx.N.V.)的同時待審專利申請和本文中提到的現(xiàn)有技術(shù)，以及其中引用的其他現(xiàn)有技術(shù)中所述的。然而，由于本文中所述的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體具有增長的半衰期，所以優(yōu)選地將它們施用到循環(huán)中。同樣地，可以以任何容許所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體進入循環(huán)的合適方式，諸如靜脈內(nèi)、通過注射或灌輸，或以任何其他容許所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體進入循環(huán)的合適方式(包括口服施藥、經(jīng)由皮膚施藥、透粘膜施藥、鼻內(nèi)施藥、通過肺的施藥等)施用它們。而且，還例如由WO04/041862的教導(dǎo)，技術(shù)人員應(yīng)該清楚合適的施藥方法和途徑。因此，在另一方面。本發(fā)明涉及用于預(yù)防和/或治療至少一種能夠通過使用如本文中所述的化合物、融合蛋白或構(gòu)建體預(yù)防或治療的疾病或病癥的方法，所述方法包括向有此需要的受試者施用藥物活性量的本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白和構(gòu)建體，和/或包括所述本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白和構(gòu)建體的藥物組合物。能夠通過使用如本文中所述的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體預(yù)防或治療的疾病和病癥通常與能夠通過使用本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體中存在的治療部分預(yù)防或治療的疾病和病癥相同。待治療的受試者可以是任何靈長類動物，但是具體地是人。如技術(shù)人員應(yīng)該清楚地，待治療的受試者應(yīng)該具體地是患有或處于本文中提及疾病和病癥危險的人。更具體地，本發(fā)明涉及治療方法，其中施用本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體的頻率是本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體針對的血清蛋白天然半衰期的至少50%，優(yōu)選地至少60%,優(yōu)選地至少70%,更優(yōu)選地至少80%和最優(yōu)選地至少90%。屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的對靈長類動物特殊施藥頻率是本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體針對的血清蛋白天然半衰期的至少50%，55%，60%,65%,70%，75%,80%,85%,90%,95%或至少100%。換言之，屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的特殊施藥頻率是每4,5,6,7，8,9,10,11，12，13,14，15,16,17,18,或19天。不限制地，上文提到的施藥頻率特別適合于維持利用所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體治療的受試者血清中的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體理想水平，任選地，在施用意欲建立所述理想血清水平的一或多(起始)劑量后。如技術(shù)人員應(yīng)該清楚地，所述理想的血清水平可以特別依賴于使用的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體和/或待治療的疾病。臨床醫(yī)生或醫(yī)師應(yīng)該能夠選擇理想的血清水平，和選擇向待治療受試者施用的劑量和/或量，從而在以本文中提到的頻率施用本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體時，在所述受試者中獲得和/或維持理想的血清水平。在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語"預(yù)防和/或治療"不僅包括預(yù)防和/或治療疾病，通常還包括預(yù)防疾病的發(fā)作，減緩或逆轉(zhuǎn)疾病進程，預(yù)防或減緩一種或多種與疾病相關(guān)癥狀的發(fā)作，減輕和/或緩解一種或多種與疾病相關(guān)的癥狀，減少疾病和/或其任意相關(guān)癥狀的嚴重性和/或持續(xù)時間，和/或預(yù)防疾病和/或其任意相關(guān)癥狀嚴重性的增加，預(yù)防、降低或逆轉(zhuǎn)由疾病導(dǎo)致的任何生理學(xué)損傷，和通常任何有益于受治療患者的藥理學(xué)作用。待治療的受試者可以是任何靈長類動物，但是具體地是人。如技術(shù)人員應(yīng)該清楚地，待治療的受試者應(yīng)該具體地是患有或處于能通過本文中提及的治療部分治療的疾病和病癥危險的人。在另一個實施方案中，本發(fā)明涉及用于免疫治療，和具體地用于被動免疫治療的方法，所述方法包括向患有或處于本文中提及疾病和病癥危險的受試者施用藥物活性量的本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體，和/或包括所述本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體的藥物組合物。本發(fā)明還涉及用于延長或增長治療劑血清半衰期的方法，在這些方法中，治療劑與任意本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體，包括多價和多特異性納米體相接觸，這樣該治療劑與所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體結(jié)合或另外締合。所述治療劑和所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體可以以技術(shù)人員己知的不同方式結(jié)合或另外締合。在生物治療劑，諸如肽或多肽的情形中，該治療劑可以按照本領(lǐng)域中已知的方法與所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體融合。所述治療劑可以直接融合，或利用間隔區(qū)或連接體分子或序列融合。在優(yōu)選的實施方案中，所述間隔區(qū)和連接體由氨基酸組成，但是可以如本領(lǐng)域中熟知的方式使用其他非-氨基酸間隔區(qū)或連接體。因此，接觸所述治療劑的步驟可以包括通過將所述肽或多肽和本發(fā)明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體，包括多價和多特異性納米體連接，而制備融合蛋白。所述治療劑還可以與本發(fā)明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體直接結(jié)合。作為一個實例，多價和多特異性納米體可以包括至少一種結(jié)合所述血清蛋白(諸如血清白蛋白)的可變結(jié)構(gòu)域和至少一種結(jié)合所述治療劑的可變結(jié)構(gòu)域。用于延長或增長治療劑血清半衰期的方法還可以包括在所述治療劑與本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體結(jié)合或另外締合后，向靈長類動物施用所述治療劑。在所述方法中，如本文中別處所述地，以顯著量延長或增長所述治療劑的半衰期。按照適合于預(yù)防和/或治療待預(yù)防或治療的疾病或病癥的治療方案，施用所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體和/或包括所述氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體的組合物。臨床醫(yī)生通常應(yīng)該能夠根據(jù)因素，諸如待預(yù)防或治療的疾病或病癥，待治療疾病的嚴重性和/或其癥狀的嚴重性，待使用的本發(fā)明特殊納米體或多肽，待使用的特殊施藥途徑和藥物制劑或組合物，患者的年齡、性別、體重、飲食、一般狀態(tài)，和臨床醫(yī)生熟知的類似因素，確定合適的治療方案。通常，所述治療方案應(yīng)該包括以一種或多種藥物有效量或劑量，施用一種或多種本發(fā)明的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體，或一種或多種包括所述本發(fā)明氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體的組合物。臨床醫(yī)生也可以根據(jù)以上引用的因素確定具體的待施用量或劑量。通常，為了預(yù)防和/或治療本文中提到的疾病和病癥，并根據(jù)待治療的特殊疾病或病癥，待使用的氨基酸序列、化合物、融合蛋白或構(gòu)建體的功效和/或半衰期，使用的特殊施藥途徑和特殊藥物劑型或組合物，通常應(yīng)該以這樣的量，在一天中連續(xù)地(例如通過灌輸)作為單次每日劑量或作為多次分開的劑量施用本發(fā)明的納米體和多肽，所述量是1克_0.01微克/kg體重/天，優(yōu)選地0.1克-0.1微克/kg體重/天，諸如約1,10,100或1000微克/kg體重/天。臨床醫(yī)生通常能夠根據(jù)本文中提到的因素確定合適的每日劑量。還應(yīng)該清楚地是，在特殊情形中，臨床醫(yī)生可以選擇偏離這些量，例如，基于以上引用的因素和他的專業(yè)判斷。通常，可以由對類似常規(guī)抗體或抗體片段通常施用的量獲得一些關(guān)于待施用量的指導(dǎo)，所述類似常規(guī)抗體或抗體片段針對基本通過相同途徑施用的相同靶標，然而考慮親和性/親和力、功效、生物分布、半衰期和技術(shù)人員熟知的類似因素中的差別。通常，在以上方法中，應(yīng)該使用本發(fā)明的單納米體或多肽。然而，組合使用兩種或更多本發(fā)明的納米體和/或多肽屬于本發(fā)明的范圍。本發(fā)明的納米體和多肽還可以與一種或多種其他藥物活性化合物或成分(principles)組合使用，即作為組合的治療方案，其可以或可以不引起協(xié)同功效。而且，臨床醫(yī)生應(yīng)該能夠基于以上引用的因素和他的專業(yè)判斷，選擇所述其他化合物或原理，以及合適的組合治療方案。具體地，本發(fā)明的納米體和多肽可以與其他藥物活性化合物或成分組合使用，所述藥物活性化合物或成分用于或能夠用于預(yù)防和/或治療能夠用本發(fā)明融合蛋白或構(gòu)建體預(yù)防或治療的疾病和病癥，且作為其結(jié)果，可以或可以不獲得協(xié)同功效。如臨床醫(yī)生應(yīng)該清楚地，可以以關(guān)于有關(guān)疾病或病癥本身已知的任何方式，確定和/或觀注按照本發(fā)明使用的治療方案的效力。臨床醫(yī)生還應(yīng)該能夠，在適當(dāng)和或個案基礎(chǔ)上，改變或修改具體的治療方案，從而獲得理想的治療效果，以避免、限制或減少不希望的副作用，和/或在一方面獲得理想治療效果和另一方面避免、限制或減少不希望副作用之間獲得適當(dāng)?shù)钠胶?。通常，?yīng)該遵從所述治療方案，直到獲得理想的治療效果和/或為了維持所述理想的治療效果長久。而且，這可以由臨床醫(yī)生確定。使用的術(shù)語和表述作為描述而非限制性術(shù)語使用，且不意欲使用所述術(shù)語和表述排除所示和所述特征及其部分的任何等價物，承認多種修改可能在本發(fā)明的范圍內(nèi)。引入本文中所述的全部參考文獻作為參考，具體地對于上文中提到的教導(dǎo)。實驗部分實施例l:識別血清白蛋白特異性納米體獸醫(yī)系道德委員會(根特大學(xué)，比利時)批準后，按照標準方案，以每周一次的時間間隔，用6次肌肉內(nèi)注射人血清白蛋白，以及小鼠血清白蛋白、食蟹猴血清白蛋白和狒狒血清白蛋白的混合物，交替免疫2只美洲鴕(llamas)(117，118)。文庫構(gòu)建當(dāng)最后一次抗原注射后4天在美洲駝中誘導(dǎo)了適當(dāng)?shù)拿庖唔憫?yīng)時，收集150ml血液樣品，并按照供應(yīng)商的指示，通過在Ficoll-PaqueTM的密度梯度離心純化外周血淋巴細胞(PBLs)。其次，從這些細胞中提取總RNA，并將其用作RT-PCR的起始材料，從而擴增編碼基因片段的納米體。將這些片段克隆到噬菌粒載體pAX50中。按照標準方法(見，例如在本文中引入的由申請人提交的現(xiàn)有技術(shù)和申請)制備噬菌體并將其保存在4°C，以便將來使用。選擇透揮屏,蘊成薪分"蕕淳與虛獰A蛋力游翁合在第一次選擇中，在室溫(RT)下，以100昭/ml，將人血清白蛋白(西格瑪(Sigma)A-8763)包被在Maxisorp96-孔板(Nunc,Wiesbaden,德國)上過夜。在RT下，用處于PBS中的4%Marvel封閉板2小時。用PBST清洗3次后，將噬菌體加入到4%Marvel/PBS中，并在RT下培養(yǎng)1小時。充分清洗后，用0.1M三乙醇胺(TEA)洗脫，并用1MTris-HClpH7.5中和結(jié)合的噬菌體。廢遂謝術(shù)沐與力弱游;^教效齢1.通過ELISA篩選納米體的pH-獨立性結(jié)合為了針對它們與白蛋白的pH-不靈敏或有條件結(jié)合而篩選納米體，用兩種代表性的條件，pH5.8和pH7.3進行結(jié)合ELISA，并確定相對結(jié)合強度。用100pl處于碳酸氫鹽緩沖液(50mM,pH9.6)中的1|ig/ml人血清白蛋白溶液，在4'C，包被Maxisorb微量滴定板(Nunc,商品號430341)過夜。包被后，用含有0.05%吐溫20的PBS(PBST)清洗該板3次，并在室溫(RT)下，用含有2%Marvel的PBS(PBSM)封閉2小時。封閉步驟后，用PBSTpH5.8清洗包被的板2次，將在PBSMpH5.8中稀釋10倍的每種周質(zhì)樣品等分試樣(100^il)轉(zhuǎn)移到包被的板中，并容許在RT下結(jié)合1小時。樣品培養(yǎng)后，用PBST清洗該板5次，并在RT下，與100pl處于2%PBSM中的1:1000小鼠抗-myc抗體稀釋液一起培養(yǎng)1小時。在RT下1小時后，用PBST清洗該板5次，并與100pi與辣根過氧化物酶綴合的山羊抗-小鼠抗體的1:1000稀釋液一起培養(yǎng)。1小時后，用PBST清洗板5次，并與100慢TMB(Pierce，商品號34024)—起培養(yǎng)。20分鐘后，利用100plH2SO4終止反應(yīng)。在450nm處測量每個孔的吸光率。2.通過表面等離振子共振(BIAcore)篩選動力學(xué)off-速率。對于活化利用NHS/EDC和對于鈍化利用乙醇胺(Biacore胺偶聯(lián)試劑盒)，將人血清白蛋白通過胺偶聯(lián)固定在CM5傳感器芯片表面上。固定大約IOOORU人血清白蛋白。實驗在25。C進行。針對納米體與白蛋白的pH依賴性結(jié)合所使用的緩沖液(Biacore)如下10mM檸檬酸鈉(Na3C6H507)+10mM磷酸鈉(Na2HP04)+10mM乙酸鈉(CH3C00Na)+115mMNaCl。通過加入HC1或NaOH(根據(jù)測量的混合物pH)使該混合物變?yōu)閜H7、pH6禾卩pH5。在pH7、pH6和pH5的運行緩沖液中稀釋周質(zhì)提取物。以45^1/分鐘的流速，向活化的和參考表面注射樣品1分鐘。用甘氨酸-HClpH1.5+0.1。/。P20的3s脈沖再生那些表面。利用BiacoreT100評估軟件實現(xiàn)評估。辦鵬#組朋鄉(xiāng)沐還生成由C-末端抗-HSA納米體(ALB8)、9個氨基酸的Gly/Ser連接體和N-末端抗-IL6R納米體組成的雙特異性納米體。該構(gòu)建體還稱為IL6R202。該構(gòu)建體在大腸桿菌(E.coli)中表達為c-myc、His6-標記的蛋白質(zhì)，并隨后通過固定金屬親合層析(IMAC)和大小排阻層析(SEC)從培養(yǎng)基中對其進行純化。在所有選擇中，觀察到富集。將來自每次選擇的產(chǎn)物作為集合重新克隆到表達載體pAX51中。挑取菌落，并在96深-孔板(lml容積)中生長，并通過加入IPTG誘導(dǎo)納米體表達。按照標準方法(見，例如在本文中引入的申請人提交的現(xiàn)有技術(shù)和申請)制備周質(zhì)提取物(體積~80^ll)。通過ELISA進行文庫評估通過在固相包被的人血清白蛋白上進行ELISA，針對白蛋白特異性，篩選各自納米體的周質(zhì)提取物。利用生物素化的小鼠抗-his抗體(SerotecMCA1396B)進行對與固定的人血清白蛋白結(jié)合的納米體片段的檢測，所述生物素化的小鼠抗-his抗體是通過鏈霉抗生物素-HRP(DakoCytomation弁P0397)檢測的。通過加入TMB基質(zhì)溶液(Pierce34021)形成信號，并在450nm波長處檢測信號。在第1輪淘選(panning)后，可以容易地獲得關(guān)于陽性克隆的高擊中率。圖1說明典型的ELISA結(jié)果。實施例2:利用表面等離振子共振(BIAcore)確定鑒定的納米體與人血清白蛋白的pH依賴性結(jié)合。對于活化利用NHS/EDC和對于鈍化利用乙醇胺(Biacore胺偶聯(lián)試劑盒)，將人血清白蛋白通過胺偶聯(lián)固定在CM5傳感器芯片表面上。分別固定大約1000RU食蟹猴和人血清白蛋白。實驗在25'C進行。針對納米體與白蛋白的pH依賴性結(jié)合所使用的緩沖液(Biacore)如下10mM檸檬酸鈉(Na3C6Hs07)+10mM磷酸鈉(Na2HP04)+10mM乙酸鈉(CH3COONa)+115mMNaCl。通過加入HC1或NaOH(根據(jù)測量的混合物pH)使該化合物變?yōu)閜H7、pH6和pH5。在pH7、pH6和pH5的運行緩沖液中稀釋標準緩沖液HBS-EP+周質(zhì)提取物或純化的納米體。以45^1/分鐘的流速，向活化的和參考表面注射樣品1分鐘。用甘氨酸-HClpH1.5+0.1%P20的3s脈沖再生那些表面。利用BiacoreT100評估軟件實現(xiàn)評估。表1中記錄了不同納米體在pH7和pH5條件下的off速率。大多數(shù)納米體(4A2，4A6，4B5,4B6，4B8，4C3，4C4,4C5,4C8,4C9,4D3，4D4,4D7和4D10)在pH5具有比在pH7更快的off速率。納米體4A9在pH5具有比在pH7更慢的off速率。對于其他納米體，包括IL6R202,Alb-8，4C11，4B1,4B10和4D5，在不同pH條件下與抗原的結(jié)合不變。圖2a和2B中顯示代表性克隆的傳感圖(sensorgram)。實施例2a:與白蛋白結(jié)合的納米體ALB8與針對治療靶標IL6R的納米體(IL6R202)的融合不影響其與人或食蟹猴血清白蛋白的PH獨立性結(jié)合。通過表面等離振子共振(BIAcore)評估IL6R202的pH-不靈敏結(jié)合特性。對于活化利用NHS/EDC和對于鈍化利用乙醇胺(Biacore胺偶聯(lián)試劑盒)，將人和食蟹猴血清白蛋白通過胺偶聯(lián)固定在CM5傳感器芯片表面上。分別固定大約1000RU食蟹猴和人血清白蛋白。實驗在25。C進行。針對納米體與白蛋白的pH依賴性結(jié)合所使用的緩沖液(Biacore)如下10mM檸檬酸鈉(Na3C6Hs07)+lOmM磷酸鈉(Na2HP04)+10mM乙酸鈉(CH3COONa)+115mMNaCl。通過加入HCl或NaOH(根據(jù)測量的混合物pH)使該化合物變?yōu)閜H7、pH6和pH5。在pH7、pH6和pH5的運行緩沖液中稀釋周質(zhì)提取物或純化的納米體。以45^1/分鐘的流速，向活化的和參考表面注射樣品1分鐘。用甘氨酸-HClpH1.5+0.1°/。P20的3s脈沖再生那些表面。利用BiacoreT100評估軟件實現(xiàn)評估。下文顯示IL6R202的結(jié)合特征。當(dāng)將ALB8引入到雙特異性納米體形式IL6R202中時，pH-獨立性結(jié)合特征與其作為單價納米體的pH-獨立性結(jié)合特征相比，沒有區(qū)別。而且，所述雙特異性構(gòu)建體中的ALB8顯示與食蟹猴血清白蛋白的交叉-反應(yīng)性，并具有類似的結(jié)合特征。ALB8與人血清白蛋白的結(jié)合動力學(xué).<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>IL6R202與人和食蟹猴血清白蛋白的結(jié)合動力學(xué)<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>實施例3:食蟹猴中的藥物動力學(xué)特征利用人源化的抗-IL6R構(gòu)件和人源化的抗-血清白蛋白構(gòu)件(人源化的抗-血清白蛋白構(gòu)件-Alb-8)，將納米體(納米體稱為IL6R202)構(gòu)建到二價構(gòu)建體中。使用9-氨基酸GlySer連接體來連接不同的構(gòu)件。將該構(gòu)建體表達在大腸桿菌中，并利用ProtA進行純化，隨后進行大小排阻層析(SEC)。在食蟹猴中進行關(guān)于IL6R202的藥物動力學(xué)研究(具有不依賴于pH的k-off速率——見上)。通過大丸劑(bolus)注射(l.Oml/kg,大約30秒)，將IL6R202靜脈內(nèi)施用到左臂或右臂的頭靜脈中，以獲得2.0mg/kg的劑量。表2總結(jié)關(guān)于所有猴的劑量方案。<table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>如下述確定血漿樣品中的IL6R202濃度用100^處于碳酸氫鹽緩沖液(50mM,pH9.6)中的5pg/ml12B2-GS9-12B2(B2存1302nr4.3.9)溶液，在4。C，包被Maxisorb微量滴定板(Nunc，商品號430341)過夜。包被后，用含有0.1%吐溫20的PBS(PBST)清洗該板3次，并在室溫(RT)下，用含有P/。酪蛋白的PBS(250pl/孔)封閉2小時。在單獨的未包被板(Nunc，商品號249944)中，以PBS稀釋血漿樣品，和納米體-標準物(摻加到100%匯集的空白食蟹猴血漿中)的連續(xù)稀釋物，從而在由10%匯集的食蟹猴血漿組成的最終樣品基質(zhì)中獲得處于PBS中的理想濃度/稀釋度。在RT下，在未包被板中培養(yǎng)所有預(yù)先-稀釋物30分鐘。封閉步驟后，(用含有0.1。/。吐溫20的PBS)清洗包被的板3次，并將每種樣品稀釋物的等分試樣(100)il)轉(zhuǎn)移到包被的板中，并容許在RT下結(jié)合1小時。樣品培養(yǎng)后，(用含有0.1。/。吐溫20的PBS)清洗該板3次，并在RT下，與100|il處于PBS中的100ng/mlsIL6R溶液(Peprotech,商品號20006R)—起培養(yǎng)1小時。在RT下1小時后，(用含有0.1%吐溫20的PBS)清洗該板3次，并與100pl處于含有1。/。酪蛋白(R&D系統(tǒng),商品號BAF227)的PBS中的250ng/ml生物素化多克隆抗-IL6R抗體溶液一起培養(yǎng)。培養(yǎng)30分鐘(RT)后，(用含有0.P/。吐溫20的PBS)清洗板3次，并與100|il與辣根過氧化物酶綴合的鏈霉抗生物素(DaktoCytomation，商品號P0397)的1/5000稀釋液一起培養(yǎng)30分鐘(RT)。30分鐘后，(用含有0.1%吐溫20的PBS)清洗板3次，并與100pl慢TMB(Pierce,商品號34024)—起培養(yǎng)。20分鐘后，利用100HC1(1N)終止反應(yīng)。在450nm處測量每個孔的吸光率(TecanSunrise分光光度計)，并針對620nm處的吸光率對其進行校正。該測定測量游離的納米體以及與sIL6R和/或食蟹猴血清白蛋白結(jié)合的納米體?；诰哂嘘P(guān)于各種納米體可變斜率的S形標準曲線，確定每份血漿樣品中的濃度。IL6R202的LLOQ和ULOQ是7.00ng/ml。在2個獨立的測定中分析每份單獨的血漿樣品，并計算平均血漿濃度，用于藥物動力學(xué)數(shù)據(jù)分析。表3中列出以2.00mg/kg向雄性和雌性食蟹猴單次靜脈內(nèi)施藥后，關(guān)于IL6R202的基本藥物動力學(xué)參數(shù)。用二-區(qū)室建模，從中央?yún)^(qū)室消除，計算所有參數(shù)。確定的IL6R202半衰期是6.8+/-0.226天，其與在食蟹猴中食蟹猴血清白蛋白的半衰期非常類似。表3:以2.00mg/kg向雄性和雌性食蟹猴單次靜脈內(nèi)施藥后，關(guān)于IL6R202的基本藥物動力學(xué)參數(shù)1。猴3m猴4f平均值SDCV(%)C(0)Og/ml)57.656.557.1±0.7781.36Vss(mL/kg)65.160.662.9±3.185.06Vz(mL/kg)70.064.667.3±3.825.67Vc(mL/kg)34.735.435.1±0.4951,41Vt(mL/kg)30.425.227.8±3.6813.2CL(mL/天/kg)6.976.746.860.1632.37CLd(mL/天/kg)22.119.120.62.1210.3t'/2(天)6.966.646.800.2263.33MRT(天)9.358.999.170.2552.78AUCinf(嗎爭天/ml)2872972927.072.42AUCinf/D(kg,天/ml)0.1440.1480.1460.002831.94所有參數(shù)利用二-區(qū)室建模計算表1.記錄了在pH7和pH5下，不同納米體⑧的off速率(由Biacore確定)<table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>權(quán)利要求1.氨基酸序列，所述氨基酸序列以處于生理pH值時基本不依賴于pH的方式與血清蛋白結(jié)合。2.按照權(quán)利要求1的氨基酸序列，所述氨基酸序列在動物或人體細胞中存在的pH值時，以這樣的締合常數(shù)(KA)與血清蛋白結(jié)合，所述締合常數(shù)(KA)是所述氨基酸序列在處于所述細胞外存在的pH值時與相同血清蛋白結(jié)合的締合常數(shù)(KA)的至少5。/。，諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%，諸如甚至更優(yōu)選地至少70%,諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。3.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，其中所述細胞參與血清蛋白的再循環(huán)。4.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，其中所述細胞包含或表達FcRn受體。5.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，所述氨基酸序列在動物或人體細胞的(亞)細胞區(qū)室或小泡內(nèi)部存在的pH值時，以這樣的締合常數(shù)(Ka)與血清蛋白結(jié)合，所述締合常數(shù)(Ka)是所述氨基酸序列在處于所述細胞所在的人或動物體循環(huán)中，諸如在血液(流)或在淋巴系統(tǒng)中存在pH值時與相同血清蛋白結(jié)合的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%，更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。6.按照權(quán)利要求的氨基酸序列，其中所述細胞參與血清蛋白的再循環(huán)。7.按照權(quán)利要求6的氨基酸序列，其中所述細胞的所述(亞)細胞區(qū)室或小泡參與血清蛋白的再循環(huán)。8.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，其中所述細胞包含或表達FcRn受體。9.按照權(quán)利要求l的氨基酸序列，所述氨基酸序列在至少一種低于6.7的生理pH值下，以這樣的締合常數(shù)(KA)結(jié)合血清蛋白，所述這樣的締合常數(shù)(KA)是所述氨基酸序列在至少一種高于7.0的生理pH值下與相同血清蛋白結(jié)合的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%，諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。10.按照權(quán)利要求l的氨基酸序列，所述氨基酸序列在6.5-5.5范圍內(nèi)的pH值(諸如6.5，6.4,6.3,6.2,6.1,6.0,5.9,5.8,5.7或5.6)下，以這樣的締合常數(shù)(KA)結(jié)合血清蛋白，所述這樣的締合常數(shù)(KA)是所述氨基酸序列在7.2-7.4范圍內(nèi)的pH值(諸如7.2，7.3或7.4)下與相同血清蛋白結(jié)合的締合常數(shù)(KA)的至少5%,諸如至少10%,優(yōu)選地至少25%,更優(yōu)選地至少50%,甚至更優(yōu)選地至少60%,諸如甚至更優(yōu)選地至少70%，諸如至少80%或90%或更高(或甚至超過100%,諸如超過110%,超過120%或甚至130%或更高)。11.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，所述氨基酸序列結(jié)合這樣的血清蛋白，所述血清蛋白在天然存在所述血清蛋白的人或動物體內(nèi)進行再循環(huán)或再循環(huán)機制。12.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，所述氨基酸序列結(jié)合人血清蛋白。13.按照權(quán)利要求12的氨基酸序列，所述氨基酸序列與來自至少另一種哺乳動物物種，諸如小鼠、大鼠、兔、狗或靈長類動物的相應(yīng)(即，直向同源)血清蛋白交叉-反應(yīng)。14.按照權(quán)利要求13的氨基酸序列，所述氨基酸序列與來自至少另一種靈長類動物物種的相應(yīng)(即，直向同源)血清蛋白交叉-反應(yīng)，所述靈長類動物物種來自獼猴屬(MacaCfl)(諸如，和具體地，食蟹猴(食蟹猴(Afacaca/oscz'cw/aWs))禾口/或恒河猴(恒河猴(Macacaww/afto)))禾口狒狒(豚尾狒狒(尸—o))。15.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，所述氨基酸序列以這樣的方式與所述血清蛋白結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)所述氨基酸序列與所述血清蛋白分子結(jié)合或另外締合時，不(顯著)縮短所述血清蛋白分子的半衰期。16.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，所述氨基酸序列結(jié)合能夠與FcRn結(jié)合的血清蛋白。17.按照權(quán)利要求15的氨基酸序列，所述氨基酸序列以這樣的方式與所述血清蛋白結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)所述氨基酸序列與所述血清蛋白分子結(jié)合或另外締合時，不(顯著)減少或抑制所述血清蛋白分子與FcRn的結(jié)合。18.按照權(quán)利要求16或17的氨基酸序列，所述氨基酸序列能夠結(jié)合所述血清蛋白上不參與所述血清蛋白和FcRn結(jié)合的氨基酸殘基。19.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，所述氨基酸序列結(jié)合選自由下列各項組成的組的血清蛋白血清白蛋白、免疫球蛋白諸如IgG或運鐵蛋白。20.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，所述氨基酸序列結(jié)合血清白蛋白。21.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，所述氨基酸序列以這樣的方式與至少一種靈長類動物物種的血清蛋白結(jié)合或另外締合，所述方式是當(dāng)所述氨基酸序列與所述靈長類動物中的所述血清蛋白結(jié)合或另外締合時，所述氨基酸序列表現(xiàn)出的血清半衰期是所述靈長類動物中所述血清蛋白天然血清半衰期的至少50%。22.按照權(quán)利要求21的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表現(xiàn)出的血清半衰期是所述靈長類動物中所述血清蛋白天然血清半衰期的至少60%。23.按照權(quán)利要求21或22的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表現(xiàn)出的血清半衰期是所述靈長類動物中所述血清蛋白天然血清半衰期的至少80%。24.按照權(quán)利要求21-23中任一項的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表現(xiàn)出的血清半衰期是所述靈長類動物中所述血清蛋白天然血清半衰期的至少90%。25.按照權(quán)利要求21-24中任一項的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表現(xiàn)出的血清半衰期是至少4天。26.按照權(quán)利要求25的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表現(xiàn)出的血清半衰期是至少7天。27.按照權(quán)利要求25或26的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列表現(xiàn)出的血清半衰期是至少9天。28.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，所述氨基酸序列是免疫球蛋白序列或其片段。29.按照權(quán)利要求28的氨基酸序列，所述氨基酸序列是免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列或其片段。30.按照權(quán)利要求28的氨基酸序列，所述氨基酸序列是VH-、VL-或VHH-序列或其片段。31.按照權(quán)利要求28-30中任一項的氨基酸序列，其中所述免疫球蛋白序列是結(jié)構(gòu)域抗體、"dAb"、單結(jié)構(gòu)域抗體或納米體，或其中任一項的片段。32.按照以上權(quán)利要求中任一項的氨基酸序列，所述氨基酸序列是完全人的、人源化的、駱駝的、駱駝化的人的序列或人源化的駱駝的序列。33.包括權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列的化合物。34.按照權(quán)利要求33的化合物，其中所述化合物還包括至少一種治療部分。35.按照權(quán)利要求34的化合物，其中所述治療部分選自由小分子、多核苷酸、多肽或肽組成的組中的至少一種。36.按照權(quán)利要求33-35中任一項的化合物，所述化合物是融合蛋白或構(gòu)建體。37.按照權(quán)利要求36的化合物，其中在所述融合蛋白或構(gòu)建體中，按照權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列與至少一種治療部分直接相連，或通過連接體或間隔區(qū)與所述至少一種治療部分相連，或引入至少一種治療部分。38.按照權(quán)利要求33-37中任一項的化合物，其中所述治療部分包括免疫球蛋白序列或其片段。39.按照權(quán)利要求38的化合物，其中所述治療部分包括(單)結(jié)構(gòu)域抗體或納米體。40.多價和多特異性納米體構(gòu)建體，其包括至少一種作為納米體的按照權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列，和至少一種其他納米體。41.按照權(quán)利要求40的多價和多特異性納米體構(gòu)建體，其中所述作為納米體的按照權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列與至少一種其他納米體直接相連，或通過連接體或間隔區(qū)與至少一種其他納米體相連。42.按照權(quán)利要求41的多價和多特異性納米體構(gòu)建體，其中所述作為納米體的按照權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列通過連接體或間隔區(qū)與至少一種其他納米體相連，且其中所述連接體是氨基酸序列。43.核苷酸序列或核酸，所述核苷酸序列或核酸編碼按照權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列、或按照權(quán)利要求33-35中任一項的化合物的氨基酸序列、或權(quán)利要求40-42中任一項的多價和多特異性納米體。44.宿主或宿主細胞，所述宿主或宿主細胞包含按照權(quán)利要求43的核苷酸序列或核酸，和/或表達(或能夠表達)按照權(quán)利要求1-21中任一項的氨基酸序列、或按照權(quán)利要求22-28中任一項的化合物的氨基酸序列、或權(quán)利要求30-32中任一項的多價和多特異性納米體。45.用于制備按照權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列、或按照權(quán)利要求33-39中任一項的化合物的氨基酸序列、或權(quán)利要求40-42中任一項的多價和多特異性納米體的方法，所述方法包括在這樣的條件下培養(yǎng)或維持按照權(quán)利要求44的宿主細胞，在所述條件下，所述宿主細胞產(chǎn)生或表達按照權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列、或按照權(quán)利要求33-39中任一項的化合物的氨基酸序列、或權(quán)利要求40-42中任一項的多價和多特異性納米體，且任選地，還包括分離由此產(chǎn)生的按照權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列、或按照權(quán)利要求33-39中任一項的化合物的氨基酸序列、或權(quán)利要求40-42中任一項的多價和多特異性納米體。46.藥物組合物，其包括選自由下列各項組成的組中的一種或多種權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列、或權(quán)利要求33-39中任一項的化合物、或權(quán)利要求40-42中任一項的多價和多特異性納米體，其中所述藥物組合物適合于對靈長類動物，以在所述靈長類動物中所述血清蛋白天然半衰期的至少50%的時間間隔施用。47.按照權(quán)利要求46的藥物組合物，其還包括至少一種藥用載體、稀釋劑或賦形劑。48.按照權(quán)利要求1-32中任一項的氨基酸序列、按照權(quán)利要求33-39中任一項的化合物、或權(quán)利要求40-42中任一項的多價和多特異性納米體制造施用于靈長類動物的藥物的用途，其中以在所述靈長類動物中所述血清蛋白天然半衰期的至少50%的時間間隔施用所述藥物。49.按照權(quán)利要求48的用途，其中所述靈長類動物是人。50.按照權(quán)利要求49的用途，其中以至少7天的時間間隔施用所述藥51.治療方法，其包括向需要所述治療方法的靈長類動物施用按照權(quán)利要求1-32中任一項的任何氨基酸序列、按照權(quán)利要求33-39中任一項的化合物或權(quán)利要求40-42中任一項的多價和多特異性納米體，其中所述施用以在所述靈長類動物中所述血清蛋白天然半衰期的至少50%的頻率進行。52.按照權(quán)利要求51的方法，其中所述靈長類動物是人。53.按照權(quán)利要求52的方法，其中以至少7天的時間間隔施用所述藥物。54.用于延長或增長治療劑的血清半衰期的方法，所述方法包括使所述治療劑與按照權(quán)利要求1-32中任一項的任意氨基酸序列、或按照權(quán)利要求33-39中任一項的化合物或權(quán)利要求40-52中任一項的多價和多特異性納米體相接觸，從而使所述治療劑與所述氨基酸序列、化合物、或多價和多特異性納米體結(jié)合或另外締合。55.權(quán)利要求45的方法，其中所述治療劑是生物治療劑。56.權(quán)利要求55的方法，其中所述生物治療劑是肽或多肽，且其中接觸所述治療劑的步驟包括通過使所述肽或多肽與所述氨基酸序列、化合物、或多價和多特異性納米體連接而制備融合蛋白。57.權(quán)利要求54-56中任一項的方法，其還包括在所述治療劑與所述氨基酸序列、化合物、或多價和多特異性納米體結(jié)合或另外締合后，向靈長類動物施用所述治療劑。58.權(quán)利要求57的方法，其中所述治療劑在靈長類動物中的血清半衰期是治療劑本身半衰期的至少1.5倍。59.權(quán)利要求57的方法，其中所述治療劑在靈長類動物中的血清半衰期與治療劑本身的半衰期相比，增長至少1小時。60.氨基酸序列，當(dāng)在pH5-8范圍內(nèi)測量時，所述氨基酸序列針對血清蛋白的koff速率在+/-70%范圍內(nèi)。61.權(quán)利要求60的氨基酸序列，其中所述針對血清蛋白的koff速率在+/-60%范圍內(nèi)。62.氨基酸序列，所述氨基酸序列在5.5-4.5范圍內(nèi)的pH值下針對血清蛋白具有這樣的koff速率，所述koff速率是在6.5-7.5范圍內(nèi)的pH下針對相同血清蛋白的koff速率的20-180%。63.氨基酸序列，所述氨基酸序列在5.5-4.5范圍內(nèi)的pH值下針對血清蛋白具有這樣的koff速率，所述koff速率是在6.5-7.5范圍內(nèi)的pH下針對相同血清蛋白koff速率的40-160%。64.權(quán)利要求60-63中任一項的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列是納米體。65.權(quán)利要求60-63中任一項的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列是dAbso66.權(quán)利要求60-65中任一項的氨基酸序列，其中所述氨基酸序列結(jié)合所述血清蛋白和至少一種蛋白質(zhì)靶標。67.權(quán)利要求60-65中任一項的氨基酸序列，其中所述血清蛋白是人血清白蛋白，且所述氨基酸序列結(jié)合所述人血清白蛋白和至少一種蛋白質(zhì)耙標。68.權(quán)利要求60-67中任一項的氨基酸序列，其中體內(nèi)半衰期是與其結(jié)合的血清蛋白體內(nèi)半衰期的70%或更長。69.權(quán)利要求60-68中任一項的氨基酸序列，其中體內(nèi)半衰期是與其結(jié)合的血清蛋白體內(nèi)半衰期的80%或更長。70.權(quán)利要求60-69中任一項的氨基酸序列，其中體內(nèi)半衰期是與其結(jié)合的血清蛋白體內(nèi)半衰期的90%或更長。全文摘要本發(fā)明涉及與血清蛋白諸如血清白蛋白結(jié)合的氨基酸序列；包括或基本由所述氨基酸序列組成的化合物、蛋白質(zhì)和多肽；編碼所述氨基酸序列、蛋白質(zhì)或多肽的核酸；包括所述氨基酸序列、蛋白質(zhì)和多肽的組合物，且特別是藥物組合物；和所述氨基酸序列、蛋白質(zhì)和多肽在pH5-8范圍內(nèi)基本獨立的用途。文檔編號C07K14/00GK101528767SQ200780037886公開日2009年9月9日申請日期2007年10月11日優(yōu)先權(quán)日2006年10月11日發(fā)明者亨德里克斯·雷內(nèi)瑞斯·雅各布斯·馬托伊斯·霍根博姆,伊格納茨·約瑟夫·伊莎貝拉·拉斯特斯申請人:埃博靈克斯股份有限公司