專利名稱：具有抗白血病活性的化合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有抗白血病活性的化合物及制備該種化合物得到的一種具有抗白血病活性的中間體，以及上述化合物和中間體的制備方法。

背景技術(shù)：
白血病是造血干/祖細(xì)胞惡性克隆增殖性疾病，已成為危害人類生命的十大惡性腫瘤之一。據(jù)最新估計(jì)，每年全球被報(bào)道的白血病有260,000例，死亡20,000例。我國(guó)白血病發(fā)病率為4.7/10萬(wàn)人，在惡性腫瘤中居第七位。其中急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)已成為兒童惡性腫瘤中最常見的一種(肖志堅(jiān)等.Cancer Research Clinic，2006，15(1)78-80)。目前在NCI定義的一線抗白血病藥物中絕大多數(shù)是細(xì)胞毒類藥物，這類藥物的作用機(jī)制決定了它不可避免的胃腸道刺激、肝腎毒性及骨髓抑制等毒副作用。另一種不是以干擾DNA合成為作用機(jī)制的非細(xì)胞毒性抗腫瘤藥物，如以細(xì)胞有絲分裂、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞凋亡和血管生成為靶點(diǎn)的抗腫瘤藥物表現(xiàn)出較強(qiáng)的選擇性。
酪氨酸蛋白激酶是體內(nèi)廣泛存在的一系列催化ATP的γ磷酸基轉(zhuǎn)移到特定的酪氨酸酚羥基上的蛋白質(zhì)，可分為受體型和非受體型兩種。酪氨酸蛋白激酶在細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路中占據(jù)可十分重要的地位，它調(diào)節(jié)著細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、增殖、凋亡、T細(xì)胞和B細(xì)胞的活化、對(duì)外界刺激的反應(yīng)等一系列生理生化過(guò)程。然而，蛋白酪氨酸激酶功能失調(diào)則會(huì)引發(fā)生物體內(nèi)一系列疾病(Konstantina等Drugs of the Future，2003，28(7)679-697)。已有資料顯示超過(guò)50％的原癌基因和癌基因產(chǎn)物都具有酪氨酸蛋白激酶的活性。它們的異常表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)紊亂，進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。例如，在正常細(xì)胞中，磷酸化的酪氨酸數(shù)量很少，僅占磷酸化氨基酸的0.5％，但是一系列證據(jù)表明，在帶有酪氨酸激酶活性的癌基因病毒轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中，蛋白質(zhì)上磷酸化的酪氨酸增加10倍。因此，以酪氨酸蛋白激酶為作用靶點(diǎn)設(shè)計(jì)合成新型抗腫瘤藥物已成為當(dāng)前抗腫瘤藥物研究開發(fā)的新方向。
非受體酪氨酸蛋白激酶JAKs(Janus tyrosine kinase)發(fā)現(xiàn)于1990年。JAKs通過(guò)與信號(hào)轉(zhuǎn)道及轉(zhuǎn)錄活化蛋白(Signal Transducers and Activators ofTranscription protein，STATs)相偶聯(lián)形成JAKs-STATs通路而起始細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)。JAKs-STATs通路負(fù)反饋調(diào)節(jié)的反常可引起造血性疾病、自免疫性疾病、炎性疾病及癌癥。研究發(fā)現(xiàn)，在癌細(xì)胞和轉(zhuǎn)染癌基因的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)JAKs-STATs的表達(dá)增高；在多種腫瘤細(xì)胞系及其轉(zhuǎn)染細(xì)胞系中，如腦瘤、乳腺癌、頭頸癌、前列腺癌、肝癌及肺癌等，STAT3持續(xù)活化；持續(xù)激活的STAT3或促進(jìn)細(xì)胞增殖，或阻礙細(xì)胞凋亡，從而使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化導(dǎo)致腫瘤(Alexander等，Current Biology，2002，12R288-R290.)。
與許多細(xì)胞中普遍存在的JAK1、JAK2和TYK2不同，JAK3具有明顯的特異性。它高濃度的存在于自然殺傷細(xì)胞(NK)、正常的胸腺細(xì)胞、血小板及肥大細(xì)胞，并且可在T、B細(xì)胞中誘導(dǎo)產(chǎn)生。JAK3特異性地與帶有γ鏈的受體如IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-13、IL-15及IL-21受體相偶聯(lián)，并可被它們活化。由于JAK3包含于T細(xì)胞的活化、增殖及功能維持過(guò)程中，所以選擇JAK3為靶點(diǎn)將有助于治療T細(xì)胞誘發(fā)的病理性疾病(Cetkovic-Cvrlje1等，CurrentPharmaceutical Design，2004，101767-1784)。
大量研究表明，JAK3在正常淋巴細(xì)胞的發(fā)育及功能維持方面起著重要的作用，JAK3的過(guò)度表達(dá)與急性淋巴細(xì)胞白血病有直接關(guān)系，如在兒童急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)大量表達(dá)的JAK3。有文獻(xiàn)報(bào)道，JAK3是人類白血病細(xì)胞中重要的靶點(diǎn)(Cetkovic-Cvrlje1等，Current Pharmaceutical Design，2004，101767-1784；Cetkovic-Cvrlje1等Arch Immunol Ther Exp，2004，5269-82)。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種以JAK3為靶點(diǎn)的抗白血病化合物。
本發(fā)明的另一目的是提供上述化合物的制備方法。
本發(fā)明還一目的是提供制備上述以JAK3為靶點(diǎn)的抗白血病化合物的具有抗白血病活性的中間體。
本發(fā)明的又一個(gè)目的是提供上述中間體化合物的制備方法。
本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)上述目的 一種具有抗白血病活性的化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如式I
其中，R1為H、OCOCH3或OCOAr1，式中Ar1為苯基、苯丙烯基、4-甲基苯丙烯基、4-氟苯丙烯基、4-氯苯丙烯基、3-氯苯丙烯基、2-氯苯丙烯基、3-氟-4-甲氧基苯丙烯基或呋喃丙烯基；R2為H、OCH3、CH3CONH或Ar2CONH，式中Ar2為苯基或苯丙烯基；R3為H、OCH3、CH3CONH、Ar3CONH，式中Ar3為苯基、苯丙烯基、4-氟苯丙烯基或呋喃丙烯基。符合式I結(jié)構(gòu)通式的化合物在本發(fā)明中被稱為4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯酚酯類化合物。
本發(fā)明式I所示的4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯酚酯類化合物的制備方法，其步驟為 將6位或7位或6位和7位被H、OCH3、CH3CONH或Ar2CONH取代的4-(4’-羥基苯基)-氨基喹唑啉在四氫呋喃和三乙胺的混合液中溶解，式中Ar2為苯基或苯丙烯基，冰浴冷卻下加入乙酰氯，取代苯胺基喹唑啉乙酰氯摩爾比為1∶3，保持0℃反應(yīng)1～24h，然后倒入飽和NaHCO3水溶液中，用乙酸乙酯提取，經(jīng)干燥、過(guò)濾、減壓除去溶劑即得。
所述四氫呋喃是溶劑。
所述三乙胺是催化劑。
上述反應(yīng)以6位或7位或6位和7位被H、OCH3、CH3CONH或Ar2CONH取代的4-(4’-羥基苯基)-氨基喹唑啉制得目標(biāo)化合物，實(shí)際上是以取代的苯甲酸甲酯或乙酯為起始原料，經(jīng)涅門托夫斯基反應(yīng)(Niementowski)、氯代、烴化及中和反應(yīng)，再通過(guò)酯化得到目標(biāo)化合物。
上述制備式I類化合物的方法舉例如下 例1
其中，R6為H、OCH3、CH3CONH或Ar1CONH，式中Ar1為苯基、苯丙烯基、4-甲基苯丙烯基、4-氟苯丙烯基、4-氯苯丙烯基、3-氯苯丙烯基、2-氯苯丙烯基、3-氟-4-甲氧基苯丙烯基或呋喃丙烯基。
例2

其中，R7為H、OCH3、CH3CONH或Ar2CONH，式中Ar2為苯基或苯丙烯基、4-氟苯丙烯基或呋喃丙烯基。
在合成式I所述化合物的過(guò)程中，得到一種具有抗白血病活性的中間體化合物B，其結(jié)構(gòu)通式如式II
其中，R4為NH2或NO2；R5為4-氟苯基、4-氯苯基、2-氯苯基、3-氟-4-甲氧基苯基或α-呋喃基。符合式II結(jié)構(gòu)通式的化合物在本發(fā)明中被稱為N-[4-(苯基氨基)喹唑啉-7-基]酰胺類化合物。
本發(fā)明式II的N-[4-(苯基氨基)喹唑啉-7-基]酰胺類化合物制備方法步驟如下 將4-氟苯基或4-氯苯基或2-氯苯基或3-氟-4-甲氧基苯基或α-呋喃基7-氨基喹唑啉溶解于適量四氫呋喃中，然后加入NaHCO3水溶液，取代苯胺基喹唑啉∶NaHCO3的摩爾比1∶5，冰浴冷卻下滴加乙酰氯，取代苯胺基喹唑啉∶乙酰氯摩爾比為1∶5，保持0-5℃反應(yīng)1～24h，倒入冰水中，過(guò)濾，即得。
上述反應(yīng)是用4-氟苯基、或4-氯苯基或2-氯苯基或3-氟-4-甲氧基苯基或α-呋喃基7-氨基喹唑啉制得目標(biāo)化合物，實(shí)際上是以取代的苯甲醛為起始原料，經(jīng)克腦文格爾縮合反應(yīng)(Knoevenagel)、酯化、還原反應(yīng)得到目標(biāo)化合物。
舉例說(shuō)明說(shuō)下
其中，R8為H、OCH3、CH3CONH或Ar3CONH，式中Ar3為苯基、苯丙烯基、4-甲基苯丙烯基、4-氟苯丙烯基、4-氯苯丙烯基、3-氯苯丙烯基、2-氯苯丙烯基、3-氟-4-甲氧基苯丙烯基或呋喃丙烯基。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于使用市場(chǎng)易得的原料取代的苯甲酸甲酯或者取代的苯甲酸，經(jīng)過(guò)五步反應(yīng)得到目標(biāo)化合物，為進(jìn)一步以酪氨酸激酶JAK3為靶點(diǎn)進(jìn)行抗腫瘤藥物的研究奠定了基礎(chǔ)。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)在于操作簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，不僅適用于實(shí)驗(yàn)室小規(guī)模制備，也適用于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。

具體實(shí)施例方式 以下通過(guò)具體的實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案。
實(shí)施例1 4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯基乙酸酯(Z1) 稱取4-(4’-羥基苯基)-氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉1.19g(0.004mol)(注4-(4’-羥基苯基)-氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉的制備如文獻(xiàn)報(bào)道)放入50ml帶溫度計(jì)和滴液漏斗的三口瓶中，加入20ml四氫呋喃及2ml三乙胺，磁子攪拌，冰浴冷至0℃。用滴液漏斗滴加乙酰氯0.852ml(0.012mol)，保持0℃反應(yīng)6h，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝2∶1)。待反應(yīng)完畢，攪拌下倒入飽和NaHCO3溶液中。乙酸乙酯(20ml/次)提取三次，水洗至水層為中性，無(wú)水MgSO4干燥。過(guò)濾，減壓除去溶劑，得類白色粉末0.58g，產(chǎn)率43.1％。m.p.268.8～269.9℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)89.49(s，1H，NH)，8.45(s，1H，2-H)，7.84(s，1H，5-H)，7.80(d，2H，2’，6’-H，J＝8.8Hz)，7.19(s，1H，8-H)，7.15(d，2H，3’，5’-H，J＝8.8Hz)，3.96(s，3H，OCH3)，3.93(s，3H，OCH3)，2.28(s，1H，CH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3268(vNH)，3078(v＝CH)，2837(vOCH3)，1746(vC＝O)，1625(vC＝N)，1580(vC＝C)，1506(vC＝C)。
C18H17N3O4計(jì)算的元素分析值為C63.17，H5.05，N12.38。實(shí)測(cè)值C63.43，H5.12，N12.18。
實(shí)施例2 4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯基苯甲酸酯(Z2) 稱取4-(4’-羥基苯基)-氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉0.594g(0.002mol)放入50ml帶溫度計(jì)和滴液漏斗的三口瓶中，加入20ml四氫呋喃及2ml三乙胺，磁子攪拌，冰浴冷至0℃。用滴液漏斗滴加苯甲酰氯1.16ml(0.01mol)，保持0℃反應(yīng)4h，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝2∶1)。待反應(yīng)完畢，攪拌下倒入飽和NaHCO3中，析出大量鮮黃色固體，抽濾。濾餅用20ml乙酸乙酯溶解，濾出不溶的部分，紅外烘箱干燥，得類白色粉末0.545g，產(chǎn)率67.9％。m.p.226.5～229.2℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ9.57(s，1H，NH)，8.48(s，1H，2-H)，8.16(m，2H，ArH)，7.88(d，2H，J＝8.9Hz)，7.86(s，1H，5-H)，7.77(t，1H，J＝7.4Hz)，7.63(t，2H，J＝7.8Hz)，7.33(d，2H，J＝8.9Hz)，7.21(s，1H，8-H)，3.98(s，3H，OCH3)，3.94(s，3H，OCH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3607(vNH)，3065(v＝CH)，2835(vOCH3)，1735(vC＝O)，1625(vC＝N)，1581(vC＝C)，1506(vC＝C)。
C23H19N3O4計(jì)算的元素分析值為C68.82，H4.77，N10.47。實(shí)測(cè)值C68.82，H4.48，N10.47。
實(shí)施例3 (E)-4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯基-3-苯基丙烯酸酯鹽酸鹽(Z3) 稱取(E)-3-苯基-4-氨基苯基丙烯酸酯1.195g(0.005mol)置于250ml帶有回流冷凝管的茄形瓶中，加入50ml異丙醇及50ml丙酮，磁子攪拌，待完全溶解后加入1.118g(0.005mol)4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉，加熱回流，逐漸有固體生成，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)，4h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，室溫冷卻，抽濾，干燥，得淺黃色固體1.982g，產(chǎn)率85.7％。m.p.285.9～287.2℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ11.3(s，1H，NH)，8.82(s，1H，2-H)，8.29(s，1H，5-H)，7.48(d，1H，J＝16Hz)，7.82(m，2H，ArH)，7.72(d，2H，J＝8.6Hz)，7.84(m，3H，ArH)，7.35(d，2H，J＝7.6Hz)，7.34(s，1H，8-H)，6.91(d，1H，J＝16Hz)，3.98(s，3H，OCH3)，3.97(s，3H，OCH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3433(vNH)，3032(v＝CH)，3001(v＝CH)，2838(vOCH3)，1726(vC＝O)，1632(vC＝N)，1574(vC＝C)，1507(vC＝C)。
C25H22ClN3O4·HCl計(jì)算的元素分析值為C64.72，H4.78，N9.06。實(shí)測(cè)值C64.59，H4.86，N8.97。
(E)-4-氨基苯基-3-苯基丙烯酸酯的獲得 稱取(E)-4-硝基苯基-3-苯基丙烯酸酯2.15g(0.008mol)放入250ml帶溫度計(jì)、回流冷凝管及機(jī)械攪拌的三口瓶中，加入120ml丙酮、40ml水、2.24g(0.04mol)還原鐵粉及0.01ml濃鹽酸，油浴加熱，攪拌。薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶3)，5h反應(yīng)完全，停止反應(yīng)，趁熱過(guò)濾，用飽和NaHCO3調(diào)節(jié)pH＝7，生成亮黃色固體，抽濾得粗品。干燥后用丙酮重結(jié)晶得淺黃色粉末1.57g，產(chǎn)率82.6％。
(E)-4-硝基苯基-3-苯基丙烯酸酯的獲得 稱取苯丙烯酸2.96g(0.02mol)置于100ml帶溫度計(jì)及機(jī)械攪拌的三口瓶中，加入8ml吡啶，室溫?cái)嚢瑁腆w全溶后冰浴冷至0℃，用滴液漏斗滴加苯磺酰氯2.54ml(0.02mol)，滴加完畢后撤去冰浴，緩慢升至室溫?cái)嚢?5min，冰浴冷至0℃，將4-硝基苯酚2.78g(0.02mol)溶于15ml吡啶并滴入反應(yīng)液，滴加完畢后加入1.2g DMAP，緩慢升至室溫?cái)嚢?，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶2)，1.5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，將反應(yīng)液倒入200ml碎冰水中，產(chǎn)生大量白色固體，抽濾，干燥，乙醇-水重結(jié)晶后得白色粉末1.93g，產(chǎn)率34.7％。
實(shí)施例4 (E)-4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯基-3-(4-氟苯基)丙烯酸酯鹽酸鹽(Z4) 稱取(E)-4-氨基苯基-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯1.028g(0.004mol)置于100ml帶有回流冷凝管的茄形瓶中，加入40ml異丙醇及40ml丙酮，磁子攪拌，待完全溶解后加入0.894g(0.004mol)4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉，加熱回流，逐漸有固體生成，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)，4.5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，室溫冷卻，抽濾，干燥，得淺黃色固體1.81g，產(chǎn)率94.2％。m.p.210.4～211.8℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ11.1(s，1H，NH)，8.80(s，1H，2-H)，8.17(s，1H，5-H)，7.91(d，1H，J＝16Hz)，7.90(m，2H，ArH)，7.75(d，2H，J＝8.8Hz)，7.35(d，2H，J＝8.8Hz)，7.34(m，2H，ArH)，7.30(s，1H，8-H)，6.89(d，1H，J＝16Hz)，4.01(s，3H，OCH3)，4.00(s，3H，OCH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3033(v＝CH)，3000(v＝CH)，2839(vOCH3)，1727(vC＝O)，1628(vC＝N)，1573(vC＝C)，1501(vC＝C)。
C25H21ClFN3O4·HCl計(jì)算的元素分析值為C62.31，H4.39，N8.72。實(shí)測(cè)值C62.14，H4.35，N8.67。
(E)-4-氨基苯基-3-(4-氟苯基)丙烯酸酯的獲得 稱取(E)-4-硝基苯基-3-(4-氟苯基)丙烯酸酯1.72g(0.006mol)放入250ml帶溫度計(jì)、回流冷凝管及機(jī)械攪拌的三口瓶中，加入90ml丙酮、30ml水、1.18g(0.06mol)還原鐵粉及0.1ml濃鹽酸，油浴加熱，攪拌。薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶3)，5h反應(yīng)完全，停止反應(yīng)，趁熱過(guò)濾，用飽和NaHCO3調(diào)節(jié)PH＝7，生成亮黃色固體，抽濾得粗品。干燥后用丙酮重結(jié)晶得淺黃色粉末1.18g，產(chǎn)率76.5％。m.p.145.1～147.0℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)7.84(m，2H，ArH)，7.89(d，1H，J＝16Hz))，7.27(t，2H，ArH，J＝8.5Hz))，6.82(d，2H，ArH，J＝8.5Hz)，6.75(d，1H，J＝16Hz)，6.57(d，2H，ArH，J＝8.5Hz)，4.98(s，2H，NH2)。
(E)-4-硝基苯基-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例5 (E)-4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯基-3-(4-甲基苯基)丙烯酸酯鹽酸鹽(Z5) 稱取(E)-4-氨基苯基-3-(4-甲基苯基)丙烯酸酯1.265g(0.005mol)置于100ml帶有回流冷凝管的茄形瓶中，加入40ml異丙醇及40ml丙酮，磁子攪拌，待完全溶解后加入1.118g(0.005mol)4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉，加熱回流，逐漸有固體生成，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)，4.5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，室溫冷卻，抽濾，干燥，得淺黃色固體2.06g，產(chǎn)率86.5％。m.p.251.3～252.9℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ11.1(s，1H，NH)，8.80(s，1H，2-H)，8.17(s，1H，5-H)，7.85(d，1H，J＝16Hz)，7.71(m，4H，ArH)，7.33(m，2H，ArH)，7.29(s，2H，ArH)，7.27(s，1H，8-H)，6.82(d，1H，J＝16Hz)，4.01(s，3H，OCH3)，3.99(s，3H，OCH3)，2.36(s，3H，CH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3361(vNH)，3028(v＝CH)，3005(v＝CH)，1731(vC＝O)，1632(vC＝N)，1573(vC＝C)，1505(vC＝C)。
C26H24ClN3O4·HCl計(jì)算的元素分析值為C65.34，H5.06，N8.79。實(shí)測(cè)值C65.17，H4.90，N8.55。
(E)-4-氨基苯基-3-(4-甲基苯基)丙烯酸酯的獲得 稱取(E)-4-硝基苯基-3-(4-甲基苯基)丙烯酸酯1.70g(0.006mol)放入250ml帶溫度計(jì)、回流冷凝管及機(jī)械攪拌的三口瓶中，加入105ml丙酮、35ml水、1.18g(0.03mol)還原鐵粉及0.1ml濃鹽酸，油浴加熱，攪拌。薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶3)，5h反應(yīng)完全，停止反應(yīng)，趁熱過(guò)濾，用飽和NaHCO3調(diào)節(jié)pH＝7，生成亮黃色固體，抽濾得粗品。干燥后用丙酮重結(jié)晶得淺黃色粉末1.31g，產(chǎn)率86.3％。m.p.138.9-141.1℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)7.75(d，1H，J＝16Hz)，7.02(d，2H，J＝3.5Hz，ArH)，7.25(d，2H，J＝3.5Hz，ArH)，6.81(m，2H，ArH)，6.72(d，1H，J＝16Hz)，6.57(m，2H，ArH)，4.99(s，2H，NH2)，2.49(s，3H，CH3)。
(E)-4-硝基苯基-3-(4-甲基苯基)丙烯酸酯的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例6 (E)-4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯基-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯鹽酸鹽(Z6) 稱取(E)-4-氨基苯基-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯1.37g(0.005mol)置于100ml帶有回流冷凝管的茄形瓶中，加入40ml異丙醇及40ml丙酮，磁子攪拌，待完全溶解后加入1.118g(0.005mol)4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉，加熱回流，逐漸有固體生成，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝2∶1)，5.5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，室溫冷卻，抽濾，干燥，得淺黃色固體2.28g，產(chǎn)率91.7％。m.p.234.5～237.1℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ11.4(s，1H，NH)，8.83(s，1H，2-H)，8.31(s，1H，5-H)，7.89(d，1H，J＝16Hz)，7.86(d，2H，J＝8.4Hz)，7.77(d，2H，J＝8.8Hz)，7.54(d，2H，J＝8.4Hz)，7.35(m，2H，ArH)，7.32(s，1H，8-H)，6.92(d，1H，J＝16Hz)，4.02(s，3H，OCH3)，4.00(s，3H，OCH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3422(vNH)，3025(v＝CH)，2933(v＝CH)，2834(vOCH3)，1733(vC＝O)，1633(vC＝N)，1572(vC＝C)，1508(vC＝C)。
C25H21Cl2N3O4·HCl計(jì)算的元素分析值為C60.25，H4.25，N8.43。實(shí)測(cè)值C59.96，H4.21，N8.22。
(E)-4-氨基苯基-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯的獲得 稱取(E)-4-硝基苯基-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯1.82g(0.006mol)放入250ml帶溫度計(jì)、回流冷凝管及機(jī)械攪拌的三口瓶中，加入130ml丙酮、42ml水、1.18g(0.06mol)還原鐵粉及0.1ml濃鹽酸，油浴加熱，攪拌。薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶3)，5h反應(yīng)完全，停止反應(yīng)，趁熱過(guò)濾，用飽和NaHCO3調(diào)節(jié)pH＝7，生成亮黃色固體，抽濾得粗品。干燥后用丙酮重結(jié)晶得淺黃色粉末1.41g，產(chǎn)率85.9％。m.p.148.8～149.5℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)7.79(s，2H，ArH)，7.79(d，1H，J＝16Hz)，7.49(s，2H，ArH)，6.81(s，1H，ArH)，6.81(d，1H，J＝16Hz)，6.58(s，2H，ArH)，4.99(s，2H，NH2)。
(E)-4-硝基苯基-3-(4-氯苯基)丙烯酸酯的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例7 (E)-4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯基-3-(3-氯苯基)丙烯酸酯鹽酸鹽(Z7) 稱取(E)-4-氨基苯基-3-(3-氯苯基)丙烯酸酯0.447g(0.002mol)置于100ml帶有回流冷凝管的茄形瓶中，加入30ml異丙醇及3ml丙酮，磁子攪拌，待完全溶解后加入0.547g(0.002mol)4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉，加熱回流，逐漸有固體生成，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝2∶1)，5.5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，室溫冷卻，抽濾，干燥，得淺黃色固體0.886g，產(chǎn)率88.9％。m.p.210.3-212.5℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ11.3(s，1H，NH)，8.83(s，1H，2-H)，8.30(s，1H，5-H)，7.95(s，1H，ArH)，7.87(d，1H，J＝16Hz)，7.76(m，3H，ArH)，7.52(m，2H，ArH)，7.35(m，2H，ArH)，7.33(s，1H，8-H)，7.01(d，1H，J＝16Hz)，4.02(s，3H，OCH3)，4.00(s，3H，OCH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3372(vNH)，3032(v＝CH)，2937(v＝CH)，2833(vOCH3)，1735(vC＝O)，1633(vC＝N)，1574(vC＝C)，1514(vC＝C)。
C25H21Cl2N3O4·HCl計(jì)算的元素分析值為C60.25，H4.25，N8.43。實(shí)測(cè)值C59.98，H4.33，N8.48。
(E)-4-氨基苯基-3-(3-氯苯基)丙烯酸酯的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例8 (E)-4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯基-3-(2-氯苯基)丙烯酸酯鹽酸鹽(Z8) 稱取(E)-4-氨基苯基-3-(2-氯苯基)丙烯酸酯1.37g(0.005mol)置于100ml帶有回流冷凝管的茄形瓶中，加入50ml異丙醇及50ml丙酮，磁子攪拌，待完全溶解后加入1.118g(0.005mol)4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉，加熱回流，逐漸有固體生成，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)，5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，室溫冷卻，抽濾，干燥，得淺黃色固體2.04g，產(chǎn)率82.1％。m.p.219.5～222.1℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ11.5(s，1H，NH)，8.82(s，1H，2-H)，8.39(s，1H，5-H)，8.13(d，1H，J＝16Hz)，8.07(dd，1H，J＝7.6，1.6Hz)，7.79(d，2H，J＝7Hz)，7.59-7.46(m，3H，ArH)，7.38(s，1H，8-H)，7.38(d，2H，J＝6.8Hz)，6.99(d，1H，J＝16Hz)，4.03(s，3H，OCH3)，4.00(s，3H，OCH3。
IR(KBr，v/cm-1)3410(vNH)，3008(v＝CH，1737(vC＝O)，1631(vC＝N)，1573(vC＝C)，1506(vC＝C)。
C25H21Cl2N3O4·HCl計(jì)算的元素分析值為C60.25，H4.25，N8.43。實(shí)測(cè)值C60.02，H4.19，N8.30。
(E)-4-氨基苯基-3-(2-氯苯基)丙烯酸酯的獲得同實(shí)施例1。
(E)-4-硝基苯基3-(2-氯苯基)丙烯酸酯的獲得 稱取(E)-3-(2-氯苯基)丙烯酸5.11g(0.028mol)置于100ml帶溫度計(jì)及機(jī)械攪拌的三口瓶中，加入40ml吡啶，室溫?cái)嚢瑁腆w全溶后冰浴冷至0℃，用滴液漏斗滴加苯磺酰氯3.56ml(0.028mol)，滴加完畢后撤去冰浴，緩慢升至室溫?cái)嚢?5min，冰浴冷至0℃，將4-硝基苯酚3.90g(0.028mol)溶于15ml吡啶并滴入反應(yīng)液，滴加完畢后加入1.68g DMAP，緩慢升至室溫?cái)嚢?，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶2)，1.5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，將反應(yīng)液倒入200ml碎冰水中，產(chǎn)生大量白色固體，抽濾，干燥，乙醇-水重結(jié)晶后得白色粉末2.09g，產(chǎn)率24.6％。m.p.138.5～139.0℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)8.33(m，2H，ArH)，8.15(d，1H，J＝16Hz)，8.07(dd，1H，ArH J＝1.5，8.0Hz)，7.60(dd，1H，ArH，J＝1.5，8.0Hz)，7.55(m，2H，ArH)，7.50(td，1H，ArH，J＝1.5，8.0Hz)，7.46(m，1H，ArH)，7.01(d，1H，J＝16Hz)。
實(shí)施例9 (E)-4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯基-3-(3-氟-4-甲氧基苯基)丙烯酸酯鹽酸鹽(Z9) 稱取(E)-4-氨基苯基-3-(3-氟-4-甲氧基苯基)丙烯酸酯1.435g(0.005mol)置于100ml帶有回流冷凝管的茄形瓶中，加入40ml異丙醇及40ml丙酮，磁子攪拌，待完全溶解后加入1.118g(0.005mol)4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉，加熱回流，逐漸有固體生成，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝2∶1)，5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，室溫冷卻，抽濾，干燥，得淺黃色固體2.24g，產(chǎn)率87.4％。m.p.226.4～227.7℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ11.6(s，1H，NH)，8.82(s，1H，2-H)，8.43(s，1H，5-H)，7.84(d，1H，J＝16Hz)，7.88(m，3H，ArH)，7.61(d，1H，J＝8.4Hz)，7.40(s，1H，8-H)，7.32(d，2H，J＝8.8Hz)，7.32(m，1H，ArH)，6.82(d，1H，J＝16Hz)，4.00(s，3H，OCH3)，3.99(s，3H，OCH3)，3.91(s，3H，OCH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3423(vNH)，3025(v＝CH)，2938(v＝CH)，2839(vOCH3)，1736(vC＝O)，1633(vC＝N)，1574(vC＝C)，1514(vC＝C)。
C26H23Cl2FN3O5·HCl計(jì)算的元素分析值為C61.00，H4.53，N8.21。實(shí)測(cè)值C60.88，H4.47，N8.04。
(E)-4-氨基苯基-3-(3-氟-4-甲氧基苯基)丙烯酸酯的獲得 稱取(E)-4-硝基苯基-3-(3-氟-4-甲氧基苯基)丙烯酸酯1.91g(0.006mol)放入250ml帶溫度計(jì)、回流冷凝管及機(jī)械攪拌的三口瓶中，加入130ml丙酮、42ml水、3.64g(0.06mol)還原鐵粉及0.3ml濃鹽酸，油浴加熱，攪拌。薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶3)，5h反應(yīng)完全，停止反應(yīng)，趁熱過(guò)濾，用飽和NaHCO3調(diào)節(jié)pH＝7，生成亮黃色固體，抽濾得粗品。干燥后用丙酮重結(jié)晶得淺黃色粉末1.47g，產(chǎn)率85.3％。m.p.112.5～114.2℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)7.74(m，1H，ArH)，7.72(d，1H，J＝16Hz)，7.55(d，1H，J＝9.0Hz，ArH)，7.21(t，1H，J＝9.0Hz，ArH)，6.81(m，2H，ArH)，6.71(d，1H，J＝16Hz)，6.58(m，2H，ArH)，4.98(s，2H，NH2)，3.90(s，3H，OCH3)。
(E)-4-硝基苯基-3-(3-氟-4-甲氧基苯基)丙烯酸酯的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例10 (E)-4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯基-3-(α-呋喃基)丙烯酸酯鹽酸鹽(Z10) 稱取(E)-4-氨基苯基-3-(α-呋喃基)丙烯酸酯1.145g(0.005mol)置于100ml帶有回流冷凝管的茄形瓶中，加入40ml異丙醇及40ml丙酮，磁子攪拌，待完全溶解后加入1.118g(0.005mol)4-氯-6，7-二甲氧基喹唑啉，加熱回流，逐漸有固體生成，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝4∶1)，5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，室溫冷卻，抽濾，干燥，得淺黃色固體1.81g，產(chǎn)率80.0％。m.p.211.3～213.6℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ11.3(s，1H，NH)，8.81(s，1H，2-H)，8.26(s，1H，5-H)，7.92(d，1H，α-H，J＝1.6Hz)，7.75(d，2H，J＝8.8Hz)，7.71(d，1H，J＝16Hz)，7.33(d，2H，J＝8.8Hz)，7.32(s，1H，8-H)，7.09(d，1H，β-H，J＝3.2Hz)，6.69(m，1H，β-H)，6.46(d，1H，J＝16Hz)，4.02(s，3H，OCH3)，4.00(s，3H，OCH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3446(vNH)，3052(v＝CH)，2999(v＝CH)，2839(vOCH3)，1733(vC＝O)，1630(vC＝N)，1575(vC＝C)，1509(vC＝C)。
C23H20ClN3O5·HCl計(jì)算的元素分析值為C60.86，H4.44，N9.26。實(shí)測(cè)值C60.62，H4.48，N9.16。
(E)-4-氨基苯基-3-(α-呋喃基)丙烯酸酯的獲得 稱取(E)-4-硝基苯基-3--(α-呋喃基)丙烯酸酯1.82g(0.007mol)放入250ml帶溫度計(jì)、回流冷凝管及機(jī)械攪拌的三口瓶中，加入150ml丙酮、50ml水、1.96g(0.035mol)還原鐵粉及0.3ml濃鹽酸，油浴加熱，攪拌。薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶3)，5h反應(yīng)完全，停止反應(yīng)，趁熱過(guò)濾，用飽和NaHCO3調(diào)節(jié)pH＝7，生成亮黃色固體，抽濾得粗品。干燥后用丙酮重結(jié)晶得淺黃色粉末1.26g，產(chǎn)率77.7％。m.p.111.4～112.7℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)7.88(s，1H，α-H)，7.59(d，1H，J＝16Hz)，7.02(d，2H，β-H，J＝3.5Hz)，6.81(d，2H，ArH，J＝8.5Hz)，6.66(m，1H，β-H)，6.56(d，2H，ArH，J＝8.5Hz)，6.37(d，1H，J＝16Hz)，4.99(s，2H，NH2)。
(E)-4-硝基苯基-3-(α-呋喃基)丙烯酸酯的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例11 N-[4-(苯基氨基)喹唑啉-7-基]乙酰胺(Y1) 在帶溫度計(jì)、滴液漏斗的50ml三口瓶中加入4-苯基氨基-7-氨基喹唑啉0.472g(0.002mol)及20ml THF，室溫?cái)嚢柚寥?，加入NaHCO30.84g(0.01mol)，冰浴冷卻至0℃，滴加5ml THF稀釋的乙酰氯0.71ml(0.01mol)，滴加完畢后控制在0～5℃繼續(xù)反應(yīng)3h，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(CH2Cl2∶CH3OH＝10∶1)，待反應(yīng)完全后將反應(yīng)液倒入冰水中，析出白色絮狀固體，抽濾，紅外烘箱干燥。得類白色粉末0.21g，產(chǎn)率37.8％。m.p.245.3～247.9℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ10.34(s，1H，NH)，9.65(s，1H，NH)，8.52(s，1H，2-H)，8.46(d，1H，5-H，J＝9.0Hz)，8.12(d，1H，8-H，J＝1.9Hz)，7.84(d，2H，J＝7.8Hz)，7.71(dd，1H，6-H，J＝2.0，9.0Hz)，7.38(m，2H，ArH)，7.12(t，1H，J＝7.4Hz)，2.14(s，3H，CH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3364(vNH)，3289(vNH)，3032(v＝CH)，2853(vCH3)，1685(vC＝O)，1610(vC＝N)，1560(vC＝C)，1500(vC＝C)。
C16H14N4O計(jì)算的元素分析值為C69.05，H5.07，N20.13。實(shí)測(cè)值C69.08，H5.18，N20.34。
4-苯基氨基-7-氨基喹唑啉的制備如文獻(xiàn)報(bào)道，其中7-硝基喹唑啉-4-酮按如下方法制得。
7-硝基喹唑啉-4-酮的獲得 向裝有回流冷凝管的50ml圓底燒瓶中加入0.91g(5mmol)2-氨基-4-硝基苯甲酸和2.2ml(50mmol)的甲酰胺，置于微波反應(yīng)器中，在微波功率為70W下反應(yīng)7min，將反應(yīng)液傾入50ml冰水中，抽濾，干燥得黃色粉末0.81g，產(chǎn)率85.2％。m.p.274.4～275.6℃。
實(shí)施例12 N-[4-(苯基氨基)喹唑啉-6-基]乙酰胺(Y2) 在帶溫度計(jì)、滴液漏斗的50ml三口瓶中加入4-苯基氨基-6-氨基喹唑啉0.472g(0.002mol)及20ml THF，室溫?cái)嚢柚寥?，加入NaHCO30.84g(0.01mol)，冰浴冷卻至0℃，滴加5ml THF稀釋的乙酰氯0.71ml(0.01mol)，滴加完畢后控制在0-5℃繼續(xù)反應(yīng)3h，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(CH2Cl2∶CH3OH＝15∶1)，待反應(yīng)完全后將反應(yīng)液倒入冰水中，用乙酸乙酯提取(20ml/次)三次，合并乙酸乙酯層，無(wú)水硫酸鎂干燥。濾出硫酸鎂，減壓除去乙酸乙酯，得淺黃色固體0.251g，產(chǎn)率45.0％。m.p.226.6～228.7℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ10.2(s，1H，NH)，9.76(s，1H，NH)，8.64(s，1H，2-H)，8.49(s，1H，5-H)，7.76(m，4H，ArH)，7.37(s，2H，ArH)，7.10(s，1H，ArH)，2.12(s，3H，CH3)。
IR(KBr，v/cm-1)3145(vNH)，2926(vCH3)，1681(vC＝O)，1610(vC＝N)，1548(vC＝C)，1498(vC＝C)。
C16H14N4O計(jì)算的元素分析值為C69.05，H5.07，N20.13。實(shí)測(cè)值C68.99，H5.22，N20.26。
4-苯基氨基-6-氨基喹唑啉的獲得如文獻(xiàn)報(bào)道，其中6-硝基喹唑啉-4-酮也可按如下方法獲得。
6-硝基喹唑啉-4-酮的獲得 向裝有回流冷凝管的50ml圓底燒瓶中加入0.91g(5mmol)2-氨基-5-硝基苯甲酸和2.6ml(70mmol)的甲酰胺，置于微波反應(yīng)器中，在微波功率為70W下反應(yīng)11min，將反應(yīng)液傾入50ml冰水中，抽濾，干燥得黃色粉末0.80g，產(chǎn)率84.2％。
實(shí)施例13 N-[4-(苯基氨基)喹唑啉-7-基]苯甲酰胺(Y3) 在帶溫度計(jì)、滴液漏斗的50ml三口瓶中加入4-苯基氨基-7-氨基喹唑啉0.236g(0.001mol)及10ml THF，室溫?cái)嚢柚寥?，加入NaHCO30.42g(0.005mol)，冰浴冷卻至0℃，滴加2.5ml THF稀釋的苯甲酰氯0.58ml(0.005mol)，滴加完畢后控制在0-5℃繼續(xù)反應(yīng)6h，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝3∶1)，待反應(yīng)完全后將反應(yīng)液倒入冰水中，用乙酸乙酯提取(20ml/次)三次，合并乙酸乙酯層，無(wú)水硫酸鎂干燥。濾出硫酸鎂，減壓除去乙酸乙酯，得淺黃色固體0.113g，產(chǎn)率33.1％。m.p.250.0～251.7℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ11.5(s，1H，NH)，11.1(s，1H，NH)，8.87(s，1H，2-H)，8.86(d，1H，5-H，J＝6.8Hz)，8.46(s，1H，8-H)，8.15(d，1H，6-H，J＝6.8Hz)，8.06(d，2H，J＝6.0Hz)，7.73(d，2H，J＝6.0Hz)，7.66(t，1H，J＝6.0Hz)，7.59(t，2H，J＝6.0Hz)，7.49(t，2H，J＝6.4Hz)，7.33(t，1H，J＝6.0Hz)。
IR(KBr，v/cm-1)3419(vNH)，3226(vNH)，3054(v＝CH)，1617(vC＝O)，1635(vC＝N)，1568(vC＝C)，1495(vC＝C)。
C21H16N4O計(jì)算的元素分析值為C74.10，H4.74，N16.46。實(shí)測(cè)值C73.98，H4.78，N16.66。
實(shí)施例14 N-[4-(苯基氨基)喹唑啉-6-基]苯甲酰胺(Y4) 在帶溫度計(jì)、滴液漏斗的50ml三口瓶中加入4-苯基氨基-6-氨基喹唑啉0.472g(0.002mol)及20ml THF，室溫?cái)嚢柚寥?，加入NaHCO30.84g(0.01mol)，冰浴冷卻至0℃，滴加5ml THF稀釋的苯甲酰氯0.71ml(0.01mol)，滴加完畢后控制在0-5℃繼續(xù)反應(yīng)3h，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(CH2Cl2∶CH3OH＝20∶1)，待反應(yīng)完全后將反應(yīng)液倒入冰水-乙酸乙酯中，產(chǎn)生黃色固體，抽濾。得淺黃色固體0.15g，產(chǎn)率22.1％。m.p.265.7～268.1℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ10.6(s，1H，NH)，9.78(s，1H，NH)，8.89(d，1H，5-H，J＝1.5Hz)，8.56(s，1H，2-H)，8.28(d，1H，7-H，J＝1.5Hz)，8.06(m，2H，ArH)，8.02(dd，1H，7-H，J＝2.5，9Hz)，7.83(m，2H，ArH)，7.81(d，1H，8-H)，7.59(m，3H，ArH)，7.39(t，2H，ArH J＝7.0Hz)，7.12(t，1H，ArH，J＝7.5Hz)。
IR(KBr，v/cm-1)3470(vNH)，3402(vNH)，3057(v＝CH)，1658(vC＝O)，1605(vC＝N)，1535(vC＝C)，1497(vC＝C)。
C21H16N4O計(jì)算的元素分析值為C74.10，H4.74，N16.46。實(shí)測(cè)值C73.98，H4.48，N16.16。
實(shí)施例15 (E)-3-苯基-N-[4-(苯基氨基)喹唑啉-7-基]丙烯酰胺(Y5) 在裝有機(jī)械攪拌、溫度計(jì)及滴液漏斗的50ml三口瓶中加入苯丙烯酸0.148g(0.001mol)和5ml吡啶，室溫?cái)嚢柚寥堋１±鋮s至0℃，滴加苯磺酰氯0.127ml(0.001mol)，控制溫度在0℃，滴畢，撤去冰浴，緩慢升至室溫?cái)嚢?5min，待反應(yīng)液變粘稠后再用冰浴冷至0℃，滴加5ml吡啶溶解的4-苯基氨基-7-氨基喹唑啉0.236g(0.001mol)，加入0.06g DMAP，撤去冰浴，緩慢升至室溫?cái)嚢?，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)，1.5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，攪拌下將反應(yīng)液倒入碎冰水中，得微黃色懸濁液，抽濾，水洗至中性，干燥后用甲醇-乙醇重結(jié)晶，得類白色粉末0.125g，產(chǎn)率34.1％。m.p.266.8～269.9℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ10.7(s，1H，NH)，9.82(s，1H，NH)，8.57(s，1H，2-H)，8.53(d，1H，5-H，J＝6.8Hz)，8.28(d，1H，8-H，J＝1.6Hz)，7.84(m，3H，ArH)，7.69(d，1H，J＝16Hz)，7.67-7.45(m，5H，ArH)，7.41(m，2H，ArH)，7.15(m，1H，ArH)，6.91(d，1H，J＝16Hz)。
IR(KBr，v/cm-1)3453(vNH)，3366(vNH)，3029(v＝CH)，2926(v＝CH)，1668(vC＝O)，1629(vC＝N)，1553(vC＝C)，1498(vC＝C)。
C23H18N4O計(jì)算的元素分析值為C75.39，H4.95，N15.29。實(shí)測(cè)值C74.89，H5.00，N15.20。
實(shí)施例16 (E)-3-苯基-N-[4-(苯基氨基)喹唑啉-6-基]丙烯酰胺(Y6) 在裝有機(jī)械攪拌、溫度計(jì)及滴液漏斗的50ml三口瓶中加入苯丙烯酸0.74g(0.005mol)和10ml吡啶，室溫?cái)嚢柚寥?。冰浴冷卻至0℃，滴加苯磺酰氯0.635ml(0.005mol)，控制溫度在0℃，滴畢，撤去冰浴，緩慢升至室溫?cái)嚢?5min，待反應(yīng)液變粘稠后再用冰浴冷至0℃，滴加20ml吡啶溶解的4-苯基氨基-6-氨基喹唑啉1.18g(0.005mol)，加入0.06g DMAP，撤去冰浴，綬慢升至室溫?cái)嚢?，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)，1.5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，攪拌下將反應(yīng)液倒入碎冰水中，得微黃色懸濁液，抽濾，水洗至中性，干燥后用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得灰白色粉末0.312g。產(chǎn)率16.9％。m.p.262.1～264.9℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ10.5(s，1H，NH)，9.81(s，1H，NH)，8.80(d，1H，5-H，J＝2.0Hz)，8.52(s，1H，2-H)，7.96(dd，1H，7-H，J＝2.1，8.9Hz)，7.83(d，2H，ArH，J＝7.7Hz)，7.79(d，1H，8-H，J＝8.9Hz)，7.67(d，1H，J＝16Hz)，7.49-7.37(m，5H，ArH)，7.12(t，1H，ArH，J＝7.3Hz)，6.93(d，1H，J＝16Hz)。
IR(KBr，v/cm-1)3309(vNH)，3263(vNH)，3062(v＝CH)，3029(v＝CH)，1660(vC＝O)，1628(vC＝N)，1573(vC＝C)，1522(vC＝C)。
C23H18N4O計(jì)算的元素分析值為C75.39，H4.95，N15.29。實(shí)測(cè)值C74.79，H4.90，N15.20。
實(shí)施例17 (E)-3-(4-氟苯基)-N-[4-(苯基胺基)喹唑啉-7-基]丙烯酰胺(Y7) 在裝有機(jī)械攪拌、溫度計(jì)及滴液漏斗的50ml三口瓶中加入4-氟苯基丙烯酸0.332g(0.002mol)和2ml吡啶，室溫?cái)嚢柚寥堋１±鋮s至0℃，滴加苯磺酰氯0.254ml(0.002mol)，控制溫度在0℃，滴畢，撤去冰浴，緩慢升至室溫?cái)嚢?5min，待反應(yīng)液變粘稠后再用冰浴冷至0℃，滴加8ml吡啶溶解的4-苯基氨基-7-氨基喹唑啉0.472g(0.002mol)，加入0.12g DMAP，撤去冰浴，緩慢升至室溫?cái)嚢?，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)，1.5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，攪拌下將反應(yīng)液倒入碎冰水中，得鮮黃色懸濁液，抽濾，水洗至中性，干燥后用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得白色粉末0.145g，產(chǎn)率18.9％。m.p.276.9～279.0℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ10.6(s，1H，NH)，9.67(s，1H，NH)，8.54(s，1H，2-H)，8.51(d，1H，5-H，J＝9.2Hz)，8.25(d，1H，8-H，J＝2.0Hz)，7.87(m，2H，ArH)，7.81(dd，1H，6-H，J＝2.1，9.0Hz)，7.74(m，2H，ArH)，7.69(d，1H，J＝16Hz)，7.41-7.11(m，5H，ArH)，6.83(d，1H，J＝16Hz)。
IR(KBr，v/cm-1)3351(vNH)，3281(vNH)，3105(v＝CH)，3058(v＝CH)，1664(vC＝O)，1627(vC＝N)，1525(vC＝C)，1497(vC＝C)。
C23H17FN4O計(jì)算的元素分析值為C71.86，H4.46，N14.57。實(shí)測(cè)值C71.70，H4.46，N14.41。
實(shí)施例18 (E)-3-(α-呋喃基)-N-[4-(苯基胺基)喹唑啉-7-基]丙烯酰胺(Y8) 在裝有機(jī)械攪拌、溫度計(jì)及滴液漏斗的50ml三口瓶中加入α-呋喃基丙烯酸0.69g(0.005mol)和4ml吡啶，室溫?cái)嚢柚寥?。冰浴冷卻至0℃，滴加苯磺酰氯0.635ml(0.005mol)，控制溫度在0℃，滴畢，撤去冰浴，緩慢升至室溫?cái)嚢?5min，待反應(yīng)液變粘稠后再用冰浴冷至0℃，滴加10ml吡啶溶解的4-苯基氨基-7-氨基喹唑啉1.18g(0.005mol)，加入0.3g DMAP，撤去冰浴，緩慢升至室溫?cái)嚢?，薄層層析監(jiān)測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)(乙酸乙酯∶石油醚＝3∶1)，1.5h反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，攪拌下將反應(yīng)液倒入碎冰水中，得褐色懸濁液，抽濾，水洗至中性，干燥后用甲醇-丙酮重結(jié)晶，得鮮黃色粉末0.145g，產(chǎn)率18.9％。m.p.281.9～283.1℃。
1H-NMR(DMSO-d6，ppm)δ10.6(s，1H，NH)，9.69(s，1H，NH)，8.54(s，1H，2-H)，8.50(d，1H，5-H，J＝9.2Hz)，8.24(d，1H，8-H，J＝2.0Hz)，7.86(m，3H，ArH)，7.80(dd，1H，6-H，J＝2.0，9.0Hz)，7.49(d，1H，J＝16Hz)，7.41-7.11(m，3H，ArH)，6.91(d，1H，β-H，J＝3.2Hz)，6.69(d，1H，J＝16Hz)，6.65(q，1H，β-H，J＝1.6Hz)。
IR(KBr，v/cm-1)3374(vNH)，3007(v＝CH)，1684(vC＝O)，1627(vC＝N)，1577(vC＝C)1499(vC＝C)。
C21H16N4O2計(jì)算的元素分析值為C70.77，H4.53，N15.72。實(shí)測(cè)值C70.47，H4.46，N15.59。
實(shí)施例19抗白血病活性測(cè)定 實(shí)驗(yàn)原理 四氮唑[MTT，3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenyl-tetrazolium bromide]是一種能接受氫原子的染料。活細(xì)胞線粒體中與NADP相關(guān)的脫氫酶在細(xì)胞內(nèi)可將黃色的MTT轉(zhuǎn)化成不溶性的藍(lán)紫色的formazon，而死細(xì)胞則無(wú)此功能。用DMSO溶解formazon后，在一定波長(zhǎng)下用酶標(biāo)儀測(cè)定光密度值，既可定量測(cè)出細(xì)胞的存活率。
結(jié)果評(píng)定 腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率(％)＝(OD對(duì)照-OD實(shí)驗(yàn))/(OD對(duì)照-OD空白)X 100％ 實(shí)驗(yàn)方法 MTT比色試驗(yàn)，將培養(yǎng)的人慢性粒細(xì)胞急性白血病細(xì)胞系K562細(xì)胞株用含10％胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液配成單個(gè)細(xì)胞懸液，以每孔2×104個(gè)細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔體積100μL。將培養(yǎng)板放入CO2孵箱，在37℃、5％CO2及飽和濕度條件下培養(yǎng)24h。將上述實(shí)施例1-18的化合物依次倍比稀釋為10-5、10-6、10-7、10-8、10-9mol·L-1濃度，加入96孔板中，每個(gè)濃度分別設(shè)5個(gè)平行孔。同時(shí)各板都設(shè)溶劑對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照藥為紫杉醇。人慢性粒細(xì)胞急性白血病細(xì)胞系K562細(xì)胞株繼續(xù)培養(yǎng)3d。培養(yǎng)3d后，每孔加入MTT溶液(1mg/mL)50μL，37℃繼續(xù)孵育4h，終止培養(yǎng)。用平板離心機(jī)離心(1000rpm，10min)，然后棄去孔內(nèi)液體，每孔加入150μL DMSO，振蕩3min，選擇490nm波長(zhǎng)，在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀上測(cè)定各孔光吸收值，記錄結(jié)果。
細(xì)胞株人慢性粒細(xì)胞急性白血病細(xì)胞系K562細(xì)胞株 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 其中，實(shí)施例13和15的化合物在10-5mol/L的濃度下對(duì)人慢性粒細(xì)胞急性白血病細(xì)胞系K562細(xì)胞株的抑制率超過(guò)50％，進(jìn)一步MTT法實(shí)驗(yàn)，實(shí)施例15的化合物IC50為3.4×10-7mol·L-1。其他實(shí)施例的化合物在10-5mol/L的濃度下對(duì)人慢性粒細(xì)胞急性白血病細(xì)胞系K562細(xì)胞株的抑制率未達(dá)到50％，結(jié)果見表1。
表1 10-5mol/L的濃度下化合物的抑制率

權(quán)利要求
1.一種具有抗白血病活性的化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如式I
其中，R1為H、OCOCH3或OCOAr1，式中Ar1為苯基、苯丙烯基、4-甲基苯丙烯基、4-氟苯丙烯基、4-氯苯丙烯基、3-氯苯丙烯基、2-氯苯丙烯基、3-氟-4-甲氧基苯丙烯基或呋喃丙烯基；R2為H、OCH3、CH3CONH或Ar2CONH，式中Ar2為苯基或苯丙烯基；R3為H、OCH3、CH3CONH或Ar3CONH，式中Ar3為苯基、苯丙烯基、4-氟苯丙烯基或呋喃丙烯基。
2.權(quán)利要求1所述化合物的制備方法，步驟如下
將6位或7位或6位和7位被H、OCH3、CH3CONH或Ar2CONH取代的4-(4’-羥基苯基)-氨基喹唑啉在四氫呋喃和三乙胺的混合液中溶解，式中Ar2為苯基或苯丙烯基，冰浴下加入乙酰氯，0℃反應(yīng)1～24h，然后倒入飽和NaHCO3水溶液中，用乙酸乙酯提取，經(jīng)干燥、過(guò)濾、除去溶劑即得。
3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于取代苯胺基喹唑啉∶乙酰氯的摩爾比為1∶3。
4.一種制備權(quán)利要求1所述化合物的具有抗白血病活性的中間體化合物，其結(jié)構(gòu)如式II
其中R4為NH2或NO2；R5為4-氟苯基、4-氯苯基、2-氯苯基、3-氟-4-甲氧基苯基或α-呋喃基。
5.權(quán)利要求4所述化合物的制備方法，步驟如下
將4-氟苯基或4-氯苯基或2-氯苯基或3-氟-4-甲氧基苯基或α-呋喃基7-氨基喹唑啉溶解于適量四氫呋喃中，然后加入NaHCO3水溶液，冰浴冷卻下滴加乙酰氯，取代苯胺基喹唑啉∶乙酰氯摩爾比為1∶5，保持0-5℃反應(yīng)1～24h，倒入冰水中，過(guò)濾，即得。
6.如權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于所述取代苯胺基喹唑啉∶NaHCO3的摩爾比1∶5。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種以JAK3為靶點(diǎn)的抗白血病的化合物4-(6，7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氨基苯酚酯類化合物，還公開了制備上述化合物的具有抗白血病活性的中間體化合物N-[4-(苯基氨基)喹唑啉-7-基]酰胺類化合物，本發(fā)明還提供了上述兩種化合物的制備方法。本發(fā)明為抗白血病藥物的研制提供了新的途徑。
文檔編號(hào)C07D239/94GK101402611SQ200810219079
公開日2009年4月8日 申請(qǐng)日期2008年11月14日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月14日
發(fā)明者馬玉卓, 洋 張, 朱玉香, 劉鷹翔 申請(qǐng)人:廣東藥學(xué)院