專利名稱：一種梓醇的提取方法
技術領域：
本發(fā)明涉及中藥有效成分的提取方法，具體涉及從地黃或地黃莖中提取梓醇的提 取方法。
背景技術：
梓醇是地黃最主要有效成分之一，是其“滋陰，，作用的有效活性成分，為一種不很 穩(wěn)定的環(huán)烯醚萜苷類化合物，常與多種環(huán)烯醚萜苷類成分如桃葉珊瑚苷和胡黃連苷等同時 存在于植物組織中，具有利尿、緩瀉、降血糖、保肝及抗衰老等多種藥理活性。研究表明，在 暫時缺血情況下，梓醇有顯著的神經(jīng)保護功能，并發(fā)現(xiàn)梓醇能激活腦神經(jīng)元，可以治療因外 傷、代謝障礙、腦缺血和帕金森氏病等引起的腦神經(jīng)病。地黃為玄參科植物地黃Rehmarmia glutinosa Libsch的塊根。是常用補益中藥之 一，臨床應用極為廣泛。據(jù)文獻報道，主要成分含有植物留醇類、糖類、氨基酸、梓醇等。梓 醇是地黃中含量最高的環(huán)烯醚萜單糖苷，為地黃的主要活性，現(xiàn)代藥理研究表明其具有降 血糖、利尿、緩瀉、抗癌、抗炎等作用，另外對腦缺血受損神經(jīng)還有保護作用，有望成為潛在 的治療帕金森病和早老性癡呆的藥物。國內(nèi)專家學者的研究和發(fā)明主要是從地黃根中提取梓醇，匡巖巍等(匡巖巍，盧 兗偉，吳祖澤.大孔吸附樹脂分離純化鮮地黃葉中梓醇的初步研究，軍事醫(yī)學科學院院刊， 2009,33(6),550-553)研究了采用大孔吸附樹脂從鮮地黃葉中提取分離梓醇的方法。地黃 莖通常是在種植和收割時，僅作為飼料、肥料，甚至往往是被廢棄的。通過研究發(fā)現(xiàn)，相比地 黃根，在地黃莖中梓醇含量比較多，糖類相對較少，能夠有效的作為梓醇提取的材料。本方 法利用廢棄的地黃莖，采用廢物利用的新工藝，具有很好的實用價值和經(jīng)濟效益。梓醇在加熱條件下易水解和氧化，所以現(xiàn)有技術中在提取梓醇方面有很大限制。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是為解決上述現(xiàn)有技術提取時間長，轉(zhuǎn)化率低，技術操作復雜 等問題，提供一種操作便捷、轉(zhuǎn)化的可靠性、產(chǎn)品回收率高，可達到工業(yè)化生產(chǎn)要求的梓醇 的提取方法。工藝研究(1)選用鮮地黃或鮮地黃莖，洗凈、切片，以質(zhì)量計，加入0. 1-0. 5%的復合酶溶液 酶解1-3小時，然后加5-20質(zhì)量倍數(shù)的70-95%乙醇，常溫下在勻漿提取裝置中勻漿提取 5-10min,連續(xù)2次或2次以上，勻漿液轉(zhuǎn)移后在超聲波作用下5-30min，合并勻漿液，濾渣取 液，濾液減壓濃縮成稠浸膏。(2)將稠浸膏用2倍以上的水稀釋，加到預先用95%乙醇浸泡過的大孔樹脂，洗 脫，將洗脫液減壓濃縮成浸膏；(3)在浸膏中加入拌樣硅膠，攪拌均勻，過硅膠柱，用混合溶劑沖洗柱子，收集混合 溶劑，減壓濃縮，再用甲醇重結晶，得到純度達到99 %的梓醇純品。
步驟O)中洗脫時用5-20%的乙醇洗脫。步驟O)中洗脫時也可以先用水洗，水的量為稠浸膏量的0.01-0. 5倍，再用 5-20%的乙醇洗脫。步驟(3)中混合溶劑為甲醇乙酸乙酯1-3 1或者正丁醇乙酸乙酯甲醇 2-4 1-3 1。所用超聲波功率為80-100W的超聲波。所述復合酶溶液是質(zhì)量百分含量為0. 1-0. 5 %的溶液，所述復合酶溶液質(zhì)量 濃度為0. 1-0.5% ；所述復合酶為纖維素酶與酒曲酶、淀粉酶、蛋白酶的混合物；纖維素 酶與酒曲酶、淀粉酶、蛋白酶按照質(zhì)量計算，比例為1 0.5-1 0.01-0.5 0.01-1 ； 所述復合酶中，纖維素酶與酒曲、淀粉酶、蛋白酶按照質(zhì)量計算，優(yōu)選比例為 1 0. 6-0. 8 0. 05-0. 2 0. 05-0. 5。所述蛋白酶優(yōu)選酸性蛋白酶。所述酶解時間1-3小時，酶解溫度40_50°C，酶解時Wi值為4_6。Ph值通過鹽酸或硫酸調(diào)節(jié)，優(yōu)選鹽酸。本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明在總結前人的工作和自己探索的基礎上，經(jīng)反復的研究改進，采用酶法協(xié) 同超聲波法進行提取，解決了常規(guī)生產(chǎn)中梓醇在加熱條件下易水解和氧化的難題，使原料 中的有效物質(zhì)最大程度的被提取出來，極大地地提高了生產(chǎn)效率和轉(zhuǎn)化率，使得產(chǎn)品質(zhì)量 更進一步提高，且產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。在提取過程中加入抗氧化劑，進一步解決了常規(guī)生產(chǎn)中梓醇在加熱條件下易水解 和氧化的難題，提高了產(chǎn)率和產(chǎn)量，梓醇遇到部分酶，如β葡萄糖苷酶，可以使梓醇降解， 本發(fā)明中采用復合酶，本復合酶很好的破壞細胞壁等影響梓醇析出的壁壘，提高生產(chǎn)效率， 并且因為復合酶中各種成分相互作用避免了使梓醇降解的情況。本發(fā)明可以利用廢棄的地黃莖，采用廢物利用的新工藝，具有很好的實用價值和 經(jīng)濟效益，適宜推廣應用。
具體實施例方式下面結合實施例來進一步說明本發(fā)明，但并不作為對本發(fā)明的限定。實施例1(1)選用IOOkg鮮地黃莖，洗凈、切片，以質(zhì)量計，加入0.2kg的復合酶溶液酶解2 小時，然后加500kg的75%乙醇，分為3份，加入1份在酶解后的原料中，常溫下在勻漿提取 裝置中勻漿提取8min，轉(zhuǎn)移勻漿液，然后將剩余的乙醇溶液中的1份加入勻漿后的物質(zhì)中， 重復勻漿過程，勻漿過程完成后，再次重復操作，勻漿液轉(zhuǎn)移后在超聲波作用下15min，合并 勻漿液，濾渣取液，濾液減壓濃縮成稠浸膏；得到5kg稠浸膏。(2)將稠浸膏用IOkg水稀釋，加到預先用95%乙醇浸泡過的大孔樹脂中，過樹脂， 然后洗脫，將洗脫液減壓濃縮成浸膏，得到3kg浸膏；(3)在浸膏中加入拌樣硅膠，攪拌均勻，過硅膠柱，用甲醇乙酸乙酯2 1的混合 溶劑沖洗硅膠柱，收集混合溶劑，減壓濃縮，再用甲醇重結晶，得到梓醇純品。所述步驟O)中洗脫時先用少量水洗，再用5-20%的乙醇洗脫。所用水的量為
40. 5kg。所用超聲波功率為80-100W的超聲波。所述復合酶溶液為質(zhì)量百分含量為0. 2 %的溶液，所述復合酶中，纖維素酶與酒 曲、淀粉酶、蛋白酶按照質(zhì)量計算，比例為1 0.8 0. 1 0.3。所述酶解時間1-3小時，酶解溫度40_50°C，酶解時Wi值為4_6。產(chǎn)量為368g，產(chǎn)率達90%以上，產(chǎn)品純度為99. 13%。原料選用河南武陵生產(chǎn)的地黃的莖，經(jīng)精密測量，原料中的梓醇含量不超過 4. 2mg/g0實施例2為避免梓醇的損失，直接用10%乙醇洗脫，而不用水先洗，可提高產(chǎn)量、提高制備 樣品純度。其余同實施例1。產(chǎn)量為370g，產(chǎn)品純度為99. 07%。實施例3所述酶解液為纖維素酶、酒曲酶、淀粉酶、酸性蛋白酶復合酶，比例為 1 0. 6 0. 2 0.3，其余同實施例2。產(chǎn)量為365g，產(chǎn)品純度為99. 12%。實施例4(1)選用IOOkg鮮地黃，洗凈、切片，以質(zhì)量計，加入0. Ikg的復合酶溶液酶解1-3 小時，然后加800kg質(zhì)量倍數(shù)的95%乙醇，常溫下在勻漿提取裝置中勻漿提取5min，連續(xù)4 次，勻漿液轉(zhuǎn)移后在超聲波作用下5min，合并勻漿液，濾渣取液，濾液減壓濃縮成稠浸膏；(2)將稠浸膏用2倍以上的水稀釋，加到預先用95%乙醇浸泡過的大孔樹脂，先用 0. 8kg水洗，再用5-20%的乙醇洗脫；將洗脫液減壓濃縮成浸膏；(3)在浸膏中加入拌樣硅膠，攪拌均勻，過硅膠柱，用正丁醇乙酸乙酯甲醇 2:1: 1混合溶劑沖洗柱子，收集混合溶劑，減壓濃縮，再用甲醇重結晶，得到梓醇純品。 其余同實施例1，產(chǎn)量為367g，產(chǎn)品純度為98.9%。實施例5(1)選用鮮地黃和鮮地黃莖，洗凈、切片，以質(zhì)量計，加入0. 5kg的復合酶溶液酶解 3小時，然后加20質(zhì)量倍數(shù)的70%乙醇，常溫下在勻漿提取裝置中勻漿提取lOmin，連續(xù)5 次，勻漿液轉(zhuǎn)移后在超聲波作用下30min，合并勻漿液，濾渣取液，濾液減壓濃縮成稠浸膏；(2)將稠浸膏用5倍的水稀釋，加到預先用95%乙醇浸泡過的大孔樹脂，洗脫，將 洗脫液減壓濃縮成浸膏；(3)在浸膏中加入拌樣硅膠，攪拌均勻，過硅膠柱，用正丁醇乙酸乙酯甲醇 4:3: 1混合溶劑沖洗柱子，收集混合溶劑，減壓濃縮，再用甲醇重結晶，得到梓醇純品。所述步驟(2)中洗脫時用5-20%的乙醇洗脫。其余同實施例1，產(chǎn)量為366g，產(chǎn)品 純度為98.9%。實施例6-13所述酶解液為纖維素酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶的復合酶以下表比例的 組合；酶解溫度，酶解時間也如下表所示，其余同實施例2。
權利要求
1.一種梓醇的提取方法，其特征在于所述工藝如下(1)選用鮮地黃或鮮地黃莖，洗凈、切片，以質(zhì)量計，加入0.1-0. 5%的復合酶溶液酶 解1-3小時，然后加5-20質(zhì)量倍數(shù)的70-95%乙醇，常溫下在勻漿提取裝置中勻漿提取 5-10min,連續(xù)2次或2次以上，勻漿液轉(zhuǎn)移后在超聲波作用下5-30min，合并勻漿液，濾渣取 液，濾液減壓濃縮成稠浸膏；(2)將稠浸膏用2倍以上的水稀釋，加到預先用95%乙醇浸泡過的大孔樹脂，洗脫，將 洗脫液減壓濃縮成浸膏；(3)在浸膏中加入拌樣硅膠，攪拌均勻，過硅膠柱，用混合溶劑沖洗柱子，收集混合溶 劑，減壓濃縮，再用甲醇重結晶，得到梓醇純品。
2.如權利要求1所述的一種梓醇的提取方法，其特征在于所述步驟O)中洗脫時用 5-20%的乙醇洗脫。
3.如權利要求2所述的一種梓醇的提取方法，其特征在于所述步驟O)中洗脫時先 用水洗，再用5-20%的乙醇洗脫。
4.如權利要求1所述的一種梓醇的提取方法，其特征在于所用超聲波功率為80-100W 的超聲波；所述步驟(3)中混合溶劑為甲醇乙酸乙酯1-3 1或者正丁醇乙酸乙酯 甲醇 2-4 1-3 1。
5.如權利要求1所述的一種梓醇的提取方法，其特征在于所述復合酶溶液質(zhì)量濃度 為0. 1-0. 5% ；所述復合酶為纖維素酶與酒曲酶、淀粉酶、蛋白酶的混合物；纖維素酶與酒 曲酶、淀粉酶、蛋白酶按照質(zhì)量計算，比例為1 0.5-1 0.01-0.5 0.01-1;酶解時間為 0. 5-24小時，酶解溫度為15-700C O
6.如權利要求5所述的一種梓醇的提取方法，其特征在于所述復合酶中，纖維素酶與 酒曲、淀粉酶、蛋白酶按照質(zhì)量計算，比例為1 0.6-0.8 0. 05-0. 2 0.05-0.5。
7.如權利要求5所述的一種梓醇的提取方法，其特征在于所述酶解時間1-3小時，酶 解溫度40-50°C，酶解時Wi值為4-6。
8.如權利要求5所述的一種梓醇的提取方法，其特征在于所述蛋白酶為酸性蛋白酶。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物制備領域，是一種梓醇的制備方法，解決了現(xiàn)有技術梓醇的制備轉(zhuǎn)化率低，產(chǎn)量低，產(chǎn)品品質(zhì)不好的問題，工藝如下原料洗凈、切片，后酶解，然后加乙醇，常溫下在勻漿提取裝置中勻漿提取2次或2次以上，合并勻漿液，濾渣取液，濾液減壓濃縮，稠浸膏加水稀釋，加到大孔樹脂中，洗脫，將洗脫液減壓濃縮成浸膏；在浸膏中加入拌樣硅膠，攪拌均勻，過硅膠柱，洗脫液減壓濃縮，再用甲醇重結晶，得到梓醇純品。通過本發(fā)明的方法極大地提高了生產(chǎn)效率和轉(zhuǎn)化率，促使原料中的有效物質(zhì)更多的轉(zhuǎn)化為梓醇，使得產(chǎn)品質(zhì)量更進一步提高，且產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07H1/08GK102127131SQ20101052943
公開日2011年7月20日 申請日期2010年11月3日 優(yōu)先權日2010年11月3日
發(fā)明者張守力 申請人:張守力