專利名稱：一種牛蒡子苷的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種牛蒡子苷的制備方法。
背景技術(shù)：
牛蒡子為菊科植物牛蒡的干燥成熟果實，主要用于治療風(fēng)熱感冒、麻疹、癰腫瘡毒等癥，為我國傳統(tǒng)中藥。牛蒡子含有木質(zhì)素類化合物主要成分是牛蒡子苷?，F(xiàn)代藥理研究表明，牛蒡子具有抗菌、抗腫瘤、抗腎病變、增強機體免疫功能、抗高血壓、降血糖等藥理作用。牛蒡子苷及其體內(nèi)口服轉(zhuǎn)化成分牛蒡子苷元是其主要活性成分，可用于相關(guān)的藥品和功能食品領(lǐng)域。參見王潞等“牛蒡子苷及牛蒡子苷元的藥理作用研究進展”(中草藥，2008 467-470.)及相關(guān)文獻。近年來，牛蒡子苷的工業(yè)化制備工藝受到重視，相關(guān)文獻主要集中在我國。王勁等“牛蒡苷的制備與純化”(中草藥，2002 783.)采用80%乙醇提取、正丁醇萃取、大孔吸附樹脂純化、硅膠H柱層析精制的工藝路線，從牛蒡子中制備得到高純度牛蒡子苷。龔又明等“大孔樹脂法純化牛蒡子中有效部位的工藝”(復(fù)旦學(xué)報醫(yī)學(xué)版，2010 :487-494.) 通過樹脂工藝的考察，采用的最佳工藝為牛蒡子經(jīng)水提、濃縮、ZTC澄清劑澄清、過濾、二次濃縮獲得提取液，再用HPD100大孔樹脂吸附，水洗脫除雜，40 %乙醇洗脫，獲得提取物牛蒡子苷含量為67. 05 %。竇德強等“一種制備牛蒡子苷及其苷元的方法”(中國專利號 200610046797. 4)采用聚酰胺柱從牛蒡子提取液中分離純化牛蒡子苷及其苷元的方法。吳世華等“一種牛蒡子苷的制備方法”(中國專利申請?zhí)?01010200981. 6)公開的牛蒡子苷的制備方法，其步驟如下將牛蒡子粉碎用水或醇溶液提??；提取液直接進入吸附柱，進行吸附和富集，而后依次用水和醇溶液進行洗脫，減壓濃縮得到牛蒡子苷的流分用單一有機溶劑-鹽的水溶液形成的兩廂體系進行逆流色譜分離，得到含鹽的牛蒡子苷流分，然后用大孔吸附樹脂或離子交換樹脂吸附除去鹽，即可。劉東鋒等“一種從牛蒡子中制備牛蒡子苷的方法”(中國專利申請?zhí)?01010017680. X)采用以牛蒡子藥材為原料，粉碎，乙醇回流提取2-3次，活性炭脫色，微濾、超濾后濃縮至低濃度乙醇，調(diào)pH，大孔吸附樹脂吸附，經(jīng)水及乙醇洗脫，收集牛蒡子苷流分，回收試劑，放置結(jié)晶，石油醚洗滌，丙酮乙醚重結(jié)晶，制備高純度牛蒡子苷。王峰等“一種牛蒡子苷的制備方法”(中國專利申請?zhí)?01010554175. 9)采用CO2超臨界萃取，結(jié)合的乙酸乙酯-水(10 幻混合溶劑進行多級逆流萃取，以及大孔吸附樹脂柱吸附，丙酮結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥，制備高純度牛蒡子苷。通過長期的牛蒡子苷制備工藝研究，現(xiàn)有工藝多采用有機溶劑萃取、大孔樹脂純化、重結(jié)晶等多種技術(shù)方案，可獲得較高純度牛蒡子苷。但由于牛蒡子熱回流提取液十分渾濁，雜質(zhì)較多，因而一般采用有機溶劑脫脂或澄清劑處理；同時由于牛蒡子苷中含有內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)，在加熱條件下容易水解，給后期純化處理、純度和收率帶來負(fù)面影響。現(xiàn)有工藝一般產(chǎn)品純度低于70 %，采用重結(jié)晶技術(shù)得率較低。探索更優(yōu)化的牛蒡子苷產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)工藝，仍然是目前有待解決的技術(shù)難題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種純度大于90%、易于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的牛蒡子苷制備工藝。本發(fā)明提供的制備牛蒡子苷的方法包括以下步驟(1)選取牛蒡子藥材，采用水進行提取，提取液合并，過濾，得牛蒡子提取液；(2)由(1)所得牛蒡子提取液，采用預(yù)處理好的大孔樹脂進行吸附，先用水洗，再用乙醇-水混合溶媒按10-30^^40-75%乙醇梯度洗脫，收集40-75%乙醇洗脫部位洗脫液，濃縮，靜置，過濾，得牛蒡子苷洗脫液；(3)由( 所得牛蒡子苷洗脫液，采用預(yù)處理好的脫色大孔樹脂進行吸附，先用水洗，再用乙醇-水混合溶媒按10-30^^40-75%乙醇梯度洗脫，收集40-75%乙醇洗脫部位洗脫液，濃縮，過濾，得牛蒡子苷濃縮液；(4)由( 所得牛蒡子苷濃縮液，加入適量與水混溶的有機溶劑，在一定溫度下結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥，即可獲得純度大于90%的牛蒡子苷成品。所述工藝步驟(1)中提取溶媒選用水提取，提取液合并，經(jīng)沉淀，過濾后即可得到牛蒡子提取液。所述提取方法為回流提取、超聲提取、微波輔助提取、逆流提取中的任意一種。加水總量為按藥材干重計的15-40倍，提取次數(shù)1-3次。所述工藝步驟⑵中，所述大孔樹脂優(yōu)選非極性或弱極性大孔樹脂，大孔樹脂梯度洗脫時優(yōu)選按10-30%、50-70%乙醇梯度洗脫。所述工藝步驟(3)中梯度洗脫時優(yōu)選按10-30^^40-70%乙醇梯度洗脫。所述洗脫液濃縮后，過濾前可再經(jīng)活性炭或聚酰胺脫色處理。所述工藝步驟中所述有機溶劑優(yōu)選丙酮、甲醇、乙醇、水中的一種，所述溫度優(yōu)選0-5度或室溫。所述牛蒡子苷成品純度大于90%。本發(fā)明通過牛蒡子苷工藝研究，所完成的組合技術(shù)路線有下特色和優(yōu)勢(1)藥材提取采用水提液直接上柱工藝，一方面降低了牛蒡子苷后處理過程中的熱降解，另一方面直接降低了能源成本；( 采用優(yōu)選的大孔樹脂梯度洗脫工藝，保證了樹脂純化工藝效率最大化，該工序純化產(chǎn)品含量可提高到55%以上；C3)創(chuàng)新性應(yīng)用大孔樹脂脫色工序， 結(jié)合后續(xù)重結(jié)晶處理工序，獲得成品純度大于90%，收率大幅提高。本發(fā)明工藝路線經(jīng)濟合理、得率高、能耗低、容易實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，同時避免了其它有機溶劑的使用，對環(huán)境無污染。本發(fā)明內(nèi)容是通過大量實驗研究、工藝優(yōu)化分析完成的，以下述具體實施例進行說明。
具體實施例方式本發(fā)明所述的牛蒡子苷是按以下實施例所表示的方法制造，所涉及到的方法是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠掌握和運用的技術(shù)手段。但以下實施例不得理解為任何意義上的對本領(lǐng)域發(fā)明權(quán)利要求的限制。實施例1牛蒡子藥材200克，經(jīng)20倍水分兩次超聲提取(10倍、10倍)，每次1小時，提取液靜置，過濾，濾液合并，上DlOl柱(柱體積300ml/BV)，上樣后依次用2BV水、2BV 30%乙醇、 3BV 75%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫部分，濃縮，濃縮液加水稀釋至200ml，上LSA-700樹脂柱(柱體積200ml/BV)，上樣后依次用2BV水、2BV 60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫液， 濃縮至50ml，室溫下加入2%聚酰胺攪拌30min，過濾，濾液加入1倍量的丙酮在0 5°C 結(jié)晶過夜，過濾，干燥，得牛蒡子苷5. 17g，按中國藥典2010版1部采用HPLC法檢測純度 96. 3%。實施例2牛蒡子藥材200克，經(jīng)30倍水分兩次回流提取(15倍、15倍)，每次2小時，提取液靜置，過濾，濾液合并，上LX38柱(柱體積300ml/BV)，上樣后依次用2BV水、2BV 10%乙醇、3BV 40%乙醇洗脫，收集40%乙醇洗脫部分，濃縮，濃縮液加水稀釋至200ml，上DDW-16 樹脂柱(柱體積200ml/BV)，上樣后依次用2BV水、2BV 60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫液，濃縮至50ml，過濾，濾液加入2倍量的乙醇在0 5°C結(jié)晶過夜，過濾，干燥，得牛蒡子苷 5. 79g，純度 95. 8%。實施例3牛蒡子藥材200克，經(jīng)40倍水分兩次微波加熱提取(20倍、20倍)，每次1小時， 提取液靜置，過濾，濾液合并，上AB-8柱(柱體積300ml/BV)，上樣后依次用2BV水、2BV 25%乙醇、3BV 60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫部分，濃縮，濃縮液加水稀釋至200ml，上 D-318樹脂柱(柱體積200ml/BV)，上樣后依次用2BV水、2BV 50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，濃縮至50ml，加入0. 5%活性炭煮沸30min，過濾，濾液加入1倍量的甲醇在0 5°C結(jié)晶過夜，過濾，干燥，得牛蒡子苷4. 98g，純度98. 7%。實施例4牛蒡子藥材200kg，經(jīng)20倍水分兩次回流提取(10倍、10倍)，每次2小時，提取液靜置，過濾，濾液合并，上DlOl柱(柱體積400L/BV)，上樣后依次用3BV水、2BV 25%乙醇、 3BV 60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫部分，濃縮，濃縮液加水稀釋至200ml，上DDW-16樹脂柱(柱體積200ml/BV)，上樣后依次用2BV水、2BV 50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液， 濃縮至100L，加入0. 5%活性炭煮沸30min，過濾，濾液加入0. 5倍量的乙醇在0 5°C結(jié)晶過夜，過濾，干燥，得牛蒡子苷4. 67kg，純度93. 7 %。
權(quán)利要求
1.一種牛蒡子苷的制備方法，其特征在于所述牛蒡子苷的制備方法如下(1)選取牛蒡子藥材，采用水進行提取，提取液合并，過濾，得牛蒡子提取液；(2)由(1)所得牛蒡子提取液，采用預(yù)處理好的大孔樹脂進行吸附，先用水洗，再用乙醇-水混合溶媒按10-30%、40-75%乙醇梯度洗脫，收集40-75%乙醇洗脫部位洗脫液，濃縮，靜置，過濾，得牛蒡子苷洗脫液；(3)由( 所得牛蒡子苷洗脫液，采用預(yù)處理好的脫色大孔樹脂進行吸附，先用水洗， 再用乙醇-水混合溶媒按10-30%、40-75%乙醇梯度洗脫，收集40-75%乙醇洗脫部位洗脫液，濃縮，過濾，得牛蒡子苷濃縮液；(4)由( 所得牛蒡子苷濃縮液，加入適量與水混溶的有機溶劑，在一定溫度下結(jié)晶， 分離結(jié)晶，洗滌、干燥，即可獲得純度大于90%的牛蒡子苷成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述牛蒡子苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(1)中所述提取方法為回流提取、超聲提取、微波輔助提取、逆流提取中的任意一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述牛蒡子苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(1)中選用水進行提取，所加水總量為按藥材干重計的15-40倍，提取次數(shù)1-3次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述牛蒡子苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟O)中所述牛蒡子提取液不經(jīng)濃縮處理。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述牛蒡子苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟O)中所述大孔樹脂優(yōu)選非極性或弱極性大孔樹脂，所述乙醇-水混合溶媒優(yōu)選按10-30%、50-70% 乙醇梯度洗脫。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述牛蒡子苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(3)中乙醇-水混合溶媒優(yōu)選按10-30^^40-70%乙醇梯度洗脫。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述牛蒡子苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(3)中所述洗脫液濃縮后，過濾前可再經(jīng)活性炭或聚酰胺脫色處理。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述牛蒡子苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟中所述有機溶劑優(yōu)選丙酮、甲醇、乙醇、水中的一種。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述牛蒡子苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟中所述溫度優(yōu)選0-5度或室溫。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述牛蒡子苷的制備方法，其特征在于其制備方法步驟(4)中所述牛蒡子苷成品純度大于90%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種牛蒡子苷的制備方法，其主要步驟如下將牛蒡子藥材用水提取，提取液過濾后直接進入大孔樹脂柱進行吸附和富集，而后依次用水和乙醇溶液進行梯度洗脫，收集所需洗脫液經(jīng)濃縮過濾，經(jīng)脫色樹脂柱處理得到牛蒡子苷粗品，用含水混合溶劑結(jié)晶，即可獲得純度大于90％的成品。本發(fā)明方法工藝簡潔、可連續(xù)化操化、便于自動化；溶劑便于回收和循環(huán)利用，能耗低，產(chǎn)品純度高，易于實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號C07H15/26GK102351926SQ201110299698
公開日2012年2月15日 申請日期2011年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月9日
發(fā)明者何欽, 劉江云, 唐靖雯, 彭曉國, 李孟林, 梁斌, 王國麗 申請人:蘇州大學(xué)