專利名稱：西羅莫司粗晶的制備方法
西羅莫司粗晶的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物的制備方法，尤其涉及一種西羅莫司粗晶的制備方法。背景技術(shù)：
西羅莫司(sirolimus)又稱雷帕霉素(rapamycin)，1975年，由力口拿大Ayerst 實(shí)驗(yàn)室的Vezina等人從太平洋fesler島土壤樣品中分離的吸水鏈霉菌(Str印tomyees hygroscopicus)發(fā)酵液中首次得到。西羅莫司是一種親脂性含氮36元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素， 分子式C51H79NO13,分子量914. 2，其結(jié)構(gòu)式如下1977年Morris等人首先發(fā)現(xiàn)西羅莫司具有免疫抑制作用，1989年開始把西羅莫司作為治療器官移植的排斥反應(yīng)的新藥進(jìn)行使用。它是目前世界上最新的強(qiáng)效免疫抑制劑，它的免疫抑制活性比現(xiàn)行臨床廣泛使用的環(huán)孢素強(qiáng)數(shù)十倍，不但毒性低、用量小， 而且與環(huán)孢素有協(xié)同免疫抑制作用，在臨床上西羅莫司與環(huán)孢素聯(lián)合使用。與環(huán)孢素和 Π(506(他克莫司)相比，西羅莫司是一種療效好、低毒、無(wú)腎毒性的免疫抑制劑。1991年， 在酵母中發(fā)現(xiàn)了雷帕霉素的作用靶點(diǎn)并命名為“雷帕霉素靶點(diǎn)(TOR)”。其在哺乳動(dòng)物中發(fā)現(xiàn)的唯一的同質(zhì)體后來(lái)被克隆，稱為“哺乳類動(dòng)物雷帕霉素靶點(diǎn)(mTOR)”?，F(xiàn)在雷帕霉素不但作為器官移植抗排斥藥物和治療冠狀動(dòng)脈再狹窄的支架涂層在臨床上應(yīng)用，而且已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室中被證實(shí)可抑制許多癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，包括橫紋肌肉瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、肺小細(xì)胞癌、 骨癌、胰臟癌、白血病癌細(xì)胞及B細(xì)胞淋巴癌等。西羅莫司具有異構(gòu)體B和異構(gòu)體C，其中異構(gòu)體B為主要活性成分，兩種異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種西羅莫司粗晶的制備方法，其特征在于將西羅莫司菌絲體的浸提液采用下述步驟進(jìn)行操作(1)吸附將西羅莫司菌絲體的浸提液減壓濃縮成濃縮物，接著濃縮物中加入固體吸附劑，并攪拌、靜置，然后傾浙除去液體得到殘余物，其中，固體吸附劑加入量以所述浸提液的體積為標(biāo)準(zhǔn)，每升浸提液加入0. 001 0. 005kg固體吸附劑；(2)萃取加入浸提液體積的0.05 0. 5倍的有機(jī)溶劑至經(jīng)過(guò)(1)處理所得的殘余物中，并攪拌，然后過(guò)濾或離心除去固體，再將所得溶液靜置以使溶液分為水、有機(jī)溶液兩層， 并除去水層以獲得有機(jī)溶液；(3)洗滌濃縮加入飽和食鹽水至經(jīng)過(guò)( 處理所得有機(jī)溶液中，飽和食鹽水與有機(jī)溶液的體積比為0.1 1 1，對(duì)有機(jī)溶液進(jìn)行洗滌，并除去水層，得到剩余物；再加無(wú)水硫酸鈉至上述剩余物中干燥3小時(shí)，然后過(guò)濾以獲得濾液，最后將濾液減壓濃縮，得黑褐色油狀物；(4)洗滌加非極性溶劑至經(jīng)過(guò)C3)處理所得的油狀物中，并攪拌、靜置，然后除去非極性溶劑以獲得殘留物，其中，非極性溶劑與油狀物的體積比為0. 5 3 1 ；(5)結(jié)晶加結(jié)晶溶劑至經(jīng)過(guò)(4)處理所得的殘留物中，并攪拌溶解，即獲得西羅莫司溶液，結(jié)晶溶劑與所述殘留物的體積比為0.5 3 1 ；接著將西羅莫司溶液在室溫下放置 2 10h，然后過(guò)濾除去液體，得到西羅莫司晶體；(6)洗晶干燥用所述結(jié)晶溶劑洗滌( 中獲得的西羅莫司晶體三次，然后將洗滌后的西羅莫司晶體置于45°C下減壓干燥4h，即得產(chǎn)品；(7)檢測(cè)采用高效液相色譜對(duì)(6)中獲得的產(chǎn)品的純度進(jìn)行檢測(cè)。
2.如權(quán)利要求1所述的西羅莫司粗晶的制備方法，其特征在于所述固體吸附劑為硅藻土、硅膠中的一種或幾種；所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷、甲苯、乙酸丁酯、乙酸異丙酯中的一種或幾種；所述非極性溶劑為石油醚、己烷、庚烷、環(huán)己烷、戊烷中的一種或幾種；所述結(jié)晶溶劑為乙醚、甲基叔丁基醚、異丙醚、丙醚中的一種或幾種。
3.如權(quán)利要求1所述的西羅莫司粗晶的制備方法，其特征在于所述高效液相色譜的檢測(cè)條件為色譜柱為Kromasil C18柱；色譜柱規(guī)格是5 μ m、4. 6mmX 250mm ；流動(dòng)相為甲醇、乙腈和水組成的混合溶液，且各組成成分的體積比為甲醇乙腈水=70 15 30 ； 檢測(cè)波長(zhǎng)277nm ；柱溫40°C ；流速lml/min。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種西羅莫司粗晶的制備方法，包括吸附、萃取、洗滌濃縮、洗滌、結(jié)晶、洗晶干燥等步驟，即可得到西羅莫司粗晶，本發(fā)明不需要經(jīng)過(guò)柱層析等一系列繁雜工序，而是通過(guò)簡(jiǎn)單常規(guī)的實(shí)驗(yàn)操作就可得到西羅莫司粗晶，操作簡(jiǎn)單，可進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明極大程度地提高了西羅莫司的純度和含量，并提高了西羅莫司中異構(gòu)體B與異構(gòu)體C的比值。目前市場(chǎng)上未見西羅莫司以粗晶形式存在的產(chǎn)品，采用本發(fā)明制得的西羅莫司粗晶具有方便儲(chǔ)存和運(yùn)輸?shù)膬?yōu)點(diǎn)，大大便利了廣大研發(fā)人員或生產(chǎn)人員。
文檔編號(hào)C07D498/18GK102372726SQ201110350009
公開日2012年3月14日 申請(qǐng)日期2011年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月8日
發(fā)明者余輝, 楊國(guó)新, 程元榮, 金東偉, 陳夏琴, 陳有鐘, 黃捷 申請(qǐng)人:福建省微生物研究所