專利名稱：從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法
技術領域：
本發(fā)明屬從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法。
背景技術：
隨著植物多酚化學和藥理學的發(fā)展，人們逐漸認識到多酚是一類具有獨特生理活性和藥理活性的天然產(chǎn)物。隨著當前“追求自然”消費觀念的興起，多酚在制藥、生化、日化、 食品以及精細化工等高科技領域具有廣闊的應用前景。蔗梢是蔗莖生長點(蔗黃)所在部位，當甘蔗發(fā)育過程(除開花以后)，蔗莖的養(yǎng)料盡量提供給生長點，故含有多種無機元素、蛋白質(zhì)、淀粉、維生素、氨基酸、酚類、酶類等。 甘蔗中的多酚含量很高，尤其是蔗梢部分。目前已經(jīng)有多種植物的多酚被人們開發(fā)利用，但是有些多酚含量高的植物用來做提取原料成本較高。在廣西每年有幾百萬噸的蔗梢，除少部分作飼料或留種以外，大部分作為柴草焚燒，對其加工利用的程度不大，沒有發(fā)揮資源優(yōu)勢。蔗梢是一種提取多酚的廉價原料，可根據(jù)甘蔗蔗梢的成分將其榨汁提取多酚類物，提后的副產(chǎn)物還可以發(fā)酵酒精和制作蔗渣飼料等，充分開發(fā)利用其潛在價值，對帶動地方經(jīng)濟是大有益處的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種能變廢為寶、充分利用資源、用甘蔗梢做原料提取酚類物質(zhì)的方法。本發(fā)明以如下技術方案解決上述技術問題—種從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其工藝步驟為步驟1將甘蔗梢除去外面老葉和泥土等雜質(zhì)并經(jīng)熱燙滅酶，切成小段，放入破碎機中破碎，取破碎好的甘蔗梢用乙醇浸提，將浸提液和蔗梢壓出汁合并，過濾，加熱濃縮合并汁，所得濃縮物為粗提多酚，回收揮發(fā)的有機溶劑，用福林法測定多酚含量；步驟2取聚酰胺，以乙醇浸泡，不斷攪拌，除去氣泡后裝入空柱中；聚酰胺裝入空柱后，先后用乙醇、NaOH水溶液、蒸餾水、乙酸水溶液洗脫，最后用蒸餾水洗脫至pH中性，得到聚酰胺層析柱；步驟3取初始質(zhì)量濃度為2. 06 17. Hmg · mL—1的粗提多酚溶液，用濃鹽酸調(diào)節(jié) PH為4，用0. 45 μ m濾膜過濾，之后上樣到步驟2所得的聚酰胺層析柱，放置過夜，使充分吸附；先用純化水進行洗脫，除去極性較大雜質(zhì)成分，洗至Molish反應為陰性后，再用乙醇溶液進行洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到純品多酚。
1步驟1中的甘蔗梢要經(jīng)過熱燙滅酶處理，熱燙的溫度為80士2 °C，清水作為熱燙液，熱燙時間為aiiin;將熱燙好的甘蔗梢浸入冰水混合物中，使甘蔗梢溫度降至10°C以下；經(jīng)冷卻后的甘蔗梢立即進行浙水，以免殘留水進入提取環(huán)節(jié)引起誤差。
2
步驟1所述的甘蔗梢切成0. 4 0. 7cm的小段，浸提溫度20 70°C。
3步驟1所述的浸提的溫度為55 65°C，浸提劑乙醇溶液的質(zhì)量百分濃度為55 65%， 料液比為1 2 4，浸取時間為1 3h。
4步驟1所述的福林法測定多酚含量的測定方法用單寧酸的當量值TAE表示；FD試劑體積為1 4mL，F(xiàn)D試劑與飽和Na2CO3溶液的體積比為2 1 6，室溫20 30°C，反應時間為0. 5 1. 5h。5步驟2制備聚酰胺層析柱時，聚酰胺的孔徑為150 180 μ m，pH值為2 6，上樣流速為2 6mL · mirT1，實驗情況進入穩(wěn)定所需時間為1. 5 2. 5h ；聚酰胺上空柱后，用 3 4倍體積的質(zhì)量百分濃度為90% 95%的乙醇洗脫，洗至洗脫液透明并在蒸干后無殘渣或極少殘渣；再依次用2 2. 5倍體積的質(zhì)量百分濃度為5% NaOH水溶液、1倍體積的蒸餾水、2 2. 5倍體積的質(zhì)量百分濃度為10%的乙酸水溶液洗脫，最后用蒸餾水洗脫至pH 中性。
6步驟3中的聚酰胺層析柱充分吸附后，用質(zhì)量百分濃度為20% 80%的乙醇溶液進行洗脫。
7總酚含量測定公式為
權(quán)利要求
1.一種從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其特征是工藝步驟為步驟1將甘蔗梢除去外面老葉和泥土等雜質(zhì)并經(jīng)熱燙滅酶，切成小段，放入破碎機中破碎，取破碎好的甘蔗梢用乙醇浸提，將浸提液和蔗梢壓出汁合并，過濾，加熱濃縮合并汁， 所得濃縮物為粗提多酚，回收揮發(fā)的有機溶劑，用福林法測定多酚含量；步驟2取聚酰胺，以乙醇浸泡，不斷攪拌，除去氣泡后裝入空柱中；聚酰胺裝入空柱后， 先后用乙醇、NaOH水溶液、蒸餾水、乙酸水溶液洗脫，最后用蒸餾水洗脫至pH中性，得到聚酰胺層析柱；步驟3取初始質(zhì)量濃度為2. 06 17. Hmg -πιΓ1的粗提多酚溶液，用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH為 4，用0. 45 μ m濾膜過濾，之后上樣到步驟2所得的聚酰胺層析柱，放置過夜，使充分吸附；先用純化水進行洗脫，除去極性較大雜質(zhì)成分，洗至Molish反應為陰性后，再用乙醇溶液進行洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到純品多酚。
2.如權(quán)利要求1所述的從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其特征是步驟1中的甘蔗梢要經(jīng)過熱燙滅酶處理，熱燙的溫度為80 士 2°C，清水作為熱燙液，熱燙時間為aiiin 將熱燙好的甘蔗梢浸入冰水混合物中，使甘蔗梢溫度降至10°C以下；經(jīng)冷卻后的甘蔗梢立即進行浙水，以免殘留水進入提取環(huán)節(jié)引起誤差。
3.如權(quán)利要求1所述的從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其特征是步驟1中的甘蔗梢浸提溫度20 70°C。
4.如權(quán)利要求3所述的從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其特征是步驟1所述的浸提的溫度為陽 65°C，浸提劑乙醇溶液的質(zhì)量百分濃度為55 65%，料液比為1 2 4， 浸取時間為1 池。
5.如權(quán)利要求1所述的從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其特征是步驟1所述的福林法測定多酚含量的測定方法用單寧酸的當量值TAE表示；FD試劑體積為1 4mL，F(xiàn)D試劑與飽和Na2C03溶液的體積比為2 1 6，室溫20 30°C，反應時間為0. 5 1.釙。
6.如權(quán)利要求1所述的從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其特征是步驟2制備聚酰胺層析柱時，聚酰胺的孔徑為150 180 μ m，pH值為2 6，上樣流速為2 6mL -min"1,實驗情況進入穩(wěn)定所需時間為1. 5 2. 5h ；聚酰胺上空柱后，用3 4倍體積質(zhì)量百分濃度為 90 % 95 %的乙醇洗脫，洗至洗脫液透明并在蒸干后無殘渣或極少殘渣；再依次用2 2. 5 倍體積的質(zhì)量濃度為5% NaOH水溶液、1倍體積的蒸餾水、2 2. 5倍體積的質(zhì)量百分濃度為10 %的乙酸水溶液洗脫，最后用蒸餾水洗脫至pH中性。
7.如權(quán)利要求1所述從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其特征在于步驟3中的聚酰胺層析柱充分吸附后，用質(zhì)量百分濃度為20% 80%的乙醇溶液進行洗脫。
8.如權(quán)利要求1所述從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其特征在于總酚含量測定公式為TAE[mg. (1 OOg)-1 ] = X Fl X Vl χ 100W式中=X1-根據(jù)標準曲線算得樣品濃度值，mg · L—1 ； V1-樣品稀釋倍數(shù)； V2-樣品液體總體積，L ； W"原料重，go
9.如權(quán)利要求8所述的從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其特征在于選擇單寧酸為標準對照品，用單寧酸繪制標準曲線方程，最佳吸收波長為725nm。
10.如權(quán)利要求9所述的從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法，其特征在于用單寧酸繪制標準曲線方程時，準確吸取濃度為0. 2mg · πιΓ1的單寧酸標準溶液0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、2. 5、 3. 0,3. 5,4. 0,4. 5,5. OmL 于 IOOmL 容量瓶中，配成 1、2、3、4、5、6、7、8、9、IOmg · Γ1 不同濃度的標準溶液；加入FD試劑3mL，充分混勻后加入飽和碳酸鈉溶液4. 5mL, 1小時后，用蒸餾水定容至刻度，測定吸光度值，以蒸餾水代替樣品做空白，得到單寧酸標準曲線方程為Y = 0. 0436χ+0. 167，Y為吸光度，χ為多酚含量。
全文摘要
一種從甘蔗梢中提取酚類物質(zhì)的方法。將甘蔗梢除去雜質(zhì)后破碎，破碎的甘蔗梢用乙醇浸提，將浸提液和蔗梢壓出汁合并、過濾，加熱濃縮合并汁，所得濃縮物為粗提多酚，回收揮發(fā)的有機溶劑，用福林法測定多酚含量；將所得粗提多酚調(diào)節(jié)pH及濾膜過濾后上樣到聚酰胺層析柱，再用乙醇溶液洗脫、收集洗脫液、濃縮，得純品多酚。本發(fā)明的方法不僅降低了原料成本，簡化了實驗操作，提高了工作效率，提高了目標產(chǎn)物的提取率及純度，同時建立了甘蔗梢中總酚測定的方法和多酚提取及分離純化的具體工藝。
文檔編號C07G99/00GK102516319SQ201110406170
公開日2012年6月27日 申請日期2011年12月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月8日
發(fā)明者倪小智, 唐艷瓊, 孫衛(wèi)東, 孫曉雪, 朱蓉艷, 李軍委, 牛麗 申請人:廣西大學