專利名稱：從甘蔗梢中提取氨基酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬一種從甘蔗梢中提取氨基酸的方法。
背景技術(shù)：
蔗梢是蔗莖生長(zhǎng)點(diǎn)(蔗黃)所在部位，在甘蔗生長(zhǎng)發(fā)育過程中，蔗莖的養(yǎng)料盡量提供給生長(zhǎng)點(diǎn)，故它含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、淀粉、氨基酸、維生素、酶類及礦物質(zhì)等。 蔗梢中氨基酸的含量是蔗莖中的約5倍左右。氨基酸是構(gòu)成生物體蛋白質(zhì)分子的基本單位，與生物的生命活動(dòng)有著密切的關(guān)系。它在機(jī)體內(nèi)具有特殊的生理功能，是生物體內(nèi)不可缺少的營(yíng)養(yǎng)成分之一。氨基酸除具有眾所周知的營(yíng)養(yǎng)作用以外，近年醫(yī)藥研究部門已確認(rèn)某些氨基酸的醫(yī)療價(jià)值，如精氨酸、谷氨酸作為肝昏迷搶救藥物之一；組氨酸用于治療胃及十二指腸潰瘍和肝炎；蛋氨酸用于治療肝硬化和脂肪肝；賴氨酸、蛋氨酸大量用作強(qiáng)化食品，促進(jìn)兒童發(fā)育；天冬氨酰胺是治療心臟病和高血壓的良藥等。廣西甘蔗年產(chǎn)量超過4400萬(wàn)噸，甘蔗蔗梢的量非常大，但蔗梢對(duì)制糖工業(yè)幾乎沒有用處，每年被砍割下來的數(shù)百萬(wàn)噸蔗梢或被還田，或做牲畜飼料，對(duì)其加工利用的程度不大，沒有發(fā)揮資源優(yōu)勢(shì)。如果能根據(jù)甘蔗蔗梢的成分，對(duì)其做一些深加工方面的研究，充分開發(fā)利用其潛在價(jià)值，對(duì)帶動(dòng)地方經(jīng)濟(jì)是大有益處的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要求解決的技術(shù)問題是提供一種能變廢為寶、充分利資源、用甘蔗梢做原料提取氨基酸的方法。本發(fā)明以如下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問題(1)對(duì)甘蔗梢壓榨出的甘蔗梢汁，首先用真空抽濾除去汁中的泥土、蔗渣，再用活性炭靜態(tài)吸附脫色，脫色時(shí)將原汁稀釋50倍，pH為2 5，活性炭用量2 6g/100mL，吸附時(shí)間為50 150min，加熱溫度為50°C 90°C ；(2)使用活性炭動(dòng)態(tài)吸附蔗梢汁中的酪氨酸和苯丙氨酸，活性炭的用量為1 5g/100mL, pH為5 6 ；再用氨水和乙醇從活性炭中動(dòng)態(tài)洗脫酪氨酸和苯丙氨酸，氨水的濃度為0. 5 2. Omo 1/L,乙醇的濃度為30% 90% ；(3)用離子交換吸附法分離堿性氨基酸(組氨酸、賴氨酸、精氨酸)，洗脫劑為以下五種中的一種或兩種NH4Cl, NH4Cl-NH3 · H2O(1 1)、NH3 · H2O, NH4COOH-NH3 · H2O(1 1)、 NH4COOH,流速為 1 ;3mL/min。步驟1所述的活性炭靜態(tài)吸附脫色的pH為4，加熱溫度為80°C，吸附時(shí)間為 75min，活性炭用量為4g/100mL。步驟2所述的活性炭動(dòng)態(tài)吸附酪氨酸和苯丙氨酸時(shí)，流速控制在1 1. 5mL/min。步驟2所述的從活性炭中動(dòng)態(tài)洗脫氨基酸時(shí)，先用蒸餾水洗柱，控制流速在2 3mL/min,至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止；然后用氨水洗脫，控制流速約在2 3mL/min，分步收集，配
3合Pauly反應(yīng)檢查，合并酪氨酸顯淺紅色部分，得到酪氨酸洗脫液；再改用60%乙醇洗脫， 至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止，得到苯丙氨酸洗脫液。本發(fā)明的活性炭要經(jīng)過預(yù)處理，用0. 5mol/L的NaOH溶液、0. 5mol/L HCL溶液、自來水與蒸餾水按順序處理，洗凈浸泡，待其PH值變?yōu)橹行詴r(shí)將其烘干。步驟3所述的分離堿性氨基酸時(shí)，利用離子交換法從蔗梢汁溶液中提取三種堿性氨基酸的最佳上柱及洗脫流速為lmL/min ；若需制備三種堿性氨基酸，可分別用三種不同濃度的 NH3 · H2O (0. 05mol/L,0. lmol/L, 2mol/L)洗脫先用 0. 05mol/L 氨水洗脫(洗脫液流速為約lmL/min)，待流出約20mL實(shí)體積后；開始分步收集，每管10mL，用0. lmol/L氨水洗脫，洗脫至無(wú)茚三酮反應(yīng)，再用2mol/L氨水洗脫，洗至茚三酮反應(yīng)檢測(cè)基本上無(wú)顯色為止，對(duì)收集洗脫液進(jìn)行層析，層析池后，利用Pauly試劑檢測(cè)和坂口試劑檢測(cè)確定收集液組成，再進(jìn)行結(jié)晶及重結(jié)晶得到精制的組氨酸、賴氨酸、精氨酸。若制備單一的精氨酸，采用 NH4COOH 和 NH4COOH-NH3 · H2O 結(jié)合使用，首先用 0. 2mol/L 的 NH4COOH-NH3 · H2O 洗脫組氨酸、 賴氨酸，洗至無(wú)茚三酮反應(yīng)時(shí)，用去離子水洗至無(wú)C00H—，再用0. ImoVLNH3 · H2O和lmol/L NH3 · H2O相繼洗脫，得單一的精氨酸，這樣不僅可使組氨酸、賴氨酸與精氨酸獲得較好分離， 同時(shí)又節(jié)省洗脫劑且產(chǎn)品不含NH4COOH,較易純化。本發(fā)明的離子交換樹脂要經(jīng)過預(yù)處理，將732陽(yáng)離子樹脂放入燒杯中，加入過量的蒸餾水浸泡Mh，攪動(dòng)樹脂，除去懸浮的破碎樹脂。然后，用2mol/L的HCl浸泡約池，用蒸餾水洗至PH5 6，然后用2mol/L的NaOH浸泡3h，再用蒸餾水洗至pH5 6，最后用2mol/ L的HCl作轉(zhuǎn)型處理，用蒸餾水洗至中性。本發(fā)明的方法顯著優(yōu)點(diǎn)有應(yīng)用活性炭來脫色和吸附苯丙氨酸與酪氨酸，大大提高了原料的利用率，降低了對(duì)設(shè)備的要求，提高了工作效率，而且活性炭吸附濾除了上柱液中的雜質(zhì)，還解決了單純分離交換柱中樹脂易毒化的問題；同時(shí)先用活性炭吸附后用離子交換樹脂分離比較好的解決了單純離子交換苯丙氨酸、酪氨酸和組氨酸之間的交叉重疊現(xiàn)象。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明提供了一種物理和化學(xué)方法相結(jié)合的手段從甘蔗梢中提取氨基酸的方法。 在本發(fā)明的方法中，用活性炭吸附分離酪氨酸和苯丙氨酸，用離子交換吸附法分離堿性氨基酸，洗脫劑和分離條件的選擇是實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的關(guān)鍵。本方法在對(duì)甘蔗梢汁進(jìn)行了真空抽濾后，活性炭在PH為2 5、活性炭用量2 6g/100mL、吸附時(shí)間為50 150min、加熱溫度為50°C 90°C的條件下對(duì)甘蔗梢汁進(jìn)行脫色的預(yù)處理；預(yù)處理后的甘蔗梢汁經(jīng)活性炭在流速為1 1. 5mL/min、pH為5. 8的條件下吸附，然后用1. 5mol/L氨水洗脫，控制流速約在 2 3mL/min，分步收集，配合Pauly顯色反應(yīng)檢查，至酪氨酸轉(zhuǎn)陰顯色，合并含酪氨酸部分， 再改用60 %乙醇洗脫，至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止，洗脫液經(jīng)脫色低溫結(jié)晶過濾得苯丙氨酸與酪氨酸的粗品；濾液再用離子交換樹脂吸附交換，洗脫流速為lmL/min ；洗脫劑為以下五種中的一種或兩種NH4C1、NH4Cl-NH3 · H20(1 1) >NH3 · H2O, NH4COOH-NH3 · H2O (1 1) ,NH4COOH, 洗脫液減壓濃縮結(jié)晶得組氨酸、賴氨酸、精氨酸粗品，再經(jīng)脫色過濾結(jié)晶烘干得精制氨酸。實(shí)施例1取甘蔗梢壓榨成汁，過濾，濾去泥土等大分子雜質(zhì)，將濾清汁稀釋50倍，用活性炭脫色，脫色PH值為4. 0，加熱溫度為80°C，活性炭用量為4g/100mL，脫色時(shí)間為75min，活性炭對(duì)蔗梢汁溶液的脫色率達(dá)到75. 37%，氨基酸損失率為13. 75% ；過濾后取濾汁調(diào)pH為 5. 8，以流速為1 1. 5mL/min流入含IOOg活性炭的吸附柱內(nèi)吸附酪氨酸和苯丙氨酸，配合茚三酮反應(yīng)檢查，至有紫紅色反應(yīng)，即停止上柱；先用蒸餾水洗柱，控制流速約在2 3mL/ min，至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止；然后用1. 5mol/L氨水洗脫，控制流速約在2 3mL/min，分步收集，配合Pauly反應(yīng)檢查，直到Panly反應(yīng)不顯淺紅色為止，合并含酪氨酸轉(zhuǎn)陰顯色部分， 得到酪氨酸洗脫液；再改用60%乙醇洗脫，至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止，得到酪氨酸洗脫液。將酪氨酸洗脫液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓濃縮趕氨，調(diào)pH值為2，加2 %活性炭顆粒脫色，過濾，濾液冷卻至室溫，冰箱內(nèi)4°C下放置兩天，小心分離濾液，有白色針狀晶體析出，過濾得酪氨酸及濾液，再重結(jié)晶一次，用95 %乙醇洗滌，放置烘箱60°C烘干得酪氨酸成品，紙層析檢測(cè)為單一斑點(diǎn)。將酪氨酸過濾液和苯丙氨酸洗脫液混合，同酪氨酸濃縮提純步驟，得苯丙氨酸晶體，紙層析檢測(cè)為單一斑點(diǎn)。將50mL處理完畢的732陽(yáng)離子樹脂置于1 X 40cm的離子交換柱內(nèi)，取200mL活性炭吸附苯丙氨酸、酪氨酸后的蔗梢汁氨基酸溶液上柱，流速控制在ImL/ min，至流出液中有組氨酸顯色反應(yīng)(即Pauly顯色反應(yīng)檢測(cè))時(shí)，用去離子水洗至無(wú)氨基酸出來為止(不同溫度條件下的吸附茚三酮檢驗(yàn))，先用0. 05mol/L氨水以約lmL/min流速洗脫，待流過約20mL實(shí)體積后，開始分步收集，每管10mL，繼而用0. lmol/L氨水洗脫，洗脫至無(wú)茚三酮反應(yīng)，再用2mol/L氨水洗脫，洗至茚三酮反應(yīng)檢測(cè)基本上無(wú)顯色為止，共收集洗脫液86管。將第15-32管含有組氨酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，待有結(jié)晶出來，趁熱用鹽酸調(diào)至pH2. 5，并加入二倍于溶液量的95%無(wú)水乙醇，靜置沉淀，過濾，得組氨酸粗品；將粗品溶于去離子水中，加熱溶解，用鹽酸調(diào)至PH2. 5，加1.5%溶液量的活性炭進(jìn)行脫色、過濾， 濾液加二倍溶液量的95%無(wú)水乙醇，冷卻結(jié)晶，過濾后低溫烘干，紙層析檢測(cè)為L(zhǎng)-組氨酸成品。將第37-55管含有賴氨酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮至糖漿狀，用鹽酸調(diào)至pH4左右，加入三倍溶液量的95%無(wú)水乙醇，冷卻放置，過濾，得賴氨酸粗品；將粗品溶解于去離子水， 加熱溶解，加1.5%活性炭脫色，過濾，再減壓濃縮至結(jié)晶出現(xiàn)，加二倍溶液量的95%無(wú)水乙醇，冷卻結(jié)晶，過濾后低溫烘干，紙層析檢測(cè)為L(zhǎng)-賴氨酸成品。將第57-86管含有精氨酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，待有結(jié)晶出來，趁熱用鹽酸調(diào)至PH4. 0左右，并加入二倍于溶液量的95%無(wú)水乙醇，靜置沉淀，過濾，得精氨酸粗品；將精氨酸粗品溶于去離子水，加熱溶解， 用鹽酸調(diào)至PH4.0，加溶液量的活性炭脫色，過濾，濾液加二倍溶液量的95%無(wú)水乙醇， 冷卻結(jié)晶，過濾后低溫烘干，紙層析檢測(cè)為L(zhǎng)-精氨酸成品。實(shí)施例2取甘蔗梢壓榨成汁，過濾，濾去泥土等大分子雜質(zhì)，將濾清汁稀釋50倍，用活性炭脫色，脫色PH值為3. 22，加熱溫度為77. 8°C，活性炭用量為5g/100mL，脫色時(shí)間為70min, 過濾；取濾汁IOOmL,調(diào)pH為6，以流速為1 1. 5mL/min流入重量為500g活性炭的吸附柱內(nèi)吸附先用蒸餾水洗柱，控制流速約在2 3mL/min，至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止；然后用2. Omol/L氨水洗脫，控制流速約在2 3mL/min，分步收集，配合Pauly反應(yīng)檢查，直到 Panly反應(yīng)不顯淺紅色為止，合并含Tyr轉(zhuǎn)陰顯色部分，得到酪氨酸洗脫液；再改用50%乙醇洗脫，至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止，得到苯丙氨酸洗脫液。將酪氨酸洗脫液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓濃縮趕氨，調(diào)PH值為2，加2%活性炭顆粒脫色，過濾，濾液冷卻至室溫，冰箱內(nèi)4°C下放置兩天，小心分離濾液，有白色針狀晶體析出，過濾得酪氨酸及濾液，再重結(jié)晶一次，用95%乙醇洗滌，放置烘箱60°C烘干得酪氨酸成品，紙層析檢測(cè)為單一斑點(diǎn)。將酪氨酸過濾液和苯丙氨酸洗脫液混合，同酪氨酸濃縮提純步驟，得苯丙氨酸晶體，紙層析檢測(cè)為單一斑點(diǎn)。將50mL 處理完畢的732陽(yáng)離子樹脂置于lX40cm的離子交換柱內(nèi)，取200mL經(jīng)活性炭吸附苯丙氨酸、酪氨酸后的蔗梢汁氨基酸溶液上柱，流速控制在lmL/min，至流出液中有組氨酸顯色反應(yīng)(Pauly反應(yīng)檢測(cè))時(shí)，用去離子水洗至無(wú)氨基酸出來為止(不同溫度條件下的吸附茚三酮檢驗(yàn))，然后用0. lmol/L的NH4C00H-NH3 · H20洗脫，至無(wú)茚三酮反應(yīng)，再用0. 5mol/L的 NH4C00H-NH3 · H20繼續(xù)洗脫。當(dāng)洗脫劑用量為150 300mL時(shí)，洗脫出來的為組氨酸，將組氨酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，待有結(jié)晶出來，趁熱用鹽酸調(diào)至PH 2. 5，并加入二倍于溶液量的95%無(wú)水乙醇，靜置沉淀，過濾，得組氨酸粗品；將組氨酸粗品溶解于去離子水中，加熱溶解，用鹽酸調(diào)至PH2. 5，加1. 5%溶液量的活性炭進(jìn)行脫色、過濾，濾液加二倍溶液量的 95%無(wú)水乙醇，冷卻結(jié)晶，過濾后低溫烘干，紙層析檢測(cè)為L(zhǎng)-組氨酸成品。當(dāng)洗脫劑用量為 340 690mL時(shí)，洗脫出來的為賴氨酸，將賴氨酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮至糖漿狀，用鹽酸調(diào)至pH4左右，加入三倍溶液量的95%無(wú)水乙醇，冷卻放置，過濾，得賴氨酸粗品；將賴氨酸粗品溶于去離子水，加熱溶解，加1.5%活性炭脫色，過濾，再減壓濃縮至結(jié)晶出現(xiàn)，加二倍溶液量的95%無(wú)水乙醇，冷卻結(jié)晶，過濾后低溫烘干，紙層析檢測(cè)為L(zhǎng)-賴氨酸成品。當(dāng)洗脫劑用量為690 920mL時(shí)，洗脫出來的為精氨酸，將精氨酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，待有結(jié)晶出來，趁熱用鹽酸調(diào)至PH4.0左右，并加入二倍于溶液量的95%無(wú)水乙醇，靜置沉淀，過濾，得精氨酸粗品；將粗品溶于去離子水，加熱溶解，用鹽酸調(diào)至PH4.0，加溶液量的活性炭脫色，過濾，濾液加二倍溶液量的95%無(wú)水乙醇，冷卻結(jié)晶，過濾后低溫烘干，紙層析檢測(cè)為L(zhǎng)-精氨酸成品。實(shí)施例3取甘蔗梢壓榨成汁，過濾，濾去泥土等大分子雜質(zhì)，將濾清汁稀釋50倍，用活性炭脫色，脫色PH值為3，加熱溫度為75°C，活性炭用量為4g/100mL，脫色時(shí)間為80min，過濾， 取濾汁IOOmLdif PH為5. 5，以流速為1 1. 5mL/min流入重量為500g活性炭的吸附柱內(nèi)吸附，先用蒸餾水洗柱，控制流速約在2 3mL/min，至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止；然后用1. Omol/ L氨水洗脫，控制流速約在2 3mL/min，分步收集，配合Pauly反應(yīng)檢查，直到Panly反應(yīng)不顯淺紅色為止，合并含酪氨酸轉(zhuǎn)陰顯色部分，得到酪氨酸洗脫液；再改用70%乙醇洗脫， 至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止，得到苯丙氨酸洗脫液。將酪氨酸洗脫液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器減壓濃縮趕氨， 調(diào)PH值為2，加2%活性炭顆粒脫色，過濾，濾液冷卻至室溫，冰箱內(nèi)4°C下放置兩天，小心分離濾液，有白色針狀晶體析出，過濾得酪氨酸及濾液，再重結(jié)晶一次，用95%乙醇洗滌，放置烘箱60°C烘干得酪氨酸成品，紙層析檢測(cè)為單一斑點(diǎn)。將酪氨酸過濾液和苯丙氨酸洗脫液混合，同酪氨酸濃縮提純步驟，得苯丙氨酸晶體，紙層析檢測(cè)為單一斑點(diǎn)。將50mL處理完畢的732陽(yáng)離子樹脂置于IX 40cm的離子交換柱內(nèi)，取200mL經(jīng)活性炭吸附苯丙氨酸、酪氨酸后的蔗梢汁氨基酸溶液上柱，流速控制在lmL/min，至流出液中有組氨酸顯色反應(yīng)(Pauly 顯色反應(yīng)檢測(cè))時(shí)，用去離子水洗至無(wú)氨基酸出來為止(不同溫度條件下的吸附茚三酮檢驗(yàn))，然后用0. lmol/L的NH4C00H洗脫至無(wú)茚三酮反應(yīng)，再用0. 5mol/L的NH4C00H繼續(xù)洗脫。當(dāng)洗脫劑用量為180 320mL時(shí)，洗脫出來的為組氨酸，將組氨酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，待有結(jié)晶出來，趁熱用鹽酸調(diào)至PH2. 5，并加入二倍于溶液量的95%無(wú)水乙醇，靜置沉淀，過濾，得組氨酸粗品；將組氨酸粗品溶解于去離子水中，加熱溶解，用鹽酸調(diào)至PH2. 5，加1. 5%溶液量的活性炭進(jìn)行脫色、過濾，濾液加二倍溶液量的95%無(wú)水乙醇，冷卻結(jié)晶， 過濾后低溫烘干，紙層析檢測(cè)為L(zhǎng)-組氨酸成品。當(dāng)洗脫劑用量為340 750mL時(shí)，洗脫出來的為賴氨酸，將賴氨酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮至糖漿狀，用鹽酸調(diào)至PH4左右，加入三倍溶液量的95%無(wú)水乙醇，冷卻放置，過濾，得賴氨酸粗品；將粗品溶于去離子水，加熱溶解，加 1.5%活性炭脫色，過濾，再減壓濃縮至結(jié)晶出現(xiàn)，加二倍溶液量的95%無(wú)水乙醇，冷卻結(jié)晶，過濾后低溫烘干，紙層析檢測(cè)為L(zhǎng)-賴氨酸成品。當(dāng)洗脫劑用量為750 980mL時(shí)，洗脫出來的為精氨酸，將精氨酸的洗脫液進(jìn)行減壓濃縮，待有結(jié)晶出來，趁熱用鹽酸調(diào)至PH4. 0 左右，并加入二倍于溶液量的95%無(wú)水乙醇，靜置沉淀，過濾，得精氨酸粗品；將粗品溶于去離子水，加熱溶解，用鹽酸調(diào)至PH4. 0，加1 %溶液量的活性炭脫色，過濾，濾液加二倍溶液量的95%無(wú)水乙醇，冷卻結(jié)晶，過濾后低溫烘干，紙層析檢測(cè)為L(zhǎng)-精氨酸成品。
權(quán)利要求
1.一種從甘蔗梢中提取氨基酸的方法，其特征是工藝步驟為步驟1對(duì)甘蔗梢壓榨出的甘蔗梢汁，首先用真空抽濾除去汁中的泥土、蔗渣，再用活性炭靜態(tài)吸附脫色，脫色時(shí)將原汁稀釋50倍，PH為2 5、活性炭用量2 6g/100mL、吸附時(shí)間為50 150min、加熱溫度為50°C 90°C ；步驟2使用活性炭動(dòng)態(tài)吸附蔗梢汁中的酪氨酸和苯丙氨酸，pH為5 6;再用氨水和乙醇從活性炭中動(dòng)態(tài)洗脫酪氨酸和苯丙氨酸，氨水的濃度為0. 5 2. Omol/L,乙醇的濃度為 30% 90% ；步驟3用離子交換吸附法分離堿性氨基酸組氨酸、賴氨酸、精氨酸，洗脫劑為以下五種中的一種或兩種=NH4Cl、比例為1 1的NH4Cl-NH3 · H2O, NH3 · H2O,比例為1 1的 NH4COOH-NH3 · H2O 和 NH4COOH,流速為 1 3mL/min。
2.如權(quán)利要求1所述的從甘蔗梢中提取氨基酸的方法，其特征是步驟1所述的活性炭靜態(tài)吸附脫色的PH為4，加熱溫度為80°C，吸附時(shí)間為75min，活性炭用量為4g/100mL。
3.如權(quán)利要求1所述的從甘蔗梢中提取氨基酸的方法，其特征是步驟2所述的活性炭動(dòng)態(tài)吸附酪氨酸和苯丙氨酸時(shí)，流速控制在1 1. 5mL/min。
4.如權(quán)利要求1所述的從甘蔗梢中提取氨基酸的方法，其特征是步驟2所述的從活性炭中動(dòng)態(tài)洗脫氨基酸時(shí)，先用蒸餾水洗柱，控制流速在2 3mL/min，至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止； 然后用氨水洗脫，控制流速在2 3mL/min，分步收集，配合Pauly顯色反應(yīng)檢查，合并酪氨酸顯淺紅色部分，得到酪氨酸洗脫液；再改用60%乙醇洗脫，至無(wú)茚三酮反應(yīng)為止，得到苯丙氨酸洗脫液。
5.如權(quán)利要求1或2或3或4所述的從甘蔗梢中提取氨基酸的方法，其特征是本發(fā)明的活性炭要經(jīng)過預(yù)處理，用0. 5mol/L的NaOH溶液、0. 5mol/L HCL溶液、自來水與蒸餾水按順序處理，洗凈浸泡，待其PH值變?yōu)橹行詴r(shí)將其烘干。
6.如權(quán)利要求1所述的從甘蔗梢中提取氨基酸的方法，其特征是步驟3所述的分離組氨酸、賴氨酸、精氨酸時(shí)，利用離子交換法從蔗梢汁溶液中提取的最佳上柱及洗脫流速為lmL/min ；若需制備上述三種堿性氨基酸時(shí)，可分別用0. 05mol/L、0. lmol/L,2mol/L的 NH3 · H2O洗脫先用0. 05mol/L氨水以流速為0. 8-1. 2mL/min洗脫，待流出約20mL實(shí)體積后，開始分步收集，每管10mL，共收集洗脫液86管。再用0. lmol/L氨水洗脫，洗脫至無(wú)茚三酮反應(yīng)，最后用2mol/L氨水洗脫，洗至茚三酮反應(yīng)檢測(cè)基本上無(wú)顯色為止，對(duì)收集洗脫液進(jìn)行層析，層析池后，利用Pauly顯色試劑檢測(cè)和坂口試劑檢測(cè)確定收集液組成，再進(jìn)行結(jié)晶及重結(jié)晶得到精制的組氨酸、賴氨酸、精氨酸；若制備單一的精氨酸，采用NH4COOH和 NH4COOH-NH3 · H2O結(jié)合使用，首先用0. 2mol/L的NH4COOH-NH3 · H2O洗脫組氨酸、賴氨酸，洗至無(wú)茚三酮反應(yīng)時(shí)，用去離子水洗至無(wú)C00H-，再用0. ImoVLNH3 · H2O和lmol/LNH3 · H2O相繼洗脫，得單一的精氨酸。
7.如權(quán)利要求1所述的從甘蔗梢中提取氨基酸的方法，其特征是本發(fā)明離子交換樹脂要經(jīng)過預(yù)處理，將732陽(yáng)離子樹脂放入燒杯中，加入過量的蒸餾水浸泡Mh，攪動(dòng)樹脂，除去懸浮的破碎樹脂；然后，用2mol/L的HCl浸泡約池，用蒸餾水洗至pH5 6，再用2mol/L的 NaOH浸泡池，用蒸餾水洗至pH5 6，最后用2mol/L的HCl作轉(zhuǎn)型處理，用蒸餾水洗至中性。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從甘蔗梢中提取氨基酸的方法，將壓榨砍割后的蔗梢壓出汁，用真空抽濾除去汁中的泥土、蔗渣，用活性炭對(duì)蔗梢汁吸附脫色后，再用活性炭動(dòng)態(tài)吸附酪氨酸和苯丙氨酸，用氨水和乙醇動(dòng)態(tài)洗脫，收集洗脫液，經(jīng)濃縮結(jié)晶，得粗品酪氨酸和苯丙氨酸；再用離子交換吸附法分離出組氨酸、賴氨酸和精氨酸。本發(fā)明先用活性炭吸附、后用離子交換樹脂分離的方法，不僅提高了原料的利用率、降低了對(duì)設(shè)備的要求，提高了工作效率，而且較好的解決了單純離子交換時(shí)苯丙氨酸、酪氨酸和組氨酸之間的交叉重疊現(xiàn)象。
文檔編號(hào)C07C227/40GK102260181SQ20111012426
公開日2011年11月30日 申請(qǐng)日期2011年5月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月13日
發(fā)明者孫衛(wèi)東, 張業(yè)輝, 張娟, 朱蓉艷, 李軍委, 牛麗, 謝偉 申請(qǐng)人:廣西大學(xué)