專利名稱：一種提取純化植物大分子活性成分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提取純化植物大分子活性成分的方法。
背景技術(shù)：
隨著植物化學研究的深入，植物大分子活性物質(zhì)越來越受到醫(yī)療保健界的關(guān)注。植物大分子包括蛋白質(zhì)、糖蛋白、糖肽、多糖、多肽、酶類及多酚類物質(zhì)。研究表明，植物大分子具有很強的生物活性，如免疫調(diào)節(jié)、抗癌、降血糖、降血脂、降血壓、抗氧化等功效。因此，在天然植物藥的研發(fā)生產(chǎn)中，對植物大分子的運用越來越廣泛。在傳統(tǒng)針對植物大分子的制備方法包括水提醇沉法，有機溶劑法、樹脂吸附法等。但是，這些傳統(tǒng)方法都存在高溫、有機溶劑殘留以及強酸堿的問題。這些因素都會影響植物大分子的結(jié)構(gòu)，尤其是當破壞大分子三維立體結(jié)構(gòu)以后，其功效就會迅速喪失失活，從而影響產(chǎn)品功效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種可大幅度高產(chǎn)品的功效的提取純化植物大分子活性成分的方法。本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(1)將植物藥材用水提取，得提取液；(2)提取液澄清過濾得清液；(3)清液進行微孔膜精濾，得精濾液；(4)精濾液進行活性分子純化截流，得大分子純化濃縮液；(5)純化濃縮液低溫干燥得到大分子活性成分。步驟(1)植物藥材包括枸杞、茶葉、青錢柳、麥冬、石斛或余甘子。步驟(1)所述的植物藥材用水提取為按植物藥材與水重量比1 16混合進行攪拌提取，攪拌速度為20-30rpm。步驟⑵所述的澄清過濾為將提取液靜置12h，抽取上層清液在轉(zhuǎn)速為8000-10000rpm下進行高速離心，得清液。步驟(3)所述的微孔膜的孔徑為0. 1-0. 2 μ m。步驟(4)所述的精濾液進行活性分子純化截流是根據(jù)植物藥材大分子活性的分子量大小選擇與其分子量相匹配的膜進行過濾。步驟(4)所述的純化濃縮液低溫干燥的溫度為35°C -40°C，干燥時間為8小時。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用水作為提取液，而且在低溫下進行干燥，不會影響植物大分子的結(jié)構(gòu)，尤其是不會破壞大分子三維立體結(jié)構(gòu)，可以保持活性，從而大大提高了其功效。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行詳細說明。實施例1一種提取純化枸杞中大分子活性成分糖蛋白的方法，該方法包括以下步驟(1)將枸杞用水提取，得提取液；(2)提取液澄清過濾得清液；(3)清液用孔徑為0. 1-0. 2 μ m微孔膜進行精濾，得精濾液；(4)由于枸杞糖蛋白的分子量大小在70k_80k范圍內(nèi)，因此選用分子量為50k和IOOk的超濾膜進行分離純化得到枸杞糖蛋白純化濃縮液；(5)純化濃縮液低溫干燥得到枸杞糖蛋白。將本發(fā)明產(chǎn)品枸杞糖蛋白與市場上銷售的同類產(chǎn)品進行活性比較結(jié)果如下兩個劑量組即上述方法制得的枸杞糖蛋白5mg、市售枸杞糖蛋白500mg/kg. Bff0同時設空白對照組。采用SPF級昆明種小鼠，連續(xù)經(jīng)口灌胃給予，30天后開始實驗。實驗結(jié)果顯示本發(fā)明5mg劑量與市售500mg作用相當，1)能明顯增強ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞增殖能力；幻能明顯增強二硝基氟苯誘導的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應；幻能明顯升高小鼠血清溶血素含量；4)能明顯增強小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞功能；5)能明顯增強小鼠碳廓清能力；6)能明顯增強抗體生成細胞能力。由此可見，本發(fā)明方法制得的枸杞糖蛋白可以明顯提高生物活性。實施例2一種提取純化茶葉中大分子活性成分茶多糖的方法，該方法包括以下步驟(1)將粗老茶用水提取，得提取液；(2)提取液澄清過濾得清液；(3)清液用孔徑為0. 1-0. 2 μ m微孔膜進行精濾，得精濾液；(4)由于茶多糖的分子量大小在40k左右，因此選用分子量為30k和50k的超濾膜進行分離純化得到茶多糖純化濃縮液；(5)純化濃縮液低溫干燥得到活性茶多糖。將本發(fā)明方法制得的活性茶多糖10mg/kg與市售同類產(chǎn)品500mg/kg進行降血糖活性比較
組別η空腹(Oh)0.5hIh2h曲線下面積模型對照組723.86土 4.62*44.64士 8.63*38.45 土 6.58*28.41 ±4.87*71.33 土 6.51*市售88.22 土 1.63**34.50土9.34*** 34.06+9.01*23.29 土 7.79*56.49 土 14.66***本發(fā)明產(chǎn)品87.14 士 1.05**20.73 土5.56*** 26.31 土4.96***19.32 土 5.26***41.54 土 8.91***正常對照組105.76 土 0.69**7.38 土 1.01**8.53 ±1.08**7.71 ±0.95**15.39+1.18**F值78.5537.7436.7418.3842.96P<0.0001<0.0001<0.0001<0.0001<0.0001
由此可見，本發(fā)明方法制得的茶多糖降血糖活性明顯大幅度提高。綜上所述本發(fā)明方法能夠更好的保留植物活性大分子的活性，使其產(chǎn)品功效更
顯著
權(quán)利要求
1.一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟(1)將植物藥材用水提取，得提取液；(2)提取液澄清過濾得清液；(3)清液進行微孔膜精濾，得精濾液；(4)精濾液進行活性分子純化截流，得大分子純化濃縮液；(5)純化濃縮液低溫干燥得到大分子活性成分。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(1)植物藥材包括枸杞、茶葉、青錢柳、麥冬、石斛或余甘子。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(1)所述的植物藥材用水提取為按植物藥材與水重量比1 16混合進行攪拌提取，攪拌速度為20-30rpm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(2)所述的澄清過濾為將提取液靜置12h，抽取上層清液在轉(zhuǎn)速為8000-10000rpm下進行高速離心，得清液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(3)所述的微孔膜的孔徑為0. 1-0. 2 μ m。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(4)所述的精濾液進行活性分子純化截流是根據(jù)植物藥材大分子活性的分子量大小選擇與其分子量相匹配的膜進行過濾。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提取純化植物大分子活性成分的方法，其特征在于，步驟(4)所述的純化濃縮液低溫干燥的溫度為35°C -40°C，干燥時間為8小時。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種提取純化植物大分子活性成分的方法，該方法包括以下步驟(1)將植物藥材用水提取，得提取液；(2)提取液澄清過濾得清液；(3)清液進行微孔膜精濾，得精濾液；(4)精濾液進行活性分子純化截流，得大分子純化濃縮液；(5)純化濃縮液低溫干燥得到大分子活性成分。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有可大幅度高產(chǎn)品的功效等優(yōu)點。
文檔編號C07K14/415GK102584968SQ201110458300
公開日2012年7月18日 申請日期2011年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月31日
發(fā)明者許宏華, 韓超 申請人:上海善力健生物科技有限公司