專利名稱：細(xì)霉素衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新穎的細(xì)霉素(I印tomycin)衍生物及其治療用途。更特別的，本發(fā)明涉及含有可共價結(jié)合于細(xì)胞結(jié)合劑的部分(連接基團(tuán))的新穎的細(xì)霉素衍生物，并且該相應(yīng)的結(jié)合物包括通過連接體結(jié)合于所述細(xì)胞結(jié)合劑的所述細(xì)霉素衍生物。所述結(jié)合物提供能夠在體內(nèi)被活化和釋放的治療劑，并且以靶向的方式遞送到特定細(xì)胞群。
背景技術(shù)：
已出現(xiàn)許多涉及用單克隆抗體-藥物結(jié)合物靶向腫瘤細(xì)胞的報告{Sela etal, Immunoconjugatesj 第 189-216 頁(C.Vogel,ed. 1987) ；Ghose et al，TargetedDrugs,第 1-22 頁(E. Goldberg, ed. 1983) ；Diener et al,Antibody Mediated DeliverySystems,第 1-23 頁(J. Rodwel1，ed. 1988) ；Pietersz et al, Antibody MediatedDelivery Systems,第 25-53 頁(J. Rodwellj ed. 1988) ；Bumol et al, AntibodyMediated Delivery Systems,第 55-79 頁(J.Rodwell，ed. 1988) ；G.A. Pietersz &K. Krauerj 2J. Drug Targeting，183-215 (1994) ；R. V. J. Chari, 31 Adv. Drug DeliveryRevs.，89-104 (1998) ；W. A. Blattler & R. V. J. Chari, in Anti cancer Agents, Frontiersin Cancer Chemotherapy，317-338，ACS Symposium Series 796 ；以及 I. Ojima et aleds，American Chemical Society 2001}。細(xì)胞毒藥物例如甲氨蝶呤、柔紅霉素、多柔比星、長春新堿、長春堿、美法侖、絲裂霉素C、苯丁酸氮芥、剌孢霉素(calicheamicin)和maytansinoids已結(jié)合于多種鼠科單克隆抗體。在某些情況下，該藥物分子通過中間載體分子連接于抗體分子，該中間載體分子例如血清白蛋白{Garnett et al, 46 CancerRes. 2407-2412 (1986) ；Ohkawa et al,23 Cancer Immunol. Immunother. 81-86(1986)；Endo et al, 47 Cancer Res. 1076-1080 (1980) }、右旋糖酐{Hurwitz et al, 2 Appl.Biochem. 25-35(1980) ；Manabi et al,34 Biochem. Pharmacol. 289-291 (1985) ；Dillmanet al, 46 Cancer Res. 4886-4891 (1986)；以及 Shoval et al, 85 Proc. Natl. Acad.Sci. U.S. A. 8276-8280 (1988)}、或者聚谷氨酸{Tsukada et al, 73 J. Natl. Cane.Inst. 721-729 (1984) ；Kato et al, 27 J. Med. Chem. 1602-1607 (1984) ；Tsukada et al, 52Br. J. Cancer 111-116(1985)}。目前有大量的連接體可用于制備此類免疫結(jié)合物，包括能裂解的和不能裂解的連接體。然而，體外細(xì)胞毒試驗已顯示，抗體-藥物結(jié)合物很少達(dá)到與游離的未結(jié)合的藥物相同的細(xì)胞毒效能。這提示藥物分子從結(jié)合的抗體釋放的機(jī)制是非常低效的。免疫毒素領(lǐng)域的早期著作顯示，通過單克隆抗體與催化活性蛋白毒素之間的二硫鍵形成的結(jié)合物比含有其它連接體的結(jié)合物更具毒性{Lambert et al，260 J. Biol. Chem. 12035-12041 (1985)；Lambert et al, Immunotoxins 175-209(A. Frankelj ed. 1988) ；Ghetie et al,48 CancerRes. 2610-2617 (1988) }0此種改善的細(xì)胞毒性要?dú)w因于高的還原型谷胱甘肽的細(xì)胞內(nèi)濃度造成該抗體分子與該毒素之間二硫鍵的有效裂解。Maytansinoids和刺孢霉素是高細(xì)胞毒性的藥物的最初實例，它們通過二硫鍵連接到單克隆抗體。已顯示這些藥物的抗體結(jié)合物在體外具有高的效能，以及在小鼠中的人腫瘤移植物模型中特別的抗腫瘤活性{R. V. J. Chari et al. , 52 Cancer Res.，127-131 (1992) ；C. Liu et al. , 93, Proc. Natl.Acad. Sci.，8618—8623 (1996) ；L. M. Hinman et al. , 53, Cancer Res.，3536-3542 (1993);以及 P. R. Hamann et al, 13, BioConjugate Chem. , 40-46 (2002)}。細(xì)霉素B
權(quán)利要求
1.制備結(jié)合物的方法，其包括使含有二硫化物或硫醇的細(xì)霉素衍生物與肽或抗體反應(yīng)的步驟，所述肽或抗體用選自以下的試劑修飾N-琥珀酰亞胺基4-(2-吡啶基二硫)戊酸酯、4-琥珀酰亞胺基-氧基羰基-a -甲基-a - (2-吡啶基二硫)_甲苯、N-琥珀酰亞胺基-3-(2-吡啶基二硫)丁酸酯、琥珀酰亞胺基吡啶基-二硫丙酸酯、4-(2-吡啶基二硫)丁酸N-氫琥珀酰亞胺酯、琥珀酰亞胺基4-[N-馬來酰亞胺基甲基]環(huán)己烷-I-羧酸酯，N-硫代琥珀酰亞胺基-3-(2-(5-硝基-吡啶基二硫)丁酸酯、2-亞氨基硫戊烷或S-乙?；晁狒?； 所述含有二硫化物或硫醇的細(xì)霉素衍生物為式(I)的細(xì)霉素衍生物
2.權(quán)利要求I所述的方法，其中Ra是直線或分支的C1-C2tl烷基并且R’a是H。
3.權(quán)利要求I或2所述的方法，其中R17是直線或分支的C1-C2tl烷基。
4.權(quán)利要求I或2所述的方法，其中R9是直線或分支的C1-C2tl烷基。
5.權(quán)利要求I或2所述的方法，其中T是H或SR1，其中R1表示直線或分支的C1-C2tl烷基。
6.權(quán)利要求I所述的方法，其中所述細(xì)霉素衍生物選自< (2E, 10E, 12E, 16Z, 18E) - (R)-6-羥基-3，5，7，9，11，I 5，I 7-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氫-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九燒-2, 10, 12, 16, 18-五烯酸的(2-甲基硫燒基-乙基)_酰胺；雙-[(2E, 10E, 12E, 16Z, 18E)-(R)-6-羥基-3，5，7，9，11，15，17-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氫-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九烷-2，10，12，16，18-五烯酸的(2-巰乙基)-酰胺]；(2E, 10E, 12E, 16Z, 18E) - (R)-6-羥基-3，5，7，9，11，I 5，I 7-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氫-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九燒-2, 10, 12, 16, 18-五烯酸的(2-巰基-乙基)-酰胺；(2E, 10E, 12E, 16Z, 18E) - (R)-6-羥基-3，5，7，9，11，I 5，I 7-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氫-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九燒-2, 10, 12, 16, 18-五烯酸的(2-甲基二硫燒基-乙基)_酰胺；(2E, 10E, 12E, 16Z, 18E) - (R)-6-羥基-3，5，7，9，11，I 5，I 7-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氫-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九燒-2, 10, 12, 16, 18-五烯酸的(2-甲基-2-甲基二硫燒基-丙基)-酰胺；(2E, 10E, 12E, 16Z, 18E)-(R)-6-羥基-3，5，7，9，11，I 5，I 7-七甲基-19-((2S，3S) -3-甲基-6-氧代-3，6- 二氫-2H-吡喃-2-基)_8_氧代-十九燒-2, 10, 12, 16, 18-五烯酸的(2-巰基-2-甲基-丙基)-酰胺； 或者藥學(xué)可接受的鹽或其光學(xué)異構(gòu)體、外消旋體、非對映體或?qū)τ丑w。
7.制備硫醚連接的結(jié)合物的方法，其包括使權(quán)利要求I至6任一項所述的含有硫醇的細(xì)霉素衍生物與抗體或細(xì)胞結(jié)合劑反應(yīng)的步驟，所述抗體或細(xì)胞結(jié)合劑經(jīng)以下化合物修飾N-硫代琥珀酰亞胺基-4- (5-硝基-2-吡啶基-二硫)丁酸酯、N-琥珀酰亞胺基4-(馬來酰亞胺基甲基)環(huán)己烷-羧酸酯、N-琥珀酰亞胺基-4-(N-馬來酰亞胺基甲基)_環(huán)己烷-I-羧基-(6-氨基己酸酯)、N-琥珀酰亞胺基-4-(碘乙?；?-氨基苯甲酸酯、N-琥珀酰亞胺基碘乙酸酯、N-琥珀酰亞胺基溴乙酸酯和N-琥珀酰亞胺基3-(溴-乙酰氨基)丙酸酯。
8.抑制所選細(xì)胞群生長的治療劑，其包含 (a)細(xì)胞毒量的與細(xì)胞結(jié)合劑連接的權(quán)利要求I至6任一項所述的細(xì)霉素衍生物，和 (b)藥學(xué)可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的治療劑，其用于治療惡性腫瘤。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的治療劑，其用于治療肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、腎癌、胰癌、卵巢癌、淋巴器官癌或黑素瘤。
全文摘要
公開了具有一個部分例如硫化物或二硫化物的細(xì)霉素衍生物，其可結(jié)合于細(xì)胞結(jié)合試劑例如抗體。還描述了此類細(xì)霉素衍生物結(jié)合物的治療用途；此類結(jié)合物具有治療用途，因為它們能以靶向的方式向特定細(xì)胞群釋放細(xì)胞毒性的細(xì)霉素衍生物。
文檔編號C07K1/113GK102731611SQ20121021647
公開日2012年10月17日 申請日期2007年5月23日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月9日
發(fā)明者A.康默康, H.鮑查德, R.V.J.查里 申請人:賽諾菲-安萬特