一種靶向腫瘤血管Anxa1標記前體NOTA-IF 7的制備方法
【專利摘要】一種靶向腫瘤血管Anxa1標記前體NOTA-IF?7的制備方法，屬于有機化學和藥物領(lǐng)域。本發(fā)明由雙功能螯合劑1，4，7-三氮雜環(huán)壬烷-1，4，7-三乙酸(1，4，7-triazacyclononane-1，4，7-triaceticacid，p-SCN-Bn-NOTA，簡寫NOTA)與特異性結(jié)合腫瘤血管Anxa1的7肽氨基酸(異亮氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-亮氨酸-色氨酸-谷氨酰胺-精氨酸，IF7)耦合，經(jīng)高效液相色譜法（HPLC）一歩法純化得到NOTA-IF7。本發(fā)明所述NOTA-IF7的制備方法簡便，工藝反應條件溫和，產(chǎn)率高，該產(chǎn)品可用于氟-18、銅-64和鎵-68等同位素標記，方便制得腫瘤的正電子顯像劑。
【專利說明】—種靶向腫瘤血管Anxal標記前體NOTAHF 7的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明一種靶向腫瘤血管Anxal標記前體NOTA-1F 7的制備方法，可用于腫瘤顯像劑的研制，在腫瘤藥物研制和腫瘤早期診斷等生物應用領(lǐng)域具有重要的作用，屬于有機化學和藥物領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]癌癥是嚴重威脅人類健康的疾病，癌癥的早期診斷和治療可以減輕患者痛苦和精神、經(jīng)濟負擔，爭取讓癌癥患者早日康復。目前，大多數(shù)用于診斷與治療的靶向藥物為單克隆片段，其腫瘤穿透能力差，不能特異地被單核巨噬細胞系統(tǒng)捕獲。而多肽具有量小，免疫原性低，良好的組織穿透能力和腫瘤組織親合力高等優(yōu)點，靶向藥物的研究一直是腫瘤診斷和治療的熱點。
[0003]1971年，F(xiàn)olkman最早提出腫瘤生長是血管依賴性的，腫瘤血管不僅可向腫瘤提供充足的營養(yǎng)，同時也是腫瘤細胞惡性生長和轉(zhuǎn)移的重要條件。膜聯(lián)蛋白Al(annexin Al，Anxall)是膜聯(lián)蛋白超家族中的一員，它參與細胞信號轉(zhuǎn)導、分化及凋亡等多種重要的生命過程。Anxal是腫瘤新生血管特異的標志物，是EGFR的底物，可以特異性調(diào)節(jié)MAPK/ERK信號傳導通路，同時作為PLA2的抑制劑等參與信號轉(zhuǎn)導、細胞凋亡、鈣離子通道的形成等眾多生理過程，其在腫瘤組織及癌前病變中的表達明顯高于在相應的正常組織中的表達，其與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、診斷及治療密切相關(guān)。
[0004]糖模擬肽(carbohydrate mimetic peptide, CMP),是一短序列肽分子，能模擬生物大分子或細胞表面復雜的糖結(jié)構(gòu)，常用于替代糖分子進行誘導免疫反應制備特異性抗體。CMP分子小，血漿清除快，在藥代動力學方面極具優(yōu)勢，備受研究者青睞，現(xiàn)在也多用于篩選受體或抗體的特異性高親和力配體。如能篩選出一種與腫瘤新生血管特異性結(jié)合的CMP,將有較高應用前景。Shingo Hatakeyama等在研究糖模擬肽的過程中，發(fā)現(xiàn)了一個名為IF 7的七肽片段，能有效靶向腫瘤血管，而且基本不引起免疫反應。
[0005]結(jié)合Shingo Hatakeyama等的研究,我們發(fā)展了以IF 7為基礎(chǔ)，以Anxal為革巴點，用雙功能連接劑P-SCN-Bn-NOTA與IF 7進行螯合生成NOTA-1F 7，其結(jié)構(gòu)含有大環(huán)多胺類螯合基團Ν0ΤΑ，易于實現(xiàn)氟-18、銅-64和鎵-68等標記，為腫瘤的診斷提供一種新的顯像劑。所得配合物制備簡單、價格便宜以及較高靶/非靶比值的優(yōu)點。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是提供一種靶向腫瘤血管Anxal標記前體NOTA-1F 7的制備及純化方法。功能螯合劑NOTA與IF 7耦合，經(jīng)HPLC —步法純化得到N0TA-1F7，后者可以提供放射性正電子核素的標記靶點，在抗腫瘤藥物研制和分子成像等生物應用領(lǐng)域具有重要的作用。
[0007]本發(fā)明的技術(shù)方案，具體合成路線如下:
【權(quán)利要求】
1.一種靶向腫瘤血管Anxal標記前體NOTA-1F 7的制備方法，其特征在于步驟如下: (1)溶解:稱取8mgNOTA溶解在50 μ L 二甲基亞砜DMSO中，得到溶液a ;稱取20mg IF7溶解在300 μ L 二甲基甲酰胺DMF中，得到溶液b ； (2)N0TA-1F7的制備:將步驟(1)制得的溶液a和溶液b按NOTA: IF 7質(zhì)量比1_2:I加到玻璃瓶中，再加5(^1^二異丙基乙胺0^么，401:反應2h ;冷卻至室溫，在反應液中加Λ 30 μ L乙酸終止反應； (3)純化:取步驟(2)制備的N0TA-1F7，用制備型高效液相HPLC純化；流動相A為含質(zhì)量百分比0.1%三氟乙酸TFA的純水，B為含質(zhì)量百分比0.1%三氟乙酸TFA的乙腈，流速20mL/min,進樣體積為lmL，檢測波長254nm ;梯度洗脫，流動相組成從5min的95% A和5%B增加到24min的35% A和65% B,收集15_16min的組分，得到產(chǎn)品靶向腫瘤血管Anxal標記前體NOTA-1F 7。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述靶向腫瘤血管Anxal標記前體N0TA-1F7的制備方法，其特征在于純化條件為:ffaters XBridge C-18 色譜柱 150 mm X 19mm, 5 μ m。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述靶向腫瘤血管Anxal標記前體N0TA-1F7的制備方法，其特征在于:所述IF7為7肽氨基酸，具體為異亮氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-亮氨酸-色氨酸-谷氨酰胺-精 氨酸。
【文檔編號】C07K1/13GK103936830SQ201410006010
【公開日】2014年7月23日 申請日期:2014年1月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月7日
【發(fā)明者】蔣孟軍, 吳鵬西, 陳宏偉, 朱寶, 陳越新 申請人:蔣孟軍, 吳鵬西, 陳宏偉, 朱寶, 陳越新