一種制備艾替班特的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種制備艾替班特的方法。本發(fā)明的具體步驟為：A）通過液相合成片段Boc-D-Arg-Arg-OH.2HCl；B）采用固相合成法，以王樹脂為起始樹脂，按照艾替班特主鏈肽序依次偶聯(lián)具有N端Fmoc保護(hù)且側(cè)鏈保護(hù)的氨基酸，其中最后兩個(gè)氨基酸偶聯(lián)采用片段Boc-D-Arg-Arg-OH.2HCl偶聯(lián)；C）肽樹脂裂解、純化、脫鹽、凍干后可以得到艾替班特，其缺失肽雜質(zhì)des-D-Arg1-艾替班特和des-Arg2-艾替班特含量都小于0.1%。本發(fā)明提供了一種純度高、成本低，適合規(guī)?；a(chǎn)的艾替班特的制備工藝，此工藝既能有效控制雜質(zhì)des-D-Arg1-艾替班特和des-Arg2-艾替班特的含量又不影響艾替班特的收率。
【專利說明】一種制備艾替班特的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種多肽類藥物的制備方法，是一種合成具有選擇性抑制緩激肽與B2受體結(jié)合以治療遺傳性血管水腫治療特效藥-艾替班特的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]艾替班特,英名為:Icatibant,是含有5個(gè)非蛋白源氨基酸的十肽,結(jié)構(gòu)式如下:
【權(quán)利要求】
1.一種制備艾替班特的方法，提供了一種純度高、成本低，適合規(guī)?；a(chǎn)的艾替班特的制備工藝，此工藝既能有效控制雜質(zhì)des-D-Arg1-艾替班特和des-Arg2-艾替班特的含量又不影響艾替班特的收率，其特征在于，所述方法包括以下步驟: 步驟I，通過液相合成片段Boc-D-Arg-Arg-OH.2HC1 ； 步驟2，采用固相合成法，以王樹脂為起始樹脂，按照艾替班特主鏈肽序依次偶聯(lián)具有N端Fmoc保護(hù)且側(cè)鏈保護(hù)的氨基酸，其中最后兩個(gè)氨基酸偶聯(lián)采用片段Boc-D-Arg-Arg-OH.2HC1 偶聯(lián)； 步驟3，肽樹脂裂解、純化、脫鹽、凍干后可以得到艾替班特，其缺失肽雜質(zhì)des-D-Arg1-艾替班特和des-Arg2-艾替班特含量都小于0.1%。
2.根據(jù)權(quán)利 要求1所述的方法，其特征是: 其中，步驟I所述的片段Boc-D-Arg-Arg-OH.2HC1的液相合成步驟為=Boc-D-Arg-OH.HCl.HOSu 和 DCC 偶聯(lián)得到 Boc-D-Arg-OSu.HCl，然后 Boc-D-Arg-OSu.HCl 和 H-Arg-OH 反應(yīng)得到二肽片段 Boc-D-Arg-Arg-OH，重結(jié)晶后得到 Boc-D-Arg-Arg-OH.2HC1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是: 其中，步驟2所述的固相合成方法，I)采用王樹脂為起始樹脂，在活化劑系統(tǒng)的存在下,Fmoc-Arg (Pbf) -OH和王樹脂偶聯(lián)得到取代度為 0.60-0.90mmol/g 的 Fmoc-Arg (Pbf)-王樹脂；2)采用由體積比為4:1的DMF和哌啶組成的去保護(hù)液脫除氨基酸樹脂上的Fmoc保護(hù)基；3)在偶聯(lián)劑系統(tǒng)的存在下，H-Arg (Pbf)-王樹脂和Fmoc-Oic-OH偶聯(lián)得到Fmoc-Oic-Arg(Pbf)-王樹脂；4)重復(fù)步驟2)、3),按照艾替班特主鏈肽序依次偶聯(lián)具有N端Fmoc保護(hù)且側(cè)鏈保護(hù)的氨基酸，其中，最后兩個(gè)氨基酸偶聯(lián)采用片段Boc-D-Arg-Arg-OH.2HC1 偶聯(lián)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是: 所述活化劑系統(tǒng)由DIC、HOBt和DMAP組成；所述偶聯(lián)劑系統(tǒng)包括縮合劑和反應(yīng)溶劑，所述縮合劑選自DIC/HOBt、PyBOP/HOBt/DIEA或HATU/HOBt/DIEA ;所述反應(yīng)溶劑選自DMF、DCM、NMP, DMSO或他們之間的組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是: 優(yōu)選地，步驟 2)中，二肽 Boc-D-Arg-Arg-OH.2HC1 偶聯(lián)過程中，H-Pro-Hyp (tBu) -Gly-Th1-Ser (tBu) -D-Tic-Oic-Arg (Pbf)-王樹脂、Boc-D-Arg-Arg-OH.2HC1、DIC 和 HOBt 的摩爾比優(yōu)選為:1:3:3:3~1:5:5:5，反應(yīng)溫度為25~35°C，反應(yīng)時(shí)間為2~3小時(shí)；更優(yōu)選，H-Pro-Hyp (tBu) -Gly-Th1-Ser (tBu) -D-Tic-Oic-Arg (Pbf)-王樹脂、Boc-D-Arg-Arg-OH.2HC1、DIC和HOBt的摩爾比優(yōu)選為:1:3:3:3，反應(yīng)溫度為25°C，反應(yīng)時(shí)間為2小時(shí)。
【文檔編號】C07K1/06GK103992383SQ201410209368
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年6月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月27日
【發(fā)明者】何南海, 葉曉峰, 林曉峰, 楊東暉, 路楊 申請人:杭州諾泰制藥技術(shù)有限公司