從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法
【專(zhuān)利摘要】從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，包括以下步驟：（1）原料準(zhǔn)備：將普通油茶葉洗凈、除雜、風(fēng)干，粉碎；（2）提取：將普通油茶葉粉用乙醇溶液加熱浸提，過(guò)濾，濃縮，得濃縮液；（3）分離純化：將濃縮液過(guò)大孔樹(shù)脂，然后用蒸餾水及乙醇溶液依次洗脫，分別收集、合并洗脫液，得洗脫液混合物；（4）硅膠分離：將洗脫液混合物濃縮后進(jìn)行硅膠層析，然后用二氯甲烷、甲醇和水的混合溶液進(jìn)行洗脫，分別收集目標(biāo)餾分段；（5）液相制備：分別將目標(biāo)餾分段濃縮后溶解，用液相半制備收集，即成。經(jīng)過(guò)鑒定確認(rèn)了兩種目標(biāo)產(chǎn)物成分，其得率可達(dá)37mg/kg和200mg/kg，純度＞90%；本發(fā)明方法制備工藝簡(jiǎn)便，適于工業(yè)生產(chǎn)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種分離聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，具體涉及一種從普通油茶葉中分離出 兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 我國(guó)生長(zhǎng)的油茶主要有以下幾種：普通油茶（Camellia oleifera Abel)約占總面 積的98 %，其次為浙江省的浙江紅花油茶、云南省的騰沖紅花油茶、廣東省和廣西的南山茶 等。油茶研宄大多著眼于油茶果或其種質(zhì)資源，每年四五月間打葉產(chǎn)生的大批落葉造成了 很大的資源浪費(fèi)。
[0003] 研宄表明，油茶葉成分組成復(fù)雜，含有脂肪、還原糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、酸、灰分、葉 綠素、茶皂素和黃酮類(lèi)物質(zhì)等成分，其活性成分具有抗氧化、抗自由基、抑菌保鮮，及抗癌、 防癌等功效。近年來(lái)，油茶活性成分的研宄瓶頸在于提取方法及分離純化技術(shù)的落后，不能 很好的實(shí)現(xiàn)油茶中活性成分的高效提取或分離。
[0004] 3,5,4'-三羥基聯(lián)芐又名二氫白藜蘆醇，0八5#58436-28-5，分子式為（：14!1 1403，分子 量為230,其結(jié)構(gòu)式如下所示：

【權(quán)利要求】
1. 一種從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，其特征在于：包括以下步 驟： (1) 原料準(zhǔn)備：將普通油茶葉洗凈并去除雜質(zhì)，自然風(fēng)干，粉碎得普通油茶葉粉備用； (2) 提?。簩⑵胀ㄓ筒枞~粉用體積分?jǐn)?shù)20?80%的乙醇溶液進(jìn)行加熱浸提，過(guò)濾得提 取液，將提取液濃縮至體積為濃縮前的30?50%，得濃縮液； (3) 分離純化：將步驟（2)所得濃縮液的2. 0?3. 5BV過(guò)大孔樹(shù)脂，吸附完成后，用2? 6 BV蒸饋水，1?8 BV體積分?jǐn)?shù)15?25%的乙醇溶液，0. 5?6 BV體積分?jǐn)?shù)45?55%的 乙醇溶液，0. 5?6 BV體積分?jǐn)?shù)75?85%的乙醇溶液依次洗脫，分別收集洗脫液，將體積分 數(shù)45?55%和75?85%的乙醇溶液洗脫液合并，得洗脫液混合物； (4) 硅膠分離：將步驟（3)所得洗脫液混合物濃縮后進(jìn)行硅膠層析，然后選用二氯 甲烷、甲醇和水中二氯甲烷含量以梯度遞減的混合溶液作為洗脫劑先后進(jìn)行洗脫，分 段收集洗脫液，經(jīng)過(guò)液相色譜檢測(cè)，合并含有3, 5, 4' -三羥基聯(lián)芐的餾分段，命名為第 一順序組分；合并含有1_(3'，5' -二甲氧基）苯基-2 _[4'' -0-0-D-吡喃葡萄糖基 (6 - 1)-0-a -L-吡喃鼠李糖基]苯乙烷的餾分段，命名為第二順序組分； (5) 液相制備：將步驟（4)所得第一順序組分濃縮后用氮吹儀吹干，用相當(dāng)于其1?2 倍量mL/g的二甲基亞砜溶解，進(jìn)行液相色譜檢測(cè)，采用液相半制備收集3, 5, 4' -三羥基聯(lián) 芐的餾分，干燥得3, 5, 4' -三羥基聯(lián)芐。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，其特征在 于：將步驟（4)所得第二順序組分濃縮后用氮吹儀吹干，用相當(dāng)于其1?2倍量mL/g的 二甲基亞砜溶解，進(jìn)行液相色譜檢測(cè)，采用液相半制備收集1-(3'，5' -二甲氧基）苯 基-2-[4' ' -0-0 -D-吡喃葡萄糖基（6 - 1)-0-a -L-吡喃鼠李糖基]苯乙烷的餾分，干燥 得1-(3'，5' -二甲氧基）苯基-2-[4'' -0-0-D-吡喃葡萄糖基（6 - 1)-0-a-L-吡喃鼠 李糖基]苯乙烷。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，其特征 在于：步驟（2)中，所述加熱浸提中每克普通油茶葉粉加入1. 5?6mL體積分?jǐn)?shù)20?80% 的乙醇溶液，浸提溫度為50?80°C，浸提多1次，每次1?3h。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，其特征在 于：步驟（2)中，所述加熱浸提中每克普通油茶葉粉加入2?3mL體積分?jǐn)?shù)45?65%的乙 醇溶液，浸提溫度為60?70°C，浸提2?4次，每次2h。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，其特 征在于：步驟（2)中，所述濃縮為減壓濃縮，濃縮的溫度為40?50°C，真空度為0. 08? 0. 09MPa ;步驟（4)中，所述濃縮為減壓濃縮，濃縮的溫度為35?45°C，真空度為0. 08? 0. 09MPa，濃縮后濃縮液中固含量為34?36% ;步驟（5)中，所述濃縮為減壓濃縮，濃縮的溫 度為30?40°C，真空度為0. 08?0. 09MPa，濃縮至溶劑完全蒸發(fā)。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，其特征 在于：步驟（3)中，用3?4 BV蒸餾水，4?6 BV體積分?jǐn)?shù)15?25%的乙醇溶液，1?2 BV 體積分?jǐn)?shù)45?55%的乙醇溶液、1?2 BV體積分?jǐn)?shù)75?85%的乙醇溶液依次洗脫。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，其特征 在于：步驟（4)中，所述二氯甲烷、甲醇和水中二氯甲烷含量以梯度遞減的混合溶液中體積 配比依次為7?9:1:0. 1、6?8:1:0. 1、4?6:1:0. 1，洗脫體積分別為0.8?1.2BV、2.5? 3. 5BV、1. 5 ?2. 5BV。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，其特征 在于：步驟（3)、（4)中，所述洗脫的流速為0. 5?1. 5BV/h。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，其特征 在于：步驟（3)中，所述大孔樹(shù)脂為D-101型大孔樹(shù)脂。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從普通油茶葉中分離出兩種聯(lián)芐類(lèi)化合物的方法，其特 征在于：步驟（3)中，所述大孔樹(shù)脂的用量為9?11L，大孔樹(shù)脂填充的徑高比為1:4. 5? 5. 5 ;步驟（4)中，所述硅膠的用量為0. 8?1. 2L，硅膠填充的徑高比為1:4?5。
【文檔編號(hào)】C07C39/16GK104496762SQ201510013675
【公開(kāi)日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2015年1月12日 優(yōu)先權(quán)日:2015年1月12日
【發(fā)明者】曹清明, 鄔靖宇, 鐘海雁 申請(qǐng)人:中南林業(yè)科技大學(xué)