專利名稱：2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物和其制法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物，其制備方法和含其的抗腫瘤組合物。
人們已經(jīng)認(rèn)識到2′-脫氧-5-氟尿苷(下文稱作FdUrd)在抑制細胞能力試驗(體內(nèi))中，具有極大的腫瘤增生抑制作用。然而，由于FdUrd會快速代謝和分泌，使其大部分分解成5-氟尿嘧啶，因此很難發(fā)現(xiàn)FdUrd比5-氟尿嘧啶有什么任何特殊的優(yōu)點和作用。此外，加上FdUrd的毒性很大，所以現(xiàn)在也僅僅只有在美國把它用作為動脈內(nèi)注射液〔Physicians′DeskReference32edition，1387(1978)〕。為能克服FdUrd的缺點，人們進行了廣泛研究，曾提出過磷酸酰胺化物衍生物(見未經(jīng)審查的日本公開專利申請(公開)號128699/1982)，任意含有醚鍵或在5′位具有亞胺鍵的脂族烴的磷酸酯衍生物等(見公開號99499/1983，70699/1984，93096/1984，91195/1986，91196/1986，152694/1986，236793/1986的專利公報)。
同F(xiàn)dUrd相比較，上面所提各種FdUrd衍生物中的任何一種的抗癌活性并沒有充分提高，并且其副作用也幾無減少。
本發(fā)明目的之一是提供新的FdUrd衍生物，它們同F(xiàn)dUrd和其它已知的FdUrd衍生物相比，具有較高的高癌活性和較低毒性。本發(fā)明目的之二是提供這類新FdUrd衍生物的制備方法。本發(fā)明目的之三是提供含有作為活性組分的所說新FdUrd衍生物的抗腫瘤組合物，該組合物能用作口服給藥和注射給藥。
根據(jù)本發(fā)明，能通過下面來達得上面所提的各個目的。
(1)式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物
式中R1為氫原子或?；?，R2和R3分別表示氫原子，?；蚴?
，其中X1和X2分別為氧原或硫原子，R4為各自可以由烷基，烷氧基，烷氧羰基，烷硫基，酰基，鹵原子，三氟甲基，硝基，氰基，羧基或亞甲二氧基所取代的苯基，芐基或萘基，R5為烷基，鏈烯基或為由R4表示的基團之一(此時R5可相同或不同于R4)，并且R2和R3中至少一個為
(2)制備式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物的方法，其包括將下式(Ⅱ)化合物與式(Ⅲ)化合物進行反應(yīng)，如有必要，對所得反應(yīng)產(chǎn)物再進行羥基保護基的脫保護反應(yīng)，式(Ⅱ)化合物為
式中R1定義如前，R6和R7分別為氫原子或保護的羥基，并且R6和R7不能同時為保護的羥基，式(Ⅲ)化合物為
式中X1，X2，R4和R5分別定義如前，Y為鹵原子，(3)制備式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物的方法，其包括在有縮合劑存在下，式(Ⅱ)化合物與式(Ⅳ)化合物進行反應(yīng)，如有必要，對所得反應(yīng)產(chǎn)物可再進行羥基保護基的脫保護反應(yīng)，式(Ⅳ)化合物為
式中X1，X2，R4和R5分別定義如前，R8為氫原子，金屬陽離子，銨離子或有機銨離子，(4)抗腫瘤組合物，其特征是含有作為有效組分的式(Ⅰ)2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物。
下面詳細給出式(Ⅰ)中R1，R2和R3的定義。R1為氫原子或?；?。R1中所表示的酰基為具有1至7個碳原子的脂族?；缂柞?，乙酰，丙酰，丁酰，戊酰和己酰;苯甲?；?3，4-亞甲二氧基苯甲?；?芳族酰基例如可以有一個或至少二個取代基所取代的苯甲?；蜉良柞；?，取代基例如具有1至6個碳原子的烷基例如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，叔丁基，正己基和異己基;含有1至6個碳原子的烷氧基例如甲氧基，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，異丁氧基，叔丁氧基，正己氧基和異己氧基;鹵原子例如氟，氯，溴和碘;具有2至7個碳原子的烷氧羰基例如甲氧羰基，乙氧羰基，正丁氧羰基和正己氧羰基;在鄰，間或?qū)ξ坏那杌蛳趸?。?dāng)苯甲酰基或萘甲?；辽倬咴诙€取代基時，所述取代基可相同或不同。對于R1來說，其較好為氫原子，乙?；郊柞；g或?qū)谆郊柞；?，間或?qū)籽趸郊柞；?，4-亞甲二氧基苯甲?；取2和R3分別表示氫原子，?；蚴?Ⅴ)基團
式中X1和X2分別為氧原子或硫原子。R4為各自可以有一個取代基或至少二個取代基的苯基，芐基或萘基，取代基例如具有1至6個碳原子的烷基如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，叔丁基，正己基和異己基;具有1至6個碳原子的烷氧基如甲氧基，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，異丁氧基，叔丁氧基，正己氧基和異己氧基;具有2至7個碳原子的烷氧羰基如甲氧羰基，正丁氧羰基和正己氧羰基;具有1至6個碳原子的烷硫基如甲硫基，乙硫基，正丁硫基，異丁硫基，正己硫基和異己硫基;具有1至7個碳原子的?；缂柞＃阴?，丙酰，丁酰，戊酰，己酰和苯甲?；?囟原子如氟，氯，溴和碘;三氟甲基;硝基;氰基;羧基和亞甲二氧基。這里苯基，芐基和萘基上的取代基可以連接在苯環(huán)和萘環(huán)上的任意位置。當(dāng)苯基，芐基或萘基至少具有二個取代基時，其取代基可相同或不同。對于帶有至少二個取代基的苯基，芐基或萘基來說，可以為2，3-二氯苯基，2，4-二氯苯基，3，4-二氯苯基，2，6-二氯苯基，3，5-二氯苯基，4-氯-3-甲基苯基，2-溴-4-甲基苯基，2-氯-4-硝基苯基，3，4-二甲基苯基，6-叔丁基-4-甲基苯基，2，3，5-三氯苯基，2，3，5-三甲基苯基，2，4-二氯芐基，2，5-二氯芐基，2，6-二氯芐基，3，4-二氯芐基，3，5-二氯芐基，4-氯-3-硝基芐基，2，4-二甲基芐基，2，4-二氯-1-萘基等。R5包括R4所代表的基團(同時R5可與R4相同或不同)，或具有1至15個碳原子的烷基或鏈烯基。對烷基來說，可以是甲基，乙基，正丁基，異丁基，正辛基，正十二烷基，3-甲基丁烯-1-基，3，7-二甲基辛-1-基等。鏈烯基可以是所提的2-丁烯-1-基，2-甲基丁烯-1-基，3，7-二甲基-2，6-辛二烯-1-基，3，7-二甲基-6-辛烯-1-基等。其中，R4和R5優(yōu)選分別為間或?qū)β缺交?，間或?qū)Ψ交?，間或?qū)θ谆交?，4-二氯苯基，3，5-二氯苯基，2，4-二氯苯基，2，3-二氯苯基，間或?qū)︿灞交?，間或?qū)η杌交?，間或?qū)ο趸交?，間或?qū)籽豸驶交?，間或?qū)σ阴１交?，間或?qū)谆交?。分別對于R2和R3中的?；鶃碚f，其可以是前面R1所表示的?；?。較佳?；鶠橐阴＃?，丁酰，苯甲?；?，間甲基苯甲?；?。
式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物的具體例子為下列化合物。
2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二苯酯2′-脫氧-5-氟-3′-尿苷酸二苯酯2′-脫氧-5-鄰(二苯氧基氧膦基)-5-氟-3′-尿苷酸二苯酯3-苯甲酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對甲基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對正己基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對甲氧基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間正己氧基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對甲氧羰基苯酯
2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間甲氧羰基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對正己氧羰基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對甲硫基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對正己硫基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間乙酰苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對乙酰苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對苯甲?；锦?′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間氟苯酯3-對己氧羰基苯甲酰基-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氟苯酯3-對硝基苯甲?；?2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氟苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氟苯酯3-(3，4-亞甲二氧基苯甲酰基)-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氟苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-鄰氯苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間氯苯酯3-間甲氧苯甲?；?2′-脫氧-5-氟-5-尿苷酸二-間氯苯酯3-對甲基苯甲?；?2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間氯苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯3-甲酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯3′-鄰乙酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯3′-鄰丁酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯3′-鄰苯甲?；?2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯3′-鄰甲基苯甲酰基-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯3-乙酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯3-苯甲?；?2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯3-間甲基苯甲酰基-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯
3-(3，4-亞甲二氧基苯甲酰基)-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯3′-鄰乙酰-3-苯甲?；?2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間溴苯酯3′-鄰己酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對溴苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對溴苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間三氧甲基苯酯3′-鄰丙酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間三氟甲基苯酯3′-鄰丁酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間三氟甲基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對三氟甲基苯酯3-(3，4-亞甲二氧基苯甲?；?-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對三氟甲基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-鄰氰基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間氰基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氰基苯酯3-間甲氧基苯甲?；?2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氰基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-鄰硝基苯酯3-己酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-鄰硝基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間硝基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對硝基苯酯3′-鄰乙酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對硝基苯酯3-(3，4-亞甲二氧基苯甲酰基)-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對硝基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對羧基苯酯3-(1-萘甲?；?-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對羧基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(3，4-亞甲二氧基苯酯)
3′-丁酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(3，4-亞甲二氧基苯酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(2，3-二氯苯酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(2，4-二氯苯酯)3′-鄰乙酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(2，4-二氯苯酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(3，4-二氯苯酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(3，5-二氯苯酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(4-氯-3-甲基苯酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(2-溴-4-甲基苯酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(2-氯-4-硝基苯酯)3′-鄰乙酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(3，4-二甲基苯酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(2，3，5-三氯苯酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(2，3，5-三甲基苯酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-1-萘酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-2-萘酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-4-甲氧羰基苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(2，4-二氯-1-萘酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二芐酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(4-氯-3-硝基芐酯)2′-脫氧-5-氟尿苷5′-(S，S-二苯基二硫代磷酸酯)2′-脫氧-5-氟尿苷5′-(S，S-二-對甲氧苯基二硫代磷酸酯)2′-脫氧-5-氟尿苷5′-(S，S-二-對氯苯基二硫代磷酸酯)2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸對氯苯酯·苯酯2′-脫氧-5-氟-3′-尿苷酸對氯苯酯·苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸對氯苯酯·對溴苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸4-氯-3-甲基苯酯·苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸甲酯·苯酯
2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸正丁酰苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸正十二烷酯·苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸香茅酯·苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸香葉酯·苯酯2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸香茅酯·對氯苯酯對于式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物來說，其中符合下列要求的化合物較優(yōu)選，即式(Ⅰ)化合物中，R2為式(Ⅴ)基團和R1和R3都為氫原子的化合物;R2為式(Ⅴ)基團，R1是氫原子和R3為?；氖?Ⅰ)化合物;R2為式(Ⅴ)基團，R1為?；蚏3為氫原子的式(Ⅰ)化合物;以及R2為式(Ⅴ)基團和R1和R3各為酰基的式(Ⅰ)化合物。對于R2來說，較優(yōu)選為式(Ⅴ)基團。優(yōu)選的R1和R3分別為氫原子或酰基。式(Ⅰ)中R2為式(Ⅴ)基團以及R1和R3都為氫原子的化合物最佳。對于式(Ⅴ)基團來說，其中R4和R5各自為苯基或帶取代基的苯基，以及X1和X2都為氧原子或硫原子。優(yōu)選的取代基為氯原子，氟原子，溴原子，三氟甲基，硝基，氰基，甲氧羰基，乙酰基和甲基，帶有取代基的苯基可以有一個取代基或至少二個取代基，其中取代基選自上面所提到的取代基。當(dāng)苯基具有至少二個取代基時，這二個或以上的取代基可相同或不同。最優(yōu)選的式(Ⅴ)基為其中X1和X2都代表氧原子以及R4和R5分別代表由氯原，氟原子，溴原子和/或三氟甲基所一或二取代的苯基。
按照下面方法A或方法B，能合成制得式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物。
方法A方法A包括將下式(Ⅱ)化合物與式(Ⅲ)化合物進行反應(yīng)，視需要，將所得的反應(yīng)產(chǎn)物再進行羥基保護基的脫保護反應(yīng)，式(Ⅱ)化合物為
式中R1，R6和R7分別定義如前，式(Ⅲ)化合物為
式中X1，X2，R4和R5分別定義如前，Y為鹵原子。
在式(Ⅱ)化合物中，用R6和R7表示的羥基保護基可以是所提的?；缂柞?，乙酰，丁酰，苯甲?；g甲基苯甲?；蛯β缺郊柞；?甲基;取代烷基例如四氫吡喃基和2-甲氧基乙氧甲基;甲硅烷基例如三甲基甲硅烷基和二甲基-叔丁基甲硅烷基和三芳基-取代甲基例如三苯甲基，4-甲氧基三苯甲基和4，4′-二甲氧基三苯甲基。這些式(Ⅱ)化合物能按常規(guī)方法進行合成。例如能用J.A.Montgomery的方法〔見Journal of Medical and Phormaceutical Chemistry 5，24(1962)〕來合成5′-鄰三苯甲基-2′-脫氧-5-氟尿苷和3′-鄰乙酰-2′-脫氧-5-氟尿苷。
通常，能通過醇或硫醇與三鹵氧化磷(phosphorusoxyhalide)或其衍生物進行常規(guī)的脫鹵反應(yīng)制得式(Ⅲ)化合物，可用下列反應(yīng)式表示
式中X1，X2，R4，R5和Y分別定義如前。用Y表示的鹵原子優(yōu)選為氯原子和溴原子。優(yōu)選的反應(yīng)溶劑為能高度溶解鹼并不阻礙反應(yīng)進行的有機非質(zhì)子傳遞溶劑，它們可以是吡啶，氯仿，二氯甲烷，二噁烷，四氫呋喃，苯，甲苯，二甲基亞砜，乙腈等。反應(yīng)溫度通常為-10℃至100℃。反應(yīng)時間通常為約1小時至24小時。選擇在有鹼存在下進行反應(yīng)較好，鹼的離子有有機堿例如叔胺如吡啶，三乙胺和N，N-二甲基苯胺，無機鹼例如碳酸氫鈉，碳酸鉀和乙酸鈉。
式(Ⅱ)化合物與式(Ⅲ)化合物能在常規(guī)的脫鹵反應(yīng)條件下進行反應(yīng)。相對于式(Ⅱ)化合物所用量，式(Ⅲ)化合物的用量至少為等摩爾量，較好為約1至3倍的摩爾量。對于所用的反應(yīng)溶劑來說，較好為那些能高度溶解鹼并又不阻礙反應(yīng)進行的有機非質(zhì)子傳遞溶劑，其中較佳的溶劑為所提的叔胺例如吡啶，三乙胺和甲基吡啶;鹵代烴類例如氯仿和二氯甲烷;醚類例如二噁烷和四氫呋喃;芳族烴類例如苯和甲苯;N，N-二甲基乙酰胺;二甲基亞砜和乙腈等。反應(yīng)溫度通常為-30℃至100℃，較好-10℃至室溫，反應(yīng)時間通常約1小時至3天，較好1小時至24小時。較好在有鹼存在下進行反應(yīng)，所用的鹼為有機鹼例如叔胺如吡啶，三乙胺和N，N-二甲基苯胺，或無機鹼例如碳酸氫鈉，碳酸鉀和乙酸鈉。
方法B方法B包括在有縮合劑存在下，將式(Ⅱ)化合物與式(Ⅳ)化合物進行反應(yīng)，并且視需要，對所得的反應(yīng)產(chǎn)物再進行羥基保護基的脫保護反應(yīng)，式(Ⅳ)化合物為
式中X1，X2，R4，R5和R8分別定義如前。
式(Ⅳ)化合物例如能夠通過水解式(Ⅲ)化合物來進行制備。其中X1和X2均為硫原子的式(Ⅳ)化合物例如能通過由硫醇與甲基二氯磷酸酯進行縮合，然后對縮合物進行水解制得〔見Chemistry Letters507(1978)〕。
式(Ⅱ)化合物與式(Ⅳ)化合物能在常規(guī)的縮合反應(yīng)條件下進行反應(yīng)。相對于式(Ⅱ)化合物的量來說，至少使用等摩爾量的式(Ⅳ)化合物，較好約1-3倍的摩爾量。較好的縮合劑為碳化二亞胺例如二環(huán)己基碳化二亞胺和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺，芳基磺酰氯例如2，4，6-三異丙基苯磺酰氯，苯磺酰氯，對甲苯磺酰氯，2，4，6-三甲基苯磺酰氯和8-喹啉磺酰氯，芳基磺酰胺例如2，4，6-三甲基苯磺酰咪唑烷，2，4，6-三異丙基苯磺酰咪唑烷，2，4，6-三甲基苯磺酰三唑烷，2，4，6-三異丙基苯磺酰三唑烷，2，4，6-三甲基苯磺?；?3-硝基三唑烷，2，4，6-三異丙基苯磺?；?3-硝基三唑烷，偶氮化合物和膦類例如二乙基偶氮二羧酸酯和三苯基膦，以及二異丙基偶氮二羧酸酯和三苯基膦〔見BulletinoftheChemicalSocietyofJapan52(4)1191(1979)〕。對于反應(yīng)溶劑來說，較好為能高度溶解鹼又不影響反應(yīng)進行的有機非質(zhì)子傳遞溶劑。優(yōu)選的溶劑有前面所提的吡啶，N，N-二甲基甲酰胺，N，N-二甲基乙酰胺，二甲基亞砜，六甲基磷酰胺，乙酸乙酯，四氫呋喃，二甲氧基甲烷，二噁烷，氯仿和二氯甲烷，它們可以分別單獨或混合來使用。有時在縮合反應(yīng)中可使用縮合輔助劑，例如有機鹼如三乙胺，三丁胺，吡啶，甲基吡啶，r-二甲氨基吡啶和二甲基苯胺。反應(yīng)時間通常為約1小時至3天。反應(yīng)溫度通常為-30℃至100℃，較好是0℃至室溫。
其中R1為?；氖?Ⅱ)化合物能用常規(guī)方法進行合成，例如用?；鹊姆椒ā惨妕he gazette of Tokkai No61591/1985，the Chemistry Letters 1051(1983)〕。
其中R1為?；氖?Ⅰ)2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物也能由下面方式得到，由式中R1為氫原子的式(Ⅱ)化合物同式(Ⅲ)化合物進行反應(yīng)制得或同式(Ⅳ)化合物反應(yīng)先獲得其中R1為氫原子的式(Ⅰ)化合物，接著用常規(guī)方法讓所得產(chǎn)物與相應(yīng)的酰基氯進行反應(yīng)制得。
上述方法A或方法B所得到的式(Ⅰ)2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物能選用下列合適操作方法進行分離和純化，操作包括再沉淀，萃取，硅膠色譜，高性能液相色譜，重結(jié)晶和其它常規(guī)操作，在某些情況下，能組合使用這些操作。
下面給出式(Ⅰ)2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物的抗腫瘤和急性毒性的試驗結(jié)果。
試驗實施例1抗腫瘤活性數(shù)值的測定將鼠的可移植腫脹肉瘤180細胞(5×106細胞)經(jīng)后背皮下移植到雄性ICR/JCL鼠(體重27-30g)內(nèi)，把試驗化合物溶于或懸浮于含有吐溫80的0.5%(重量)CMC水溶液中，得到濃度為0.1%(重量)的試驗制劑。每組使用7只動物，從移植肉瘤第一天起，對每只鼠進行每天一次的試驗化合物的口服給藥，連續(xù)9天。給藥劑量為每10g體重用量0.1ml。對于對照組來說，以相同的方式進行給藥，不同的是所給的試驗制劑中不含任何試驗化合物。
在腫瘤移植后的第十二時，測定每個試驗化合物在各自劑量時的腫瘤平均重量。與對照組的腫瘤平均重量進行比較，并且根據(jù)對照組的腫瘤增生抑制率，評定試驗化合物在不同劑量下的腫瘤增生抑制率。
通過這些試驗數(shù)值可知，這些評定值為腫瘤增生抑制率超過50%(ED50)時的劑量，并且這些劑量就被視為各自試驗化合物的抗腫瘤活性數(shù)值。

試驗實施例2急性毒性數(shù)值的測定每組使用5只雄性ICR/JCL鼠(體重27-30g)進行試驗。將試驗化合物溶于或懸浮于含有吐溫80的0.5%(重量)的CMC水溶液中，得到濃度為0.1%(重量)的試驗制劑。
以0.1ml/10g(鼠體重)的劑量進行試驗制劑的口服給藥。經(jīng)試驗3周后，每天觀測總毒性癥狀，體重的變化和死亡率。經(jīng)各自給藥3周后，用往復(fù)(jp and down)方法進行急性毒性數(shù)值(LD50)的評定。
表1中所列的全部試驗化合物的LD50數(shù)值(mg/kg)都不低于2000mg/kg，該值為可投藥最大劑量。
從表中可明顯看出，式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物同F(xiàn)dUrd(對照化合物)相比具有極佳的抗腫瘤活性。其中R2為式(Ⅴ)基團，R4和R5分別為可由氯原子，氟原子，溴原子，三氟甲基，氰基，硝基，甲基等取代的苯基的式(Ⅰ)2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物所具有的活性更大。尤其是R4和R5分別可由氯原子，氟原子，溴原子和/或三氟甲基所一或二取代的苯基，并且X1和X2均為氧原子的式(Ⅰ)2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物顯示出極其大的抗腫瘤活性，就ED50來說，其就要比FdUrd(對照化合物)的腫瘤增生抑制作用高出40至70倍。另外，從所測定的急性毒性值來看，式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物的毒性很低。式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物降低了毒性和減少了副作用例如消化道紊亂，血細胞減少(白細胞的大量減少)和體積減輕，以及顯示出高的治療指數(shù)。對于癌病的治療，無論采用口服還是注射形式，所到說的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物都顯示出極佳的治療效果。
當(dāng)把本發(fā)明式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物用作為抗腫瘤劑，即抗腫瘤組合物時，通常按具體給藥途徑將它們同藥理上可接受的載體一起制成合適的劑量形式。例如口服給藥形式如片劑，丸劑，膠囊，粒劑，粉劑，液體等，非口服給藥形式如靜脈內(nèi)或肌肉注射液，栓劑等。
能夠采用本技術(shù)領(lǐng)域人員用于藥物制劑制備的已知和常規(guī)的方法進行劑量形式的制備。在制備用于口服的固體藥物制劑時，在本發(fā)明的有效組分(式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物)中加入賦形劑，視需要，還可加入粘合劑，崩解劑，潤滑劑，著色劑，矯味劑，增甜劑等，然后用常規(guī)方法將所得混合物配制成片劑，包衣片劑，粒劑，粉劑，膠囊等。在注射制劑的制備中，本發(fā)明的有效組分用稀釋劑稀釋，接著加入pH調(diào)節(jié)劑，緩沖劑，穩(wěn)定劑，等滲劑，局部麻醉劑等，從而再用常規(guī)方法制得皮下，肌肉和靜脈內(nèi)注射劑。對于栓劑的制備來說，在本發(fā)明的有效組分中加入鹼，視需要還可加入表面活性劑等，接著用常規(guī)方法制成栓劑。
用于制備片劑，膠囊，粒劑和粉劑的賦形劑例子有乳糖，蔗糖，淀粉，滑石，硬脂酸鎂，硬脂酸鈣，結(jié)晶纖維素，甲基纖維素，羧酸甲基纖維素，甘油，精氨酸鈉，阿拉伯樹膠等;使用的粘合劑為聚乙烯醇，聚乙烯醚，乙基纖維素，阿拉伯樹脂，紫膠，白糖等;所用的潤濕劑為硬脂酸鎂，滑石粉等;可以使用常規(guī)的和已知的著色劑，崩解劑等。也可用常規(guī)方法進行片劑的包衣。
注射劑中的稀釋劑可以是水，乙醇，大粒凝膠(macrogol)，丙二醇，乙氧基異十八烷醇，異十八烷醇多氧化物，聚氧乙烯脫水山梨醇酯肪酸酯等。在這種情況下，藥物制劑中可加入使制劑成等滲的氯化鈉，葡萄糖或甘油。此外，還可以摻入常規(guī)的pH調(diào)節(jié)劑，緩沖劑，穩(wěn)定劑，局部麻醉劑等。
用于制備栓劑的鹼的例子有潤滑脂的堿類例如可可脂，聚乙二醇，羊毛脂，脂肪酸甘油三酯和Witepsol(DynamiteNovelCorp.的注冊商標(biāo))等，或水溶性鹼如大粒凝膠等。
盡管在上面所提的各種劑量形式中所摻入的本發(fā)明有效組分量是隨藥物組合物的形式，化合物的溶解度和其化學(xué)性質(zhì)，給藥途徑，給藥目的等不同而變化，但通常來說，對每單位劑量形式，口服給藥用量藥10-200mg，注射液約100-1000mg，用于栓劑為約10-2000mg。
對于采用上面劑量形式的藥用組合物來說，其每日劑量充分取決于受藥宿主的癥狀，年齡和性別等，但在口服給藥時，成人的日劑量約50-200mg，并且該劑量可以分成每天2至4次給藥。在采用注射液時，例如靜脈注射的每日劑量為10-1000mg，并且視需要還能用生理鹽水或葡萄糖可注射溶液連同乙醇，大粒凝膠，丙二醇，聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯等一起進行稀釋，每天給藥注射一次。使用栓劑形式時，成人的日劑量通常為50-1000mg，可以一次性至分成四次，每間隔6至24小時進行直腸給藥。含有作為有效組分的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物的抗腫瘤組合物能使其中的衍生物顯示出其有效的，極佳的抗腫瘤活性。
下面將給出式(Ⅰ)的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物的制備實施例。本發(fā)明并不僅僅限于這些實施例。實施例中所給出的核磁共振光譜分析數(shù)據(jù)，都是采用TMS為內(nèi)標(biāo)測得。
實施例12′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二苯酯的制備在冷水浴中將二苯基氯代磷酸酯〔1.1g(4.11mmol)〕冷卻至-10℃至0℃。接著，將溶于15ml吡啶中的1.0g(4.06mmol)2′-脫氧-5-氟尿苷滴加20分鐘。滴加完畢后，室溫攪拌混合物過夜。反應(yīng)混合物中加入50ml甲苯，減壓蒸去溶劑。所得殘余物中再加入50ml甲苯，再減壓蒸去溶劑。殘余物經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿甲醇(9∶1V/V)洗脫得910mg透明狀的2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二苯酯(得率41%)。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)9.93(1H，broad s，N3-H)7.52(1H，d，J＝6Hz，C6-H)7.38-7.03(10H，m，Ar-H)6.27-6.10(1H，m，C1′-H)4.51-4.33(3H，m，C3′，5′-H)4.13-4.00(1H，m，C4′-H)2.46-1.70(3H，m，C2′-H，OH)實施例22′-脫氧-5′-鄰(二苯氧基氧膦基)-5-氟-3′-尿苷酸二苯酯〔其中R1＝H，R2，R3＝(PhO)2P(＝O)-(Ph為苯基)的式(Ⅰ)化合物〕的制備冰水浴冷卻二苯基氯代磷酸酯〔160mg(0.63mmol)〕至-10℃-0℃，并將100mg(0.41mmol)2′-脫氧-5-氟尿苷的2ml吡啶液滴加入，滴加5分鐘。滴加完畢后，室溫攪拌混合物過夜。減壓蒸去溶劑，殘余物中加入水，接著用氯仿萃取。萃取液用水洗滌和無水硫酸鎂干燥，然后減壓蒸去溶劑。殘余物用硅膠薄層柱色譜(用Merck A.G.硅膠60F2455與濃縮區(qū)制得PLC板，展開劑乙酸乙酯)純化，得到120mg油狀的2′-脫氧-5′-鄰(二苯氧基氧膦基)-5-氧-3′-尿苷酸二苯酯(得率42%)。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)9.87(1H，broad s，N3-H)7.58(1H，d，J＝6Hz，C6-H)7.50-7.17(20H，m，Ar-H)6.40-6.23(1H，m，C1′-H)5.37-5.21(1H，m，C3′-H)4.57-4.28(3H，m，C4′，5′-H)2.67-1.82(2H，m，C2′-H)實施例33-苯甲酰基-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二苯基的制備將二苯基氯代磷酸酯〔1.05g(3.9mmol)〕在冰水浴中冷卻至-10℃-0℃，接著滴加1.24g(3.54mmol)3-苯甲?；?2′-脫氧-5-氟尿苷的10ml吡啶溶液20分鐘。滴加完畢后，室溫攪拌混合物過夜。反應(yīng)混合物中加入50ml甲苯，減壓蒸去溶劑，殘余物中再加入50ml甲苯，并再減壓蒸去溶劑。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜，用乙酸乙酯和苯(3∶2V/V)的混合液進行洗脫，得810mg透明狀3-苯甲?；?′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二苯酯(得率33%)。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)7.87-7.01(16H，m，C6-H，Ar-H)6.17-6.03(1H，m，C1′-H)4.40-4.23(3H，m，C3′，5′-H)4.05-3.88(1H，m，C4′-H)3.47(1H，broad s，OH)2.33-1.66(2H，m，C2′-H)實施例42′-脫氧-5-氟-3′-尿苷酸二苯酯的制備用冰水浴將二苯基氯代磷酸酯〔0.9g(3.35mmol)〕冷卻至-10℃-0℃，然后滴加入1.3g(2.66mmol)5′-三苯甲基-2′-脫氧-5-氟尿苷的10ml吡啶液20分鐘。滴加完畢后，室溫攪拌混合物過夜。反應(yīng)混合物中加入50ml甲苯，減壓蒸去溶劑。殘余物中再加入50ml甲苯并減壓蒸去溶劑。把所得殘余物溶于100ml氯仿中，然后依次用水，稀的氫氧化鈉水溶液和水洗滌，再用無水硫酸鎂干燥。然后經(jīng)減壓蒸去溶劑得2.0粗制的5′-三苯甲基-2′-脫氧-5-氟-3′-尿苷酸二苯酯。在該粗產(chǎn)品中加入15ml的80%乙酸水溶液，80℃加熱混合物7小時。減壓蒸去溶劑，并加入水，再減壓蒸去溶劑。所得殘余物中加入100ml氯仿，用水洗滌三次并無水硫酸鎂干燥。經(jīng)減壓蒸去溶劑后，所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜，用乙酸乙酯和苯(3∶2，V/V)的混合液洗脫，得到900mg透明狀2′-脫氧-5-氟-3′-尿苷酸二苯酯(得率71%)。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)9.34(1H，broad s，N3-H)7.91(1H，d，J＝6Hz，C6-H)7.47-7.10(10H，m，Ar-H)6.32-6.17(1H，m，C1′-H)5.37-5.17(1H，m，C3′-H)4.23-4.10(1H，m，C4′-H)3.85-3.72(2H，m，C5′-H)2.63-1.92(3H，m，C2′-H，OH)實施例5
2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸香茅酯·苯酯的制備將苯基二氯代磷酸酯〔1.92ml(12.58mmol)〕溶于20ml四氫呋喃中，然后用冰水浴冷卻至-10℃-0℃。于1小時將2.0g(12.80mmol)香茅醇，1.8ml(12.91mmol)三乙胺和10ml四氫呋喃的混合液滴加入上述溶液中。滴加完畢后，室溫攪拌混合物過夜。濾出所生成的沉淀物，用石油醚洗滌(30℃至60℃)。減壓蒸去所得濾液中的溶劑，殘余物經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿洗脫得2.3g油狀的苯基氯代磷酸香茅酯(得率54%)。
在冰水浴中，將所得苯基氯代磷酸香茅酯〔1.30g(3.93mmol)〕冷卻至-10℃-0℃，然后20分鐘內(nèi)滴加入850mg(3.45mmol)2′-脫氧-5-氟尿苷的17ml吡啶溶液。滴加完畢后，室溫攪拌混合物過夜。反應(yīng)混合物中加入50ml甲苯，減壓蒸去溶劑，殘余物中再加入50ml甲苯，并減壓蒸去溶劑。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜，用氯仿和甲醇(9∶1，V/V)的混合液進行洗脫，得到1.27g透明狀的2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸香茅酯苯酯(得率68%)。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)9.60(1H，broad s，N3-H)7.65，7.58(1H，d，d，J＝6.6Hz，C6-H)7.40-7.10(5H，m，Ar-H)6.32-6.17(1H，m，C1′-H)5.08-4.92(1H，m，C6″-H)4.50-4.07(7H，m，C3′，4′，5′-H，C1″-H，OH)2.57-1.70(4H，m，C2′-H，C5″-H)1.62，1.53(6H，s，s，C7″-CH3)1.47-1.07(5H，m，C2″，3″，4″-H)0.82(3H，d，J＝4.5Hz，C3″-CH3)實施例62′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸4-氯-3-甲基苯酯·苯酯的制備按實施例5相同的方法，制得透明狀的2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸4-氯-3-甲基苯酯·苯酯(得率61%)。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)7.62，7.60(1H，d，d，J＝6，6Hz，C6-H)7.57-6.93(8H，m，Ar-H)6.37-6.17(1H，m，C1′-H)4.60-4.40(3H，m，C3′，5′-H)4.21-4.06(1H，m，C4′-H)2.34(3H，s，CH3)2.53-1.80(2H，m，C2′-H)實施例72′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯的制備將3.07g(20mmol)磷酰氯溶于100ml苯中，然后在冰水浴中冷卻。在這冷卻的溶液中滴加入5.14g(40mmol)對氯苯酚，4.05g(40mmol)三乙胺和20ml苯的混合液，滴加15分鐘。滴加完畢后，加熱回流混合物3小時?；旌衔锝?jīng)抽吸過濾，所得的濾液流經(jīng)一根管徑為7cm的玻璃短柱過濾器，其中裝填有各為約1cm厚度的硅膠層，無水硫酸鎂層和沙層。用苯洗脫，苯量為使所得的洗脫液量為200ml。經(jīng)減壓蒸去溶劑得5.84g油狀的二對氯苯基氯代磷酸酯(得率86%)。
將上面所得的二-對氯苯基氯代磷酸酯〔1.25g(3.70mmol)〕在冰水浴中冷至-10℃-0℃，于20分鐘滴加入700mg(2.84mmol)2′-脫氧-5-氟尿苷的10ml吡啶液。滴加完畢后，室溫攪拌混合物過夜。反應(yīng)混合物中加入50ml甲苯，減壓蒸去溶劑，接著殘余物再加入50ml甲苯并減壓除去溶劑。所得殘余物經(jīng)硅膠柱色譜，氯仿和甲醇(9∶1V/V)混合液洗脫，得1.00g透明狀2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯(得率64%)。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm)9.97(1H，broad s，N3-H)7.62(1H，d，J＝6Hz，C6-H)7.40-7.10(8H，m，Ar-H)6.37-6.18(1H，m，C1′-H)4.60-4.40(3H，m，C3′，5′-H)4.23-4.10(1H，m，C4′-H)3.63(1H，broad s，OH)2.58-1.82(2H，m，C2′-H)按實施例7相同的方法制得下面為透明狀的實施例8至20的化合物。
權(quán)利要求
1.下式的2′-脫氧-5-氰尿苷衍生物
其中R1為氫原子或酰基，R2和R3分別為氫原子，酰基或式
團，其中X1和X2分別為氧原子或硫原子；R4為各自可以由烷基，烷氧基，烷氧羰基，烷硫基，酰基，鹵原子，三氧甲基，硝基，氰基，羧基和/或亞甲二氧基所取代的苯基，芐基或萘基，R5為烷基，鏈烯基或為R4表示的基團之一(R5可相同或不同于R4)，并且R2和R3中至少一個為式
基團。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物，其中R2為式
基團，式中符號定義如權(quán)利要求1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物，其中R1和R3分別為氫原子或?；?。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物，其中R2為式
基團，式中X1和X2為氧原子，R4和R5分別為由氯原子，氟原子，溴原子和1或三氟甲基所一或二取代的苯基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物，其中R1為氫原子，R2為式
基團，式中X1和X2各自為氧原子，R4和R5分別為由氯原子，氟原子，溴原子和1或三氟甲基所一或二取代的苯基，R3是氫原子或?；?。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物，其中包括2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯，2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-間氯苯酯，2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二(2，4-二氯苯酯)，2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氟苯酯，2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對溴苯酯，2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對三氟甲基苯酯和3′-乙酰-2′-脫氧-5-氟-5′-尿苷酸二-對氯苯酯。
7.制備權(quán)利要求1的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物的方法，其包括將下式化合物與
(式中X1，X2，R4和R5分別定義如權(quán)利要求1，Y為鹵原子)進行反應(yīng)，視需要對反應(yīng)產(chǎn)物進行羥基保護基的脫保護反應(yīng)，
式中R1定義如同權(quán)利要求1，R6和R7分別為氫原子或保護的羥基，并且R6和R7不能同時為保護的羥基。
8.制備權(quán)利要求1的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物的方法，其包括在有縮合劑存在下，將下式化合物與
(式中X1，X2，R4和R5分別定義如同權(quán)利要求1，R8為氫原子，金屬陽離子，銨離子或有機銨離子)進行反應(yīng)，視需要，對反應(yīng)產(chǎn)物再進行羥基保護基的脫保護反應(yīng)，
式中R1定義如同權(quán)利要求1，R6和R7分別為氫原子或保護的羥基，并且R6和R7不能同時為保護的羥基。
9.一種治療癌癥的組合物，其包括有效量的權(quán)利要求1的2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物和藥物上可接受的載體。
全文摘要
本發(fā)明關(guān)于具有極佳抗腫瘤活性和低毒性的下式2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物，其制備方法和含有所說2′-脫氧-5-氟尿苷衍生物的抗腫瘤組合物，
文檔編號C07H19/10GK1045395SQ8910103
公開日1990年9月19日 申請日期1989年2月28日 優(yōu)先權(quán)日1988年2月29日
發(fā)明者河合勉, 森文男, 武田節(jié)夫, 齊藤等, 采見憲男 申請人:可來麗股份有限公司, 大鵬藥品工業(yè)株式會社