專利名稱：3－芳基－琥珀酰胺基－異羥肟酸,其制備方法及含有它們的藥物的制作方法
本申請涉及基質(zhì)金屬蛋白酶的抑制劑。特別是，本申請涉及3-芳基-琥珀酰胺基-異羥肟酸。
在健康組織中存在著胞外基質(zhì)的合成與降解之間的平衡。胞外基質(zhì)主要由基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)族中的蛋白酶進(jìn)行降解。該族成員的例子是膠原酶，stromelysins和明膠酶。在健康組織中該降解是通過用TIMPs(金屬蛋白酶的組織抑制劑)的抑制來調(diào)節(jié)。在多種疾病例如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)病，多重硬化癥，腫瘤轉(zhuǎn)移和發(fā)作，角膜潰瘍，腦膜炎，心血管病，例如再狹窄和動(dòng)脈硬化以及骨骼和齒齦病中，基質(zhì)金屬蛋白酶與TIMPs間的平衡被打亂。許多實(shí)例表明抑制這些酶對(duì)這些疾病的臨床圖象具有積極的作用(Beckett等，1996)。
兩種明膠酶A(MMP-2)和B(MMP-9)似乎是轉(zhuǎn)移和發(fā)作最重要的MMPs。選擇性抑制這兩種酶是合乎需要的。目前本領(lǐng)域最新開發(fā)的正在III期臨床的物質(zhì)Marimastat是有活性的但表現(xiàn)出較大的副作用例如肌肉痛。目前形式的Marimastat是一種廣譜MMP抑制劑，因而如同組織代謝絕對(duì)必需的MMP1，MMPs也被抑制。通常假設(shè)副作用是由于非專一性造成的。
現(xiàn)已出人意外地發(fā)現(xiàn)，新的3-芳基-琥珀酰胺基-丙?；惲u肟酸比Marimastat具有更有利的藥理分布。這些物質(zhì)特別不同于Marimastat的是在琥珀?；?位上有一個(gè)芳基取代基。新化合物對(duì)于明膠酶的專一性有了顯著的改進(jìn)，或者更確切地說，現(xiàn)在是首次即有可能避免抑制MMPI和其它重要的酶。
本申請涉及通式(I)的物質(zhì)
為達(dá)到對(duì)明膠酶的最佳抑制，通式I化合物的R和R1基團(tuán)應(yīng)有一定疏水性。適宜的參數(shù)為clogP，可借助Daylight ChemicalInformation System Inc.(1993)的“PCModels clogP 3”來測定。系數(shù)是基于Hansch，C.& Leo，A化學(xué)與生物學(xué)相關(guān)分析取代常數(shù)。Wiley Interscience New York(1979)，而算法引自下列文獻(xiàn)Chou，J.& Jurs，P.，J.Chem.Inf.Comput.Sci.19，172(1979)。碎片當(dāng)作完整的分子進(jìn)行計(jì)算，即不看作是游離基或離子。為得到可提供數(shù)據(jù)的數(shù)值，R的clogP值與相鄰苯環(huán)(Ph-R碎片)一起測定。R1的colgP值與相鄰羰基和氨基一起作為(CHO)(NH2)CHR1(氨基羰基-R1碎片)測定。
Ph-R的例子
氨基羰基-R1的例子
本發(fā)明的化合物中，Ph-R碎片中R的clogP值為2.0～6.0，優(yōu)選2.5～5.0，特別優(yōu)選3.0～4.5。
本發(fā)明的化合物中，氨基羰基-R1碎片中R1的colgP值為-1.5～2.0，優(yōu)選-1.2～1.5，特別優(yōu)選-1.0～1.2。
因此，本發(fā)明涉及通式I的物質(zhì)，其可藥用的鹽、酯和在體內(nèi)能代謝成式I化合物的衍生物，以及這些化合物生產(chǎn)藥物的用途
其中R作為Ph-R碎片具有2.0～6.0的clogP值，優(yōu)選2.5～5.0，特別優(yōu)選3.0～4.5，R1作為氨基羰基-R1碎片具有-1.5～2.0的colgP值，優(yōu)選-1.2～1.5，特別優(yōu)選-1.0～1.2和R5表示氫或C1-C8烷基，R6表示氫，任選被取代的C1-C8烷基或任選被取代的單環(huán)或二環(huán)狀的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或烷基雜芳基，或R5，R6和N原子一起表示最多含有另外一個(gè)雜原子的飽和或不飽和的5-或6-元環(huán)。
或者，本申請的主題可表示為通式I的化合物，其可藥用的鹽、酯和在體內(nèi)能代謝成式I化合物的衍生物，以及這些化合物生產(chǎn)藥物的用途
其中R表示任選被取代的C1-C8烷基或任選被取代的單環(huán)或二環(huán)狀的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳氧基、雜芳氧基或芳烷基，R1表示任選被取代的C1-C8烷基或任選被取代的單環(huán)或二環(huán)狀的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或烷基雜芳基，R5表示氫或C1-C8烷基，R6表示氫，任選被取代的C1-C8烷基或任選被取代的單環(huán)或二環(huán)狀的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或烷基雜芳基，或R5和R6與N原子一起表示最多含有另外一個(gè)雜原子的飽和或不飽和5-或6-元環(huán)。
所列R，R1和R6基團(tuán)可各自獨(dú)立地任選被下列基團(tuán)取代一次、兩次或三次鹵素，羥基，硫代，烷基，C3-C8環(huán)烷基，C4-C8環(huán)烯基，羥基烷基，烷氧基，羥基烷氧基，氯烷氧基，烷硫基，烷基亞磺?；榛酋；?，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，硝基，羧基，酰胺基，烷氧基羰基，烷氧基羰基烷基，全氟烷基或任選被低級(jí)烷基取代一次或兩次的氨基或氨基羰基、腈基、氧代和?；?br> 關(guān)于此，優(yōu)選的是鹵素，羥基，氧代，硫代，烷氧基，ω-羥基烷氧基，ω-氯烷氧基，烷硫基，氨基，氨基羰基，羧基和?；?。特別優(yōu)選的是甲基，鹵素和羥基。
如果它們被取代的，優(yōu)選是單取代的。
如果未另外說明，環(huán)烷基表示可任選被雜原子如氮，氧或硫間斷一次或多次的含有3-8個(gè)結(jié)構(gòu)原子、優(yōu)選5-7個(gè)結(jié)構(gòu)原子的飽和的單或多不飽和碳環(huán)或雜環(huán)，環(huán)烷基特別表示環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，嗎啉基，硫代嗎啉基，哌啶基，哌嗪基，四氫呋喃基或四氫吡喃基。
在R，R1和R6中的芳烷基和雜烷基中的烷基各自獨(dú)立地表示C1或C2烷基。
R，R1和R6中的?；紫缺硎疽阴；?。
如果未另外說明，R，R1和R6中烷基，單獨(dú)地或與例如烷氧基，烷硫基，芳基磺?；?，烷基磺?；?，烷基氨基-羰基，芳基氨基羰基，烷基氨基，烷氧基羰基，芳氧基羰基，烷基氨基硫代羰基，芳基氨基硫代羰基結(jié)合中，表示1-3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的飽和或不飽和基團(tuán)例如甲基，乙基，丙基，異丙基，烯丙基或丙炔基。
R，R1，R5和R6中的C1-C8烷基各自獨(dú)立地表示含有1-8個(gè)碳原子的直鏈、支鏈、飽和或不飽和的基團(tuán)，它可被1或2個(gè)雜原子例如O，N或S間斷，優(yōu)選無間斷或被氧間斷一次，在被氧間斷的情況下，特別優(yōu)選的是C1-C7烷氧基。C1-C8烷基的例子是甲基，乙基，丙基，戊基，辛基，烯丙基，炔丙基，2，4-戊二烯基，異丙基，仲丁基，叔丁基，3-甲基-丁基，2-羥基-己基，正丁氧基，己氧基，C(CH3)2OMe，特別是叔丁基，正丁氧基，己氧基，C(CH3)2OMe。
芳基為可任選被取代、特別是被鹵素，烷基或烷氧基取代的苯基或萘基。優(yōu)選苯基。
鹵素為氯，溴或碘，優(yōu)選氯。
結(jié)構(gòu)原子為C，N，O和S，雜原子為N，O和S。
R，R1和R6中的雜芳基各自獨(dú)立地表示吡啶，嘧啶，噠嗪，吡嗪，哌嗪，咪唑，呋喃，噁唑，異噻唑，異噁唑，1，2，3-三唑或1，2，4-三唑，噻唑，噻吩或吲哚環(huán)，優(yōu)選吡啶，咪唑或噻吩環(huán)。
R，R1和R6中的二環(huán)優(yōu)選為萘基，四氫萘基，十氫萘基，喹啉基，異喹啉基，四氫喹啉基，四氫異喹啉基，吲哚基，苯并咪唑基，吲唑基，羥吲哚基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，苯并噻唑基，苯并噁唑基或嘌呤基，特別是萘基，喹啉基，異喹啉基，四氫喹啉基，吲哚基或苯并咪唑基。
優(yōu)選的R是4-7個(gè)結(jié)構(gòu)原子的烷基和環(huán)烷基，和5-10、特別優(yōu)選6-8個(gè)結(jié)構(gòu)原子的芳基，二環(huán)和雜芳基。
優(yōu)選的R1是1-12個(gè)結(jié)構(gòu)原子、特別優(yōu)選3-10個(gè)結(jié)構(gòu)原子。
特別優(yōu)選的R是-O-苯基(p-R2)，苯基(p-R2)，正丁氧基，己氧基，其中R2代表小取代基，例如氫，鹵素，甲基或羥基；特別優(yōu)選的R是-O-苯基，苯基和正丁氧基。
特別優(yōu)選的R1是芐基，苯基，叔丁基或C(CH3)2OMe，特別是叔丁基。
優(yōu)選的R5是氫，甲基和乙基；特別優(yōu)選氫。
優(yōu)選的R6是甲基和乙基，苯基和吡啶基；特別優(yōu)選甲基。
如果R5和R6成環(huán)，優(yōu)選含有氧，特別優(yōu)選嗎啉代。
本發(fā)明還涉及所有光學(xué)異構(gòu)體和外消旋體。優(yōu)選下列光學(xué)異構(gòu)體琥珀酰異羥肟酸的C2和氨基酸酰胺的Cα為S構(gòu)型，和琥珀酸母體的C3為R構(gòu)型。
本發(fā)明的通式I化合物可用已知方法合成。光學(xué)異構(gòu)體可用已知方法分離。適宜的話，所述方法是指分離終產(chǎn)物和/或前體。非對(duì)映體鹽通過與光學(xué)活性的酸例如D-或L-酒石酸，扁桃酸，蘋果酸，乳酸或樟腦磺酸反應(yīng)或者與光學(xué)活性的胺例如D-或L-α-苯乙胺，麻黃堿，奎尼定或cinquonidine反應(yīng)得到的外消旋混合物得到，它們可以通過結(jié)晶法分離，或者可用HPLC分離光學(xué)異構(gòu)體。另一種分離光學(xué)異構(gòu)體的方法是在合成和/或中間體的合成中進(jìn)行酶促分離。
通式I的化合物可用下法得到(a)式II羧酸與羥胺或O-保護(hù)或N，O-保護(hù)的羥胺反應(yīng)，隨后斷裂保護(hù)基，式II中的R，R1，R5和R6具有上述定義和其中的醇羥基以游離或被保護(hù)形式例如與乙酸成酯存在
為進(jìn)行反應(yīng)，羧酸可用肽化學(xué)的已知方法活化。例如，羧酸與氯甲酸酯，碳化二亞胺，N，N’-羰基二咪唑，2-氯-N-甲基吡啶鎓碘化物反應(yīng)直接被活化，或進(jìn)行中間反應(yīng)生成活化酯，例如五氟苯基，N-羥基琥珀酰亞胺，N-羥基苯并三唑酯，然后與羥胺或被保護(hù)的羥胺反應(yīng)。被保護(hù)的羥胺衍生物的反應(yīng)完成后，用已知方法斷裂保護(hù)基。被保護(hù)的羥胺的例子是O-芐基羥胺，O-p-甲氧基芐基羥胺，O-三甲基甲硅烷基羥胺和O-叔丁基-羥胺，N，O-二芐基羥胺和N，O-二-p-甲氧基芐基-羥胺。芐基或p-甲氧基芐基的情況下保護(hù)基可用氫解斷裂，或者在后一種情況下或在O-叔丁基的情況下可用酸水解斷裂。三甲基甲硅烷基保護(hù)基可用水進(jìn)行水解。(b)除(a)法外，式I化合物還可用式III的1，3-二氧戊環(huán)-4-酮與羥胺反應(yīng)進(jìn)行制備，式III中R3和R4表示氫，低級(jí)烷基或苯基，優(yōu)選甲基。
式II化合物可通過式III化合物堿水解進(jìn)行制備。
式III化合物可通過式IVa的2-芳基-3-羥基-琥珀酸與外消旋或旋光均勻的α-氨基酸例如(R)或(S)-叔丁基-甘氨酸-N-甲基酰胺用肽化學(xué)已知的方法偶聯(lián)得到，式IVa中R，R3和R4具有上述定義并且羥基及相鄰COOH基被生成的1，3-二氧戊環(huán)-4-酮結(jié)構(gòu)保護(hù)。
例如活化酯，如N-羥基琥珀酰亞胺，1-羥基苯并三唑或五氟苯基酯可通過碳化二亞胺如二環(huán)己基碳化二亞胺或二異丙基碳化二亞胺活化IVa中的COOH，然后與酰胺基被取代的α-氨基酸酰胺中的游離氨基反應(yīng)進(jìn)行制備。這些酯也可不經(jīng)分離進(jìn)行制備并進(jìn)一步反應(yīng)。其它活化方法包括混合酸酐的制備，將羧酸與氯甲酸酯或縮合劑例如uronium鹽如2H-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基-uronium-四氟硼酸鹽反應(yīng)。
式IVa的羧酸可通過其中R具有上述定義的式V的α-甲酰芳基乙酸與堿金屬氫化物或三甲基甲硅烷基氰化物/碘化鋅反應(yīng)，作為中間產(chǎn)物得到的式VI氰醇的酸皂化，隨后與縮醛或縮醇酮例如2，2-二甲氧基丙烷進(jìn)行酸催化反應(yīng)保護(hù)羥基和COOH基進(jìn)行制備。氰醇也可被制成光學(xué)活性分子，通過式V化合物被(R)-或(S)-醇腈酶酶促反應(yīng)分別生成立體專一的R或S化合物，
或者，式IVa化合物可用下法制備用硼氫化鈉還原草酰-芳基乙酸酯，將酯進(jìn)行酸皂化隨后與縮醛或縮酮例如2，2-二甲氧基丙烷進(jìn)行酸催化還原來保護(hù)羥基和相鄰的COOH。
堿金屬鹽，銨鹽，乙酸鹽或鹽酸鹽主要用作常規(guī)方法制備的可藥用的鹽，例如用無機(jī)或有機(jī)堿或無機(jī)酸如氫氧化鈉，氫氧化鉀，氨水，胺如三乙胺或鹽酸滴定該化合物。通常從水/丙酮中再沉淀將鹽純化。
式I的本發(fā)明的新物質(zhì)及其鹽可以液體或固體形式經(jīng)腸或非經(jīng)胃腸給藥。所有常用給藥形式都在考慮之內(nèi)，例如片劑，膠囊，糖衣，糖漿，溶液，懸浮液等。優(yōu)選水作為注射介質(zhì)，其中含有例如穩(wěn)定劑，加溶劑和緩沖劑等常用的添加劑。
這些添加劑為例如酒石酸鹽和檸檬酸鹽緩沖劑，乙醇，配位劑(例如乙二胺四乙酸及其無毒鹽)，高分子聚合物(如液相聚環(huán)氧乙烷)以調(diào)節(jié)黏度。注射溶液的液相載體必須是無菌的，最好裝入安瓿中。固體載體為例如淀粉，乳糖，甘露糖醇，甲基纖維素，滑石，高分散硅酸，高分子脂肪酸(例如硬脂酸)，明膠，瓊脂，磷酸鈣，硬脂酸鎂，動(dòng)物和植物脂，固體高分子聚合物(例如聚乙二醇)；如果需要的話，適宜的口服制劑可含有調(diào)味劑和增甜劑。
劑量取決于多種因素，例如給藥方式，人種，年齡和/或個(gè)體情況。每日給藥量約為10-1000mg/人，優(yōu)選100-500mg/人，可一次或分成幾次給藥。
除了實(shí)施例中所述化合物和結(jié)合實(shí)施例中所述的取代基的所有意義衍生出的化合物外，下列3-芳基-琥珀酰胺基-異羥肟酸也是本發(fā)明意義上的優(yōu)選者1. 2-(聯(lián)苯-4-基氨基)-N1-(2，2-二甲基-1-甲基氨基甲酰基-丙基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺2. 2-(聯(lián)苯-4-基氨基)-N1-[2，2-二甲基-1-(嗎啉-4-羰基)-丙基]-3，N4-二羥基-琥珀酰胺3. 2-(聯(lián)苯-4-基氨基)-N1-[2，2-二甲基-1-(吡啶-2-基氨基甲?；?-丙基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺4. 2-(聯(lián)苯-4-基氨基)-3，N4-二羥基-N1-(1-甲基氨基甲?；?2-苯基-乙基)-琥珀酰胺5.N1-(1-芐基-2-嗎啉-4-基-2-氧代-乙基)-2-(聯(lián)苯-4-基氨基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺6. 2-(聯(lián)苯-4-基氨基)-3，N4-二羥基-N1-[2-苯基-1-(吡啶-2-基氨基甲?；?-乙基]-琥珀酰胺7. 2-(聯(lián)苯-4-基氨基)-3，N4-二羥基-N1-[2-甲氧基-2-甲基-1-甲基氨基甲?；?丙基]-琥珀酰胺8. 2-(聯(lián)苯-4-基氨基)-3，N4-二羥基-N1-[2-甲氧基-2-甲基-1-(嗎啉-4-羰基)-丙基]-琥珀酰胺9. 2-(聯(lián)苯-4-基氨基)-3，N4-二羥基-N1-[2-甲氧基-2-甲基-1-(吡啶-2-基氨基甲?；?-丙基]-琥珀酰胺10.N4-(2，2-二甲基-1-甲基氨基甲?；?丙基)-2，N1-二羥基-3-(4-苯氧基-苯基氨基)-琥珀酰胺11.N4-[2，2-二甲基-1-(嗎啉-4-羰基)-丙基]-2，N1-二羥基-3-(4-苯氧基-苯基氨基)-琥珀酰胺12.N4-[2，2-二甲基-1-(吡啶-2-基氨基甲?；?-丙基]-2，N1-二羥基-3-(4-苯氧基-苯基氨基)-琥珀酰胺13. 2，N1-二羥基-N4-(1-甲基氨基甲酰基-2-苯基-乙基)-3-(4-苯氧基-苯基氨基)-琥珀酰胺14.N4-(1-芐基-2-嗎啉-4-基-2-氧代-乙基)-2，N1-二羥基-3-(4-苯氧基-苯基氨基)-琥珀酰胺15. 2，N1-二羥基-3-(4-苯氧基-苯基氨基)-N4-[2-苯基-1-(吡啶-2-基氨基甲?；?-乙基]-琥珀酰胺16. 2，N1-二羥基-N4-(2-甲氧基-2-甲基-1-甲基-氨基甲?；?丙基)-3-(4-苯氧基-苯基氨基)-琥珀酰胺17. 2，N1-二羥基-N4-[2-甲氧基-2-甲基-1-(嗎啉-4-羰基)-丙基]-3-(4-苯氧基-苯基氨基)-琥珀酰胺18. 2，N1-二羥基-N4-(2-甲氧基-2-甲基-1-(吡啶-2-基氨基甲?；?-丙基]-3-(4-苯氧基-苯基氨基)-琥珀酰胺19. 2-(4-丁氧基-苯基氨基)-N1-(2，2-二甲基-1-甲基氨基甲?；?丙基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺20. 2-(4-丁氧基-苯基氨基)-N1-[2，2-二甲基-1-(嗎啉-4-羰基)-丙基]-3，N4-二羥基-琥珀酰胺21. 2-(4-丁氧基-苯基氨基)-N1-(2，2-二甲基-1-(吡啶-2-基氨基甲酰基)-丙基]-3，N4-二羥基-琥珀酰胺22. 2-(4-丁氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-N1-(1-甲基氨基甲?；?2-苯基-乙基)-琥珀酰胺23. N1-(1-芐基-2-嗎啉-4-基-2-氧代-乙基)-2-(4-丁氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺24. 2-(4-丁氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-N1-[2-苯基-1-(吡啶-2-基氨基甲酰基)乙基]-琥珀酰胺25. 2-(4-丁氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-N1-(2-甲氧基-2-甲基-1-甲基氨基甲?；?丙基)-琥珀酰胺26. 2-(4-丁氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-N1-[2-甲氧基-2-甲基-1-(嗎啉-4-羰基)-丙基]-琥珀酰胺27. 2-(4-丁氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-N1-[2-甲氧基-2-甲基-1-(吡啶-2-基氨基甲酰基)-丙基]-琥珀酰胺28. N1-(2，2-二甲基-1-甲基氨基甲?；?丙基)-2-(4-己氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺29.N1-[2，2-二甲基-1-(嗎啉-4-羰基)-丙基]-2-(4-己氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺30.N1-[2，2-二甲基-1-(吡啶-2-基氨基甲?；?-丙基]-2-(4-己氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺31. 2-(4-己氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-N1-(1-甲基氨基甲酰基-2-苯基-乙基)-琥珀酰胺32.N1-(1-芐基-2-嗎啉-4-基-2-氧代-乙基)-2-(4-己氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺33. 2-(4-己氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-N1-[2-苯基-1-(吡啶-2-基氨基甲?；?-乙基]-琥珀酰胺34. 2-(4-己氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-N1-(2-甲氧基-2-甲基-1-甲基氨基甲酰基-丙基)-琥珀酰胺35. 2-(4-己氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-N1-[2-甲氧基-2-甲基-1-(嗎啉-4-羰基)-丙基]-琥珀酰胺36. 2-(4-己氧基-苯基氨基)-3，N4-二羥基-N1-[2-甲氧基-2-甲基-1-(吡啶-2-基氨基甲?；?-丙基]-琥珀酰胺實(shí)施例2-聯(lián)苯-4-基-N1-(1S)-2，2-二甲基-1-甲基氨基甲?；?丙基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺1.1 α-甲酰-聯(lián)苯乙酸乙酯攪拌下將24g聯(lián)苯乙酸乙酯和8.2g甲酸乙酯的混合物滴加到2.4g氫氧化鈉溶于250ml乙醚的懸浮液中。將反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)，小心加入冷水。將水層酸化至pH2，用乙醚萃取產(chǎn)物。干燥萃取液，蒸發(fā)濃縮。1.2 2-聯(lián)苯-3-羥基-琥珀酸將2g三甲基甲硅烷基氰化物和催化量的碘化鋅加到5.7gα-甲酰-聯(lián)苯乙酸乙酯溶于70ml二氯甲烷的溶液中。將混合物于室溫下攪拌過夜，蒸發(fā)濃縮。向殘余物中加入6N HCl，煮沸回流，使腈、三甲基甲硅烷基和酯基團(tuán)皂化。用乙醚萃取分離產(chǎn)物。1.3 α-2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-酮-5-基-聯(lián)苯-乙酸3.14g 2-聯(lián)苯-3-羥基-琥珀酸溶于100ml 2，2-二甲氧基丙烷和30ml DMF，加入催化量的p-甲苯磺酸，于30-40℃攪拌過夜。蒸發(fā)除去溶劑，粗品用于下步反應(yīng)。1.4 α-2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-酮-5-基-聯(lián)苯-乙?；?(S)-叔丁基-甘氨酸-N’-甲基酰胺將0.6g α-2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-酮-5-基-聯(lián)苯乙酸和0.3g(S)-叔丁基-甘氨酸-N’-甲基酰胺溶于30ml二氯甲烷，加入0.2g二異丙基乙胺。加入0.5g 2H-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基uroniumm四氟硼酸鹽，將混合物攪拌過夜。加入約200ml乙酸酯，有機(jī)層依次用碳酸氫鈉溶液、0.5N鹽酸、再用碳酸氫鈉溶液洗滌。干燥有機(jī)層，蒸發(fā)濃縮，殘余物用乙醚研磨。1.5 2-聯(lián)苯-4-基-N1-(1S)-2，2-二甲基-1-甲基-氨基甲?；?丙基)-3，N4-二羥基-琥珀酰胺將0.14g甲醇鈉加到0.14g鹽酸羥胺溶于甲醇的溶液中，將混合物室溫?cái)嚢?小時(shí)。過濾除去沉淀，將濾液在冰浴上冷卻。分次加入0.9g上步反應(yīng)得到的R，S-α-2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-酮-5-基-聯(lián)苯乙?；?叔-甘氨酸-N’-甲基酰胺。將混合物于0℃攪拌30分鐘，然后室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)液蒸發(fā)濃縮，殘余物在硅膠上層析純化，以二氯甲烷/甲醇(3-10％)作洗脫劑。實(shí)施例2為檢測式I化合物對(duì)MMPs如HNC的抑制潛力，培育催化區(qū)域(分離和純化參見Schnierer，S.，Kleine，T.，Gote，T.，Hillemann，A.，Knuper，V.，Tschesche，H.，Biochem.Biophys.Res.Commun.(1993)，191，319-326).隨后按照Grams F.et al.，F(xiàn)EBS 335(1993)76-80所述方法測量標(biāo)準(zhǔn)底物的初期反應(yīng)速度。按通常方法(參見如Dixon，M.，Biochem.J.(1953)55，170-202)評(píng)價(jià)結(jié)果。
合成膠原酶底物是C-末端與二硝基苯酚(DNP)連結(jié)的七肽。該DNP殘基使七肽的Trp的熒光熄滅。斷裂含有DNP殘基的三肽后，測得的熒光增強(qiáng)。
測試緩沖液50mM Tris/HCl pH7.6(Tris＝三-(羥基甲基)-氨基甲烷)100mM NaCl/10mM CaCl2/5％ MeOH(如果需要的話)酶8nM催化區(qū)域(Met80-Gly242)人嗜中性膠原酶(MMP8)底物10μm DNP-Pro-Leu-Gly-Leu-Trp-Ala-D-Arg-NH2測試總體積1ml25℃下在測試緩沖液中制備酶和抑制劑的溶液。向溶液中加入底物使反應(yīng)開始。用熒光光譜計(jì)測量熒光底物的斷裂(激發(fā)和發(fā)射波長分別為280和350nm)。反應(yīng)速度減半時(shí)測得抑制濃度IC50值。
式I化合物用作抑制劑。
對(duì)酶MMP2和MMP1的測試與上述實(shí)施例中對(duì)HNC(MMP8)相似但在其它濃度下，并將實(shí)施例1.5的化合物與Marimastat進(jìn)行比較。需額外活化MMP2和MMP1。這表明相對(duì)于MMP1明顯的選擇性優(yōu)點(diǎn)。
表
*)N2-[3S-羥基-4-(N-羥基氨基)-2R-異丁基-琥珀酰]-L-叔-亮氨酸-N1-甲基酰胺當(dāng)抑制劑對(duì)MMP2和MMP8的抑制程度基本上相同時(shí)，本發(fā)明的實(shí)施例1.5中的化合物對(duì)MMP1的抑制比Marimastat要明顯地弱。
權(quán)利要求
1.式I化合物，其可藥用的鹽、酯以及在體內(nèi)能代謝成式I化合物的衍生物
其中R表示任選被取代的C1-C8烷基，或任選被取代的單環(huán)或二環(huán)狀的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳氧基、雜芳氧基或芳烷基，R1表示任選被取代的C1-C8烷基或任選被取代的單環(huán)或二環(huán)狀的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或烷基雜芳基，R5表示氫或C1-C8烷基，R6表示氫，任選被取代的C1-C8烷基或任選被取代的單環(huán)或二環(huán)狀的環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳烷基或烷基雜芳基，或R5和R6與N原子一起表示最多含有另外一個(gè)雜原子的飽和或不飽和5-或6-元環(huán)。
2.式I化合物，其可藥用的鹽、酯以及在體內(nèi)能代謝成式I化合物的衍生物
其中R表示clogP值為2.0～6.0的Ph-R碎片，R1表示clogP值為-1.5～2.0的氨基羰基-R1碎片，和R5表示氫或C1-C8烷基，R6表示氫，任選被取代的C1-C8烷基或任選被取代的單環(huán)或二環(huán)狀的環(huán)烷基，芳基，雜芳基，芳烷基或烷基雜芳基，或R5和R6與N原子一起表示最多含有另外一個(gè)雜原子的飽和或不飽和5-或6-元環(huán)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的式I化合物，其中當(dāng)R為烷基和環(huán)烷基時(shí)它有4-7個(gè)結(jié)構(gòu)原子，而當(dāng)R為芳基、二環(huán)和雜芳基時(shí)它有5-10個(gè)結(jié)構(gòu)原子。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3之一的式I化合物，其中R有3-10個(gè)結(jié)構(gòu)原子。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4之一的式I化合物，其中R5表示氫，甲基和乙基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5之一的式I化合物，其中R6表示甲基，乙基，苯基或吡啶基。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-4之一的式I化合物，其中R5和R6表示含氧環(huán)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7之一的式I化合物，它們以光學(xué)異構(gòu)體存在，其中琥珀酰異羥肟酸的C2和氨基酸酰胺中的Cα為S構(gòu)型，而琥珀酸母體物質(zhì)的C3為R構(gòu)型。
9.藥物制劑，除含常用載體和輔助物質(zhì)外，還含有至少一種權(quán)利要求1-8之一的式I化合物。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-8之一的式I化合物用于生產(chǎn)具有對(duì)明膠酶抑制作用的藥物制劑的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及其中R,R1,R5和R6具有權(quán)利要求書中給出的意義的式(Ⅰ)化合物,其可藥用的鹽、酯和在體內(nèi)可代謝成式(Ⅰ)化合物的衍生物以及這些化合物生產(chǎn)藥物的用途。
文檔編號(hào)C07C259/00GK1276786SQ98810344
公開日2000年12月13日 申請日期1998年8月18日 優(yōu)先權(quán)日1997年8月19日
發(fā)明者F·格拉姆斯, G·茲默曼, H·W·克雷爾, E·門塔, H·萊納特 申請人:羅赫診斷器材股份有限公司