專利名稱：帶有側(cè)鏈的紫杉烷類化合物的制作方法
本申請是申請?zhí)枮?3121758.X，申請日為1993年12月23日，發(fā)明名稱為“制備新的帶有側(cè)鏈的紫杉烷類化合物及其中間體的方法”地發(fā)明專利申請的分案申請。
本申請是申請人的共同未決申請07/995,443(1992年12月23日申請)的部分繼續(xù)申請，該未決申請被本文全部引入作為參考文獻(xiàn)。
本發(fā)明涉及制備帶有側(cè)鏈的紫杉烷類化合物及其中間體的方法，以及由這些方法制得的新化合物。
紫杉烷類化合物是在藥物領(lǐng)域中已發(fā)現(xiàn)用途的二萜化合物。例如，已發(fā)現(xiàn)紫杉醇，具有下列結(jié)構(gòu)的紫杉烷是有效的抗癌劑
其中ph是苯基，Ac是乙?；虰z是苯甲?；Ｌ烊淮嬖诘淖仙纪轭惢衔锶缱仙即伎稍谥参镏邪l(fā)現(xiàn)并且已從中分離出來。然而，這些紫杉烷類化合物以相當(dāng)?shù)偷暮看嬖谟谥参镏?，因此，例如就紫杉醇而言，需要大量生長緩慢的紫杉樹作為化合物的來源。所以本領(lǐng)域在繼續(xù)研究制備紫杉烷類化合物如紫杉醇及其類似物的合成包括半合成途徑以及制備用于制備這些化合物的中間體的途徑。
本發(fā)明提供了制備新的帶有側(cè)鏈的紫杉烷類化合物的新的綜合方法，該方法包括下列步驟(a)至(e):
(a)．制備下式Ⅰ的噁唑啉化合物或其鹽
其中
R1是R5,R7-O-,R7-S-或(R5)(R6)N-；
R2是R7-O-,R7-S-或(R5)(R6)N-；
R3和R4分別是R5,R5-O-C-(O)-，或(R5)(R6)N-C(O)-；
R5和R6分別是氫，烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，
芳基或雜環(huán)基；
R7是烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，芳基或雜環(huán)基；
(b)．將式Ⅰ噁唑啉或其鹽轉(zhuǎn)化為式Ⅱ噁唑啉或其鹽
其中R1、R3和R4如上定義，
(c)．使式Ⅱ噁唑啉或其鹽與具有直接鍵連于其C-13的羥基的紫杉烷或其鹽在偶合劑存在下進(jìn)行偶合生成下式Ⅲ的帶有噁唑啉側(cè)鏈的紫杉烷或其鹽
其中R1、R3和R4如上定義，T是紫杉烷部分，優(yōu)選式Ⅸ化合物與紫杉烷部分的C-13直接鍵連；
(d)．使式Ⅲ帶有噁唑啉側(cè)鏈的紫杉烷或其鹽與能夠打開式Ⅲ化合物或其鹽的噁唑啉環(huán)的含水酸反應(yīng)生成下式Ⅹ的帶有側(cè)鏈的紫杉烷或其鹽
其中R1、R3、R4和T如上定義，所述式Ⅹ的胺基的酸鹽是通過與所述的開環(huán)酸反應(yīng)生成的；
(e)．使上述式Ⅹ的帶有側(cè)鏈的紫杉烷或其鹽與堿反應(yīng)生成下式Ⅳ的帶有側(cè)鏈的紫杉烷或其鹽
其中R1、R3、R4和T如上定義。
另外，本發(fā)明提供了每一步驟(a)至(e)的各個方法，這些方法均是新方法，本發(fā)明還提供如下所述的新的式Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅸ和Ⅹ化合物及其鹽和水合物。這些化合物的新的前藥也包括在本發(fā)明之中。
本發(fā)明進(jìn)一步描述如下
本文單獨(dú)或作為其他基團(tuán)一部分使用的術(shù)語“烷基”或“烷”是指選擇性取代的直鏈和支鏈飽和烴基，優(yōu)選在直鏈中具有1-10個碳原子，最優(yōu)選低級烷基。典型的未取代的基團(tuán)包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、戊基、己基、異己基、庚基、4,4-二甲基戊基、辛基、2,2,4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基等。典型的取代基可包括一個或多個下列基團(tuán)鹵、烷氧基、烷硫基、鏈烯基、炔基、芳基、(例如形成芐基)、環(huán)烷基、環(huán)烯基、羥基或被保護(hù)的羥基、羧基(-COOH)、烷氧羰基、烷基羰氧基、烷基羰基、氨基甲酰基(NH2-CO-)，取代的氨基甲?；?(R5)(R6)N-CO-，其中R5或R6如上所定義，只是至少R5或R6之一不是氫)、氨基(-NH2)、雜環(huán)基、一或二烷基氨基或硫羥基(-SH)。
本文所用術(shù)語“低級烷”或“低級烷基”是指如上所述的選擇性取代的、在直鏈中具有1-4個碳原子的烷基。
術(shù)語“烷氧基”或“烷硫基”分別是指通過氧鍵(-O-)或硫鍵(-S-)鍵連的如上所述的烷基。本文所用的術(shù)語“烷氧羰基”是指通過羰基鍵連的烷氧基。本文所用的術(shù)語“烷基羰基”是指通過羰基鍵連的烷基。本文所用的術(shù)語“烷基羰氧基”是指通過羰基鍵連，接著通過氧鍵鍵連的烷基。術(shù)語“一烷基氨基”或“二烷基氨基”是指分別被一個或兩個如上所述的烷基取代的氨基。
本文單獨(dú)或作為其他基團(tuán)一部分使用的術(shù)語“鏈烯基”是指在其鏈中含有至少一個碳-碳雙鍵且優(yōu)選在直鏈中具有2-10個碳原子的選擇性取代的直鏈和支鏈的烴基。典型的未取代的此類基團(tuán)包括乙烯基、丙烯基、異丁烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基等。典型的取代基可包括一個或多個下列基團(tuán)鹵、烷氧基、烷硫基、烷基、炔基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、羥基或被保護(hù)的羥基、羧基(-COOH)、烷氧羰基、烷基羰氧基、烷基羰基、氨基甲?；?NH2-CO-)、取代的氨基甲?；?(R5)(R6)N-CO-，其中R5或R6如上定義，只是至少R5或R6之一不是氫)、氨基(-NH2)、雜環(huán)基、一或二烷基氨基或硫羥基(-SH)。
本文單獨(dú)或作為其他基團(tuán)一部分使用的術(shù)語“炔基”是指在其鏈中含有至少一個碳-碳三鍵且優(yōu)選在直鏈中具有2-10個碳原子的選擇取代的直鏈和支鏈的烴基。典型的未取代的基團(tuán)包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基、癸炔基等。典型的取代基可包括一個或多個下列基團(tuán)鹵、烷氧基、烷硫基、烷基、鏈烯基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、羥基或被保護(hù)的羥基、羧基(-COOH)、烷氧羰基、烷基羰氧基、烷基羰基、氨基甲?；?NH2-CO-)，取代的氨基甲酰基((R5)(R6)N-CO-，其中R5或R6如上定義，只是至少R5或R6之一不是氫)、氨基(-NH2)、雜環(huán)基、一或二烷基氨基或硫羥基(-SH)。
本文單獨(dú)或作為其他基團(tuán)一部分使用的術(shù)語“環(huán)烷基”是指優(yōu)選含有1-3個環(huán)并每個環(huán)具有3-7個碳原子的選擇性取代的飽和環(huán)烴環(huán)體系。典型的末取代的此類基團(tuán)包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)癸基、環(huán)十二烷基、金剛烷基。典型的取代基包括一個或多個如上所述的烷基，或一個或多個如上所述的作為烷基取代基的基團(tuán)。
本文單獨(dú)或作為其他基團(tuán)一部分使用的術(shù)語“環(huán)烯基”是指選擇取代的如上所述的環(huán)烷基，且還含有至少一個碳-碳雙鍵形成部分不飽和環(huán)的基團(tuán)。
本文單獨(dú)或作為其他基團(tuán)一部分使用的術(shù)語“芳”或“芳基”是指優(yōu)選含有1個或2個環(huán)和6-12個環(huán)碳原子的選擇取代的碳環(huán)芳香基。典型的未取代的基團(tuán)包括苯基、聯(lián)苯基和萘基。典型的取代基包括一個或多個優(yōu)選三個或較少的硝基、如上所述的烷基或如上所述的作為烷基取代基的基團(tuán)。
本文單獨(dú)或作為其他基團(tuán)一部分使用的術(shù)語“雜環(huán)基”或“雜環(huán)的”是指在至少一個環(huán)中具有至少一個雜原子的選擇取代的完全飽和或不飽和的芳香或非芳香的環(huán)基，優(yōu)選在每一環(huán)中具有5或6個原子的單環(huán)或二環(huán)基。例如雜環(huán)基在其環(huán)中具有1個或2個氧原子，1個或2個硫原子和/或1-4個氮原子。各雜環(huán)基可通過其環(huán)體系的任一碳原子或雜原子鍵連。典型的雜環(huán)基包括下列基團(tuán)噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡啶基、咪唑基、吡咯烷基、哌啶基、吖庚因基、吲哚基、異吲哚基、喹啉基、異喹啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并噁二唑基和苯并呋咱基。典型的取代基包括一個或多個如上所述的烷基，或者一個或多個如上所述的作為烷基取代基的基團(tuán)。雜環(huán)基還包括較小的雜環(huán)基如環(huán)氧化物和氮丙啶類。
本文單獨(dú)或作為其他基團(tuán)一部分使用的術(shù)語“鹵素”、“鹵代”或“鹵”是指氯、溴、氟和碘。
本文所用的術(shù)語“紫杉烷部分”是指含有下列核心結(jié)構(gòu)的部分
其核心結(jié)構(gòu)可被取代并且在其環(huán)系中可含有乙烯不飽和度。
本文所用的術(shù)語“紫杉烷”是指含有上述紫杉烷部分的化合物。
本文所用的術(shù)語“羥(或羥基)保護(hù)基”是指能夠保護(hù)游離羥基的任何基團(tuán)，在其用于反應(yīng)之后，可在不破壞分子的其余部分的情況下將其除去。這些基團(tuán)及其合成可在＂Protective Groups inOrganic Synthesis＂T.W.Greene,John Wiley和Sons,1991或Fieser&Fieser中找到。典型的羥基保護(hù)基包括甲氧基甲基、1-乙氧基乙基、1-甲氧基-1-甲基乙基、芐氧基甲基、(β-三甲基甲硅烷基乙氧基)甲基、四氫吡喃基、2,2,2-三氯乙氧基羰基、叔丁基(二苯基)甲硅烷基、三烷基甲硅烷基、三氯甲氧羰基、2,2,2-三氯乙氧基甲基。
術(shù)語“鹽”包括無機(jī)酸和/或有機(jī)酸和堿形成的酸鹽和/或堿鹽。典型的酸鹽包括無機(jī)酸如HCl、H2SO4或HNO3，或羧酸如三氟乙酸或乙酸形成的鹽。典型的堿鹽包括與胺如三乙胺、二異丙基乙胺，或吡啶或氨基酸如精氨酸，或胍形成的鹽。羥基鹽如金屬(如堿金屬或堿土金屬)醇鹽也被本文稱為“鹽”，例如使羥基與金屬取代劑反應(yīng)可生成金屬醇鹽。
除非另有說明，本發(fā)明中所使用的或用本發(fā)明的方法制備的有關(guān)化合物包括其鹽和水合物。
式Ⅰ的噁唑啉化合物及其鹽的制備
本發(fā)明提供了制備式Ⅰ的噁唑啉化合物及其鹽的新方法，具體是如下所述的脫水、置換和交換方法。
本發(fā)明還提供了新的式Ⅰ的噁唑啉化合物及其鹽，包括其所有立體異構(gòu)體，或者基本上無其他立體異構(gòu)體、或者與選擇的其他立體異構(gòu)體或所有其他立體異構(gòu)體的混合物，其條件是當(dāng)R1是苯基和R3或R4之一是氫時，(ⅰ)當(dāng)R3或R4的另一個是十五烷基，芐基或甲氧羧基時R2不是甲氧基，或者(ⅱ )當(dāng)R3或R4的另一個是乙氧羰基時R2不是乙氧基；當(dāng)R1是甲基和R3或R4之一是氫，而R3或R4的另一個是2-甲基丙基時，R2不是8-苯基_氧基；當(dāng)R1是乙?；谆蚏3和R4是氫時，R2不是乙氧基或NH2。
優(yōu)選下述的式Ⅰa噁唑啉及其鹽，特別是具有下面稱為“優(yōu)選化合物”中選出的那些取代基的化合物。
脫水方法
式Ⅰ噁唑啉化合物或其鹽可用脫水方法制備，該方法包括使下式Ⅴ化合物或其鹽
其中R1、R2、R3和R4如上定義，與能夠使式Ⅴ化合物或其鹽脫水的酸反應(yīng)生成式Ⅰ化合物或其鹽的步驟。
起始原料式Ⅴ化合物及其鹽可按例如下列文獻(xiàn)中所述的方法制備美國專利申請?zhí)?7/975,453,Patel等人,1992年11月12日申請；Ojima等人，J.Org.Chem.,56,1681-1683(1991)；Georg等人,Tetrahedron Lett.,32,3151-3154(1991)；Denis等人，J.Org.Chem.,51,46-50(1986)；Corey等人，Tetrahedron Lett.,32,2857-2860(1991)；Denis等人，J.Org.Chem.,57,4320-4323(1992)；Ojima等人，Tetrahedron,48,6985-7012(1992)；Commercon等人，Tett.Lett.,33,5185-5188(1992)；Denis等人，J.Org.Chem.,56(24),6939-6942(1991)(例如接著酯化并用酸處理)；和Denis等人，J.Org.Chem.,55,1957-1959(1990)，所有上述文獻(xiàn)在此引入作為參考文獻(xiàn)。
能夠脫水的任何酸均可用于本發(fā)明的脫水方法，典型的酸包括磺酸如吡啶鎓對甲苯磺酸、對甲苯磺酸、樟腦磺酸和甲磺酸，羧酸如三氟乙酸或乙酸，或無機(jī)酸如HCl、H2SO4或HNO3。酸∶式Ⅴ化合物的摩爾比優(yōu)選為大約1∶100至大約1∶1。
反應(yīng)優(yōu)選在大約0℃至大約200℃的溫度下，在大約1atm至大約5atm下進(jìn)行，反應(yīng)也優(yōu)選在惰性氣體如氬氣氛中進(jìn)行。
優(yōu)選使用的溶劑是惰性有機(jī)溶劑如甲苯、四氫呋喃、乙腈、苯或二甲苯。優(yōu)選使用的溶劑量應(yīng)使起始原料式Ⅴ化合物占溶劑和式Ⅴ化合物總重量的大約2.5％。
式Ⅰ化合物的噁唑啉環(huán)編號如下
就4和5位的碳原子而言，式Ⅰ化合物的噁唑啉化合物可存在如下四種立體異構(gòu)體Ⅰa、Ⅰb、Ⅰc和Ⅰd
就相應(yīng)位置的碳原子而言，式Ⅴ化合物也可存在四種立體異構(gòu)體。這些立體異構(gòu)體為下列化合物Ⅴa、Ⅴb、Ⅴc和Ⅴd
例如，所需立體異構(gòu)體的式Ⅰ化合物可按本發(fā)明的脫水方法使用合適立體異構(gòu)體的起始原料式Ⅴ化合物來制備，因此，使用化合物Ⅴa將得到化合物Ⅰa，使用化合物Ⅴb將得到化合物Ⅰb，使用化合物Ⅴc將得到化合物Ⅰc，使用化合物Ⅴd將得到化合物Ⅰd。盡管也可使用立體異構(gòu)體混合物，但在本發(fā)明的脫水方法中優(yōu)選使用起始原料化合物Ⅴ的單一立體異構(gòu)體。特別優(yōu)選使用化合物Ⅴa制備化合物Ⅰa，尤其是制備具有下面稱為“優(yōu)選化合物”中列出的那些取代基的化合物。
置換方法
式Ⅰ噁唑啉化合物或其鹽也可用置換方法制備，該方法包括使式Ⅴ化合物或其鹽在堿存在下與能夠活化式Ⅴ化合物或其鹽的羥基的活化劑反應(yīng)從而發(fā)生分子內(nèi)置換，生成式Ⅰ化合物或其鹽的步驟，其條件是當(dāng)R1是苯基，R3或R4之一是氫時，(ⅰ)當(dāng)R3或R4的另一個是乙氧羰基時R2不是乙氧基，或者(ⅱ)當(dāng)R3或R4的另一個是芐基時R2不是甲氧基。
能夠活化式Ⅴ化合物的羥基并發(fā)生分子內(nèi)置換的任何化合物均可用作本發(fā)明置換方法中的活化劑。典型的活化劑包括磺酰鹵如烷基磺酰鹵(如甲磺酰氯)，或芳基磺酰鹵(如苯磺酰氯或?qū)妆交酋Ｂ?，磷酰氯(POCl3)，五氯化磷(PCl5)，或亞硫酰氯(SOCl2)?；罨瘎檬舰趸衔锏哪柋葍?yōu)選為大約1∶1至大約2∶1。
活化式Ⅴ化合物或其鹽的羥基可制得新的式Ⅵ中間體化合物或其鹽
其中R1、R2、R3和R4如上定義。L是離去基團(tuán)如烷基磺酰氧基(如甲磺酰氧基)，芳基磺酰氧基(如苯磺酰氧基或?qū)妆交酋Ｑ趸?，氯或磷?；?PO2-或PO-)。本發(fā)明提供了上述新的式Ⅵ化合物及其鹽，包括其所有立體異構(gòu)體，或者基本上無其他立體異構(gòu)體，或者是與選擇的其他立體異構(gòu)體或所有其他立體異構(gòu)體的混合物，其條件是當(dāng)R1是苯基、R2是甲氧基、R3或R4之一是氫而另一個是芐基時，L不是氯。
可使用的堿包括有機(jī)堿如胺(例如吡啶、三乙胺、二異丙基乙胺、二甲基吡啶或1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯)或六甲基二硅氮烷化鋰，或無機(jī)堿如堿金屬碳酸鹽(如碳酸鉀)，堿∶式Ⅴ化合物的摩爾比優(yōu)選大于約2∶1。
反應(yīng)優(yōu)選在大約-20℃至大約100℃，特別是0℃的溫度下，并在大約1atm壓力下進(jìn)行。反應(yīng)優(yōu)選在惰性氣體如氬氣中進(jìn)行。
優(yōu)選使用的溶劑是惰性有機(jī)溶劑如氯仿、二氯甲烷、甲苯、四氫呋喃、乙腈，最優(yōu)選的溶劑是在本發(fā)明的方法中既能用作溶劑又能用作堿的堿性有機(jī)溶劑如吡啶、三乙胺或二甲基吡啶。優(yōu)選使用的溶劑的量應(yīng)使起始原料式Ⅴ化合物占溶劑和式Ⅴ化合物總重量的大約10％。
例如，所需的式Ⅰ化合物的立體異構(gòu)體可按本發(fā)明的置換方法使用起始原料式Ⅴ化合物的合適的立體異構(gòu)體來制備。因此，使用化合物Ⅴa將得到化合物Ⅰc，使用化合物Ⅴb將得到化合物Ⅰb，使用化合物Ⅴc將得到化合物Ⅰa，使用化合物Ⅴd將得到化合物Ⅰd，盡管也可使用立體異構(gòu)體混合物，但在本發(fā)明的置換方法中優(yōu)選使用起始原料化合物Ⅴ的單一立體異構(gòu)體。特別優(yōu)選使用化合物Ⅴc制備化合物Ⅰa，尤其是制備具有下面稱為“優(yōu)選化合物”中列出的那些取代基的化合物。
交換方法
其中R1為如下定義的R1′的式Ⅰ噁唑啉化合物或其鹽也可通過交換法制備，此方法包括將下列式Ⅶ化合物或其鹽
其中R2、R3和R4如上定義，與下列式Ⅶ化合物或其鹽反應(yīng)
其中R1′和E分別為烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，芳基或雜環(huán)基；條件是當(dāng)E為乙基，R3和R4其中之一為氫，并且(ⅰ)當(dāng)R1＇為苯基，當(dāng)R3或R4中的另一個為甲氧羰基時，R2不為甲氧基，和當(dāng)R3或R4中的另一個為乙氧羰基時，R2不為乙氧基；和(ⅱ)當(dāng)R3或R4中的另一個為2-甲丙基時，R1′為甲基，R2不為8-苯基_氧基。
當(dāng)兩個原料化合物Ⅶ和Ⅷ分別以NH2和HN基團(tuán)上的酸加成鹽的形式同時使用時，為了足以令反應(yīng)進(jìn)行可以使用胺堿如氨或有機(jī)胺堿分別形成游離的NH2和/或HN基團(tuán)。在此任何形成游離的NH2和/或HN基團(tuán)的胺堿均可使用。優(yōu)選叔胺堿例如三乙胺，二異丙基乙基胺，二甲基吡啶，吡啶或1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一-7-烯。胺堿∶式Ⅶ化合物的摩爾比優(yōu)選是從約1∶1-約10∶1。
式Ⅶ原料化合物和其鹽可以通過下列文獻(xiàn)中所述的方法制備，例如Patcl等人于1992,11,12申請的美國專利申請?zhí)?7/975,453；Commercon等人，Tetrahedron Lett.,33(36),5185-5188(1992)；Corey等人，Tetrahedron Lett.,32,2857-2860(1991)；Ojima等人，Tetrahedron,48,6985-7012(1992)和Ojima等人Tetrahedron Lett.,33,5737-5740(1992)。所有這些文獻(xiàn)在此引入做為參考。式Ⅷ原料化合物和其鹽可以通過例如Kimball等人，Org.Synth.Coll.Vol.Ⅱ,P 284(1943)中所述方法制備。式Ⅷ化合物的酸性鹽例如與羧酸，磺酸或無機(jī)酸形成的鹽是優(yōu)選使用的原料，因?yàn)榇祟惢衔锵鄬Ψ€(wěn)定并容易得到。上述鹽可以通過與上述所用堿反應(yīng)中和。式Ⅷ化合物∶式Ⅶ化合物的摩爾比優(yōu)選是從約1∶1-約2∶1。
反應(yīng)優(yōu)選在約0℃至約100℃溫度下和約1atm壓力下進(jìn)行。反應(yīng)優(yōu)選在惰性氣體如氬氣或氮?dú)庀逻M(jìn)行。
優(yōu)選使用的溶劑為惰性有機(jī)溶劑例如甲苯，四氫呋喃，二氯甲烷，1,2-二氯乙烷或氯仿。所用溶劑的量優(yōu)選是應(yīng)使起始原料式Ⅶ化合物占以溶劑和式Ⅶ化合物總和重量為基準(zhǔn)的約6％重量。
同式Ⅴ化合物一樣，式Ⅶ化合物可在相應(yīng)位置碳原子上具有四個立體異構(gòu)體。這些異構(gòu)體為下列化合物Ⅶa,Ⅶb,Ⅶc和Ⅶd
所需式Ⅰ化合物的立體異構(gòu)體可以通過例如使用式Ⅶ原料化合物的適宜立體異構(gòu)體利用本發(fā)明交換方法制備。這樣，當(dāng)使用化合物Ⅶa時可得到化合物Ⅰa，使用化合物Ⅶb時可得到化合物Ⅰd，使用化合物Ⅶc時可得到化合物Ⅰc，和使用化合物Ⅶd時可得到化合物Ⅰb。在本發(fā)明交換法中盡管也可以使用立體異構(gòu)體混合物，但優(yōu)選的是使用原料化合物Ⅶ的單一立體異構(gòu)體。特別優(yōu)選的是使用化合物Ⅶa可制得化合物Ⅰa，特別是可制得具有在下列稱為“優(yōu)選化合物”中所列舉取代基的化合物Ⅰa。
式Ⅱ噁唑啉化合物及其鹽的制備
式Ⅱ噁唑啉化合物及其鹽可通過將基團(tuán)-C(O)-R2轉(zhuǎn)化成基團(tuán)-C(O)-OH從而由式Ⅰ噁唑啉化合物及其鹽制備。
任何能夠完成上述轉(zhuǎn)化的試劑均可使用。例如當(dāng)R2為烷氧基如甲氧基或乙氧基時，可用適宜的親核試劑如甲硫醇的堿金屬或堿土金屬鹽將式Ⅰ化合物或其鹽脫烷基化形成式Ⅱ化合物。另外，也可利用氫化作用，例如通過使用氫化劑如氫和氫化催化劑如鈀可將芐氧羧基基團(tuán)轉(zhuǎn)化成羧基。
優(yōu)選的是，通過水解進(jìn)行基團(tuán)-C(O)-R2轉(zhuǎn)變成羧基。任何能夠完成水解作用的化合物均可在此用作水解劑。典型的水解劑包括含水堿例如氫氧化物(如金屬氫氧化物例如氫氧化鋇，或優(yōu)選的是堿金屬氫氧化物例如氫氧化鋰，氫氧化鈉或氫氧化鉀)。堿∶式Ⅰ化合物的摩爾比優(yōu)選是由約1∶1-約3∶1。水∶式Ⅰ化合物的摩爾比優(yōu)選是由約1∶1-約100∶1。
反應(yīng)優(yōu)選在約-20℃至約100℃溫度下和約1個大氣壓下進(jìn)行。其中R2為-N(R5)(R6)的式Ⅰ化合物或其鹽的氫氧化物皂化反應(yīng)優(yōu)選在上述溫度范圍的較高溫度下或在接近所用液體介質(zhì)回流溫度下或在所用液體介質(zhì)回流溫度下進(jìn)行。反應(yīng)優(yōu)選在氮?dú)?，氬氣或空氣下進(jìn)行。
溶劑可選自無機(jī)和有機(jī)液體如水，醇，甲苯，四氫呋喃，二噁烷，乙腈或二甲基甲酰胺，或它們的混合物。水和有機(jī)液體如四氫呋喃混合液優(yōu)選用作溶劑。所用溶劑的量優(yōu)選是應(yīng)使起始原料Ⅰ化合物占以溶劑和式Ⅰ化合物總重量為基準(zhǔn)的約7％重量。
本發(fā)明還提供了新的式Ⅱ化合物及其鹽，包括其所有立體異構(gòu)體，可以是基本上不含有其它立體異構(gòu)體的形式，或者是與其它選擇性立體異構(gòu)體或所有其它立體異構(gòu)體的混合物形式，條件是，當(dāng)R1為苯基和R3或R4中的一個為氫時，R3或R4中的另一個不為COOH。同式Ⅰ噁唑啉一樣，式Ⅱ噁唑啉可在4-和5-位碳原子上具有四個立體異構(gòu)體。這些立體異構(gòu)體為下列化合物Ⅱa,Ⅱb,Ⅱc和Ⅱd
式Ⅱa噁唑啉及其鹽是優(yōu)選的，特別優(yōu)選的是具有在下列稱為“優(yōu)選化合物”中所列舉取代基的式Ⅱa化合物。
在本方法中式Ⅰ原料化合物或其鹽的立體構(gòu)象可以被保留和/或被轉(zhuǎn)化。例如，分別在4-和5-位上具有相應(yīng)順式位置取代基的式Ⅰ化合物的水解可以水解生成具有相應(yīng)順式構(gòu)象的式Ⅱ化合物，當(dāng)對應(yīng)于起始化合物的5-位羧基取代基被轉(zhuǎn)化時生成具有相應(yīng)反式構(gòu)象的式Ⅱ化合物或上述順式和反式化合物的混合物，當(dāng)用堿進(jìn)行水解時，鍵合有基團(tuán)-C(O)-R2的碳原子被脫質(zhì)子化，隨即由環(huán)系反方向上述碳原子被再質(zhì)子化，結(jié)果導(dǎo)致立體構(gòu)象的轉(zhuǎn)化。典型的堿包括上文所述堿金屬或堿金屬碳酸鹽例如碳酸鉀，胺堿，或金屬如堿金屬或堿土金屬醇鹽，后者醇鹽可以在加入之前生成或者就地生成(例如，通過將金屬取代劑(metallating agent)如正丁基鋰和鏈烷醇如乙醇一起加入)。
當(dāng)在上述本方法中立體構(gòu)象被轉(zhuǎn)化時，相對于式Ⅰ原料化合物具有轉(zhuǎn)向立體構(gòu)象的式Ⅰ化合物可以制成中間體形式(即差向異構(gòu)化)。例如，在水解反應(yīng)中，當(dāng)式Ⅰ原料化合物4-和5-位取代基在相對彼此順式位置時，其中相對于原料化合物5-位取代基-C(O)-R2被轉(zhuǎn)化的相應(yīng)的式Ⅰ反式化合物可以作為中間體的形式制得上述轉(zhuǎn)化方法也包含在本發(fā)明范圍內(nèi)。
式Ⅲ帶有噁唑啉側(cè)鏈的紫杉烷
及其鹽的偶合法制備
式Ⅲ帶有側(cè)鏈的紫杉烷或其鹽可以通過下述方法制備，此方法包括在偶合劑存在下將式Ⅱ噁唑啉化合物或其鹽與C-13上直接鍵合有羥基的紫杉烷或其鹽反應(yīng)。在此方法中優(yōu)選使用式Ⅱa噁唑啉或其鹽，特別是具有在下列稱為“優(yōu)選化合物”中所列舉的取代基的式Ⅱa化合物。
紫杉烷為含有下列母核結(jié)構(gòu)的化合物
如上所述，此母核可以被取代并且在其環(huán)系中可以含有不飽和烯鍵。在此方法中任何含有C-13上直接鍵合的羥基的紫杉烷或其鹽(例如C-13羥基的金屬醇鹽)均可使用。用于本發(fā)明方法中的紫杉烷原料可以是歐洲專利公開號400,971(在此作為參考)中所述化合物，或者可以是Chen等人于1992,7,1，申請的美國專利申請?zhí)?7/907,261或Ueda等人于1992,11,24申請的美國專利申請?zhí)?7/981,151(上述兩篇文獻(xiàn)在此作為參考)中所述含有紫杉烷殘基的化合物，以及通過其中所述方法或其中所述方法的相似方法制備的化合物。此紫杉烷的實(shí)例包括下列式Ⅸ化合物或其鹽
其中R8為氫，羥基，R14-O-,R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R9為氫，羥基，氟，R14-O-,R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；R10和R11各自為氫，烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，R16-O-，芳基或雜環(huán)基；R14為羥基保護(hù)基；和R15為氫，烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，芳基或雜環(huán)基；R16為烷基。
未具體指明手性中心的式Ⅸ化合物所有立體構(gòu)象均適用于本發(fā)明的偶合方法。盡管可以使用其混合物，但優(yōu)選使用單一的立體異構(gòu)體，用作式Ⅸ原料的優(yōu)選的一種化合物是7-三烷基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ化合物，更優(yōu)選的是7-三甲基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ或7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ。
作為式Ⅸ原料化合物優(yōu)選的另外一系列化合物為其中R8為OC(O)CH3；R9為羥基或羥基保護(hù)基例如O-三甲基甲硅烷基或三乙基甲硅烷基；R10除不是金屬外如上所定義以及R11為芳基例如芐基的化合物。此后一類化合物被認(rèn)為是新的，它們的制備方法如下文所述，特別優(yōu)選的上述化合物為其中R10為環(huán)烷基或OR15的化合物。
上述化合物可通過下列一般反應(yīng)流程制備
步驟F
通過與適宜試劑例如鹵代三烷基硅烷如鹵代三甲基或鹵代三乙基硅烷，2,2,2-三氯乙基氯甲酸酯或芐氧羰基(Carbobenzyloxy)反應(yīng)將漿果赤霉素ⅢC-7和C-13位進(jìn)行保護(hù)?？扇芙鉂{果赤霉素Ⅲ的任何惰性有機(jī)溶劑均可使用，例如THF,DMF,MeCl2和二噁烷。反應(yīng)在叔胺堿如吡啶或咪唑存在下進(jìn)行。反應(yīng)溫度可在-30℃至室溫范圍內(nèi)變化，對于C-7取代作用優(yōu)選在-30℃-0℃下進(jìn)行而對于C-13優(yōu)選在0℃至室溫下進(jìn)行。保護(hù)基反應(yīng)物濃度優(yōu)選是對C-7和C-13兩取代基過量的摩爾濃度(1-10)。步驟G
此后通過在例如DMF,THF，二噁烷或各種醚中與三甲基硅烷或優(yōu)選二甲基硅烷例如氯代三甲基硅烷或優(yōu)選氯代二甲基硅烷反應(yīng)將中間體ⅪC-1羥基進(jìn)行保護(hù)。如步驟F中所述，反應(yīng)優(yōu)選在叔胺堿如咪唑或吡啶中進(jìn)行，溫度范圍可以是-30℃至室溫，優(yōu)選是約0℃。步驟H(A)此后通過與適宜的還原劑如Red-Al或氫化鋁鋰反應(yīng)將中間體ⅫC-4還原為羥基，通常使用過量摩爾比(1-5當(dāng)量)還原劑。反應(yīng)溶劑可以是THF，二噁烷或各種適宜的醚而反應(yīng)溫度可以是-30℃-0℃范圍，優(yōu)選是約0℃。(B)在仲胺堿的堿金屬(Li,Na或K)陰離子存在下，通過與適宜的酰氯酸酐或混合酸酐如丙烯酰氯，苯甲酰氯，環(huán)烷基甲酰氯，氯甲酸烷基酯反應(yīng)將(A)中間體ⅩⅢ其中C-4羥基轉(zhuǎn)變成適宜的C-4取代基。反應(yīng)溶劑包括THF，二噁烷等。溫度范圍可以是-30℃至室溫，優(yōu)選是約0℃。步驟I(A)此后通過與吡啶鎓氟化物(含水氟化氫的吡啶溶液)于乙腈中反應(yīng)，隨后于THF中用四丁基氟化銨或于THF用氟化銫處理將步驟H(B)中間體ⅩⅢ脫保護(hù)。然后混合物用醇稀釋，用溫和的有機(jī)或無機(jī)酸洗滌并分離。(B)隨后如步驟F所述按照上述適于C-7取代基的反應(yīng)參數(shù)在ⅩⅣ中引入C-7羥基保護(hù)基。
隨后按照本文所述新的方法或經(jīng)美國專利5,227,400,5,175,315和5,229,526(在此作為參考)中所述Holton工藝可在C-13上引入適宜的側(cè)鏈。
因此，本發(fā)明新的最終產(chǎn)物是下式化合物或其鹽或水合物
其中
R1為R5,R7-O-,R7-S-或(R5)(R6)N-；
R3和R4各自為R5,R5-O-C(O)-或(R5)(R6)N-C(O)-；
R5和R6各自為氫，烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，
芳基或雜環(huán)基；和
R7為烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，芳基或雜環(huán)基；T為
其中
R8為氫，羥基，R14-O-,R15-C-(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；
R9為氫，羥基，氟，R14-O-,R15-C(O)-O-或R15-O-C(O)-O-；
R10和R11各自為氫，烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，R16-O-芳基或雜環(huán)基；
R14為羥基保護(hù)基；和
R15為氫，烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，芳基或雜環(huán)
基，
R15為烷基，條件是R10不是甲基。
優(yōu)選化合物
新的式Ⅳ化合物中特別優(yōu)選的是其中R10為環(huán)烷基或OR6的化合物。新的式Ⅳ化合物中最優(yōu)選的是其中R10為環(huán)烷基，R1為芳基，優(yōu)選苯基，或烷氧基優(yōu)選叔丁氧基；R3為芳基，優(yōu)選苯基，雜環(huán)基優(yōu)選2-或3-呋喃基或噻吩基，異丁烯基，2-丙烯基，異丙基或(CH3)2CH-；R4為氫；R8優(yōu)選為羥基或烷羰氧基例如乙酰氧基；R9為羥基和R11為芳基，優(yōu)選苯基的化合物。
任何可用式Ⅱ噁唑啉或其鹽的羧基將原料紫杉烷或其鹽的C-13羥基酯化的化合物均可用作本方法中的偶合劑。偶合劑的實(shí)例包括當(dāng)與式Ⅱ噁唑啉反應(yīng)時可形成活化噁唑啉酯(例如1-羥基苯并三唑或N-羥基琥珀酰亞胺)或酸酐(例如酰氯如新戊酰氯或雙(2-氧-3-噁唑烷基)膦酰氯)的化合物，特別是偶合劑包括如碳化二亞胺(如二環(huán)己基碳二亞胺(DCC),1,3-二異丙基碳二亞胺(DIC)或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸化物)，雙(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯)，羰基二咪唑(CDI)，新戊酰氯或2,4,6-三氯苯甲酰氯的化合物；其中上述化合物優(yōu)選與如1-羥基苯并三唑(HOBt)或N-羥基琥珀酰亞胺(HO-Su)的化合物或如下列的胺一起使用，所述胺如三乙胺，吡啶或在4-位上被-N(R16)(R17)取代的吡啶，其中R16和R17各自選自烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基或雜環(huán)基(形成例如4-二甲氨基吡啶(DMAP)的化合物)，或者其中R16和R17與它們所連接的氮原子一起形成一個雜環(huán)基(形成例如4-嗎啉代吡啶或4-吡咯烷基吡啶的化合物)。偶合劑∶原料紫杉烷的摩爾比優(yōu)選是由約1∶1至約2∶1。式Ⅱ噁唑啉∶原料紫杉烷的摩爾比優(yōu)選是由約1∶1至約2∶1。
反應(yīng)優(yōu)選是在約0℃至約140℃溫度下并于一個大氣壓下進(jìn)行。反應(yīng)優(yōu)選在惰性氣體如氬氣氛下進(jìn)行。
所用優(yōu)選溶劑為惰性有機(jī)液體如甲苯，乙腈，1,2-二氯乙烷，氯仿，四氫呋喃，吡啶，二氯甲烷或二甲基甲酰胺。所用溶劑的量優(yōu)選是應(yīng)使原料紫杉烷占以溶劑和紫杉烷化合物的總合為基準(zhǔn)的約20％重量。
在偶合的式Ⅲ產(chǎn)物中原料噁唑啉4-和5-位取代基的立體構(gòu)象可以保留和/或轉(zhuǎn)化，例如，當(dāng)5-位取代基相應(yīng)于原料被轉(zhuǎn)化時，則產(chǎn)生由順式轉(zhuǎn)化成反式的差向異構(gòu)化作用。
本發(fā)明還提供了新的式Ⅲ帶有噁唑啉側(cè)鏈的紫杉烷及其鹽，包括其所有立體異構(gòu)體，基本上不含有其它立體異構(gòu)體的形式或與其它選擇性立體異構(gòu)體或所有其它立體異構(gòu)體混合的形式。
開環(huán)形成式Ⅹ紫杉烷及其鹽
式Ⅹ帶有測鏈的紫杉烷或其鹽可以通過下述方法由帶有噁唑啉測鏈的式Ⅲ紫杉烷或其鹽制備，此方法包括將式Ⅲ紫杉烷或其鹽與能夠使與所述紫杉烷化合物紫杉烷殘基C-13鍵合的噁唑啉基團(tuán)開環(huán)以形成所述式Ⅹ化合物或其鹽的含水酸反應(yīng)。
任何能夠完成上述開環(huán)反應(yīng)的含水酸均可用于本發(fā)明方法中，可開環(huán)酸的實(shí)例包括羧酸如乙酸或三氟乙酸，或優(yōu)選無機(jī)酸如鹽酸，氫氟酸或硫酸水溶液，可開環(huán)酸∶式Ⅲ化合物的摩爾比優(yōu)選由約1∶1至約10∶1，水∶式Ⅲ化合物的摩爾比優(yōu)選由約1∶1至約100∶1。
開環(huán)反應(yīng)優(yōu)選是在約-20℃至約40℃溫度下并在約1個大氣壓下進(jìn)行。反應(yīng)優(yōu)選在氮?dú)?，氬氣或空氣氣氛下進(jìn)行。
所用優(yōu)選溶劑為單獨(dú)使用或與水混合的惰性有機(jī)液體如四氫呋喃，醇(優(yōu)選低級鏈烷醇如甲醇)，二噁烷，甲苯，乙腈或它們的混合物，所用溶劑的量優(yōu)選是應(yīng)使式Ⅲ原料化合物占以溶劑和式Ⅲ化合物的總和為基準(zhǔn)的大約5％重量。
本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案進(jìn)一步包括脫除紫杉烷殘基上的一個或多個基團(tuán)，特別是游離的羥基以制備式Ⅹ紫杉烷。例如，脫保護(hù)反應(yīng)可通過用脫保護(hù)劑于上述開環(huán)反應(yīng)之前或之后，或與開環(huán)反應(yīng)同時進(jìn)行，任何能夠完成脫保護(hù)反應(yīng)的化合物均可用作脫保護(hù)劑。例如，酸如氫氟酸或含水質(zhì)子傳遞酸，或四烷基氟化銨如四正丁基氟化銨可用于脫除甲硅烷基保護(hù)基；芐基保護(hù)基可通過氫化脫除，三氯乙氧羰基保護(hù)基可通過與鋅反應(yīng)脫除；而醛縮醇或酮縮醇保護(hù)基可通過用質(zhì)子傳遞酸或路易斯酸脫除。
本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)例包括同時進(jìn)行開環(huán)反應(yīng)和紫杉烷環(huán)結(jié)構(gòu)上，特別是C-7上一個或多個羥基保護(hù)基的脫保護(hù)反應(yīng)。特別優(yōu)選的實(shí)例包括用能夠完成這兩個反應(yīng)的酸(如無機(jī)酸例如鹽酸)同時進(jìn)行開環(huán)反應(yīng)和脫保護(hù)反應(yīng)。例如，在上述開環(huán)反應(yīng)條件下使用酸可以使開環(huán)反應(yīng)和C-7上可酸裂解羥基保護(hù)基如三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基或三乙基甲硅烷基)的脫除反應(yīng)同時進(jìn)行。
本發(fā)明還提供了在開環(huán)反應(yīng)中和任意的脫保護(hù)反應(yīng)中形成的新的式Ⅹ中間體及其鹽，包括其所有立體異構(gòu)體，基本上不含有其它立體異構(gòu)體的形式或與選擇性地與其它立體異構(gòu)體或所有其它立體異構(gòu)體的混合形式。
與堿反應(yīng)生成式Ⅳ紫杉烷及其鹽
將式Ⅹ化合物或其鹽用堿處理得到式Ⅳ化合物或其鹽。任何可使?；?C(O)-R1轉(zhuǎn)變成基團(tuán)-NH2以生成式Ⅳ化合物或其鹽的堿均可用于本發(fā)明方法中。這種堿的實(shí)例包括堿金屬碳酸氫鹽如碳酸氫鈉或碳酸氫鉀。堿∶式Ⅹ化合物的摩爾比優(yōu)選為約1∶1至約5∶1。
反應(yīng)優(yōu)選是在約-20℃至約80℃溫度下并于1個大氣壓下進(jìn)行。反應(yīng)優(yōu)選在氬氣，氮?dú)饣蚩諝鈿夥障逻M(jìn)行。
所用優(yōu)選溶劑為單獨(dú)使用或與水混合的惰性有機(jī)液體如四氫呋喃，醇(優(yōu)選低級鏈烷醇如甲醇)，甲苯，乙腈，二噁烷或它們的混合物。所用溶劑的量優(yōu)選應(yīng)使式Ⅹ化合物占以溶劑和式Ⅹ化合物的總和重量為基準(zhǔn)的大約1～5％重量。
如上所述，盡管可在開環(huán)反應(yīng)之前進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)，但也可在開環(huán)反應(yīng)的同時或之后再用堿進(jìn)行脫保護(hù)基反應(yīng)，優(yōu)選是與開環(huán)反應(yīng)同時進(jìn)行。
分離
本發(fā)明方法制備的產(chǎn)物可經(jīng)例如萃取，蒸餾，結(jié)晶和柱色譜法分離和純化。
帶側(cè)鏈的紫杉烷產(chǎn)物
本發(fā)明方法制備的式Ⅳ帶側(cè)鏈的化合物及其鹽本身具有藥理學(xué)活性，或者是可被轉(zhuǎn)化成藥理學(xué)活性產(chǎn)物的化合物，具有藥理學(xué)活性的紫杉烷如紫杉醇(taxol)在對癌癥例如乳房癌，卵巢癌，結(jié)腸癌或肺癌患者治療中用作抗癌劑。此類帶有側(cè)鏈的紫杉烷的應(yīng)用已在下列參考文獻(xiàn)中公開，例如歐洲專利公開號400,971，美國專利4,876,399，美國專利4,857,653，美國專利4,814,470，美國專利4,924,012，美國專利4,924,011，美國專利申請?zhí)?7/907,261,1992,7,1由Chen等人申請以及美國專利申請?zhí)?7/981,151,1992,11,24由Ueda等人申請。所有這些文獻(xiàn)在此引入作為參考。
具有下述結(jié)構(gòu)的Taxotere，或者特別是具有上述結(jié)構(gòu)的紫杉醇優(yōu)選最終以式Ⅳ帶有側(cè)鏈的紫杉烷的形式制得
在本發(fā)明的任一方法中均可使用或以適宜的形式制得反應(yīng)物或產(chǎn)物的溶劑化物如水合物。
式Ⅳ化合物可溶于水的前藥形式也認(rèn)為包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。此類式Ⅳ化合物的前藥形式可通過在C-7或C-10和/或在側(cè)鏈2’-位上引入下列通式的膦酰氧基制備-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2
其中m為0或1-6的整數(shù)。
下式新的前藥及其膦酰氧基堿鹽
其中
R1是R5,R7-O-,R7-S-或(R5)(R6)N-；
R3和R4各自為R5,R5-O-C(O)-或(R5)(R6)N-C(O)-；
R5和R6各自為氫，烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，芳
基或雜環(huán)基；和
R7為烷基，鏈烯基，鏈炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，芳基或雜環(huán)基；和T為
其中
R8為氫，羥基，R14-O-,R15-C(O)-O-,R15-O-C(O)-O-，或
-OCH2(OCH2)m OP(O)(OH)2；
R10和R11各自為氫，烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基， R16-O-芳基，或雜環(huán)基；
R20為氫，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2,-OC(O)R21或-OC(O)OR21，其中R21為被1-6個鹵原子任意取代的C1-C6烷基，C3-C6環(huán)烷基，C2-C6鏈烯基或下式殘基
其中D為一個鍵或C1-C6烷基而Ra,Rb和Rc各自為氫，氨基，C1-C6一或二烷氨基，鹵素，C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；
R14為羥基保護(hù)基；
R16為烷基；
R30為氫，羥基，氟，-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2或-OC(O)OR21，其中R21如上定義；
R15為氫，烷基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，環(huán)烯基，芳基或雜環(huán)基；
m為0或1-6的整數(shù)，條件是R8,R20和R30中至少一個為-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH2)而R10不為甲基。
優(yōu)選的式Ⅳ′化合物包括其中R10為環(huán)烷基；R1為芳基，優(yōu)選苯基或烷氧基優(yōu)選叔丁氧基；R3為芳基優(yōu)選苯基或雜環(huán)基優(yōu)選呋喃基或噻吩基；R4為氫；R8為羥基或烷羰氧基，優(yōu)選乙酰氧基；R11為芳基優(yōu)選苯基；R20為-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2或-OC(O)OR21,其中R21為乙基或N-丙基；R30為-OCH2(OCH2)mOP(O)(OH)2和m為0或1的化合物。
膦酰氧基通常按照參考文獻(xiàn)1993年8月17日申請的U.S.S.N08/108,015中所述方法隨式Ⅳ最終產(chǎn)物的形成而引入。
在制備上述新的前藥過程中，按照U.S.S.N.08/108,015中所述一般反應(yīng)條件可形成各種新的中間體。用其中不需要的羥基已被保護(hù)的式Ⅳ化合物作原料，首先將式Ⅳ中2’或7或10位或多個位置上存在的活潑羥基被適宜保護(hù)的式Ⅳ化合物連接到相應(yīng)的甲硫基甲基醚[-OCH2(OCH2)mSCH3]上，此后根據(jù)m的數(shù)據(jù)，按照上述U.S.S.N.中各步所述將此醚連接成被保護(hù)的膦酰氧基甲基醚，然后經(jīng)常規(guī)方法可除去膦?；Ｗo(hù)基和羥基保護(hù)基。
此后用常規(guī)方法包括將游離酸與金屬堿或與胺反應(yīng)可將游離酸轉(zhuǎn)變成所需堿鹽。適宜的金屬堿包括鈉，鉀，鋰，鈣，鋇，鎂，鋅和鋁的氫氧化物，碳酸鹽和碳酸氫鹽；而適宜的胺包括三乙胺，氨，賴氨酸，精氨酸，N-甲基葡糖胺，乙醇胺，普魯卡因，芐星(benzathine)二芐胺，緩血酸胺(TRIS)，氯普魯卡困，膽堿，二乙醇胺，三乙醇胺等。堿鹽可進(jìn)一步經(jīng)色譜法，隨后經(jīng)冷凍干燥或結(jié)晶純化。
按照上述專利申請(08/108,015)的教導(dǎo)，前藥既可以口服也可以非腸道用藥。式Ⅳ和Ⅳ’化合物是新的抗癌劑，其表現(xiàn)在在體外對人結(jié)腸癌細(xì)胞系HCT-116和HCT-116/VM 46及M 109肺癌有細(xì)胞毒性活性。
下列實(shí)施例將進(jìn)一步描述本發(fā)明，這些實(shí)施例僅用于說明目的，而對權(quán)利要求的范圍無任何限制作用。
實(shí)施例1(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯的制備
將(2R,3S)-N-苯甲?；?3-苯基異絲氨酸乙酯(0.104g,0.332mmol)加到烘箱干燥、氬氣清洗的10ml燒瓶中，并懸浮于甲苯(5.0ml)中。加入吡啶鎓對甲苯磺酸(PPTS)(42mg,0.167mmol)，于室溫?cái)嚢杓s1小時后，將混合物加熱回流，加熱得到澄清的均勻溶液。加熱約1小時后，反應(yīng)混合物變得渾濁。加熱16.5小時后，TCL顯示反應(yīng)完全(1∶1乙酸乙酯(EtOAc)∶己烷，PMA(磷鉬酸)/乙醇，紫外(U.V.))。
反應(yīng)混合物用10ml氯仿稀釋，用5ml飽和NaHCO。水溶液洗滌，Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到97.8mg黃色油狀物(產(chǎn)率=100％)。1H NMR顯示得到僅含微量(＜＜5％)雜質(zhì)的反式-噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物，其中沒有相應(yīng)的順式-噁唑啉。
實(shí)施例2(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯的制備
將(2R,3S)-N-苯甲?；?3-苯基異絲氨酸乙酯(0.100g,0.319mmol)加到火焰干燥、氬氣清洗的5ml燒瓶中，溶于吡啶(1.0ml)并冷至0℃。滴加甲磺酰氯(38mg,0.335mmol)。并于0℃將黃色溶液攪拌
小時，然后熱至室溫。于室溫1_小時后薄層色譜法(TCL)顯示反應(yīng)完全(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V.)
將不均勻混合物用5ml乙酸乙酯稀釋并用1/3飽和CuSO4水溶液(10ml)洗滌。水相用2×5ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用5ml飽和NaCl水溶液洗滌，Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到0.12g黃色油狀物。
標(biāo)題產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法(柱20mmd×50mml)用1∶1乙酸乙酯∶己烷純化，得到92.6mg黃色油狀物(產(chǎn)率=98.3％)。1H NMR和質(zhì)譜顯示得到反式-噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物。旋光率(c=0.1,CHCl3),[α]D=+15.6°,[α]578=+16.3°,[α]546=+18.7°,[α]436=+33.1°。
原料化合物(2S,3S)-N-苯甲?；?3-苯基異絲氨酸乙酯如下列分離實(shí)驗(yàn)制備
于0℃攪拌下10分鐘內(nèi)向含有(4S-順式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯(0.79g,2.67mmol)甲醇(MeOH)(57ml)溶液的500ml燒瓶中加入1N HCl(57ml)。在加入HCl時有沉淀生成，經(jīng)加入四氫呋喃(THF)令沉淀溶解，然后向澄清溶液中加入THF(57ml)，并于0℃將混合物攪拌2小時15分鐘。用飽和的NaCHO3(120ml)將溶液的PH調(diào)至9.0，然后令混合物于室溫?cái)嚢?8小時。(反應(yīng)經(jīng)TLC(硅膠)檢測，用4∶6 EtOAc∶己烷作洗脫劑，原料的Rf=0.71，產(chǎn)物的Rf=0.42,UV顯色)。
將反應(yīng)用EtOAc(200ml)稀釋，分出水層并用EtOAc(100ml×1)萃取，然后將合并的EtOAc溶液用鹽水(150ml×1)洗滌，Na2SO4干燥，過濾并濃縮得到固體狀粗品(2S,3S)-N-苯甲?；?3-苯基異絲氨酸乙酯(0.810g)。將其溶于熱MeOH(15ml)中并于室溫靜置30分鐘，然后于4℃靜置1小時。將固體過濾，用冷MeOH(2ml)洗滌并真空干燥，第一批得到0.43g(2S,3S)-N-苯甲?；?3-苯基異絲氨酸乙酯，如上所述第二批得到0.24g，總共得到0.67g(80％)(2S,3S)-N-苯甲酰基-3-苯基異絲氨酸乙酯。(白色固體mp=160-161℃,[α]D=-40.3°(C,l,CHCl3)。元素分析C18H19NO4 0.03H2O
計(jì)算值 實(shí)測值C 68.86 68.99H 6.12 6.07N 4.46 4.60H2O0.20 0.20
實(shí)施例3(4S-反式)-和(4S-順式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯
將(2S,3S)-N-苯甲?；?3-苯基異絲氨酸乙酯(66.8g,0.213mmol)加到烘箱干燥、氬氣清洗的10ml燒瓶中，并懸浮于甲苯(4.0ml)中。加入吡啶鎓對甲苯磺酸(49mg,0.195mmol)，燒瓶裝上迪安-斯達(dá)克榻分水器(裝有4埃分子篩)，將反應(yīng)加熱回流(加熱下大部分固體溶解)。5小時后，TCL顯示反應(yīng)接近完全(1∶1 EtOAc∶己烷，PMA/EtOH,U.V.)。
令回流繼續(xù)過夜，加熱22小時后，將反應(yīng)冷至室溫。溶液中生成一些油滴狀油狀物，將此油狀物進(jìn)一步冷至室溫。加入～5ml EtOAc，固體溶解不明顯，加入～3ml CHCl3，固體全部溶解。TLC顯示沒有原料存在。
溶液用5ml飽和NaHCO3水溶液洗滌，Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到64.3mg部分結(jié)晶的黃色油狀物。1H和13C NMR顯示順式-噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物∶反式-噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物∶雜質(zhì)為-5∶痕量∶1。反式-噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物是由存在于原料中的痕量(2R,3S)-N-苯甲?；?3-苯基異絲氨酸乙酯產(chǎn)生的。產(chǎn)物于硅膠上用1∶1EtOAc/己烷2∶1EtOAc/己烷進(jìn)行色譜分離(Rf=0.57(1∶1EtOAc/己烷)，得到49.3mg油狀黃色固體，產(chǎn)率=78.4％；1H NMR顯示順式和反式噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物的比率約為10∶1(順式∶反式)。
實(shí)施例4(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸甲酯的制備(a)苯甲亞氨酸乙酯鹽酸化物
將芐腈(30.3g,294mmol)和乙醇(14.2g,308mmol)加到火焰干燥、氬氣清洗的100ml燒瓶中并冷至0℃。向攪拌的溶液中吹入HCl 20分鐘，此時配衡瓶顯示已經(jīng)加入了17.5g HCl。停止加入HCl并于0℃攪拌澄清溶液，約1小時后開始有沉淀生成。
于0℃攪拌約2_小時后，將均勻混合物轉(zhuǎn)入4℃冷室中。于4℃3_天后，將固體物搗碎并用150ml冷至4℃乙醚研制。令混合物于4℃靜置6小時，將混合物真空過濾并迅速用2×100ml冷乙醚洗滌，高真空(0.5mmHg,17小時)干燥，得到51.6g(94.5％)白色自由流動的粉狀標(biāo)題產(chǎn)物。
(b)(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸甲酯
將(2R,3S)-3-苯基異絲氨酸甲酯鹽酸鹽(5.76g,24.9mmol)溶于1,2-二氯乙烷(75ml)，加入三乙胺(2.77g,27.3mmol)并在將所得混合物攪拌15分鐘后，一次加入上述步驟(a)所制備的苯甲亞氨酸酯(benzimidate)(4.62g,24.9mmol)。將混合物攪拌10分鐘，然后加熱回流?；亓?_小時后，TCL顯示反應(yīng)完全(1∶1乙酸乙酯/己烷，PMA/乙醇，U.V.)。
反應(yīng)混合物用150ml二氯甲烷和150ml 10％K2CO3稀釋并振搖，分層，水相用3×50ml CH2 Cl2萃取，合并的有機(jī)相用50ml飽和NaCl水溶液洗滌，Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到黃色油狀物，將其于硅膠柱(干柱～750ml；裝柱100mmd×110mml)用1∶2乙酸乙酯/己烷純化，得到6.05g略帶顏色的油狀標(biāo)題產(chǎn)物，將其于室溫靜置固化，產(chǎn)率=86.4％。
實(shí)施例5(4S-順式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯的制備
于0℃2分鐘內(nèi)向含有(2R,3S)-N-苯甲?；?3-苯基異絲氨酸乙酯(2.00g,6.38mmol)的吡啶(20ml)溶液的100ml燒瓶中滴加甲磺酰氯(0.52ml,6.70mmol)。將溶液于0-4℃攪拌90分鐘，然后于65-70℃攪拌18小時。(反應(yīng)經(jīng)TCL檢測，用1∶2EtOAc∶甲苯作展開劑，原料的Rf=0.42，甲磺酸酯的Rf=0.48，順式-噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物的Rf=0.78,UV顯色)。
將反應(yīng)冷至室溫并用EtOAc(80ml)和1/3飽和CuSO4溶液(80ml)(1/3飽和CuSO4溶液通過將飽和CuSO4溶液稀釋至其原始濃度的1/3制備)稀釋。分出水層并用EtOAc(40ml×1)萃取，合并的EtOAc溶液用鹽水(80ml×1)洗滌，Na2SO4干燥，過濾，濃縮并與庚烷(20ml×2)共沸，得到固體狀粗品順式噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物(1.88g)。將其溶于熱EtOAc(8ml)并加入己烷(4ml)，將結(jié)晶混合物于室溫靜置20分鐘，然后于4℃靜置30分鐘，將固體過濾，用冷10％EtOAc的己烷液洗滌并空氣干燥，得到1.34g(71.3％)順式-噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物，熔點(diǎn)135℃。[α]D=-9.25(C=1.0,CHCl3)。
實(shí)施例6(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸的制備
將(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯(92mg,0.311mmol)導(dǎo)入1英錢管形瓶中并溶于四氫呋喃(THF)(0.8ml)，滴加LiOH(1N水溶液，0.343mmol)并將所得雙相混合物于室溫劇烈攪拌，5分鐘內(nèi)得到均勻溶液。45分鐘后，TLC顯示無原料存在(1∶1乙酸乙酯(EtOAc)/己烷，PMA/乙醇(EtOH),U.V)。
將溶液冷至0℃并進(jìn)一步用2.0ml THF稀釋，反應(yīng)用0.34ml1N HCl(1.1當(dāng)置)驟冷。熱至室溫后，溶液用5ml EtOAC和5mlH2O稀釋并振搖。分層，水相用3×5ml EtOAc萃取。(萃取后，水相PH-6)。合并的有機(jī)相用Na2SO4干燥，過濾并濃縮，得到72.1mg白色固體，產(chǎn)率=87％。1H和13C NMR以及質(zhì)譜顯示為標(biāo)題產(chǎn)物，其熔點(diǎn)為201-203℃,[α]D=+25.6°,[α]578=+26.9°,[α]546=+30.7,[α]436=+53.8,(C=1.0 CHCl3∶CH3OH(1∶1)。
實(shí)施例7(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸的制備
將(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸甲酯(0.509g,1.81mmol)加到10ml燒瓶中并溶于四氫呋喃(THF)(4.7ml)。滴加氫氧化鋰(1N水溶液，2.0ml,1.99mmol)，將雙相混合物劇烈攪拌，于2分鐘內(nèi)加完氫氧化鋰后，得到一澄清溶液。15分鐘后，TLC顯示反應(yīng)完全(1∶1乙酸乙酯∶己烷，DMA/乙醇)。
將反應(yīng)混合物進(jìn)一步用10ml THF稀釋并將所得渾濁溶液冷至0℃。通過滴加2.0ml 1N HCl水溶液使反應(yīng)驟冷，溶液再用20ml乙酸乙酯和15ml水稀釋并振搖。分層，水相用3×10ml乙酸乙酯萃取(萃取后，水層的PH約為6)。合并的有機(jī)相用Na2SO4干燥，過濾并濃縮。將所得濃縮物溶于苯和甲醇混合液中，但在甲醇，CHCl3，乙酸乙酯或這些溶劑的混合液中不易溶解。將濃縮物于高真空下干燥過夜，得到白色固體狀標(biāo)題產(chǎn)物0.448g(產(chǎn)率=93％).M.P.=201-203°.[α]D=+25.6,[α]578=+26.9°,[α]546=+30.7,[α]436=+53.8°,(c=1.0,CHCl3∶CH3OH(1∶1))
實(shí)施例8(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸的制備
將乙醇(0.1ml)與四氫呋喃(1.0ml)混合并將混合物冷至-78℃，滴加正丁基鋰(n-BuLi)(2.12M,0.050ml)，并將混合物溫?zé)嶂?℃。加入具有下列結(jié)構(gòu)式的固體(4S-順式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯
(20mg,0.0678mmol)并將反應(yīng)攪拌1小時(有少量水存在)。經(jīng)TCL檢測到順式噁唑啉乙酯原料和相應(yīng)的反式噁唑啉乙酯(5-位轉(zhuǎn)向)混合物(在此步驟可觀察到很少量的水解反應(yīng))。將反應(yīng)混合物再攪拌1小時，然后令其于冰浴中(0℃至室溫)過夜，18小時后，TCL顯示絕大部分為反式酸標(biāo)題化合物并有痕量順式酯原料(溶劑體系己烷∶EtOAc2∶1(痕量順式酯)和EtOAc∶丙酮∶H2O∶MeOH7∶1∶1∶1(標(biāo)題產(chǎn)物))。
反應(yīng)用磷酸鹽(PH=4.3)緩沖液驟冷并用乙酸乙酯(5×10ml)萃取。將有機(jī)相干燥并除去溶劑，得到～17mg(93％)標(biāo)題產(chǎn)物。(NMR顯示為反式酸標(biāo)題產(chǎn)物)。M.P.=135℃[α]D=-92.5°,(C=1.0,CHCl3)。
實(shí)施例9(4S-反式)-和(4S-順式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸的制備
和
將(4S-順式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸乙酯(202mg,0.6890mmol)溶于四氫呋喃(1.5ml)并滴加氫氧化鋰(1N水溶液，0.718ml)，得到一不均勻溶液，將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢柽^夜，此時溶液變得澄清。(TLC(乙酸乙酯∶己烷，1∶1)顯示有少量原料存在。TLC(乙酸乙酯∶甲醇∶水∶丙酮7∶1∶1∶1)顯示得到順式和反式噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物)。
加入1N HCl(0.718ml)，隨后加入飽和NaCl(約10ml)和乙酸乙酯(約10ml)，水層用乙酸乙酯洗滌5次(約10ml)并將H2O層由PH～5.5進(jìn)一步酸化至3.4PH，用約10ml EtOAc萃取。合并的有機(jī)層用MgSO4干燥，并過濾。減壓蒸發(fā)乙酸乙酯，得到183mg(100％)順式和反式標(biāo)題產(chǎn)物的混合物(經(jīng)1H NMR測得3∶1順式∶反式)。
實(shí)施例107-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑基]羰基]漿果赤霉素Ⅲ(a)7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉Ⅲ(ⅰ)[2aR-(2aα,4β,4αβ,6β,9α,11β,12α,12aα,
12bα)]苯甲酸12b-乙酰氧基-2a,3,4,4a,5,
6,9,10,11,12,12a,12b-十二氫-6,
9,11-三羥基-4a,8,13,13-四甲基-5-氧
代-4-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-7,11-亞甲基-1
H-環(huán)癸[3,4]苯并[1,2-b]氧雜環(huán)丁烷-12基酯
將10-去乙?；鶟{果赤霉素Ⅲ(27.4g,50.3mmol，含有H2O:1.57％,CH3OH:1.6％，乙酸乙酯0.09％和己烷0.03％)和4-二甲氨基吡啶(2.62g,21.4mmol,H2O重量百分比(Karl Fisher法(”K.F.”)=0.09)加到火焰干燥、氬氣清洗的113口燒瓶(裝有機(jī)械攪拌器和數(shù)字溫度計(jì))并溶于無水二甲基甲酰胺(122ml,H2O重量百分比(K.F.)=＜0.01)。加入二氯甲烷(256ml,H2O重量百分比(K.F.)=＜0.01)(在加入二氯甲烷期間反應(yīng)溶液的溫度由23℃升至25℃)并將所得均勻溶液冷至-50℃。
于3分鐘內(nèi)滴加三乙胺(16ml,120mmol,H2O重量百分比(K.F.)=0.08)并于-50℃將所得溶液攪拌5分鐘后，滴加純凈的三乙基甲硅烷基氯(18.6ml,111mmol)，于10分鐘內(nèi)加入三乙基甲硅烷基氯，此時反應(yīng)溫度不超過-50℃。在加入三乙基甲硅烷基氯期間反應(yīng)變得十分渾濁。
將所得混合物于約-50℃攪拌1小時，然后令其于-48℃冷凍箱中靜置(不攪拌)22小時。(分離實(shí)驗(yàn)表明于-48℃將反應(yīng)攪拌8小時得到～60％轉(zhuǎn)化)，將混合物于冷凍箱中取出并熱至約-10℃?；旌衔颰LC分析(溶劑乙酸乙酯，染色劑磷鉬酸/乙醇)發(fā)現(xiàn)沒有原料存在并且顯示一個產(chǎn)物色點(diǎn)(Rf=0.60)。將冷卻的混合物與EtOAc(11)合并并用H2O(890ml)洗滌。
分出形成的水層并用EtOAc(250ml)萃取。合并的有機(jī)層用5.7％NaH2PO4水溶液(2×250ml，測得5.7％NaH2PO4水溶液PH=4.30±0.05，測得合并的NaH2PO4洗液PH=5.75±0.05)，半飽和NaCl水溶液(250ml)、飽和NaCl水溶液(250ml)洗滌，Na2SO4干燥，過濾并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮(此實(shí)施例于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上全部濃縮過程于35℃水浴溫度下進(jìn)行)。
將所得半固體狀物暴露于高真空下(～1mmHg 20分鐘)進(jìn)一步干燥，得到41.5g白色固體，然后將粗產(chǎn)物溶于CH2Cl2(400ml)(于35℃水浴中加熱以使固體溶解)，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上使所得溶液的體積減至～150ml，立即開始析晶并令混合物于室溫靜置1小時。加入己烷(100ml)并使混合物輕輕回蕩，令混合物于4℃冷室中靜置16.5小時。將固體過濾，用1∶9 CH2Cl2/己烷(3×250ml)于吸濾器上洗滌，并于高真空下(～0.2mmHg 42小時)干燥，得到26.1g(79％)白色粉末狀標(biāo)題產(chǎn)物。將母液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮，殘余物于CH2Cl2中結(jié)晶，得到4.5g(14％)白色結(jié)晶狀標(biāo)題產(chǎn)物。用相同方法將第一批產(chǎn)物進(jìn)行重結(jié)晶不需加熱將固體溶于CH2Cl2(100ml)，并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上將所得溶液的體積減至～7ml，于5分鐘內(nèi)開始析晶，令混合物于室溫靜置1小時，4℃冷室中靜置42小時。將結(jié)晶過濾并于吸濾器上用1∶9 CH2Cl2/己烷(3×50ml)洗滌，于高真空下(～0.2mmHg,18小時)干燥。此批產(chǎn)物的1H NMR與第一批產(chǎn)物的1H NMR相同。兩批合并的產(chǎn)率為93％(未校正)。
元素分析(％)
C35H50O10Si
計(jì)算值 實(shí)測值C 63.80 63.43H7.65 7.66KF(H2O)0.00 0.00m.p.:239-242℃(分解)[α]22D:-53.6°(c 1.0,CHCl3)TLC:Rf=0.60(硅膠，EtOAc)磷鉬酸/乙醇顯色。(ⅱ)[2aR-(2aα,4β,4αβ,6β,9α,11β,12α,12aα,
12bα)]-6,12b-雙(乙酰氧基)-12-(苯甲酰氧
基)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,
12a,12b-十二氫-9,11-二羥基-4a,8,
13,13-四甲基-4-[(三乙基甲硅烷基)氧基]-7,
11-亞甲基-1H-環(huán)癸[3,4]苯并[1,2-b]氧雜環(huán)丁
烷-5-酮
(7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ)
將上述步驟(ⅰ)所得標(biāo)題產(chǎn)物(21.4g,32.4mmol)加到火焰干燥、氬氣清洗的113口燒瓶(裝有機(jī)械攪拌器和數(shù)字溫度計(jì))并溶于THF(350ml，由鈉/二苯酮中新蒸的)。將所得溶液冷至-70℃，于23分鐘內(nèi)滴加正丁基鋰(n-BuLi)溶液(14.6ml,2.56M己烷溶液，37.3mmol，于0℃THF中用二苯基乙酸滴定，作三次平行分析)，在滴加過程中反應(yīng)溫度不超過-68℃。在加入n-BuLi時有固體生成并且于-70℃溶解不明顯。將所得混合物于-70℃攪拌20分鐘，然后熱至-48℃，當(dāng)熱至-48℃時得到-澄清均勻溶液。
于-48℃攪拌_小時后，于7分鐘內(nèi)滴加乙酸酐(4.6ml,49mmol，使用前于氬氣氛下(137-138℃ latm)新蒸的)，在滴加過程中反應(yīng)溫度不超過-45℃。將所得溶液于-48℃攪拌20分鐘，然后于0℃攪拌1小時，溶液用乙酸乙酯(350ml)稀釋，飽和NH4Cl水溶液(250ml)洗滌，分層，水層用乙酸乙酯(200ml)萃取。合并的有機(jī)層用飽和NaCl水溶液洗滌，Na2SO4干燥，過濾并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮(此實(shí)施例中于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上的所有濃縮過程在35℃水浴溫度下進(jìn)行)。將半固體狀物暴露于高真空下(～1.5mmHg,1/2小時)，得到24.7g白色固體。
將粗產(chǎn)物溶于CH2Cl2(300ml)并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上將所得溶液的體積減至～70ml，一分鐘內(nèi)開始結(jié)晶。令混合物于室溫靜置45分鐘，然后于4℃冷室中靜置18小時。將結(jié)晶過濾，于吸濾器上用1∶9 CH2Cl2/己烷(3×100ml)洗滌并于真空下(～0.2mmHg,19小時)干燥，得到20.9g(92.0％)精細(xì)白色針狀結(jié)晶的標(biāo)題產(chǎn)物。于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上將母液濃縮，殘余物于CH2Cl2/己烷中結(jié)晶，得到0.82g(3.6％)細(xì)小白色針狀結(jié)晶為標(biāo)題產(chǎn)物。
母液的結(jié)晶過程如下所述進(jìn)行將殘余物溶于CH2Cl2(10ml)中并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上將所得溶液的體積減至～5ml。于室溫靜至1/2小時后，無結(jié)晶生成。以每份1ml加入己烷(5ml)并將溶液輕輕搖蕩，此時有極少結(jié)晶出現(xiàn)。令混合物于室溫靜置1/2小時(有較多的結(jié)晶生成)，然后于4℃冷室中靜置18小時，將結(jié)晶過濾，于吸濾器上用1∶9 CH2Cl2/己烷洗滌，并于高真空下(～0.15mmHg,21小時)干燥。兩批產(chǎn)物合并的產(chǎn)率為95.6％。m.p.=218-219℃(分解)；[α]22D=-78.4°(C1.O,CHCl3)；TLC∶Rf=0.37(硅膠，1∶9丙酮∶CH2Cl2，磷鉬酸/乙醇顯色)。(b)7-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑基]羰基]漿果赤霉素Ⅲ
將上述步驟(a)所制7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(0.209g,0.298mmol)，如實(shí)施例6制備的噁唑啉標(biāo)題產(chǎn)物(80.2mg,0.300mmol)，二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)(84mg,0.407mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)(25mg,0.205mmol)加到1英錢管形瓶(烘干)，用氬氣清洗并懸浮于甲苯(1.0ml)中。于室溫?cái)嚢?小時后，部分固體溶解，混合物呈黃色。將不均勻混合物熱至85℃,2_小時后TLC顯示有原料存在(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V.)。于85℃繼續(xù)加熱，5小時后TLC顯示基本相同。令反應(yīng)于室溫?cái)嚢柽^夜，于室溫14小時后，TLC仍然相同。將不均勻混合物用1.0ml乙酸乙酯稀釋(觀察到部分沉淀)并將混合物經(jīng)一層硅藻土過濾，硅藻土用3×1ml乙酸乙酯洗滌，將濾液濃縮，得到0.349g黃色固體。1H NMR顯示存在的標(biāo)題產(chǎn)物和7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ的比率約為8∶1，另外也可觀察到一些1,3-二環(huán)己基脲(DCU)和痕量原料噁唑啉或雜質(zhì)。
將混合物于硅膠上(柱20mm直徑×90mm 長)用1∶2乙酸乙酯/己烷-1∶1乙酸乙酯/己烷進(jìn)行部分分離。色譜法分離過程中，TLC分析發(fā)現(xiàn)在比偶合標(biāo)題產(chǎn)物Rf稍低處有一小色點(diǎn)，將此雜質(zhì)和偶合產(chǎn)物的混合餾分合并。第一個色點(diǎn)偶合標(biāo)題產(chǎn)物(0.267g灰白色固體，產(chǎn)率94％)(1H NMR顯示所需偶合產(chǎn)物和上述雜質(zhì)的比率約為18∶1)；第一色點(diǎn)和上述混合餾分11.5mg油狀物(1HNMR顯示所需偶合產(chǎn)物和不同雜質(zhì)的比率約為2∶1)。M.P.=139-142℃[a]D=-49.5°,[α]578=-52.6°,[α]546=-63.5°,[α]436=-157.0°,(c=1.0,CHCl3)。
實(shí)施例117-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑基]羰基]漿果赤霉素Ⅲ的制備
將4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸(96.0mg,0.359mmol),7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(0.252g,0.359mmol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)(30mg,0.246mmol)加到火焰干燥的1英錢管形瓶中，用氬氣清洗并懸浮于甲苯(1.2ml)中，立即加入二異丙基碳二亞胺(DIC)(63mg,0.503mmol)，于室溫?cái)嚢璐藴\黃色不均勻混合物。隨著時間的延長，得到十分渾濁的黃色溶液。此時，將管形瓶密封并浸入80℃油浴中，于～80℃3小時后，得到暗橙色溶液。將反應(yīng)混合物直接濃縮。1H NMR顯示所需偶合產(chǎn)物和7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ的比率約為6∶1。產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜法用1∶3 EtOAc/己烷進(jìn)行部分分離，得到0.300g灰白色固體。TLC顯示有分離的產(chǎn)物和二異丙基脲副產(chǎn)物。
1H NMR顯示僅含有～25∶1的所需偶合產(chǎn)物和雜質(zhì)及二異丙基脲副產(chǎn)物。所需偶合產(chǎn)物與二異丙基脲副產(chǎn)物的比率約為12∶1。
由上述結(jié)果得出所需偶合產(chǎn)物的產(chǎn)率約為85％。M.P.=139-142℃,[α]D=-49.5°,[α]578=-52.6°,[α]546=-63.5,[α]436=-157.0,(c=1.0,CHCl3).
實(shí)施例127-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4,5-二氫-2,5-二苯基-5-噁唑基]羰基]漿果赤霉素Ⅲ
在下列表1所列條件下將7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(此實(shí)施例中縮寫為“A”)和(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑羧酸(此實(shí)施例中縮寫為“B”)反應(yīng)制備標(biāo)題化合物。烷點(diǎn)=139-142℃。[α]D=-49.5°,[α]578=-52.6°,[α]546=-63.5°,[α]436=-157.0°,(C=1.0,CHCl3)。
表1實(shí)施 B 試劑 濃度時間溫度例號 (eq)* (eq)* 溶劑 B(M)(hrs) (℃)12a 1.2 DCC(1.4)PhCH30.29 1 23
DMAP(0.7) 2.5 8512b 1.0 DCC(1.4)PhCH30.30 5.5 85
OMAP(0.7)12c 1.0 R2POCl(1.04) 1.2-DCE0.28 6 23
DMAP(1.01) 15 55
NEt3(1.04)12d 1.0 R2POCl(1.01) 1.2-DCE0.23 5 23
NEt3(2.0) 16 65
44 7512e 1.0 CDt(1.2) THF0.39 21 70
DMAP(1.0)12t 1.0 ArCOCl(1.5)CH2Cl2 0.23 23 23
DMAP(2.0)
NEt3(1.5)12g 1.0 ArCOCl(1.5)PhCH3 0.29 55 23
DMAP(2.0)
NEt3(1.5)12h 1.0 ArCOCl(1.05) CH2Cl2 0.30 3.5 -78
DMAP(2.0) 19-60
NEt3(1.0) 1 0
20 23
表1(續(xù))12i1.0t-BuCOCl(1.1) 1,2-DCE0.284.523
DMAP(2.0)
NEt3(1.2) 15 6012j2.1t-BuCOCl(2.1) 1,2-DCE0.2321 23
DMAP(4.2)
NEt3(2.3)12k1.0t-BuCOCl(1.0) CH2Cl2 0.24 19 23
DMAP(0.07)
NEt3(2.0)12l1.0t-BuCOCl(1.0) Pyridine 0.234.523
DMAP(0.05) 16 55
23 23eq.=當(dāng)量，以7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ為基準(zhǔn)(根據(jù)上述實(shí)施例
12a=0.061g；12b=0.533g；12c=0.200g；
12d=0.161g；12e=0.057g；12f=0.200g；12g=0.203g；
12h=0.208g；12i=0.196g；12j=0.165g；12k=0.165g；
121=0.164g所用7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ的量)表1關(guān)鍵詞R2POCl=
=雙(2-氧-3-噁唑烷基)膦酰氯DCC=二環(huán)己基碳二亞胺DMAP=二甲氨基吡啶DIC=二異丙基碳二亞胺ArCOCl=2,4,6-三氯苯甲酰氯=
CDl=羰基二咪唑t-BuCOCl=新戊酰氯1,2-DCE=1,2-二氯乙烷NEt3=三乙胺THF=四氫呋喃PhCH3=甲苯
實(shí)施例12a
在加入溶劑之前將所有試劑混合在一起。經(jīng)色譜法分離得到108％(90mg)標(biāo)題產(chǎn)物(含有約10％雜質(zhì))。NMR未發(fā)現(xiàn)原料化合物A。(此實(shí)施例中B的濃度為0.29M。在分離實(shí)驗(yàn)中當(dāng)使用DCC(2.0當(dāng)量)，DMAP(3.0當(dāng)量)，DMAP·HCl(2.0當(dāng)量)的CHCl3溶液和1.0當(dāng)量B時，27小時后NMR顯示B的摩爾濃度為0.07M時不能令反應(yīng)迅速進(jìn)行且不足以觀察到標(biāo)題產(chǎn)物的生成。
實(shí)施例12b
在加入溶劑之前將所有試劑混合在一起。所得標(biāo)題產(chǎn)物與原料化合物A的比率約為9∶1(經(jīng)NMR顯示)。經(jīng)色譜法分離得到87％(0.63g)標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)施例12c
在加入溶劑之前將所有試劑混合在一起。所得標(biāo)題產(chǎn)物與原料化合物A的比率約為1∶1(經(jīng)NMR顯示)。1小時后不再進(jìn)一步反應(yīng)。
實(shí)施例12d
在加入原料化合物A之前令活化的噁唑啉B形成1小時(通過向原料化合物B中加入R2POCl)。所得標(biāo)題產(chǎn)物與原料化合物A的比率約為1∶6(經(jīng)NMR顯示)。5小時后觀察到有極微弱的反應(yīng)進(jìn)行。
實(shí)施例12e
在加入原料化合物A之前使CDI與原料化合物B反應(yīng)1小時，當(dāng)t=4小時時加入DMAP。得到標(biāo)題化合物與原料化合物A和雜質(zhì)的比率約為1∶1∶1(經(jīng)NMR顯示)。在加入DMAP之前未發(fā)現(xiàn)有反應(yīng)發(fā)生并且過度加熱引起一些分解反應(yīng)。
實(shí)施例12f
最后加入ArCOCl。得到標(biāo)題產(chǎn)物與原料化合物A的比率約為1∶1(經(jīng)NMR顯示)。1.5小時后未觀察到有進(jìn)一步反應(yīng)進(jìn)行。
實(shí)施例12g
最后加入ArCOCl。得到標(biāo)題產(chǎn)物與原料化合物A的比率約為1∶1(經(jīng)NMR顯示)。1小時后未觀察到有進(jìn)一步反應(yīng)進(jìn)行。
實(shí)施例12h
最后加入ArCOCl。得到標(biāo)題產(chǎn)物與原料化合物A的比率約為1∶1(經(jīng)NMR顯示)。3.5小時后未觀察到有進(jìn)一步反應(yīng)進(jìn)行。
實(shí)施例12i
在加入原料化合物A之前預(yù)先制備混合酸酐1小時(通過向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。得到標(biāo)題產(chǎn)物與原料化合物A的比率約為1∶2(經(jīng)NMR顯示)。2小時后未觀察到有進(jìn)一步反應(yīng)進(jìn)行。
實(shí)施例12j
在加入原料化合物A之前預(yù)先制備混合酸酐1小時(通過向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。得到標(biāo)題產(chǎn)物與原料化合物A的比率約為3∶1(經(jīng)NMR顯示)。1小時后未觀察到有進(jìn)一步反應(yīng)進(jìn)行。
實(shí)施例12k
在加入原料化合物A之前預(yù)先制備混合酸酐1小時(通過向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。加入原料化合物A后1小時加入DMAP。得到標(biāo)題產(chǎn)物與原料化合物A的比率約為1∶4(經(jīng)NMR顯示)。在未加入DMAP情況下未觀察到有反應(yīng)發(fā)生；在加入DMAP后2小時未觀察到有進(jìn)一步反應(yīng)進(jìn)行。
實(shí)施例121
在加入原料化合物A之前預(yù)先制備混合酸酐1小時(通過向原料化合物B中加入t-BuCOCl)。于16小時后55℃加入DMAP。得到標(biāo)題產(chǎn)物與原料化合物A的比率約為1∶6(經(jīng)NMR顯示)。在加入DMAP之前未觀察到有反應(yīng)發(fā)生或者觀察到有很微弱的反應(yīng)。
實(shí)施例137-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑基]羰基]漿果赤霉素Ⅲ的制備
將(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑基羧酸(65.0mg,0.243mmol),7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(0.142g,0.203mmol),DCC(75mg,256mmol)和吡咯烷并吡啶(38mg,256mmol)加到火焰干燥的1英錢管形瓶中，用氬氣清洗并部分溶于甲苯(1.0ml)。將所得黃色不均勻混合物于室溫?cái)嚢琛?小時后TLC顯示有標(biāo)題產(chǎn)物生成(1∶1 EtOAc∶己烷，PMA/EtOH,U.V.)(于室溫下攪拌之后，7小時和23小時TLC顯示沒有進(jìn)一步的變化。)
將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(1ml)稀釋，經(jīng)一層硅藻土過濾并濃縮，得到0.275g油狀黃色固體。1H NMR顯示所需偶合標(biāo)題產(chǎn)物和7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ的比率約為8∶1，偶合劑的副產(chǎn)物N-?；宕嬖诘牧考s與7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ的量相同。
將固體于硅膠上用1∶2 EtOAc/己烷進(jìn)行色譜分離，得到0.176g灰白色固體，產(chǎn)率約為91％。1H NMR顯示所需偶合產(chǎn)物和N-?；宓谋嚷始s為11∶1。
實(shí)施例147-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑基]羰基]漿果赤霉素Ⅲ的制備
將(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑基羧酸(66.7mg,0.250mmol),7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(0.146g,0.208mmol),DCC(79mg,0.383mmol)和4-嗎啉代吡啶(41mg,0.250mmol)加到火焰干燥的1英錢管形瓶中，用氬氣清洗并部分溶于甲苯(1ml)。將所得黃色不均勻混合物于室溫?cái)嚢琛?小時后TLC顯示有標(biāo)題產(chǎn)物生成(1∶1EtOAc∶己烷，PMA/EtOH,U.V.)(于室溫下攪拌之后，7小時和23小時TLC顯示沒有進(jìn)一步的變化。)
將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯(1ml)稀釋，經(jīng)一層硅藻土過濾并濃縮，得到0.280g黃色固體。1H NMR顯示為所需偶合標(biāo)題產(chǎn)物且不含有7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(盡管經(jīng)TLC可觀測到痕量)。偶合劑的副產(chǎn)物N-酰基脲與標(biāo)題產(chǎn)物的比率約為1∶9。
將固體于硅膠上用1∶2EtOAc/己烷進(jìn)行色譜分離，得到0.196g白色固體，1H NMR顯示偶合產(chǎn)物和N-?；宓谋嚷始s為15∶1。產(chǎn)率大于90％。M.P.=139-142℃.[α]D=-49.5°,[α]578=-52.6°,[α]546=-63.5°,[α]=436=-157.0°(c=1.0,CHCl3)。
實(shí)施例15制備7-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-反式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑基]羰基]漿果赤霉素Ⅲ，和7-三乙基甲硅烷基13-[[(4S-順式)-4,5-二氫-2,4-二苯基-5-噁唑基]羰基]漿果赤霉素Ⅲ
制備實(shí)施例9順反之比為3∶1的順式和反式噁唑啉標(biāo)題化合物(100mg)、7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ(219mg,0.3121mmol)、DCC(97mg)和DMAP(23mg)于甲苯(0.9ml)中的混合物。在80℃加熱1小時后，有相當(dāng)數(shù)量的7-三乙基甲硅烷基漿果赤霉素Ⅲ沒有反應(yīng)。再加入DMAP(97mg)和DCC(23mg)，混合物在80℃加熱過夜。由TLC(己烷∶EtOAc2∶1)可測出少量起始物。
反應(yīng)混合物用二氯甲烷(20ml)稀釋，向其中加入飽和碳酸氫鈉溶液(10ml，水溶液)，水層用二氯甲烷萃取(2×10ml)，合并的有機(jī)相用無水MgSO4干燥和真空濃縮后，產(chǎn)品用HPLC(己烷∶乙酸乙酯4∶1)純化，得到含二環(huán)己基脲(DCU)的標(biāo)題化合物。產(chǎn)物重260mg，在將產(chǎn)品懸浮于乙酸乙酯后，過濾除去DCU。再一次HPLC純化后給出117mg純的反式標(biāo)題化合物(40％)和45mg混合物(～2∶1的反式標(biāo)題產(chǎn)物順式標(biāo)題產(chǎn)物(15％))。混合物用制備TLC純化(己烷∶乙酸乙酯1∶1)得到11mg順式標(biāo)題產(chǎn)物。
實(shí)施例16制備紫杉醇(Taxol)
將上述實(shí)施例10得到的偶聯(lián)標(biāo)題產(chǎn)物(0.102g,0.107mmol)稱重后加入10ml燒瓶中，并溶于四氫呋喃(1.2ml)。然后加入甲醇(1.2ml)，使均相溶液冷至0℃。滴加HCl(水溶液，1N,0.59ml,0.59mmol)，在0℃攪拌澄清的均相溶液。0℃下攪拌3小時后，TLC(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V)表明仍有起始物。將澄清的均相溶液轉(zhuǎn)移至4℃冷卻室內(nèi)，4℃下18小時后，TLC分析說明反應(yīng)基本完全(1∶1乙酸乙酯∶己烷，PMA/乙醇，U.V)。得到下述化合物
將澄清溶液加熱至室溫，加入3.5ml飽和NaHCO3水溶液(可看到產(chǎn)生氣泡)生成非均相混合物。加入5ml四氫呋喃和2ml水不能顯著增加其溶解性。將非均相混合物于室溫劇烈攪拌，1小時后，依然有非均相混合物存在。用7ml水和4ml四氫呋喃進(jìn)一步稀釋非均相混合物，得到的澄清均相混合物于室溫下攪拌。
加入NaHCO3 2.5小時以后TLC表明僅有紫杉醇(2∶1乙酸乙酯/己烷，PMA/乙醇，U.V.)。將反應(yīng)混合物用25ml乙酸乙酯和25ml水稀釋并振蕩，分層，水層用3×25ml乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相用Na2SO4干燥、過濾和濃縮得到104mg淺米色透明狀固體。1H NMR證實(shí)是紫杉醇。得到的固體在硅膠上色譜純化(柱直徑20mm×70mm長)，用2∶1乙酸乙酯/己烷至4∶1乙酸乙酯/己烷洗脫給出79.0mg標(biāo)題化合物白色固體，產(chǎn)率86.4％。
實(shí)施例17制備7,13-雙TES漿果赤霉素
把漿果霉素Ⅲ(3.102g,5.290mmol)溶于無水DMF(21ml),0℃下向其中加入咪唑(1.80g,26.5mmol)，接著再加入TESCL(4.45ml,26.5mmol)。室溫下攪拌過夜，用EtOAC(350ml)稀釋，用水(4×20ml)和鹽水洗滌。干燥和真空濃縮有機(jī)相，殘余物經(jīng)色譜純化(含20％乙酸乙酸的己烷)給出4.00g(89.1％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例18制備1-DMS-7,13-TES漿果赤霉素
把7,13-TES漿果赤霉素(2.877g,3.534mmol)溶于無水四氫呋喃(17.7ml)。0℃下在此溶液中加入咪唑(720.9mg,10.60mmol)，接著加入二甲基氯硅烷(91.18ml,10.60mmol)。在此溫度下攪拌反應(yīng)45分鐘，然后用EtOAc(300ml)稀釋，用水(4×20ml)洗滌。將有機(jī)相干燥和真空濃縮，殘余物色譜分離(含10％乙酸乙酯的己烷)，給出2.632g(85.4％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例19制備4-羥基-7,13-雙TES-1-DMS漿果赤霉素
把實(shí)施例18的甲硅烷基化的漿果赤霉素衍生物(815mg,0.935mmol)溶于THF(15.6ml)。0℃下在此溶液中加入紅鋁(Red-Al)(0.910ml,60％重量比，4.675mmol)。40分鐘后，反應(yīng)用飽和酒石酸鈉溶液(7ml)驟停。5分鐘后用EtOAc(250ml)稀釋反應(yīng)混合物。有機(jī)相用水和鹽水洗滌并干燥，然后真空濃縮有機(jī)層，殘余物經(jīng)色譜純化(含10-20％乙酸乙酯的己烷)，給出590mg(76.0％)C4-羥基漿果赤霉素目的類似物。
實(shí)施例20制備C4-環(huán)丙基酯-7,13-雙TES-1-DMS漿果赤霉素
把實(shí)施例19的C4-羥基漿果赤霉素衍生物(196mg,0.236mmol)溶于無水THF(4.7ml)。在0℃下用LHMDS(0.283ml,1M,0.283mmol)處理此溶液，在此溫度下30分鐘以后加入環(huán)丙烷羰基氯(0.032ml,0.354mmol)。0℃下攪拌反應(yīng)1小時，然后用飽和NH4Cl(3ml)驟停。反應(yīng)混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)干燥和真空濃縮。得到殘余物經(jīng)色譜純化(含10％乙酸乙酯的己烷)給出137mg(65％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例21制備 C4-環(huán)丙烷基酯漿果赤霉素
把實(shí)施例20的7,13-TES-1-DMS-C4-環(huán)丙烷漿果赤霉素(673mg,0.749mmol)溶于無水乙腈(6ml)和THF(2ml)。于0℃下在此溶液中加入吡啶(2.25ml)，接著加入48％HF溶液(6.74ml)。0℃,30分鐘后，加入TBAF(2.25ml,1M,2.25mmol)。加入附加量的TBAF，直至TLC確定起始物已耗盡。把反應(yīng)混合物濃縮成漿液，再用EtOAc(350ml)稀釋，用1N HCl、NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌，真空濃縮。殘留物經(jīng)色譜純化(含60％乙酸乙酯的己烷)給出366mg(80％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例22制備7-TES-4-環(huán)丙烷漿果赤霉素
把實(shí)施例21的4-環(huán)丙烷漿果赤霉素(46.6mg,0.076mmol)溶于無水DMF(1ml),0℃下在此溶液中加入咪唑(20.7mg,0.305mmol)，再加入TESCl(0.0512ml,0.305mmol),0℃下攪拌反應(yīng)30分鐘，再用EtOAc(50ml)稀釋。反應(yīng)混合物用水和鹽水洗滌、干燥、真空濃縮，殘余物經(jīng)色譜純化(含30-50％乙酸乙酯的己烷)給出36mg(65.1％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例23
制備2’,7-雙TES-4-環(huán)丙烷Paclitaxel
將實(shí)施例22化合物(30.0mg,0.413mmol)的THF(1ml)溶液冷卻至-40℃，用LHMDS(0.062ml,0.062mmol)處理。5分鐘后，加入β-內(nèi)酰胺*(23.6mg,0.062mmol)的THF溶液(0.5ml)。反應(yīng)在0℃下攪拌1小時，然后用飽和NH4Cl溶液1ml使反應(yīng)驟停。反應(yīng)混合物用EtOAc(40ml)萃取，用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)干燥和真空濃縮，殘余物經(jīng)色譜純化(含20-30-60％乙酸乙酯的己烷)給出24.5mg(53.6％)目的產(chǎn)物，與5.1mg(17％)的起始物混在一起。
*制備此β-內(nèi)酰胺的方法見USP5,175,315。
實(shí)施例24制備Paclitaxel的4-環(huán)丙烷酯
0℃下，將實(shí)施例23的產(chǎn)物(22.0mg,0.020mmol)的乙腈溶液(0.5ml)先用吡啶(0.060ml)，再用48％HF溶液(0.180ml)處理。反應(yīng)混合物于5℃放置過夜，然后用EtOAc(30ml)稀釋，用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(含60％乙酸乙酯的己烷)給出10.0mg(57.2％)目的產(chǎn)物。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.10-8.06(m,2H),7.76-7-26(m,13H),7.04(d,J=9.1Hz,1H),6.27(s,1H),6.14(m,1H),5.82(d,J=9.1Hz,1H),5.65(d,J=6.9Hz,1H),4.85(m,2H),4.39(m,1H),4.19(ABq,J=8.4Hz,2H),3.80(d,J=6.9Hz,1H),3.59(d,J=4.8Hz,1H),2.60-1.13(m,24H,
包括單峰2.23,1.77,1.66,1.23,1.14，各3H).HRMS C49H54NO14(MH+)計(jì)算值880.3544，
測定值880.3523
實(shí)施例25制備7,13-TES-1-DMS-4-環(huán)丁烷酯漿果赤霉素
用LHMDS(0.178ml,1M,0.178mmol)于0℃下處理實(shí)施例19產(chǎn)物(113.6mg,0.137mmol)的THF溶液(2.6ml)。0℃下30分鐘后，加入環(huán)丁基羰基氯(24.4mg,0.206mmol)。反應(yīng)在0℃下攪拌1小時，用NH4Cl飽和溶液(2ml)使反應(yīng)停止。反應(yīng)混合物用EtOAc(75ml)萃取，用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)干燥和真空濃縮，殘余物經(jīng)色譜純化(含10％乙酸乙酯的己烷)給出80mg(64.1％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例26制備4-環(huán)丁基漿果赤霉素
0℃下，在實(shí)施例25化合物的乙腈溶液(3ml)中先加入無水吡啶(0.61ml)，再加入48％HF(1.83ml)。0℃下1小時以后，加入TBAF(0.61ml,1M,0.61mmol)。再加入附加量的TBAF直到所有的起始物全部耗盡。然后部分除去溶劑，殘余物用EtOAc(150ml)稀釋，用1N HCl和NaHCO3飽和溶液洗滌。有機(jī)層經(jīng)干燥和直空濃縮，殘余物色譜純化(含60％乙酸乙酯的己烷)給出95.6mg(75％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例27制備7-TES-4-環(huán)丁基酯漿果赤霉素
把實(shí)施例26的4-環(huán)丁基漿果赤霉素(85mg,0.136mmol)溶于無水DMF(1.4ml)，于0℃下向此溶液中加入咪唑(36.9mg,0.543mmol)和TESCl(91.2μl,0.543mmol)。反應(yīng)混合物用EtOAc(75ml)稀釋，用水和鹽水洗滌。有機(jī)層經(jīng)干燥和真空濃縮殘余物色譜純化(含40％乙酸乙酯的己烷)給出74mg(73.6％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例28制備2’,7-TES-4-環(huán)丁基Paclitaxel
把實(shí)施例27的7-TES-4-環(huán)丁基酯漿果赤霉素(41mg,0.055mmol)溶于THF(1ml)，將此溶液冷卻至-40℃，并先用LHMDS(0.083ml,1M,0.083mmol)，再用實(shí)施例23的β-內(nèi)酰胺(31.7mg,0.083mmol)的THF溶液(0.5ml)處理。反應(yīng)于0℃放置1小時后用NH4Cl(2ml)驟停。反應(yīng)混合物用EtOAc(50ml)萃取，用水和鹽水洗滌，然后干燥和真空濃縮有機(jī)層，殘余物色譜純化(含20-30％乙酸乙酯的己烷)給出56mg(90.2％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例29制備4-環(huán)丁基Paclitaxel
把實(shí)施例28的2’,7-TES-4-環(huán)丁基紫杉醇(47mg,0.042mmol)溶于乙腈(1ml),0℃下在此溶液中先加入吡啶(0.125ml)，再加入48％HF(0.375ml)。反應(yīng)于5℃放置過夜。然后該反應(yīng)用EtOAc(50ml)稀釋，用1N HCl,NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌。有機(jī)相經(jīng)干燥和真空濃縮，殘余物經(jīng)色譜純化(含60％乙酸乙酯的己烷)給出31.8mg(84.9％)的目的產(chǎn)物。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.15-8.12(m,2H),7.73-7.26(m,13H),6.96(d,J=9.0Hz,1H),6.26(s,1H),6.17(m,1H),5.80(d,J=9.0Hz,1H),5.66(d,J=7.1Hz,1H),4.83(m,2H),4.41(m,1H),4.26(ABq,J=8.4Hz,2H),3.78(d,J=7.0Hz,1H),3.57(d,J=5.2Hz,1H),3.42(m,1H),2.61-1.14(m,25H，包括單峰2.23,1.76,1.68,1.23,1.14，各3H).HRMS C50H56NO14(MH+)計(jì)算值894.3701，
測定值894.3669
實(shí)施例30制備 漿果赤霉素的7,13-TES-1-DMS-4-環(huán)戊基酯
0℃下，用LHMDS(0.230ml,1M,0.230mmol)處理實(shí)施例19化合物(147mg,0.177mmol)的THF溶液(3.5ml)。30分鐘后加入環(huán)戊基羰基氯(32.3μl,0.266mmol)。在該溫度下攪拌反應(yīng)1小時后，用NH4Cl飽和溶液使反應(yīng)停止。反應(yīng)混合物經(jīng)萃取、洗滌、干燥和真空濃縮，殘留物色譜純化(含10％乙酸乙酯的己烷)給出90mg(55％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例31制備 4-環(huán)戊基漿果赤霉素
將實(shí)施例30的產(chǎn)物(75mg,0.081mmol)的乙腈溶液(1.6ml)于0℃下先用吡啶(0.24ml)，再用48％HF(0.72ml)處理。反應(yīng)在0℃攪拌1小時，然后加入TBAF(0.405ml,1M,0.405mmol),1小時后加入5當(dāng)量上述試劑。反應(yīng)混合物用EtOAc(100ml)稀釋，用1N HCl,NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌，有機(jī)相經(jīng)干燥和真空濃縮。殘余物色譜純化(含50％乙酸乙酯的己烷)給出44mg(85％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例32制備 7-TES-4-環(huán)戊基酯漿果赤霉素
把4-環(huán)戊基漿果赤霉素(35mg,0.055mmol)溶于無水DMF(1ml),0℃下在此溶液中加入咪唑(14.9mg,0.219mmol)，接著薦加入TESCl(36.8μl,0.219mmol)。反應(yīng)混合物在0℃攪拌30分鐘，用EtOAc(50ml)稀釋。有機(jī)相經(jīng)洗滌、干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(含40％乙酸乙酯的己烷)給出31mg(75％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例33制備2’,7-TES-4-環(huán)戊基酯漿果赤霉素
把實(shí)施例32產(chǎn)品(24.5mg,0.0324mmol)的THF溶液(0.6ml)于-40℃先用LHMDS(0.049ml,1M,0.049mmol)，再用實(shí)施例23的β-內(nèi)酰胺(18.6mg,0.049mmol)的THF溶液(0.3ml)處理。反應(yīng)可0℃下攪拌1小時，然后用NH4Cl飽和溶液驟停。反應(yīng)混合物用EtOAc(35ml)萃取、洗滌、干燥和真空濃縮。殘余物色譜純化(含20-30-50％乙酸乙酯的己烷)給出15.5mg(42％)目的產(chǎn)物，與7.8mg(31.8％)未反應(yīng)起始物在一起。
實(shí)施例34制備4-環(huán)戊基酯Paclitaxel
于0℃下，先用吡啶(0.035ml)，再用48％HF溶液(0.103ml)處理實(shí)施例33產(chǎn)品(13mg,0.0115mmol)的乙腈溶液(0.3ml)，反應(yīng)于5℃放置過夜。然后反應(yīng)混合物用EtOAc(30ml)稀釋，用1NHCl、NaHCO3和鹽水洗滌，有機(jī)層經(jīng)干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(含50％乙酸乙酯的己烷)給出7.3mg(70.3％)目的產(chǎn)物。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.17-8.14(m,2H),7.74-7.26(m,13H),6.90(d,J=8.9Hz,1H),6.27(s,1H),6.20(m,1H),5.75(d,J=8.9Hz,1H),5.69(d,J=7.0Hz,1H),4.79(m,2H),4.44(m,1H),4.24(ABq,J=8.4Hz,2H),3.81(d,J=7.0Hz,1H),3.46(d,J=4.7Hz,1H),3.06(m,1H),2.56-1.15(m,27H，包括單峰2.24.1.82.1.68.1.33,1.15，各3H).HRMS,C51H57NO14Na(MNa+)計(jì)算值930.3677，
測定值930.3714
實(shí)施例35制備 帶有呋喃側(cè)鏈的2’,7-甲硅烷基化的-4-環(huán)戊烷紫杉烷(taxane)
將實(shí)施例22產(chǎn)品(75.8mg,0.104mmol)的THF溶液(2ml)于-40℃用LHMDS(0.136ml,1M,0.136mmol)和β-內(nèi)酰胺*(57.3mg,0.156mmol)處理。反應(yīng)于0℃下攪拌1小時，然后用NH4Cl飽和溶液(1ml)使反應(yīng)驟停。反應(yīng)混合物用EtOAc萃取、洗滌和干燥，以及真空濃縮，殘余物色譜純化(含20％乙酸乙酯的己烷)給出113mg(100％)目的產(chǎn)物。
*制備β-內(nèi)酰胺的方法見USP5,227,400。
實(shí)施例36制備帶有呋喃側(cè)鏈的4-環(huán)丙基酯紫杉烷
實(shí)施例35產(chǎn)品的乙腈溶液(2ml)在0℃先用吡啶(0.27ml)，再用48％HF(0.81ml)處理，反應(yīng)于5℃放置3小時，用EtOAc(75ml)稀釋，用1N HCl、NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌，干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(含50-60％乙酸乙酯的己烷)給出68mg(88.2％)目的產(chǎn)物。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.09-8.06(m,2H),7.62-7.37(m,3H),7.26(s,1H),6.37-6.30(m,3H),6.19(m,1H),5.65(d,J=7.0Hz,1H),5.37(d,J=9.9Hz,1H),5.23(d,J=9.9Hz,1H),4.82(d,J=8.3Hz,1H),4.76(d,J=4.1Hz,1H),4.42(m,1H),4.18(ABq,J=8.4Hz,2H),3.85(d,J=6.9Hz,1H),3.37(d,J=5.4Hz,1H),2.55-1.01(m,33H，包括單峰223,190,1.66,126,1.14，各3H；133,9H).HRMS,C45H56NO16(MH+)計(jì)算值866.3599，
測定值866.3569
實(shí)施例37制備帶有呋喃側(cè)鏈的2’,7-甲硅烷基化的-4-環(huán)丁基酯紫杉烷
實(shí)施例22產(chǎn)物的THF溶液(0.8mg)于-40℃用LHMDS(0.050ml,1M,0.050mmol)處理，2分鐘后，加入實(shí)施例35的β-內(nèi)酰胺(18.2mg,0.050mmol)。反應(yīng)混合物于0℃攪拌1小時，用NH4Cl飽和溶液停止反應(yīng)。反應(yīng)混合物經(jīng)萃取、洗滌、干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(含20％乙酸乙酯的己烷)給出33.0mg(89.4％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例38制備帶有呋喃基側(cè)鏈的4-環(huán)丁基酯紫杉烷
將實(shí)施例37產(chǎn)品(30.0mg,0.027mmol)的乙腈溶液(1ml)于0℃下先用吡啶(0.081ml)，接著再用48％HF(0.243ml)處理。反應(yīng)于5℃放置過夜，用EtOAc(50ml)稀釋，用1N HCl、NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌。然后干燥和真空濃縮有機(jī)層，殘余物色譜純化(含60％乙酸乙酯的己烷)得到22mg(92.4％)目的產(chǎn)物。1H NMR(300HMz,CDCl3):δ8.13-8.10(m,2H),7.62-7.45(m,3H),6.42-6.38(m,2H),6.30(s,1H),6.19(m,1H),5.65(d,J=7.1Hz,1H),5.34(d,J=9.6Hz,1H),5.18(d,J=9.8Hz,1H),4.90(d,J=7.7Hz,1H),4.73(dd,J=2.0Hz,J′=5.7Hz,1H),4.45(m,1H),4.25(ABq,J=8.4Hz,2H),3.80(d,J=7.0Hz,1H),3.50(m,1H),3.27(d,J=5.8Hz,1H),2.61-1.15(m,34H，包括單峰2.24,1.86,1.68,1.26,1.15，各3H；1.33,9H).
實(shí)施例39
制備7,13-TES-1-DMS-4-丁酸酯漿果赤霉素
把實(shí)施例19的C4-羥基漿果赤霉素衍生物(181mg,0.218mmol)溶于無水THF(4.4ml)，將此溶液于0℃下用LHMDS(0.262ml,1M,0.262mmol)處理，在此溫度下30分鐘以后，加入丁酰氯(0.034ml,0.33mmol)。反應(yīng)于0℃攪拌1小時，用飽和NH4Cl(3ml)驟停。反應(yīng)混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和鹽水洗滌。有機(jī)相經(jīng)干燥和真空蒸發(fā)。得到的殘余物色譜純化(含10％乙酸乙酯的己烷)，給出138mg(70.3％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例40制備 C4-丁酸酯漿果赤霉素
把實(shí)施例39的7,13-TES-1-DMS-4-丁酸酯漿果赤霉素(527mg,0.586mmol)溶于無水乙腈(19.5ml),0℃在此溶液中先加入吡啶(1.95ml)，再加入48％HF溶液(5.86ml)。0℃,30分鐘以后，反應(yīng)混合物于5℃放置過夜。然后用EtOAc(400ml)稀釋，用1N HCl,NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌并真空濃縮。殘余物色譜純化(含60％乙酸乙酯的己烷)給出286mg(80％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例41制備7-TES-4-丁酸酯漿果赤霉素
把實(shí)施例40的4-丁酸酯漿果赤霉素(286mg,0.466mmol)溶于無水DMF(2.3ml),0℃下，在此溶液中加入咪唑(127mg,1.86mmol)，接著再加入TESCl(0.313ml,1.86mmol)。反應(yīng)于0℃攪拌30分鐘，然后用EtOAc(100ml)稀釋。反應(yīng)混合物用水和鹽水洗滌，然后真空濃縮。殘余物色譜純化(含30-50％乙酸乙酯的己烷)得到283.3mg(83.5％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例42制備2’,7-雙TES-C4-丁酸酯Paclitaxel
把實(shí)施例41產(chǎn)物(300.6mg,0.413mmol)的THF(8.3ml)溶液冷卻至-40℃，用LHMDS(0.619ml,0.619mmol)處理，5分鐘后，加入實(shí)施例23的β-內(nèi)酰胺(236mg,0.619mmol)的THF溶液(4.1ml)。反應(yīng)于0℃攪拌1小時，然后用飽和NH4Cl溶液(3ml)驟停。反應(yīng)混合物用EtOAc(150ml)萃取，用水和鹽水洗滌，有機(jī)相經(jīng)干燥和真空濃縮，殘余物色譜提純(含20-30-60％乙酸乙酯的己烷)給出377mg(82.3％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例43制備 C4-丁酸酯Paclitaxel
實(shí)施例42產(chǎn)物(366mg,0.334mmol)的乙腈溶液(15.3ml)于0℃下先用吡啶(0.926ml)，再用48％HF溶液(2.78ml)處理。反應(yīng)混合物于5℃放置過夜，然后用EtOAc(200ml)稀釋，用水和鹽水洗滌。有機(jī)相經(jīng)干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(含60％乙酸乙酯的己烷)給出274mg(94.5％)目的產(chǎn)物。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.12-8.09(m,2H),7.71-7.32(m,13H),7.00(d,J=8.9Hz,1H),6.25(s,1H),6.16(m,1H),5.73(d,J=8.8Hz,1H),5.64(d,J=7.0Hz,1H),4.85(d,KJ=9.4Hz,1H),4.76(m,1H),4.38(m,1H),4.20(ABq,J=B.4Hz,2H),3.77(d,J=6.9Hz,1H),3.70(d,J=4.3Hz,1H),2.66-0.85(m,26H，包括單峰2.20,1.76,1.65,1.21,1.11,各3H,triplet at 0.88,3H).
實(shí)施例44制備7,13-TES-1-DMS-4-碳酸乙酯漿果赤霉素
把實(shí)施例19產(chǎn)物(205mg,0.247mmol)的THF溶液(5ml)于0℃用LHMDS(0.296ml,1M,0.296mmol)處理。0℃,30分鐘以后，加入氯甲酸乙酯(0.0354ml,0.370mmol)。反應(yīng)于0℃攪拌1小時，用NH4Cl飽和溶液(3ml)停止反應(yīng)。反應(yīng)混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和鹽水洗滌、干燥并真空濃縮有機(jī)相。殘余物色譜純化(含10％乙酸乙酯的己烷)，給出155mg(69.6％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例45制備 C4-碳酸乙酯漿果赤霉素
在0℃下，于實(shí)施例44產(chǎn)物(152mg,0.169mmol)的乙腈溶液中(5.6ml)先加入無水吡啶(0.56ml)，再加入48％HF(1.69ml)。0℃,30分鐘后，反應(yīng)混合物于5℃放置過夜。然后殘余物用EtOAc(150ml)稀釋，用1N HCl和NaNCO3飽和溶液洗滌。有機(jī)層經(jīng)干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(含60％乙酸乙酯的己烷)給出99mg(95.4％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例46制備7-TES-C4-碳酸乙酯漿果赤霉素
把實(shí)施例45的4-碳酸乙酯漿果赤霉素(95mg,0.154mmol)溶于無水DMF(0.771ml)。0℃下，在此溶液中加入咪唑(42mg,0.617mmol)和TESCl(104μl,0.617mmol)，反應(yīng)混合物用EtOAc(100ml)稀釋，用水和鹽水洗滌。干燥和真空濃縮有機(jī)層。殘余物色譜純化(含40％乙酸乙酯的己烷)給出95mg(84.4％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例47制備2’,7-TES-C4-碳酸乙酯Paclitaxel
把實(shí)施例46的7-TES-4-碳酸乙酯漿果赤霉素(93.4mg,0.128mmol)溶于THF(2.6ml)。此溶液冷卻至-40℃，并先后用LHMDS(0.192ml,1M,0.192mmol)，和實(shí)施例23的β-內(nèi)酰胺(73.1mg,0.192mmol)的THF溶液(1.3ml)處理。反應(yīng)于0℃放置1小時，用NH4Cl(3ml)使反應(yīng)停止。反應(yīng)混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水和鹽水洗滌，然后干燥和真空濃縮有機(jī)層，殘余物色譜純化(含20-30％乙酸乙酯的己烷)給出118mg(83.0％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例48制備 C4-碳酸乙酯Paclitaxel
把實(shí)施例47的2’,7-TES-4-碳酸乙酯漿果赤霉素(114mg,0.103mmol)溶于乙腈(5.1ml),0℃下，在此溶液中加入吡啶(0.285ml)，再加入48％HF(0.855ml)。反應(yīng)于5℃放置過夜，然后用EtOAc(100ml)稀釋，用1N HCl、NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌。有機(jī)相經(jīng)干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(含60％乙酸乙酯的己烷)給出75mg(82.8％)目的產(chǎn)物。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.09-8.06(m,2H),7.75-7.24(m,13H),7.14(d,J=9.0Hz,1H),6.24(s,1H),6.10(m,1H),5.79(d,J=7.1Hz,1H),5.66(d,J=6.9Hz,1H),4.95(d,J=8.2Hz,1H),4.75(m,1H),4.41-4.16(m,5H),3.89(d,J=4.3Hz,1H),3.81(d,J=6.9Hz,1H),2.56-1.11(m,23H，
包括單峰2.21,1.75,1.65,1.18,1.11，各3H,triplet at 1.22,3H).
實(shí)施例49
制備帶有呋喃基側(cè)鏈的2’,7-甲硅烷基化的-C-4-丁酸酯
紫杉烷
-40℃，用LHMDS(0.548ml,1M,0.548mmol)處理實(shí)施例41的7-甲硅烷基-4-丁酸酯漿果赤霉素(266mg,0.365mmol)的THF溶液(7.3ml)。2分鐘后，加入實(shí)施例35的β-內(nèi)酰胺(201mg,0.548mmol)的THF溶液(3.6ml)。反應(yīng)混合物于0℃攪拌1小時，用NH4Cl飽和溶液驟停。反應(yīng)混合物經(jīng)萃取、洗滌、干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(含20％乙酸乙酯的己烷)給出399.0mg(99％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例50制備 帶有呋喃基側(cè)鏈的C-4-丁酸酯紫杉烷
實(shí)施例49產(chǎn)物(399.0mg,0.364mmol)的乙腈溶液(18.2ml)于0℃先后用吡啶(1.01ml)和48％HF(3.03ml)處理。反應(yīng)于5℃放置過夜，用EtOAc(200ml)稀釋，用1N HCl,NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌。干燥和真空濃縮有機(jī)相，殘余物色譜純化(含60％乙酸乙酯的己烷)給出305mg(96.5％)目的產(chǎn)物。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.05-8.02(m,2H),7.56-7.35(m,4H),6.33-6.26(m,3H),6.15(m,1H),5.59(d,J=7.0Hz,1H),5.40(d,J=9.7Hz,1H),5.26(d,J=9.7Hz,1H),4.85(d,J=9.5Hz,1H),4.66(m,1H),4.39(m,1H),4.17(ABq,J=8.4Hz,2H),3.76(d,J=6.9Hz,1H),3.64(J=6.0Hz,1H),2.65-0.91(m,35H，包括單峰2.18,1.82,1.62,1.21,1.09，各3H1.28,9H,triplet at 0.94,3H).
實(shí)施例51
制備 7,13-雙TES-1-DMS-C-4-碳酸甲酯漿果赤霉素
把實(shí)施例19化合物(118mg,0.150mmol)溶于THF(3ml),0℃下在此溶液中加入LHMDS(0.180ml,1M,0.180mmol)。30分鐘后，加入氯甲酸甲酯(0.174ml,0.225mmol)。再過30分鐘，用NH4Cl使反應(yīng)停止。反應(yīng)混合物用EtOAc(100ml)萃取，有機(jī)層用水(10ml×2)和鹽水(10ml)洗滌。有機(jī)層經(jīng)干燥和真空濃縮。殘余物色譜純化(5-10％EtOAc-己烷)給出104mg(82.1％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例52制備 C-4-碳酸甲酯漿果赤霉素
把實(shí)施例51化合物(89.0mg,0.105mmol)溶于CH3CN(3.5ml),0℃下在此溶液中加入吡啶(0.30ml)，接著再加入48％HF(1.05ml)。反應(yīng)于0℃攪拌6小時，然后用EtOAc(100ml)稀釋，反應(yīng)混合物用1N HCl(10ml),NaHCO3飽和溶液(10ml×3)洗滌，有機(jī)相經(jīng)干燥和真空濃縮。殘余物色譜純化(含50％乙酸乙酯己烷)給出70mg(100％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例53制備 7-TES-C-4-碳酸甲酯漿果赤霉素
把實(shí)施例52化合物(115.5mg,0.192mmol)溶于DMF(0.960ml),0℃下，在此溶液中加入咪唑(52.2mg,0.767mmol)，接著再加入TESCl(0.128ml,0.767mmol)。30分鐘后，反應(yīng)混合物用EtOAc(100ml)稀釋，有機(jī)相用水(10ml×2)和鹽水(10ml)洗滌，然后干燥并真空濃縮有機(jī)相，殘余物色譜分離(含40％乙酸乙酯的己烷)給出133mg(96.8％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例54制備帶有呋喃基側(cè)鏈的2’,7-甲硅烷基化的-C4-碳酸甲酯紫杉烷
在-40℃，用LHMDS(0.350ml,1M,0.350mmol)處理實(shí)施例53的7-甲硅烷基-4-碳酸甲酯漿果赤霉素(227.8mg,0.318mmol)的THF溶液(6.4ml)。2分鐘后，加入實(shí)施例35的β-內(nèi)酰胺(140mg,0.382mmol)THF溶液(3.6ml)。反應(yīng)混合物于0℃攪拌1小時，用NH4Cl飽和溶液停止反應(yīng)。反應(yīng)混合物經(jīng)萃取、洗滌、干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(含20％乙酸乙酯的己烷)給出332.0mg(96.3％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例55制備帶有呋喃基側(cè)鏈的C-4-碳酸甲酯紫杉烷
實(shí)施例54(332.0mg,0.307mmol)的乙腈溶液(15.3ml)于0℃下先后用吡啶(1.7ml)和48％HF(5.1ml)處理。反應(yīng)于5℃放置過夜，用EtOAc(200ml)稀釋，用1N HCl,NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌，然后干燥和真空濃縮有機(jī)相。殘余物色譜分離(含60％乙酸乙酯的己烷)給出260mg(99％)目的產(chǎn)物。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.05-8.02(m,2H),7.53-7.37(m,4H),6.29-6.15(m,4H),5.62(d,J=6.9Hz,1H),5.40(d,J=9.6Hz,1H),5.30(d,J=9.6Hz,1H),4.91(d,J=9.3Hz,1H),4.68(m,1H),4.34(m,1H),4.16(ABq,J=8.5Hz,2H),3.88(s,3H),3.80(d,J=8.9Hz,1H),3.69(d,J=5.5Hz,1H),2.63-1.08(m,28H，包括單峰2.18,1.85,1.60,1.20,1.08，各3H；1.26,9H).
實(shí)施例56制備 2’,7-甲硅烷基化的-C4-碳酸甲酯Paclitaxel
把實(shí)施例53化合物(113.3mg,0.158mmol)溶于THF(3.16ml),-40℃下在此溶液中加入LHMDS(0.237ml,1M,0.237mmol)，接著加入實(shí)施例23的β-內(nèi)酰胺(90.43mg,0.237mmol)。按照上述同樣的方法，得到159mg(91.6％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例57制備 C4-碳酸甲酯Paclitaxel
把實(shí)施例56化合物(149mg,0.136mmol)溶于CH3CN(6.8ml),0℃下，在此溶液中加入吡啶(0.377ml)，再加入48％HF(1.132ml)。按照上述相同的方法，得到103.4mg(87.6％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例58制備 C-4環(huán)丙酯-7-TES-13-oxayol-漿果赤霉素
室溫下，在實(shí)施例22產(chǎn)物(72mg,0.099mmol)和實(shí)施例6產(chǎn)物(29.4mg,0.110mmol)于甲苯(2ml)的懸浮液中加入DMAP(13.4mg,0.110mmol)。10分鐘后，加入DCC(22.6mg,0.1l0mmol)。反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?小時，然后通過Celite過濾，用EtOAc淋洗，然后真空濃縮有機(jī)相。殘余物色譜純化(含30％EtOAc的己烷)給出產(chǎn)率100％(99mg)的目的產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3):δ8.27-8.24(m,2H),8.03-7.26(m,13H),6.42(s,1H),6.08(m,1H),5.67(d,J=7.0Hz,1H),5.60(d,J=6.0Hz,1H),4.92(d,J=6.1Hz,1H),4.87(d,J=8.3Hz,1H),4.50(dd,J=6.6Hz,J′=10.3Hz,1H),4.16(ABq,J=8.3Hz,2H),3.85(d,J=6.9Hz,1H),2.56-0.52(m,39H，包括單峰2.15,2.02,1.68,1.20,1.18，各3H,triplet at 0.92,9H).HRMS,C55H66NO13Si(MH+)計(jì)算值976.4303，
測定值976.4271。
實(shí)施例59制備 Paclitaxel的C-4環(huán)丙酯
0℃下，在實(shí)施例58產(chǎn)物(83.4mg,0.084mmol)于THF(0.8ml)和甲醇(0.8ml)的溶液中加入1N HCl(0.42ml)。反應(yīng)于4℃放置14小時。將反應(yīng)混合物加熱至室溫，加入NaHCO3飽和溶液(2.1ml)。反應(yīng)于室溫?cái)嚢?小時，然后傾入水中。用EtOAc(4×20ml)萃取反應(yīng)混合物。合并的有機(jī)相經(jīng)干燥和真空濃縮，殘余物色譜純化(60％EtOAc/己烷)給出產(chǎn)率為60％的目的產(chǎn)物(45mg)。
實(shí)施例60
在一烘箱干燥用氬氣吹掃過的25ml燒瓶中，把BMS-189892-01(485mg,3.0mmol)(注解1)溶于無水甲醇(5.0ml)。0℃下用注射器向此燒瓶中滴加三甲基氯代甲硅烷(326mg,3.0mmol)。反應(yīng)混合物于0℃攪拌5分鐘，然后移去冰-水浴，反應(yīng)混合物在室溫下再攪拌14小時。將反應(yīng)混合物真空濃縮并在高真空下干燥定量地生成1，為白色泡沫體(691mg,100％)。
1.Chem.Abs:34408-064-33
實(shí)施例61
在-25ml燒瓶中將上面得到的1(691mg,3.0mmol)溶于飽和NaHCO3(10ml)，室溫下，在此溶液中加入氯甲酸芐酯(512mg,3.0mmol)。反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?4小時，在此期間形成白色沉淀。濾出白色沉淀，用水(2×5ml)和己烷(2×5ml)洗滌，高真空下干燥固體給出2，為米色固體(745mg,86％)。
實(shí)施例62
在-用烘箱干燥、氬氣吹掃過的，配備有迪安-斯達(dá)克分水器的25ml燒瓶中，把2(745mg,2.58mmol)溶于甲苯(12ml)和DMF(2.5ml)，在此溶液中加入PPTS(502mg,2.0mmol)。反應(yīng)混合物在攪拌下加熱回流28小時。混合物用乙酸乙酯稀釋(50ml)，用H2O(20ml)洗滌。水相用乙酸乙酯萃取(50ml)，合并的有機(jī)餾份用MgSO4干燥、過濾、真空濃縮得到粗產(chǎn)品3(630mg,77％)，為深色油。粗產(chǎn)品3用柱色譜純化(硅膠，2×12cm,10％乙酸乙酯/己烷為洗脫劑)得到3，為無色粗稠的油(540mg,66％)。
實(shí)施例63
在25ml燒瓶中，把3(540mg,2.1mmol)溶于THF(6ml)和H2O(3ml)，室溫下向此溶液一次加入固體LiOH(82mg,2.0mmol)。得到的混合物于室溫?cái)嚢?.5小時。室溫下滴加HCl(2.4ml,1N溶液)停止反應(yīng)，然后混合物傾入H2O(10ml)，用CH2Cl2(4×15ml)萃取，用MgSO4干燥，過濾，真空濃縮得到粗產(chǎn)品4(420mg,82％)，石黃色油，可直接用于下步反應(yīng)而無須進(jìn)一步純化。
實(shí)施例64
在-經(jīng)烘箱干燥、氬氣吹掃過的25ml燒瓶中，于室溫下將4(140mg,0.54mmol)、BMS-184260-01(346mg,0.495mmol)和N,N-二甲氨基吡啶(66mg,0.54mmol)懸浮于甲苯(10ml)。將懸浮液攪拌20分鐘后，一次加入1,3-二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)(111mg,0.54mmol)，混合物于室溫下攪拌2小時。接著把N,N-二甲氨基吡啶(66mg,0.54mmol)和1,3-二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)(111mg,0.54mmol)再次加入反應(yīng)混合物中。把反應(yīng)混合物攪拌14小時，將其傾入飽和NH4Cl(20ml)并用乙酸乙酯(100ml)萃取。通過Celite過濾有機(jī)萃取液，然后用乙酸乙酯(4×50ml)淋洗Celite塞。合并的有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥、過濾和真空濃縮給出粗制的5(582mg,125％)。粗制品用柱色譜純化(硅膠，2×12cm。5％乙酸乙酯/己烷為洗脫液)得到5(413mg,89％)，為無色油。
實(shí)施例65
在-烘箱干燥、氬氣吹掃過的25ml燒瓶中，把5(92mg,0.094mmol)溶于THF(2.0ml)和甲醇(2.0ml),0℃下在此燒瓶中加入HCl水溶液(0.5ml,2.0N溶液)，然后將此溶液置于6℃冷浴中14小時。使反應(yīng)混合物溫至室溫，在燒瓶中加入飽和NaHCO3(5.0ml)。然后將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?小時。將混合物傾入H2O(10ml)，用CH2Cl2萃取(4×20ml)。合并的有機(jī)相用MgSO4干燥、過濾、真空濃縮給出粗制BMS-184060-01(70mg)，為白色固體。在溶解于CH3OH(3.0ml)的粗制BMS-184060-01熱溶液中加入H2O(～1.0ml)至到溶液出現(xiàn)混濁。溶液于冰箱中過夜進(jìn)行冷卻，用中等多孔玻璃過濾器濾出白色固體，高真空干燥給出最終產(chǎn)物(51mg,64％)，為白色固體。
實(shí)施例66制備帶有C-13(Oxayolyl-呋喃基)側(cè)鏈的C-4-環(huán)丙基酯-7-TES漿果赤霉素
室溫下在實(shí)施例22產(chǎn)物(92.3mg,0.127mmol)和實(shí)施例63產(chǎn)物(36.0mg,0.140mmol)于甲苯(2.5ml)的懸浮液中加入DMAP(17.1mg,0.140mmol)。10分鐘后，再加入DCC(28.8mg,0.140mmol)。室溫2小時后加入第二劑量的試劑。反應(yīng)于室溫?cái)嚢柽^夜。然后過濾反應(yīng)混合物并用EtOAc洗滌。有機(jī)相真空濃縮。殘余物色譜純化(30％EtOAc/己烷)以100％產(chǎn)率得到目的產(chǎn)物(125mg)。1H NMR(CDCl3):δ8.20-7.80(m,4H),7.62-7.39(m,7H),6.38(m,3H),6.08(m,1H),5.67(m,2H),5.20(d,J=5.9Hz,1H),5.20(d,J=5.9Hz,1H),4.88(d,J=9.2Hz,1H),4.49(dd,J=6.6Hz,J′=10.2Hz,1H),4.16(ABq,J=8.4Hz,2H),3.86(d,J=6.8Hz,1H),2.54-0.52(m,39H，包括單峰2.14,2.03,1.67,1.21,1.15，各3H,triplet at 0.91,9H).
HRMS,C53H64NO14Si(MH+)計(jì)算值 966.4096
測定值 966.4134
實(shí)施例67制備帶有呋喃側(cè)鏈的C-4環(huán)丙基酯紫杉烷
將實(shí)施例66化合物(69mg,0.0715mmol)溶于THF(1.4ml)和甲醇(1.4ml)。然后在0℃用1N HCl(0.716ml)處理該溶液。4℃下17小時后，使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝夭⒂肗aHCO3飽和溶液(6.5ml)處理。室溫6小時后，反應(yīng)混合物用EtOAc(4×20ml)萃取，合并的有機(jī)相真空濃縮，殘留物色譜提純(60％乙酸乙酯/己烷)得到目的產(chǎn)物(37.4mg)，產(chǎn)率60％。1H NMR(CDCl3):δ8.12-8.09(m,2H),7.74-7.26(m,7H),6.85(d,J=9.3Hz,1H),6.39(s,2H),6.30(s,1H),6.20(m,1H),5.93(d,J=9.3Hz,1H),5.67(d,J=7.0Hz,1H),4.88(s,1H),4.82(d,J=7.7Hz,1H),4.42(m,1H),4.20(ABq,J=8.5Hz,2H),3.85(d,J=6.8Hz,1H),2.54-0.88(m,24H，包括單峰2.23,1.88,1.67,1.24,1.14，各3H)。
HRMS,C47H52NO15(MH+)計(jì)算值 870.3337
測定值 870.3307
實(shí)施例68
制備C-4環(huán)丙基酯-2’-碳酸乙酯
在0℃下，于實(shí)施例24產(chǎn)物(1.333g,1.52mmol)的二氯甲烷(22.8ml)溶液中加入EtPr2 N(1.586ml,9.10mmol)，接著再加入EtOCOCl(0.87ml,9.10mmol)。反應(yīng)于0℃攪拌6小時。然后反應(yīng)混合物用EtOAc(200ml)稀釋，用水(20ml×3)和鹽水洗滌。干燥并真空濃縮有機(jī)相。殘余物色譜純化(50％EtOAC/己烷)以88.8％的產(chǎn)率得到目的產(chǎn)物(1.281g)，與86mg起始原料(6.5％)在一起。1H NMR(CDCl3):δ8.12-8.10(m,2H),7.76-7.26(m,13H),6.90(d,J=9.4Hz,1H),6.27(m,2H),6.01(dd,J=2.1Hz,J′=9.3Hz,1H),5.68(d,J=7.0Hz,m 1H),5.55(d,J=2.4Hz,1H),4.83(d,J=8.2Hz,1H),4.44(m,1H),4.23(m,4H),3.83(d,J=7.0Hz,1H),2.53-0.87(m,27H，包括單峰2.22,1.95,1.87,1.67,1.26，各3H,triplet at 1.32,3H).
HRMS,C32H38NO16(MH+)計(jì)算值952.3756
測定值952.3726
實(shí)施例69
制備 C-4環(huán)丙烷-2’-碳酸乙酯-7-取代的前體
把實(shí)施例68的2’-碳酸乙酯(53mg,0.056mmol)溶于DMSO(0.5ml)，再加入Ac2O(0.5ml)。反應(yīng)于室溫?cái)嚢?4小時。反應(yīng)混合物用EtOAc(50ml)稀釋，用水(5ml×3)、NaHCO3飽和溶液和鹽水洗滌。然后干燥和真空濃縮有機(jī)相。殘余物色譜純化(40％EtOAc/己烷)以100％的產(chǎn)率得到56.3mg目的產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3):δ8.10-8.07(m,2H),7.76-7.26(m,13H),6.90(d,J=9.4Hz,1H),6.56(s,1H),6.23(m,1H),6.03(d,J=9.5Hz,1H),5.70(d,J=6.9Hz,1H),5.58(d,J=2.1Hz,1H),4.84(d,J=8.9Hz,1H),4.66(s,2H),4.21(m,5H),3.91(d,J=6.8Hz,1H),2.80-0.87(m,30H，包括單峰2.17,2.12,2.11,1.75,1.22,1.2C，各3H,triplet at 1.32,3H).
實(shí)施例70
制備 C-4環(huán)丙烷-2’-碳酸乙酯-7-磷酸酯前體
在實(shí)施例69產(chǎn)物(1.30g,1.286mmol)的二氯甲烷(25.7ml)溶液中加入4A分子篩(1.30g)，再加入NIS(434mg,1.929mmol)和磷酸二芐酯(537mg,1,929mmol)的THF溶液(25.7ml)。反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?小時。然后反應(yīng)混合物用Celite過濾，用EtOAc淋洗。去除溶劑，將殘余物溶于EtOAc(200ml)，用1％NaHSO3和鹽水洗滌，用MgSO4干燥，有機(jī)相真空蒸發(fā)，殘余物色譜提純(50％乙酸乙酯/己烷)給出1.278g產(chǎn)品，產(chǎn)率80.1％。1H NMR(CDCl3):δ8.10-8.07(m,2H),7.76-7.26(m,23H),6.90(d,J=9.4Hz,1H),6.35(s,1H),6.23(m,1H),6.02(d,J=9.5Hz,1H),5.68(d,J=6.8Hz ,1H),5.56(s,1H),5.40(rn,1H),5.04(m,4H),4.75(d,J=9.0Hz,1H),4.20(m,5H),3.89(d,J=6.8Hz,1H),2.78-0.86(m,27H，包括單峰2.18,1.99,1.67,1.18,1.05，各3H triplet at 1.31,3H).
實(shí)施例71
制備C-4環(huán)丙烷-2’-碳酸乙酯-7-磷酸酯
把實(shí)施例70化合物(1.278g,1.03mmol)溶于無水EtOAc(41.2ml)，在此溶液中加入催化劑Pd/C(438mg,10％,0.412mmol)。反應(yīng)混合物在50psi(磅)氫化12小時。然后過濾和真空濃縮反應(yīng)混合物得到1.08g粗產(chǎn)物，產(chǎn)率100％。
粗產(chǎn)物可不經(jīng)進(jìn)一步鑒定直接用于下步反應(yīng)。
實(shí)施例72制備 C-4環(huán)丙烷-2’-碳酸乙酯-7-磷酸酯三乙醇銨鹽
在實(shí)施例71產(chǎn)物(1.08g,1.02mmol)的EtOAc溶液(6.8ml)中加入三乙醇胺(6.8ml,0.15M)的0.100M EtOAc溶液，得到的混合物于-20℃放置過夜。然后過濾混合物，固體用冷的10％乙酸乙酯/己烷洗滌，真空干燥12小時，給出目的前藥(1.00g)，產(chǎn)率81.2％。經(jīng)測定(用HPLC)最終產(chǎn)物純度＞97％1H NMR(CD3OD):δ8.10-8.07(m,2H),7.80-7.26(m,14H),6.38(s,1H),6.07(m,1H),5.89(d,J=5.2Hz,1H),5.63(d,J=7.0Hz,1H),5.55(d,J=5.2Hz,1H),5.22(m,1H),4.87(m,2H),4.23(m,5H),3.88(d,J=7.0Hz,1H),3.80(m,6H),3.30(m,1H),3.18(m,6H),2.97-0.86(m,26H，包括單峰2.15,1.94,1.69,1.57,1.13，各3H,triplet at 1.30,3H).HRMS,C53H61NO20P(MH+,M=acid)計(jì)算值 1062.3525
測定值 1062.3550
實(shí)施例73制備 7-TES-13-TMS漿果赤霉素
把實(shí)施例10的7-TES漿果赤霉素(1.895g,2.707mmol)溶于無水DMF(10.8ml),0℃下此溶液中加入咪唑(736.4mg,10.83mmol)，接著再加入TMSCl(1.37ml,10.83mmol)。反應(yīng)于0℃攪拌1.5小時，然后反應(yīng)混合物用EtOAc(400ml)稀釋，用水(20ml×3)和鹽水(15ml)洗滌，然后干燥和真空濃縮有機(jī)層，殘余物色譜純化(20％ EtOAc/己烷)給出1.881g(90％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例74制備7-TES-13-TMS-1-DMS漿果赤霉素
把實(shí)施例73的7-TES-13-TMS漿果赤霉素(305mg,0.430mmol)溶于無水DMF(2ml),0℃下在此溶液中加入咪唑(87.6mg,1.289mmol)，接著加入二甲基氯硅烷(122mg,1.289mmol)。1小時后，反應(yīng)混合物用EtOAc(150ml)稀釋，用水(10ml×3)和鹽水(10ml)洗滌，干燥并真空濃縮得到的有機(jī)層，殘余物色譜純化(10％EtOAc/己烷)給出305mg(92.4％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例75制備 7-TES-13-TMS-1-DMS-C-4羥基漿果赤霉素
把實(shí)施例74的1-DMS-7-TES-13-TMS漿果赤霉素溶于無水THF(8ml),0℃下在此溶液中加入紅鋁(0.314ml,60％,1.61mmol)?；旌衔镌?℃攪拌40分鐘，然后用飽和酒石酸鈉溶液(1ml)停止反應(yīng)2分鐘。反應(yīng)混合物用EtOAc(150ml)萃取，用水(15ml×2)和鹽水(15ml)洗滌。有機(jī)相經(jīng)干燥和真空濃縮。殘余物色譜純化(10-20％EtOAc/己烷)給出143.8mg(45.3％)目的產(chǎn)物。NMR(300MHz,CDCl3):d8.10-8.06(m,2H),7.55-7.39(m,3H),6.39(s,1H),5.59(d,J=5.5Hz,1H),4.68(dd,J1=3.9Hz,J2=9.6Hz,1H),4.61(m,1H),4.53(m,1H),4.21(ABq,J=7.8Hz,2H),4.03(dd,J1=6.1Hz,J2=11.6Hz,1H),3.74(s,1H),3.48(d,J=5.7Hz,1H),2.74-0.48(m,34H，
包括單峰2.15,2.06,1.54,1.16,0.92，各3H),0.28(s,9H),-0.015&-0.32(doublets，各3H)
實(shí)施例76制備7-TES-13-TMS-1-DMS-C-4[OC(O)CH=CH2]漿果赤霉素
把實(shí)施例75化合物(99mg,0.125mmol)溶于無水THF(2.5ml),0℃下在此溶液中加入LHMDS(0.150ml,1M,0.150mmol)。30分鐘后，加入丙烯酰氯(0.0153ml,0.188mmol)。再過30分鐘，反應(yīng)用NH4Cl飽和溶液驟停。反應(yīng)混合物用EtOAc(100ml)萃取，用水(10ml×2)和鹽水(10ml)洗滌。干燥并真空濃縮有機(jī)相，殘余物色譜純化(5-10％EtOAc/己烷)給出57.5mg(54.6％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例77制備C-4[OC(O)CH=CH2]漿果赤霉素
把實(shí)施例76化合物(105mg,0.125mol)溶于CH3CN(2.5ml),0℃下在此溶液中加入吡啶(0.374ml)，接著再加入48％HF(1.12ml)。反應(yīng)于4℃放置過夜。然后用EtOAc(75ml)稀釋反應(yīng)，有機(jī)相用1N HCl(5ml)、NaHCO3飽和溶液(5ml×3)和鹽水洗滌，然后干燥和真空濃縮有機(jī)相。殘余物色譜分離(60％EtOAc/己烷)得到60.6mg(81.3％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例78制備 7-TES-C-4[OC(O)CH=CH2]漿果赤霉素
把實(shí)施例77的三醇(60.0mg,0.100mmol)溶于無水DMF(0.66ml),0℃下在此溶液中加入咪唑(27.2mg,0.400mmol)，接著加入TESCl(0.0672ml,0.400mmol)。30分鐘后，反應(yīng)用EtOAc(75ml)稀釋，用水(5ml×3)和鹽水洗滌。然后干燥并真空濃縮有機(jī)層。殘余物色譜純化(40％EtOAc/己烷)給出56.0mg(78.4％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例79制備 2’,7-雙TES-4-[OC(O)CH=CH2]Paclitaxel
把實(shí)施例78的漿果赤霉素(50mg,0.0702mmol)溶于THF(1.4ml)，于-40℃向該溶液中加入LHMDS(0.0843ml,1M,0.0843mmol)，接著立刻加入實(shí)施例23的β-內(nèi)酰胺(40.1mg,0.105mmol)的THF(0.7ml)溶液。-40℃2分鐘后，反應(yīng)在0℃攪拌1小時，然后用NH4Cl飽和溶液使反應(yīng)驟停。反應(yīng)混合物用EtOAc萃取，用鹽水洗滌，干燥并真空濃縮有機(jī)層。殘余物色譜純化(20-30％EtOAc/己烷)給出66mg(86％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例80制備C-4[OC(O)CH=CH2]Paclitaxel
把實(shí)施例79化合物(46mg,0.0421mmol)溶于CH3CN(0.85ml),0℃下在此溶液中加入吡啶(0.125ml)，接著加入48％HF(0.375ml)。反應(yīng)于4℃放置過夜。然后反應(yīng)混合物用EtOAc(40ml)稀釋，用1N HCl(3ml)和NaHCO3飽和溶液(3ml×3)洗滌。干燥并真空濃縮有機(jī)層，殘余物色譜純化(70％EtOAc/己烷)給出28mg(76.9％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例81制備7,13-雙TES-1-DMS-C-4[C(O)C6H5]漿果赤霉素
把實(shí)施例19化合物(279mg,0.336mmol)溶于無水THF(7ml),0℃下在此溶液中加入LHMDS(0.403ml,1M,0.403mmol),30分鐘后，加入苯甲酰氯(0.0585ml,0.504mmol)。30分鐘后，反應(yīng)用NH4Cl飽和溶液驟停。反應(yīng)混合物用EtOAc(150ml)萃取，有機(jī)層用水和鹽水洗滌、干燥和真空濃縮，殘余物色譜分離(10％EtOAc/己烷)給出215.5mg(68.6％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例82制備 C-4苯甲?；鶟{果赤霉素
將實(shí)施例81化合物(161mg,0.172mmol)溶于CH3CN。0℃下在此溶液中加入吡啶(0.57ml)，接著再加入48％HF(1.80ml)。于4℃5小時后，再加入另一劑量的試劑。反應(yīng)于4℃放置過夜。反應(yīng)混合物用EtOAc(100ml)稀釋，用1N HCl(5ml)和NaHCO3(5ml×3)洗滌。干燥并真空濃縮有機(jī)相，得到的殘余物色譜純化(30-50％EtOAc/己烷)給出48mg(43.0％)目的產(chǎn)物。
實(shí)施例83制備 7-TES-C-4-苯甲?；鶟{果赤霉素
把實(shí)施例82的三醇(48.0mg,0.074mmol)溶于DMF(0.40ml),0℃下在此溶液中加入咪唑(20.1mg,0.296mmol)，接著加入TESCl(0.0496ml,0.296mmol)。30分鐘后，反應(yīng)混合物用EtOAc(45ml)稀釋，用水(1ml×3)和鹽水洗滌。干燥并真空濃縮有機(jī)相，殘余物色譜純化(40％EtOAc/己烷)給出48mg(85.0％)最終目的產(chǎn)物。
實(shí)施例84制備 C-4-苯甲?；鵓aclitaxel
把實(shí)施例83化合物(364.6mg,0.478mmol)溶于THF(9.6ml)，在-40℃向此溶液中加入LHMDS(0.718ml,1M,0.718mmol)，接著加入實(shí)施例23的β-內(nèi)酰胺(273.5gmg,0.718mmol)。按照前面實(shí)施例同樣的方法，得到415mg(75.9％)化合物。之后通過將上述化合物溶于CH3CN(16.5ml)，和在0℃下加入吡啶(0.36ml)，接著再加入48％HF(3.0ml)可得脫保護(hù)的Paclitaxel類似物。按照實(shí)施例80所列步驟，得到315mg Paclitaxel類似物(產(chǎn)率94.8％)。
實(shí)施例85制備 帶呋喃基側(cè)鏈的4-環(huán)丁烷紫杉烷
(A)
把實(shí)施例27的7-TES-4-環(huán)丁基漿果赤霉素(154mg,0.208mmol)溶于無水甲苯(4ml)。室溫下在此溶液中加入實(shí)施例63的游離酸(64.2mg,0.250mmol)和DMAP(30.5mg,0.250mmol)。10分鐘后加入DCC(51.4mg,0.250mmol)，攪拌反應(yīng)2小時，此時再加入另一份DCC/DMAP，反應(yīng)再攪拌12小時。然后通過Celite過濾反應(yīng)混合物，“濾餅”用EtOAc淋洗。真空濃縮合并的有機(jī)相，殘余物色譜純化(30-40％EtOAc/己烷)給出222mg(100％)目的產(chǎn)物。(B)
0℃下，將(A)(182mg,0.186mmol)的THF(2ml)和MeOH(2ml)溶液用1N HCl(1.86ml)處理。在0℃1小時后，將反應(yīng)于4℃放置過夜。然后反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3(9.6ml)處理。室溫下5小時后，反應(yīng)混合物用EtOAc(120ml)稀釋，用水(4×10ml)洗滌，再用MgSO4干燥和真空濃縮有機(jī)層，殘余物色譜純化(含40-60％乙酸乙酯的己烷)得到77mg(47％)目的產(chǎn)物。1H NMR(CDCl3):8.15-8.12(m,2H),7.73-7.35(m,9H),6.87(d,J=9.2Hz,1H),6.44(m,2H),6.28(s,1H),6.20(m,1H),5.89(d,J=9.2Hz,1H),5.66(d,J=7.1Hz,1H),4.90(d,J=8.1Hz,1H),4.85(s,1H),4.44(m,1H),4.27(ABq J=8.4Hz,2H),3.80(d,J=7.0Hz,1H),3.56(m,1H),2.61-0.92(m,25H，包括單峰2.22,1.83,1.69,1.23,1.13，各3H).13C NMR(CDCl3):203.6,174.4,172.4,171.2,166.9,166.8,150.9,142.5,142.0,133.5,133.3,132.9,131.9,130.1,130.0,129.7,129.0,128.5,127.0,110.8,108.0,84.6,80.8,78.9,76.4,75.475.0,72.5,72.0,71.3,58.5,50.1,45.6,43.1,38.8,35.6,35.5,26.7,25.3,25.1,21.9,20.7,18.2,14.6,9.5.HRMS:C48H54NO15(MH+)計(jì)算值884.3493
測定值884.3472
實(shí)施例86制備Paclitaxel
將實(shí)施例7(b)化合物加入5ml燒瓶中并溶于THF，加入甲醇，把稍帶淺黃色的均相溶液冷卻至0℃。加入HCl，所得均相溶液在0℃攪拌0.5小時后轉(zhuǎn)移至4℃的冷室，在加入HCl后19.5小時后，TLC檢測說明已無起始原料。把反應(yīng)溶液加入一燒瓶中，其中含有20ml_飽和的NaCl溶液。得到的非均相混合物在室溫下攪拌45分鐘，過濾混合物，固體用15ml水洗滌并在多孔玻璃漏斗中空氣干燥。然后在燒結(jié)漏斗中洗滌白色固體，使其溶于THF進(jìn)入另一燒瓶中，濃縮后給出0.169g透明狀固體。將物料轉(zhuǎn)移至一管形瓶，使其溶于1.0ml THF，加入NEt3(4eq.,0.63mmol,88ml)，形成沉淀。在室溫下攪拌非均相混合物，在加入NEt34.25小時后，TLC表明反應(yīng)基本完全。混合物用5ml EtOAc和5ml H2O稀釋并振搖，水相用5ml EtOAc萃取二次，合并的有機(jī)餾份用5ml HCl(in)、5ml飽和NaCl洗滌，用Na2SO4干燥，過濾和濃縮給出0.127g白色固體(Paclitaxel)，產(chǎn)率93.9％。
權(quán)利要求
1．下式化合物
其中R10選自環(huán)丙基、環(huán)丁基和環(huán)戊基。
2．權(quán)利要求1的化合物，其中R10是環(huán)丙基。
3．下式化合物
其中R10選自環(huán)丙基、環(huán)丁基和環(huán)戊基。
4．權(quán)利要求3的化合物，其中R10是環(huán)丙基。
5．下式化合物
其中X選自三甲基硅烷或二甲基硅烷，R14是羥基保護(hù)基。
6．下式化合物
其中X選自三甲基硅烷或二甲基硅烷；R14是羥基保護(hù)基，R選自氫或C(O)R10，其中的R10選自氫、烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、芳基、雜環(huán)基或-O-烷基。
7．下式化合物
其中R20是氫或羥基保護(hù)基，R選自氫或C(O)R10，其中的R10選自氫、烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、芳基、雜環(huán)基或-O-低級烷基。
全文摘要
制備帶有側(cè)鏈的紫杉烷類的新方法,該方法包括制備噁唑啉化合物,使噁唑啉化合物與帶有直接鍵連于紫杉烷C－13的羥基的紫杉烷偶合,以及使如此形成的帶有噁唑啉側(cè)鏈的紫杉烷上的噁唑啉環(huán)開環(huán)。本發(fā)明還提供了由本發(fā)明的方法制備的新化合物。
文檔編號C07C309/73GK1230542SQ9910106
公開日1999年10月6日 申請日期1999年1月12日 優(yōu)先權(quán)日1992年12月23日
發(fā)明者M·A·波斯, D·J·庫塞拉, J·K·托塔特希爾, J·L·蒙尼奧特, I·D·特里富諾維奇 申請人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司