專利名稱：具有釋放生長激素特性的化合物的制作方法
發(fā)明的領域本發(fā)明涉及一些新化合物，特別是4,4-雙取代和3,3-雙取代的哌啶化合物，含有它們的組合物，以及它們用于治療由生長激素缺乏所致的內科疾病。
背景技術：
生長激素是一種刺激所有能生長的組織生長的激素。而且已知生長激素對代謝過程有諸多作用，例如刺激蛋白質的合成和游離脂肪酸的調動從而產生能量代謝從碳水化合物代謝到脂肪酸代謝的轉換。生長激素的缺乏可以導致許多嚴重的內科疾病，例如侏儒癥。
生長激素是從腦垂體釋放的。該釋放是在大量激素和神經遞質直接或間接的嚴密控制下進行。生長激素的釋放可以通過生長激素釋放激素(GHRH)刺激并且通過促生長抑制素抑制。在這兩種情況下，激素從下丘腦釋放，但是它們的作用主要是通過位于腦垂體的特定受體傳遞的。刺激生長激素從腦垂體釋放的其他化合物，也有過報導。例如精氨酸、L-3,4-二羥基苯基丙氨酸(L-Dopa)、胰高血糖素、后葉加壓素、PACAP(腺苷酸環(huán)化酶活化肽)、蕈毒堿受體拮抗劑和一種合成六肽，GHRP(生長激素釋放肽)通過直接對腦垂體作用或通過影響下丘腦中釋放GHRH和/或促生長抑制素來釋放外源性生長激素。
在需要增加生長激素水平的疾病或病理狀態(tài)下，生長激素的蛋白質性質決定了只有非腸道給藥是可行的。
而且，其他直接作用的天然促分泌劑，例如GHRH和PACAP是較長的多肽，這正是優(yōu)選非腸道給藥的原因。
某些化合物用于增加哺乳動物體內生長激素水平的用途以前已經提出，例如在EP18072、EP83864、WO89/07110、WO89/01711、WO89/10933、WO88/9780、WO83/02272、WO91/18016、WO92/01711、WO93/04081、WO9517422、WO9517423、WO9514666、WO9419367、WO9534311、WO9602530、WO9615148、WO9613265、WO9622997、WO9635713、WO9638471、WO9632943、WO9700894、WO9706803、WO9709060、WO9707117、WO9711697、WO9722620、WO9723508、WO9724369和WO9734604中。
含有釋放生長激素化合物的組合物，對于生長激素釋放效力以及生物利用率是非常重要的。因此，本發(fā)明的目的是提供具有釋放生長激素特性的新的化合物。而且，本發(fā)明的目的是提供新的釋放生長激素的化合物(生長激素促分泌劑)，它是特異性的和/或選擇性的，并且沒有或基本上沒有副作用，例如釋放LH、FSH、TSH、ACTH、后葉加壓素、催產素、皮質醇和/或催乳激素。本發(fā)明的另一個目的是提供具有良好口服生物利用率的化合物。
發(fā)明概要本發(fā)明提供一些新的化合物，它們可在體外標準的試驗條件下直接作用于垂體細胞，而使其釋放生長激素。
這些釋放生長激素的化合物可在體外用作獨特的研究工具，特別是用于了解生長激素的分泌在垂體水平的調節(jié)機制。
而且本發(fā)明的釋放生長激素的化合物還可在體內應用，以提高內源性生長激素的釋放。
發(fā)明的詳細說明因此，本發(fā)明在寬范圍內涉及一種通式Ⅰ的化合物 其中R1為氫，或者C1-6烷基，它可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代；
a和d為相互獨立的0、1、2或3；b和c為相互獨立的0、1、2、3、4或5，條件是b+c為3、4或5，D為R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自為氫或C1-6烷基，它可任意被一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意構成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j各自為1或2，并且U為-O-、-S-或一個價鍵；h和f各自為0、1、2或3；g和e各自為0或1；M為一個價鍵、-CR6=CR7-、亞芳基、雜亞芳基、-O-或-S-；R6和R7各自為氫，或者C1-6烷基，它可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代；G為-O-(CH2)k-R8， J為-O-(CH2)l-R13， 其中R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16和R17相互獨立地為氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；
k和l各自為0、1或2；E為-CONR18R19、-COOR19、-(CH2)m-NR18SO2R20、-(CH2)m-NR18COR20、-(CH2)m-OR19、-(CH2)m-OCOR20、-CH(R18)R19、-(CH2)m-NR18-CS-NR19R21、或-(CH2)m-NR18-CO-NR19R21；或者E為-CONR22NR23R24，其中R22為氫、可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一個或多個C1-6烷基取代的芳基或雜芳基；R23為可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基，或者為C1-7?；徊⑶襌24為氫、可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一個或多個C1-6烷基取代的芳基或雜芳基；或者R22和R23與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R22和R24與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R23和R24與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；其中m為0、1、2或3，R18、R19和R21各自為氫或C1-6烷基，它可任意被鹵素、-N(R25)R26(其中R25和R26各自為氫或C1-6烷基)、羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷基碳酰氧基或芳基取代；或者R19為 其中Q為-CH＜或-N＜，K和L各自為-CH2-、-CO-、-O-、-S-、-MR27-或一個價鍵，其中R27為氫或C1-6烷基；n和o各自為0、1、2、3或4；R20為C1-5烷基、芳基或雜芳基；或者它的一種藥物可接受的鹽；條件是如果M為一個價鍵，則E為-CONR22NR23R24。
本發(fā)明在較窄的范圍內涉及一種通式Ⅰ的化合物 其中R1為氫，或者C1-6烷基，它可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代；a和d為相互獨立的0、1、2或3；b和c為相互獨立的0、1、2、3、4或5，條件是b+c為3、4或5，D為R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自為氫或C1-6烷基，它可任意被一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意構成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j各自為1或2，并且U為-O-、-S-或一個價鍵；h和f各自為0、1、2或3；g和e各自為0或1；M為-CR6=CR7-、亞芳基、雜亞芳基、-O-或-S-；R6和R7分別為氫，或者C1-6烷基，它可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代；G為-O-(CH2)k-R8， J為-O-(CH2)l-R13， 其中R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16和R17相互獨立地為氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；k和1分別為0、1或2；E為-CONR18R19、-COOR19、-(CH2)m-NR18SO2R20、-(CH2)m-NR18COR20、-(CH2)m-OR19、-(CH2)m-OCOR20、-CH(R18)R19、-(CH2)m-NR18-CS-NR19R21、或-(CH2)m-NR18-CO-NR19R21；或者E為-CONR22NR23R24，其中R22為氫、可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一個或多個C1-6烷基取代的芳基或雜芳基；R23為可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基，或者為C1-7?；?；并且R24為氫、可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基；或者可任意被一個或多個C1-6烷基取代的芳基或雜芳基；或者R22和R23與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R22和R24與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R23和R24與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者其中m為0、1、2或3，R18、R19和R21各自為氫或C1-6烷基，它可任意被鹵素、-N(R25)R26(其中R25和R26各自為氫或C1-6烷基)、羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷基碳酰氧基或芳基取代；或者R19為 其中Q為-CH＜或-N＜，K和L各自為-CH2-、-CO-、-O-、-S-、-NR27-或一個價鍵，其中R27為氫或C1-6烷基；n和o各自為0、1、2、3或4；R20為C1-5烷基、芳基或雜芳基；或者它的一種藥物可接受的鹽。
此外，式Ⅰ化合物可包括其任何的旋光異構體，其形式可為可分的、純的或部分純化的旋光異構體，或者是它們的外消旋混合物。每當存在一個或多個手性碳原子時，這個或這些手性中心可為R和/或S構型，或者為R和S的混合體。
另外，在可能的幾何異構體中，此式Ⅰ化合物可具有一個或多個碳-碳雙鍵。而且，除非指定一種特殊的幾何異構體，本發(fā)明將包括可能的立體異構體(E或Z異構體)。
在式Ⅰ化合物的一個實施例中，R1為氫。在式Ⅰ化合物的另一個實施例中，R1為C1-6烷基，如C1-4烷基，特別是甲基。
在式Ⅰ化合物的再一個實施例中，a為1。
在式Ⅰ化合物的另外再一個實施例中，d為1。
在式Ⅰ化合物的再一個實施例中，b為1。
在式Ⅰ化合物的另外再一個實施例中，b為2。
在式Ⅰ化合物的再一個實施例中，b為3。
在式Ⅰ化合物的另外再一個實施例中，c為1。
在式Ⅰ化合物的再一個實施例中，c為2。
在式Ⅰ化合物的另外再一個實施例中，c為3。
在式Ⅰ化合物的一個特殊實施例中，b+c為4。
在式Ⅰ化合物的再一個實施例中，D為R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自為氫或C1-6烷基，它可任意被一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者
R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意形成-(CH2)i-(CH2)j-，其中i和j各自為1或2，并且U為-O-、-S-或一個價鍵，h和f各自為0、1、2和3；g和e各自為0或1；M為-CR6=CR7-、亞芳基、雜亞芳基、-O-或-S-，其中R6和R7各自為氫或C1-6烷基。在一個實施例中R2為氫。在第二個實施例中R3為氫。在第三個實施例中R3為C1-6烷基，特別是甲基。在另一個實施例中R4為氫。在另一個實施例中R4為C1-6烷基，尤其為甲基。在另一個實施例中R3和R4形成-(CH2)i-U-(CH2)j-。在再一個實施例中i為1。在另一個實施例中i為2。在另一個實施例中j為1。在另一個實施例中j為2。在另一個實施例中U為一個價鍵。在另一個實施例中R3和R4形成-(CH2)3-。在另一個實施例中h為0。在另一個實施例中f為0。在另一個實施例中f為1。在另一個實施例中g為0。在另一個實施例中e為0。在另一個實施例中e為1。在另一個實施例中M為-CR6=CR7-、亞芳基、-O-或-S-。在另一個實施例中R6和R7均為氫，或者R6和R7中的一個為甲基，另一個則為氫。在另一個實施例中M為-CR6=CR7-的E-異構體。在另一個實施例中M為-CH=CH-。在另一個實施例中M為-C(CH3)=CH-。在另一個實施例中M為亞芳基，尤其為亞苯基。
在式Ⅰ化合物的另一個實施例中D為R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自為氫或C1-6烷基，它可任意被一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意形成-(CH2)i-(CH2)j-，其中i和j各自為1或2，并且U為-O-、-S-或一個價鍵，h和f各自為0、1、2和3；g和e各自為0或1；M為一個價鍵。在一個實施例中R2為氫。在第二個實施例中R3為氫。在第三個實施例中R3為C1-6烷基，特別是甲基。在另一個實施例中R4為氫。在另一個實施例中R4為C1-6烷基，尤其為甲基。在另一個實施例中R3和R4形成-(CH2)i-U-(CH2)j-。在再一個實施例中i為1。在另一個實施例中i為2。在另一個實施例中j為1。在另一個實施例中j為2。在另一個實施例中U為一個價鍵。在另一個實施例中R3和R4形成-(CH2)3-。在另一個實施例中h為0。在另一個實施例中f為0。在另一個實施例中f為1。在另一個實施例中g為0。在另一個實施例中e為0。在另一個實施例中e為1。在式Ⅰ化合物的優(yōu)選實施例中D為(1E)-4-氨基-4-甲基戊-1-烯基、(1E)-4-氨基-2,4-二甲基戊-1-烯基、(1E)-3-(1-氨基環(huán)丁基)丙-1-烯基、1-氨基-1-甲乙基或3-氨基甲苯基。
在式Ⅰ化合物的另一個實施例中G為-O-(CH2)k-R8、 其中R8、R9、R10、R11和R12相互獨立地為氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；k為0、1或2。在另一個實施例中R8、R9、R10、R11和R12相互獨立地為氫。在再一個實施例中R8、R9、R10、R11和R12中的一個為苯基，并且其它的為氫，特別是R10為苯基。在另一個實施例中R8為苯基。在另一個實施例中k為1。在另一個實施例中G為苯基、1-萘基或2-萘基，優(yōu)選苯基或2-萘基。在另一個實施例中G為芐氧基。在另一個實施例中G為1H-吲哚基。在另一個實施例中G為聯苯-4-基。
在上面式Ⅰ化合物中G優(yōu)選為2-萘基、芐氧基、1H-吲哚基或聯苯-4-基。
在式Ⅰ化合物的另一個實施例中J為 其中R13、R14、R15、R16和R17相互獨立地為氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基。在另一個實施例中J為 在一個特別的實施例中J為 在一個優(yōu)選實施例中R13、R14、R15、R16和R17均為氫。
在式Ⅰ化合物的另一個實施例中E為-CONR18R19、-COOR19或-(CH2)m-OR19。其中m為0、1、2或3。R18和R19各自為氫或C1-6烷基，它可任意被鹵素、-N(R25)R26(其中R25和R26各自為氫或C1-6烷基)、羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基碳酰氧基或芳基取代。在一個特別的實施例中E為-CONR18R19。在另一個實施例中R18和R19各自為氫或C1-6烷基。在一個特別的實施例中R18和R19中的一個為氫，而另一個為甲基。在另一個實施例中E為-COOR19。在一個特別的實施例中R19為C1-6烷基，特別是乙基。
在另一個實施例中E為-CONR22NR23R24。其中R22為氫、C1-6烷基(可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代)或者芳基或雜芳基(可任意被一個或多個C1-6烷基取代)；R23為C1-6烷基(可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代)或者C1-7?；?；R24為氫、C1-6烷基(可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代)或者芳基或雜芳基(可任意被一個或多個C1-6烷基取代)；或者R22和R23與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R22和R24與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R23和R24與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代。在另一個實施例中R22為氫。在另一個實施例中R22為C1-6烷基，諸如C1-4烷基，特別是甲基。在另一個實施例中R23為C1-6烷基，諸如C1-4烷基，特別是甲基。在另一個實施例中R23為C1-7?；T如C2-4?；?，特別是乙?；?。在式Ⅰ化合物的另一個實施例中R24為氫。在另一個實施例中R24為C1-6烷基，諸如C1-4烷基，特別是甲基。在一個特殊實施例中R22為氫，并且R23和R24為C1-6烷基，諸如C1-4烷基，特別是甲基。在另一個實施例中R22和R23可與連接于它們的的氮原子一起形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代。這種雜環(huán)系，包括R22和R23，可為芳族或非芳族的，并且可選自例如吡唑、噠嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮雜萘、肉啉、吡唑烷或吡唑啉。在另一個實施例中R22和R24可與連接于它們的的氮原子一起形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代。這種雜環(huán)系，包括R22和R24，可為芳族或非芳族的，并且可選自例如吡唑、噠嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮雜萘、肉啉、吡唑烷或吡唑啉。在式Ⅰ化合物的另一個實施例中R23和R24可與連接于它們的的氮原子一起形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代。這種雜環(huán)系，包括R22和R23，可為芳族或非芳族的，并且可選自例如氮丙啶、二噻嗪、吡咯、咪唑、吡唑、異吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、咪唑啉、吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、二氫吲哚、異二氫吲哚或嗎啉。在一個特殊實施例中，R23和R24與連接于它們的氮原子一起形成吡咯烷。
當R22和R23形成一種雜環(huán)系，R23和R24也可同時形成一種雜環(huán)系，或者R24可為氫、可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一個或多個C1-6烷基取代的芳基或雜芳基。
當R22和R24形成一種雜環(huán)系，R23和R24也可同時形成一種雜環(huán)系，或者R23可為可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基、或者C1-7?；?br> 在上面式Ⅰ化合物中，E優(yōu)選為(甲氨基)碳基、N,N-二甲基肼基羰基、乙氧基羰基、或(吡咯烷-1-基)氨基羰基。
式Ⅰ化合物一種特別優(yōu)選的基團為那些具有式Ia的基團， 其中R1、D、G、E、J、a和d均如上所述。
式Ⅰ化合物另一種特別優(yōu)選的基團為那些具有式Ib的基團， 其中R1、D、G、E、J、a和d均如上所述。
優(yōu)選的本發(fā)明的式Ⅰ化合物為1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(1R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯?；?N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺
1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-((2R)-2-{N-[(2E)-4-(1-氨基環(huán)丁基)丁-2-烯酰基]-N-甲基氨基}-3-(聯苯- 2-氨基-N-[(1R)-2-[4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-1(3R)-3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-芐氧基甲基-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺
2-氨基-N-[(1R)-2-[(3R)-3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯
1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；被?-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰]-3-芐基哌啶-3-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰]-3-芐基哌啶-3-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-(3-(氨甲基)苯甲酰氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰]-3-芐基哌啶-3-羧酸乙酯
(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-2-[4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基碳基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基甲基)-2-氧乙基}酰胺
2-氨基-N-{2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((聯苯-4-基)甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{2-[3-芐基-3-(N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺
2-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 1-[(2R)-2-(2-氨基-2-甲基丙酰氨基)-3-(1-H-吲哚-3-基)丙酰]-3-芐基哌啶-3-羧酸(吡咯-1-基)酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’,N’-三甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 和它們的藥物可接受的鹽。
通用方法方案Ⅰ 本發(fā)明所用的并在上面方案Ⅰ中說明的方法是基于本領域所熟知的肽偶合反應，而且它不應該被理解為是對本發(fā)明進行任何限制。在第一步中，通過一種諸如碳化二亞胺和羥基氮雜苯并三唑(HOAt)的偶合劑將一種胺(1)與一種羧酸偶合為一種酰胺。在進行下一步偶合之前，應用本領域技術人員所熟知的方法可除去適宜的保護基，諸如叔丁基氧基羰基(Boc)，因此而產生化合物(2)。也可以免用保護基。然后通過一種偶合劑，將(2)與一種式D-COOH的羧酸偶合，而產生化合物(3)。方案Ⅱ 可按照方案Ⅱ中說明的方法制備通式結構Ⅰ的化合物，它在C末端含有一個肼。本發(fā)明所用的和在上面方案Ⅱ中說明的方法是基于本領域所熟知的肽偶合反應，而且它不應該被理解為是對本發(fā)明進行任何限制。在第一步中，應用一種適宜的偶合劑，諸如1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺氫氯化物、1-羥基苯并三唑，或者另一種在適宜溶劑(諸如二甲基甲酰胺或二氯甲烷)中進行肽偶合的已知偶合劑，將一種單、二或三取代肼或腙(4)和一種適宜的保護氨基酸偶合，而形成化合物(5)。然后通過一種偶合劑，將酰胺(5)和一種羧酸偶合而產生化合物(6)。然后通過一種偶合劑，將(6)與一種式D-COOH的羧酸偶合而產生化合物(7)。在此方法中，在進行下一步偶合之前，應用本領域技術人員所熟知的方法可除去適宜的保護基，諸如叔丁基氧基羰基(Boc)。也可以免用保護基。按照本領域已知的方法以及例如T.W.Green所述的方法(《有機合成中的保護基》，第2版，John Wiley和Sons，紐約，1991)可對這些適宜的氨基酸進行保護和去保護。
因為式Ⅰ化合物是非天然的，特別是因為非天然酰胺鍵模擬鍵取代了天然的酰胺鍵，所以對于通過酶而進行的蛋白降解作用，它們表現出強的抵抗性。與已知激素釋放肽相比，本發(fā)明化合物對蛋白降解作用抵抗性的增強，其生物利用度將比前面文獻所提到的肽的生物利用度估計會高。
在上面結構式和本發(fā)明整個說明書中，術語的含義說明如下上面指定的C1-6烷基、C1-6亞烷基、C1-4烷基或C1-4亞烷基將要包括直鏈或者支鏈或者環(huán)結構中的指定長度的那些烷基或亞烷基。直鏈烷基的實例有甲基、乙基、丙基、丁基、戊基和己基，以及它們相應的二價部分，諸如乙烯。支鏈烷基的實例有異丙基、仲丁基、叔丁基、異戊基和異己基，以及它們相應的二價部分，諸如異丙烯。環(huán)烷基的實例有C3-6環(huán)烷基，諸如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基，以及它們相應的二價部分，諸如環(huán)丙烯。
上面指定的C1-6烷氧基將要包括直鏈或者支鏈或者環(huán)結構中的指定長度的那些烷氧基。直鏈烷氧基的實例有甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基和己氧基。支鏈烷氧基的實例有異丙氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、異戊氧基和異己氧基。環(huán)烷氧基的實例有環(huán)丙氧基、環(huán)丁氧基、環(huán)戊氧基和環(huán)己氧基。
上面指定的C1-7?；鶎⒁ㄖ辨溁蛘咧ф溁蛘攮h(huán)結構中的指定長度的那些?；?。直鏈?；膶嵗屑柞；?、乙?；⒈；⒍□；⑽祯；?。支鏈酰基的實例有異丁?；?、異戊酰基和新戊?；?。環(huán)?；膶嵗协h(huán)戊基羰基和環(huán)己基羰基等。
在本發(fā)明說明書中，術語“芳基”將要包括單價碳環(huán)的芳環(huán)部分，或為單環(huán)，或為二環(huán)，或為多環(huán)，例如選自由苯基和萘基組成的組，它可任意被一個或多個C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素、氨基或芳基取代。
在本發(fā)明說明書中，術語“亞芳基”將要包括二價碳環(huán)的芳環(huán)部分，或為單環(huán)，或為二環(huán)，或為多環(huán)，例如選自由亞苯基和亞萘基組成的組，它可任意被一個或多個C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素、氨基或芳基取代。
在本發(fā)明說明書中，術語“雜芳基”將要包括單價雜環(huán)的芳環(huán)部分，或為單環(huán)，或為二環(huán)，或為多環(huán)，例如選自由吡啶基、1-H-四唑-5-基、噻唑基、咪唑基、吲哚基、嘧啶基、噻二唑基、吡唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻吩基、喹啉基、吡嗪基或異噻唑基組成的組，它可任意被一個或多個C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素、氨基或芳基取代。
在本發(fā)明說明書中，術語“雜亞芳基”將要包括二價雜環(huán)的芳環(huán)部分，或為單環(huán)，或為二環(huán)，或為多環(huán)，例如選自由吡啶二基、1-H-四唑二基、噻唑二基、咪唑二基、吲哚二基、嘧啶二基、噻二唑二基、吡唑二基、噁唑二基、異噁唑二基、噁二唑二基、噻吩二基、喹啉二基、吡嗪二基或異噻唑二基組成的組，它可任意被一個或多個C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵素、氨基或芳基取代。
在本發(fā)明說明書中，術語“雜環(huán)系”將要包括芳環(huán)和非芳環(huán)部分，它可為單環(huán)、二環(huán)或多環(huán)，并且在它們的環(huán)結構中包含至少一個氮原子(諸如一個、二個或三個)和任意一個或多個其它雜原子(諸如一個或二個)，例如硫或氧原子。這個雜環(huán)系優(yōu)先選自吡唑、噠嗪、三嗪、吲唑、2,3-二氮雜萘、1,2-二氮雜萘、吡唑烷、吡唑啉、氮丙啶、二噻嗪、吡咯、咪唑、吡唑、異吲哚、吲哚、嘌呤、吡咯烷、吡咯啉、咪唑烷、咪唑啉、吡唑烷、吡唑啉、哌啶、哌嗪、二氫吲哚、異二氫吲哚或嗎啉。
術語“鹵素”將要包括氯(Cl)、氟(F)、溴(Br)和碘(I)。
本發(fā)明的化合物可具有一個或多個不對稱中心(手性碳原子)，并且在本發(fā)明的范圍內將包括可分離、純化或部分純化的立體異構體或它們的外消旋混合物。
本發(fā)明的化合物可任意為一種藥物可接受的鹽的形式，諸如式Ⅰ化合物的藥物可接受的酸加成鹽，它包括將式Ⅰ化合物與一種無機或有機酸反應而制備的那些鹽，這些無機或有機酸諸如為鹽酸、氫溴酸、硫酸、乙酸、磷酸、乳酸、馬來酸、扁桃酸、苯二甲酸、檸檬酸、戊二酸、葡糖酸、甲磺酸、水楊酸、琥珀酸、酒石酸、甲苯磺酸、三氟乙酸、氨基磺酸或富馬酸和/或水。
可以藥物可接受的酸加成鹽的形式應用式Ⅰ化合物，或者在適宜的地方以一種堿金屬或堿土金屬或者低級烷基銨鹽進行應用。這種鹽的形式其活性等級被認為是與游離堿形式的活性等級大致相同。
另一方面，本發(fā)明涉及一種藥物組合物，它含有作為活性組分的通式Ⅰ的化合物或其藥物可接受的鹽和一種藥物可接受的載體或稀釋劑。
可按照常規(guī)技術制備包含本發(fā)明化合物的藥物組合物，例如在《Remington’s藥物科學》1985或在Remington《科學和藥物實驗》，19版(1995)中所述的方法。此組合物可為常規(guī)的形式，例如膠囊、片劑、氣霧劑、溶液、懸浮劑或局部涂敷劑。
所用的藥物載體或稀釋劑可為常用的固體或液體載體。固體載體的實例為乳糖、石膏粉、蔗糖、環(huán)糊精、滑石、凝膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂、硬脂酸或纖維素的低級烷基醚。液體載體的實例為糖漿、花生油、橄欖油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、聚氧乙烯或水。
相似地，此載體或稀釋劑可包括本領域已知的各種緩釋物質，諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，單用或與一種蠟混合應用。
如果一種固體載體用于口服，則可將此制劑制成片劑、以粉末或小丸的形式放在一種硬凝膠膠囊中、或者它可為錠劑或糖錠的形式。固體載體的量可有較大的變化，但是通常為25mg左右至1g左右。如果應用一種液體載體，此制劑可為糖漿、乳劑、軟凝膠膠囊或無菌注射液的形式，注射液諸如為含水或非水液體懸浮液或溶液。
按照常規(guī)制片技術制備的典型片劑可含有藥芯活性化合物(可為自由化合物或其鹽)100mg膠體二氧化硅(Aerosil) 1.5mg纖維素、微晶(Avicel)70mg改良的纖維素樹膠(Ac-Di-Sol) 7.5mg硬脂酸鎂包衣HPMC大約9mg*Mywacett 9-40 T 大約0.9mg*酰化單酸甘油酯用作涂膜的增塑劑。
用于鼻腔給藥，此制劑中的式Ⅰ化合物可溶解或懸浮于液體載體中，特別是一種水載體中，以利于氣霧給藥。此載體可含有添加劑，諸如例如丙二醇的加溶劑、表面活性劑、諸如卵磷脂(磷脂酰膽堿)或環(huán)糊精的吸收增強劑、或者諸如對羥基苯甲酸酯(parabenes)的防腐劑。
通常按單位劑量形式分配本發(fā)明的化合物，每單位劑量由50-200mg的活性組分和一種藥物可接受的載體組成。
本發(fā)明化合物作為藥物應用于患者(例如人)時，適宜的劑量為0.01-500mg/天，例如可從5至50mg左右，諸如每劑可約為10mg。
在另一方面，本發(fā)明涉及單位劑量形式的一種藥物組合物，它包含的活性組分是約為10至200mg的通式Ⅰ的化合物或其一種藥物可接受的鹽。
已經證明通式Ⅰ的化合物具有在體內釋放內源性生長激素的作用。因此此化合物可用于治療需要提高血漿生長激素水平的疾病，諸如生長激素不足的人或老年患者，或者家畜。
因而，在一個具體方面，本發(fā)明涉及一種用于刺激垂體釋放生長激素的藥物組合物，此組合物含有作為活性組分的一種通式Ⅰ的化合物或其藥物可接受的鹽與一種藥物可接受的載體或稀釋劑。
在另一方面本發(fā)明涉及一種刺激垂體釋放生長激素的方法，此方法包括將一種有效量的通式Ⅰ的化合物或其藥物可接受的鹽給予需要它的患者。
在另一方面，本發(fā)明涉及通式Ⅰ的化合物或其藥物可接受的鹽在一種藥物制備中的應用，此藥物用于刺激垂體釋放生長激素。
本領域的技術人員均知道，生長激素在人體中的現有和潛在用途是非常廣泛和多種多樣的。因而，式Ⅰ化合物可用于刺激垂體釋放生長激素，并且因此具有與生長激素相似的作用和用途。式Ⅰ化合物用于刺激老年人生長激素的釋放；預防糖皮質激素分解代謝的副作用；治療和/或預防骨質疏松癥；治療慢性疲勞綜合征(CFS)；治療急性疲勞綜合征和選擇性手術后的肌肉脫失；刺激免疫系統(tǒng)；加速傷口愈合；加速骨折修復；加速骨折復合例如盤狀骨生成；治療繼發(fā)性骨折的消耗；治療生長遲緩；治療腎衰或腎功不全所致的生長遲緩；治療心肌??；治療慢性肝??；治療血小板減少癥；治療節(jié)段性回腸炎；治療短腸綜合征；治療慢性阻塞性肺病(COPD)；治療與移植相關的并發(fā)癥；治療包括生長激素不足的兒童的生理性身材矮小和與慢性疾病相關的身材矮??；治療肥胖和與肥胖相關的生長遲緩；治療厭食；治療與Prader-Willi綜合征和特納綜合征相關的生長遲緩；提高不完全性生長激素不敏感綜合征患者的生長速度；加速燒傷患者的恢復并縮短住院期；治療宮內發(fā)育遲緩、骨骼發(fā)育不良、皮質醇過多癥、庫欣綜合征；誘導搏動的生長激素釋放；應激患者生長激素的置換；骨軟骨發(fā)育不良、Noonan’s綜合征、精神分裂癥、抑郁癥、阿爾茨海默病、傷口愈合延遲和精神喪失的治療；肺機能不良和呼吸機依賴性的治療；心衰或相關的血管機能不良的治療；心功損害的治療；心肌梗塞的治療或預防；降低血壓；心室機能不良的保護或再灌注的預防；慢性透析成人患者的治療；減弱大手術后蛋白分解代謝的反應；減輕癌癥或艾滋病等慢性病所致的惡病質；包括胰島細胞增殖癥的高胰島素血癥的治療；排卵誘導的輔助治療；刺激胸腺發(fā)育并預防年齡相關的胸腺機能下降；免疫抑制患者的治療；肌肉委縮的治療；與艾滋病相關的消耗的治療；增強肌肉力量、動度、保持皮膚厚度、代謝平衡、虛弱老年人腎平衡的保持；成骨細胞的激發(fā)；骨再成形和軟骨生長；食物攝取的調節(jié)；寵物動物免疫系統(tǒng)的激發(fā)和寵物衰老疾病的治療；促進家畜的生長和羊毛生長；代謝綜合征(綜合征X)的治療；哺乳動物(例如人)中胰島素抗性的治療，包括NIDDM；睡眠質量的改善以及REM睡眠延長和REM潛伏期縮短所致衰老的相對生長激素減少的校正；以及低溫的治療。也將要包括預防性治療。
對于上面所說的那些適應癥來說，劑量將隨所用式Ⅰ化合物、給藥的方式和所需要的治療的不同而不同。但是，對患者和動物使用一般劑量水平可獲得內源性生長激素的有效釋放，此劑量水平在0.0001和100mg/kg體重/天之間。而且按照上面的劑量水平進行給藥時，式Ⅰ化合物沒有或基本沒有副作用，這種副作用是例如LH、FSH、TSH、ACTH、抗利尿激素、催產素、氫化可的松和/或催乳激素的釋放。通常適用于口、鼻、肺或經皮給藥的劑量含約0.0001mg至約100mg的式Ⅰ化合物與一種藥物可接受的載體或稀釋劑混合，式Ⅰ化合物優(yōu)選為0.001mg左右至50mg左右。
本發(fā)明的藥物組合物或者也可以是將式Ⅰ化合物與具有不同活性的一種或多種化合物組合，此不同活性的化合物例如為一種抗生素或其它藥物活性物質。
給藥途徑可以是能有效地將活性化合物傳遞至適宜或需要作用的位點，諸如經口、鼻、肺、皮膚或胃腸外給藥，優(yōu)選口服給藥。
式Ⅰ化合物除了藥物應用外，它們還可用作體外的工具，以用于研究生長激素釋放的調節(jié)。
式Ⅰ化合物還可用作體內工具，以評價垂體生長激素的釋放能力。例如可檢測這些化合物給藥前后人血清樣本中的生長激素。比較每份血清樣本的生長激素可直接地確定患者垂體釋放生長激素的能力。
可將式Ⅰ化合物用于經濟上重要的動物，以提高它們的生長速度和生長程度，并能提高奶產量。
促生長激素分泌的式Ⅰ化合物的另一個用途是與其它促分泌素合用，這些促分泌素諸如為GHRP(2或6)、GHRH及其類似物、生長激素及其類似物，或包括IGF-1和IGF-2的生長調節(jié)素。
藥理學方法可評價式Ⅰ化合物在大鼠垂體原始培養(yǎng)物中體外釋放生長激素的效率和功能，并且可按照下述方法進行這種評價。
大鼠垂體細胞的分離群是O.Sartor等在《內分泌學116》1985，第952-957頁中所述的改良型。從丹麥Lille Skensved的Mφllegaard購買雄性白化體Sprague-Dawley大鼠(250+/-25g)。將這些鼠養(yǎng)在分組飼育箱中(每箱4只)，并放在12小時光照周期的房間內。室溫在19-24℃之間，濕度為30-60％。
對這些鼠處死，并分割垂體。除去神經中間葉，立即將剩余組織放于冰冷的分離緩沖劑中(添加有0.25％D-葡萄糖、2％非基本氨基酸(Gibco 043-01140)和1％牛血清白蛋白(BSA)(Sigma A-4503)的Gey’s培養(yǎng)基(Gibco 041-04030))。將此組織切成小片，轉移至添加3.8mg/ml胰蛋白酶(Worthington#3707TRL-3)和330mg/ml脫氧核糖核酸(SigmaD-4527)的分離緩沖劑中。在37℃,95/5％的O2/CO2氣氛中，以70轉/分將此混合物培養(yǎng)35分鐘。然后在上面的緩沖劑中將此組織沖洗3遍。用標準巴斯德移液管將此組織抽吸為單細胞。分散后，通過一種尼龍濾紙(160mm)過濾此細胞，以除去未水解的組織。用添加胰蛋白酶抑制劑(0.75mg/ml,Worthington#2829)的分離緩沖劑沖洗此細胞懸浮液3遍，最后將其再懸浮于培養(yǎng)基中，此培養(yǎng)基為添加25mM HEPES(Sigma H-3375)、4mM谷氨酰胺(Gibco 043-05030H)、0.075％碳酸氫鈉(Sigma S-8875)、0.1％非基本氨基酸、2.5％胎牛血清(FCS,Gibco011-06290)、3％馬血清(Gibco 034-06050)、10％新鮮大鼠血清、1nMT3(Sigma T-2752)和40mg/l地塞米松(Sigma D-4902)的DMEM(Gibco 041-01965)，PH為7.3，密度為2×105細胞/ml。以200ml/池，將此細胞種在微滴定板(Nunc，丹麥)上，并在37℃和8％的CO2下將其培養(yǎng)3天。
培養(yǎng)后，用刺激緩沖劑(添加1％BSA(Sigma A-4503)、0.25％D-葡萄糖(Sigma G-5250)和25mM HEPES(Sigma H-3375)的Hanks平衡鹽溶液(Gibco041-04020)，pH為7.3)將此細胞沖洗2遍，然后在37℃預保溫l小時。用90ml刺激緩沖劑(37℃)交換此緩沖劑。加入10ml試驗化合物溶液，在37℃和5％CO2下將此板培養(yǎng)15分鐘。傾析此培養(yǎng)基，并在rGH SPA試驗系統(tǒng)中分析GH的含量。
進行試驗的所有化合物的劑量范圍為10pM至100nM。應用Hill等式(圖表P,Biosoft)建立一種劑量-反應關系。用GHRP-6的Emax的百分比(％)表示其效率(最大GH釋放，Emax)。將功能(EC50)確定為引起GH釋放的最大刺激的半量的濃度。
可用下面描述的方法評價式Ⅰ化合物的代謝穩(wěn)定性將化合物以1mg/ml的濃度溶于水中。將25ml此溶液加到175ml相關的酶溶液中(使酶底物比例(w/w)大約為1∶5)。將此溶液保持在37℃過夜。用分子離子的選擇離子檢測的流量注射電噴(electrospray)質譜分析法(ESMS)對10ml各種降解溶液進行分析，將這與相應的零樣本進行對比。與零樣本相比，如果信號下降超過20％，則通過HPLC和質譜分析法對剩余的溶液進行分析，以便精確地確定降解的程度和位點。
在穩(wěn)定性試驗中已經包括了幾種標準肽(ACTH 4-10、血管緊張素1-14和胰高血糖素)，以便檢驗各種溶液降解肽的能力。
標準肽(血管緊張素1-14、ACTH 4-10和胰高血糖素)從美國密蘇里州的Sigma公司購得。
酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶、彈性蛋白酶、氨肽酶M和羧肽酶Y和B)全部是從Boehringer Mannheim GmbH(曼海姆，德國)購得。
胰酶混合物胰蛋白酶、糜蛋白酶和彈性蛋白酶在100mM碳酸氫銨中，PH為8.0(所有濃度均為0.025mg/ml)。
羧肽酶混合物羧肽酶Y和B在50mM乙酸銨中，PH為4.5(濃度均為0.025mg/ml)。
氨肽酶M溶液氨肽酶M(0.025mg/ml)在100mM碳酸氫銨中，PH為8.0。
用兩種不同的質譜儀進行質譜分析。在Sciex APIⅢ三相四極LC-MS儀器(Sciex儀器，Thornhill，安大略)上裝有一種電噴(electrospray)離子源和一種Bio-lon20飛行時間等離子解吸儀(Bio-Ion Nordic AB,Uppsala，瑞典)。
在APIⅢ儀上在所分析物的流量注射的同時用所測定的分子離子的單離子檢測，以此進行此化合物的定量測定(在降解前和降解后)。通過ABI 140BHPLC儀(Perkin-Elmer應用生物系統(tǒng)部，Foster市，加拿大)控制的液體流量(MeOH水1∶1)為100ml/min。將儀器的參數設定在標準操作條件，并用最強的分子離子進行SIM檢測(在大多數情況中，這相當于兩倍的帶電分子離子)。
將樣本用在硝化纖維包被的靶目標和標準儀器裝置上，通過用等離子解吸質譜分析(PDMS)進一步進行降解產物的鑒定。在此測定的質量的精度通常優(yōu)于0.1％。
用一種標準乙腈TFA分離梯度，用HY-TACH C-18反相4.6×105mmHPLC柱進行降解產物的離析和分離。所用的HPLC系統(tǒng)為HP1090M(惠普公司，Palo Alto，加拿大)。
+穩(wěn)定(降解溶液中24后SIM信號減弱小于20％)-不穩(wěn)定(降解溶液中24后SIM信號減弱大于20％)在此描述的任何新特征或特征的組合均被認為是本發(fā)明所必要的。
實施例在下面的實施例中進一步說明制備式Ⅰ化合物和包含該化合物的制劑的方法，但是它并不是要對本發(fā)明構成任何限制。
通過高性能液相色譜(HPLC)、核磁共振(NMR,Bruker 400MHz)或液相色譜-質譜(LC-MS)確定化合物的結構。每兆(ppm)部分地給出NMR移動，而且僅給出選擇峰。mp是熔點，用℃表示。用W.C.Still等在有機化學雜志1978,43,2923-2925中所述的技術在Merck硅膠60(Art9385)上進行柱層析。用作原材料的化合物或者是已知化合物，或者是每個本領域的普通技術人員用已知方法很容易制備的化合物。所用的甲醇/氨溶液是含有10％氨的甲醇溶液。
HPLC分析方法A1.
通過在42℃下以1mL/分鐘的速率洗脫的218TP54 4.6mm×250mm 5mC-18二氧化硅柱(The Seperation Group,Hesperia)上的214、254、276和301nm處，用紫外檢測法進行逆向分析。此柱用含有5％乙腈的緩沖液平衡，緩沖液由0.1M硫酸銨組成并用4M硫酸調節(jié)PH至2.5，注射后，樣品用梯度為5％-60％的乙腈緩沖液在50分鐘內洗脫，所用緩沖液與上同。
方法B1.
通過在42℃下以1mL/分鐘的速率洗脫的218TP54 4.6mm×250mm 5mC-18二氧化硅柱(The Seperation Group,Hesperia)上的214、254、276和301nm處的紫外檢測進行逆向分析。此柱用含有5％乙腈的0.1％的TFA水溶液平衡，注射后，樣品用含有梯度為5％-60％(乙腈+0.1％TFA)的相同緩沖水溶液在50分鐘內洗脫。
LC-MS分析用Water3mm×150mm 3.5m C-18 Symmetry柱和流速為20ml/分鐘的噴淋陽離子在PE Sciex AP1 100 LC/MS系統(tǒng)上進行LC-MS分析。此柱用線性梯度為5-90％乙腈、85-0％水和10％三氟乙酸(0.1％)/水在15分鐘內以1ml/分鐘的流速洗脫。
縮寫TLC薄層分析
DMSO 二甲亞砜min 分鐘h小時Boc 叔丁基氧羰基DMF 二甲基甲酰胺THF 四氫呋喃EDAC N-乙基-N’-二甲基氨丙基碳化二亞胺鹽酸鹽HOAt 1-羥基-1-氮雜苯并三唑DIEA 二異丙基乙胺TFA 三氟乙酸結構單元如加拿大化學雜志1977,55,906所述制備用于下列實施例的N-甲基化氨基酸。
實施例11-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；?N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 步驟AN-叔-丁基氧羰基-4-芐基哌啶-4-羧酸將N-叔-丁基氧羰基-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯(11.0g；32mmol)(如Gilligan等在醫(yī)藥化學1994,364-370中所述用芐基溴作烷基化劑)在(190ml)乙醇和(18％190ml)氫氧化鈉水溶液的混合物中回流7小時。在真空下將體積減至三分之一并用硫酸氫鈉將pH調至3。加(300ml)水并用(2×250ml)乙酸乙酯提取混合物。蒸發(fā)混合的有機相得到8.6g N-叔-丁基氧羰基-4-芐基哌啶-4-羧酸。1H-NMR:d(CDCl3)1.45(s,9H)；1.5(m(br)；2H)；2.08(m(br)；2H)；2.88(m(br)；2H)；2.89(s,2H)；3.95(m(br)；2H)；7.09-7.30(5arom.H).
步驟B4-芐基-4-甲基氨基甲酰基哌啶-1-羧酸叔-丁基酯將(3.0g；9.0mmol)N-叔-丁基氧羰基-4-芐基哌啶-4-羧酸溶于(25ml)二氯甲烷，并加入(1.8g；9.0mmol)EDAC和(1.3g；9.0mmol)HOAt。攪拌混合物15分鐘，然后加入(33％乙醇中；2.3ml；18mmol)甲胺和(1.6ml；9.0mmol)DIEA，并攪拌混合物過夜。加入(100ml)二氯甲烷，并用(50ml)飽和碳酸氫鈉水溶液和(10％,50ml)硫酸氫鈉沖洗，用MgSO4干燥并在真空下蒸發(fā)。用含有氨、乙醇和二氯甲烷(1∶7；92)的混合水溶液作洗脫劑在(90g)二氧化硅上層析殘余物，得到2.8g 4-芐基-4-甲基氨基甲?；哙?1-羧酸叔-丁基酯。1H-NMR:d(CDCl3)1.44(s,9H)；1.55(m(br)；2H)；1.98(m(br)；2H)；2.70(d,sH)；2.98(m(br)；2H)；2.89(s,2H)；3.87(m(br)；2H)；5.15(q(br)；1H)；7.01-7.32(5arom. H).步驟C4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺將(2.8g)4-芐基-4-甲基氨基甲?；哙?1-羧酸叔-丁基酯溶于TFA和二氯甲烷的混合液并攪拌40分鐘。在真空下去掉溶劑，將殘余物溶于(30ml)水并用(1N)氫氧化鈉水溶液將pH調至13。水相用(3×75ml)二氯甲烷提取，混合有機相用MgSO4干燥并在真空下蒸發(fā)，得到1.50g4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺。1H-NMR:d(CDCl3)1.80(td,2H)；2.14(d(br),2H)；2.70(d,3H)；2.81(s,2H)；2.85(dt,2H)；3.21(dt,2H)；5.25(t,1H)；7.00-7.35(5arom.H).步驟D
4-芐基-1-((2R)-2-甲基氨基-3-(2-奈基)丙酰)哌啶-4-羧酸甲基酰胺將(709mg；2.15mmol)(2R)-2-叔-丁基氧羰基氨基-N-甲基-3-(2-奈基)丙酸、(293mg 2.25mmol)HOAt和(412mg；2.25mmol)EDAC溶于(5ml)二氯甲烷，并攪拌15分鐘。加入(500mg；2.25mmol)4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺和(0.35ml)DIEA，并攪拌混合物過夜。加入(30ml)二氯甲烷，并將混合物用(20ml)飽和碳酸氫鈉水溶液和(10％,20ml)硫酸氫鈉水溶液沖洗，用MgSO4干燥并在真空下蒸發(fā)。用乙酸乙酯作洗脫劑在(40g)二氧化硅上層析殘余物，得到810mg 4-芐基-1-((2R)-2-(N-甲基-叔-丁基氧羰基氨基)-3-(2-萘基)丙酰)哌啶-4-羧酸甲基酰胺，將其溶于TFA/二氯甲烷(8+8ml)并在室溫下攪拌40分鐘。在真空下去掉溶劑，殘余物用飽和碳酸氫鈉溶液中和并用(50ml)乙酸乙酯提取。有機相用MgSO4干燥并蒸發(fā)得到729mg4-芐基-1-((2R)-2-甲基氨基-3-(2-萘基)丙酰)哌啶-4-羧酸甲基酰胺。
步驟E用步驟D中所述相同的偶合方法，將(360mg；0.82mmole)4-芐基-1-((2R)-2-甲基氨基-3-(2-萘基)丙酰)哌啶-4-羧酸甲基酰胺與(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5-甲基-2-己烯酸偶合。在-10℃下，如步驟D所述去掉N-末端叔-丁基氧羰基基團。粗產物在RP-18-Seppak(5g；Waters)上純化，所用梯度為0.1％TFA的100/0水/乙腈溶液至0.1％TFA的60/40水/乙腈溶液，得到306mg三氟乙酸鹽形式的標題化合物。1H-NMR:δ(MeOH)(主要旋轉異構體的選擇峰)1.30(s,3H)；1.31(a,3H)；2.10(AB-syst,2H)；2.55(s,3H)；5.81(m,1H).
HPLC:rt=31.88 min(A1)rt=33.30min(B1)ESMS:m/z:569.4(M+H)+實施例21-{(1R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基〕-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙?；鶀-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 如實施例1所述制備化合物，用(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5,3-二甲基-2-己烯酸代替步驟E中的(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5-甲基-2-己烯酸。
HPLC:rt=33.70 min(A1)rt=34.22min(B1)ESMS:m/z:583.4(M+H)+
HPLC:rt=34.53min(A1)rt=36.15min(B1)ESMS:m/z:595.4(M+H)+實施例41-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯?；?N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙?；鶀-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 如實施例1所述制備化合物，用(2R)-2-叔-丁基氧羰基氨基-N-甲基-3-(4-聯苯基)丙酸代替步驟D中的(2R)-2-叔-丁基氧碳基氨基-N-甲基-3-(2-萘基)丙酸，用(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5,3-二甲基-2-己烯酸代替步驟E中的(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5-甲基-2-己烯酸。
HPLCrt=35.15 min(A1)rt=36.83min(B1)ESMS:m/z:609.4(M+H)+實施例51-{(2R)-2-{N-[(2E)-4-(1-氨基環(huán)丁基)丁-2-烯?；鵠-N-甲基氨基}-3-(聯苯-4-基)丙酰)-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 如實施例1所述制備化合物，用(2R)-2-叔-丁基氧羰基氨基-N-甲基-3-(4-聯苯基)丙酸代替步驟D中的(2R)-2-叔-丁基氧羰基氨基-N-甲基-3-(2-萘基)丙酸，用(2E)-4-(1-(叔-丁基氧羰基氨基)環(huán)丁基)丁-2-烯酸代替步驟E中的(2E)-5-(叔-丁基氧羰基氨基)-5-甲基-2-己烯酸。
HPLC:rt=35.15min(A1)rt=36.68min(B1)ESMS:m/z:607.4(M+H)+
實施例62-氨基-N-[(1R)-2-[4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-羧酸叔-丁酯 向含有(0.75g,2.35mmol)4-芐基哌啶-1,4-二羧酸1-叔-丁酯(如Gilligan等在醫(yī)藥化學雜志1994,364-370中所述制備)的(10ml)二氯甲烷溶液中，加入(0.32mg,2.35mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑和(0.45g,2.35mmol)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)鹽酸碳化二亞胺，并將混合物攪拌30分鐘。然后加入(0.27ml,3.53mmol)N’,N’-二甲基肼和(0.52ml,3.06mmol)二異丙基乙胺，并將混合物攪拌2天。加入(100ml)二氯甲烷，混合物用(20ml)飽和碳酸氫鈉水溶液和(20ml)水沖洗，用MgSO4干燥，過濾并在真空下濃縮。所得油在(40g)二氧化硅上用(1∶2)庚烷/乙酸乙酯層析，得到0.76g呈無色油狀的4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-羧酸叔-丁酯。
HPLC:Rt=9.66min(H8)LC-MS:Rt=9.29min,m/z=362.0(M+1)4-芐基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基酰肼 在0℃下，向含有(0.76g,2.02mmol)4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-羧酸叔-丁酯的(2ml)二氯甲烷溶液中，加入(5ml)三氟乙酸，并將混合物攪拌60分鐘。用(20ml)乙醇驟冷，在真空下濃縮并用二氯甲烷洗提三次，得到定量收率的4-芐基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基酰肼。
LC-MS:Rt=5.64min,m/z=262.0(M+1)(2-(4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基)氨基甲酸叔-丁酯 向含有(0.37g,1.2mmol)2-叔-丁氧基羰基氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酸的(15ml)二氯甲烷和(5ml)二甲基甲酰胺的溶液中，加入(0.16mg,1.20mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑和(0.23g,1.2mmol)1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)鹽酸碳化二亞胺，并將混合物攪拌30分鐘。然后加入(0.26g,1.0mmol)4-芐基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基酰肼和(0.69ml,4.0mmol)二異丙基乙胺，并將混合物攪拌過夜。加入(100ml)二氯甲烷，混合物用(20ml)飽和碳酸氫鈉水溶液和(20ml)水中洗，用MgSO4干燥，過濾并在真空下濃縮。所得油在(40g)二氧化硅上用(9∶1)二氯甲烷/(10％氨的乙醇溶液〕層析，得到0.43g呈無色油狀的(2-(4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基)氨基甲酸叔-丁酯。
HPLC:Rt=10.45min(H8)LC-MS:Rt=9.92min,m/z=548.2(M+1)1-(2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基)-4-芐基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基肼 在0℃下，向含有(0.40g,0.73mmol)(2-(4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基)氨基甲酸叔-丁酯的(3ml)二氯甲烷溶液中，加入(3ml)三氟乙酸，并將混合物攪拌30分鐘。混合物用(20ml)乙醇驟冷，在真空下濃縮并用二氯甲烷洗提三次，得到0.63g呈無色油狀的1-(2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰基)-4-芐基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基肼。
HPLC:Rt=7.52min(H8)LC-MS:Rt=7.61min,m/z=448.4(M+1)1-(2-(4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基氨基甲酰基)-1-甲基乙基)氨基甲酸叔-丁酯 向含有(0.18g,0.88mmol)2-叔-丁氧基羰基氨基-2-甲基丙酸的(10ml)二氯甲烷溶液中，加入(0.12mg,0.88mmol)1-羥基-7-氮雜苯并三唑和(0.12g,0.8mmol)1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)鹽酸碳化二亞胺，并將混合物攪拌30分鐘。然后加入(0.46g,0.73mmol)1-(2-氨基-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰)-4-芐基哌啶-4-羧酸N’,N’-二甲基肼和(0.50ml,2.92mmol)二異丙基乙胺，并將混合物攪拌過夜。加入(100ml)二氯甲烷，混合物用(20ml)飽和碳酸氫鈉水溶液和(20ml)水沖洗，用MgSO4干燥，過濾并在真空下濃縮。所得油在(40g)二氧化硅上用(9∶1)二氯甲烷/(10％氨的乙醇溶液〕層析，得到0.31g呈無色油狀的1-(2-(4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基氨基甲?；?-1-甲基乙基)氨基甲酸叔-丁酯。
HPLC:Rt=10.25min(H8)LC-MS:Rt=9.66min,m/z=633.2(M+1)2-氨基-N-[(1R)-2-[4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 在0℃下，向含有(0.29g,0.46mmol)1-(2-(4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-(1H-吲哚-3-基甲基)-2-氧乙基氨基甲?；?-1-甲基乙基)氨基甲酸叔-丁酯的(3ml)二氯甲烷溶液中，加入(3ml)三氟乙酸，并將混合物攪拌30分鐘?；旌衔镉?20ml)乙醇驟冷，在真空下濃縮并用二氯甲烷洗提三次，得到0.25g呈白色非晶形粉末的2-氨基-[(1R)-2-[4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基)-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺。
HPLC:Rt=24.56min(A1),Rt=24.95 min(B1),Rt=7.73min(H8)LC-MS:Rt=7.74min,m/z=533.4(M+1)實施例72-氨基-N-{(1R)-2-[(3R)-3-芐基-(N’,N’-二甲基-肼基羰基)哌啶-1-基]-1-芐氧基乙基-2-氧基-乙基}-2-甲基-丙酰胺
用實施例6中的方法制備化合物。
ESMS:m/z:524.4(M+H)+實施例82-氨基-N-[(1R)-2-[(3R)-3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 用實施例6中的方法制備化合物。
ESMS:m/z:533.4(M+H)+HPLC:rt:27.60min(A1)HPLC:rt:26.84min(B1)實施例91-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=12.11min,m/z:610.4(M+H)HPLC:Rt=42.075min(A1)HPLC:Rt=44.383min(B1)
實施例101-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙?；鶀-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=12.36min,m/z:624.4(M+H)HPLC:Rt=42.785min(A1)HPLC:Rt=45.148min(B1)實施例111-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙?；鶀-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=11.92min,m/z:584.4(M+H)HPLC:Rt=39.893min(A1)HPLC:Rt=42.046 min(B1)實施例121-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙?；鶀-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=12.21min,m/z:598.2(M+H)HPLC:Rt=40.541min(A1)HPLC:Rt=42.780min(B1)實施例13(3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙?；鵠-3-芐基哌啶-3-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=10.07 min,m/z:559.4(M+H)HPLC:Rt=35.585min(A1)HPLC:Rt=37.441min(B1)實施例14(3S)-1(2R)-2-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙?；鵠-3-芐基哌啶-3-羧酸乙酯
LC-MS:Rt=10.42 min,m/z:573.2(M+H)HPLC:Rt=36.680min(A1)HPLC:Rt=38.563 min(B1)實施例15(3S)-1-[(2R)-2-(3-(氨基甲基)芐基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰]-3-芐基哌啶-3-羧酸乙酯 LC-MS:Rt=10.24 min,m/z:567.4(M+H)HPLC:Rt=36.118min(A1)HPLC:Rt=38.052 min(B1)實施例16(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(2R)-2-[4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-奈基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 LC-MS:Rt=8.82 min,m/z:598.4(M+H)HPLC:Rt=30.858min(A1)HPLC:Rt=31.198min(B1)實施例17(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-[(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]酰胺 ESMS:m/z:573.2(M+H)+實施例18(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 ESMS:m/z:598.4(M+H)+實施例19(2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基乙基)-2-氧乙基}酰胺
LC-MS:Rt=8.77min；m/z:564.2(M+H)HPLC:Rt=29.829min(A1)HPLC:Rt=29.250min(B1)實施例202-氨基-N-{2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2奈基}甲基)-2-氧-乙基}-2-甲基-丙酰胺 LC-MS:Rt=4.77min；m/z:544.4(M+H)HPLC:Rt=30.900/31.586min(A1)HPLC:Rt=30.188/30.727min(B1)實施例212-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((聯苯-4-基}甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 LC-MS:Rt=4.98min；m/z:570.4(M+H)HPLC:Rt=33.839/34.313min(A1)HPLC:Rt=33.2978/33.640min(B1)
實施例222-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 LC-MS:Rt=4.32min,m/z:533.4(M+H)HPLC:Rt=25.946/27.231min(A1)HPLC:Rt=25.822/26.685min(B1)實施例232-氨基-N-{2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基碳基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 LC-MS:Rt=4.33/4.75min；m/z:510.4(M+H)HPLC:Rt=30.737/30.945(A1)HPLC:Rt=26.809/27.307(B1)實施例242-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 LC-MS:Rt=4.25/5.27min；m/z:519.4(M+H)HPLC:Rt=24.994min(A1)HPLC:Rt=25.742min(B1)實施例251-[(2R)-2-(2-氨基-2-甲基丙酰氨基)-3-(1-H-吲哚-3-基)丙酰基]-3-芐基哌啶-3-羧酸(吡咯烷-1-基)酰胺 非對映體的混合物非對映體ⅠLC-MS:Rt=4.40min；m/z:559.4(M+H)HPLC:Rt=26,04min(A1)HPLC:Rt=25,79min(B1)非對映體ⅡHPLC:Rt=27,38min(A1)
實施例262-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 非對映體的混合物非對映體ⅠLC-MS:Rt=5,07min；m/z:547,4(M+H)HPLC:Rt=32,16min(A1)非對映體ⅡLC-MS:Rt=5,24min；m/z:547,4(M+H)HPLC:Rt=33,60min(A1)用實施例1-6中所述的方法制備實施例9-26中的化合物。
權利要求
1．一種通式Ⅰ的化合物 其中R1為氫，或者C1-6烷基，它可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代；a和d為相互獨立的0、1、2或3；b和c為相互獨立的0、1、2、3、4或5，條件是b+c為3、4或5，D為R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自為氫或C1-6烷基，它可任意被一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意構成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j各自為1或2，并且U為-O-、-S-或一個價鍵；h和f分別為0、1、2或3；g和e分別為0或1；M為一個價鍵、-CR6=CR7-、亞芳基、雜亞芳基、-O-或-S-；R6和R7各自為氫，或者C1-6烷基，它可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代；G為-O-(CH2)k-R8， J為-O-(CH2)l-R13， 其中R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16和R17相互獨立地為氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；k和l各自為0、1或2；E為-CONR18R19、-COOR19、-(CH2)m-NR18SO2R20、-(CH2)m-NR18COR20、-(CH2)m-OR19、-(CH2)m-OCOR20、-CH(R18)R19、-(CH2)m-NR18-CS-NR19R21、或-(CH2)m-NR18-CO-NR19R21；或者E為-CONR22NR23R24，其中R22為氫、可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一個或多個C1-6烷基取代的芳基或雜芳基；R23為可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基，或者為C1-7?；?；并且R24為氫、可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一個或多個C1-6烷基取代的芳基或雜芳基；或者R22和R23與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R22和R24與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R23和R24與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；其中m為0、1、2或3，R18、R19和R21各自為氫或C1-6烷基，它可任意被鹵素、-N(R25)R26其中R25和R26分別為氫或C1-6烷基、羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧羰基、C1- 6烷基碳酰氧基或芳基取代；或者R19為 其中Q為-CH＜或-N＜，K和L各自為-CH2-、-CO-、-O-、-S-、-NR27-或一個價鍵，其中R27為氫或C1-6烷基；n和o各自為0、1、2、3或4；R20為C1-5烷基、芳基或雜芳基；或者它的一種藥物可接受的鹽；條件是如果M為一個價鍵，則E為-CONR22NR23R24。
2．根據權利要求1所述的化合物，其中R1為C1-6烷基。
3．根據權利要求1或2所述的化合物，其中a為1。
4．根據前面任一權利要求所述的化合物，其中d為1。
5．根據前面任一權利要求所述的化合物，其中b+c為4。
6．根據前面任一權利要求所述的化合物，其中D為R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自為氫或C1-6烷基，它可任意被一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意構成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j分別為1或2，并且U為-O-、-S-或一個價鍵；h和f各自為0、1、2或3；g和e各自為0或1；M為-CR6=CR7-、亞芳基、雜亞芳基、-O-或-S-；R6和R7各自為氫，或者C1-6烷基。
7．根據權利要求1-5中任一項所述的化合物，其中D為R2-NH-(CR3R4)e-(CH2)f-M-(CHR5)g-(CH2)h-其中R2、R3、R4和R5各自為氫或C1-6烷基，它可任意被一個或多個鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R2和R3或R2和R4或R3和R4可任意構成-(CH2)i-U-(CH2)j-，其中i和j分別為1或2，并且U為-O-、-S-或一個價鍵；h和f各自為0、1、2或3；g和e各自為0或1；M為一個價鍵。
8．根據前面任一權利要求所述的化合物，其中G為-O-(CH2)k-R8， 其中R8、R9、R10、R11和R12相互獨立地為氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基；k為0、1或2。
9．根據前面任一權利要求所述的化合物，其中J為 其中R13、R14、R15、R16和R17相互獨立地為氫、鹵素、芳基、雜芳基、C1-6烷基或C1-6烷氧基。
10．根據前面任一權利要求所述的化合物，其中E為-CONR18R19、-COOR19或-(CH2)m-OR19，其中m為0、1、2或3，R18和R19各自為氫或C1-6烷基，它可任意被鹵素、-N(R25)R26其中R25和R26各自為氫或C1-6烷基、羥基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧羰基、C1-6烷基碳酰氧基或芳基取代。
11．根據權利要求1-9中任一項所述的化合物，其中E為-CONR22NR23R24，其中R22為氫、可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一個或多個C1-6烷基取代的芳基或雜芳基；R23為可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基，或者為C1-7?；?；并且R24為氫、可任意被一個或多個芳基或雜芳基取代的C1-6烷基、或者可任意被一個或多個C1-6烷基取代的芳基或雜芳基；或者R22和R23與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R22和R24與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；或者R23和R24與連接于它們的氮原子一起可形成一種雜環(huán)系，它可任意被一個或多個C1-6烷基、鹵素、氨基、羥基、芳基或雜芳基取代；
12．根據前面任一權利要求所述的化合物，選自1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；?N-甲基氨基]-3-(2-奈基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(1R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基〕-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；?N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯酰基〕-N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 1-{(2R)-2-{N-[(2E)-4-(1-氨基環(huán)丁基)丁-2-烯?；鵠-N-甲基氨基}-3-(聯苯-4-基)丙酰)-4-芐基哌啶-4-羧酸甲基酰胺 2-氨基-N-[(1R)-2-[4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[(3R)-3-芐基-(N’,N’-二甲基-肼基羰基)哌啶-1-基]-1-芐氧基乙基-2-氧基-乙基}-2-甲基-丙酰胺 2-氨基-N-[(1R)-2-[(3R)-3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)-哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]-2-甲基丙酰胺 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙酰基}-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(聯苯-4-基)丙酰}-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酰基)-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙?；鶀-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 1-{(2R)-2-[N-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯?；?-N-甲基氨基]-3-(2-萘基)丙酰基}-4-芐基哌啶-4-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯?；被?-3-(1H-吲哚-3-基)丙?；鵠-3-芐基哌啶-3-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-((2E)-5-氨基-3,5-二甲基己-2-烯?；被?-3-(1H-吲哚-3-基)丙?；鵠-3-芐基哌啶-3-羧酸乙酯 (3S)-1-[(2R)-2-(3-(氨基甲基)芐基氨基)-3-(1H-吲哚-3-基)丙酰]-3-芐基哌啶-3-羧酸乙酯 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(2R)-2-[4-芐基-4-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-[(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基]酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2-萘基)甲基)-2-氧乙基}-N-甲基酰胺 (2E)-5-氨基-5-甲基己-2-烯酸{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基乙基)-2-氧乙基}酰胺 2-氨基-N-{2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((2萘基}甲基)-2-氧-乙基}-2-甲基-丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((聯苯-4-基}甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-((1H-吲哚-3-基)甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N’,N’-二甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 1-[(2R)-2-(2-氨基-2-甲基丙酰氨基)-3-(1-H-吲哚-3-基)丙?；鵠-3-芐基哌啶-3-羧酸(吡咯烷-1-基)酰胺 2-氨基-N-{(1R)-2-[3-芐基-3-(N,N’,N’-三甲基肼基羰基)哌啶-1-基]-1-(芐氧基甲基)-2-氧乙基}-2-甲基丙酰胺 及其藥物可接受的鹽。
13．一種藥物組合物，它含有作為活性組分的根據前面任一化合物權利要求中所述的一種化合物或其藥物可接受的鹽和一種藥物可接受的載體或稀釋劑。
14．一種刺激哺乳動物垂體釋放生長激素的方法，此方法包括給所說的哺乳動物服用一種有效量的根據前面任一化合物權利要求中所述的一種化合物或其藥物可接受的鹽，或者是根據前面組合物權利要求中所述的一種組合物。
15．根據前面任一化合物權利要求中所述的一種化合物或其藥物可接受的鹽在制備一種用于刺激哺乳動物的垂體釋放生長激素藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一些新的化合物,特別是4,4－雙取代和3,3－雙取代哌啶化合物,包含它們的組合物,以及它們在治療生長激素缺乏所致的內科疾病中的應用。
文檔編號C07D223/06GK1300281SQ99806010
公開日2001年6月20日 申請日期1999年5月10日 優(yōu)先權日1998年5月11日
發(fā)明者托馬斯·K·漢森, 邁克爾·安克森 申請人:諾沃挪第克公司