專利名稱：一種利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于利用酶法提取果膠技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法。
背景技術(shù)：
隨著現(xiàn)代果汁飲料工業(yè)的發(fā)展，從鮮果中榨取果汁的加工過程中產(chǎn)生的大量廢棄果渣，長期以來未能得到有效利用，造成資源的巨大浪費(fèi)，同時(shí)也嚴(yán)重污染環(huán)境。如果對(duì)這些水果加工廢棄物進(jìn)行綜合加工，不僅可以使資源得到充分合理地利用，大大提高水果加工的綜合經(jīng)濟(jì)效益，還可減少對(duì)環(huán)境的污染。因而，很多科技工作者開始研究從廢棄果渣中提取可溶性膳食纖維——果膠。果膠被認(rèn)定為21世紀(jì)食品功能成分之一，被稱為“人體健康的平衡素”。果膠主要用于食品添加劑，如增稠劑、凝膠劑、穩(wěn)定劑、代脂劑、乳化劑等，也可作為水溶性膳食纖維用于降低血糖血脂，促進(jìn)維生素的吸收，防止鉛中毒，防治動(dòng)脈硬化等醫(yī)療保健(VoragenAG J, et al.Struct Chem, 2009, 20, 263)。目前報(bào)道果膠原料已超過四十種，但商品果膠的主要原料仍為柑橘皮和蘋果皮(May ⑶.Carbohydrate Polymers, 1990, 12(1): 79)。朽1 檬是一種優(yōu)良的人體保健果品，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，我國的檸檬加工主要是生產(chǎn)檸檬油、檸檬汁(檸檬飲料)、檸檬干片等產(chǎn)品，且以粗加工為主，故而檸檬在粗加工后約產(chǎn)生40 50%的皮渣。經(jīng)研究，檸檬皮渣富含果膠，且比一般柑桔類原料果膠含量高，柑桔皮渣果膠含量僅為20%，而檸檬皮渣的果膠含量可高達(dá)30% (魏海香等.食品研究與開發(fā)，2006，27，157)。不僅如此，檸檬果膠還是所有果膠中性能最好，色澤最佳，價(jià)格也最高的果膠，但遺憾的是目前國內(nèi)還沒有商品化的朽1檬果膠。

現(xiàn)有提取果膠的主要方法有傳統(tǒng)酸提取法、離子交換法、微波法、微生物法、連續(xù)逆流提取法、酶法等(田輝等.中國食品添加劑，2007，(I): 126)。國內(nèi)商品果膠生產(chǎn)多采用傳統(tǒng)方法——酸提取乙醇沉淀法。雖然如此，但酸提法存在的缺點(diǎn)是明顯的:1)果膠分子在提取過程中易發(fā)生局部水解，會(huì)降低果膠的相對(duì)分子量，影響果膠收率和質(zhì)量；2)提取時(shí)需使用大量的無機(jī)酸，這一方面會(huì)增加成本，另一方面酸液會(huì)腐蝕設(shè)備，并對(duì)環(huán)境有污染；3)當(dāng)用乙醇沉淀提取果膠時(shí)，耗用的乙醇量太大，加之乙醇價(jià)格高且回收處理困難，使提取的成本太高，經(jīng)濟(jì)效益不明顯。于是，人們致力于對(duì)酸法工藝進(jìn)行改進(jìn)。如徐丹等(食品工業(yè)科技，2007，28(6): 182)就改進(jìn)了預(yù)處理方法，SP采用微波滅酶及復(fù)合磷酸鹽預(yù)處理檸檬皮，從而提高了果膠收率。劉義武等(食品研究與開發(fā)，2012，33(9): 76)則采用有機(jī)酸來提取檸檬皮果膠，有效地降低了酸液對(duì)設(shè)備的腐蝕速率。吳永嫻等在CN 1107858中公開了一種以檸檬皮為原料，酸提取果膠的方法。該方法用超濾濃縮代替真空濃縮，克服了真空濃縮能耗高的缺點(diǎn)。呂維學(xué)在CN102731679中公開了一種以檸檬皮為原料，酸提取、超濾結(jié)合納濾、噴霧干燥提取果膠的方法，降低了有機(jī)溶劑的使用量，保留了原有生物活性，這樣當(dāng)果膠添加到食品中就可增加食品保質(zhì)期、保健功能等。Masmoudi M等又發(fā)現(xiàn)用酸化棗汁提取檸檬皮果膠，可增加檸檬皮果膠的風(fēng)味和凝膠性能以及降低果膠酯化度(Carbohyd Polym, 2008, 74, 185; Food Sci Technol Int,2010, 16，105; Food Bioproc Technol 2012, 5，687.)。萬國福等人的研究表明通過復(fù)合磷酸鹽預(yù)處理可有效提高檸檬皮果膠提取率(食品工業(yè)科技，27(2): 78)，而利用超聲波、微波輔助可以提高檸檬皮果膠提取率(萬國福等.食品研究與開發(fā)，2006，27(7):115;李明元.食品研究與開發(fā)，2007，28(5): 91)。離子交換法生產(chǎn)成本高，需要較高的溫度和長時(shí)間加熱，原料中含有的果膠不可避免地會(huì)產(chǎn)生變性和分解破壞，降低果膠提取的數(shù)量和質(zhì)量。微波法則存在:微波加熱速度太快，不易控制加熱溫度；微波的波長和功率需嚴(yán)格控制，否則會(huì)造成果膠產(chǎn)品形態(tài)有所差異；微波法操作不當(dāng)容易泄漏，對(duì)生物產(chǎn)生危害。微生物法提取果膠受原料的預(yù)處理、反應(yīng)時(shí)的固液比、微生物的生長時(shí)間、保溫時(shí)間以及pH值的影響比較大。所以，這些提取方法都難以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。酶法提取果膠已有一段歷史。在上世紀(jì)20年代末期，Paul等就用果膠酯酶脫酯制備低酯果膠。Sakamoto等采用原果膠酶來提取果膠(Process Biochemistry, 1995，30(5): 403)o Shkodina 等(Food Hydrocolloids, 1998, 12(3): 313)則通過比較酸法和酶法(纖維素酶、半纖維素酶和糖苷酶)從南瓜中提取果膠，發(fā)現(xiàn)酶法提取果膠的產(chǎn)量均高于酸法，其中纖維素酶的產(chǎn)量最高，是酸法的兩倍還多，但時(shí)間卻長達(dá)20 h。張一青等研究了用自制的原果膠酶粗酶液(沒有分析酶含量)來提取桔柚皮中果膠，果膠產(chǎn)率達(dá)35.7%(食品科學(xué)，2005，26(1): 150)。最近披露的利用纖維素酶提取蘋果皮渣、柑桔皮、菠蘿皮、橙皮和豆腐柴葉等果膠研究也較多。如古澤克等在CN 101160327中公開了一種利用纖維素酶、半纖維素酶及其混合制劑提取柑桔類水果、熱帶水果、蘋果、甜菜、向日葵、大豆及其混合物中果膠的方法。但提取時(shí)間較長，最長的提取時(shí)間長達(dá)72h。趙越等在CN102161713中公開了采 用纖維素酶、半纖維素酶、糖苷酶及其混合酶通過酶解、超濾濃縮、噴霧干燥工藝連續(xù)制備高純度果膠的方法。Contreras-Esquivel等(Food Sci Biotechnol2006，15，163)發(fā)現(xiàn)內(nèi)切多聚半乳糖醛酸酶(屬果膠酶)有利于降低檸檬皮果膠酯化度。雖然酶法提取果膠因酶作用的高效性和專一性，果膠收率高，生產(chǎn)工藝流程和設(shè)備簡單，工藝易于控制，且能夠更好地保持產(chǎn)品的膠凝度，但由于使用的酶主要來源于微生物培養(yǎng)，故會(huì)因菌種的不同、培養(yǎng)條件的差異，使酶的構(gòu)成比例不同，加之酶本身的結(jié)構(gòu)復(fù)雜，使得使用不同廠家即便是同種酶的提取效率也不同，并且國內(nèi)外在酶法提取果膠的研究中，都普遍存在提取用酶的成本高，難以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的問題(韓冬梅等.食品工業(yè)科技，2011，32(2):183)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有酶法從檸檬皮渣中提取果膠存在的問題，提供一種利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法。本發(fā)明提供的一種利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法，該方法的工藝步驟和條件如下:I)將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)2 3倍的水中，加熱煮沸5 10 min，用清水漂洗至無色，烘干、粉碎；
2)將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:15 1:30與pH為4 8的緩沖液混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.0Γ0.3%酶制劑緩慢攪拌，于4(T70°C下保溫提取I 5 h ;3)將果膠提取液離心分離，所得果膠原液濃縮至濃縮前提取液體積的1/4 1/2，即快速冷卻；4)在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)0.5 3%的雙氧水，室溫下脫色3(Γ60min，然后加入I 3倍濃度為95%的乙醇，靜置30 60 min，過濾，再在濾餅中加入2 3倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗3 5次，過濾，乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成
品O上述方法所用的緩沖液為檸檬酸一檸檬酸納或檸檬酸一磷酸氫二鈉組成，其比例以緩沖液的PH調(diào)節(jié)為4 8為準(zhǔn)。上述方法所用的酶制劑為纖維素酶、半纖維素酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶和無花果蛋白酶中的至少一種，優(yōu)選從植物中提取的純天然植物蛋白酶——木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶和無花果蛋白酶中的至少一種。上述方法中粉碎的檸檬皮渣按重量比優(yōu)選1:20 1:30與pH為6 8的緩沖液混
口 ο上述方法中所用酶制劑的用量優(yōu)選0.Γ0.3% ;保溫溫度優(yōu)選5(T60°C，保溫時(shí)間優(yōu)選2 3 h ;雙氧水用量優(yōu)選2.0%，脫色時(shí)間優(yōu)選5(T60 min。上述方法中所用的雙氧水是市售的濃度為30%的雙氧水。與現(xiàn)有技術(shù) 相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:1.由于本發(fā)明方法在使用酶制劑提取果膠的同時(shí)，還添加了 pH為4 8的緩沖液與之配合，因而不僅大大縮短了果膠的提取時(shí)間，提高了提取效率，且還減少了酶制劑的使用量，降低了提取成本。2.由于本發(fā)明方法采用純天然植物蛋白酶來提取果膠，在保持較高的提取率的前提下，不僅酶的用量可以減少，且價(jià)格較低，因而既可進(jìn)一步降低生產(chǎn)成本，且可提高產(chǎn)品純度高O 65%)，使之能滿足我國(GB 25533-2010)和歐盟制定的食品添加劑——果膠的標(biāo)準(zhǔn)，直接進(jìn)入市場作為產(chǎn)品流通。3.由于本發(fā)明方法采用的純天然植物蛋白酶不僅成本低，用量少，且其果膠提取率高，因而產(chǎn)業(yè)化的經(jīng)濟(jì)效益十分可觀。4.由于本發(fā)明方法的脫糖工藝中采用了濃度75%的醫(yī)用消毒級(jí)乙醇，因而降低了微生物、細(xì)菌等對(duì)產(chǎn)品的影響，進(jìn)一步提高了果膠質(zhì)量。5.本發(fā)明提供的提取方法的操作簡單易行，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體的描述，有必要在此指出的是本實(shí)施例只用于對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說明，不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，該領(lǐng)域的技術(shù)熟練人員可以根據(jù)上述本發(fā)明的內(nèi)容做出一些非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整。值得說明的是:以下各實(shí)施例所得果膠的提取率、干燥失重、總半乳糖醛酸和酯化度均按照GB 25533-2010中果膠分析部分的方法來測定的。實(shí)施例1
將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)2倍的水中，加熱煮沸5 min以破壞檸檬皮渣中的果膠酶，用清水漂洗至無色，初步除去芳香物質(zhì)、糖分、苦味物質(zhì)及色素等各種非膠體物質(zhì)，烘干、粉碎；將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:15與pH為5的檸檬酸一檸檬酸納緩沖液進(jìn)行混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.01%纖維素酶緩慢攪拌，于50°C下保溫提取3 h ;將果膠提取液離心分離得果膠原液；將果膠原液用等體積水洗滌，再離心分離，合并濾液，合并后的濾液濃縮至濃縮前提取液體積的1/2，即快速冷卻；在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)0.5%的雙氧水，室溫下脫色30 min,然后加入3倍濃度為95%的乙醇，靜置30min，過濾；再在濾餅中加入2倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗3次，過濾，95%的乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。收集濾液，真空濃縮，回收乙醇循環(huán)使用。本實(shí)施例果膠的提取率為21.2%，干燥失重7.0%，總半乳糖醛酸70.7%，酯化度71.1%。實(shí)施例2將檸檬皮渣放 入以皮重計(jì)2倍的水中，加熱煮沸5 min,烘干、粉碎；將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:30與pH為6的檸檬酸一檸檬酸納緩沖液進(jìn)行混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.05%纖維素酶緩慢攪拌，于40°C下保溫提取4 h ;將果膠提取液離心分離得果膠原液；將果膠原液用等體積水洗滌，再離心分離，合并濾液，合并后的濾液濃縮至濃縮前提取液體積的1/3，即快速冷卻；在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)1.0%的雙氧水，室溫下脫色40 min，然后加入2倍濃度為95%的乙醇，靜置30min，過濾；再在濾餅中加入2倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗4次，過濾，用95%的乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。收集濾液,真空濃縮，回收乙醇循環(huán)使用。本實(shí)施例果膠的提取率為22.6%，干燥失重7.2%，總半乳糖醛酸70.3%，酯化度71.0%。實(shí)施例3將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)2.3倍的水中，加熱煮沸5 min，烘干、粉碎；將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:25與pH為7的檸檬酸一磷酸氫二鈉緩沖液進(jìn)行混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.1%無花果蛋白酶緩慢攪拌，于70°C下保溫提取5 h ;將果膠提取液離心分離得果膠原液；將果膠原液用等體積水洗滌，再離心分離，合并濾液，合并后的濾液濃縮至濃縮前提取液體積的1/3，即快速冷卻；在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)2.0%的雙氧水，室溫下脫色50 min,然后加入2倍濃度為95%的乙醇,靜置60min,過濾；再在濾餅中加入2.3倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗5次，過濾，用95%的乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。收集濾液，真空濃縮，回收乙醇循環(huán)使用。本實(shí)施例果膠的提取率為26.6%，干燥失重7.6%，總半乳糖醛酸70.4%，酯化度
60.2%。實(shí)施例4將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)2.6倍的水中，加熱煮沸10 min，烘干、粉碎；將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:30與pH為7.5的檸檬酸一磷酸氫二鈉緩沖液進(jìn)行混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.3%無花果蛋白酶緩慢攪拌，于55°C下保溫提取2 h ;將果膠提取液離心分離得果膠原液；將果膠原液用等體積水洗滌，再離心分離，合并濾液，合并后的濾液濃縮至濃縮前提取液體積的1/4，即快速冷卻；在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)2.0%的雙氧水，室溫下脫色50 min,然后加入I倍濃度為95%的乙醇,靜置60min,過濾；再在濾餅中加入2.3倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗4次，過濾，用95%的乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。收集濾液，真空濃縮，回收乙醇循環(huán)使用。本實(shí)施例果膠的提取率為31.4%，干燥失重7.8%，總半乳糖醛酸66.0%，酯化度
63.4%。實(shí)施例5將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)3倍的水中，加熱煮沸8 min，烘干、粉碎；將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:30與pH為4的檸檬酸一磷酸氫二鈉緩沖液進(jìn)行混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.2%半纖維素酶緩慢攪拌，于60°C下保溫提取2 h ;將果膠提取液離心分離得果膠原液；將果膠原液用等體積水洗滌，再離心分離，合并濾液，合并后的濾液濃縮至濃縮前提取液體積的1/2，即快速冷卻；在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)2.0%的雙氧水，室溫下脫色60 min，然后加入1.5倍濃度為95%的乙醇，靜置40min，過濾；再在濾餅中加入2倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗4次，過濾，用95%的乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。收集濾液，真空濃縮，回收乙醇循環(huán)使用。本實(shí)施例果膠的提取率為23.6%，干燥失重7.4%，總半乳糖醛酸71.0%，酯化度65.8%。實(shí)施例6將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)2倍的水中，加熱煮沸7 min,烘干、粉碎；將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:15與pH為8的檸檬酸一檸檬酸鈉緩沖液進(jìn)行混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.25%菠蘿蛋白酶緩慢攪拌，于45°C下保溫提取3 h ;將果膠提取液離心分離得果膠原液；將果膠原液用等體積水 洗滌，再離心分離，合并濾液，合并后的濾液濃縮至濃縮前提取液體積的1/2，即快速冷卻；在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)2.0%的雙氧水，室溫下脫色60 min，然后加入1.5倍濃度為95%的乙醇，靜置40min，過濾；再在濾餅中加入2.6倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗3次，過濾，用95%的乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。收集濾液，真空濃縮，回收乙醇循環(huán)使用。本實(shí)施例果膠的提取率為26.4%，干燥失重7.3%，總半乳糖醛酸67.8%，酯化度68.4%。實(shí)施例7將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)2倍的水中，加熱煮沸7 min,烘干、粉碎；將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:20與pH為6.5的檸檬酸一檸檬酸鈉緩沖液進(jìn)行混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.1%木瓜蛋白酶緩慢攪拌，于65°C下保溫提取I h ;將果膠提取液離心分離得果膠原液；將果膠原液用等體積水洗滌，再離心分離，合并濾液，合并后的濾液濃縮至濃縮前提取液體積的1/2，即快速冷卻；在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)2.0%的雙氧水，室溫下脫色55 min,然后加入3倍濃度為95%的乙醇,靜置50min,過濾；再在濾餅中加入2.6倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗3次，過濾，用95%的乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。收集濾液，真空濃縮，回收乙醇循環(huán)使用。本實(shí)施例果膠的提取率為29.4%，干燥失重7.1%，總半乳糖醛酸67.6%，酯化度65.5%。實(shí)施例8
將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)2.6倍的水中，加熱煮沸8 min，烘干、粉碎；將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:20與pH為8的檸檬酸一磷酸氫二鈉緩沖液進(jìn)行混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.05%纖維素酶和0.05%木瓜蛋白酶緩慢攪拌，于55°C下保溫提取2h ;將果膠提取液離心分離得果膠原液；將果膠原液用等體積水洗滌，再離心分離，合并濾液，合并后的濾液濃縮至濃縮前提取液體積的1/3，即快速冷卻；在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)2.0%的雙氧水，室溫下脫色50 min,然后加入2倍濃度為95%的乙醇，靜置50min，過濾；再在濾餅中加入3倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗3次，過濾，用95%的乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。收集濾液，真空濃縮，回收乙醇循環(huán)使用。本實(shí)施例果膠的提取率為33.4%，干燥失重7.5%，總半乳糖醛酸65.4%，酯化度
64.0%。實(shí)施例9將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)3倍的水中，加熱煮沸10 min，烘干、粉碎；將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:20與pH為6的檸檬酸一檸檬酸鈉緩沖液進(jìn)行混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.05%半纖維素酶和0.05%無花果蛋白酶緩慢攪拌，于60°C下保溫提取2.5h ;將果膠提取液離心分離得果膠原液；將果膠原液用等體積水洗滌，再離心分離，合并濾液，合并后的濾液濃縮至濃縮前提取液體積的1/2，即快速冷卻；在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)2.0%的雙氧水，室溫下脫色50 min,然后加入2倍濃度為95%的乙醇，靜置60min，過濾；再在濾餅中加入3倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗3次，過濾，用95%的乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。收集濾液，真空濃縮，回收乙醇循環(huán)使用。本實(shí)施例果膠的提取率為37.6%，干燥失重7.6%，總半乳糖醛酸65.1%，酯化度
62.4%。實(shí)施例10`將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)3倍的水中，加熱煮沸10 min，烘干、粉碎；將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:25與pH為7的檸檬酸一磷酸氫二鈉緩沖液進(jìn)行混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.1%木瓜蛋白酶和0.1%菠蘿蛋白酶緩慢攪拌，于50°C下保溫提取3h ;將果膠提取液離心分離得果膠原液；將果膠原液用等體積水洗滌，再離心分離，合并濾液，合并后的濾液濃縮至濃縮前提取液體積的1/3，即快速冷卻；在果膠濃縮液中加入果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)3.0%的雙氧水，室溫下脫色50 min,然后加入2倍濃度為95%的乙醇，靜置60min，過濾；再在濾餅中加入3倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗3次，過濾，用95%的乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。收集濾液，真空濃縮，回收乙醇循環(huán)使用。本實(shí)施例果膠的提取率為36.9%，干燥失重7.7%，總半乳糖醛酸65.4%，酯化度
61.3%。
權(quán)利要求
1.一種利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法，該方法的工藝步驟和條件如下: I)將檸檬皮渣放入以皮重計(jì)2 3倍的水中，加熱煮沸5 10 min，用清水漂洗至無色，烘干、粉碎； 2)將粉碎的檸檬皮渣按重量比1:15 1:30與pH為4 8的緩沖液混合，然后加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.0Γ0.3%酶制劑緩慢攪拌，于4(T70°C下保溫提取I 5 h ; 3)將果膠提取液離心分離，所得果膠原液濃縮至濃縮前提取液體積的1/4 1/2，即快速冷卻； 4)在果膠濃縮液中加入以果膠濃縮液質(zhì)量計(jì)0.5 3%的雙氧水，室溫下脫色3(Γ60min，然后加入I 3倍濃度為95%的乙醇，靜置30 60 min，過濾，再在濾餅中加入2 3倍重量的75%乙醇洗滌，反復(fù)洗3 5次，過濾，乙醇洗滌脫水，干燥，粉碎后即為果膠粉末成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法，該方法所用的緩沖液為檸檬酸一檸檬酸納或檸檬酸一磷酸氫二鈉組成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法，該方法所用的酶制劑為纖維素酶、半纖維素酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶和無花果蛋白酶中的至少一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法，該方法所用的酶制劑為木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶和無花果蛋白酶中的至少一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法，該方法中粉碎的檸檬皮渣按重量比1:20 1:30與pH為6的緩沖液混合。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法，該方法中粉碎的檸檬皮渣按重量比1:20 1:30與pH為6的緩沖液混合。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法，該方法中粉碎的檸檬皮渣按重量比1:20 1:30與pH為6的緩沖液混合。
全文摘要
本發(fā)明公開的一種利用酶法從檸檬皮渣中提取果膠的方法是先將檸檬皮渣進(jìn)行預(yù)處理，然后按重量比1∶15～ 1∶30與pH為4～8的緩沖液混合，再加入以檸檬皮渣重量計(jì)0.01～0.3%酶制劑攪拌并于40～70℃下保溫提取1～5h，繼后依次離心分離、真空濃縮、冷卻、脫色、醇沉淀、脫糖、干燥和粉碎后即得果膠粉末成品。由于本發(fā)明在使用酶制劑的同時(shí)，還添加了pH為4～8的緩沖液混與之配合，因而不僅大大縮短了果膠的提取時(shí)間，提高了提取效率，減少了酶制劑的使用量，降低了提取成本，且還提高果膠提取率和產(chǎn)品純度，加之所用的蛋白酶大多為植物中提取的純天然植物，價(jià)格較低，更有利于實(shí)現(xiàn)其商業(yè)化應(yīng)用。
文檔編號(hào)C08B37/06GK103232555SQ20131018211
公開日2013年8月7日 申請日期2013年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月16日
發(fā)明者謝峰, 王碧, 劉義武, 周文俊, 黃輝 申請人:內(nèi)江師范學(xué)院