一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于化工制藥領(lǐng)域，具體涉及一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法。針對(duì)目前大量臍橙生理落果和臍橙果皮丟棄，造成資源浪費(fèi)的缺陷，本發(fā)明公開(kāi)了一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法，該方法的步驟如下：(1)干燥、磨粉；(2)索氏萃??；(3)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)；(4)抽濾、提取粗橙皮苷；(5)柱層析分離；(6)提取精橙皮苷。有益效果：①本發(fā)明可以實(shí)現(xiàn)臍橙落果和臍橙果皮的綜合利用，回收有價(jià)成分，從而能夠?qū)崿F(xiàn)臍橙有價(jià)成分的回收，同時(shí)減少資源浪費(fèi)，提高資源的利用率；②本發(fā)明對(duì)橙皮苷回收率很高，粗橙皮苷提取率達(dá)89.3％，精橙皮苷產(chǎn)提取率達(dá)93.6％；③通過(guò)對(duì)臍橙落果和臍橙果皮中的橙皮苷回收，能夠提高臍橙產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。
【專利說(shuō)明】
一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于化工制藥領(lǐng)域，具體涉及一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 橙皮苷的結(jié)構(gòu)式：
[0004] 橙皮苷(Hesperidin)，分子式C28H34O15，屬雙氫黃酮類化合物，主要存在于柑橘、甜 橙和檸檬等的果皮中，約占果皮重的3%，純品為淡黃色結(jié)晶性粉末。橙皮苷具有抗炎、抗氧 化、抗癌等藥理活性，廣泛應(yīng)用于化工、醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域，具有極廣的開(kāi)發(fā)應(yīng)用價(jià)值。
[0005] 臍橙屬容易成花，但果樹(shù)的座果率較低，一般為5%左右，臍橙幼果由于生理原因 凋落為生理落果。臍橙生理落果有兩個(gè)明顯的高峰期，第一次在5月上中旬（花謝后1~2 周），落果的數(shù)量多，約占總落果量的73%~90%，時(shí)間短而集中；第二次落果高峰期出現(xiàn)在 6月上旬，落果較大，約占總落果量的0.25%。
[0006] 我國(guó)臍橙種植面積廣闊，臍橙生理落果和臍橙果皮資源豐富，臍橙落果和臍橙果 皮中含有橙皮苷等多種有效成分，并且臍橙生理落果中的橙皮苷含量還遠(yuǎn)高于臍橙果皮中 的橙皮苷含量。目前果園里的臍橙生理落果大量丟棄，造成巨大的資源浪費(fèi)，另外，人們吃 完了臍橙后，果皮將作為廢物丟棄掉，也造成了一定的資源浪費(fèi)。因而針對(duì)性地開(kāi)發(fā)一種從 臍橙生理落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的技術(shù)，不僅可以促進(jìn)臍橙栽培業(yè)的發(fā)展，也可為 化工制藥等行業(yè)提供豐富的原料，可以提高臍橙的附加值和利用率，增加經(jīng)濟(jì)效益，實(shí)現(xiàn)資 源最大化利用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 針對(duì)目前大量臍橙落果和臍橙果皮丟棄，造成資源浪費(fèi)的缺陷，本發(fā)明目的是提 出一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法，以提高臍橙綜合利用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)效 益，減少資源的浪費(fèi)，實(shí)現(xiàn)臍橙落果和果皮的最大化利用。
[0008] 為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了這樣一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙 皮苷的方法，該方法的步驟如下：
[0009] (1)干燥、磨粉:將臍橙落果和果皮放入烘干機(jī)中烘干，再用粉碎機(jī)粉碎至粉末狀， 制備臍橙落果和果皮粉末，臍橙落果和臍橙果皮采用80°c鼓風(fēng)干燥的方式進(jìn)行烘干；
[0010] (2)索氏萃取:在500mL圓底燒瓶中加入250mL石油醚，裝上索氏提取器，稱取步驟 (1)樣品粉末放入濾紙筒中，將濾紙筒放入索氏提取器中，最后裝上冷凝管，通水、加熱;過(guò) 程中可觀察到石油醚經(jīng)加熱揮發(fā)至冷凝管冷卻滴入索氏提取器中，虹吸回圓底燒瓶，全過(guò) 程持續(xù)3-5h，直至索氏提取器中的溶液接近無(wú)色;將濾紙筒取出，打開(kāi)，放入培養(yǎng)皿中，風(fēng) 干，干燥后裝入另一濾紙筒中，取干凈圓底燒瓶加入甲醇250mL，裝上索氏提取器，將濾紙筒 放入索氏提取器中，裝上冷凝管，通水、加熱，直至索氏提取器中的溶液接近無(wú)色，全過(guò)程持 續(xù)1 -3h;最后得到圓底燒瓶中的溶液呈淡黃色，保留，濾紙筒及其中粉末廢棄；
[0011] (3)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā):將步驟(2)中提取得到的含橙皮苷淡黃色溶液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到深棕 色泥漿狀物質(zhì)；首先將低溫恒溫箱打開(kāi)溫度設(shè)定在2攝氏度，待其降溫，同時(shí)將旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 打開(kāi)溫度設(shè)定在22攝氏度，待其升溫；當(dāng)溫度條件到達(dá)后，安裝上裝有樣液的圓底燒瓶，關(guān) 上閥門打開(kāi)真空栗，將燒瓶下降進(jìn)入水面，溫度升至26攝氏度，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā);30分鐘后可觀察 到有無(wú)色液體經(jīng)揮發(fā)冷凝滴下，繼續(xù)蒸發(fā)25-35分鐘，將燒瓶中的溶液轉(zhuǎn)移至梨形瓶中；再 次將瓶中溶液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，至不再有液體冷凝下滴，停止旋轉(zhuǎn)蒸發(fā);使其冷卻，最后得到 深棕色泥漿狀物質(zhì)；
[0012] (4)抽濾、提取粗橙皮苷:將步驟(3)中得到的深棕色泥漿狀物質(zhì)抽濾，采用乙酸沖 洗，乙酸的濃度為6%，靜置干燥后得到土黃色固體粉末，即粗橙皮苷提取物，計(jì)算粗橙皮苷 提取率；
[0013] (5)柱層析分離:先制作好層析柱，然后取步驟(4)中的粗橙皮苷提取物，加入5mL 的二甲基亞砜(DMS0)和2-3滴甲醇使之溶解，溶解后用滴管吸取沿層析柱壁周緩緩加入，待 其進(jìn)入硅膠混合液又沒(méi)干掉之前加入5mL乙酸乙酯與甲醇的混合溶液，乙酸乙酯與甲醇混 合的體積比為4:1，重復(fù)多次，直到橙皮苷完全進(jìn)入后，直接加到柱頂;一段時(shí)間后可觀察到 樣品溶液沿硅膠渾濁液逐漸往下走并出現(xiàn)不同顏色分層，直到走到底部，打開(kāi)開(kāi)關(guān)，用錐形 瓶接收；
[0014] 層析柱的制作方法:配制300mL乙酸乙酯：甲醇=4:1溶液，用燒杯稱取15.22g的硅 膠，加入配制溶液到80mL，攪拌均勾，得到渾濁乳白色溶液；在層析柱中倒入5ml的乙酸乙 酯：甲醇=4:1溶液，再倒入渾濁溶液，保持層析柱開(kāi)關(guān)打開(kāi);待底端的透明溶液走到頂端， 且液面下降至剛好要與下層渾濁溶液融合又未融合時(shí)，關(guān)掉開(kāi)關(guān);保持不讓兩液體融合；
[0015] (6)提取精橙皮苷:將步驟(5)中接收在錐形瓶中的溶液收集在梨形瓶中，收集前 先稱重梨形瓶的質(zhì)量并記錄;通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將溶液蒸發(fā)至不再減少，梨形瓶用真空栗抽真 空除去殘留溶劑，直到梨形瓶中沉淀物質(zhì)量不再減少，此為精橙皮苷，并計(jì)算精橙皮苷提取 率。
[0016] 本發(fā)明的有益效果是：
[0017] ①本發(fā)明可以實(shí)現(xiàn)臍橙落果和臍橙果皮綜合利用，回收有價(jià)成分，從而能夠?qū)崿F(xiàn) 臍橙有價(jià)成分的回收，同時(shí)減少資源浪費(fèi)，提高資源的利用率；
[0018] ②本發(fā)明對(duì)橙皮苷回收率很高，粗橙皮苷提取率達(dá)87.5%，精橙皮苷產(chǎn)率達(dá) 92.3%以上；
[0019]③通過(guò)對(duì)臍橙落果和臍橙果皮中橙皮苷的回收，能夠提高臍橙產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益；
[0020] ④本發(fā)明所述的方法，可以利用企業(yè)現(xiàn)有的設(shè)備，不需要額外增加設(shè)備，能夠有效 降低設(shè)備的投入，從而降低成本；
[0021] ⑤本發(fā)明所述的方法，所產(chǎn)生的溶液除最后一個(gè)步驟外，基本上都會(huì)在后序工序 中進(jìn)行處理，對(duì)環(huán)境的污染很小。
【附圖說(shuō)明】
[0022]圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
[0023]圖2為索氏提取裝置結(jié)構(gòu)示意圖。
[0024]圖3為柱層析結(jié)構(gòu)示意圖。
[0025]圖4為提取物樣品(橙皮苷產(chǎn)品）核磁共振C譜圖。
[0026] 圖5為提取物樣品(橙皮苷產(chǎn)品）核磁共振H譜圖。
[0027] 圖6為提取物樣品(橙皮苷產(chǎn)品）的紅外光譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。
[0029] 實(shí)施例1
[0030] -種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法，如圖1-圖3所示，
[0031] 其步驟如下：
[0032] (1)干燥、磨粉:將臍橙落果和果皮放入烘干機(jī)中烘干，再用粉碎機(jī)粉碎至粉末狀， 制備臍橙落果和臍橙果皮粉末，臍橙落果和臍橙果皮采用80°C鼓風(fēng)干燥的方式進(jìn)行烘干。 [0033] (2)索氏萃取:在500mL圓底燒瓶中加入250mL石油醚，裝上索氏提取器，稱取10克 步驟（1)樣品（樣品中橙皮苷含量為2.8%)粉末放入濾紙筒中，將濾紙筒放入索氏提取器 中，最后裝上冷凝管，通水、加熱;過(guò)程中可觀察到石油醚經(jīng)加熱揮發(fā)至冷凝管冷卻滴入索 氏提取器中，到達(dá)一定高度后，虹吸回圓底燒瓶，全過(guò)程持續(xù)4h，直至索氏提取器中的溶液 接近無(wú)色;將濾紙筒取出，打開(kāi)，放入培養(yǎng)皿中，風(fēng)干，干燥后裝入另一濾紙筒中，取干凈圓 底燒瓶加入甲醇250mL，重復(fù)上述步驟進(jìn)行回流，裝上索氏提取器，將濾紙筒放入索氏提取 器中，裝上冷凝管，通水、加熱，直至索氏提取器中的溶液接近無(wú)色，全過(guò)程持續(xù)2h;最后得 到圓底燒瓶中的溶液呈淡黃色，保留，濾紙筒及其中粉末廢棄。
[0034] (3)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā):將步驟(2)中提取得到的含橙皮苷淡黃色溶液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到深棕 色泥漿狀物質(zhì)；首先將低溫恒溫箱打開(kāi)溫度設(shè)定在2攝氏度，待其降溫，同時(shí)將旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 打開(kāi)溫度設(shè)定在22攝氏度，待其升溫；當(dāng)溫度條件到達(dá)后，安裝上裝有樣液的圓底燒瓶，關(guān) 上閥門打開(kāi)真空栗，將燒瓶下降進(jìn)入水面，溫度升至26攝氏度，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā);一段時(shí)間后可觀 察到有無(wú)色液體經(jīng)揮發(fā)冷凝滴下，待燒瓶中的溶液蒸發(fā)至少量時(shí)，將燒瓶中的溶液轉(zhuǎn)移至 梨形瓶中；再次將瓶中溶液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，至不再有液體冷凝下滴，停止旋轉(zhuǎn)蒸發(fā);使其冷 卻，最后得到深棕色泥漿狀物質(zhì)；
[0035] (4)抽濾、提取粗橙皮苷:將步驟(3)中得到的深棕色泥漿狀物質(zhì)抽濾，采用6%的 乙酸沖洗，靜置干燥后得到土黃色固體粉末，即粗橙皮苷提取物，稱重〇. 30克，橙皮苷含量 為0.25克，粗橙皮苷提取率達(dá)89.3 %。
[0036] (5)柱層析分離：取O.lg步驟（4)中的粗橙皮苷提取物，加入5mL的二甲基亞砜 (DMSO)和2-3滴甲醇使之溶解，溶解后用滴管吸取沿層析柱壁周緩緩加入，待其進(jìn)入硅膠混 合液又沒(méi)干掉之前加入5mL乙酸乙酯：甲醇= 4:1溶液，重復(fù)多次，直到橙皮苷完全進(jìn)入后， 直接加到柱頂;一段時(shí)間后可觀察到樣品溶液沿硅膠渾濁液逐漸往下走并出現(xiàn)不同顏色分 層，直到走到底部，打開(kāi)開(kāi)關(guān)，用錐形瓶接收；
[0037] (6)提取精橙皮苷:將步驟(5)中接收在錐形瓶中的溶液收集在梨形瓶中，收集前 先稱重梨形瓶的質(zhì)量并記錄;通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將溶液蒸發(fā)至不再減少，梨形瓶用真空栗抽真 空除去殘留溶劑，直到梨形瓶中沉淀物質(zhì)量不再減少，此為精橙皮苷，真空干燥后稱重 〇. 078克，精橙皮苷提取率達(dá)93.6 %。
[0038] 提取物樣品(橙皮苷產(chǎn)品）核磁共振C譜圖，如圖4所示，圖4中樣品各碳原子所對(duì)應(yīng) 的化學(xué)位移S為：C-1:196 ? 92ppm; C-2 :165 ? 06ppm; C-3 :162 ? 93ppm; C-4:162 ? 42ppm; C-5 : 147?87ppm;C-6:146?41ppm;C-7:130?86ppm;C-8:117?83ppm;C-9:114?09ppm;C-10: 112.OOppm；C-11:103.23ppm；C-12:100.53ppm；C-13:99.37ppm；C-14:96.31ppm；C-15: 95.47ppm；C-16:78.29ppm；C-17:76.21ppm；C-18:75.45ppm；C-19:72.91ppm；C-20: 71.99ppm；C-21:70.62ppm；C-22:70.20ppm；C-23:69.51ppm；C-24:68.23ppm；C-25: 65.97口口111 ;(：-26:55.62口口111;(：-27:41.96口口111;(：-28:17.73口口111.其中溶劑的化學(xué)位移 ：40.1-38?8ppm〇
[0039] 所得樣品經(jīng)核磁共振碳譜分析，與橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品核磁共振碳譜圖相符，說(shuō)明樣品 為橙皮苷。
[0040] 提取物樣品(橙皮苷產(chǎn)品）的核磁共振H譜圖，如圖5所示。
[0041] 提取物樣品（橙皮苷產(chǎn)品）的紅外光譜圖，如圖6所示，0-H鍵的特征吸收峰為 3500cm-S苯環(huán)中C-H-鍵的特征吸收峰為3080-3010cm-S飽和碳原子上的C-H-鍵的特征吸 收峰為2980-2865cm-S0CH3中C-H-鍵的特征吸收峰為2850cm-SCiO鍵的特征吸收峰為 1650CHT 1。
[0042] 以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并 不能因此而理解為對(duì)本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員 來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形、改進(jìn)及替代，這些都屬于本發(fā) 明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于，包括以下步驟： (1) 干燥、磨粉:將臍橙落果和臍橙果皮放入烘干機(jī)中烘干，再用粉碎機(jī)粉碎至粉末狀， 制備臍橙落果和臍橙果皮粉末； (2) 索氏萃取:在500mL圓底燒瓶中加入250mL石油醚，裝上索氏提取器，稱取步驟（1)樣 品粉末放入濾紙筒中，將濾紙筒放入索氏提取器中，最后裝上冷凝管，通水、加熱;過(guò)程中可 觀察到石油醚經(jīng)加熱揮發(fā)至冷凝管冷卻滴入索氏提取器中，虹吸回圓底燒瓶，全過(guò)程持續(xù) 3-5h，直至索氏提取器中的溶液接近無(wú)色；將濾紙筒取出，打開(kāi)，放入培養(yǎng)皿中，風(fēng)干，干燥 后裝入另一濾紙筒中，取干凈圓底燒瓶加入甲醇250mL，裝上索氏提取器，將濾紙筒放入索 氏提取器中，裝上冷凝管，通水、加熱，直至索氏提取器中的溶液接近無(wú)色，全過(guò)程持續(xù)1-3h;最后得到圓底燒瓶中的溶液呈淡黃色，保留，濾紙筒及其中粉末廢棄； (3) 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā):將步驟(2)中提取得到的含橙皮苷淡黃色溶液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到深棕色泥 漿狀物質(zhì)； (4) 抽濾、提取粗橙皮苷:將步驟(3)中得到的深棕色泥漿狀物質(zhì)抽濾，采用乙酸沖洗， 靜置干燥后得到土黃色固體粉末，即粗橙皮苷提取物，并計(jì)算粗橙皮苷提取率； (5) 柱層析分離:先制作好層析柱，然后取步驟(4)中的粗橙皮苷提取物，加入5mL的二 甲基亞砜和2-3滴甲醇使之溶解，溶解后用滴管吸取沿層析柱壁周緩緩加入，待其進(jìn)入硅膠 混合液又沒(méi)干掉之前加入5mL乙酸乙酯與甲醇的混合溶液，重復(fù)多次，直到橙皮苷完全進(jìn)入 后，直接加到柱頂;一段時(shí)間后可觀察到樣品溶液沿硅膠渾濁液逐漸往下走并出現(xiàn)不同顏 色分層，直到走到底部，打開(kāi)開(kāi)關(guān)，用錐形瓶接收； (6) 提取精橙皮苷:將步驟(5)中接收在錐形瓶中的溶液收集在梨形瓶中，收集前先稱 重梨形瓶的質(zhì)量并記錄;通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將溶液蒸發(fā)至不再減少，梨形瓶用真空栗抽真空除 去殘留溶劑，直到梨形瓶中沉淀物質(zhì)量不再減少，此為精橙皮苷，并計(jì)算精橙皮苷提取率。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于， 步驟(1)中，臍橙落果和臍橙果皮采用80°C鼓風(fēng)干燥的方式進(jìn)行烘干。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于， 步驟(3)的制作過(guò)程為:首先將低溫恒溫箱打開(kāi)溫度設(shè)定在2攝氏度，待其降溫，同時(shí)將旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā)器打開(kāi)溫度設(shè)定在22攝氏度，待其升溫；當(dāng)溫度條件到達(dá)后，安裝上裝有樣液的圓底燒 瓶，關(guān)上閥門打開(kāi)真空栗，將燒瓶下降進(jìn)入水面，溫度升至26攝氏度，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā);30分鐘后可 觀察到有無(wú)色液體經(jīng)揮發(fā)冷凝滴下，繼續(xù)蒸發(fā)25-35分鐘，將燒瓶中的溶液轉(zhuǎn)移至梨形瓶 中；再次將瓶中溶液進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，至不再有液體冷凝下滴，停止旋轉(zhuǎn)蒸發(fā);使其冷卻，最后 得到深棕色泥漿狀物質(zhì)。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于， 步驟(4)中，乙酸的濃度為6%。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于， 步驟(5)中乙酸乙酯與甲醇混合的體積比為4:1。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從臍橙落果和臍橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于， 步驟(5)中，層析柱的制作方法:配制300mL乙酸乙酯：甲醇=4:1溶液，用燒杯稱取15.22g的 硅膠，加入配制溶液到80mL，攪拌均勾，得到渾濁乳白色溶液;在層析柱中倒入5ml的乙酸乙 酯：甲醇=4:1溶液，再倒入渾濁溶液，保持層析柱開(kāi)關(guān)打開(kāi);待底端的透明溶液走到頂端， 且液面下降至剛好要與下層渾濁溶液融合又未融合時(shí)，關(guān)掉開(kāi)關(guān);保持不讓兩液體融合。
【文檔編號(hào)】C07H1/08GK105968151SQ201610065475
【公開(kāi)日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2016年1月31日
【發(fā)明人】李小康, 淳炯, 鐘八蓮
【申請(qǐng)人】贛南師范學(xué)院