一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開的一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法，涉及生物醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，包括原料粉碎、第一次震蕩提取、第二次震蕩提取、一次濃縮、沉淀、上柱、二次濃縮、干燥等步驟；具有操作簡單、流程短、提取純度高等特點，既可用于從黑茶金花中提取茶多糖，也可用于從黑茶或其它茶葉或油茶粕中提取茶多糖。
【專利說明】一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]茶多糖是一類與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起的酸性糖蛋白，其多糖部分是由阿拉伯糖、核糖、木糖、葡萄糖與半乳糖組成。茶多糖具有防輻射、抗凝血及抗血栓、抗腫瘤、抗病毒、降血糖、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、降血壓、降血脂、耐缺氧及增加冠狀動脈血流量等多種生物學(xué)功能。黑茶經(jīng)發(fā)酵工序后，由于糖苷酶、蛋白酶、水解酶的作用，形成了相對長度較短的糖鏈，因而，更易被吸收，且生物活性更強(qiáng)。
[0003]黑茶屬全發(fā)酵茶，其茶多糖(Tea Polysaccharide)含量較高。黑茶在加工過程中產(chǎn)生一種獨特的金黃色顆粒，科研發(fā)現(xiàn)是一種對人體非常有益的益生菌體，專家命名為“冠突散囊菌”，俗稱“黑茶金花”，其含有較多的茶多糖，故有較強(qiáng)的降脂降壓、調(diào)節(jié)糖類代謝等功效。
[0004]目前，茶多糖的提 取主要是通過將茶葉粉碎，在一定的溫度下，先用酸性、中性或者弱堿性水浸提，再通過沉淀分離或柱層析分離，制備出粗品。其具體方法包括:一是有機(jī)溶劑沉淀法:茶多糖在有機(jī)溶劑中的溶解度較小通過有機(jī)溶劑沉淀的方法可將茶多糖與其他成分初步分離，用到的有機(jī)溶劑主要有乙醇、丙酮、乙酸乙酯等；二是委銨鹽沉淀法:在酸性、中性或弱堿性條件下，一些季銨鹽如溴代十六烷基三甲銨(CTAB)、十六烷基鹽酸吡啶(CPC)能與茶多糖形成不溶于水的鹽，以此把茶多糖與其他成分分離，再利用透析法得到較純品；三是樹脂法:茶多糖是一種酸性多糖，而酸性多糖一般都能被相關(guān)樹脂吸附，如DEAE-纖維樹脂，然后通過不同的洗脫液可將茶多糖與其他成分分開。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種操作簡單、流程短、排放少、能耗低、用于從黑茶金花中制備茶多糖的方法。
[0006]本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是發(fā)明一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法，其工藝流程如下:
[0007]㈠、原料粉碎:將黑茶金花粉碎成粒徑為1-5 μ m的黑茶金花粉，備用；
[0008]㈡、第一次震蕩提取:將備用的黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，同時加入
1.5-3.0倍重量、體積濃度為70-95%的乙醇溶液，攪勻，在震蕩頻率為30-50HZ、室溫條件下，震蕩提取5-10min ;接著按3_5°C /min的升溫速度加熱至45_65°C，在頻率為60_100Ηζ的條件下，提取2-5min，過濾留渣，得第一次震蕩提取黑茶金花粉，備用；
[0009]㈢、第二次震蕩提取:將備用的第一次震蕩提取黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，加入2-4倍重量、溫度為40-50°C的溫水，將震蕩頻率調(diào)至80-120Hz，進(jìn)行恒溫震蕩提??；當(dāng)每100ml水提液中含固形物1.5-3.0mg時，將震蕩頻率調(diào)至140_160Hz，并按2-30C /min的升溫速度，將溫度升至60_70°C，進(jìn)行恒溫震蕩提取；當(dāng)每100ml水提液中含7.5-10.5mg固形物時，停止提取，過濾，得水提液，備用；
[0010]㈣、一次濃縮:將備用的水提液用弱堿調(diào)節(jié)其Ph值為7.5-8.0，攪勻；接著將其投入真空濃縮器中，在溫度為65-75 °C、真空度為0.4-0.8Mpa壓力下，濃縮至原體積的1/5-1/2，得濃縮液，備用；
[0011]㈤、沉淀:向備用的濃縮液中加入中性無機(jī)鹽，至中性無機(jī)鹽的濃度為5-9g/100ml時，將其轉(zhuǎn)移至冷庫中溫度為O~4°C，待濃縮液的溫度與冷庫溫度一致時，快速加入乙醇，使乙醇濃度達(dá)到40-55%，靜置25-50min ;待無沉淀析出時，將上層液在0.35-0.55MPa壓力、冷庫溫度下過孔徑為0.02-0.1mm的濾膜，收集濾液，備用；
[0012]㈥、上柱:向備用的濾液中加入溫度為40_55°C的溫水，邊加邊攪，至乙醇濃度為25-35% ;接著，將其上弱極性大孔樹脂(可采用AB-8或DlOl或S300等弱極性樹脂)，控制上柱流速為1-2.5L/min,收集上柱后的濾液；再將上柱后的濾液在0.5-0.85MPa的外壓力下，過中性氧化鋁柱，控制裝填的中性氧化鋁的重量為上柱后的濾液重量的1/4-1/2，接著快速收集上柱濾液，備用；
[0013]㈦、二次濃縮:將備用的上柱濾液投入真空濃縮器中，在溫度為50_65°C、真空度為0.4-0.8Mpa壓力下，濃縮至原體積的1/5-1/2，得濃縮上柱液，備用；
[0014]㈧、干燥:將備用的濃縮上柱液進(jìn)行噴霧干燥，即得茶多糖成品。
[0015]步驟(E)中所述的弱堿是碳酸氫鈉或磷酸鈉或磷酸氫鈉。
[0016]步驟⑶中所述的中性無機(jī)鹽是硫酸鈉或硫酸銨或氯化鈉或硫酸鋅或氯化鋅。
[0017]本發(fā)明的從黑茶金花中提取茶多糖的方法，是采用黑磚茶在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的黑茶金花(即:冠突散囊菌)作為原料，并采用原料粉碎、第一次震蕩提取、第二次震蕩提取、一次濃縮、沉淀、上柱、二次濃縮、干燥等步驟，去除了大部分雜質(zhì)，因而，其成品中的茶多糖^ 90%。同時，由于采用震蕩提取，避免大量燃料使用`，既減少廢氣廢水等的排放，利于環(huán)境保護(hù)；加之在除去蛋白質(zhì)時，采用中性鹽變性和低溫冷藏等方式，使得該操作簡單，能耗低，同時也易于生產(chǎn)人員操作；因此，在整個提取過程中，采用的都是易于操作、省時省能的技術(shù)，具有操作簡單、流程短、效率高等特點。
[0018]下面的表1是按照本發(fā)明方法從黑茶金花中提取的茶多糖的主要成份含量檢測數(shù)據(jù)。
[0019]表1茶多糖的主要成份含量的檢測對照表
[0020]
^含量(％ )
成份_
阿拉伯糖__62^4_
_巖藻糖__10.56_
___5^2_
_葡萄糖__12.35_
_^rf;__90.63_【具體實施方式】
[0021]以下結(jié)合實施例，對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。下面的說明是以例舉的方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此。
[0022]本實施例的從黑茶金花中提取茶多糖的方法，其工藝流程如下:
[0023]㈠、原料粉碎:將黑茶金花投入轉(zhuǎn)速為3000-6000轉(zhuǎn)/min的超微粉碎機(jī)中，粉碎成粒徑為1-5 μ m的黑茶金花粉，備用；
[0024]㈡、第一次震蕩提取:將備用的黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，同時加入2倍重量、體積濃度為85%的乙醇溶液，攪勻，在震蕩頻率為40Hz、室溫條件下，震蕩提取8min ；接著按4°C /min的升溫速度加熱至55°C,在頻率為80Hz的條件下,提取4min,過濾留洛，得第一次震蕩提取黑茶金花粉，備用；
[0025]㈢、第二次震蕩提取:將備用的第一次震蕩提取黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，加入3倍重量、溫度為45°C的溫水，將震蕩頻率調(diào)至100Hz，進(jìn)行恒溫震蕩提取；當(dāng)每100ml水提液中含固形物2.5mg時，將震蕩頻率調(diào)至150Hz，并按3°C /min的升溫速度，將溫度升至65°C，進(jìn)行恒溫震蕩提??；當(dāng)每100ml水提液中含9mg固形物時，停止提取，過濾，得水提液，備用；
[0026]_、一次濃縮:將備用的水提液用濃度為35-45%的碳酸氫鈉水溶液調(diào)節(jié)其Ph值為
8.0，攪勻；接著將其投入真空濃縮器中，在溫度為70°C、真空度為0.6Mpa壓力下，濃縮至原體積的2/5，得濃縮液，備用；
[0027]㈤、沉淀:向備用的濃縮液中加入濃度為45-60%硫酸鈉水溶液，至硫酸鈉的濃度為7g/100ml時，將其轉(zhuǎn)移至·2°C的冷庫中，待濃縮液的溫度與冷庫溫度一致時，快速加入乙醇，使乙醇濃度達(dá)到50%，靜置40min ;待無沉淀析出時，將上層液在0.45MPa壓力、冷庫溫度下過孔徑為0.05mm的濾膜，收集濾液，備用；
[0028]㈥、上柱:向備用的濾液中加入溫度為50°C的溫水，邊加邊攪，至乙醇濃度為30% ；接著，將其上S300弱極性大孔樹脂，控制上柱流速為2L/min，收集上柱后的濾液；再將上柱后的濾液在0.7MPa的外壓力下，過中性氧化鋁柱，控制裝填的中性氧化鋁的重量為上柱后的濾液重量的1/2，接著快速收集上柱濾液，備用；
[0029]㈦、二次濃縮:將備用的上柱濾液投入真空濃縮器中，在溫度為60°C、真空度為
0.6Mpa壓力下，濃縮至原體積的2/5，得濃縮上柱液，備用；
[0030](Λ)、干燥:將備用的濃縮上柱液進(jìn)行噴霧干燥，即得茶多糖成品，其含量為90.63%。
[0031]本發(fā)明的從黑茶金花中提取茶多糖的方法，既可用于從黑茶金花中提取茶多糖，也可用于從黑茶或其它茶葉或油茶柏中提取茶多糖。
【權(quán)利要求】
1.一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法，其特征于工藝流程如下: (-)、原料粉碎:將黑茶金花粉碎成粒徑為1-5 μ m的黑茶金花粉，備用； ㈡、第一次震蕩提取:將備用的黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，同時加入1.5-3.0倍重量、體積濃度為70-95%的乙醇溶液，攪勻，在震蕩頻率為30-50HZ、室溫條件下，震蕩提取5-10min ;接著按3_5°C /min的升溫速度加熱至45_65°C，在頻率為60_100Hz的條件下，提取2-5min，過濾留渣，得第一次震蕩提取黑茶金花粉，備用； 曰、第二次震蕩提取:將備用的第一次震蕩提取黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，加入2-4倍重量、溫度為40-50°C的溫水，將震蕩頻率調(diào)至80-120HZ，進(jìn)行恒溫震蕩提?。划?dāng)每100ml水提液中含固形物1.5-3.0mg時，將震蕩頻率調(diào)至140_160Hz，并按2_3°C /min的升溫速度，將溫度升至60-70°C，進(jìn)行恒溫震蕩提??；當(dāng)每100ml水提液中含7.5-10.5mg固形物時，停止提取，過濾，得水提液，備用； _、一次濃縮:將備用的水提液用弱堿調(diào)節(jié)其Ph值為7.5-8.0，攪勻；接著將其投入真空濃縮器中，在溫度為65-75°C、真空度為0.4-0.8Mpa壓力下，濃縮至原體積的1/5-1/2，得濃縮液，備用； ㈤、沉淀:向備用的濃縮液中加入中性無機(jī)鹽，至中性無機(jī)鹽的濃度為5-9g/100ml時，將其轉(zhuǎn)移至冷庫中溫度為O~4°C，待濃縮液的溫度與冷庫溫度一致時，快速加入乙醇，使乙醇濃度達(dá)到40-55%，靜置25-50min ;待無沉淀析出時，將上層液在0.35-0.55MPa壓力、冷庫溫度下過孔徑為0.02-0.1mm的濾膜， 收集濾液，備用； ㈥、上柱:向備用的濾液中加入溫度為40-55 °C的溫水，邊加邊攪，至乙醇濃度為25-35% ;接著，將其上弱極性大孔樹脂，控制上柱流速為1-2.5L/min,收集上柱后的濾液；再將上柱后的濾液在0.5-0.85MPa的外壓力下，過中性氧化鋁柱，控制裝填的中性氧化鋁的重量為上柱后的濾液重量的1/4-1/2，接著快速收集上柱濾液，備用； (七)、二次濃縮:將備用的上柱濾液投入真空濃縮器中，在溫度為50-65°C、真空度為0.4-0.8Mpa壓力下，濃縮至原體積的1/5-1/2，得濃縮上柱液，備用； (八)、干燥:將備用的濃縮上柱液進(jìn)行噴霧干燥，即得茶多糖成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述從黑茶中提取茶多糖的方法，其特征在于:步驟(E)中所述的弱堿是碳酸氫鈉或磷酸鈉或磷酸氫鈉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述從黑茶中提取茶多糖的方法，其特征在于:步驟?中所述的中性無機(jī)鹽是硫酸鈉或硫酸銨或氯化鈉或硫酸鋅或氯化鋅。
【文檔編號】C08B37/00GK103739735SQ201410031932
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2014年1月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月23日
【發(fā)明者】李文東, 鄒先明 申請人:李文東