一種提高車前子多糖黏性的制備方法
【專利摘要】一種提高車前子多糖黏性的制備方法，按料液質(zhì)量體積比例1:10加入80%乙醇，進(jìn)行前處理；前處理后的車前子，沸水浴下提取2~3h，車前子與水的質(zhì)量體積比為1:10~1:30，重復(fù)兩次，合并濾液，濃縮，再加入乙醇于4℃靜置12h，體系中的乙醇質(zhì)量濃度控制在80%，離心、收集沉淀，再用丙酮、無水乙醚、無水乙醇各洗滌兩次，冷凍干燥得到車前子多糖；將車前子多糖，加水復(fù)溶，按每毫克車前子多糖加入0.1~0.5U漆酶的比例添加漆酶，25~45℃下反應(yīng)1~8h，冷凍干燥，獲得高黏性車前子多糖。本發(fā)明車前子多糖可以直接與漆酶混合作用，提高多糖黏度；也適用于其他來源阿拉伯木聚糖類多糖；制備得到的高黏性車前子多糖，呈現(xiàn)剪切變稀現(xiàn)象，具有良好的成膠性能。
【專利說明】一種提高車前子多糖黏性的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物多糖制備和開發(fā)【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]膳食纖維是指在人體小腸內(nèi)不能被消化吸收，而能在大腸內(nèi)部分或全部被腸道內(nèi)微生物利用的一類碳水化合物，按其溶解性可分成水溶性膳食纖維和水不溶性膳食纖維。水溶性膳食纖維可溶于溫水或熱水，攝入后能降低體內(nèi)膽固醇和血糖水平，從而降低心臟疾病發(fā)生率、改善糖尿病癥狀。車前子是我國用藥之一，始見于《詩經(jīng)》，藥用始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，并被列為上品，為車前科植物車前G0Zafligao asiatica L.)或平車前(/7Zafliagodepressa Willd.)的干燥成熟種子,具有利水通淋、清熱明目、祛咳止痰等功效，現(xiàn)被國家食品藥品監(jiān)督管理局列為可用于保健食品的物品。車前子多糖是車前子種皮外細(xì)胞壁主要成分之一，近年來相關(guān)研究證實(shí)了車前子多糖具有潤腸通便、降血糖、調(diào)節(jié)血脂等生物活性，含車前籽殼的產(chǎn)品也被廣泛應(yīng)用于改善腸道功能和促進(jìn)排便正常。
[0003]目前普遍認(rèn)為車前子多糖腸道功能與其高黏度或成膠性能有關(guān)，但車前子多糖凝膠性能比較弱，例如英國學(xué)者Haque等報(bào)道，堿提卵葉車前子多糖顯示弱凝膠性能，本實(shí)驗(yàn)室之前制備的大粒車前子水提多糖成膠性能也不高。因此提高車前子多糖黏度以提高其成膠性能，對于車前子多糖的應(yīng)用具有重要意義。另外，高黏性車前子多糖還可以作為增稠劑、填充劑、配方助劑等添加到食品中，制成各種健康食品。中國專利CN102138981A公開了“一種車前子多糖提取物的制備方法及用途”，發(fā)明人對原料脫脂后，再經(jīng)過水提取、醇沉淀得到粗多糖，粗多糖經(jīng)過透析、離子交換層析脫去蛋白、色素，除去小分子化學(xué)成分，制備較高純度的車前子多糖提取物。但有關(guān)提高車前子多糖黏性的制備方法未見報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明目的是提供一種提高車前子多糖黏性的制備方法，所得高黏性多糖表觀黏度約為改性之前的10~50倍。
[0005]本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的，其特征是方法步驟為。
[0006](I)車前子前處理:稱取一定質(zhì)量的車前子，按料液質(zhì)量體積(kg/L)比為1:10的比例加入80%乙醇，浸泡24小時(shí)，過濾、收集車前子，烘干。
[0007](2)車前子多糖制備:稱取一定量步驟(1)處理的車前子，于沸水浴下提取2~3小時(shí)，車前子與水的質(zhì)量體積(kg/L)比為1:l(Tl: 30，提取液過濾后收集濾液，濾渣重復(fù)提取I次。合并兩次濾液，減壓濃縮，濃縮液中加入乙醇于4 °C靜置12小時(shí)，體系中的乙醇質(zhì)量濃度控制在80%，離心、收集沉淀，沉淀依次用丙酮、無水乙醚、無水乙醇各洗滌兩次，樣品然后經(jīng)冷凍干燥得到車前子多糖。
[0008](3)車前子多糖酶法處理:稱取一定量步驟(2)所得到的車前子多糖，加水復(fù)溶，然后按照每毫克車前子多糖對應(yīng)加入0.1~0.5 U漆酶的比例添加漆酶，于25~45°C下反應(yīng)4~8小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后冷凍干燥，獲得高黏性車前子多糖。
[0009]本發(fā)明所述的車前子多糖酶法處理，直接向車前子多糖溶液中加入漆酶，反應(yīng)一定時(shí)間后即可得到高黏性車前子多糖。
[0010]本發(fā)明所述的車前子多糖酶法處理，漆酶活力單位> 0.5 U/mg，每毫克車前子多糖對應(yīng)的漆酶添加量優(yōu)選0.4~0.5 U，漆酶和多糖作用時(shí)間優(yōu)選2~4小時(shí)，漆酶和多糖作用溫度優(yōu)選25 °C~40 °C。
[0011]本發(fā)明所述的車前子多糖酶法處理，經(jīng)漆酶作用后的車前子多糖黏度提高了約10~50倍。
[0012]本發(fā)明所述的車前子多糖，其特征在于所述的車前子多糖是一種水溶性、阿拉伯木聚糖類多糖，因此其他來源阿拉伯木聚糖類多糖也適用于本方法。
[0013]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:1、車前子多糖可以直接與漆酶混合作用一段時(shí)間后，便可以極大地提高多糖黏度；2、本方法所用車前子多糖，是一種水溶性、阿拉伯木聚糖類多糖，因此也適用于其他來源阿拉伯木聚糖類多糖；3、制備得到的高黏性車前子多糖，呈現(xiàn)剪切變稀現(xiàn)象，具有良好的成膠性能，可作為增稠劑應(yīng)用于食品、化妝品、醫(yī)藥工業(yè)中。

【具體實(shí)施方式】
[0014]結(jié)合以下具體實(shí)施例，對本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明。實(shí)施本發(fā)明的過程、條件、試劑、實(shí)驗(yàn)方法等，除以下專門提及的內(nèi)容之外，均為本領(lǐng)域的普遍知識(shí)，本發(fā)明沒有特別限制內(nèi)容。
[0015]本發(fā)明所采用的黏度測定方法為:使用ARES-G2旋轉(zhuǎn)流變儀(美國TA Instrument公司)，夾具為40 mm平行板，測試溫度為25°C，剪切速率掃描范圍為0.f500 s'得到樣品的表觀黏度隨著剪切速率變化曲線，取曲線上剪切速率為0.125 s—1的表觀黏度作為考察指標(biāo)。
[0016]實(shí)施例1。
[0017]以干燥大粒車前子為原料，稱取100 g車前子,按料液質(zhì)量體積(kg/L)比為1:10的比例加入80%乙醇浸泡24小時(shí)，兩層紗布過濾，烘干。
[0018]稱取一定量經(jīng)乙醇浸泡過的車前子，于沸水浴下提取3小時(shí)，車前子與水的質(zhì)量體積比為1:10，提取液過濾后收集濾液，濾渣重復(fù)提取I次。合并兩次濾液，減壓濃縮，濃縮液中加入乙醇于4 °C靜置12小時(shí)，體系中的乙醇質(zhì)量濃度控制在80%，離心、收集沉淀，沉淀依次用丙酮、無水乙醚、無水乙醇各洗滌兩次，樣品然后經(jīng)冷凍干燥得到車前子多糖。
[0019]將所得車前子多糖樣品配制成0.5%車前子多糖溶液，然后按照每毫克車前子多糖對應(yīng)加入0.3 U漆酶的比例添加漆酶，于25°C恒溫水浴鍋中靜置2小時(shí)。同時(shí)按照上述條件做相同處理，但不加入漆酶，獲得對照樣品。采用Ares流變儀，測定經(jīng)漆酶作用后的多糖在溫度25°C、剪切速率為0.125 s—1時(shí)，其表觀黏度為1.40 Pa.S，而對照車前子多糖樣品表觀黏度為0.16 Pa*s，黏度增加了約8倍。
[0020]實(shí)施例2。
[0021]以干燥大粒車前子為原料，稱取100 g車前子,按料液質(zhì)量體積(kg/L)比為1:10的比例加入80%乙醇24小時(shí)，兩層紗布過濾，烘干。
[0022]稱取一定量經(jīng)乙醇浸泡過的車前子，于沸水浴下提取3小時(shí)，車前子與水的質(zhì)量體積比為1:10，提取液過濾后收集濾液，濾渣重復(fù)提取I次。合并兩次濾液，減壓濃縮，濃縮液中加入乙醇于4 °C靜置12小時(shí)，體系中的乙醇質(zhì)量濃度控制在80%，離心、收集沉淀，沉淀依次用丙酮、無水乙醚、無水乙醇各洗滌兩次，樣品然后經(jīng)冷凍干燥得到車前子多糖。
[0023]將所得車前子多糖樣品配制成1%車前子多糖溶液，然后按照每毫克車前子多糖對應(yīng)加入0.4 U漆酶的比例添加漆酶，于25°C恒溫水浴鍋中靜置2小時(shí)。同時(shí)按照上述條件做相同處理，但不加入漆酶，獲得對照樣品。采用Ares流變儀，測定經(jīng)漆酶作用后的多糖在溫度25°C、剪切速率為0.125 s—1時(shí)，其表觀黏度為40.64 Pa *s，而對照車前子多糖樣品表觀黏度為1.28 Pa*s，黏度增加了約32倍。
[0024]實(shí)施例3。
[0025]以干燥大粒車前子為原料，稱取100 g車前子,按料液質(zhì)量體積(kg/L)比為1:10的比例加入80%乙醇浸泡24小時(shí)，兩層紗布過濾，烘干。
[0026]稱取一定量經(jīng)乙醇浸泡過的車前子，于沸水浴下提取3小時(shí)，車前子與水的質(zhì)量體積比為1:10，提取液過濾后收集濾液，濾渣重復(fù)提取I次。合并兩次濾液，減壓濃縮，濃縮液中加入乙醇于4 °C靜置12小時(shí)，體系中的乙醇質(zhì)量濃度控制在80%，離心、收集沉淀，沉淀依次用丙酮、無水乙醚、無水乙醇各洗滌兩次，樣品然后經(jīng)冷凍干燥得到車前子多糖。
[0027]將所得車前子多糖樣品配制成1%車前子多糖溶液，然后按照每毫克車前子多糖對應(yīng)加入0.4 U漆酶的比例添加漆酶，于25°C恒溫水浴鍋中靜置6小時(shí)。同時(shí)按照上述條件做相同處理，但不加入漆酶，獲得對照樣品。采用Ares流變儀，測定經(jīng)漆酶作用后的多糖在溫度25°C、剪切速率為0.125 s—1時(shí)，其表觀黏度為15.55 Pa *s，而對照車前子多糖樣品表觀黏度為1.14 Pa*s，黏度增加了約14倍。
[0028]實(shí)施例4。
[0029]以干燥大粒車前子為原料，稱取100 g車前子,按料液質(zhì)量體積(kg/L)比為1:10的比例加入80%乙醇浸泡24小時(shí)，兩層紗布過濾，烘干。
[0030]稱取一定量經(jīng)乙醇浸泡過的車前子，于沸水浴下提取3小時(shí)，車前子與水的質(zhì)量體積比為1:10，提取液過濾后收集濾液，濾渣重復(fù)提取I次。合并兩次濾液，減壓濃縮，濃縮液中加入乙醇于4 °C靜置12小時(shí)，體系中的乙醇質(zhì)量濃度控制在80%，離心、收集沉淀，沉淀依次用丙酮、無水乙醚、無水乙醇各洗滌兩次，樣品然后經(jīng)冷凍干燥得到車前子多糖。
[0031]將所得車前子多糖樣品配制成1%車前子多糖溶液，然后按照每毫克車前子多糖對應(yīng)加入0.4 U漆酶的比例添加漆酶，于40°C恒溫水浴鍋中靜置2小時(shí)。同時(shí)按照上述條件做相同處理，但不加入漆酶，獲得對照樣品。采用Ares流變儀，測定經(jīng)漆酶作用后的多糖在溫度25°C、剪切速率為0.125 s—1時(shí)，其表觀黏度為18.02 Pa *s，而對照車前子多糖樣品表觀黏度為0.62 Pa*s，黏度增加了約29倍。
【權(quán)利要求】
1.一種提高車前子多糖黏性的制備方法，其特征是按如下步驟: (1)車前子前處理:稱取一定質(zhì)量的車前子，按料液質(zhì)量體積(kg/L)比為1:10的比例加入80%乙醇，浸泡24小時(shí)，過濾、收集車前子，烘干； (2)車前子多糖制備:稱取一定量步驟(1)處理的車前子，于沸水浴下提取2~3小時(shí)，車前子與水的質(zhì)量體積比(kg/L)為1:l(Tl: 30，提取液過濾后收集濾液，濾渣重復(fù)提取I次；合并兩次濾液，減壓濃縮，濃縮液中加入乙醇于4 °C靜置12小時(shí)，體系中的乙醇質(zhì)量濃度控制在80%，離心、收集沉淀，沉淀依次用丙酮、無水乙醚、無水乙醇各洗滌兩次，經(jīng)冷凍干燥得到車前子多糖； (3)車前子多糖酶法處理:稱取一定量步驟(2)所得到的車前子多糖，加水復(fù)溶，然后按照每毫克車前子多糖加入0.1~0.5 U漆酶的比例添加漆酶，于25~45°C下反應(yīng)廣8小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后冷凍干燥，得高黏性車前子多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高車前子多糖黏性的制備方法，其特征是直接向車前子多糖溶液中加入漆酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高車前子多糖黏性的制備方法，其特征是漆酶活力單位^0.5 U/mg，每毫克車前子多糖對應(yīng)的漆酶添加量為0.4~0.5 U，漆酶和多糖作用時(shí)間為2~4小時(shí)，漆酶和多 糖作用溫度為25°C~40 °C。
【文檔編號(hào)】C08B37/14GK104177514SQ201410390932
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年8月11日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月11日
【發(fā)明者】聶少平, 殷軍藝, 施曉丹, 謝明勇 申請人:南昌大學(xué)