本發(fā)明涉及一種辣椒品種培育用花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方，具體涉及一種顯著提高辣椒花藥出愈率的誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方，屬于農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：
辣椒（CapsicumannuumL.），又稱番椒、海椒、青椒、椒子等，為茄科蔬菜作物，一種重要的經(jīng)濟(jì)作物，也是世界上普遍栽培的一種蔬菜作物。辣椒果皮、胎座組織中含有豐富的胡蘿卜素和維生素C，特別是線椒中Vc含量居蔬菜之冠，因而營養(yǎng)價(jià)值極高。辣椒中含有的辣椒素具有增強(qiáng)食欲、幫助消化、增強(qiáng)人體抵抗力、抵御多種疾病的作用。辣椒產(chǎn)量高，供應(yīng)季節(jié)長，食用方式多樣，營養(yǎng)豐富，是一種深受人們喜愛的蔬菜。辣椒起源于中南美洲及墨西哥一帶的熱帶地區(qū)，1493年由哥倫布最初帶到西班牙，傳播到歐洲，再經(jīng)印度于17世紀(jì)傳到中國，之后便在我國各地廣泛種植。雖然我國辣椒種植至今只有三百七十幾年的栽培歷史，但發(fā)展很快，我國甜辣椒種植面積和年產(chǎn)量不斷增長。近年來，除常規(guī)露地栽培外，設(shè)施種植面積也在不斷擴(kuò)大，全國已形成數(shù)個(gè)甜辣椒規(guī)?；a(chǎn)基地。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2005年我國甜辣椒種植面積達(dá)到130萬hm2，約占全國蔬菜種植面積的10%，各地市場甜辣椒基本實(shí)現(xiàn)了周年供應(yīng)?，F(xiàn)在中國已是世界上最大的辣椒種植國，同時(shí)，也是世界上干辣椒的主要生產(chǎn)和出口國家，遠(yuǎn)銷俄羅斯、新加坡、馬來西亞、韓國及歐洲等國和地區(qū)。辣椒在我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中具有十分重要的地位，開展辣椒的遺傳育種研究工作具有重要意義。隨著人們生活水平的提高，對辣椒品質(zhì)的要求不斷提高；同時(shí)保護(hù)地栽培技術(shù)的推廣，選育適用于保護(hù)地栽培的品種提到了廣大科技工作者的面前；由于我國尚未實(shí)行大規(guī)模集約化生產(chǎn)，重茬嚴(yán)重，導(dǎo)致病毒病、炭疽病和疫病等大面積發(fā)生，已成為影響辣椒生產(chǎn)的重大障礙。因此，選育品質(zhì)優(yōu)良、適合不同條件栽培和抗病的辣椒新品種，已成為廣大育種工作者急需解決的問題。常規(guī)辣椒育種多利用雜種優(yōu)勢育種，即選用兩個(gè)雜交配合力高的、雜種優(yōu)勢表現(xiàn)明顯和性狀互補(bǔ)性強(qiáng)的純系品種或自交系或不育系進(jìn)行人工授粉生產(chǎn)雜交種子。但是辣椒是一種常異花授粉植物，天然雜交率為4%～10%，有的品種達(dá)25%，而通過自交分離選育純化而穩(wěn)定的自交系，一般需要進(jìn)行5～6代選擇才能獲得，不僅時(shí)間長，而且基因之間存在顯隱性關(guān)系，很難選育出綜合性狀優(yōu)良、具有突出優(yōu)點(diǎn)且配合力強(qiáng)、適宜作為強(qiáng)優(yōu)勢親本的品系，而且會造成作物遺傳多樣性下降和有益基因的流失。隨著植物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展，植物細(xì)胞具有全能性得到廣泛證實(shí)，因此，在離體條件下培養(yǎng)花藥，人為改變小孢子的發(fā)育途徑，使其配子體發(fā)育途徑終止，轉(zhuǎn)向孢子體發(fā)育，通過胚發(fā)生或器官發(fā)生途徑，形成完整的單倍體植株，為人工大量生產(chǎn)單倍體植株提供了有效手段。單倍體育種作為一種新的育種途徑，通過培育單倍體，然后對單倍體材料進(jìn)行加倍，在較短時(shí)間內(nèi)便可以選育出適宜作為強(qiáng)優(yōu)勢親本的純系，同時(shí)由于不存在基因間的顯隱性關(guān)系，因此一些由隱性基因控制的性狀便可以得到充分利用，這樣既大大縮短了育種年限，又能豐富所選優(yōu)良品系的遺傳基礎(chǔ)，這樣的品系易于實(shí)現(xiàn)親本的選配。因此，進(jìn)行辣椒單倍體培養(yǎng)技術(shù)的研究，無疑對于選育具有突出優(yōu)點(diǎn)的親本品系，加速育種進(jìn)程，培育強(qiáng)優(yōu)勢辣椒組合具有重要意義。辣椒花藥培養(yǎng)工作開始較早，自20世紀(jì)70年代初，國內(nèi)外眾多學(xué)者對辣椒花藥培養(yǎng)進(jìn)行了研究。1973年，王玉英和George報(bào)道獲得了辣椒單倍體植株。1981年Dumas等利用花藥培養(yǎng)的技術(shù)成功獲得了3個(gè)不同遺傳來源的群體，并對影響花藥培養(yǎng)的主要因素進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，提出了一套有效的培養(yǎng)方法。1990年李春玲等報(bào)道成功選育出國內(nèi)外第一個(gè)用花培法育成的辣椒品種“?；ㄈ枴?，以后又相繼育成海豐1號、海豐2號、海豐5號、海豐12號、海豐14號等6個(gè)甜辣椒品種或雜交種，并在生產(chǎn)上推廣應(yīng)用，表現(xiàn)出明顯的早熟性及豐產(chǎn)性。陳肖師等利用地方品種“易縣甜椒”進(jìn)行花藥培養(yǎng)，育成了花培品種“塞花一號”?；ㄋ幣囵B(yǎng)作為新興技術(shù)，已廣泛應(yīng)用于辣椒育種工作中。目前，辣椒花藥培養(yǎng)研究雖取得了較大進(jìn)展，但在理論和應(yīng)用上仍存在一些問題。關(guān)于辣椒小孢子由配子體發(fā)育途徑向孢子體途徑轉(zhuǎn)變，進(jìn)而形成單倍體或雙單倍體植株的發(fā)育調(diào)控機(jī)理尚不明確。培養(yǎng)基成分及培養(yǎng)條件間相互作用關(guān)系不清楚，胚狀體或愈傷組織的誘導(dǎo)率和分化率較低，離實(shí)際應(yīng)用要求有較大差距。因此，加快辣椒花培育種機(jī)理研究，開發(fā)出花藥愈傷誘導(dǎo)率分化率更高的培養(yǎng)基配方，具有重要的現(xiàn)實(shí)需求。培養(yǎng)基是花藥培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，直接關(guān)系到培養(yǎng)物的生長與分化，培養(yǎng)基組分是影響花培成功的一個(gè)非常重要的因素，多種辣椒花培實(shí)驗(yàn)表明：培養(yǎng)基各組分的合適用量，以及它們之間一定的組合關(guān)系，可顯著影響花培效率，發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化組合花藥培養(yǎng)有機(jī)附加物質(zhì)，可進(jìn)一步提高花藥培養(yǎng)力。因此，培養(yǎng)基成分的優(yōu)化，生長調(diào)節(jié)劑種類、配比及濃度的調(diào)節(jié)，有機(jī)附加物質(zhì)的篩選等，均是篩選出培養(yǎng)效率更高的花培培養(yǎng)基的重要研究對象。通過多年辣椒花藥培養(yǎng)的摸索和實(shí)踐，我們進(jìn)一步優(yōu)化了基本培養(yǎng)基配方，并且不斷嘗試加入一些提高辣椒花藥誘導(dǎo)力的有機(jī)添加物并組合其種類搭配及濃度，最終摸索出了一種辣椒品種培育用花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方。我們的研究技術(shù)對于推動辣椒花培育種的產(chǎn)業(yè)化推廣無疑具有極大的現(xiàn)實(shí)意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供了一種辣椒品種培育用花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)基，其特征在于：該培養(yǎng)基的配方如下：KNO3900～1000mg/L，NH4NO3800～850mg/L，KH2PO4650～700mg/L，MgSO4?H2O1100～1300mg/L，CaCl2?2H2O200～250mg/L，Na2-EDTA72～78mg/L，F(xiàn)eSO4?7H2O53～57mg/L，MnSO4?H2O16～18mg/L，ZnSO4?7H2O17～19mg/L，H3BO35.5～6.5mg/L，KI0.75～0.85mg/L，CuSO4?5H2O0.02～0.03mg/L，CoCl?6H2O0.025～0.035mg/L，NaMoO4?2H2O0.2～0.3mg/L，AgNO34.5～5.5mg/L，肌醇90～110mg/L，維生素B10.45～0.55mg/L，維生素B60.45～0.55mg/L，煙酸4.5～5.5mg/L，甘氨酸1.8～2.2mg/L，葉酸0.45～0.55mg/L，環(huán)磷酸鳥苷0.25～0.35g/L，麥芽糖18～22g/L，蔗糖14～16g/L，植物凝膠4.5～5.5g/L；2，4-D0.5～0.7mg/L，激動素0.4～0.6mg/L，復(fù)酞核酸0.7～0.9mg/L，生物素0.04～0.06mg/L，維生素C40～50μmol/L，活性炭150～200mg/L，水解蛋白0.35～0.45g/L。所述的培養(yǎng)基配方的最佳含量為：KNO3950mg/L，NH4NO3825mg/L，KH2PO4675mg/L，MgSO4?H2O1200mg/L，CaCl2?2H2O225mg/L，Na2-EDTA75mg/L，F(xiàn)eSO4?7H2O55mg/L，MnSO4?H2O17mg/L，ZnSO4?7H2O18mg/L，H3BO36.0mg/L，KI0.8mg/L，CuSO4?5H2O0.025mg/L，CoCl?6H2O0.03mg/L，NaMoO4?2H2O0.25mg/L，AgNO35.0mg/L，肌醇100mg/L，維生素B10.5mg/L，維生素B60.5mg/L，煙酸5.0mg/L，甘氨酸2.0mg/L，葉酸0.5mg/L，環(huán)磷酸鳥苷0.3g/L，麥芽糖20g/L，蔗糖15g/L，植物凝膠5.0g/L；2，4-D0.6mg/L，激動素0.5mg/L，復(fù)酞核酸0.8mg/L，生物素0.05mg/L，維生素C45μmol/L，活性炭175mg/L，水解蛋白0.4g/L。所述的培養(yǎng)基配方的配制pH值為：5.6～6.0，最佳配制pH值為5.8。本發(fā)明所述的培養(yǎng)基具有高效率地誘導(dǎo)辣椒花藥產(chǎn)生花粉愈傷的優(yōu)點(diǎn)，可以顯著提高辣椒花藥培養(yǎng)效率，加快辣椒良種培育進(jìn)程。下面的實(shí)施例以及對比實(shí)驗(yàn)可以清楚地反映本發(fā)明所述培養(yǎng)基的特點(diǎn)。具體實(shí)施方式實(shí)施例1配制如下配方的培養(yǎng)基：KNO3950mg/L，NH4NO3825mg/L，KH2PO4675mg/L，MgSO4?H2O1200mg/L，CaCl2?2H2O225mg/L，Na2-EDTA75mg/L，F(xiàn)eSO4?7H2O55mg/L，MnSO4?H2O17mg/L，ZnSO4?7H2O18mg/L，H3BO36.0mg/L，KI0.8mg/L，CuSO4?5H2O0.025mg/L，CoCl?6H2O0.03mg/L，NaMoO4?2H2O0.25mg/L，AgNO35.0mg/L，肌醇100mg/L，維生素B10.5mg/L，維生素B60.5mg/L，煙酸5.0mg/L，甘氨酸2.0mg/L，葉酸0.5mg/L，環(huán)磷酸鳥苷0.3g/L，麥芽糖20g/L，蔗糖15g/L，植物凝膠5.0g/L；2，4-D0.6mg/L，激動素0.5mg/L，復(fù)酞核酸0.8mg/L，生物素0.05mg/L，維生素C45μmol/L，活性炭175mg/L，水解蛋白0.4g/L，pH5.8。選擇辣椒品種新豐5號和朝天椒作為花藥培養(yǎng)供體，在晴日溫度較低、日照較弱的早上，選取生長于露地的無病蟲危害的花蕾（花萼與花瓣近等長或花瓣略長于花萼，鏡檢此時(shí)小孢子正處于單核晚期，為培養(yǎng)的最佳時(shí)期），取后立即于4℃冰箱中保存。接種前將花萼用自來水沖洗10-15min，75%乙醇浸20s，0.1%升汞消毒10min，然后無菌水沖洗3-4次，取出花藥置于盛有無菌吸水紙的培養(yǎng)皿中備用。接種時(shí)將花藥從花蕾中小心地切取出來，接種于盛有10ml培養(yǎng)基的60mm×15mm的培養(yǎng)皿中，每皿接種25-30枚花藥，然后用封口膜封口?；ㄋ幗臃N后先于33℃高溫下暗培養(yǎng)8天左右，之后25℃暗培養(yǎng)至胚狀體出現(xiàn)，花藥出胚后置于25℃光下培養(yǎng)，計(jì)算愈傷組織誘導(dǎo)率，然后轉(zhuǎn)移入再生培養(yǎng)基。愈傷組織誘導(dǎo)率（%）=（愈傷組織產(chǎn)生數(shù)/接種花藥總數(shù)）×100。實(shí)施例2配制如下配方的培養(yǎng)基（AgNO3添加濃度的優(yōu)選）：KNO3950mg/L，NH4NO3825mg/L，KH2PO4675mg/L，MgSO4?H2O1200mg/L，CaCl2?2H2O225mg/L，Na2-EDTA75mg/L，F(xiàn)eSO4?7H2O55mg/L，MnSO4?H2O17mg/L，ZnSO4?7H2O18mg/L，H3BO36.0mg/L，KI0.8mg/L，CuSO4?5H2O0.025mg/L，CoCl?6H2O0.03mg/L，NaMoO4?2H2O0.25mg/L，肌醇100mg/L，維生素B10.5mg/L，維生素B60.5mg/L，煙酸5.0mg/L，甘氨酸2.0mg/L，葉酸0.5mg/L，環(huán)磷酸鳥苷0.3g/L，麥芽糖20g/L，蔗糖15g/L，植物凝膠5.0g/L；2，4-D0.6mg/L，激動素0.5mg/L，復(fù)酞核酸0.8mg/L，生物素0.05mg/L，維生素C45μmol/L，活性炭175mg/L，水解蛋白0.4g/L，pH5.8。AgNO3的添加濃度...