技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種通過點突變提高大片段嗜熱脂肪地芽孢桿菌DNA聚合酶活性的方法及應(yīng)用，屬于基因工程領(lǐng)域的基因重組表達技術(shù)領(lǐng)域。酶的基因來源于嗜熱脂肪地芽孢桿菌(Geobacillus?stearothermophilus)。通過基因重組獲得大片段Bst?DNA聚合酶質(zhì)粒。將大片段Bst?DNA聚合酶的第310位氨基酸G突變?yōu)長或A，或?qū)?10位氨基酸D突變?yōu)镋，突變位點氨基酸均為保守氨基酸。結(jié)果顯示與野生型Bst?DNA聚合酶相比，突變體G310L、G310A和D540E的聚合效率均有顯著提高，且都高于商業(yè)化Bst?DNA聚合酶，具有較大的應(yīng)用價值，為Bst?DNA聚合酶國產(chǎn)化提供便利。

技術(shù)研發(fā)人員：李彬;王菊芳;馬毅;張蓓蕾
受保護的技術(shù)使用者：華南理工大學
文檔號碼：201610865232
技術(shù)研發(fā)日：2016.09.29
技術(shù)公布日：2017.02.15