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      一種動物胚胎培養(yǎng)基的制作方法

      文檔序號:12411342閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種動物胚胎培養(yǎng)基,其特征在于,所述動物胚胎培養(yǎng)基組成如下:

      試劑名稱添加量氯化鈉2.0-8.0g/L氯化鉀0.1-1.0g/L氯化鈣0.1-1.0g/L磷酸二氫鉀0.1-1.0g/L硫酸鎂0.1-0.8g/L碳酸氫鈉1.0-5.0g/Lβ-巰基乙醇0.1-10mL/L轉(zhuǎn)鐵蛋白0.005-0.100g/L葡萄糖0.1-1.0g/L乳酸鈉1.0-5.0mL/L乳酸鈣0.1-2.0g/L丙酮酸鈉0.01-0.1g/L乙二胺四乙酸鈉0.01-0.1g/L谷氨酰胺0.1-0.2g/L牛血清白蛋白0.0005-3g/L胎牛血清5-30%HEPES1.0-6.0g/LNEAA(100×)0.1-10×小分子物質(zhì)0.001-100g/L

      ;

      其中NEAA(100×)的成分為:

      成分濃度(g/100mL)脯氨酸0.01-0.1丙氨酸0.01-0.1絲氨酸0.01-0.1甘氨酸0.01-0.1天冬酰胺0.05-0.5天冬氨酸0.05-0.5谷氨酸0.05-0.5

      ;

      其中,所述小分子物質(zhì)為C、H、F、N、O、S類化學成分組成的氨基芳香烴類,其范圍在C(11-25)H(9-30)F(2-8)N(1-10)O(2-8)S(1-5)。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基,其特征在于,所述動物胚胎培養(yǎng)基組成如下:

      其中NEAA(100×)的成分為:

      成分濃度(g/100mL)脯氨酸0.05-0.1丙氨酸0.05-0.1絲氨酸0.05-0.1甘氨酸0.05-0.1天冬酰胺0.05-0.4天冬氨酸0.05-0.4谷氨酸0.05-0.4

      ;其中,所述小分子物質(zhì)為C、H、F、N、O、S類化學成分組成的氨基芳香烴類,其范圍在C(11-25)H(9-30)F(2-8)N(1-10)O(2-8)S(1-5)。

      3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的培養(yǎng)基,其特征在于,所述小分子物質(zhì)選自XAV939、PD184352、A0-6301、PD184352、AZD6244、CT99021、GSK1120212、PS-341類抑制劑中的兩種或兩種以上。

      4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基,其特征在于,所述動物胚胎培養(yǎng)基組成如下:

      ;

      其中NEAA(100×)的成分為:

      成分濃度(mg/L)脯氨酸1150丙氨酸890絲氨酸1050甘氨酸750天冬酰胺1320天冬氨酸1330谷氨酸1470

      ;

      其中,所述小分子物質(zhì)選自XAV939、PD184352、A0-6301、PD184352、AZD6244、CT99021、GSK1120212、PS-341類抑制劑中的兩種或兩種以上。

      5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)體系,其特征在于,所述培養(yǎng)體系pH:7.0-7.4;滲透壓:260-320mOsm/kg;細菌、真菌檢測:陰性;衣原體、支原體檢測:陰性;內(nèi)毒素:<0.5EU/mL。

      6.如權(quán)利要求1-5任一項所述的培養(yǎng)基用于體外培養(yǎng)哺乳動物早期胚胎。

      7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用途,其特征在于,所述早期胚胎包括2細胞期、4細胞期、8細胞期、桑椹期和囊胚期。

      8.如權(quán)利要求1-5任一項所述的培養(yǎng)基用于ES胚胎顯微注射時的注射液。

      9.如權(quán)利要求1-5任一項所述的培養(yǎng)基用于ES胚胎顯微注射后的胚胎培養(yǎng)。

      10.根據(jù)權(quán)利要求6-9任一項所述的用途,其特征在于,所述的胚胎選自小鼠、大鼠、兔、猴、人的胚胎。

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