本實(shí)用新型涉及生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種可計(jì)數(shù)盒及PCR檢測(cè)試劑盒。

背景技術(shù)：

動(dòng)物疫病是一個(gè)多年來(lái)一直困擾畜牧養(yǎng)殖業(yè)的重大難題，每年因?yàn)閯?dòng)物疫病而對(duì)動(dòng)物進(jìn)行隔離、撲殺和銷(xiāo)毀等產(chǎn)生的損失，已經(jīng)嚴(yán)重制約了畜牧養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，此外，患有疫病的動(dòng)物也影響其他動(dòng)物和人類(lèi)的公共安全。所以做好動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)，已經(jīng)成為動(dòng)物疫控的重要工作內(nèi)容。

目前動(dòng)物疫病檢測(cè)手段主要有膠體金法、酶聯(lián)免疫法、PCR法。其中膠體金法和酶聯(lián)免疫法主要是確認(rèn)動(dòng)物是否感染患病，或者是否免疫成功；而PCR法則是從基因水平上篩查動(dòng)物體內(nèi)是否含有能引起動(dòng)物疫病的病毒基因(發(fā)病和不發(fā)病，只要含有病毒基因都能檢測(cè)出來(lái))，從而能夠更早地監(jiān)測(cè)出動(dòng)物現(xiàn)有的和潛在的發(fā)病情況，便于提前預(yù)防和治療，保障畜牧業(yè)健康發(fā)展，促進(jìn)社會(huì)公共衛(wèi)生安全。

目前的PCR試劑盒一般都是多頭份每盒的量，即每個(gè)盒子可以檢測(cè)多份樣本。很多時(shí)候，一個(gè)完整的PCR試劑盒不能一次使用完，需要分多次使用，下次使用時(shí)不能準(zhǔn)確確定上次使用的日期，以及剩下的試劑還能檢測(cè)多少頭份的樣本，這樣會(huì)給后續(xù)的工作帶來(lái)很大的不便。

即，現(xiàn)有的盒子不能夠?qū)袃?nèi)試劑的用量及使用日期等進(jìn)行記錄。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本實(shí)用新型的目的在于提供一種可計(jì)數(shù)盒及PCR檢測(cè)試劑盒，以解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的現(xiàn)有的盒子不能夠?qū)袃?nèi)試劑的用量及使用日期等進(jìn)行記錄的技術(shù)問(wèn)題。

本實(shí)用新型提供的可計(jì)數(shù)盒，包括盒體和與所述盒體相匹配的盒蓋，所述盒蓋包括蓋板和插接板，所述蓋板包括鉸接邊和插接邊，所述插接邊與所述鉸接邊位于所述盒蓋的相對(duì)兩邊，所述鉸接邊與所述盒體開(kāi)口一面的一個(gè)側(cè)邊鉸接，所述插接板設(shè)于所述插接邊上，所述盒蓋面向所述盒體開(kāi)口的一面鉸接有計(jì)數(shù)板；所述蓋板面向所述計(jì)數(shù)板一面設(shè)有卡接槽，所述計(jì)數(shù)板面向所述蓋板的一面固設(shè)有卡接塊，所述卡接塊與所述卡接槽相匹配。

進(jìn)一步的，所述計(jì)數(shù)板沿所述插接邊長(zhǎng)度方向鉸接于所述插接板內(nèi)側(cè)一面，且所述計(jì)數(shù)板與所述插接板的鉸接處靠近所述插接邊。

進(jìn)一步的，所述盒體與所述插接板相對(duì)應(yīng)的側(cè)壁上開(kāi)設(shè)有豁口。

進(jìn)一步的，所述盒蓋面向所述計(jì)數(shù)板的一面開(kāi)設(shè)有容納槽，所述計(jì)數(shù)板形狀與所述容納槽相對(duì)應(yīng)，且所述計(jì)數(shù)板轉(zhuǎn)動(dòng)可鑲嵌于所述容納槽內(nèi)。

本實(shí)用新型可計(jì)數(shù)盒的有益效果為：

本實(shí)用新型提供的可計(jì)數(shù)盒，包括盒體和盒蓋，盒蓋通過(guò)蓋板上的鉸接邊與盒體鉸接，使用時(shí)，通過(guò)繞鉸接邊轉(zhuǎn)動(dòng)蓋板實(shí)現(xiàn)盒蓋與盒體的關(guān)閉和打開(kāi)，其中，當(dāng)盒體上蓋上盒蓋時(shí)，蓋板與盒體的開(kāi)口上表面貼合，插接板插入蓋板與盒體側(cè)壁之間的縫隙里，從而實(shí)現(xiàn)盒蓋的扣緊。當(dāng)需要使用盒體內(nèi)的物品時(shí)，將插接板從縫隙中拔出，向上推動(dòng)蓋板打開(kāi)盒蓋，盒蓋上的計(jì)數(shù)板露出，使用者可以將計(jì)數(shù)板轉(zhuǎn)動(dòng)到適合的角度，在其上進(jìn)行記錄使用頭份及使用日期，記錄完成后，將計(jì)數(shù)板轉(zhuǎn)回原位，計(jì)數(shù)板與盒蓋緊貼，將盒蓋蓋緊即可，操作簡(jiǎn)單，記錄精確，方便后續(xù)試劑的計(jì)劃使用。

當(dāng)盒蓋扣緊在盒體上時(shí)，計(jì)數(shù)板上的卡接塊卡接在蓋板上的卡接槽內(nèi)，從而將計(jì)數(shù)板貼緊固定卡接在蓋板上，打開(kāi)盒蓋時(shí)，計(jì)數(shù)板貼緊盒蓋并隨盒蓋轉(zhuǎn)動(dòng)，需要使用計(jì)數(shù)板時(shí)，將計(jì)數(shù)板上的卡接塊脫離卡接槽，對(duì)計(jì)數(shù)板進(jìn)行轉(zhuǎn)動(dòng)即可；計(jì)數(shù)板使用完畢后，轉(zhuǎn)動(dòng)計(jì)數(shù)板貼緊盒蓋，卡接塊卡接在卡接槽內(nèi)，計(jì)數(shù)板被固定在盒蓋上，從而減少甚至避免在轉(zhuǎn)動(dòng)盒蓋的過(guò)程中，計(jì)數(shù)板受重力作用發(fā)生轉(zhuǎn)動(dòng)，對(duì)使用者拿取盒體內(nèi)物品的影響，同時(shí)也減少計(jì)數(shù)板自由一端將盒體內(nèi)物品碰壞情況的發(fā)生。

本實(shí)用新型的另一個(gè)目的在于提供一種PCR檢測(cè)試劑盒，包括上述可計(jì)數(shù)盒，所述盒體內(nèi)固設(shè)有襯墊，所述襯墊與所述盒體相匹配，所述襯墊上設(shè)有多個(gè)容器放置孔，所述容器放置孔內(nèi)插有容器，該P(yáng)CR檢測(cè)試劑盒具有上述可計(jì)數(shù)盒的所有技術(shù)效果，這里不再贅述。

進(jìn)一步的，所述標(biāo)識(shí)部沿所述計(jì)數(shù)板的長(zhǎng)度方向設(shè)有數(shù)行、數(shù)列。

進(jìn)一步的，所述標(biāo)識(shí)部為圓形標(biāo)識(shí)部，且所述圓形標(biāo)識(shí)部沿所述計(jì)數(shù)板的長(zhǎng)度方向設(shè)有五行，每行十個(gè)。

進(jìn)一步的，所述容器放置孔為六個(gè)，六個(gè)所述容器放置孔內(nèi)均插有容器，六個(gè)所述容器分別為陰性對(duì)照容器、陽(yáng)性對(duì)照容器、反應(yīng)液容器、引物探針容器、酶容器和無(wú)核酸水容器。

進(jìn)一步的，所述盒體開(kāi)口一端的內(nèi)壁開(kāi)設(shè)有鑲嵌槽，所述襯墊鑲嵌于所述鑲嵌槽內(nèi)。

進(jìn)一步的，所述盒體內(nèi)腔的底部固設(shè)有定位板，所述定位板上設(shè)有定位槽，所述定位槽與所述襯墊上的容器放置孔相對(duì)應(yīng)。

本實(shí)用新型PCR檢測(cè)試劑盒的有益效果為：

本實(shí)用新型提供的PCR檢測(cè)試劑盒，在上述可計(jì)數(shù)盒的盒體內(nèi)設(shè)有襯墊，襯墊上設(shè)有容器放置孔，容器放置孔內(nèi)插有容器，容器內(nèi)可以根據(jù)需要裝有不同的試劑。使用過(guò)程中，當(dāng)容器內(nèi)的試劑一次未使用完時(shí)，可以在計(jì)數(shù)板上記錄已經(jīng)使用的頭份，剩下試劑的頭份，以方便后期使用時(shí)對(duì)用量的計(jì)劃使用，操作便捷，記錄精確。

附圖說(shuō)明

為了更清楚地說(shuō)明本實(shí)用新型具體實(shí)施方式或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)具體實(shí)施方式或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，顯而易見(jiàn)地，下面描述中的附圖是本實(shí)用新型的一些實(shí)施方式，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本實(shí)用新型實(shí)施例一提供的可計(jì)數(shù)盒的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2為本實(shí)用新型實(shí)施例二提供的PCR檢測(cè)試劑盒中計(jì)數(shù)板折好貼緊盒蓋的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖3為本實(shí)用新型實(shí)施例二提供的PCR檢測(cè)試劑盒中計(jì)數(shù)板折出的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖4為本實(shí)用新型實(shí)施例二提供的PCR檢測(cè)試劑盒中襯墊的結(jié)構(gòu)示意圖。

圖標(biāo)：1－盒體；2－盒蓋；3－計(jì)數(shù)板；4－襯墊；5－標(biāo)識(shí)部；21－蓋板；22－插接板；211－鉸接邊；212－插接邊；41－容器放置孔。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例是本實(shí)用新型一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本實(shí)用新型中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本實(shí)用新型保護(hù)的范圍。

在本實(shí)用新型的描述中，需要說(shuō)明的是，術(shù)語(yǔ)“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“豎直”、“水平”、“內(nèi)”、“外”等指示的方位或位置關(guān)系為基于附圖所示的方位或位置關(guān)系，僅是為了便于描述本實(shí)用新型和簡(jiǎn)化描述，而不是指示或暗示所指的裝置或元件必須具有特定的方位、以特定的方位構(gòu)造和操作，因此不能理解為對(duì)本實(shí)用新型的限制。此外，術(shù)語(yǔ)“第一”、“第二”、“第三”僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相對(duì)重要性。

在本實(shí)用新型的描述中，需要說(shuō)明的是，除非另有明確的規(guī)定和限定，術(shù)語(yǔ)“安裝”、“相連”、“連接”應(yīng)做廣義理解，例如，可以是固定連接，也可以是可拆卸連接，或一體地連接；可以是機(jī)械連接，也可以是電連接；可以是直接相連，也可以通過(guò)中間媒介間接相連，可以是兩個(gè)元件內(nèi)部的連通。對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，可以具體情況理解上述術(shù)語(yǔ)在本實(shí)用新型中的具體含義。

實(shí)施例一

本實(shí)施例提供一種可計(jì)數(shù)盒，如圖1所示，包括盒體1和與盒體1相匹配的盒蓋2，盒蓋2包括蓋板21和插接板22，蓋板21包括鉸接邊211和插接邊212，插接邊212與鉸接邊211位于盒蓋2的相對(duì)兩邊，鉸接邊211與盒體1開(kāi)口一面的一個(gè)側(cè)邊鉸接，插接板22設(shè)于插接邊212上，盒蓋2面向盒體1開(kāi)口的一面鉸接有計(jì)數(shù)板3；蓋板21面向計(jì)數(shù)板3一面設(shè)有卡接槽，計(jì)數(shù)板3面向蓋板21的一面固設(shè)有卡接塊，卡接塊與卡接槽相匹配。

本實(shí)施例提供的可計(jì)數(shù)盒，包括盒體1和盒蓋2，盒蓋2通過(guò)蓋板21上的鉸接邊211與盒體1鉸接，使用時(shí)，通過(guò)繞鉸接邊211轉(zhuǎn)動(dòng)蓋板21實(shí)現(xiàn)盒蓋2與盒體1的配合和分離，其中，當(dāng)盒體1上蓋上盒蓋2時(shí)，蓋板21與盒體1的開(kāi)口上表面貼合，插接板22插入蓋板21與盒體1側(cè)壁之間的縫隙里，從而實(shí)現(xiàn)盒蓋2的扣緊。當(dāng)需要使用盒體1內(nèi)的物品時(shí)，將插接板22從縫隙中拔出，向上推動(dòng)蓋板21打開(kāi)盒蓋2，盒蓋2上的計(jì)數(shù)板3露出，使用者可以將計(jì)數(shù)板3轉(zhuǎn)動(dòng)到適合的角度，在其上進(jìn)行記錄，記錄完成后，將計(jì)數(shù)板3轉(zhuǎn)回原位，計(jì)數(shù)板3與盒蓋2緊貼，將盒蓋2蓋緊即可。當(dāng)可計(jì)數(shù)盒內(nèi)裝有多頭份試劑時(shí)，可以在計(jì)數(shù)板3上記錄下已使用的頭份以及使用的日期等，操作簡(jiǎn)單，記錄精確，方便后續(xù)試劑的計(jì)劃使用。

當(dāng)盒蓋2扣緊在盒體1上時(shí)，計(jì)數(shù)板3上的卡接塊卡接在蓋板21上的卡接槽內(nèi)，從而將計(jì)數(shù)板3貼緊固定卡接在蓋板21上，打開(kāi)盒蓋2時(shí)，計(jì)數(shù)板3貼緊盒蓋2并隨盒蓋2轉(zhuǎn)動(dòng)，需要使用計(jì)數(shù)板3時(shí)，將計(jì)數(shù)板3上的卡接塊脫離卡接槽，對(duì)計(jì)數(shù)板3進(jìn)行轉(zhuǎn)動(dòng)即可；計(jì)數(shù)板3使用完畢后，轉(zhuǎn)動(dòng)計(jì)數(shù)板3貼緊盒蓋2，卡接塊卡接在卡接槽內(nèi)，計(jì)數(shù)板3被固定在盒蓋2上，從而減少甚至避免在轉(zhuǎn)動(dòng)盒蓋2的過(guò)程中，計(jì)數(shù)板3受重力作用發(fā)生轉(zhuǎn)動(dòng)，對(duì)使用者拿取盒體1內(nèi)物品的影響，同時(shí)也減少計(jì)數(shù)板3自由一端將盒體1內(nèi)物品碰壞情況的發(fā)生。

上述卡接槽也可以為與卡接塊相匹配的通孔；除上述卡接結(jié)構(gòu)外，為了將計(jì)數(shù)板3可拆卸式固定在盒蓋2上，還可以在計(jì)數(shù)板3自由一端固設(shè)有磁鐵，并在盒蓋2上相應(yīng)的位置也固設(shè)磁鐵，使用計(jì)數(shù)板3時(shí)，將計(jì)數(shù)板3拉下；不使用計(jì)數(shù)板3時(shí)，通過(guò)磁鐵將計(jì)數(shù)板3吸引在蓋板21上。

具體的，計(jì)數(shù)板3與盒蓋2內(nèi)壁貼緊即可，可以將計(jì)數(shù)板3鉸接在盒蓋2內(nèi)壁上，鉸接方向不限，只要確保鉸接后的計(jì)數(shù)板3貼緊盒蓋2內(nèi)壁，尺寸不會(huì)超出盒蓋2即可；也可以將計(jì)數(shù)板3鉸接在插接板22內(nèi)壁，此時(shí)，為了保證計(jì)數(shù)板3不影響盒蓋2的扣緊，需要將計(jì)數(shù)板3鉸接在靠近插接邊212的位置，且鉸接處沿鉸接邊211長(zhǎng)度方向設(shè)置。計(jì)數(shù)板3與盒蓋2的鉸接方式也可以有很多方式(盒蓋2與盒體1的鉸接方式也可以為多種)，如，計(jì)數(shù)板3為具有一定彎折性時(shí)(如：一張厚度較小的紙板)，可以將計(jì)數(shù)板3一端固定在盒蓋2上，使用時(shí)，直接對(duì)計(jì)數(shù)板3施力對(duì)其進(jìn)行改變角度即可；當(dāng)計(jì)數(shù)板3為剛性材料時(shí)，可以將計(jì)數(shù)板3的端部通過(guò)其他部件鉸接在盒蓋2上。此外，還可以將計(jì)數(shù)板3與盒蓋2之間設(shè)置為可拆卸式鉸接，當(dāng)一個(gè)計(jì)數(shù)板3使用完以后，可以將其拆卸下來(lái)更換一個(gè)新的計(jì)數(shù)板3，從而實(shí)現(xiàn)可計(jì)數(shù)盒的重復(fù)使用，節(jié)省能源消耗、降低使用成本。

本實(shí)施例中，如圖1所示，計(jì)數(shù)板3可以沿插接邊212長(zhǎng)度方向鉸接于插接板22內(nèi)側(cè)一面，且計(jì)數(shù)板3與插接板22的鉸接處靠近插接邊212。這里是將計(jì)數(shù)板3鉸接于盒蓋2的插接板22上的一種具體情況，需要記錄時(shí)，可以打開(kāi)盒蓋2，將計(jì)數(shù)板3轉(zhuǎn)出，并使計(jì)數(shù)板3的下端架在盒體1上，計(jì)數(shù)板3被夾緊在盒蓋2和盒體1之間，穩(wěn)定性強(qiáng)，在計(jì)數(shù)板3上記錄時(shí)更加便捷。計(jì)數(shù)板3的其他使用過(guò)程上文已經(jīng)做了詳細(xì)描述，這里不再贅述。

本實(shí)施例中，可以在盒體1與插接板22相對(duì)應(yīng)的側(cè)壁上開(kāi)設(shè)有豁口。當(dāng)需要打開(kāi)盒蓋2將插接板22拔出時(shí)，可以將手指在豁口處按壓插接板22將其拔出，增強(qiáng)可計(jì)數(shù)盒的實(shí)用性。

考慮到計(jì)數(shù)板3對(duì)盒蓋2與盒體1扣緊度的影響，本實(shí)施例中，還可以在盒蓋2面向計(jì)數(shù)板3的一面開(kāi)設(shè)有容納槽，計(jì)數(shù)板3形狀與容納槽相對(duì)應(yīng)，且計(jì)數(shù)板3轉(zhuǎn)動(dòng)可鑲嵌于容納槽內(nèi)。不使用計(jì)數(shù)板3時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)計(jì)數(shù)板3，計(jì)數(shù)板3與盒蓋2貼緊時(shí)可以鑲嵌于容納槽內(nèi)，即，計(jì)數(shù)板3的存在不會(huì)增加盒蓋2與計(jì)數(shù)板3的厚度總和，從而不會(huì)影響盒蓋2與盒體1之間的扣緊。

實(shí)施例二

本實(shí)施例提供一種PCR檢測(cè)試劑盒，如圖2和圖3所示，包括實(shí)施例一所述的可計(jì)數(shù)盒，盒體1內(nèi)固設(shè)有襯墊4，襯墊4與所述盒體1相匹配，襯墊4上設(shè)有多個(gè)容器放置孔41，容器放置孔41內(nèi)插有容器。

本實(shí)施例提供的PCR檢測(cè)試劑盒，在實(shí)施例一所述的可計(jì)數(shù)盒的盒體1內(nèi)設(shè)有襯墊4，襯墊4上設(shè)有容器放置孔41，容器放置孔41內(nèi)插有容器，容器內(nèi)可以根據(jù)需要裝有不同的試劑。使用過(guò)程中，當(dāng)容器內(nèi)的試劑一次未使用完時(shí)，可以在計(jì)數(shù)板3上記錄已經(jīng)使用的頭份，剩下試劑的頭份，以方便后期使用時(shí)對(duì)用量的計(jì)劃使用，操作便捷，記錄精確。具體的，襯墊4可以選用高密性發(fā)泡材料制成。

本實(shí)施例中，如圖2和圖3所示，可以在計(jì)數(shù)板3背離蓋板21一面設(shè)有標(biāo)識(shí)部5，標(biāo)識(shí)部5沿計(jì)數(shù)板3的長(zhǎng)度方向設(shè)有數(shù)行、數(shù)列。計(jì)數(shù)板3上設(shè)置多個(gè)標(biāo)識(shí)部5，使用前，試劑裝在容器內(nèi)，容器插在襯墊4上的容器放置孔41內(nèi)，容器上會(huì)標(biāo)注其內(nèi)盛裝試劑的頭份，即，試劑可以用來(lái)檢測(cè)樣本的份數(shù)；使用時(shí)，每檢測(cè)一份樣本，使用一頭份試劑，就在計(jì)數(shù)板3的一個(gè)標(biāo)識(shí)部5上做一個(gè)記號(hào)，這樣可以準(zhǔn)確記錄使用試劑的頭份，不會(huì)因?yàn)橹貜?fù)操作而記錯(cuò)使用頭份，計(jì)數(shù)簡(jiǎn)單準(zhǔn)確。當(dāng)盒體1容器內(nèi)的試劑一次未用完時(shí)，可以根據(jù)計(jì)數(shù)板3上的記錄確定下次使用需要攜帶的PCR檢測(cè)試劑盒的盒數(shù)。

具體的，本實(shí)施例中，如圖2－圖4所示，標(biāo)識(shí)部5可以為圓形標(biāo)識(shí)部，且圓形標(biāo)識(shí)部沿計(jì)數(shù)板3的長(zhǎng)度方向設(shè)有五行，每行十個(gè)。該計(jì)數(shù)板3主要應(yīng)用于盒體1內(nèi)盛裝試劑頭份小于50份的情況。圓形標(biāo)識(shí)部形狀簡(jiǎn)單，排列起來(lái)視覺(jué)整齊，且生產(chǎn)時(shí)，壓制圓形標(biāo)識(shí)部的部件為相應(yīng)的圓柱狀，生產(chǎn)圓柱狀部件的精度和費(fèi)用要低于其他形狀部件。此外，標(biāo)識(shí)部5也可以為其他任意形狀，如正方形、菱形、橫線等。

本實(shí)施例中，如圖2－圖4所示，容器放置孔41可以為六個(gè)，六個(gè)容器放置孔41內(nèi)均插有容器，六個(gè)容器分別為陰性對(duì)照容器、陽(yáng)性對(duì)照容器、反應(yīng)液容器、引物探針容器、酶容器和無(wú)核酸水容器。該設(shè)置主要針對(duì)動(dòng)物疫病的PCR檢測(cè)，初始時(shí)，六個(gè)容器內(nèi)分別盛裝有對(duì)應(yīng)動(dòng)物疫病的試劑；檢測(cè)時(shí)，取樣本2μL、反應(yīng)液10μL、引物探針1.8μL、酶0.5μL、無(wú)核酸水5.7μL，將20μL混合液置于培養(yǎng)基中，其中，樣本為待檢測(cè)動(dòng)物的樣本基因、反應(yīng)液包含dNTP、引物探針包含引物和探針、酶根據(jù)實(shí)際需要可以包括逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq聚合酶等：

第一步：將培養(yǎng)基置于45℃溫度15min，此階段樣本RNA在培養(yǎng)基中進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，得到相應(yīng)的DNA模板；

第二步：將培養(yǎng)基反應(yīng)條件設(shè)置為溫度95℃、時(shí)間2min，上一步得到的DNA模板在此階段進(jìn)行變性，雙鏈DNA解離成單鏈DNA；

第三步：將培養(yǎng)基反應(yīng)條件設(shè)置為溫度60℃、時(shí)間1min，此階段為DNA模板與引物的退火，引物與DNA模板單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；

第四步：將培養(yǎng)基反應(yīng)條件設(shè)置為溫度95℃、時(shí)間15s，此階段為引物的延伸，DNA模板－引物結(jié)合物在Taq聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，以靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與DNA模板鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。

如此循環(huán)40次，并于60℃時(shí)設(shè)置采集熒光信號(hào)。其中，引物包括上游引物和下游引物，為一小段單鏈DNA，逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中，作為DNA復(fù)制的起始點(diǎn)，引導(dǎo)后續(xù)DNA的合成；探針上攜帶有熒光基團(tuán)，探針完整時(shí)檢測(cè)不到熒光，與上游引物和下游引物之間的目的基因結(jié)合，PCR擴(kuò)增過(guò)程中，探針被切斷，可以檢測(cè)到熒光，擴(kuò)增得到的目的基因越多，那么探針被切斷的也越多，檢測(cè)到的熒光也越多。該方法適用于病毒基因?yàn)镽NA的檢測(cè)，如果病毒基因?yàn)镈NA則可以去掉第一步的RNA逆轉(zhuǎn)錄，并適當(dāng)調(diào)整反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間。

同樣地對(duì)陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照進(jìn)行相同的實(shí)驗(yàn)，隨后對(duì)陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣本的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判定，其中，陽(yáng)性對(duì)照為肯定能出現(xiàn)預(yù)期結(jié)果的對(duì)照組、陰性對(duì)照為肯定不會(huì)出現(xiàn)預(yù)期結(jié)果的對(duì)照組，具體的針對(duì)動(dòng)物疫病，陽(yáng)性對(duì)照為含有疫病病毒的對(duì)照組、陰性對(duì)照則不含有疫病病毒：

1、陽(yáng)性對(duì)照：CT值＜30并有明顯的擴(kuò)增曲線；陰性對(duì)照：無(wú)CT值或者CT值＞37，線性為直線或者輕微斜線，無(wú)明顯擴(kuò)增曲線。以上要求需同時(shí)滿(mǎn)足，否則本次實(shí)驗(yàn)無(wú)效，需要重新進(jìn)行；

2、樣本CT值＜30并有明顯的擴(kuò)增曲線，樣本為陽(yáng)性；

3、樣本CT值＞37并無(wú)擴(kuò)增曲線，樣本為陰性；

4、30＜樣本CT值＜37可疑，需重復(fù)檢測(cè)；若第二次檢測(cè)CT值仍為30～37并有明顯擴(kuò)增曲線則判定樣本為陽(yáng)性，否則樣本為陰性。

其中，在生物學(xué)中，CT值是指PCR擴(kuò)增過(guò)程中，熒光信號(hào)開(kāi)始由本底進(jìn)入指數(shù)增長(zhǎng)階段的閾值所對(duì)應(yīng)的循環(huán)次數(shù)。

具體的，該P(yáng)CR檢測(cè)試劑盒內(nèi)裝有上述試劑時(shí)，需要置于－20℃條件下保存。

為了確保襯墊4設(shè)于盒體1內(nèi)的穩(wěn)固性，本實(shí)施例中，可以在盒體1開(kāi)口一端的內(nèi)壁開(kāi)設(shè)有鑲嵌槽，襯墊4鑲嵌于鑲嵌槽內(nèi)。襯墊4鑲嵌于鑲嵌槽內(nèi)，與盒體1的結(jié)合度較好，不會(huì)發(fā)生相對(duì)移動(dòng)，且穩(wěn)定性強(qiáng)，進(jìn)一步增強(qiáng)移動(dòng)過(guò)程中襯墊4對(duì)容器的固定保護(hù)作用。

本實(shí)施例中，還可以在盒體1內(nèi)腔的底部固設(shè)有定位板，定位板上設(shè)有定位槽，定位槽與襯墊4上的容器放置孔41相對(duì)應(yīng)。放置容器時(shí)，將容器向下插入襯墊4上的容器放置孔41內(nèi)，直到容器底部置于定位槽中，容器上部由容器放置孔41進(jìn)行固定，底部被定位槽固定，在移動(dòng)過(guò)程中，不會(huì)發(fā)生傾斜，從而增強(qiáng)容器的穩(wěn)定性，也增強(qiáng)PCR檢測(cè)試劑盒的使用性。具體的，定位板可以選用海綿定位板，在海面定位板上挖有定位槽；定位板還可以由軟質(zhì)發(fā)泡材料制成，軟質(zhì)發(fā)泡材料是以塑料(PE、EVA等)、橡膠(SBR、CR等)等為原材料，加以催化劑、泡沫穩(wěn)定劑、發(fā)泡劑等輔料，通過(guò)物理發(fā)泡或交聯(lián)發(fā)泡，使塑料和橡膠中出現(xiàn)大量細(xì)微泡沫，體積增加，密度減少，軟質(zhì)發(fā)泡材料質(zhì)量輕、柔軟度好，具備緩沖、吸音、吸震、保溫、過(guò)濾等功能，可以對(duì)容器進(jìn)行固定、緩沖減震。

最后應(yīng)說(shuō)明的是：以上各實(shí)施例僅用以說(shuō)明本實(shí)用新型的技術(shù)方案，而非對(duì)其限制；盡管參照前述各實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解：其依然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分或者全部技術(shù)特征進(jìn)行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本實(shí)用新型各實(shí)施例技術(shù)方案的范圍。