本公開內(nèi)容描述了抗體、包括抗體的組合物以及使用抗體抑制或逆轉(zhuǎn)免疫抑制的方法。

背景技術(shù)：

1、trem樣轉(zhuǎn)錄本-1(treml1；tlt-1)是trem家族的成員。treml1由單個(gè)v-set免疫球蛋白(ig)結(jié)構(gòu)域、包含帶電殘基的柄區(qū)、跨膜結(jié)構(gòu)域以及細(xì)胞質(zhì)尾部組成。treml1僅存在于人體外周血的血小板中。treml1被激活后迅速暴露于血小板膜，treml1的胞外結(jié)構(gòu)域(treml1?ecd)隨后被裂解，導(dǎo)致可溶性treml1的釋放。研究表明，與健康人相比，敗血癥患者的血漿中可溶性treml1的水平較高。死于敗血癥的患者的血漿中的可溶性treml1水平持續(xù)較高，而存活下來的患者的血漿中的可溶性treml1水平在同一時(shí)期內(nèi)下降。在敗血癥患者中觀察到的免疫抑制指標(biāo)包括淋巴細(xì)胞異常、單核細(xì)胞失活伴人體白細(xì)胞抗原-dr(hla-dr表面表達(dá)減少以及體外刺激下tnf-α產(chǎn)量低。單核細(xì)胞hla-dr表達(dá)的持續(xù)降低表明敗血癥患者發(fā)生院內(nèi)感染和死亡的風(fēng)險(xiǎn)高。最近，觀察到在感染性休克(septic?shock)患者單核細(xì)胞上程序性死亡配體-1(pd-l1)表達(dá)升高，并與繼發(fā)性院內(nèi)感染和死亡率的增加有關(guān)。此前，有報(bào)道稱，可溶性treml1直接與免疫細(xì)胞結(jié)合，并觸發(fā)細(xì)胞表達(dá)免疫抑制表型，如下調(diào)hla-dr和上調(diào)pd-l1(wo2016197975a1)。在其他疾病中，例如急性呼吸窘迫綜合征、急性冠狀動脈綜合征和冠狀動脈疾病，高可溶性treml1血漿濃度也與負(fù)面結(jié)果有關(guān)。這些結(jié)果表明可溶性treml1在炎癥相關(guān)疾病中發(fā)揮重要作用。因此，可溶性treml1可以作為炎癥相關(guān)疾病的生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。

2、巨噬細(xì)胞-1抗原(mac-1、整合素αmb2、cd11b/cd18)主要表達(dá)在先天免疫細(xì)胞(包括單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、nk細(xì)胞等)和一些b細(xì)胞群(proc.natl.acad.sci.u.s.a.2008apr1；105(13):5195-200)以及t細(xì)胞群(j.immunol.2001jan15；166(2):900-7)的表面。mac-1是一種異二聚體糖蛋白，包括非共價(jià)連接的整合素αm(cd11b、cr3a、itgam)和整合素β2(cd18、itgb2)。cd11b是一種跨膜蛋白，具有較大的胞外結(jié)構(gòu)域和較短的胞質(zhì)尾部。cd11b的胞外結(jié)構(gòu)域包括i-結(jié)構(gòu)域、β-螺旋槳結(jié)構(gòu)域、腿(thigh)結(jié)構(gòu)域、calf-1結(jié)構(gòu)域以及calf-2結(jié)構(gòu)域。cd11b的i-結(jié)構(gòu)域有大約179個(gè)氨基酸插入β-螺旋槳結(jié)構(gòu)域。該i-結(jié)構(gòu)域負(fù)責(zé)與混雜配體(例如ic3b、纖維蛋白原、icam-1、cd40l等)結(jié)合，并參與細(xì)胞粘附、遷移、趨化和吞噬以及調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的炎癥反應(yīng)。

3、需要使用新的目標(biāo)物來開發(fā)和治療與炎癥相關(guān)的疾病。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、該
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
旨在以簡化形式介紹一系列概念，這些概念將在下文的詳細(xì)說明中進(jìn)一步描述。該發(fā)明內(nèi)容并非旨在識別所要求保護(hù)的主題的所有關(guān)鍵特征或必要特征，也不旨在單獨(dú)用作確定所要求保護(hù)的主題的范圍的輔助手段。

2、本公開內(nèi)容基于treml1?ecd能夠與cd11的i-結(jié)構(gòu)域結(jié)合這一令人驚訝的發(fā)現(xiàn)。由于treml1?ecd與cd11b+免疫細(xì)胞結(jié)合，treml1?ecd可以誘導(dǎo)免疫抑制?？筩d11b抗體可以逆轉(zhuǎn)treml1?ecd誘導(dǎo)的免疫抑制。抗treml1抗體治療也降低了treml1ecd與cd11b+免疫細(xì)胞的結(jié)合。因此，抗treml1抗體可以用于治療免疫抑制疾病，例如癌癥。

3、本公開內(nèi)容描述了包括結(jié)合treml1的抗體的藥劑，這些抗體可以通過防止treml1ecd與cd11b+免疫細(xì)胞的結(jié)合來抑制腫瘤生長。本公開內(nèi)容還描述了包括本文所述的藥劑(包括結(jié)合treml1的抗體)的組合物和藥物組合物。在實(shí)施方案中，抗體結(jié)合treml1ecd。

4、另外，本公開內(nèi)容描述了使用包括本文所述的抗體的藥劑逆轉(zhuǎn)免疫抑制的方法。

5、進(jìn)一步地，本公開內(nèi)容描述了使用藥劑(例如本文所述的抗體)來治療與免疫抑制相關(guān)的各種疾病和病癥(包括癌癥)的方法。

6、此外，本公開內(nèi)容描述了用于診斷癌癥或檢測受試者中惡性腫瘤的存在和/或用于確定受試者是否對包括免疫療法和其他形式的癌癥治療的各種癌癥療法有反應(yīng)的方法。

技術(shù)特征：

1.一種抑制髓樣細(xì)胞表達(dá)的觸發(fā)受體(trem)樣轉(zhuǎn)錄本-1(treml1)與cd11b結(jié)合的藥劑，其中，所述藥劑是抗體或其抗原結(jié)合片段。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥劑，其中，所述cd11b在免疫細(xì)胞上表達(dá)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥劑，其中，所述藥劑是多克隆抗體、單克隆抗體、人源化抗體、嵌合抗體、雙特異性抗體，或其抗原結(jié)合片段。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥劑，其中，所述藥劑包括抗treml抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗treml抗體或其抗原結(jié)合片段包括：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥劑，其中，x1是s或r；x2是v或i；x3是d或n；x4是i或m；x5是n或s；x6是d、e或n；x7是i或m；x8是i、m或f；x9是t或n；x10是d或g；x11是g或h；x12是p、s或a；x13是y或f；x14是s或n；x15是d或e；x16是k或t；x17是i、a或f；x18是k、r或t；x19是d或g；x20是f或y；x21是r或k；x22是s或t；x23是l、v或i；以及x24是l或v；x25是k或q；x26是t或s；x27是h或y；以及x28是i或v。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥劑，其中，所述藥劑包括抗treml抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗treml抗體或其抗原結(jié)合片段包括：

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的藥劑，其中，所述藥劑包括：

8.一種治療或緩解有需要的受試者中的與免疫抑制相關(guān)或以免疫抑制為特征的疾病或病癥的一種或多種癥狀的方法，所述方法包括：向所述受試者施用根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的藥劑，以及逆轉(zhuǎn)所述受試者中的免疫抑制，從而治療或緩解所述疾病或所述病癥的一種或多種癥狀。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中，逆轉(zhuǎn)免疫抑制包括抑制炎癥。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中，炎癥反應(yīng)是單核細(xì)胞介導(dǎo)的、巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的和/或中性粒細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。

11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中，所述疾病或病癥包括惡性腫瘤生長、腫瘤血管生成、癌癥、慢性感染、敗血癥、免疫衰竭或衰老中的免疫衰老。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中，所述癌癥包括黑色素瘤、肺癌、肺鱗狀細(xì)胞癌、頭頸癌、乳腺癌、卵巢癌、子宮癌、前列腺癌、胃癌、宮頸癌、食管癌、膀胱癌、腎癌、腦癌、肝癌、結(jié)腸癌、骨癌、胰腺癌、皮膚癌、皮膚或眼內(nèi)惡性黑色素瘤、卵巢癌、直腸癌、肛門區(qū)癌、胃癌、睪丸癌、輸卵管癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、食管癌、小腸癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、慢性或急性白血病、兒童實(shí)體瘤、淋巴細(xì)胞淋巴瘤、腎盂癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)腫瘤、原發(fā)性cns淋巴瘤、脊柱軸腫瘤、腦干膠質(zhì)瘤、垂體腺瘤、卡波西肉瘤、表皮樣癌、鱗狀細(xì)胞癌、t細(xì)胞淋巴瘤以及胃腸道癌；任選地，其中，所述癌癥包括結(jié)腸癌。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中，所述慢性或急性白血病是急性髓系白血病、慢性髓系白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病或慢性淋巴細(xì)胞白血病。

14.一種抑制treml1與cd11b結(jié)合的方法，其中，所述方法包括將權(quán)利要求1所述的藥劑施用于表達(dá)cd11b且存在treml1的細(xì)胞，從而抑制treml1與cd11b的結(jié)合。

15.一種逆轉(zhuǎn)細(xì)胞中免疫抑制的方法，其中，所述方法包括將根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥劑施用于由treml1結(jié)合cd11b的i-結(jié)構(gòu)域被誘導(dǎo)為免疫抑制的細(xì)胞。

16.一種抑制細(xì)胞上pd-l1表達(dá)的方法，其中，所述方法包括將根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥劑施用于由treml1結(jié)合cd11b的i-結(jié)構(gòu)域被誘導(dǎo)為表達(dá)pd-l1。

17.根據(jù)權(quán)利要求14至16中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述細(xì)胞包括免疫細(xì)胞。

18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述細(xì)胞包括先天免疫反應(yīng)系統(tǒng)的細(xì)胞。

19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的方法，其中，所述細(xì)胞包括巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和粒細(xì)胞。

20.根據(jù)權(quán)利要求14至16中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述細(xì)胞位于受試者中，以及任選地，其中，所述受試者是哺乳動物。

21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中，所述方法逆轉(zhuǎn)所述細(xì)胞的免疫抑制和/或治療與免疫抑制相關(guān)的疾病或病癥。

22.一種診斷癌癥或檢測受試者中的惡性腫瘤的存在和/或確定受試者是否對一種或多種癌癥療法有反應(yīng)的方法，其中，所述方法包括從所述受試者獲取生物樣本，并檢測樣本中的treml1，從而檢測所述受試者中的癌癥或腫瘤。

23.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中，所述方法還包括對所述樣本中treml1的表達(dá)進(jìn)行量化；任選地，其中，所述方法還包括將所述受試者中的treml1的表達(dá)與對照的treml1的表達(dá)進(jìn)行比較。

24.根據(jù)權(quán)利要求22或23所述的方法，其中，所述生物樣本包括體液、細(xì)胞或組織；任選地，其中，所述體液包括血液、尿液、唾液、膽汁、骨髓抽吸物、母乳、腦脊液(csf)、血漿、血清、糞便、陰道液或滑液；任選地，其中，細(xì)胞包括血細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞、免疫細(xì)胞、干細(xì)胞、外周血細(xì)胞或干細(xì)胞；任選地，其中，所述組織來自活檢或切除的腫瘤。

25.根據(jù)權(quán)利要求22或23所述的方法，其中，檢測treml1的存在包括進(jìn)行免疫學(xué)測定、組織學(xué)測定、細(xì)胞學(xué)測定、酶聯(lián)免疫吸附測定(elisa)、基于珠子的檢測測定、dna或rna表達(dá)測定或基于適配體的測定。

26.根據(jù)權(quán)利要求22或23所述的方法，其中，檢測treml1的存在包括使用根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的一種或多種藥劑來檢測treml1的存在。

27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中，所述癌癥包括黑色素瘤、肺癌、肺鱗狀細(xì)胞癌、頭頸癌、乳腺癌、卵巢癌、子宮癌、前列腺癌、胃癌、宮頸癌、食管癌、膀胱癌、腎癌、腦癌、肝癌、結(jié)腸癌、骨癌、胰腺癌、皮膚癌、皮膚或眼內(nèi)惡性黑色素瘤、卵巢癌、直腸癌、肛門區(qū)癌、胃癌、睪丸癌、輸卵管癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮頸癌、陰道癌、外陰癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、食管癌、小腸癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌、陰莖癌、慢性或急性白血病、兒童實(shí)體瘤、淋巴細(xì)胞淋巴瘤、腎盂癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)腫瘤、原發(fā)性cns淋巴瘤、脊柱軸腫瘤、腦干膠質(zhì)瘤、垂體腺瘤、卡波西肉瘤、表皮樣癌、鱗狀細(xì)胞癌、t細(xì)胞淋巴瘤以及胃腸道癌；任選地，其中，所述癌癥包括結(jié)腸癌。

28.根據(jù)權(quán)利要求22或23所述的方法，其中，所述方法還包括用icb療法治療有需要的受試者；任選地，其中，icb療法包括向所述受試者施用阿特珠單抗、阿維魯單抗、度伐利尤單抗或其他抗pdl1藥物。

29.根據(jù)權(quán)利要求22、23或28中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法還包括通過施用根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的一種或多種藥劑來治療有需要的受試者。

技術(shù)總結(jié)
可溶性TREML1參與許多炎癥性疾病，并在免疫抑制中發(fā)揮重要作用?？扇苄訲REML1能夠結(jié)合CD11b的I?結(jié)構(gòu)域并誘導(dǎo)免疫抑制表型。因此，可溶性TREML1可以是用于治療炎癥性疾病的良好靶點(diǎn)。本發(fā)明涉及能夠降低可溶性TREML1與CD11b+免疫細(xì)胞結(jié)合的抗體及其用于逆轉(zhuǎn)TREML1誘導(dǎo)的免疫抑制的用途。抗TREML1抗體為這些疾病例如癌癥提供了新的且潛在的療法。

技術(shù)研發(fā)人員：呂衍達(dá),張家鳴,陳怡蓁,蔡宜芳
受保護(hù)的技術(shù)使用者：先知生物科技股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10