本發(fā)明涉及一種靶向trop2的嵌合抗原受體、藥物遞送體及其應(yīng)用，屬于雜合肽。

背景技術(shù)：

1、trop2是一種癌相關(guān)抗原，在正常組織中的表達(dá)量很低，在多種惡性腫瘤中過(guò)表達(dá)，它主要表達(dá)于各種人類上皮癌中，包括乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸直腸癌、胰腺癌、前列腺癌、宮頸癌和卵巢癌等。trop2的表達(dá)程度與疾病的惡性程度相關(guān)。trop2過(guò)表達(dá)可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和轉(zhuǎn)移。trop2蛋白的這種差異化表達(dá)，使得它成為研究人員開(kāi)發(fā)抗體藥物的新靶點(diǎn)。

2、目前car-t療法雖然已日漸成熟，但是始終面臨著個(gè)體化和病人等待時(shí)間長(zhǎng)的問(wèn)題，并且在實(shí)際的運(yùn)用中受限于病人血液質(zhì)量、免疫排斥等原因，治療效果與預(yù)期有差距，導(dǎo)致上市的car-t產(chǎn)品銷售不達(dá)預(yù)期。因此，有必要對(duì)嵌合抗原受體進(jìn)行遞送方式的優(yōu)化，減少病人等待時(shí)間，降低生產(chǎn)成本。

3、有研究表明，蛋白激酶a?(pka)具有抑制t細(xì)胞的功能，而risr-riad肽能夠阻斷蛋白pka在免疫調(diào)節(jié)中的作用，因此，risr-riad肽通過(guò)在腫瘤微環(huán)境中抑制pka信號(hào)通路來(lái)增強(qiáng)car-t細(xì)胞的功能，從而改善修飾后的car-t細(xì)胞的運(yùn)輸和抗腫瘤活性。

4、目前沒(méi)有以納米顆粒形式遞送trop2嵌合抗原受體，在體內(nèi)形成car-t細(xì)胞的相關(guān)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明提供一種靶向trop2的嵌合抗原受體、藥物遞送體及其應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)以下發(fā)明目的：以mrna-ines的形式將car-trop2遞送到體內(nèi)，形成car-t細(xì)胞，提高car-trop2的抗腫瘤效果。

2、為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采取以下技術(shù)方案：

3、一種靶向trop2的嵌合抗原受體，所述靶向trop2的嵌合抗原受體的氨基酸序列如序列表中seq?id?no：1所示；所述靶向trop2的嵌合抗原受體由以下模塊依次連接得到：cd8信號(hào)肽、trop2單鏈抗體、cd8鉸鏈區(qū)、cd8跨膜區(qū)、cd28和cd226共刺激區(qū)、cd3ζ胞內(nèi)區(qū)、t2a、優(yōu)化后risr-riad肽。

4、所述靶向trop2的嵌合抗原受體的核苷酸序列如序列表中seq?id?no：2所示。

5、一種靶向trop2的藥物遞送體，所述藥物遞送體為靶向trop2的mrna的納米乳液制劑；所述mrna由所述的嵌合抗原受體轉(zhuǎn)錄得到。

6、所述納米乳液制劑由mrna溶液和脂質(zhì)體混合物制得；所述脂質(zhì)體混合物由c12-200、dope、維生素e、dmg-peg2000組成，摩爾比為35:16:46.5:2.5。

7、所述脂質(zhì)體混合物中的正電荷與mrna溶液中的負(fù)電荷的比例為15:1。

8、所述的靶向trop2的嵌合抗原受體在制備抗癌藥品中的應(yīng)用。

9、所述的藥物遞送體在制備抗癌藥品中的應(yīng)用。

10、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明取得以下有益效果：

11、本發(fā)明制備的含有優(yōu)化后risr-riad肽的car-trop2-ines，體外轉(zhuǎn)染t細(xì)胞后，能夠提高對(duì)sk-ov-3細(xì)胞系和lovo細(xì)胞系的殺傷效率，對(duì)sk-ov-3細(xì)胞的殺傷效率為79.6%，對(duì)lovo細(xì)胞的殺傷效率為87.3%。

12、本發(fā)明制備的含有優(yōu)化后risr-riad肽的car-trop2-ines，用于直腸癌小鼠模型治療時(shí)，可以在體內(nèi)形成car-t細(xì)胞，能夠明顯抑制其腫瘤的生長(zhǎng)。

技術(shù)特征：

1.一種靶向trop2的嵌合抗原受體，其特征在于：所述靶向trop2的嵌合抗原受體的氨基酸序列如seq?id?no：1所示；所述靶向trop2的嵌合抗原受體由以下模塊依次連接得到：cd8信號(hào)肽、trop2單鏈抗體、cd8鉸鏈區(qū)、cd8跨膜區(qū)、cd28和cd226共刺激區(qū)、cd3ζ胞內(nèi)區(qū)、t2a、優(yōu)化后risr-riad肽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種靶向trop2的嵌合抗原受體，其特征在于：所述靶向trop2的嵌合抗原受體的核苷酸序列如seq?id?no：2所示。

3.一種靶向trop2的藥物遞送體，其特征在于：所述藥物遞送體為靶向trop2的mrna的納米乳液制劑；所述mrna由權(quán)利要求1所述的嵌合抗原受體轉(zhuǎn)錄得到。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的藥物遞送體，其特征在于：所述納米乳液制劑由mrna溶液和脂質(zhì)體混合物制得；所述脂質(zhì)體混合物由c12-200、dope、維生素e、dmg-peg2000組成，摩爾比為35:16:46.5:2.5。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的藥物遞送體，其特征在于：所述脂質(zhì)體混合物中的正電荷與mrna溶液中的負(fù)電荷的比例為15:1。

6.權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的靶向trop2的嵌合抗原受體在制備抗卵巢癌和/或結(jié)直腸癌藥品中的應(yīng)用。

7.權(quán)利要求3-5任一項(xiàng)所述的藥物遞送體在制備抗卵巢癌和/或結(jié)直腸癌藥品中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種靶向TROP2的嵌合抗原受體、藥物遞送體及其應(yīng)用，屬于雜合肽技術(shù)領(lǐng)域，所述靶向TROP2的嵌合抗原受體的氨基酸序列如序列表中SEQ?ID?NO：1所示；所述靶向TROP2的嵌合抗原受體由以下模塊依次連接得到：CD8信號(hào)肽、TROP2單鏈抗體、CD8鉸鏈區(qū)、CD8跨膜區(qū)、CD28和CD226共刺激區(qū)、CD3ζ胞內(nèi)區(qū)、T2A、優(yōu)化后RISR?RIAD肽。本發(fā)明制備的含有優(yōu)化后RISR?RIAD肽的CAR?TROP2?iNEs，體外轉(zhuǎn)染T細(xì)胞后，能夠提高對(duì)SK?OV?3細(xì)胞系和LOVO細(xì)胞系的殺傷效率，對(duì)SK?OV?3細(xì)胞的殺傷效率為79.6%，對(duì)LOVO細(xì)胞的殺傷效率為87.3%。

技術(shù)研發(fā)人員：馮建海,劉明錄,金海鋒,王立新,強(qiáng)邦明,許淼,韓慶梅,張傳鵬
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海興瑞一達(dá)生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/10/10