本發(fā)明屬于基因工程領(lǐng)域,尤其涉及一種cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、植物分生組織是在植物個體的特定部位,并且具有持續(xù)或周期性分裂能力的細(xì)胞群體,能夠通過其組織內(nèi)干細(xì)胞的活動實現(xiàn)自身的增殖和形成其它組織及器官。頂端分生組織是在植物胚胎發(fā)育過程中,由胚的縱軸向兩端分別形成特殊的區(qū)域,分別稱為莖端分生組織和根端分生組織。植物分生組織在植物的個體發(fā)育過程中具有非常重要的作用,植物體所有器官均來自于分生組織內(nèi)細(xì)胞的分化和分裂活動。植物地上部分的側(cè)生器官、莖干、葉與花等器官均是由莖端分生組織分化形成。因此,對辣椒分生組織的研究不僅有助于深入了解辣椒的生長發(fā)育機制,還能為提高辣椒產(chǎn)量和品質(zhì)提供理論支持和技術(shù)指導(dǎo)。
2、近年來,一些參與調(diào)控植物分生組織發(fā)育的基因被報道。例如stip基因突變導(dǎo)致莖端分生組織不再過度膨大;apetala2(ap2)基因能正調(diào)控wus基因表達(dá),負(fù)調(diào)控clv3表達(dá),出現(xiàn)莖端分生組織提前終止的表型;meristem?defective(mdf)突變導(dǎo)致莖端分生組織發(fā)育異常,出現(xiàn)提前終止的表型;ult1突變會產(chǎn)生膨大的花序分生組織與花分生組織;fasciated(fas1)與(fas2)突變導(dǎo)致莖端分生組織的莖段都存在嚴(yán)重的缺陷。
3、gata基因作為植物生長發(fā)育的關(guān)鍵調(diào)控因子之一,含有高度保守的iv鋅指結(jié)構(gòu)域。許多gata轉(zhuǎn)錄因子在植物抵御非生物脅迫過程中具有重要作用。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是,克服以上背景技術(shù)中提到的不足和缺陷,提供一種cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用。
2、為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明提出的技術(shù)方案為:
3、一種cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,所述cagata4基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
4、上述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,優(yōu)選的,所述cagata4基因的蛋白序列如seq?id?no.2所示。
5、上述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,優(yōu)選的,所述植物分生組織包括植物莖端分生組織或者植物側(cè)生分生組織中的至少一種。
6、上述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,優(yōu)選的,所述植物包括番茄或辣椒。
7、上述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,優(yōu)選的,在番茄中過表達(dá)所述cagata4基因,莖端分生組織發(fā)育停滯,隨著植株的生長發(fā)育,部分植株長出新的生長點,恢復(fù)生長。
8、上述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,優(yōu)選的,在番茄中過表達(dá)cagata4基因,包括以下步驟:
9、(1)將seq?id?no.1所示序列同源重組在phellsgate8載體上,構(gòu)建cagata4基因過表達(dá)載體;
10、(2)將步驟(1)的過表達(dá)載體導(dǎo)入番茄細(xì)胞中,培養(yǎng)cagata4基因過表達(dá)轉(zhuǎn)基因番茄植株。
11、上述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,優(yōu)選的,在辣椒中沉默cagata4基因,提前分化出側(cè)枝。
12、上述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,優(yōu)選的,在辣椒中沉默cagata4基因,包括以下步驟:
13、(1)利用茄科基因組網(wǎng)站里的vigs在線工具(http://vigs.solgenomics.net)選擇cagata4基因的特異片段,同源重組在ptrv2載體上;
14、(2)通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化后,將ptrv2-cagata4農(nóng)桿菌與含有ptrv1的農(nóng)桿菌菌液混勻后,注射在子葉完全展開、新葉尚未長出的辣椒葉片中。
15、上述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,優(yōu)選的,ptrv2-cagata4農(nóng)桿菌與ptrv1農(nóng)桿菌的體積比為1:1。
16、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果為:
17、(1)本發(fā)明將cagata4基因應(yīng)用在調(diào)控番茄分生組織發(fā)育中,在番茄中過表達(dá)cagata4基因,莖端分生組織發(fā)育停滯,隨著植株的生長發(fā)育,部分植株長出新的生長點,恢復(fù)生長,這說明在番茄中過表達(dá)cagata4基因,不僅有助于提高番茄植株的生存率和產(chǎn)量,還有助于促進(jìn)番茄植株的遺傳多樣性、適應(yīng)性、再生和修復(fù)能力,對于推動科技進(jìn)步和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展具有重要意義。
18、(2)本發(fā)明將cagata4基因應(yīng)用在辣椒中,cagata4沉默植株提前發(fā)育出側(cè)枝,促進(jìn)了辣椒植株分生組織的發(fā)育,提高辣椒的早期產(chǎn)量。
1.一種cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,其特征在于,所述cagata4基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
2.如權(quán)利要求1所述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,其特征在于,所述cagata4基因的蛋白序列如seq?id?no.2所示。
3.如權(quán)利要求1所述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,其特征在于,所述植物分生組織包括植物莖端分生組織或者植物側(cè)生分生組織中的至少一種。
4.如權(quán)利要求1所述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,其特征在于,所述植物包括番茄或辣椒。
5.如權(quán)利要求4所述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,其特征在于,在番茄中過表達(dá)所述cagata4基因,莖端分生組織發(fā)育停滯,隨著植株的生長發(fā)育,部分植株長出新的生長點,恢復(fù)生長。
6.如權(quán)利要求5所述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,其特征在于,在番茄中過表達(dá)cagata4基因,包括以下步驟:
7.如權(quán)利要求4所述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,其特征在于,在辣椒中沉默cagata4基因,提前分化出側(cè)枝。
8.如權(quán)利要求7所述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,其特征在于,在辣椒中沉默cagata4基因,包括以下步驟:
9.如權(quán)利要求8所述的cagata4基因在調(diào)控植物分生組織發(fā)育中的應(yīng)用,其特征在于,ptrv2-cagata4農(nóng)桿菌與ptrv1農(nóng)桿菌的體積比為1:1。